專利名稱：貫眾有效部位及單體在抗癌和抗關(guān)節(jié)炎藥劑中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥有效部位的制藥新用途，具體講是貫眾有效部位及單體在制備抗癌和抗關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用，屬于藥物領(lǐng)域。
貫眾是一種較常用中草藥，具有清熱解毒、驅(qū)蟲、涼血止血等功效，臨床用于預(yù)防感冒，治療膽道蛔蟲病、婦產(chǎn)科出血、帶狀皰疹等。到目前為止尚未見有關(guān)貫眾有效部位用于抗關(guān)節(jié)炎的報道，也未見用二氧化碳超臨界法提取貫眾有效部位并用于抗癌藥物制備的相關(guān)報道。
本發(fā)明目的是提供中藥貫眾的藥物新用途，即貫眾有效部位在制備抗關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用；同時提供采用二氧化碳超臨界法提取貫眾有效部位并用于抗癌藥物制備。
本發(fā)明所述的貫眾有效部位是按照常規(guī)的溶劑法或二氧化碳超臨界萃取法從中藥貫眾中提取的，優(yōu)選是從綿馬貫眾中提??；本發(fā)明所述的單體指綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB和東北貫眾素ABBA，是從貫眾有效部位中經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析分離得到的。
貫眾有效部位的提取方法如下溶劑法取綿馬貫眾藥材，粉碎后用丙酮或乙醚回流提取，提取液濃縮至原體積的一半，室溫放置1～2周，析出黃褐色沉淀，濾集沉淀，用丙酮或乙醚充分溶解后攪拌均勻，抽濾，如此反復(fù)處理至濾液為淡黃色為止，沉淀干燥得淺黃色粉末，即為貫眾有效部位。
超臨界法取綿馬貫眾藥材，粉碎后用二氧化碳超臨界提取，提取溫度35～65℃，提取壓力20～30MPa，所得提取物即為貫眾有效部位。
本發(fā)明所述的貫眾有效部位也可以經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析制備成綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB和東北貫眾素ABBA純品。
本發(fā)明所述的貫眾有效部位或綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB純品制成藥劑后，均具有抗癌作用；本發(fā)明所述的貫眾有效部位或東北貫眾素ABBA均具有抗關(guān)節(jié)炎作用。
按照常規(guī)制劑工藝，可以將本發(fā)明所述的貫眾有效部位、綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB和東北貫眾素ABBA制成任何一種適用于臨床使用的藥物制劑，例如膠囊劑、片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
將貫眾有效部位制成片劑的方法如下取綿馬貫眾藥材，粉碎后用乙醚回流提取，提取液濃縮至原體積的一半，室溫放置1～2周，析出黃褐色沉淀，濾集沉淀，用乙醚充分溶解后攪拌均勻，抽濾，如此反復(fù)處理至濾液為淡黃色為止，沉淀干燥得淺黃色粉末，即為貫眾有效部位。取貫眾有效部位1份，加入藥用淀粉5份，混勻，制粒，壓片，制得片劑。
經(jīng)實驗研究，證明本發(fā)明所述的貫眾有效部位及綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB純品均具有抗癌作用；本發(fā)明所述的貫眾有效部位及東北貫眾素ABBA純品均具有抗關(guān)節(jié)炎作用。
實驗例1本發(fā)明貫眾有效部位對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的影響1、實驗材料樣品貫眾有效部位及東北貫眾素ABBA，由北京揚新科技有限公司提供。雷公藤多苷上海醫(yī)科大學(xué)紅旗制藥廠，批號20000501?？ń槊?BCG)上海生物制品廠。動物清潔級SD大鼠，♂，體重16～200g，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。2、實驗方法大鼠隨機分成正常組、模型組、給藥組、陽性藥對照組，用卡介苗于大鼠右足跖皮內(nèi)注射致炎，致炎后第16天開始灌胃給藥，每天一次，連續(xù)給藥7天，在致炎前和致炎后第16天、第20天、第24天、第28天用足容積測量儀測定大鼠右測足爪容積，求出腫脹度(Δml＝致炎后容積-致炎前容積)，以觀察AA大鼠的繼發(fā)炎癥變化情況。3、實驗結(jié)果表1貫眾有效部位及東北貫眾素ABBA單體對AA大鼠的足爪腫脹的影響組別 劑量 動物數(shù) 腫脹值+(cm)mg/kg (只)d16d20d24d28模型組 100.487±0.234Δ0.800±0.239Δ0.838±0.341Δ0.668±0.247Δ正常組 100.118±0.0320.115±0.0770.199±0.0870.225±0.089有效部位 220 100.536±0.1770.587±0.2480.429±0.1720.324±0.172**單體 100 100.531±0.1620.577±0.2470.348±0.196*0.311±0.156**雷公藤多苷 30100.607±0.2280.434±0.203*0.323±0.137**0.298±0.124*ΔP＜0.01(與正常組比較)；**P＜0.01，*P＜0.05(與模型組比較)4、結(jié)論本發(fā)明所述的貫眾有效部位及東北貫眾素ABBA對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的繼發(fā)炎癥有抑制作用。