專利名稱：含1,2－丙二醇的高濃度人生長(zhǎng)激素液體制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可穩(wěn)定存儲(chǔ)、在存儲(chǔ)期間結(jié)晶減少或沒有結(jié)晶并且適于對(duì)人或動(dòng)物體給藥的人生長(zhǎng)激素(hGH，促生長(zhǎng)激素)的液體制劑。更特別地，本發(fā)明涉及穩(wěn)定的、并且在高于冷藏溫度的溫度下存儲(chǔ)至少一段時(shí)間時(shí)結(jié)晶最少或沒有結(jié)晶的人生長(zhǎng)激素的液體制劑。
天然hGH為含191個(gè)氨基酸的單多肽鏈蛋白質(zhì)。該蛋白質(zhì)通過兩個(gè)二硫橋內(nèi)部交聯(lián)，并且其單體形式的分子量為約22kDa。
hGH的一個(gè)主要的生物學(xué)效應(yīng)是促進(jìn)體內(nèi)所有器官和組織的生長(zhǎng)。在整個(gè)生命過程中hGH以脈沖方式從腦垂體分泌。hGH主要的生物學(xué)效應(yīng)是促進(jìn)生長(zhǎng)。hGH響應(yīng)性的器官或組織包括肝、腸、腎臟、肌肉、結(jié)締組織和骨骼。hGH缺乏在所有年齡段均可出現(xiàn)。hGH缺乏的后果包括骨密度減小、兒童身材矮小、瘦體重及細(xì)胞外容積減少和心血管的危險(xiǎn)因數(shù)增加。已經(jīng)證明使用重組hGH的替代治療在逆轉(zhuǎn)這些效應(yīng)方面是安全和有效的，但需要要以固定的間隔反復(fù)注射。
例如，垂體功能減退性侏儒癥是一種可通過對(duì)患有該疾病的患者給予hGH而易于治療的疾病。在通過重組方式大量生產(chǎn)hGH之前，僅有限量的hGH可通過從人尸體的垂體中經(jīng)費(fèi)力地提取而制備。這種做法帶來了與傳染物、例如引起克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病(CJD)的傳染物有關(guān)的危險(xiǎn)，并且這些傳染物可能會(huì)傳輸?shù)浇邮躧GH的患者。hGH基因的分離和表達(dá)重組hGH的轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)中的構(gòu)建不僅開拓了一種更可靠、更安全和更有經(jīng)濟(jì)效益的垂體功能減退性侏儒癥的治療法，而且開拓了用hGH治療其它疾病和病情的可能。相應(yīng)地，在本發(fā)明的上下文中，hGH優(yōu)選指重組人生長(zhǎng)激素。然而易于理解的是，從天然原料中分離的人生長(zhǎng)激素原則上同樣也可包括在本發(fā)明的藥物制劑中。
一種與藥用蛋白質(zhì)而不僅僅是hGH的含水液體制劑有關(guān)的長(zhǎng)期為人們所關(guān)注的問題是其在存放過程中不穩(wěn)定。已知含水溶液中的hGH可經(jīng)歷多種降解變化。與大多數(shù)其它蛋白質(zhì)相同，促生長(zhǎng)激素(重組人生長(zhǎng)激素，rhGH)有三種主要的可能降解途徑，即導(dǎo)致游離酰胺基脫酰胺的水解、含硫氨基酸的氧化以及物理變化聚集，所述的聚集為兩個(gè)或多個(gè)hGH分子物理上粘連在一起，例如導(dǎo)致形成不透明的不溶物質(zhì)。也可能由于水解導(dǎo)致肽主鏈剪短。另外，一個(gè)主要的問題是hGH的結(jié)晶化。
早期有關(guān)如何解決上述不穩(wěn)定問題的建議包括冷凍干燥，但是這當(dāng)然意味著需要在給藥前立即或不久重新配制所得的凍干產(chǎn)品。當(dāng)患者在家中進(jìn)行常規(guī)的自我給藥的情形下，這通常意味著患者需要將凍干制劑重新配制成含水溶液。這對(duì)于患者是不方便的，并且具有因缺乏細(xì)心、沒有注意細(xì)節(jié)和指導(dǎo)或者僅僅是患者方面的誤解而錯(cuò)誤地重新配制的危險(xiǎn)。從制備角度來看，冷凍干燥制劑還具有價(jià)格昂貴和耗時(shí)的缺點(diǎn)。
因此在研發(fā)一種允許患者較簡(jiǎn)單的自我給予hGH的制劑方面進(jìn)行了大量嘗試。這些嘗試聚焦于提供一種即可使用形式的足夠穩(wěn)定的含水液體hGH制劑的方法。該液體劑型的便利性增加，并且因此與必須重新配制并通過其它裝置填充入筆式藥液筒的凍干劑型相比具有較好的依從性。
然而，必須注意那些也許能穩(wěn)定hGH含水制劑的賦形劑在對(duì)患者給藥時(shí)可能會(huì)帶來某些危險(xiǎn)。許多可作為穩(wěn)定劑的化合物在臨床上是不能接受的，并且因此無法用來制備可藥用的制劑。另外，藥物管理要求指出，必須避免任何不必要的添加劑/賦形劑、特別是合成的添加劑/賦形劑，以減少對(duì)患者的風(fēng)險(xiǎn)。
方便地，hGH的含水藥物制劑應(yīng)當(dāng)以多劑量制劑提供給患者，患者可通過注射裝置給予該制劑。該多劑量藥物制劑通常需要有適宜的防腐劑。
已知hGH的常規(guī)液體制劑含有較低濃度的藥物，例如約3.33mg/ml，然而較低濃度在給藥時(shí)可能引起對(duì)患者的某些不利。
