專利名稱：利巴韋林吸入粉霧劑及其制備工藝－抗病毒感染的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥配制品及制備方法，具體地說，是一種用于治療病毒感染的藥物，其化學名為1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺， 分子式為C8H12N4O5，分子量為244.21，通用名為利巴韋林的粉霧劑及其制備方法。
背景技術：
呼吸道合胞病毒(RSV)是早產兒和6個月以下嬰兒呼吸道感染的主要病原體，每年冬季在北半球廣泛流行。幾乎所有的小孩至2歲時都曾經感染過。RSV感染也在成年和老年人群以及免疫功能受損病人中流行，通常為輕度感染，但足以引起毛細支氣管炎和肺炎；估計每年有300萬4歲以下的兒童感染，其中，約100萬人需住院治療，約5％因RSV感染住院治療的兒童出現呼吸窘迫導致呼吸衰竭，住院病人的死亡率近1％。而且兒童因RSV毛細支氣管炎住院治療與2～7年后哮喘發(fā)作有密切的關系。RSV通過大量飛沫傳播，病毒通過特異性吸附和融合表面蛋白、穿透入宿主細胞。吸附和融合引起組織損傷，隨后繼發(fā)細菌感染。
利巴韋林亦稱三氮唑核苷，為廣譜抗病毒藥，經體內外試驗和臨床證實，對多種DNA和RNA病毒有抑制作用，主要通過抑制肌苷酸-S＇磷酸脫氫酶，阻斷肌苷酸變?yōu)轼B苷酸，而抑制病毒的核酸合成，抑制病毒RNA轉錄，是唯一批準用于治療RSV高危病人的藥物。近期批準超免疫球蛋白被動免疫用于預防某些高危嬰兒的RSV感染。一般RSV感染主要采用支氣管擴張藥治療，某些嚴重病例給予吸氧處置。至今RSV預防疫苗仍未研制成功，幾種疫苗尚處于開發(fā)階段；早期臨床試驗表明，嬰兒使用激發(fā)免疫應答的以福爾馬林滅活的疫苗預防，其感染發(fā)生率高于使用三價副流感疫苗。
RSV是一種中等大小的被膜病毒(120～300nm)，屬副粘病毒，該屬病毒還有仙臺病毒、猿猴病毒(SIV)、副流感病毒和新城雞瘟病毒等，病毒含有負鍵DNA基因組，此基因組至少編碼10個蛋白，其中2個是糖蛋白，對靶細胞的吸附和融合起關鍵作用，90K的吸附糖蛋白(G)和70K的融合糖蛋白(F)是治療干預的重要靶點。
F蛋白含有高糖基化的20K的F2亞單位，含在潛在的N-糖基化位點，F2通過二硫鍵連接到帶有1個N-糖基化位點的50K的F1亞單位。F1和F2亞單位具有類似于其它被膜病毒，如HIV、SIV、流感病毒和仙臺病毒的結構和功能特征。融合蛋白有約20個氨基酸組成的疏水區(qū)，通過這些氨基酸插入靶細胞膜開始融合過程。
F2含有對宿主胞膜的靶識別區(qū)，對G蛋白的識別起補充作用。RSV對靶細胞膜的吸附是通過宿主細胞表面的肝素樣蛋白多糖和病毒顆粒表面的G吸附蛋白介導的。一旦RSV病毒顆粒與靶受體結合，在中性的pH情況下發(fā)生融合，通過級聯過程，與宿主細胞膜形成融合孔，其后使病毒基因組轉移至宿主細胞。
除呼吸道合胞病毒之外，利巴韋林臨床還用于治療流感病毒、副流感病毒、單純皰疹病毒、腺病毒、痘病毒、鼻病毒和腸病毒等感染。
利巴韋林可用注射、口服或吸入氣霧劑的方式給藥。據報道，利巴韋林注射給藥8小時后其肺內藥物濃度不到全身含量的1％，無法達到治療下呼吸道感染的作用，而且可致紅細胞穩(wěn)定性發(fā)生改變，紅細胞在血管外消除加快，抑制晚期紅細胞從骨髓釋出，引起貧血，還可以引起過敏性紫癜、過敏反應、過敏性休克、腹絞痛、再生障礙性貧血、皮膚廣泛出血與全身出血、抽搐、心律失常、癲癇樣發(fā)作，呼吸困難、神志不清、惡心嘔吐、黃疸、嗜睡、腎功能衰竭、心肌損害等不良反應。利巴韋林口服給藥與注射給藥一樣也會出現以上不良反應，且不能治療下呼吸道感染，使利巴韋林的臨床應用受到極大限制。利巴韋林吸入氣霧劑雖然能使藥物直接分布到呼吸道表面，使病灶表面的藥物濃度迅速達到高峰，而發(fā)揮迅速治療作用。但是由于氣霧劑中含有拋射劑等不利因素，因此利巴韋林吸入氣霧劑的上市并未使利巴韋林的臨床應用得到進一步拓展。
