專利名稱：治療肺心病及能量補(bǔ)充的脂肪乳輸液及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有調(diào)節(jié)磷酸二酯酶(PDE)蛋白質(zhì)活性的治療肺心病和能量補(bǔ)充相結(jié)合的脂肪乳輸液及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
在二十世紀(jì)七十年代，德國(guó)和印度學(xué)者從印度孟買采集到毛喉鞘蕊花植物(Coleus Forskohlii)，并從中分離到生理活性極強(qiáng)的勞丹烷型二萜化合物——佛司可林(forkolin)及其類似化合物。經(jīng)藥理研究證實(shí)，佛司可林為目前所知最強(qiáng)的腺苷酸環(huán)化酶激活劑，它不通過(guò)抑制磷酸二酯酶，而是直接提高細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度產(chǎn)生生理活性，其濃度在10-9g/ml時(shí)就具有活性。由于該類化合物表現(xiàn)出明顯的降壓和強(qiáng)心活性，在治療心血管疾病、充血性心力衰竭、腫瘤轉(zhuǎn)移、支氣管哮喘、皮膚疾病等方面療效顯著，開發(fā)前景較好。我國(guó)在1989年于云南會(huì)澤縣采集到該種植物，經(jīng)鑒定，確認(rèn)滇產(chǎn)植物和印度植物為同一種植物，其所含的化合物以異佛司可林為主。目前已開發(fā)的制劑僅有復(fù)方制劑——鞘蕊蘇口服液，已不能滿足市場(chǎng)的需求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種對(duì)肺心病具有較好的治療作用，同時(shí)還能補(bǔ)充能量的異佛司可林脂肪乳輸液及其生產(chǎn)方法。
本發(fā)明通過(guò)下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)所述異佛司可林脂肪乳輸液，包括藥物有效成分、藥用輔料及乳化劑，其特征在于每瓶輸液含有異佛司可林0.1～0.8mg，配以適量藥用輔料及能量劑和乳化劑制成醫(yī)藥上可接受的脂肪乳輸液。
所述能量劑為提供高能的脂肪酸或其衍生物，脂肪酸或其衍生物為飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸或必需脂肪酸中的一種或幾種，具體是大豆油、花生油、精煉米糠油、小麥胚芽油、芝麻油、棉籽油、月見草油、紫蘇油、沙棘油、紅花油、亞麻籽油、玉米油、葡萄籽油、沙蒿籽油、青刺果油、深海魚油、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、α-亞麻酸、γ-亞麻酸、多不飽和脂肪酸、二十碳五烯酸及其酯、二十二碳六烯酸及其酯、甘油中的一種或幾種。
所述乳化劑為卵磷脂、腦磷脂、大豆磷脂、黃原膠、蔗糖酯、低酯果膠、阿拉伯膠、人參皂苷、西洋參皂苷、三七皂苷、絞股藍(lán)皂苷中的一種或幾種。
所述藥用輔料為不影響脂肪的乳化及穩(wěn)定性的其他營(yíng)養(yǎng)劑或治療藥劑，具體是天門冬氨酸、精氨酸等氨基酸中的一種或幾種，和/或氯化鈣、氯化鉀、硫酸鋅、硫酸錳等微量元素中的一種或幾種。
本發(fā)明所述鞘蕊蘇提取物通過(guò)下列現(xiàn)有技術(shù)中的提取方法制得1、將毛喉鞘蕊蘇干品打成粗粉，用95％的乙醇按9倍、7倍、7倍、7倍的量依次進(jìn)行熱回流提取，每次提1小時(shí)，合并提取液，濃縮至50％的量；2、按溶液量的0.1％(質(zhì)量比)加入活性炭脫色，用短的硅膠柱除雜一次，濃縮至5％的量(濃縮致干得含異佛司可林10％的產(chǎn)物)；3、在攪拌下加入8倍量的氯仿或二氯甲烷，在5-10℃放置過(guò)夜，分離出氯仿或二氯甲烷層后，過(guò)濾，真空濃縮致干，得含異佛司可林80％的提取物；4、在硅膠柱上分離，用下列溶劑洗脫流份石油醚(沸點(diǎn)60-80℃)，石油醚-苯混合物，苯、苯-乙酸乙酯混合物；5、收接苯-乙酸乙酯洗脫流份，真空濃縮致干，干燥物在乙酸乙酯-石油醚(沸點(diǎn)60-80℃)中重結(jié)晶，得無(wú)色結(jié)晶異佛司可林，mp208-211℃，收率為0.03％。
所述毛喉鞘蕊蘇干品為毛喉鞘蕊蘇的根。
選擇本發(fā)明的各工藝步驟，可得到含異佛司可林(勞丹烷型二萜化合物)10％-80％的鞘蕊蘇提取物。
本發(fā)明所述鞘蕊蘇提取物還可通過(guò)下列現(xiàn)有技術(shù)的提取方法制得用超臨界(SC-CO2)提取方法提取異氟司可林。溶劑可選用CO2、CO2夾帶乙醇、CO2夾帶甲醇等，萃取溫度45～65℃，萃取壓力30～50Mpa，解析壓力8～14Mpa，解析溫度42～67℃。優(yōu)點(diǎn)在于方法屬于潔凈生產(chǎn)，提取物中殘留溶劑少。嚴(yán)格控制條件和夾帶溶劑的量可以得到異佛司可林。