特別地，患者每次注射不得不接受相對(duì)較大體積的該hGH低濃度制劑，這可能引起不適或者甚至是疼痛。例如，對(duì)于患有生長(zhǎng)激素缺乏(GHD)的兒童，可能需給予劑量為約0.1IU/kg體重/天的hGH。相應(yīng)地，體重為50公斤的患者每天不得不接受約5IU的hGH，該5IU的hGH包含在500μl含約3.33mg/ml hGH的液體制劑中(1IU hGH＝0.33mg hGH)。易于理解的是，特別希望使用的體積小于500μl。
可選擇地，該劑量可通過2次或多次注射該低濃度hGH制劑、而每次注射的體積減少的方式給予。然而，就使用安全性而言，不推薦每劑量使用多于一次注射。
另外，根據(jù)治療方案和劑量，患者也許不得不使用多于一次的該低濃度hGH制劑的單注射液，以便能得到規(guī)定量的hGH。該情況可能出現(xiàn)于例如具有與特納綜合癥有關(guān)的發(fā)育缺陷的患者，該患者由于其體重增加可能需要較高量的hGH。在很多情形下，不可能通過單次注射合理體積的該低濃度hGH制劑對(duì)該患者傳輸需要量的hGH。
因此，一直需要有一種含高濃度hGH的液體藥物制劑。
在本發(fā)明的進(jìn)程中已經(jīng)注意到，如果將已知的含水液體生長(zhǎng)激素制劑中的hGH的濃度調(diào)節(jié)到較高值、例如5mg/ml hGH或更高，則在該制劑中易于形成結(jié)晶。不僅在將所述制劑存儲(chǔ)于冷藏溫度時(shí)如此，而且當(dāng)它們?cè)诟哂诶洳販囟认麓鎯?chǔ)至少一段時(shí)間時(shí)也是如此。在hGH液體制劑中存在有結(jié)晶是特別不希望的，因?yàn)樵诮o藥前需要將該制劑振搖或渦旋，并且可能存在當(dāng)結(jié)晶細(xì)小或者未被觀察到時(shí)而導(dǎo)致給予結(jié)晶未首先充分溶解的制劑的情形。當(dāng)在存儲(chǔ)期間形成結(jié)晶時(shí)，還存在有就hGH制劑的外觀而言的明顯缺陷。
因此本發(fā)明的目的是提供一種多劑量的含水液體hGH制劑，當(dāng)其在冷藏溫度長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)時(shí)是穩(wěn)定的，例如數(shù)月，或者甚至是1或2年。本發(fā)明的另一目的是提供液體hGH制劑，當(dāng)其在高于常規(guī)冷藏溫度(例如高于2℃-8℃)或者甚至在冷藏箱外存儲(chǔ)至少一段時(shí)間(例如數(shù)小時(shí)、數(shù)天或者甚至是數(shù)周)時(shí)仍然是穩(wěn)定的。
在本申請(qǐng)的上下文中，“穩(wěn)定”主要地指基本上避免了形成結(jié)晶的問題；優(yōu)選完全避免了該問題。相應(yīng)地，本發(fā)明的藥物制劑在如上所述存儲(chǔ)時(shí)結(jié)晶最少或沒有結(jié)晶。
除了避免結(jié)晶外，穩(wěn)定制劑應(yīng)當(dāng)優(yōu)選在存儲(chǔ)時(shí)hGH沒有聚集或者聚集最少。同樣地，穩(wěn)定制劑優(yōu)選應(yīng)當(dāng)沒有或者僅僅是最低程度地發(fā)生hGH的其它降解，例如脫酰胺、氧化和/或水解。
在本發(fā)明的上下文中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，該含高濃度hGH的多劑量液體制劑中使用的1，2-丙二醇是有關(guān)穩(wěn)定性的有利參數(shù)。此外，在本發(fā)明的上下文中，已經(jīng)出人意料地確定穩(wěn)定制劑可含有比以前所認(rèn)為的量少的賦形劑。
相應(yīng)地，本發(fā)明的實(shí)施方案涉及1，2-丙二醇作為穩(wěn)定劑在制備如此處所描述的含高濃度人生長(zhǎng)激素的多劑量含水液體藥物制劑中的應(yīng)用。
在本發(fā)明的研發(fā)期間，已經(jīng)證明，1，2-丙二醇能夠使藥物制劑具有穩(wěn)定性，并且同時(shí)可有助于制劑的所需張力。
在本發(fā)明的上下文中，液體藥物制劑是以即可使用的形式提供的制劑，即它不是以需要在給藥前重新配制的形式、例如冷凍干燥的形式提供的。
因此本發(fā)明提供了一種人生長(zhǎng)激素的多劑量液體藥物制劑，其基本上由濃度為約5mg/ml至約100mg/ml的人生長(zhǎng)激素、1，2-丙二醇、含水緩沖液、非離子型表面活性劑和防腐劑組成，所述藥物制劑的張力為約100至約500mosm/kg，pH為約6.1至約6.3。
當(dāng)必要時(shí)，該藥物制劑中可存在有其它張力調(diào)節(jié)劑，從而使張力為約100至約500mosm/kg。優(yōu)選本發(fā)明的藥物制劑為等滲的。
相應(yīng)地，在其另一實(shí)施方案中，提供了基本上由濃度為約5mg/ml至約100mg/ml的人生長(zhǎng)激素、1，2-丙二醇、含水緩沖液、非離子型表面活性劑和防腐劑組成，所述藥物制劑的張力為約100至約500mosm/kg，pH為約6.1至約6.3，所述藥物制劑還另外含有張力調(diào)節(jié)劑，使得藥物組合物的張力為約100至約500mosm/kg。