實驗例2本發(fā)明所述的貫眾有效部位及綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB純品的體外抗腫瘤作用1、實驗材料藥物貫眾有效部位及綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB純品細胞株HelaS3(人宮頸癌細胞)，A549(人肺癌細胞)，Hep-G2(人肝癌細胞)培養(yǎng)液RPMI1640+15％NBS(Hep-G2為進口FBS)+雙抗2、實驗方法MTT法。3、實驗結(jié)果表1貫眾有效部位及綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB對三株人體腫瘤細胞體外增殖的抑制作用HelaS3A549 Hep-G2樣品 IC50100μg/ml時IC50100μg/ml時IC50100μg/ml時μg/ml 抑制率％ μg/ml 抑制率％ μ/ml抑制率％有效部位 77.76 78.49 ＞100 25.96＞100 9.77綿馬酸ABA74.03 88.32 ＞100 28.78＞100 13.26黃綿馬酸ABB 49.13 94.52 79.79 70.96＞100 0實驗例3本發(fā)明所述的貫眾有效部位的體內(nèi)抗腫瘤作用1、實驗材料藥物貫眾有效部位溶劑0.5％CMC-Na溶液陽性對照藥注射用環(huán)磷酰胺瘤源小鼠Lewis肺癌由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理室傳代維持動物C57BL/6小鼠，由上海中科院實驗動物中心提供2、實驗方法無菌條件下取生長旺盛的瘤源，勻漿法制成1×107/ml細胞懸液，于小鼠腋皮下接種0.2ml/只，次日開始腹腔注射給藥，每天一次，連續(xù)7天，3周后處死，取瘤稱重，計算抑瘤率抑瘤率％＝[(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重]×100％3、實驗結(jié)果表1 貫眾有效部位對小鼠Lewis肺癌(皮下接種)療效實驗結(jié)果組別劑量 動物動物體重 瘤重抑瘤率mg/kg/d 只 g(始/終)g(X±SD) ％陰性對照 相應(yīng)溶劑8 20.2/26.32.74±0.32陽性對照 30 8 20.4/24.00.28±0.17* 89.96樣品 200 8 20.0/23.11.26±0.23* 54.01100 8 20.3/24.61.40±0.18* 48.9150 8 20.1/24.51.61±0.12* 41.24*p＜0.01(與陰性對照組比)4、結(jié)論本發(fā)明所述貫眾有效部位及綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB純品均具有抗腫瘤作用。
權(quán)利要求
1.貫眾有效部位及單體在抗癌和抗關(guān)節(jié)炎藥劑中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述的貫眾為綿馬貫眾。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述的貫眾有效部位主要含綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB和東北貫眾素ABBA，貫眾有效部位是按照下述方法制備的方法(1)取綿馬貫眾藥材，粉碎后用甲醇、丙酮或乙醚回流提取，提取液濃縮至原體積的一半，室溫放置1～2周，析出黃褐色沉淀，濾集沉淀，用甲醇、丙酮或乙醚充分溶解后攪拌均勻，抽濾，如此反復(fù)處理至濾液為淡黃色為止，沉淀干燥得淺黃色粉末，即為貫眾有效部位。方法(2)取綿馬貫眾藥材，粉碎后用二氧化碳超臨界提取，提取溫度35～65℃，提取壓力20～30MPa，所得提取物即為貫眾有效部位。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述的單體為綿馬酸ABA、黃綿馬酸ABB和東北貫眾素ABBA，它們是從上述貫眾有效部位中經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析分離得到的。
5.綿馬酸ABA和黃綿馬酸ABB在抗癌藥劑中的應(yīng)用。
6.東北貫眾素ABBA在抗關(guān)節(jié)炎藥劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了貫眾有效部位及單體的新制藥用途，具體說是貫眾有效部位及單體在制備抗癌和抗關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61P19/02GK1475271SQ0315004
公開日2004年2月18日 申請日期2003年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月31日
發(fā)明者胡文波 申請人:北京揚新科技有限公司