專利名稱：中草藥組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有植物性雌激素活性的組合物，其是由數(shù)種中草藥原料依特定重量配比制成。該組合物可減緩哺乳動(dòng)物更年期綜合征。
背景技術(shù)：
女性進(jìn)入更年期后，超過(guò)一半以上的停經(jīng)婦女會(huì)因雌激素驟然下降，喪失對(duì)于心血管功能的保護(hù)及維護(hù)，容易發(fā)生中風(fēng)等心血管性疾病。也引發(fā)腦下垂體促性腺激素不定時(shí)上升，造成周邊血管舒張功能不穩(wěn)定，而出現(xiàn)熱潮紅、頭痛、腰酸背痛、頸部不舒服、失眠、盜汗或是情緒不穩(wěn)的癥狀。也會(huì)使陰道表皮組織變薄，陰道體液分泌減少，導(dǎo)致性交疼痛或造成尿失禁、頻尿及陰道萎縮等。雌激素的分泌對(duì)于鈣質(zhì)的吸收會(huì)有很大的負(fù)面效應(yīng)，鈣質(zhì)不易留存體內(nèi)，骨質(zhì)會(huì)加速流失，每年約有2～3％的骨質(zhì)流失，就會(huì)形成骨質(zhì)疏松癥，而且皮下的膠原和粘多糖會(huì)減少，容易出現(xiàn)皮膚皺褶，雌激素也會(huì)影響許多神經(jīng)傳遞系統(tǒng)，缺乏時(shí)便無(wú)法維持神經(jīng)細(xì)胞的正常功能、記憶力受損等現(xiàn)象。
近年來(lái)，臨床上廣泛建議停經(jīng)婦女積極采用激素補(bǔ)充療法，希望憑借外來(lái)的補(bǔ)充，使體內(nèi)激素回復(fù)到停經(jīng)前的濃度，能夠免除更年期綜合征，預(yù)防對(duì)于心血管系統(tǒng)、骨胳和中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生的功能障礙和疾病。上述更年期癥狀經(jīng)臨床證據(jù)顯示許多女性在激素補(bǔ)充療法之后有顯著改善，一旦停藥則癥狀惡化，這現(xiàn)象顯然表示這些不舒服與激素的不足有關(guān)系，也證明激素補(bǔ)充療法對(duì)這些癥狀的改善確實(shí)有效用。
陰道及膀胱的支撐組織依賴女性激素維持其彈性及韌性，女性激素一旦降低則可能引起尿失禁及陰道干燥易發(fā)炎、性交疼痛等問題，激素的治療效果良好。而停經(jīng)后骨質(zhì)流失加快，容易引起骨折，研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充雌激素可以減少50％脊椎骨折及25～30％的髖骨疏松。激素補(bǔ)充療法也可以對(duì)心血管疾病的預(yù)防有良好效果，使用雌激素的女性比未使用者減少約35～50％患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)榇萍に乜山档脱獫{10～14％的低密度脂蛋白(LDL)，并可提升高密度脂蛋白(HDL)約7％，所以可預(yù)防心血管疾病的發(fā)生；雌激素亦可抑制低密度脂蛋白的氧化，進(jìn)而改善內(nèi)皮血管細(xì)胞的功能，這些作用皆對(duì)心血管疾病的發(fā)生有預(yù)防效果。
美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究院近期宣布，中止一項(xiàng)從一九九三年到二零零五年全美最大規(guī)模的激素補(bǔ)充療法的研究，因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期服用雌激素和黃體素，患乳癌率增加26％，中風(fēng)率增加41％，心臟病率增加29％，肺血栓率增加113％。其中乳癌的風(fēng)險(xiǎn)是在使用三年后才有顯著的增加，而心臟病則是在一年后就已發(fā)現(xiàn)，因此使用激素補(bǔ)充療法的風(fēng)險(xiǎn)引起世人的重視。
Albertazzi，P.等人于Maturitas 42173-185(2002)，The nature andutility of the phytoestrogensa review of the evidence指出黃豆及一些蔬菜中含有一種植物性雌激素(Phytoestrogen)，它是一種天然化合物，其構(gòu)造與作用類似女性激素的化合物(17β-雌二醇)，但其效價(jià)僅為此女性激素的千分之一左右。植物雌激素與β雌激素受體的結(jié)合能力遠(yuǎn)大于α雌激素受體，因此多作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血管、骨胳及皮膚，而不會(huì)刺激乳房與子宮。植物性雌激素也因具有雌激素的作用，可以有效改善女性更年期癥狀；它能活化「成骨細(xì)胞」，抑制「破骨細(xì)胞」，可以防止骨質(zhì)的流失；它能降低血液中低密度脂蛋白(LDL)的含量，增加高密度脂蛋白(HDL)的含量，對(duì)收縮與舒張血壓也有微降的效果，因而降低了心血管疾病的發(fā)生率；它亦具有抗癌、抗氧化、抗增生、抗血管形成的特質(zhì)，因此能夠預(yù)防子宮內(nèi)膜的增厚和乳腺的增生，而具有降低乳癌發(fā)生的效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種具有植物性雌激素活性的組合物，其包含下列重量配比的原料黑大豆0.5～30、黑木耳1.0～10及大棗10～40。該組合物中優(yōu)選的原料重量配比為黑大豆10～30、黑木耳5～10及大棗20～40。上述更優(yōu)選的組合物，其中黑大豆∶黑木耳∶大棗的重量比為3∶1∶4。