如果制劑的其它賦形劑對(duì)制劑的總張力沒有貢獻(xiàn)，則有必要存在達(dá)到可獲得預(yù)期張力的程度的其它張力調(diào)節(jié)劑。特別地，根據(jù)1，2-丙二醇的濃度，其能夠提供預(yù)期張力的大部分。特別優(yōu)選的是其中1，2-丙二醇與其它賦形劑一起就能提供預(yù)期張力而不需要存在其它張力調(diào)節(jié)劑的本發(fā)明的藥物制劑，由此可使所用賦形劑的總數(shù)保持最少。
在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“基本上由...組成”指本發(fā)明的藥物制劑除此處提及的、能有助于藥物制劑的工藝學(xué)藥物性能(例如在穩(wěn)定性、pH、張力等方面)的賦形劑以外不含有其它賦形劑。然而，不排除該制劑含有一種或多種對(duì)制劑的工藝學(xué)藥物性能不起作用的其它助劑的可能。該助劑例如可以是使液體制劑有顏色的可藥用染料。這例如可幫助確定多劑量注射裝置中液體的量或者幫助順利地確定是否有結(jié)晶出現(xiàn)。
發(fā)明人由本發(fā)明已經(jīng)認(rèn)識(shí)到對(duì)患者、藥劑師和職業(yè)醫(yī)生的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。迄今為止必需確保將生長(zhǎng)激素制劑小心地存儲(chǔ)于冷藏溫度(例如在2℃至8℃范圍內(nèi))，以便使結(jié)晶最少。在患者收到生長(zhǎng)激素前，該制劑通常由廠家和藥劑師可靠地存儲(chǔ)于冷藏溫度下。然而，一旦患者收到并存儲(chǔ)在家用電冰箱中時(shí)，在貯存溫度方面的可靠性就小得多?；颊呒矣秒姳渲械臏囟壤缬捎陬l繁地打開而明顯高于2-8℃，例如為約15℃。而且，所使用的含液體制劑的裝置可能被存儲(chǔ)在冰箱外，例如給藥后忘記在廚房工作臺(tái)上，由此在一段時(shí)間內(nèi)暴露于室溫下(例如約20℃至約27℃，常為約25℃)。在已知的hGH藥物制劑中，hGH結(jié)晶在溫度高于8℃時(shí)、即高于冷藏溫度時(shí)更易于出現(xiàn)。
即使本發(fā)明的制劑在高于冷藏溫度下存儲(chǔ)一段時(shí)間，也可提供很強(qiáng)的對(duì)抗結(jié)晶的抵抗力。因此允許供應(yīng)給患者足夠多的生長(zhǎng)激素，以在比迄今為止可推存或期望的時(shí)間周期更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供每日劑量。然而以前，患者僅可能保存可使用一周的少數(shù)劑量，而使用本發(fā)明的制劑，患者可在家用電冰箱中保存供數(shù)周或甚至是數(shù)月使用的生長(zhǎng)激素，并且沒有或僅僅有最少量的結(jié)晶發(fā)生。因此通過本發(fā)明可顯著減少給患者開處方的頻率。
因此，本發(fā)明的藥物制劑于冷藏溫度至室溫下存儲(chǔ)是穩(wěn)定的，特別是基本不含結(jié)晶。特別地，該制劑在冷藏溫度至室溫下存儲(chǔ)時(shí)至少4周或至少1個(gè)月、優(yōu)選至少7周、更優(yōu)選至少13周是穩(wěn)定的。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，該制劑在2℃至8℃之間存儲(chǔ)時(shí)至少數(shù)月、例如3個(gè)月、優(yōu)選至少12個(gè)月、更優(yōu)選至少18個(gè)月是穩(wěn)定的。在其另一優(yōu)選實(shí)施方案中，該制劑在15℃至25℃之間至少7周、更優(yōu)選至少13周是穩(wěn)定的，特別是基本不含結(jié)晶的。
在本文中，應(yīng)當(dāng)提到的是，hGH制劑在存儲(chǔ)前可含有約4％的“相關(guān)蛋白”，該“相關(guān)蛋白”為脫酰胺和氧化降解過程產(chǎn)生的蛋白質(zhì)物質(zhì)。該“相關(guān)蛋白”在歐洲藥典中有定義并通過反相HPLC測(cè)定。發(fā)明人提出以最多20％“相關(guān)蛋白”作為制劑儲(chǔ)存期限結(jié)束時(shí)的目標(biāo)。
hGH的降解速率不呈嚴(yán)格的線性，降解速率隨溫度增加而增加。在2℃-8℃時(shí)，制劑中的“相關(guān)蛋白”每個(gè)月通常增加約0.8％。在25℃時(shí)每個(gè)月增加約13％，40℃時(shí)每個(gè)月增加約70％。在25℃存儲(chǔ)1個(gè)月大致相當(dāng)于在2℃-8℃存儲(chǔ)17個(gè)月。在15℃存儲(chǔ)1個(gè)月大致相當(dāng)于在2℃-8℃存儲(chǔ)5個(gè)月。因此連續(xù)在約25℃至40℃的溫度范圍內(nèi)存儲(chǔ)是不切實(shí)際的。
雖然本發(fā)明的制劑即使在溫度達(dá)40℃、特別是達(dá)25℃、更特別是達(dá)15℃時(shí)仍可較好的對(duì)抗結(jié)晶，但是在這些溫度下“相關(guān)蛋白”的迅速形成通常構(gòu)成了對(duì)制劑可能儲(chǔ)存期限的直接限制。
