專利名稱：一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中藥抗癌制劑，尤其是一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法。
背景技術：
本發(fā)明是對“一種靈芝孢子的抗癌制劑制備方法”專利申請的后續(xù)。
靈芝中的靈芝孢子為靈芝的遺傳單位，它含有了靈芝子實體中所有的有效成分，抗癌有效成分含量非常豐富，經(jīng)研究表明其中主要起效的成分為多糖類物質。多糖類物質為水溶性化合物，不溶于脂質，它通過增強人體自身免疫力來達到抑制腫瘤，有效殺滅腫瘤細胞，防止癌細胞的轉移以及癌基因的突變，增強人體免疫力的作用，從根本上對腫瘤機理進行作用，從而達到很好的療效。孢子中一般含有10％～20％的油脂，其油脂中并不含有對抑制腫瘤有效的多糖類物質。由于靈芝孢子中的多糖成分不溶于脂質，所以可經(jīng)萃取去除脂質提高多糖成分的含量，且含有油脂的孢子粉在放置一斷時間后由于油脂氧化等原因，會產(chǎn)生變質，影響產(chǎn)品質量，這就需要對靈芝孢子中的脂質進行萃取。但靈芝孢子外壁為一層堅硬的幾丁質外殼，為了使脂質能夠完全釋放、便于萃取，就需要對靈芝孢子進行超細粉碎處理，打破堅硬的幾丁質外殼，也即通俗的靈芝孢子破壁。破壁后的靈芝孢子經(jīng)萃取去除了10％～20％的油脂，可提高多糖類有效成份的含量，且能穩(wěn)定產(chǎn)品質量防止氧化變質。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，采用CO2惰性氣體為超臨界狀態(tài)下，對靈芝孢子中的脂質成分進行超臨界提取，不會引入對人體有害的成分，所以安全高效。
本發(fā)明目的由以下方法實現(xiàn)一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，選取靈芝科靈芝屬中的赤芝為原料，在赤芝栽培的成熟期，收集其孢子，經(jīng)篩選后采用常溫物理機械方法對赤芝孢子進行超細粉碎至0.2～0.5um之間，最后將破壁孢子粉根據(jù)需求進行制劑，其特征是對超細粉碎后的赤芝孢子采用CO2超臨界萃取的工藝脫脂。CO2超臨界萃取工藝要求為赤芝孢子粉裝入萃取器中，從萃取器底部通入CO2氣，控制溫度為35-65℃，壓力為20-35Mpa，萃取時間為1-35小時。將赤芝孢子粉加入水及明膠、淀粉中的一種或兩種混合，加入量使靈芝孢子粉粘結成型為準，混合均勻，在室溫下擠壓成型，自然干燥后的靈芝孢子粉裝入萃取器中，從萃取器底部通入CO2氣，從萃取器上部流出含有油脂的CO2進入減壓分離器，油脂從減壓分離器底部放出，CO2氣從減壓分離器的頂部流出，從萃取器回收脫脂靈芝孢子粉，后將脫脂靈芝孢子粉干熱滅菌0.5～3hr，使菌落總數(shù)小于10cfu/g。在符合GMP規(guī)范的車間內生產(chǎn)，制成制劑使得其服用更加方便快捷，有效成分可以充分釋放。
本發(fā)明以CO2在超臨界萃取技術為基礎。超細粉碎后的靈芝孢子經(jīng)檢測合格之后采用CO2在超臨界狀態(tài)下，對其中的脂質進行超臨界萃取。本發(fā)明中所用的靈芝品種是在我國所有的一百余種靈芝品種中進行篩選的，確定選用其中的赤芝(Ganoderma lucidum)，赤芝具有易于栽培，品種穩(wěn)定，且經(jīng)比較赤芝孢子的抑瘤功效強于其它品種的靈芝孢子。赤芝菌蓋表面褐紅色，具油漆光澤，又有一個表面光滑的菌柄，在赤芝栽培的成熟期，可收集其孢子。將收集好的孢子放入水中，則泥沙等雜質沉入水底，靈芝孢子中的癟殼、空粒等則浮在水面上，而成熟飽滿的孢子則懸浮在水中。將經(jīng)過篩選后的靈芝孢子取出，自然烘干后對靈芝孢子在常溫下進行超細粉碎。