本發(fā)明的組合物，可以一般中草藥水提方式提取活性成份。提取物可制備成液劑或其它合宜劑型(如呈冷凍干燥干粉形式)便于儲(chǔ)存或調(diào)配制劑。
本發(fā)明的組合物可以有效改善女性更年期癥狀，詳言之，本發(fā)明的組合物可預(yù)防或改善雌性哺乳動(dòng)物更年期癥狀，能活化「成骨細(xì)胞」，抑制「破骨細(xì)胞」，可以防止骨質(zhì)的流失；降低血液中低密度脂蛋白(LDL)的含量，增加高密度脂蛋白(HDL)的含量，對(duì)收縮與舒張血壓也有微降的效果，因而降低了心血管疾病的發(fā)生率；本發(fā)明的組合物亦具有抗癌、抗氧化、抗增生、抗血管形成的特質(zhì)，因此能夠預(yù)防子宮內(nèi)膜的增厚和乳腺的增生，而具有抗癌的效果。
本發(fā)明的組合物適用對(duì)象為哺乳動(dòng)物，優(yōu)選的適用對(duì)象為人。
本發(fā)明的組合物適用濃度為100～1000μg/ml，較佳濃度為100～250μg/ml，視服用者的體質(zhì)和進(jìn)展以及其它因素(如用于預(yù)防或改善)而有所變動(dòng)。
本發(fā)明的組合物亦可依不同給藥途徑而與其它賦形劑或載體一同使用，條件是該等賦形劑或載體不影響組合物的活性。


圖1顯示喂食本發(fā)明的組合物對(duì)未成熟ICR母鼠的子宮濕重的影響。
圖2顯示喂食本發(fā)明的組合物對(duì)未成熟ICR母鼠的子宮濕重/總體重的百分比的影響。
具體實(shí)施例方式
下列實(shí)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并非欲限制本發(fā)明的范圍，任何本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的替代和改變，均仍涵蓋于本發(fā)明的范圍內(nèi)，而不偏離本發(fā)明的精神和目的。
本實(shí)驗(yàn)給未成熟ICR小鼠口服本發(fā)明的組合物來(lái)評(píng)估其植物性雌激素活性。
一.本發(fā)明的組合物的制備實(shí)例1.將配方中所需藥材依序以下列重量配比配比秤好黑大豆562.5克、黑木耳187.5克及大棗750克。將秤好的藥材放入干凈的濾布藥袋中，并束緊。
2.打開提煉機(jī)的鍋蓋，放入藥袋。
3.注入20升干凈純水。
4.蓋上鍋蓋并栓緊所有開關(guān)。
5.激活電源，設(shè)定好溫度與時(shí)間(120℃，2小時(shí))6.提煉完成后，將提煉完成的藥汁送至包裝機(jī)中進(jìn)行包裝或是進(jìn)行冷凍干燥制成干粉。
二.材料與方法1.藥品17-α-炔雌醇(EE)(Sigma)配法秤取45mg EE溶于1ml 95％酒精中，此為原液。加入適量水稀釋，使最終濃度為0.45μg/ml。
本發(fā)明的組合物凍干粉末，每包150ml有1克粉末。成人每天服用3包，換算成小鼠1x劑量約為每天每只小鼠需口服8mg；10x劑量則為每天需80mg。
2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖及發(fā)明中心購(gòu)得的雌性ICR小鼠，體重20～25公克，飼養(yǎng)于光照、黑暗各12小時(shí)，室溫維持在25±1℃，濕度維持在60±5％，水分與飼料充分供給的獨(dú)立空調(diào)動(dòng)物房?jī)?nèi)。本發(fā)明中對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理及一切實(shí)驗(yàn)過(guò)程，均依據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)章程規(guī)范進(jìn)行。
三.動(dòng)物試驗(yàn)Odum，J.等人于Reg.Toxicol.Pharmacol.25176-188(1997)Therodent uterotrophic assaycritical protocol features，studies with nonylphenols，and comparison with a yeast estrogenicity assay揭示最常用來(lái)分析這些植物性化合物是否具有雌激素的活性，大多使用嚙齒類動(dòng)物的子宮來(lái)分析。一般選擇未成熟或卵巢切除的大鼠或小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并以口服或皮下給予方式來(lái)測(cè)試化合物是否具有雌激素活性。
以剛斷奶且未成熟的ICR母鼠(約21～24天)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，每組9只小鼠，進(jìn)行連續(xù)3天的口服喂食試驗(yàn)。陽(yáng)性對(duì)照組為每日口服EE10μg/kg，即0.45μg/ml喂食0.2ml。本發(fā)明的組合物劑量為每天喂食兩次，每次0.2ml(喂食量為10ml/kg體重(1))，濃度分別為1x20mg/ml及10x200mg/ml。在喂食后第4天早上將小鼠處死，取其子宮(去除脂肪組織)秤重，并以子宮濕重量/總體重的百分比來(lái)表示雌激素活性。
