專利名稱：肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)系列疫苗和診斷試劑及生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
屬生物技術(shù)領(lǐng)域背景技術(shù)：
由流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)引起的局限性或傳播性深部真菌病，屬流行病，生活在流行區(qū)的人多數(shù)會被感染，臨床表現(xiàn)分原發(fā)性和進(jìn)行性兩種，原發(fā)性是急性、自限性的肺部感染，但少數(shù)發(fā)展為進(jìn)行性急性、播散性深部真菌病，可以侵襲腦、肺、內(nèi)臟和器官，嚴(yán)重者可危及生命。
流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母)是一種雙相型真菌，寄生于人體組織內(nèi)，本菌呈球形，稱為球體，球體成熟時含有園形或不規(guī)則圓形內(nèi)生孢子，(endospore)，數(shù)目可由數(shù)個至數(shù)十個，或充滿球體。1周后球體成熟、破裂、釋放出內(nèi)生孢子，每個內(nèi)生孢子又發(fā)教育成新的球體，球體成熟后又釋放出生孢子，如此循環(huán)往復(fù)地生長繁殖，球體直徑約有10-80μm，少數(shù)可達(dá)100μm；內(nèi)生孢子直徑1～2μm，少數(shù)可達(dá)10μm。菌體排出體外，在培養(yǎng)基上生長發(fā)芽，延長分支成為菌絲體，稱為關(guān)節(jié)菌絲。
SARS流行性肺組織胞漿菌病(球狀酵母病)，是最新發(fā)現(xiàn)的烈性傳染病，本病對人群呼吸系統(tǒng)高度易感，主要臨床表現(xiàn)為發(fā)燒、咳嗽、氣促、呼吸困難、軟弱、白細(xì)胞減少，X光診斷為非典型性肺炎。本病原體屬于真菌屬，是一種雙相真菌，在血瓊脂和沙保羅氏瓊脂培養(yǎng)生長緩慢，約2-3周才長出肉眼可見的白色小菌落，在動物模型病理組織切片中，肺、脾、肝、腦等組織可見大量園形、橢園形、周圍有一光亮帶的厚壁酵母樣孢子粒顆，在液體純培養(yǎng)中可形成大小不等的孢子體，(見附圖)。
3、發(fā)明內(nèi)容采用SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)為原料制造滅活疫苗和減毒疫苗，制造提純精制系列特異性預(yù)防疫苗，包括多糖疫苗(糖蛋白)、核酸疫苗、亞單位疫苗、合成和半合疫苗、胞壁疫苗、多肽疫苗、毒素、類毒素疫苗、基因重組疫苗、抗獨特型抗體疫苗和生產(chǎn)特異性免疫球蛋白，以及用上述原料，制造出其他新生物制品，用SARS特異性預(yù)防疫苗。并同時通過免疫技術(shù)生產(chǎn)酶聯(lián)免疫試劑，PCR診斷試劑，免疫螢光抗體診斷、膠體金診斷試和基因芯片等診斷用品，制造抗體、多克隆抗體和單克隆抗體。
(1)技術(shù)關(guān)鍵①本發(fā)明制造的系列疫苗，主要通過菌株分離、擴增、純化、滅活、脫毒(死菌)制造而成，其滅活方法是使在水浴中或相當(dāng)?shù)募訙丨h(huán)境中用100℃10-40分鐘，或60-95℃，1-6小時滅活，或采用1％-3％甲醛滅活和同時脫毒，達(dá)到滅活目的，并保持疫苗抗原的免疫活性的最佳狀態(tài)。
②本發(fā)明生產(chǎn)SARS系列預(yù)防疫苗，主要通過菌種培養(yǎng)、擴增、發(fā)酵、濃縮然后用物理、化學(xué)方法或生物技術(shù)，分離免疫活性組分，經(jīng)層析、提取、純化和精制。用細(xì)胞破碎器或用其他特殊的處理方法將細(xì)胞解體然后分離，提取、純化、精制加工制造成系列特異性預(yù)防疫苗和系列特異性診斷試劑。
(2)技術(shù)方案①本發(fā)明制造的疫苗，是采用一種前所未有的滅活和甲醛脫毒的方法制造出安全有效SARS的預(yù)防疫苗。
②用細(xì)菌破碎器破碎菌體，除去細(xì)胞碎片，硅膠吸附粗提糖蛋白、核酸、亞單位、細(xì)胞壁、毒素，然后用疏水層析法精提，經(jīng)硫氰酸鹽或其他沉淀劑處理后，獲取目的產(chǎn)品，稀釋和除菌，然后進(jìn)行純化，產(chǎn)品檢定。通過聚丙烯酸胺凝膠電泳、免疫印染、高壓液相等程序，使制品達(dá)到所需要求，進(jìn)入疫苗半成品生產(chǎn)成注射液和噴喉氣霧劑以及滴鼻的粘膜免疫滴劑。成品檢定合格后分裝、包裝、商品化進(jìn)入市場。為實現(xiàn)上述目標(biāo)具體方法如下本發(fā)明的SARS預(yù)防疫苗，根據(jù)抗原活性對動物產(chǎn)生的抗原抗體免疫反應(yīng)和免疫耐受性，通過菌株分離擴增、純化、滅活、脫毒和毒性、效力試驗、安全試驗等程序，SARS預(yù)防疫苗的臨床用量單位按含菌數(shù)計算，供皮下或肌肉注射的疫苗，用于滴鼻和噴喉氣霧劑。并制造球SARS預(yù)防苗的系列劑型，如氣霧劑、滴鼻霧劑(液體)和用于舌下含的片劑、供皮下或肌肉注射針劑，以及凍干粉針劑等。供預(yù)防SARS感染之用。采用減毒活疫苗的劑量是滅活疫苗減量的2～20倍。
(3)技術(shù)效果SARS病，當(dāng)今被認(rèn)為是一種烈性傳染病，本發(fā)明研制成功特異性預(yù)防疫苗，是徹底解決本病的傳播延和易感者預(yù)防的最佳途徑。世界公認(rèn)，疫苗是最有效、最方便、最安全、最經(jīng)濟(jì)的預(yù)防傳染病方法，SARS預(yù)防疫苗的研制成功，將于人類健康作貢獻(xiàn)。
本發(fā)明流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)其制造方法是采用上述滅活方法，經(jīng)反復(fù)多次離心洗滌，加入適量無菌溶劑，用超聲波粉碎和反復(fù)凍溶后，經(jīng)毒性試驗、安全試驗、過敏試驗，用適當(dāng)溶劑以1∶100-10000稀釋，無菌試驗合格，供特異性診斷SARS皮試應(yīng)用(0.1ml/次皮內(nèi))。