“相關(guān)蛋白”在不同溫度下隨時(shí)間推移的形成速率易于由普通技術(shù)人員來測(cè)定，并且根據(jù)該信息，可無需過度費(fèi)力地計(jì)算出最優(yōu)和最大存儲(chǔ)時(shí)間/溫度曲線。在實(shí)踐中，本發(fā)明的制劑可容易地經(jīng)受由于每天開關(guān)冰箱門或出于施用目的每天由冰箱中取出1小時(shí)左右而造成的每天溫度上升至略高于約8℃的情況而無顯著的儲(chǔ)存期損失。有利地，如果在冰箱外于室溫下放置大約一天，本發(fā)明的制劑不會(huì)受到降解或結(jié)晶方面的有害影響。
因此，本發(fā)明的藥物制劑可在冷藏溫度(例如在2℃至8℃范圍內(nèi))下始終保持穩(wěn)定狀態(tài)。另外，當(dāng)至少總存儲(chǔ)時(shí)間中的部分時(shí)間處于高于冷藏溫度時(shí)，可能是在冰箱外達(dá)約1周、可能在冰箱外長(zhǎng)達(dá)約1個(gè)月或甚至是更長(zhǎng)時(shí)間時(shí)，藥物組合物也表現(xiàn)出足夠的穩(wěn)定性。
因此，制劑存儲(chǔ)時(shí)間中的至少一部分時(shí)間可存儲(chǔ)在至少8℃的貯存溫度下，并可任選地儲(chǔ)存在選自8℃至40℃、8℃至25℃或8℃至15℃的范圍內(nèi)的溫度下。
在本發(fā)明的藥物制劑的優(yōu)選實(shí)施方案中，制劑中hGH的濃度為約6mg/ml至約14mg/ml。在其特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，制劑中hGH的濃度為約6.67mg/ml。
在本發(fā)明的研發(fā)中，已經(jīng)出人意料地確定，1，2-丙二醇能提供給含高濃度hGH的本發(fā)明的制劑足夠的穩(wěn)定性。本發(fā)明的藥物制劑優(yōu)選含有濃度為約0.5mg/ml至約20mg/ml、更優(yōu)選約5mg/ml至約15mg/ml、最優(yōu)選約6mg/ml至約13mg/ml的1，2-丙二醇。優(yōu)選的實(shí)施方案涉及含有約12.4mg/ml的1，2-丙二醇的本發(fā)明的藥物制劑。
本發(fā)明的藥物制劑中存在的含水緩沖液可以是任何可藥用的緩沖液。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，含水緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液和甲酸鹽緩沖液，優(yōu)選為磷酸鹽緩沖液，更優(yōu)選為磷酸鈉緩沖液。通常，含水緩沖液的濃度為約5mM至約100mM。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，含水緩沖液的濃度為約10mM。在其特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，含水緩沖液是濃度為約10mM的磷酸鹽緩沖液(數(shù)字10mM指磷酸根離子的濃度)。最優(yōu)選的含水緩沖液是濃度為約10mM的磷酸鈉緩沖液。同樣優(yōu)選的是10mM磷酸鹽緩沖液，特別是10mM磷酸鈉緩沖液。
本發(fā)明的藥物制劑中存在的非離子型表面活性劑可以是任何可藥用的非離子型表面活性劑。優(yōu)選地，非離子型表面活性劑選自泊洛沙姆(例如泊洛沙姆184或188)和聚山梨醇酯(如例如吐溫20或80)以及其他乙烯/聚丙烯嵌段聚合物。優(yōu)選地，非離子型表面活性劑為泊洛沙姆，特別是泊洛沙姆188。所用的非離子型表面活性劑的量可以是約0.001％(w/v)至約10％(w/v)，更優(yōu)選為約0.005％(w/v)至約5％(w/v)，甚至更優(yōu)選為約0.01％(w/v)至約1％(w/v)。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，非離子型表面活性劑存在的濃度為約0.05mg/ml至約4mg/ml，優(yōu)選為約2mg/ml。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及其中非離子型表面活性劑是濃度為約0.05mg/ml至約4mg/ml、優(yōu)選為約2mg/ml的泊洛沙姆188的藥物制劑。
本發(fā)明的藥物制劑中存在的防腐劑可以是任何可藥用的防腐劑。優(yōu)選地，防腐劑選自芐醇、間甲酚、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、苯酚、苯扎氯銨、芐索氯銨、三氯叔丁醇、2-苯氧基乙醇、硝酸苯汞和硫柳汞。防腐劑的濃度對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說根據(jù)健康管理局有關(guān)多劑量制劑安全性的要求是易于獲得的。相應(yīng)地，防腐劑的濃度例如可以是約1mg/ml至約30mg/ml，其取決于實(shí)際所用的防腐劑。更優(yōu)選地，防腐劑為芐醇。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物制劑含有芐醇作為防腐劑，其濃度為約7mg/ml至約12mg/ml，最優(yōu)選為約9mg/ml。