發(fā)明目的本發(fā)明就是通過制備吸入粉霧劑(呼吸道粘膜吸收制劑)的方法，使利巴韋林經專用給藥裝置給藥后以干粉形式進入呼吸道，通過呼吸道粘膜下豐富的毛細血管吸收而達到靶向、高效、速效、安全的治療目的，充分發(fā)揮利巴韋林的抗病毒作用，極大拓展利巴韋林的臨床適應癥范圍。
由于吸入粉霧劑是在吸入氣霧劑的基礎上，為克服吸入氣霧劑的缺點，而應用綜合粉體工程學的研究成果發(fā)展起來的一種新劑型。由于它使用方便，不含拋射劑，藥物呈粉狀，穩(wěn)定性好，干擾因素少，而日益受到人們的重視。粉霧劑的最大優(yōu)點在于使用時，病人的吸氣氣流是粉末進入體內的唯一動力，故不存在協同困難，降低了藥物副作用的發(fā)生率，尤其適合老人和兒童使用；而氣霧劑吸入給藥時，即使經過指導，也約有30％的病人不能正確使用。與吸入氣霧劑及噴霧劑相比，吸入粉霧劑具有以下一些特點(1)患者主動吸入藥粉，不存在給藥協同配合困難；(2)無拋射劑氟里昂，可避免對大氣環(huán)境的污染和呼吸道刺激。(3)藥物可以膠囊或泡囊形式給藥，劑量準確，無超劑量給藥危險；(4)不含防腐劑及酒精等溶媒，對病變粘膜無刺激性。(5)無胃腸道降解作用；(6)無肝臟首過效應；(7)藥物吸收迅速，給藥后起效快；(8)藥物吸收后直接進入體循環(huán)，達到全身治療的目的；(9)患者依從性好，特別適用于需進行長期治療的病人；(10)起局部作用的藥物，給藥劑量明顯降低，毒副作用小，安全性好。

發(fā)明內容
為達到上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案可吸入形式是干粉，活性成分為利巴韋林，其結構式為 化學名為1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺，分子式為C8H12N4O5，分子量為244.21。
本發(fā)明是活性成分的超微粉與可藥用的載體微粉均勻混合的干粉形式，優(yōu)選含有可藥用載體，并且所述可藥用載體選自已知可用作干粉吸入組合物的載體的物質，例如乳糖、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、果糖、山梨醇、麥芽糖醇和氨基酸等。特別優(yōu)選的載體是乳糖和甘氨酸。干粉可以以單劑量的形式置于干粉吸入裝置的明膠或塑料膠囊內或泡罩內?；蛘?，干粉可以以儲庫的形式包含在多劑量干粉吸入裝置中。
干粉中的活性成分利巴韋林可以具有最大約10μm的平均粒徑，例如0.1μm至5μm，優(yōu)選1μm至5μm。干粉中的載體通常具有最高200μm的最大粒徑，優(yōu)選最高150μm粒徑，并且通常具有10μm至100μm粒徑，優(yōu)選30μm至80μm的平均粒徑。
當本發(fā)明的藥物是膠囊內的含有單位劑量利巴韋林和載體的組合物，例如用于從單個膠囊吸入器吸入的藥物組合物干粉時，膠囊可以含有1mg至30mg利巴韋林，優(yōu)選1mg至10mg，特別是5mg的利巴韋林以及上述的可藥用載體，可藥用載體的量為10mg至30mg，例如10mg、15mg、20mg、25mg或30mg，特別優(yōu)選20mg。
本發(fā)明通過流化床超音速氣流粉碎、高速研磨、球磨機或振動磨中研磨或超臨界溶媒重結晶等方法將利巴韋林和載體的粒度降至所需水平，利巴韋林特別優(yōu)選流化床超音速氣流粉碎法，載體特別優(yōu)選高速研磨法。
所述的利巴韋林吸入粉霧劑的制備工藝為取利巴韋林經超微粉碎得到的粒度降至所需水平的超微干粉與經高速研磨粉碎得到的粒度降至所需水平的載體微粉用等量遞增法混勻，填充3號膠囊，即得。
研究結果表明，本發(fā)明可使90％以上的吸入藥物直接分布到呼吸道表面，在肺部的藥物沉積量超過10％，使呼吸道病灶表面的藥物濃度迅速達到高峰，為血漿峰濃度的500～1000倍，迅速在呼吸道局部形成有效抑制病毒的藥物濃度、能直接到達下呼吸道且吸附于粘膜上，迅速發(fā)揮作用，提高療效。由于利巴韋林在呼吸道分泌物中的半衰期僅為2小時，所以它進入呼吸道后分泌物的稀釋作用，高濃度的利巴韋林并不能對呼吸道組織，特別是纖毛產生毒副作用，因此可以明顯減少不良反應的發(fā)生。