對于急性流行病病原學(xué)的正確診斷，是消除流行病的傳染源和對患者的及時治療以及預(yù)防的關(guān)鍵，本發(fā)流行性肺組織胞漿菌素和球狀孢子菌素研制成功，提供了一種特異性診斷用品，并同時用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)為原料生產(chǎn)酶聯(lián)免疫試劑，PCR診斷試劑，免疫螢光試劑膠體金和基基芯片等特異性診斷試劑。
為實現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用技術(shù)方案如下《SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)多糖疫、核酸疫苗制造方法》1.定義、組織及用途本品系用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)培養(yǎng)液，經(jīng)提純獲得多糖抗原，并加入適宜穩(wěn)定劑后凍干制成，供預(yù)防SARS感染之用。
2制造2.1基本要求2.1.1設(shè)施與生產(chǎn)質(zhì)量管理按中國《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求實施。同時還必須具備三級安全實驗和生產(chǎn)工作(P3)條件，并須在二級以上生物安全匱中操作；動物模型須在P3和P3級以上實驗室中進(jìn)行。
2.1.2原料及輔料應(yīng)符合現(xiàn)行《中國藥典》或《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》的要求。未納入上述標(biāo)準(zhǔn)的化學(xué)試劑，應(yīng)不低于化學(xué)純。
2.1.3生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水源水應(yīng)符合國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)；純化水及注射用水應(yīng)符合現(xiàn)行《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。
2.1.4生產(chǎn)用器直接用于生產(chǎn)的金屬或玻璃等器具，必須嚴(yán)格清洗及去熱原質(zhì)處理或滅菌處理。
2.1.5生產(chǎn)及檢定用動物小鼠、豚鼠應(yīng)符合清潔級標(biāo)準(zhǔn)。
2.2菌種2.2.1菌種名稱及來源制造用疫區(qū)分離的SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)應(yīng)經(jīng)國家藥品管理當(dāng)局批準(zhǔn)，并由國家藥品檢定機構(gòu)或國家指定的單位保管和分發(fā)。
2.2.2種子批的建立生產(chǎn)用菌種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)驗明其記錄、歷史、來源和生物學(xué)特性。從原始種子批傳代、擴增后凍干保存為主種子批。從主種子批制備工作種子批。主種子批和工作種子批的各種特性應(yīng)與原始種子批一致。工作種子批用于生產(chǎn)。
2.2.3種子批的檢定菌種接種在含10％羊血普通瓊脂培養(yǎng)基上25℃，2周后生長出細(xì)小白色棉花樣菌落，在GH改良液體培養(yǎng)24-48小時培養(yǎng)，涂片鏡檢應(yīng)為純的園形大小不等的孢子體。
2.2.3.1生化反應(yīng)接種葡萄糖、果糖及蔗糖，于35～37℃培養(yǎng)5-7日，發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。
2.2.3.3血清凝集試驗將在25℃-37℃培養(yǎng)24-48小時培養(yǎng)懸液于0.5％ 甲醛生理氯化鈉溶液或60℃加熱60分鐘殺菌以后，使每1ml含菌1.0×109-2.0×109，與特異血清定量凝集反應(yīng)，應(yīng)置35-37℃過夜，次日再放置室溫2小時觀察結(jié)果，以肉眼可見清晰凝集現(xiàn)象之血清最高稀釋度(+)為凝集效價，必須達(dá)到原血清效價之半。參考血清由國家藥品檢定機構(gòu)分發(fā)或同意。
2.2.4菌種傳代及保存2.2.4.1菌種應(yīng)凍干保存于2～8℃。主種子批自啟開后傳代最多不能超過5代。
2.2.4.2工作種子批生產(chǎn)前應(yīng)檢查菌種的全部特性，合格后方可用于生產(chǎn)。
2.3原液制備2.3.1 生產(chǎn)用種子將工作種子批菌種啟開后，接種在GH改良液體培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基上，放25～37℃培養(yǎng)一般不超過48小時，第2-4代菌種可用適宜的液體培養(yǎng)基，25-37℃。由此制備適宜數(shù)量的生產(chǎn)用工作種子，工作種子批開啟后至接種培養(yǎng)不得超過5代。
2.3.2生產(chǎn)用培養(yǎng)基生產(chǎn)多糖疫苗可選用適宜培養(yǎng)基。生產(chǎn)用的液體培養(yǎng)基不應(yīng)含有能與加入的十六烷基三甲基溴化銨形成沉淀的成分。培養(yǎng)基中不應(yīng)含有對人體有害或其他過敏原物質(zhì)。
2.3.3菌種接種和培養(yǎng)采用密封培養(yǎng)罐液體培養(yǎng)。于培養(yǎng)基中接種生產(chǎn)用工作種子后。在培養(yǎng)過程中和殺菌前取樣進(jìn)行純菌試驗，涂片做美蘭染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)污染雜菌，應(yīng)去棄。
2.3.4收獲和殺菌培養(yǎng)物于對數(shù)生長期后或靜止期前期收獲。一般培養(yǎng)24-48小時為宜。將培養(yǎng)物加入甲醛溶液殺菌，或加熱殺菌，以確保殺菌安全并不損傷菌體多糖為宜。