如果本發(fā)明的藥物制劑中存在有用于將制劑的張力調(diào)節(jié)至約100mosm/kg至約500mosm/kg的預(yù)期值的其它張力調(diào)節(jié)劑，則該張力調(diào)節(jié)劑可以是任意的可藥用張力調(diào)節(jié)劑。優(yōu)選地，該張力調(diào)節(jié)劑選自糖、糖醇、其它多元醇、中性鹽和氨基酸。例如，糖可以是單糖或二糖，象例如乳糖或蔗糖。例如，中性鹽可以是當(dāng)溶于水中時(shí)呈約中性pH的無機(jī)鹽、有機(jī)鹽或混合的鹽，象例如氯化鈉或乙酸銨。例如，氨基酸可以是甘氨酸、精氨酸或組胺酸。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，張力調(diào)節(jié)劑為糖醇，優(yōu)選為甘露糖醇。優(yōu)選張力調(diào)節(jié)劑存在的濃度為最高70mg/ml，更優(yōu)選最高50mg/ml，甚至更優(yōu)選最高30mg/ml。在其特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，附加的張力調(diào)節(jié)劑是濃度為約30mg/ml的甘露糖醇。
本發(fā)明的藥物制劑優(yōu)選具有約100mosm/kg至約500mosm/kg的張力，即該制劑的張力可從低滲直到高滲。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物制劑的張力為略微低滲至略微高滲。優(yōu)選的和根據(jù)公知常識(shí)(參見例如Pharmaceutical Dosage Forms，Parenteral Medications，第2卷；編者Kenneth E.Avis；Herbert A.Lieberman；Leon Lachman；MarcelDekker，Inc.紐約和巴塞爾，出版04/01/1993，第58-60頁(yè))，這相當(dāng)于約250mosm/kg至約350mosm/kg的張力。在其特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物制劑是等滲的。等滲優(yōu)選相當(dāng)于約270mosm/kg至約328mosm/kg的張力。更優(yōu)選等滲相當(dāng)于約286mosm/kg的張力。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物制劑的pH值為約6.2。本領(lǐng)域技術(shù)人員可將pH為約6.2理解為pH為6.15至6.25。優(yōu)選pH為6.2。
特別優(yōu)選的本發(fā)明的藥物制劑基本由以下物質(zhì)組成6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、6mg/ml至15mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、
2mg/ml泊洛沙姆188，必要時(shí)加入足以使制劑為基本等滲的濃度的甘露糖醇，其pH為6.2。
另一方面還提供了基本由下述物質(zhì)組成的藥物組合物6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、6mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、22.5mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
本發(fā)明另一方面還涉及基本由下述物質(zhì)組成的藥物組合物6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、9mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、8.1mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
另一方面本發(fā)明還涉及基本由下述物質(zhì)組成的藥物組合物6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、12.4mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
通過本發(fā)明使得在制劑中最少或避免的結(jié)晶似乎是生長(zhǎng)激素的結(jié)晶。優(yōu)選液體制劑中的任何結(jié)晶直接用肉眼觀察，更優(yōu)選在5倍放大率的光學(xué)顯微鏡下觀察，甚至更優(yōu)選在10倍放大率的光學(xué)顯微鏡下觀察。在用光學(xué)顯微鏡觀察之前，可將制劑過濾，測(cè)定過濾器上是否有結(jié)晶。當(dāng)用光學(xué)顯微鏡觀察時(shí)，過濾器的孔徑可以是約5μm。
特別優(yōu)選的結(jié)晶試驗(yàn)是將制劑在沒有剩余空間的密封容器中、于15℃或25℃下避光存儲(chǔ)一段時(shí)間，接著肉眼觀察是否有結(jié)晶。
此外，本發(fā)明的含水生長(zhǎng)激素制劑優(yōu)選存儲(chǔ)穩(wěn)定，即生長(zhǎng)激素在存儲(chǔ)期間沒有聚集或聚集最少。還優(yōu)選生長(zhǎng)激素沒有如此處所述的化學(xué)降解(如脫酰胺等)或降解最少。適合用于測(cè)定含水溶液中生長(zhǎng)激素穩(wěn)定性的試驗(yàn)在本領(lǐng)域是眾所周知的，例如如在WO 94/03198中所描述的，此處將其引入作為參考。
