專利名稱：免疫調(diào)節(jié)因子的提取方法及在制備治療不孕不育癥藥物中應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物制品及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從動(dòng)物脾臟中提取活性成份的方法及在制備治療不孕不育癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在治療不孕不育癥，包括男女生殖道炎癥，因病毒、支原體、衣原體感染和抗精子抗體陽性導(dǎo)致的不孕不育癥，月經(jīng)不調(diào)，先兆流產(chǎn)，習(xí)慣性流產(chǎn)，胎兒宮內(nèi)發(fā)育不良等病癥，目前還沒有特效治療藥物，臨床上一般采用對癥治療，治療效果不佳；對子宮萎縮、子宮發(fā)育不良、卵巢發(fā)育不良導(dǎo)致的不孕不育癥，根本無法治療，致使終身不孕。
發(fā)明人在多年臨床研究中，注意到陜西省生物制品研究所提供的轉(zhuǎn)移因子(TF)口服膠囊，有可能用來治療不孕不育癥。轉(zhuǎn)移因子(TF)是一種生化制品，是從豬羊脾臟中提取的白細(xì)胞浸出液可透析物質(zhì)(DLE)，主要含肽，核糖，多種氨基酸，因有共軛雙鍵，在入251nm處具最大吸收值，且在一定濃度范圍內(nèi)(0.1～0.5ug/ml)其吸收值與其濃度成正比。用上海產(chǎn)752紫外光度分析儀測出TF紫外吸收度為E260nm/E280nm不大于2.0(最高值為2.0)。
TF口服膠囊，每粒為4u，每一單位含肽類1000ug，含核糖80ug。
TF的提取方法分為四步1、收集豬羊脾臟并做處理，2、凍融，3、超濾和透析，4、除菌過濾、分裝，成為制劑。
TF口服膠囊在臨床上用于治療病毒性肝炎，慢性乙型肝炎表面抗原陽性，慢性乙肝E抗原陽性，病毒性心肌炎。以及用于術(shù)后恢復(fù)，惡性腫瘤的輔助治療。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人分析研究認(rèn)為，TF所治療的上述疾病為免疫功能紊亂所致，而上述不孕不育癥亦為免疫功能紊亂所致，目的在于以此尋求一種能治療不孕不育癥的藥物。
但是，發(fā)明人將TF口服膠囊在臨床上用于治療不孕不育癥，卻得不到治療效果。經(jīng)過6年上千次試驗(yàn)研究，依據(jù)《中國生物制品規(guī)程》、《中國藥典》，采取以下技術(shù)方案，實(shí)現(xiàn)了發(fā)明目的。
1、對轉(zhuǎn)移因子TF的提取工藝加以改進(jìn)，在“超濾和透析”前對原料使用超聲波發(fā)生器在室溫10-20℃作用時(shí)間10-30min，進(jìn)行“超聲碎化”。即采用的提取工藝是1、收集動(dòng)物(豬羊)脾臟，并做處理；2、凍融；3、超聲碎化，使用超聲波發(fā)生器在室溫10-20℃作用時(shí)間10-30min；4、超濾和透析；5、除菌過濾，分裝，成為液體制劑。
經(jīng)用上海產(chǎn)752紫外光度分析儀測出，紫外吸收度為E260nm/E280nm，值為2.5-3.0。
發(fā)明人將采用上述方法從動(dòng)物(豬羊)脾臟中提取的，而且紫外吸收度為E260nm/E280nm值2.5-3.0的提取物稱為免疫調(diào)節(jié)因子。
該免疫調(diào)節(jié)因子，外觀為白色或微黃色液體，PH值為6.5-7.5，紫外吸收度E250nm，1cm≥10，E260nm/E280nm值為2.5-3.0，用20％磺基水楊酸與等量的檢品反應(yīng)，蛋白質(zhì)反應(yīng)為陰性，將檢品濃縮10倍以上用敏感性為3mg/ml以下的試劑檢驗(yàn)HBSag為陰性。無任何毒副作用。
2、將所述免疫調(diào)節(jié)因子液體制劑在制備治療不孕不育癥的藥物中應(yīng)用，做臨床試驗(yàn)。
劑型為口服液，按口服液劑型方法生產(chǎn)制備免疫調(diào)節(jié)因子口服液。每支免疫調(diào)節(jié)因子口服液10ml為4u，每一單位含肽類≥1000ug，含核糖≥80ug，每天4-6支，分三次飯前或睡前口服，二個(gè)月為一療程。用于男女頑固性生殖道炎癥，因病毒、支原體、衣原體感染和抗精子抗體陽性導(dǎo)致的不孕不育癥，月經(jīng)不調(diào)，先兆流產(chǎn)，習(xí)慣性流產(chǎn)等不孕不育癥，臨床實(shí)驗(yàn)，不超過一個(gè)療程即獲得了滿意效果；用于治療子宮發(fā)育不良、子宮萎縮、卵巢發(fā)育不良等無法受孕癥，不超過2個(gè)療程，竟產(chǎn)生了意料不到的治療奇跡，還用于胎兒宮內(nèi)發(fā)育不良，保胎，促進(jìn)胎兒生長發(fā)育等臨床，也獲得了良好的效果。
據(jù)臨床試驗(yàn)資料較完整的病例統(tǒng)計(jì)，接治190例，其中男90例，女100例，死精子40例，少精子22例，精子活動(dòng)力低28例，月經(jīng)不調(diào)(停經(jīng)、閉經(jīng))25例，子宮萎縮發(fā)育不良35例，卵巢發(fā)育不良26例，支原體、衣原體感染等其它不孕不育癥14例，治愈率高達(dá)96％，有效率100％。