2.3.5提純和精制2.3.5.1去核酸(保留用于生產(chǎn)核酸)將已殺菌的單一收獲物(或合并收獲物)離心去菌體，收集上清液，于其中加入十六烷基三甲溴化銨混勻，離心收集沉淀物。沉淀物中加入氯化鈣溶液，使最終濃度為1mol/L，使多糖十六烷基三甲基溴化銨解離，加入乙醇至最終濃度為25％(ml/ml)。冷庫靜置3小時或過夜，離心去沉淀，收集澄清的上清液。
2.3.5.2沉淀多糖于上述上清液中加入冷卻乙醇至最終濃度80％(ml/ml)，充分振搖。離心收集沉淀多糖，然后用無水乙醇及丙酮各洗2次以上，將沉淀物(多糖粗制品)保存在-20℃以下待進(jìn)一步提取。
2.3.5.3多糖精制將粗制品溶解于1/10飽和中性醋酸鈉溶液中，使其濃度達(dá)10-20mg/ml，然后按1∶2容量用冷酚(100g結(jié)晶酚溶40ml 1/10飽和醋酸鈉溶液)提取2-3次，離心收集上清液，并用0.1mol/L氯化鈣溶液或適宜溶液透析。必要時可用其他方法去除內(nèi)毒素。再加乙醇至最終濃度為75％-80％(ml/ml)。離心收集沉淀物，用無水乙醇及丙酮各洗2次以上。離心后傾去上清液，用注射用水溶解沉淀的多糖，所得溶液即為提取的多糖原液。原液經(jīng)除菌過濾后，取樣進(jìn)行無菌試驗、血清學(xué)試驗及各項生化測定。提取過程應(yīng)在15℃以下進(jìn)行。提純多糖應(yīng)保存在-20℃或以下。
2.3.5.4再制若提純多糖的蛋白質(zhì)、核酸及內(nèi)毒素含量達(dá)不到要求時，可再制一次。
2.4原液檢定按3.1項進(jìn)行。
2.5半成品檢定可將單批或多批檢定合格的多糖原液合并，然后加入無菌無熱原質(zhì)乳糖和注射用水稀釋，使每人用劑量疫苗含多糖30μg，乳糖2.5-3.0mg。
2.6半成品檢定按3.2項進(jìn)行。
2.7分批按本版規(guī)程通則《生物制品分批規(guī)程》進(jìn)行。
2.8分裝及凍干按本版規(guī)程通則《生物制品分裝規(guī)程》進(jìn)行。采用適宜條件凍干，凍干過程制品溫度不應(yīng)高于30℃，真空或充氮封口。
2.9規(guī)格本品規(guī)格為每安瓿150μg或300μg多糖。每人和劑量含多糖30μg。
2.10包裝按本版規(guī)程通則《生物制品包裝規(guī)格》進(jìn)行。
3檢定3.1原液檢定3.1.1固體總量測定每批提純多糖抗原的蛋白質(zhì)含量應(yīng)小于10mg/g，按Lowry法測定。
3.1.3.核酸含量每批提純多糖的核酸含量應(yīng)小于10mg/g。按分光光度法，核酸在260nm波長處的吸收系數(shù)(E1％cm)為200。
3.1.4O-Z?；繙y定每批提純多糖的O-Z酰基含量應(yīng)不低于2mmol/g，按Herstrin法測定。
3.1.5磷含量每批提純多糖的磷含量應(yīng)不低于80mg/g，用鉬酸銨法測定。
3.1.6分子大小測定每批提純多糖的分子大小應(yīng)用瓊脂糖-4B或CL-4B凝膠層析法測定。KD值應(yīng)不高于0.40。KD值在0.5以前的洗脫液多糖回收率應(yīng)在65％以上。按附錄方法進(jìn)行。
3.1.7特異性試驗每批提純多糖應(yīng)用瓊脂擴散試驗(或國家藥品檢定機構(gòu)認(rèn)可的其他適宜免疫學(xué)方法)進(jìn)行特異性試驗。多糖抗原在球狀酵母菌抗體存在下，應(yīng)產(chǎn)生明顯的沉淀線。
3.1.8細(xì)菌內(nèi)毒素含量測定每批提純多糖可用常規(guī)鱟試驗(半定量凝膠法)檢測內(nèi)毒素含量。一般控制每1μg多糖內(nèi)毒素含量應(yīng)不高于100EU(如超過，可按3.3.7項家兔法確證)。
3.1.9原液應(yīng)保存于-20℃或以下，自收菌之日起有效期為5年。
3.2半成品檢定無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.3成品檢定3.3.1鑒別試驗按3.1.7項方法進(jìn)行。
3.3.2外觀凍干成品應(yīng)為白色疏松體，加入所附PBS后迅速溶解。溶液應(yīng)澄明無異物。
3.3.3化學(xué)檢定按本版規(guī)程附錄《生物制品化學(xué)及其他檢定方法》進(jìn)行。
3.3.3.1水分不高于3.0％。
3.3.3.2多糖含量每劑量多糖含量應(yīng)不低30μg。磷含量應(yīng)不低于2.25μg。
3.3.4分子大小測定分裝的疫苗至少5批抽一批測多糖分子大小，用瓊脂糖-4B或CL-4B凝膠過濾法測定，KD值應(yīng)不高于0.40。KD值小0.5的洗脫多糖加回收率應(yīng)在65％以上。方法見附錄。
3.3.5無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.3.6異常毒性試驗每批疫苗應(yīng)按本版規(guī)程通則《生物制品異常毒性試驗規(guī)程》進(jìn)行，豚鼠注射劑量為500μg多糖(1ml)，小鼠注射劑量為100μg多糖(0.5ml)。
3.3.7熱原質(zhì)試驗按本版規(guī)程通則《生物制品熱原質(zhì)試驗規(guī)程》進(jìn)行，家兔注射劑量為0.025μg/kg體重。
3.4疫苗稀釋液檢定稀釋疫苗用的pH6.8-7.2PBS應(yīng)經(jīng)過下列檢定。
3.4.1無菌試驗每批稀釋液應(yīng)按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.4.2異常毒性試驗按本版規(guī)程通則《生物制品異常毒性試驗規(guī)程》進(jìn)行。
3.4.3熱原質(zhì)試驗按本版規(guī)程通則《生物制品熱原質(zhì)試驗規(guī)程》進(jìn)行。
3.4.3熱原質(zhì)試驗按本版規(guī)程通則《生物制品熱朱質(zhì)試驗規(guī)程》進(jìn)行。
4保存、運輸及有效期于2-8℃避光保存和運輸，自凍干之日起有效期為3年。
5使用說明組成和性狀本品系用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)培養(yǎng)液，經(jīng)提純獲得多糖抗原并加入適宜穩(wěn)定劑后凍干制成的多糖疫苗。成品外觀為白色疏松體，加入所附PBS后可迅速溶解，溶液澄明無異物。