下面經過檢測說明本發(fā)明的有益效果檢測指標及方法1.干粉的粒徑檢測取本發(fā)明干粉，用少量無水乙醇調勻，涂于載玻片上，加蓋玻片，置電鏡下檢測。
2.干粉流動性檢測干粉的流動性以休止角表示，測定方法采用固定漏斗法，即將漏斗固定在適宜高度(H)，將本發(fā)明干粉置漏斗中，自然漏下成堆，直到圓錐體的尖端將要接觸到漏斗的出口為止，然后測出圓錐底面的半徑r，休止角＝arctg(H/r)。
3.干粉吸濕性檢測精密稱取本發(fā)明干粉各3份，置于20℃、相對濕度分別為92.5％的密閉容器中24小時后檢測相對增重。
4.含量均勻度檢測取樣品1粒，將內容物傾入5ml量瓶中，用流動相溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，過濾(濾膜為0.45μm)，取濾液，照含量測定項下的方法測定，限度為±25％，應符合規(guī)定(中國藥典2000年版二部附錄XE)。
5.排空率檢測取樣品10粒，照排空率測定法(中國藥典2000年版二部附錄IL)檢查，每粒的排空率應不低于90％。
6.有效部位藥物沉積量檢測照有效部位藥物量測定法(中國藥典2000年版二部附錄XH)檢查，以流動相為接受液。取本品膠囊1粒，置吸入裝置內，用手指撳壓裝置兩側按鈕，將膠囊兩端刺破，開啟真空泵；吸入裝置經適宜橡膠接口與模擬喉部呈水平緊密相接，10秒鐘后取下吸入器，重新安置1粒膠囊。如此共抽吸10粒膠囊，關閉泵，拆除裝置。用空白接受液清洗導入下部錐形瓶的導管內、外壁及墊片凸出物的表面，洗液與下層接受液合并，定容至50ml量瓶中，搖勻，過濾(濾膜為0.45μm)，取濾液，照含量測定項下的方法測定，并計算含量，所得結果除以10，并與標示含量相比，即為有效部位的藥物沉積量。藥物沉積量應不少于標示量的10％。
利巴韋林含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VD)測定。
色譜條件與系統適應性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以水或0.03mol/L硫酸銨溶液為流動相；檢測波長為207nm。理論板數按利巴韋林峰計算，應不低于2500。
測定法 取樣品，加水溶解并稀釋成每1ml中含50μg的溶液，取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利巴韋林對照品適量，同法測定。按外標法以峰面積計算。
7.干粉對呼吸道粘膜刺激性檢測①單次給藥呼吸道粘膜刺激性試驗取實驗兔8只，體重為2.0-3.0Kg，試驗時將利巴韋林吸入粉霧劑噴入動物口腔及咽部，每只兔噴2mg，使受試物與其粘膜接觸至少4小時，然后于24小時處死動物，取出局部粘膜組織，觀察有無充血，紅腫等現象。
②重復多次給藥呼吸道粘膜刺激性試驗取實驗兔8只，體重為2.0-3.0Kg，試驗時將利巴韋林吸入粉霧劑噴入動物口腔及咽部，每日一次，每次每兔噴2mg，連續(xù)七天，使受試物與其粘膜接觸至少4小時，末次給藥后24小時處死動物，取出局部粘膜組織，觀察有無充血，紅腫等現象。
8.過敏試驗于給藥前24小時背部兩側去毛，去毛區(qū)每側約為3×3cm，用溫水擦干凈供試驗用，去毛時不要損傷皮膚。致敏接觸利巴韋林吸入粉霧劑(0.2g)、陽性對照物0.1％2，4-二硝基氯苯(0.2ml)、藥物載體(0.2g)分別均勻涂抹豚鼠一側去毛皮膚上，用一層油紙及兩層紗布覆蓋，再用無刺激性膠布封閉固定或敷裹，使供試品與皮膚能很好地接觸6小時，隔日致敏一次，共3次。激發(fā)致敏于末次接觸后第14天，在背部一側去毛皮膚上均勻涂抹受試藥物(0.1g)、陽性對照物(0.1ml)、藥物載體(0.1g)，6小時后除去供試品，立即觀察，并于給藥后24、48、72小時再觀察有無過敏反應的情況，劃分反應級數。