四.結(jié)果將未成熟的ICR母鼠，進(jìn)行連續(xù)3天的口服喂食試驗(yàn)后，結(jié)果顯示相較于對(duì)照組，每日口服EE10μg/kg能明顯增加子宮濕重(圖1，P＜0.1)或子宮濕重與體重的百分比(圖2，P＜0.1)。喂食10x本發(fā)明的組合物雖能增加子宮濕重(圖1)，但與對(duì)照組間無(wú)顯著性差異；另以子宮濕重與體重的百分比參數(shù)來(lái)表示本發(fā)明的組合物的植物性雌激素活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)喂食10x本發(fā)明的組合物能明顯增加子宮濕重與體重的百分比(圖2，P＜0.1)，顯示高濃度本發(fā)明的組合物具有植物性雌激素活性，然而喂食1x本發(fā)明的組合物其子宮濕重或子宮濕重與體重的百分比與對(duì)照組無(wú)顯著差異。
五.討論近十年來(lái)發(fā)現(xiàn)了許多從植物而來(lái)的化合物具有結(jié)合到雌激素受體的能力，也開發(fā)出許多體外試驗(yàn)系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)或定量天然或合成化合物的雌激素活性(Diel，P.，Schmidt，S.Vollmer，G.In vivo test systemsfor the quantitative and qualitative analysis of the biological activity ofphytoestrogens.J.Chromatography B 777191-202，2002.)。但是值得注意的是，即使結(jié)合多種不同的體外測(cè)試系統(tǒng)，但還是不能去預(yù)測(cè)一個(gè)物質(zhì)在有機(jī)體內(nèi)的作用。在體內(nèi)，一個(gè)物質(zhì)會(huì)處在許多的代謝途徑及內(nèi)分泌的交互作用之中，因此為了解化合物的藥理作用及其潛在危險(xiǎn)性還是必須使用體內(nèi)測(cè)試系統(tǒng)。其中最常用來(lái)評(píng)估植物性雌激素在體內(nèi)是否具有雌激素的活性及其作用機(jī)制的方法，就是以嚙齒類動(dòng)物的子宮來(lái)分析，并以化合物是否能刺激子宮的生長(zhǎng)為決定因子。此種子宮分析的方法包括了使用未成熟母鼠、垂體切除過(guò)或摘除卵巢的大鼠或小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并以口服或皮下注射方式來(lái)測(cè)試化合物是否具有雌激素活性。典型的子宮分析為以未成熟的母鼠(21～22天)或摘除卵巢的成鼠(6～8周)給予口服或皮下注射測(cè)試的化合物3天。第4天將老鼠處死并取子宮秤重。本發(fā)明研究結(jié)果顯示，高濃度的本發(fā)明的組合物具有植物性雌激素活性。而動(dòng)物種類的選擇并不是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵所在，報(bào)告指出，無(wú)論是大鼠或小鼠，對(duì)于各種不同的化合物皆具有相似的靈敏度。K.S.Kang等人于Toxicol.Lett.118(2000)109指出以未成熟母鼠來(lái)評(píng)估雌激素活性較摘除子宮的母鼠更為敏感。此外嚙齒類動(dòng)物的子宮分析實(shí)驗(yàn)也可用來(lái)測(cè)試化合物是否具有拮抗雌激素的功能，即評(píng)估測(cè)試化合物是否能減少或破壞子宮對(duì)雌激素的反應(yīng)。L.JBlack等人于J.Clin.Invest.93(1994)63及G.L.Evans等人于Endocrinology 137(1996)4139指出以子宮分析實(shí)驗(yàn)來(lái)篩選化合物是否具有雌激素活性時(shí)仍有些限制，例如雷洛昔芬藥物雖然不會(huì)刺激子宮的生長(zhǎng)，但卻在乳腺或骨頭上具有雌激素活性。因此結(jié)合形態(tài)學(xué)、組織學(xué)、生化或分子層次上的分析可加強(qiáng)子宮分析試驗(yàn)的功效。其中最常用來(lái)當(dāng)作組織學(xué)上的評(píng)估為子宮上皮性細(xì)胞的高度。就藥理學(xué)及病理學(xué)上而言，子宮上皮性細(xì)胞的高度是評(píng)估化合物是否具有植物性雌激素活性的重要數(shù)據(jù)。
將未成熟的ICR母鼠，進(jìn)行連續(xù)3天的口服喂食試驗(yàn)后，結(jié)果顯示喂食高濃度的本發(fā)明的組合物能明顯增加子宮濕重與體重的百分比，顯示高濃度本發(fā)明的組合物具有植物性雌激素活性，因此停經(jīng)婦女飲用本發(fā)明的組合物藉以補(bǔ)充激素來(lái)減緩更年期綜合征。