規(guī)格本品規(guī)格為注射用安瓿150μg或300μg多糖。每人用劑量含多糖30μg。氣霧劑和滴鼻劑疫苗含多糖1.5-3mg/瓶。
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本品依據(jù)《中國生物制品規(guī)程》2000年版生產(chǎn)和檢定，質(zhì)量符合要求。
作用和用途本疫苗接種后，可使機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，用于預(yù)防SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)感染。
接種對象SARS病疫區(qū)人群，易感人群，對本病醫(yī)護(hù)人、實驗室研究人員和與患者近距離接的各類人員的預(yù)防。
用法與劑量(1)啟開疫苗瓶后，按瓶簽或盒簽標(biāo)含量，加入所附PBS溶解，搖勻立即使用。
(2)將上臂外側(cè)三角肌附著處消毒后，皮下注射30μg(0.2ml或0.5ml)。
禁忌有下列情況者，不得使用本疫苗。
(1)嚴(yán)重心血管、高血壓、腦部疾患及有過敏史者。
(2)心臟病(3)急性傳染病及發(fā)熱者。
副反應(yīng)及處理本疫苗反應(yīng)輕微，偶有短暫低熱，局部稍有壓痛感，可自行緩解。
注意事項(1)使用前應(yīng)檢查安瓿，如安瓿有裂紋、瓶塞松動或瓶內(nèi)有異物者，不得使用。
(2)每一安瓿制品溶解后，應(yīng)按規(guī)定人份(劑量)一次用完，不得分多次使用。
保存、運輸及使用期限于2-8℃避光保存和運輸。在盒簽(或瓶簽)標(biāo)明的失效期前使用。
生產(chǎn)批準(zhǔn)文號生產(chǎn)單位及地址6附錄球狀孢子菌多糖疫苗莢膜多糖抗原分子大小測定(瓊脂糖4B層析法)附錄流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)多糖疫苗抗原分子大小測定(瓊脂糖4B層析法)1試驗材料1.1試劑1.1.1瓊脂糖4B凝膠1.1.20.2mol/L醋酸胺(pH7.0)1.1.3藍(lán)色葡聚糖2000(2mg/ml)1.1.4鉻酸鉀或維生素B12溶液(1mg/ml)1.2儀器1.2.1層析柱(1.5cm×90cm)1.2.2組分收集器及試管1.2.3凝膠及洗脫液貯瓶1.2.4適宜監(jiān)測裝置及記錄器2試驗步驟2.1裝柱及層析柱的標(biāo)定2.1.1瓊脂糖4B凝膠的漂洗取瓊脂糖4B凝膠約200ml，加0.2mol/L醋酸胺400ml，充分?jǐn)嚢璨⒎胖眉s1小時使其沉淀，傾去混懸有顆粒的上層懸液。如此反復(fù)數(shù)次后，加200ml0.2mol/L醋酸胺溶液，置真空罐內(nèi)抽去凝膠中的空氣。
2.1.2裝柱于1.5cm×90cm層析柱中，將瓊脂糖4B凝膠裝約87cm高，操作壓70-75cm，用0.2mol/L醋酸胺流洗，流速為15-20ml/h，以2-3倍量柱床體積的流洗液流洗，使柱床平衡。
2.1.3柱的標(biāo)定2.1.3.1空流體積V取2mg/ml藍(lán)色葡聚糖2000(用0.2mol/L醋酸胺溶解)1ml，加于已平衡的柱上，用0.2mol/L醋酸胺流洗，用組分收集器收集流洗液，于260nm波長測定各管的A值。以A值為縱坐標(biāo)，ml數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，第一個峰頂洗脫體積，即為Vo。
2.1.3.2柱床體積V1取鉻酸鉀或維生素B12溶液(1mg/ml，用0.2mol/L醋酸胺溶解)1ml，加于已平衡的柱上，用0.2mol/L醋酸胺流洗，用收集器收集流洗液，于37onm波長測定各管A值。以A值為縱坐標(biāo)，ml數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，計算峰頂流洗體積，即為V1。
2.2多糖抗原KD的測定取約1ml樣品(含A群抗原3-5mg，如為固體可用0.2mol/L醋酸胺溶解)，加于已標(biāo)定的瓊脂糖4B凝膠柱上，用0.2mol/L醋酸胺洗脫，以收集器收集，測定每管的磷含量(參看磷含量測定，但以流洗液作為對照)，以每管磷含量(或A值)為縱坐標(biāo)、體積為橫坐標(biāo)作圖。也可用紫外分光光度計206nm下檢測，測磷法為仲裁法。按下述公式(1)以多糖主峰峰頂洗脫體積(V0)計算分配系數(shù)(KD)；公式(2)計算KD0.5的多糖抗原回收率。
3結(jié)果計算按下列公式計算KD值及KD值在0.5以前的多糖回收率。
KD=Ve-VoVi-Vo]]>
《SARS亞單位、抗獨特型疫苗制造方法》1定義、組成與用途本品系由SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)經(jīng)擴增、分離、提取、純化，加佐劑吸附后制成，用于預(yù)防SARS病感染。
2制造2.1基本要求2.1.1設(shè)施與生產(chǎn)質(zhì)量管理按中國《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求實施。同時還必須具備三級生物安全實驗和生產(chǎn)工作(P3)條件，并二級以上生物安全柜中操作動物模型須在P3和P3級以上實驗室中進(jìn)行。
2.1.2原料及輔料應(yīng)符合現(xiàn)行《中國藥典》或《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》的要求。未納入上述標(biāo)準(zhǔn)的化學(xué)試劑，應(yīng)不低于化學(xué)純。
2.1.3生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水源水應(yīng)符合國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)；純化水及注射用水符合現(xiàn)行《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。
2.1.4生產(chǎn)用器具直接用于生產(chǎn)的金屬或玻璃等器具，必須嚴(yán)格清洗及滅菌處理。