在本發(fā)明的優(yōu)選制劑中，生長(zhǎng)激素出現(xiàn)的聚集少于10％，優(yōu)選少于1％，更優(yōu)選少于0.1％，甚至更優(yōu)選少于0.01％。
在本發(fā)明的藥物制劑中，人生長(zhǎng)激素優(yōu)選為重組生產(chǎn)的hGH。相應(yīng)地，特別優(yōu)選的人生長(zhǎng)激素通過重組方式生產(chǎn)，例如按照EP-A-0 217 822中的教導(dǎo)生產(chǎn)，此處將其引入作為參考?？蓡为?dú)或相互組合以及與天然激素組合用于本發(fā)明的人生長(zhǎng)激素的變體包括稱為促生長(zhǎng)激素的191個(gè)氨基酸變體和稱為人蛋氨生長(zhǎng)素的192個(gè)氨基酸N-末端蛋氨酸(met)變體。還有在妊娠期的胎盤中天然發(fā)現(xiàn)的稱為hGH-V的變體，其基因序列是已知的，并且已經(jīng)制備了它的重組蛋白。
本發(fā)明的多劑量藥物制劑優(yōu)選含至少兩個(gè)、更優(yōu)選多個(gè)劑量的生長(zhǎng)激素。
本發(fā)明的液體制劑中的hGH的量取決于制劑的體積和該體積意欲提供的hGH的劑量數(shù)。優(yōu)選的劑量體積為小于0.5ml，如例如0.4ml，但原則上可采用每單次給藥的體積為0.01ml至1.0ml。其它優(yōu)選的劑量體積可落在0.1ml至0.6ml、優(yōu)選0.1ml至0.4ml的范圍內(nèi)。
在優(yōu)選的每日給藥的單位劑量中，所給予的hGH的量為1.3mg，盡管精確劑量可根據(jù)特定的個(gè)體而改變?？刹捎?.033mg至3.33mg hGH范圍內(nèi)的劑量，優(yōu)選0.33mg至2.0mg hGH范圍內(nèi)的劑量。當(dāng)給藥頻率降低時(shí)，增加劑量是恰當(dāng)?shù)摹?br> 體積和/或劑量可根據(jù)主管臨床醫(yī)生的具體建議因不同個(gè)體而變化。
藥物產(chǎn)品優(yōu)選是與注射裝置一起使用的容器形式，例如用于筆式注射器的藥液筒。該藥物產(chǎn)品可包含在注射裝置中，優(yōu)選包含在筆式注射器中。
因此，本發(fā)明還涉及含注射裝置和含如前所述的液體生長(zhǎng)激素制劑的單獨(dú)容器的藥盒。當(dāng)給藥裝置僅僅是皮下注射器時(shí)，則該藥盒可含有注射器、針頭和含hGH制劑、與注射器一起使用的小瓶或安瓿。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，注射裝置不是簡(jiǎn)單的皮下注射器，因此可對(duì)單獨(dú)的容器進(jìn)行調(diào)整以與注射裝置相連接，以便在使用時(shí)容器中的液體制劑與注射裝置的出口液體相連。
給藥裝置的實(shí)例包括但不局限于皮下注射器和筆式注射裝置。特別優(yōu)選的注射裝置為其中容器為藥液筒的筆式注射器，優(yōu)選為一次性的藥液筒。相應(yīng)地，本發(fā)明還提供了含任意如前所述的液體制劑、用于筆式注射裝置的藥液筒，該藥液筒含有多個(gè)劑量的生長(zhǎng)激素。
所提及文章的全部?jī)?nèi)容此處引入作為參考。
通過下述實(shí)施例詳細(xì)解釋了本發(fā)明，但本發(fā)明不局限于此。特別地，這些實(shí)施例涉及本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。
實(shí)施例此處所提及的物質(zhì)如試劑對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是熟知的，可商業(yè)購(gòu)得，并且可根據(jù)生產(chǎn)商的使用說明書來使用。
實(shí)施例1-重組hGH原藥的制備和純化在用hGH基因轉(zhuǎn)化以在培養(yǎng)條件下表達(dá)hGH蛋白質(zhì)的CHO細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)物中生產(chǎn)重組hGH。如何制備細(xì)胞并使之生長(zhǎng)的細(xì)節(jié)在EP-A-0217 822(Scios Nova)中有描述，此處引入作為參考。對(duì)工業(yè)或商業(yè)規(guī)模的培養(yǎng)物生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件進(jìn)行修改是在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)的。
一旦在培養(yǎng)物中由細(xì)胞生產(chǎn)出hGH，則需要將其提取并純化為適于藥物應(yīng)用的形式。這可根據(jù)AU 629177(University of New South Wales &Garvan Institute of Medical Research)中描述的方法進(jìn)行，此處引入作為參考。所得的hGH制劑為原藥溶液形式，可用于制備下述的制劑。原藥溶液中hGH的濃度(藥物物質(zhì))通常為約8mg/ml至約15mg/ml，例如約10mg/ml。該藥物物質(zhì)可便利地存在于10mM的磷酸鈉緩沖液中。