附圖詳細(xì)說(shuō)明以剛斷奶且未成熟的ICR母鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，進(jìn)行連續(xù)3天的口服喂食試驗(yàn)。陽(yáng)性對(duì)照組為每日口服EE10μg/kg。本發(fā)明的組合物劑量為每天喂食1x8mg及10x80mg。在喂食后第4天早上將小鼠處死，并以子宮濕重(A)或子宮濕重/總體重的百分比(B)來(lái)表示雌激素活性。利用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，并以Dunnettt檢驗(yàn)作為事后檢定法；*表示與對(duì)照組比較具顯著差異(P＜0.1)。
以上所述僅為本發(fā)明的部份優(yōu)選實(shí)例的說(shuō)明，故凡應(yīng)用本發(fā)明說(shuō)明書及權(quán)利要求書所為的等效方法的變化，理應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種具有植物性雌激素活性的組合物，其包含下列重量配比的原料黑大豆0.5～30、黑木耳1.0～10及大棗10～40。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其特征在于它是由下列重量配比的原料制成的黑大豆10～30、黑木耳5～10及大棗20～40。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其中黑大豆∶黑木耳∶大棗的重量比為3∶1∶4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其呈冷凍干燥制成干粉形式。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其呈冷凍干燥制成干粉形式。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可減緩哺乳動(dòng)物更年期綜合征。
7.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其可減緩哺乳動(dòng)物更年期綜合征。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可降低因更年期引起尿失禁、陰道干燥易發(fā)炎或性交疼痛等癥狀。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可活化成骨細(xì)胞、抑制「破骨細(xì)胞」及防止停經(jīng)后骨質(zhì)的流失等癥狀。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其中防止停經(jīng)后骨質(zhì)的流失等癥狀包括減少脊椎骨折及髖骨疏松。
11.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可預(yù)防因更年期引起心血管疾病及降低心血管疾病的發(fā)生率。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的組合物，其預(yù)防因更年期引起心血管疾病是通過(guò)抑制低密度脂蛋白的氧化而改善內(nèi)皮血管細(xì)胞的功能。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的組合物，其降低心血管疾病的發(fā)生率是通過(guò)降低血液中低密度脂蛋白的含量、增加高低密度脂蛋白的含量及微降收縮與舒張血壓。
14.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可預(yù)防因更年期引起心血管疾病及降低心血管疾病的發(fā)生率。
15.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其可預(yù)防子宮內(nèi)膜的增厚和乳腺的增生。
16.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其具有降低乳癌發(fā)生的效果。
17.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其中哺乳動(dòng)物為人。
18.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其中植物性雌激素活性是以增加子宮濕重與體重的百分比當(dāng)作參考指針。
19.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其濃度為100～1000μg/ml。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其濃度為100～250μg/ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有植物性雌激素活性的組合物，其包含下列重量配比的原料黑大豆0.5～30、黑木耳1.0～10及大棗10～40。該組合物可減緩哺乳動(dòng)物更年期綜合征。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1565609SQ0314874
公開日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2003年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月25日
發(fā)明者許清祥 申請(qǐng)人:光惠生物科技股份有限公司