2.1.5檢定用動物小鼠、豚鼠應(yīng)符合清潔級標(biāo)準(zhǔn)。
2.2菌種2.2.1菌種名稱及來源使用經(jīng)國家藥品管理當(dāng)局批準(zhǔn)的，來自SARS疫區(qū)新分離的流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)凍干保存菌種2.2.2種子批的建立疫苗生產(chǎn)用菌種以菌種種子批系統(tǒng)為基礎(chǔ)進(jìn)行三級管理，即原始種子批、主種子批和工作種子批。原始種子批應(yīng)驗明其記錄、歷史、來源和生物學(xué)特性。從原始種子批傳出、擴增后凍存的為主種子批。從主種子制備工作種子批。主種子批和工作種子批在規(guī)定代次內(nèi)的生物學(xué)特性應(yīng)與原始種子批一致。工作種子批用于生產(chǎn)。
2.2.3種子批菌種檢定2.2.3.1培養(yǎng)物純度試驗培養(yǎng)物接種于血瓊脂平板和沙保羅瓊脂平板，分別于20-25℃和30-35℃培養(yǎng)2-3周，應(yīng)無細(xì)菌和其他真菌被檢出。
2.2.3.2純菌試驗菌種接種于10％血瓊脂平板2周后可見長出細(xì)小白色樣花樣菌落。
2.2.4菌種傳代主種子批經(jīng)一代擴增制成工作種子批，工作種子批經(jīng)檢定合格后用于生產(chǎn)。
2.2.5菌種保存主菌種及工作菌種保存于液氮中，為方便生產(chǎn)，小部分工作菌種短期內(nèi)(6個月內(nèi))可保存于-70℃冰箱中。
2.3發(fā)酵2.3.1發(fā)酵工藝將工作菌種在適宜溫度和時間條件下進(jìn)行三角瓶、種子罐和生產(chǎn)罐三級發(fā)酵，收獲孢子體細(xì)胞冷凍保存。
2.3.2發(fā)酵產(chǎn)物檢定2.3.2.1培養(yǎng)物純度按2.2.3.1項進(jìn)行。
2.3.2.2菌種純度流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)純度100％。
2.4純化2.4.1純化工藝用細(xì)胞破碎器破碎孢子體細(xì)胞，除去細(xì)胞碎片，硅膠吸附法粗提亞單位疫苗，抗獨特疫苗，疏水層析法精提抗獨特疫苗亞單位疫苗，經(jīng)硫氰酸鹽處理后，稀釋和除菌過濾。
2.4.2純化產(chǎn)物檢定2.4.2.1無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
2.4.2.2蛋白質(zhì)濃度用lowry法測試，蛋白質(zhì)濃度應(yīng)在20.0-27.0μg/ml之間。
2.4.2.3純度(1)免疫印染法所測樣品不得出現(xiàn)國家藥品檢定機構(gòu)認(rèn)可以外的孢子體雜蛋白。
(2)高壓液相色譜法雜蛋白應(yīng)不高于1.0％。
2.4.2.5細(xì)菌內(nèi)毒素按本版規(guī)程通則《生物制品細(xì)菌內(nèi)毒素試驗規(guī)程》進(jìn)行，應(yīng)小于10EU/ml。
2.5疫苗原液配制及檢定2.5.1配制加入甲醛，37℃保溫適宜時間，氫氧化鋁吸附后，加入硫柳汞作為防腐劑，即為疫苗原液。
2.5.2原液檢定按3.1項進(jìn)行。
2.6半成品配制、分批及檢定2.6.1配制滅活吸附后與鋁稀釋劑等量混合，即為半成品。
2.6.2分批按本版規(guī)程通則《生物制品分批規(guī)程》進(jìn)行。
2..6.3半成品檢定按3.2項進(jìn)行。
2.7分裝按本版規(guī)程通則《生物制品分裝規(guī)程》進(jìn)行。
2.8規(guī)格本品規(guī)格為每安瓿0.5ml及1.0ml。每次人用劑量0.5ml。
2.9包裝按本版規(guī)程通則《生物制品包裝規(guī)程》進(jìn)行。
3檢定3.1原液檢定3.1.1吸附完全性試驗吸附率應(yīng)不低于80％。
3.1.2硫氰酸鹽含量應(yīng)小于1.0μg/ml。
3.1.3TritonX-100含量應(yīng)小于15.0μg/ml。
3.2半成品檢定3.2.1無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.2.2.化學(xué)檢定按本版規(guī)程附錄《生物制品化學(xué)及其他檢定方法》進(jìn)行。
3.2.2.1游離甲醛含量應(yīng)小于20.0μg/ml。
3.2.2.2pH值為5.5～7.2。
3.2.2.4鋁含量為0.35～10.62mg/ml。
3.2.2.5細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)小于10EU/ml。
3.2.2.6冰用冰點儀測定，應(yīng)為-0.52℃±0.12℃。
3.3成品檢定3.3.1鑒別試驗以免疫法測試，證明為流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)抗原。
3.3.2物理檢查應(yīng)為乳白色混懸液體，可因沉淀而分層，易搖散，不應(yīng)有搖不散的塊狀物。
3.3.3化學(xué)檢定按本版規(guī)程附錄《生物制品化學(xué)及其他檢定方法》進(jìn)行。
3.3.3.1鋁含量同3.2.2.3.項。
3.3.3.2硫柳汞含量同3.2.2.4項。
3.3.3.3pH值為5.5～7.2。
3.3.4效力測定將疫苗連續(xù)稀釋，每個稀釋度接種MIH 16-18克小鼠10只，每只腹腔注射1.0ml。4～6周后采血，用MIH小鼠測抗體。
3.3.5無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》進(jìn)行。
3.3.6無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品異常毒性試驗規(guī)程》進(jìn)行。
3.3.7細(xì)菌內(nèi)毒素同2.3.2.5項。
4保存、運輸及有效期于2～8℃避光保存和運輸，疫苗自效力檢定合格之日起有效期為2年。