實(shí)施例2-人生長(zhǎng)激素制劑的制備如下所概括的，通過將三倍濃賦形劑溶液稀釋至hGH原藥溶液中制備藥物制劑，必要時(shí)調(diào)節(jié)pH(例如用HCl或NaOH調(diào)節(jié))，之后用水調(diào)節(jié)最終重量。
在10mM磷酸鹽中的hGH原藥溶液可在濃縮至約150mg hGH/ml后使用，或者直接以例如10mg hGH/ml的濃度使用。為了方便，可由在10mM磷酸鈉緩沖液中的含10mg/ml hGH的hGH原藥溶液開始進(jìn)行下述制備。如果由于不同的純化步驟而得到具有不同含量的hGH和/或含有不同緩沖液的hGH原藥溶液，則應(yīng)相應(yīng)地調(diào)節(jié)下述方案?？梢岳斫獾氖?，這種改變是在熟練技術(shù)人員的常規(guī)工作范圍內(nèi)的。
分別制備100mM的Na2HPO4×7H2O和NaH2PO4×2H2O的溶液，相互混合以使得最終pH為6.2。
將6.67ml的該100mM磷酸鹽溶液置于燒杯中，用于制備66.67g三倍濃賦形劑溶液。加入下述量的賦形劑
表1三倍濃賦形劑溶液的組成
以相似的方法制備其它賦形劑溶液，該賦形劑溶液可制備得到下述的最終制劑。
用足夠量的hGH原藥制備最終藥物制劑，得到hGH的最終濃度為6.67mg/ml。具體地，該制備包括將32.66g藥物物質(zhì)(hGH濃度＝10mghGH/ml)放入燒杯中。攪拌下加入16.67g三倍濃賦形劑溶液，必要時(shí)用HCl或NaOH調(diào)節(jié)pH為6.2，并將溶液用水加至50g。
將溶液用0.22微米過濾器過濾，填充入已裝有活塞的藥筒中。在適當(dāng)位置折疊密封。
下表給出了含1，2-丙二醇作為穩(wěn)定劑的最終藥物制劑表2最終藥物制劑的組成
③包括來自hGH原藥溶液的磷酸鹽。
③包括來自hGH原藥溶液的磷酸鹽。
3.制劑的存儲(chǔ)和對(duì)結(jié)晶的評(píng)價(jià)將制劑1至8的各藥液筒分別于2-8℃、15℃和25℃下存儲(chǔ)。頻繁用肉眼觀察藥液筒是否有結(jié)晶。
于2-8℃存儲(chǔ)的制劑在測(cè)試期間沒有出現(xiàn)結(jié)晶，對(duì)于制劑1和3測(cè)試期例如是3個(gè)月，對(duì)于制劑4、5和6測(cè)試期例如是12個(gè)月，對(duì)于制劑2測(cè)試期例如是18個(gè)月。于15℃或25℃存儲(chǔ)的制劑1至4在至少4周內(nèi)沒有出現(xiàn)結(jié)晶。于15℃或25℃存儲(chǔ)的制劑5至8在至少7周內(nèi)沒有出現(xiàn)結(jié)晶。
權(quán)利要求
1.基本由濃度為約5mg/ml至約100mg/ml的人生長(zhǎng)激素、1，2-丙二醇、含水緩沖液、非離子型表面活性劑和防腐劑組成的人生長(zhǎng)激素的多劑量液體藥物組合物，所述藥物組合物的張力為約100mosm/kg至約500mosm/kg，pH為約6.1至約6.3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，還另外含有張力調(diào)節(jié)劑，使得藥物組合物的張力為約100mosm/kg至約500mosm/kg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中人生長(zhǎng)激素的濃度為約6mg/ml至約14mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中人生長(zhǎng)激素的濃度為約6.67mg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中1，2-丙二醇的濃度為約0.5mg/ml至約20mg/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中1，2-丙二醇的濃度為約5mg/ml至約15mg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液和甲酸鹽緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的緩沖液為磷酸鹽緩沖液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中緩沖液的濃度為約5mM至約100mM。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中緩沖液的濃度為約10mM。
11.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的緩沖液為濃度約10mM的磷酸鹽緩沖液。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的非離子型表面活性劑選自泊洛沙姆、Pluronicpolyol和聚山梨醇酯。
13.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的非離子型表面活性劑為泊洛沙姆。