本發(fā)明提供的異佛司可林脂肪乳輸液的生產(chǎn)方法包括以下步驟1、異佛司可林溶于制備所用的藥用輔料的油脂中，并注意使其完全溶解；2、將乳化劑溶于水或油脂中；3、將異佛司可林油脂及油溶乳化劑或水溶乳化劑混合后，于50～80℃打碎成粗乳；4、將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再進(jìn)一步乳化，得細(xì)分散的亞微乳(即脂肪乳)；5、調(diào)節(jié)pH值，濾除粗乳滴與碎片后，濾液分裝，扎蓋，得脂肪乳輸液產(chǎn)品；6、將所得制劑預(yù)熱，在121℃下滅菌15分鐘，或用旋轉(zhuǎn)滅菌器滅菌，沖熱水逐漸冷卻，陰涼處保存。
上述各步驟均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行，配液過(guò)程在100級(jí)的條件下進(jìn)行。
用本法制備的異佛司可林脂肪乳輸液經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明一、穩(wěn)定性在常溫下該脂肪乳輸液放置1年，產(chǎn)品穩(wěn)定可靠，各項(xiàng)指標(biāo)均合格，完全符合注射用的要求。
二、血管刺激性試驗(yàn)用大白兔做刺激性實(shí)驗(yàn)，該脂肪乳輸液的刺激性為0級(jí)，即無(wú)明顯變化。
實(shí)施例1異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林 0.1g大豆油 7500g甘油1250g大豆磷脂750g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、大豆油，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于70～80℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.1mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施例2異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林 0.2g紅花油 6000g甘油1000g大豆磷脂 700g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、紅花油，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于70～80℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.2mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施3異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林 0.1g 芝麻油6500g月見草油1000g 甘油 1200g大豆磷脂 700g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入草烏甲素甘油液、月見草油、芝麻油，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于70～80℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.1mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施4異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林0.4g 大豆油7500gγ-亞麻酸1000g 甘油 1250g
大豆磷脂 50g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將大豆磷脂加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、大豆油、γ-亞麻酸，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于60～70℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.4mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施例5異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林 0.6g大豆油 7500g二十二碳六烯酸及其酯500g維生素E 100g甘油 1250g卵磷脂 650g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將卵磷脂加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、大豆油、二十二碳六烯酸乙酯，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于55～60℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品。