5使用說明組成和性狀本品系由SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)經(jīng)純化、加佑劑吸附后制成。注射劑、氣霧劑、滴鼻劑疫苗為白色混懸液體，可因沉淀而分層，易搖散，不應(yīng)有搖不散的塊狀物。
規(guī)格本品規(guī)格為每安瓿節(jié)0.5ml及1.0ml或5～10ml/瓶。每次人用劑量0.5ml含5μg，氣霧和滴鼻5～10ml/瓶，50-100μg。
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本品依據(jù)《中國生物制品規(guī)程》2000年版標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)和檢定，符合質(zhì)量要求。
作用和用途本疫苗接種后，可刺激機體產(chǎn)生免疫力，用于預(yù)防流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)感染。
接種對象(1)SARS病疫區(qū)人群，易感人群和患者近距離接觸的種類人員的預(yù)防。
(2)從事醫(yī)療工作的醫(yī)護(hù)人員及接觸實驗人員。
用法和劑量(1)本疫苗注射時要充分搖勻。
(2)注射部位為上臂三角肌內(nèi)。
禁忌患有急性嚴(yán)重疾病患者及對酵母成分過敏者禁止使用。
副反應(yīng)處理本品很少有不良反應(yīng)，個別人可能有中、低度發(fā)熱或注射局部微痛，24小時內(nèi)即自行消失。
注意事項(1)用前搖勻。
(2)安瓿破裂、有搖不散塊狀物時不得使用。
保存、運輸及使用期限于2～8℃下避光保存和運輸，在盒簽或瓶簽標(biāo)明的失效期前使用。
生產(chǎn)批準(zhǔn)文號生產(chǎn)單位及地址《SARS滅活疫苗和SARS菌素制造方法》1.定義、組成及用途本品系用流行性肺組織胞漿菌(球酵母菌)培養(yǎng)后(以下簡稱SARS菌)，經(jīng)甲醛溶液滅活、脫毒處理、制成每瓶含菌2-5×109/ml和適量保護(hù)劑，不含防腐劑制成。用于SARS病的預(yù)防。
2.制造2.1基本要求2.1.1設(shè)施與生產(chǎn)質(zhì)量管理按中國《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求實施。
2.1.2原料及輔料符合現(xiàn)行《中國藥典》或《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》的要求。未納入上述標(biāo)準(zhǔn)的化學(xué)試劑，不低于化學(xué)純。
2.1.3生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水符合國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)，純化水及注射用水符合現(xiàn)行《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。
2.1.4生產(chǎn)用器具直接用于生產(chǎn)的金屬或玻璃等器具，嚴(yán)格清洗及去熱源處理或滅處理。
2.1.5生產(chǎn)及檢定用動物家兔、小鼠、豚鼠符合清潔級。
2.2菌種2.2.1菌種名稱及來源制造用菌種由當(dāng)?shù)胤蛛x獲得并凍干保存或國家指定的單位保管和分發(fā)。
2.2.2種子批的建立生產(chǎn)用菌種采用種批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)檢明其記錄、歷史、來源和生物學(xué)特性，從原始種子批傳代，擴增后凍干保存為主種子批。從主種子批備工作種子批。主種子批和工作種子批的各種特性與原始種子批一致。工作種子批用于生產(chǎn)。
2.2.3種子批菌種檢定2.2.3.1形態(tài)及培養(yǎng)特性將待檢菌種接種GH改良沙保羅瓊脂或其他適宜培養(yǎng)基，為SARS菌，在血瓊脂培養(yǎng)基上菌落初呈球狀、腦形、粉紅色至棕色。
2.2.3.2生化反應(yīng)所用菌種均用細(xì)胞生化鑒定系統(tǒng)，鑒定為SARS菌。
2.2.3.3血清凝集試驗用25℃或37℃培養(yǎng)24-48小時的培養(yǎng)物，以1％甲醛滅活，用無菌生理氯化鈉溶液稀釋，使其含菌2×109ml，與SARS菌免疫診斷血清(做定量凝集試驗)，充分混合后，置37℃過夜，以肉眼見到凝集之血清最高稀釋度為凝集反應(yīng)效價。凝集效價應(yīng)不低于原血清效價之半。
2.2.3.4毒力試驗采用SARS菌分別用25℃或37℃培養(yǎng)24-48小時的GH改良沙保羅液體培養(yǎng)物，以無菌生理氯化鈉溶液稀釋成含菌1.2×109ml、8×108ml、4×108ml、2×108ml等濃度菌液，腹腔注射體重14-16g小鼠，同性或雌雄各半，每個濃度菌液使用至少5只小鼠，每只0.5ml，觀察3-7天。
2.2.3.5毒性試驗分別采用25℃或37℃培養(yǎng)24-48小時的GH改良沙保羅液體培養(yǎng)物混懸于生理氯化納液內(nèi)，70℃加溫2小時(或其他方法)殺菌，不加防腐劑。殺菌試驗合格后，按一定比例混合，稀釋成每1ml含菌4.0×109、2.0×109及1.0×109共3個濃度，每個濃度菌懸液0.5ml腹腔注射體重16-18g小鼠5只，觀察3天，注射1.0×109至2.0×109個死菌體的小鼠應(yīng)全部生存。
2.2.3.6抗原性試驗選體重2kg左右之家兔至少3只，以上述免疫力試驗用菌液注射家兔，注射8次，末次注射后7-10天，采血做定量凝集試驗，測定效價。2/3家兔血清凝集價應(yīng)不低于1∶2560。
2.2.3.7免疫力試驗用終濃度不超過1.1％±0.1％的甲醛溶液殺菌，以不加防腐劑的菌液稀釋，使其含菌2.0×109ml。選體重14-16g小鼠至少30只，每次皮下注射菌液0.5ml，間隔5天注射1次，共注射3次，末次免疫后7-10天，用毒菌攻擊，觀察3天，對照組小鼠死亡數(shù)應(yīng)不低于80％，免疫組小鼠保護(hù)率應(yīng)不低于70％。
2.2.4菌種傳代及保存2.2.4.1菌種凍干保存于2-8℃，主種子批自啟開后傳代不得超過5批。