本發(fā)明的優(yōu)點和效果本發(fā)明選用靈芝科靈芝屬的赤芝孢子為原料，保證了其有效成分的含量和質量。經(jīng)過收集、洗滌、篩選后對孢子粉進行常溫物理破壁，使粒度達到0.2～0.5um便于對孢子中脂質的萃取。本發(fā)明在破壁后采用了CO2超臨界萃取技術，超臨界CO2安全無毒，不與其它成份產(chǎn)生化學作用，故不會給產(chǎn)品注入新的有害物質。與傳統(tǒng)方法相比，本發(fā)明方法工藝流程簡單，成本低，而且過程中萃取溫度低，不會破壞靈芝孢子中的有效原生質成份。二氧化碳超臨界加工過程中與空氣隔絕，能夠有效防止過氧化反應，而且超臨界過程是殺菌過程。以上優(yōu)點使得本發(fā)明的產(chǎn)品質量可靠，使得靈芝孢子的功效成分靈芝多糖得以保持并更有利于藥效的發(fā)揮，使人體更容易將孢子中的各種成分充分吸收，對于抑制腫瘤作用產(chǎn)生了顯著的提高。本發(fā)明由于去除了靈芝孢子中10％～20％的油脂，可以提高多糖等有效成分的含量。且油脂放置一斷時間后由于氧化等原因，會產(chǎn)生變質，去除后可提高產(chǎn)品質量。最后采用了先進的制劑工藝對靈芝破壁孢子進行加工，增加了其成分的穩(wěn)定性。由于靈芝無毒無害，對患者無副作用，使得腫瘤患者服用更方便、快捷、安全。
利用本發(fā)明制劑進行功能性試驗1.抗移植性肝癌實驗本發(fā)明制劑以300mg/Kg，600mg/Kg和1200mg/Kg灌胃給藥，對進行小鼠移植性肝癌H8ps的實驗，結果見表1，對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響見表2。
表1對小鼠移植性肝癌Heps的抑制作用(n＝10)藥物劑量給藥動物數(shù) 體重變化(g)瘤重(g) 抑瘤率分組mg/Kg×d途徑始/終 給藥前/給藥后X±S％H2O ig 10/1019.4/31.43.05±0.62低劑量組 300×12 ig 10/1019.6/27.01.59±0.70****47.87中劑量組 600×12 ig 10/1019.2/25.01.48±0.7***51.48高劑量組 1200×12ig 10/1019.2/21.71.32±0.42***56.725-Fu 25×12 ig 10/1018.9/24.81.42±0.52***53.44**P＜0.01***P＜0.001與對照組比表2對小鼠Heps肝癌免疫器官重量的影響(n＝10)藥物劑量 給藥動物數(shù)脾指數(shù)胸腺指數(shù)分組mg/Kg×d 途徑始/終 X±S X±SH2Oig 10/1051.96±14.2021.30±9.18低劑量組300×12 ig 10/1079.86±18.59**32.58±8.42*中劑量組600×12 ig 10/1060.50±23.1720.26±7.39高劑量組1200×12 ig 10/1065.18±29.1723.64±12.235-Fu 25×12ig 10/1088.05±51.0820.64±11.80*P＜0.05**P＜0.01與對照組比本發(fā)明制劑在本實驗劑量范圍內抑瘤率為47.87％～56.72％(P＜0.001)，顯示了良好的量效關系?？稍黾親eps荷瘤小鼠免疫器官重量，其脾指數(shù)、胸腺指數(shù)升高較明顯，提示其有刺激免疫功能作用。低劑量組脾指數(shù)及胸腺指數(shù)提高有顯著意義(P＜0.05)。
2.抗移植性肉瘤實驗本發(fā)明制劑以300mg/Kg，600mg/Kg和1200mg/Kg灌胃給藥，對進行小鼠移植性肉瘤S108的實驗，實驗結果見表3，對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響見表4。
表3對小鼠移植性肉瘤S108的抑制作用(n＝10)藥物劑量給藥 動物數(shù) 體重變化(g)瘤重(g) 抑瘤率分組mg/Kg×d途徑 始/終 給藥前/給藥后X±S ％H2O ig 10/1018.5/23.51.29±0.61低劑量組 300×8 ig 10/1018.4/22.90.67±0.32*47.87中劑量組 600×8 ig 10/1018.6/19.70.56±0.29**51.48高劑量組 1200×8ig 10/1018.5/19.30.52±0.22**56.725-Fu25×8 ig 10/1018.7/21.70.67±0.21*53.44*P＜0.05**P＜0.01與對照組比表4對小鼠S108肉瘤免疫器官重量的影響(n＝10)藥物劑量給藥動物數(shù) 脾指數(shù) 胸腺指數(shù)分組mg/Kg×d途徑始/終X±S X±SH2Oig10/1073.48±17.07 35.56±12.04低劑量組 300×8 ig10/1070.79±20.29 40.96±17.58中劑量組 600×8 ig10/1082.50±27.94 36.50±12.63高劑量組 1200×8 ig10/1078.96±25.14 42.50±23.635-Fu25×8 ig10/1037.84±17.86 37.63±15.31*P＜0.05**P＜0.01與對照組比本發(fā)明制劑在本實驗劑量范圍內抑瘤率為48.06％～59.69％(P＜0.05)，有良好的抑瘤作用，其抑瘤作用呈量效關系?？