可制得1000瓶50ml∶0.6mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施例6異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林0.2g大豆油 7500g沙棘油600g甘油 1250g腦磷脂650g三七總皂苷 100g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將腦磷脂、三七總皂苷加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、大豆油、沙棘油，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于70～75℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.2mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
實(shí)施例7異佛司可林脂肪乳，配方異佛司可林0.8g大豆油 7500g八種必需氨基酸混合物 400g甘油 250g大豆磷脂 750g制備工藝在100級(jí)的條件下，將異佛司可林先溶于適量的甘油中，并注意使其完全溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將大豆磷脂八種必需氨基酸混合物加入注射用水20000ml，再加入異佛司可林甘油液、大豆油，補(bǔ)加注射用水至50000ml。于70～80℃用組織打碎機(jī)制得粗乳。將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再用兩步高壓乳勻機(jī)乳化，即得細(xì)分散的亞微乳(脂肪乳)。用4號(hào)垂熔漏斗過(guò)濾，精濾液送入分裝機(jī)，按每瓶50ml分裝，扎蓋、包裝、檢驗(yàn)、合格、的成品?？芍频?000瓶50ml∶0.8mg之規(guī)格的異佛司可林脂肪乳輸液成品。
本發(fā)明提供的異佛司可林脂肪乳輸液經(jīng)藥學(xué)研究其結(jié)果如下1、脂肪乳的穩(wěn)定性將實(shí)施例1、2、3、4、5、6、7七個(gè)樣品在室溫下避光保管，放置1、2、3、6、12個(gè)月，按時(shí)檢查，每瓶外觀基本不變，有效成分經(jīng)檢驗(yàn)也未發(fā)生變化。因此，初步認(rèn)為該脂肪乳的各種處方均可達(dá)到1年左右的保質(zhì)期。
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定和鑒別等參照云南省1996年藥品標(biāo)準(zhǔn)集中鞘蕊蘇口服液。結(jié)果見表1。
2、異佛司可林脂肪乳輸液的刺激性試驗(yàn)取健康家兔4只，重量2.0～2.2kg/只，雌雄各半，分為兩組，分別在其左右腿股四頭肌上注射異佛司可林脂肪乳輸液1ml(實(shí)施例5)，藥后48h處死兔子，剖檢股四頭肌，縱向切開觀察注射局部肌肉刺激反應(yīng)，并按表2換算出相應(yīng)的反應(yīng)級(jí)。
表1、脂肪乳穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果樣品 樣品含量、鑒別1月 2月 3月 6月 12月例1 合格 合格 合格 合格合格例2 合格 合格 合格 合格合格例3 合格 合格 合格 合格 含量略降例4 合格 合格 合格 合格合格例5 合格 合格 合格 合格合格例6 合格 合格 合格 合格合格例7 合格 合格 合格含量略降 略降結(jié)果表明該發(fā)明制備的樣品，經(jīng)過(guò)初步穩(wěn)定性考察，產(chǎn)品質(zhì)量基本穩(wěn)定，可達(dá)一年以上。
表2、局部肌肉刺激反應(yīng)級(jí)表反應(yīng)級(jí) 刺激反應(yīng)0 無(wú)明顯變化1 輕度充血，其范圍小于0.5～1.0cm2 中度充血，其范圍小于0.5～1.0cm3 重度充血，伴有肌肉變性4 出現(xiàn)壞死，有褐色變性5 出現(xiàn)廣泛性壞死結(jié)果異佛司可林脂肪乳輸液的刺激性為0級(jí)，即無(wú)刺激性。
3、對(duì)離體豚鼠氣管條的作用藥物實(shí)施例1和6動(dòng)物豚鼠，體重270±20g離體豚鼠氣管條的制備及檢測(cè)將豚鼠擊頭致昏，迅速剝?nèi)夤?，剪?×30mm的螺旋條。將螺旋條懸掛于盛有20mlKrebs液(37.0±0.5℃，pH7.4±0.5)的離體氣管測(cè)定儀浴槽中，兩端分別連在張力換能器和浴槽底部的通氣鉤上，通氧氣，靜息負(fù)荷4.5g，螺旋條張力變化由連接于換能器的記錄儀(U-135C，Shimadzu)記錄。每20分鐘換液一次，平衡1小時(shí)后開始試驗(yàn)。加入組胺(終濃度1.0μg/ml)激動(dòng)，待最大收縮峰時(shí)累積加入不同濃度的藥物，測(cè)定累積量效關(guān)系，用非線性回歸法計(jì)算藥物抑制組胺誘導(dǎo)離體氣管條收縮的半數(shù)抑制率(IC50)。