2.2.4.2生產(chǎn)前檢查菌種特性，合格后用于生產(chǎn)。
2.3原液制備2.3.1生產(chǎn)用種子將工作種子批菌種啟開后，接種于GH改良沙保羅培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基，置℃培養(yǎng)傳代，一般不超過48小時，由此制備適宜數(shù)量的生產(chǎn)用工作種子。
2.3.2生產(chǎn)用培養(yǎng)基用pH7.2-7.4的GH改良沙保羅培養(yǎng)基或國家藥品管理當(dāng)局批準(zhǔn)的其他培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中不含對人體有害或其他過敏原物質(zhì)。
2.3.3菌種接種和培養(yǎng)采用密封三角燒瓶種法，接種后置37℃搖床培養(yǎng)24-48小時，在過程中滅菌前權(quán)樣做純菌試驗，涂片染色鏡檢、如發(fā)現(xiàn)雜菌，應(yīng)廢棄。
2.3.4收集和殺菌培養(yǎng)結(jié)束后，立即加熱100℃，10-30分種80℃一小時滅菌，然后加入終濃度為1.0％-1.2％的甲醛溶液，置37℃，7天，取樣種于GH改良沙保羅培養(yǎng)基做無菌試驗，4℃離心洗滌去甲醛后，加無菌PBS洗二次PBS補至原量，置2-8℃保存。
2.4原液檢定按3.1項進(jìn)行。
2.5半成品配制單批或多批檢定合格的原液合并，用PBS稀釋，加入適量保護(hù)劑，與原液混合，使每1ml含SARS病原菌5×109。
2.6半成品檢定按3.2項進(jìn)行。
2.7分批按本版規(guī)程通則《生物制品分批規(guī)程》進(jìn)行。
2.8分裝或凍干。
按本版規(guī)程通則《生物制品分裝規(guī)程》進(jìn)行。
2.9規(guī)格本品規(guī)格為每小瓶1-55×109ml，內(nèi)含適量保護(hù)劑。
2.10包裝按本版規(guī)程通則《生物制品包裝規(guī)程》進(jìn)行。
3檢定3.1原液檢定3.1.1無雜菌。
3.1.2無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.1.3濃度測定按“中國細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)“進(jìn)行濃度測定，相當(dāng)每1毫升含菌應(yīng)為5×109稀釋時按此濃度計算，誤差不超過103.1.4原液保存原液靜置保存于2-8℃。
原液采集保存期，自原液合并之日起不超過4個月。保存期自采集滅菌之日起不超過6個月。
3.2半成品檢定3.2.1無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.2.2制劑濃度每1ml含組織胞漿5×109。
3.3成品檢定3.3.1鑒別試驗與本菌的特異性免疫血清進(jìn)行玻片凝集試驗，應(yīng)呈明顯凝集反應(yīng)。
3.3.2外觀為白色混懸液或白色凍干粉針劑、溶解后應(yīng)為乳白色混懸液，不應(yīng)含有搖不散的凝塊或異物3.3.3化學(xué)檢定按本版規(guī)程附錄《生物制品化學(xué)及其他檢定方法》進(jìn)行。
3.3.3.1PH值為6-7。
3.3.3.2游離甲醛含量不應(yīng)高于0.1g/L。
3.3.3.3乳糖按現(xiàn)行《中國藥典》進(jìn)行。含乳糖。
3.3.4無菌試驗按本版規(guī)程通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》A項進(jìn)行。
3.3.5異常毒性試驗按本版規(guī)程通則《生物制品異常毒性試驗規(guī)程》進(jìn)行。
3.3.6濃度測定用“中國細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)”進(jìn)行濃度測定，每小瓶含SARS病原功菌5×109ml。
3.3.7質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)適應(yīng)癥接種后能提高機體特異性免疫，用于預(yù)防SARS菌病感染。
《流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)診斷試劑的制造方法》在完成SARS疫苗的(3、1、4)制造程序基礎(chǔ)上，取上述合并后的組織漿菌(球狀酵母菌)原液離心洗滌三次，用超聲波充分粉碎，并同時在-100℃以下反復(fù)凍溶三次，取出，4℃ 12000次/分離心一小時，棄沉淀，取上清，用注射用水1∶100～10000稀釋，供疑似SARS病患者皮膚試驗之用，《SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)特異性診斷試劑制造方法》主要采用羊抗免或兔抗羊抗體具體方法是用上述未稀釋的原菌液，加入適量羊毛脂或花生油作佐劑，然后注射到羊或兔，抽取免疫后的血清，制成羊抗免或免抗羊的抗血清，或直接從血清提取IgG抗體，制成診斷試劑盒，或制成抗抗體，酶聯(lián)免疫試劑、膠體金診斷試劑，PCR診斷試劑，或用螢光素標(biāo)記抗體制成螢光免疫試劑盒。亦可通過細(xì)胞融合制成單克隆抗體。
1.酶聯(lián)免疫診斷試劑免疫酶技術(shù)是19世紀(jì)發(fā)展的一項新技術(shù)，酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)簡稱ELISA是將SARS病原體的可溶性抗原或抗體吸附在固相載體上，利用酶標(biāo)記抗體或抗原定量測定相應(yīng)的抗原或抗體。由于酶的高效催化作用，再結(jié)合抗原抗體反應(yīng)的高度特異性，使ELISA測定具有靈敏、特異性的優(yōu)點，其操作簡便，出結(jié)果快，用流行性肺組織胞漿菌(球酵母菌)做抗原，制造出一種免疫診斷試劑(具體祥細(xì)制造方法另附或隨時提供)。