14.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的泊洛沙姆為泊洛沙姆188。
15.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中非離子型表面活性劑存在的濃度為約0.05至約4mg/ml。
16.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中非離子型表面活性劑存在的濃度為約2mg/ml。
17.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中非離子型表面活性劑為濃度為約2mg/ml的泊洛沙姆188。
18.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的防腐劑選自芐醇、間甲酚、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、苯酚、苯扎氯銨、芐索氯銨、三氯叔丁醇、2-苯氧基乙醇、硝酸苯汞和硫柳汞。
19.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的防腐劑為芐醇。
20.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的防腐劑為濃度為約7mg/ml至約12mg/ml的芐醇。
21.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其中的任選的張力調(diào)節(jié)劑選自糖、糖醇、其它多元醇、中性鹽和氨基酸。
22.根據(jù)權(quán)利要求19中所述的藥物組合物，其中張力調(diào)節(jié)劑是甘露糖醇。
23.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，所述的藥物組合物基本是等滲的。
24.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物的pH為約6.2。
25.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其基本由下列物質(zhì)組成6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、約6mg/ml至15mg/ml丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、2mg/ml泊洛沙姆188，必要時(shí)加入足以使制劑為基本等滲的濃度的甘露糖醇，其pH為6.2。
26.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其基本由下列物質(zhì)組成6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、6mg/ml丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、22.5mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
27.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其基本由下列物質(zhì)組成6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、9mg/ml丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、8.1mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
28.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的藥物組合物，其基本由下列物質(zhì)組成6.67mg/ml人生長(zhǎng)激素、12.4mg/ml丙二醇、10mM磷酸鈉緩沖液、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH為6.2。
29.含有注射裝置和含權(quán)利要求1或2中所述的人生長(zhǎng)激素的多劑量液體組合物的單獨(dú)容器的藥盒。
全文摘要
本發(fā)明涉及可穩(wěn)定存儲(chǔ)、在存儲(chǔ)期間結(jié)晶減少或沒有結(jié)晶并且適于對(duì)人或動(dòng)物體給藥的人生長(zhǎng)激素(hGH，促生長(zhǎng)激素)的液體制劑。更具體地，本發(fā)明涉及穩(wěn)定的、并且在高于冷藏溫度的溫度下存儲(chǔ)至少一段時(shí)間時(shí)結(jié)晶最少或沒有結(jié)晶的人生長(zhǎng)激素的液體制劑。
文檔編號(hào)A61K47/12GK1665540SQ03816119
公開日2005年9月7日 申請(qǐng)日期2003年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月9日
發(fā)明者M·貝茨, J·史蒂文斯 申請(qǐng)人:桑多斯股份公司