發(fā)明人粗線地認(rèn)為，由于本發(fā)明對轉(zhuǎn)移因子(TF)提取方法增加了超聲碎化的工藝改進(jìn)，可使豬羊脾臟組織中的T淋巴細(xì)胞膜進(jìn)一步徹底破裂，并使核膜和細(xì)胞器碎裂，使得具有生物活性的肽類、核糖、多種氨基酸更多地釋出，紫外吸收度為E260nm/E280nm值2.5-3.0，對人體的免疫功能起到了較好地調(diào)節(jié)作用，因而產(chǎn)生了突破性進(jìn)展和意料不到的效果；將改進(jìn)方法后的提取物在制備治療不孕不育癥藥物中應(yīng)用，臨床具有治愈率高，療期短，見效快的顯著優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式取健康新鮮的豬羊脾臟(HBSag為陰性)保存于-20℃冰柜中備用。對于一切接觸的用具器皿使用前均進(jìn)行消毒及去除熱原質(zhì)處理，不得污染熱原質(zhì)?？刂茀^(qū)達(dá)到凈化10萬級，局部達(dá)到100級。經(jīng)凍融、超聲碎化、超濾透析、除菌過濾、分裝。其中，超聲碎化使用頻度30MHz-40MHz聲強(qiáng)100MW/cm2的超聲波發(fā)生器，室溫16℃，作用時(shí)間20min即可。
將經(jīng)過上述方法提取的免疫調(diào)節(jié)因子口服液經(jīng)河南省南陽市醫(yī)學(xué)開發(fā)中心臨床實(shí)驗(yàn)，免疫調(diào)節(jié)因子口服液每支10ml為4u，每天4-6支，分三次飯前或睡前口服，2個(gè)月為一療程，一般1-2個(gè)療程，統(tǒng)計(jì)190例，治愈率96％，有效率100％。
實(shí)驗(yàn)病例1，河南新野縣，李××，女，29歲，雙子宮偏小，經(jīng)治療2個(gè)月受孕；實(shí)驗(yàn)病例2，河南南陽市，王××，女，26歲，習(xí)慣性流產(chǎn)5次，治療4個(gè)月，一年后順產(chǎn)一男嬰；實(shí)驗(yàn)病例3，河南南陽市城區(qū)，趙××，女，42歲，原發(fā)性不孕15年，治療2個(gè)月受孕。
實(shí)驗(yàn)病例4，南陽市，狄××，女，30歲，原發(fā)性不孕6年，雙側(cè)卵巢發(fā)育欠佳，經(jīng)治療2個(gè)月，正常，后受孕。
實(shí)驗(yàn)病例5，南陽市，趙××，女，33歲，繼發(fā)性不孕5年，子宮萎縮，經(jīng)治療2個(gè)月，正常，后懷孕。
實(shí)驗(yàn)病例6，明××，男，36歲，河南省唐河縣人，繼發(fā)性不育2年，類風(fēng)濕病史，經(jīng)檢查精子數(shù)少，存活率差，治療三個(gè)月，其妻受孕。
實(shí)驗(yàn)病例7，甘肅省酒泉市，楊××，男，30歲，繼發(fā)性不育3年余，精液檢查精子活動(dòng)力低，存活時(shí)間短，治療1個(gè)月正常，2個(gè)月后其妻受孕。
實(shí)驗(yàn)病例8，河南鄭州市，陳××，男，42歲，原發(fā)性不育16年，死精子，治療3個(gè)月痊愈。
以上實(shí)驗(yàn)病例資料附在之后，供參考。
權(quán)利要求
1.一種免疫調(diào)節(jié)因子的提取方法，其特征是(1)、收集動(dòng)物脾臟并做處理；(2)、凍融；(3)、超聲碎化，使用超聲波發(fā)生器在室溫10-20℃作用10-30min；(4)、超濾和透析；(5)、除菌過濾、分裝，成為免疫調(diào)節(jié)因子液體制劑，紫外吸收度為E260nm/E280nm值2.5-3.0。
2.權(quán)利要求1所述的方法提取的免疫調(diào)節(jié)因子在制備治療不孕不育癥藥物中應(yīng)用，不孕不育癥包括男女生殖道炎癥，因病毒、支原體、衣原體感染和抗精子抗體陽性導(dǎo)致的不孕不育癥，月經(jīng)不調(diào)(停經(jīng)、閉經(jīng))，先兆流產(chǎn)，習(xí)慣性流產(chǎn)，胎兒宮內(nèi)發(fā)育不良，子宮萎縮，子宮發(fā)育不良，卵巢發(fā)育不良以及促進(jìn)胎兒生長發(fā)育、保胎等。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物制品及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從動(dòng)物脾臟提取免疫調(diào)節(jié)因子的方法及在制備治療不孕不育癥藥物中的應(yīng)用。主要特點(diǎn)是采取收集動(dòng)物脾臟并做處理，凍融、超聲碎化、超濾透析、除菌過濾、分裝的方法，所提取的免疫調(diào)節(jié)因子其紫外吸收度為E260nm/E280nm值2.5－3.0，用于治療不孕不育癥，特別是對于子宮萎縮，子宮發(fā)育不良，卵巢發(fā)育不良等疑難癥以及促進(jìn)胎兒生長發(fā)育方面實(shí)現(xiàn)了突破性進(jìn)展，取得了意料不到的效果，據(jù)統(tǒng)計(jì)190例，治療1－3個(gè)月，總治愈率96％，有效率100％。
文檔編號A61K38/02GK1594357SQ20041001038
公開日2005年3月16日 申請日期2004年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月30日
發(fā)明者郝建平 申請人:郝建平