2、熒光抗體診斷試劑20世紀(jì)初熒光顯微技術(shù)已萌芽，30年代由于熒光素的發(fā)展以及采用超高壓水銀石英燈作光源，使熒光染色技術(shù)有了顯著進(jìn)步，用異氰酸熒光黃(FITC)等標(biāo)記流行性肺組織漿菌(球酵母菌)免疫抗體蛋白能保護(hù)抗體的活性，兩者結(jié)合物制作診斷特異性試劑，主要是用熒光素標(biāo)記抗體，免疫熒光技術(shù)又稱為熒光抗體技術(shù)，它是利用免疫學(xué)的特異性和敏感性同顯微鏡的精確性相結(jié)合，達(dá)到特異性、敏感、快速和簡便地檢出樣品中的抗原物質(zhì)，熒光抗體診斷試劑(詳細(xì)具體制造方法另附或隨時提供)。
3、膠體金免疫診斷試劑免疫金和免疫銀一般是采用間接步驟進(jìn)行，即用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)特異性抗體與抗原反應(yīng)，再用膠體金標(biāo)記“二抗”與“一抗”反應(yīng)顯示抗原的位置，這就是免疫金法，其結(jié)果可直接用于光鏡觀察。膠體金免疫試劑是應(yīng)用膠體金為標(biāo)記物，膠體金即金的水溶膠，它具有一般的溶膠特性，用膠體金標(biāo)記流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)抗原或特異性抗體，制成特異性免疫試劑，用于診斷病原體有高度特異性和靈敏性，(膠體金免疫試劑的具體詳細(xì)方法另附或隨時提供)。
4、PCR診斷試劑原理是用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)免疫動物(羊、兔等)分離特異性抗體或用單克隆抗體，通過將樣品的抗原物質(zhì)解離成DNA遺傳物，并通過使其抗增后達(dá)到供檢測的量，然后經(jīng)儀器直接檢測獲得病原體抗原的正確診斷。(具體制造方法另附)。
5、制造抗體、多克隆抗體和單克隆抗體采用流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)作抗原制備高特異性、高效價的免疫血清，制備方法一是以純化的抗原免疫羊、兔、馬等動物，從動物血清中獲得多克隆抗體，二是應(yīng)用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體。作診斷試劑或醫(yī)藥用途。(具體詳細(xì)制造方法另附或隨時提供)。
(附圖)

圖1是SARS肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)純培養(yǎng)形態(tài)圖，圖2是SARS肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)動物模型小鼠腦膜組織切片形態(tài)圖。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)系列特異性預(yù)防疫苗，和系列特異性診斷試劑及其生產(chǎn)方法，其特征是由SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)制成SARS特異性預(yù)防疫苗，或用生物技術(shù)生產(chǎn)SARS系列精制特異性疫苗和制造系列特異性診斷試劑及其各種不同劑型的制品，或作醫(yī)藥科學(xué)研究用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的SARS系列特異性預(yù)防疫苗，其特征是包括混合疫苗、多糖疫苗(糖蛋白)疫苗、核酸疫苗、亞單位疫苗、細(xì)胞壁(壁酸)疫苗、多肽疫苗、毒素、類毒素疫苗、合成疫苗和半合成疫苗、基因重組疫苗，抗獨特型抗體疫苗和特異性免疫球蛋白，或單克隆抗體，以及其它新生物制品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的SARS系列特異性診斷試劑，其特征是包括酶聯(lián)免疫診斷試劑、PCR診斷試劑，、免疫螢光抗體、膠體金診斷試劑，基因芯片診斷試劑，、和SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)素皮試診斷試劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 所述制品劑型，流行性肺組織漿菌(球狀酵母菌)的劑型，其特征是包括制品的注射液，生產(chǎn)出注射針劑、噴喉氣霧劑和滴鼻制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)系列制品制造方法，其特征是由SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)經(jīng)過擴增、發(fā)酵、縮濃，然后用物理和化學(xué)方法或生物技術(shù)將流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)細(xì)胞破碎(溶解)然后分離、層析提取、純化、精制加工制造成系列特異性疫苗和系列特異性診斷試劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的科學(xué)研究用途，其特征是包括基因測試、特效藥物篩選和醫(yī)藥研究用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由SARS流行性肺組織胞漿菌(球狀酵母菌)，生產(chǎn)SARS系列特異性預(yù)防疫苗，其中包括混合疫苗、多糖疫苗(糖蛋白)，核酸疫苗、多肽疫苗、亞單位疫苗、細(xì)胞壁疫苗、毒素、類毒素疫苗、合成和半合成疫苗、基因重組疫苗、抗獨特型抗體疫苗和生產(chǎn)特異性免疫球蛋白或單克隆抗體。以及特異性診斷試劑，包括酶聯(lián)免疫診斷試劑、PCR診斷試劑、熒光抗體免疫診斷試劑、膠體金診斷試劑。供SARS流行疫區(qū)人群和各類易感人群特異性預(yù)防和診斷之用。
文檔編號A61K39/00GK1513552SQ0313971
公開日2004年7月21日 申請日期2003年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月8日
發(fā)明者余國華 申請人:余國華