結(jié)果為對(duì)離體豚鼠氣管條的IC50分別為實(shí)施例1為8.2μg/ml實(shí)施例6為7.9μg/ml。
4、異佛司可林脂肪乳的活血作用以等體積NS和復(fù)方丹參輸液分別作為陰性和陽(yáng)性對(duì)照，異佛司可林脂肪乳拮抗垂體后葉素所致離體豚鼠心臟冠脈流量減少(p＜0.01)呈量效關(guān)系，優(yōu)于復(fù)方丹參組。在麻醉大鼠結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支心肌缺血模型上，異佛司可林脂肪乳0.1、0.2mg/kg較NS對(duì)照組明顯縮小梗塞范圍，緩解缺血ST段抬高和降低血清CPK和LDH方面優(yōu)于復(fù)方丹參組。沙土鼠腦缺血再灌損傷模型，異佛司可林脂肪乳0.1、0.2mg/kg與復(fù)方丹參注射液2000mg/kg均顯示降低缺血腦水腫和含鈣量。
權(quán)利要求
1.一種治療肺心病及能量補(bǔ)充的脂肪乳輸液，包括藥物有效成分、藥用輔料及乳化劑，其特征在于每瓶輸液含有異佛司可林0.1～0.8mg，配以適量藥用輔料及能量劑和乳化劑制成醫(yī)藥上可接受的脂肪乳輸液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂肪乳輸液，其特征在于所述能量劑為提供高能的脂肪酸或其衍生物，其中脂肪酸或其衍生物為飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸或必需脂肪酸中的一種或幾種，具體是大豆油、花生油、精煉米糠油、小麥胚芽油、芝麻油、棉籽油、月見草油、紫蘇油、沙棘油、紅花油、亞麻籽油、玉米油、葡萄籽油、沙蒿籽油、青刺果油、深海魚油、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、α-亞麻酸、γ-亞麻酸、多不飽和脂肪酸、二十碳五烯酸及其酯、二十二碳六烯酸及其酯、甘油中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂肪乳輸液，其特征在于所述乳化劑為卵磷脂、腦磷脂、大豆磷脂、黃原膠、蔗糖酯、低酯果膠、阿拉伯膠、人參皂苷、西洋參皂苷、三七皂苷、絞股藍(lán)皂苷中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂肪乳輸液，其特征在于所述藥用輔料為不影響脂肪的乳化及穩(wěn)定性的其他營(yíng)養(yǎng)劑或治療藥劑，具體是天門冬氨酸、精氨酸等氨基酸中的一種或幾種，以及氯化鈣、氯化鉀、硫酸鋅、硫酸錳等微量元素中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂肪乳輸液，其特征在于通過(guò)下列方法制得A、異佛司可林溶于制備所用的藥用輔料的油脂中，并注意使其完全溶解；B、將乳化劑溶于水或油脂中；C、將異佛司可林油脂及油溶乳化劑或水溶乳化劑混合后，于50～80℃打碎成粗乳；D、將粗乳迅速冷卻至20℃以下，再進(jìn)一步乳化，得細(xì)分散的亞微乳(即脂肪乳)；E、調(diào)節(jié)pH值，濾除粗乳滴與碎片后，濾液分裝，扎蓋，得脂肪乳輸液產(chǎn)品；F、將所得制劑預(yù)熱，在121℃下滅菌15分鐘，或用旋轉(zhuǎn)滅菌器滅菌，沖熱水逐漸冷卻，陰涼處保存。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的脂肪乳輸液，其特征在于各步驟均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行，配液過(guò)程在100級(jí)的條件下進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療肺心病及能量補(bǔ)充的脂肪乳輸液，包括藥物有效成分、藥用輔料及乳化劑，其特征在于每瓶輸液含有異佛司可林0.1～0.8mg，配以適量藥用輔料及乳化劑制成醫(yī)藥上可接受的脂肪乳輸液。產(chǎn)品穩(wěn)定、可靠，無(wú)刺激性，各項(xiàng)指標(biāo)完全符合注射要求，經(jīng)與復(fù)方丹參對(duì)比試驗(yàn)，在縮小梗塞范圍，緩解缺血ST段抬高和降低血清CPK和LDH方面優(yōu)于復(fù)方丹參組。
文檔編號(hào)A61P3/00GK1615822SQ20031011096
公開日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2003年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月15日
發(fā)明者于軍 申請(qǐng)人:昆明紫健生物技術(shù)有限公司