稍黾覵108荷瘤小鼠免疫器官重量，給藥組脾指數(shù)、胸腺指數(shù)有所上升，提示其有一定的刺激免疫功能作用。
具體實施例方式
下面用實施例對本發(fā)明加以說明實施例1將精選靈芝孢子粉(超細粉碎細度0.2um)加入水，加入量使之成型為準，用擠條擠出，干燥后稱取100Kg，裝入萃取器?？刂茐毫?6Mpa，溫度50℃，萃取30小時，得孢子油15.8Kg，脫脂靈芝孢子84.4Kg。
實施例2與實施例1操作相同，不同的是靈芝孢子粉超細粉碎細度為0.3um，重量1000g，超臨界條件為壓力25MPa，溫度50℃，萃取時間為2小時。得靈芝孢子油153g，脫脂靈芝孢子粉848g。
實施例3與實施例1操作相同，不同的是靈芝孢子粉超細耪碎細度為0.5um，重量1000g，超臨界條件為壓力32MPa，溫度50℃，萃取時間為15小時。得靈芝孢子油160g，脫脂靈芝孢子粉842g。
實施例4制備1000粒靈芝孢子膠囊，以本發(fā)明方法生產(chǎn)靈芝孢子粉200g，充填成1000粒膠囊。
實施例5制備10000片靈芝孢子片劑，以本發(fā)明方法生產(chǎn)靈芝孢子粉2kg，加入淀粉8kg，干法制粒，壓片制成10000片片劑。
實施例6，制備500袋靈芝孢子茶飲料，以本發(fā)明方法生產(chǎn)靈芝孢子粉250g，加入茶葉750g，混合后粉碎，裝入500袋中，制成袋泡茶飲料。
實施例7制備1000粒靈芝孢子丸劑，以本發(fā)明方法生產(chǎn)靈芝孢子粉200g，加入淀粉800g，混合均勻后加水后將其制為丸劑。
權利要求
1.一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，選取靈芝科靈芝屬中的赤芝為原料，在赤芝栽培的成熟期，收集其孢子，經(jīng)篩選后采用常溫物理機械方法對赤芝孢子進行超細粉碎至0.2～0.5um之間，最后將破壁孢子粉根據(jù)需求進行制劑，其特征是對超細粉碎后的赤芝孢子采用CO2超臨界萃取的工藝脫脂。
2.根據(jù)權利要求1所述靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，其特征是CO2超臨界萃取工藝要求為赤芝孢子粉裝入萃取器中，從萃取器底部通入CO2氣，控制溫度為35-65℃，壓力為20-35Mpa，萃取時間為1-35小時。
3.根據(jù)權利要求2所述靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，其特征是將赤芝孢子粉加入水及明膠、淀粉中的一種或兩種混合，加入量使靈芝孢子粉粘結成型為準，混合均勻，在室溫下擠壓成型，自然干燥后的靈芝孢子粉裝入萃取器中，從萃取器底部通入CO2氣，從萃取器上部流出含有油脂的CO2進入減壓分離器，油脂從減壓分離器底部放出，CO2氣從減壓分離器的頂部流出，從萃取器回收脫脂靈芝孢子粉，后將脫脂靈芝孢子粉干熱滅菌0.5～3hr，使菌落總數(shù)小于10cfu/g。
全文摘要
一種靈芝孢子的抗癌制劑生產(chǎn)方法，選取靈芝科靈芝屬中的赤芝為原料，在赤芝栽培的成熟期，收集其孢子，經(jīng)篩選后采用常溫物理機械方法對赤芝孢子進行超細粉碎至0.2～0.5um之間，最后將破壁孢子粉根據(jù)需求進行制劑，其特征是對超細粉碎后的赤芝孢子采用CO
文檔編號A61P35/00GK1569215SQ20041001476
公開日2005年1月26日 申請日期2004年4月28日 優(yōu)先權日2004年4月28日
發(fā)明者馮敏, 錢一帆, 沈建, 華克偉, 陳亮 申請人:南京中科生化技術有限公司