檢測結果一、實例1樣品檢測結果1.干粉的粒徑利巴韋林的粒徑為2.37μm±0.75μm。載體乳糖的最大粒徑為80μm，平均粒徑為50μm至75μm。
2.干粉的流動性休止角為61°。
3.干粉的吸濕性相對增重2.2％。
4.含量均勻度±10.2％。
5.排空率99.3％。
6.有效部位藥物沉積量25.3％。
7.對呼吸道粘膜的刺激性未見明顯刺激作用。
8.過敏試驗未見明顯過敏反應。
二、實例2樣品檢測結果1.干粉的粒徑利巴韋林的粒徑為3.23μm±0.92μm。載體乳糖的最大粒徑為150μm，平均粒徑為70μm至135μm。
2.干粉的流動性休止角為54°。
3.干粉的吸濕性相對增重5.4％。
4.含量均勻度±11.2％。
5.排空率98.3％。
6.有效部位藥物沉積量16.2％。
7.對呼吸道粘膜的刺激性未見明顯刺激作用。
8.過敏試驗未見明顯過敏反應。
三、實例3樣品檢測結果1.干粉的粒徑利巴韋林的粒徑為3.24μm±0.61μm。載體乳糖的最大粒徑為2 00μm，平均粒徑為100μm至190μm。
2.干粉的流動性休止角為46°。
3.干粉的吸濕性相對增重3.6％。
4.含量均勻度±13.5％。
5.排空率97.1％。
6.有效部位藥物沉積量18.3％。
7.對呼吸道粘膜的刺激性未見明顯刺激作用。
8.過敏試驗未見明顯過敏反應。
以上檢測結果表明，本發(fā)明具有靶向、高效、速效、安全的優(yōu)點。
具體實施例方式
一、實例1利巴韋林 5g乳糖 20g灌裝成1000粒3號膠囊二、實例2利巴韋林 5g乳糖 25g灌裝成 1000粒3號膠囊三、實例3利巴韋林5g乳糖30g灌裝成 1000粒3號膠囊上述實例中吸入粉霧劑的制備方法取利巴韋林置流化床超音速氣流粉碎機中粉碎得到的粒徑為1μm至5μm的超微干粉與經高速研磨粉碎得到的最大粒徑小于200μm的乳糖載體用等量遞增法混勻，填充3號膠囊，即得。
權利要求
1.利巴韋林吸入粉霧劑及其制備方法，其特征在于它是以抗病毒感染藥物利巴韋林超微粉與藥用載體充分混勻后填充膠囊制備而成的須經專用給藥裝置給藥后以干粉形式進入呼吸道的粘膜吸收制劑。
2.根據權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑，其特征在于利巴韋林的化學名稱為1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺，結構式為 分子式為C8H12N4O5，分子量為244.21。
3.根據權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑，其特征在于利巴韋林可通過流化床超音速氣流粉碎機、球磨或振動磨中研磨或超臨界溶媒重結晶等方法制備粒徑為0.1μm至10μm的超微粉。
4.根據權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑，其特征在于藥用載體為乳糖、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、果糖、山梨醇、麥芽糖醇和氨基酸等。
5.根據權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑，其特征在于藥用載體可通過高速研磨或溶媒重結晶等方法制備成粒徑為10μm至200μm的微粉。
6.根據權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑，其特征在于藥物—載體混勻的干粉可以單劑量的形式置于干粉吸入裝置的明膠或塑料膠囊內或泡罩內，或以儲庫的形式包含在多劑量干粉吸入裝置中。
7.一種權利要求1所述的利巴韋林吸入粉霧劑的制備方法，其特征在于將利巴韋林置流化床超音速粉碎機中粉碎得到的粒徑為0.1μm和10μm的超微粉與經高速研磨粉碎得到的粒徑為10μm至200μm的載體微粉用等量遞增法充分混勻后，填充3號膠囊。
全文摘要
本發(fā)明涉及利巴韋林吸入粉霧劑及其制備方法，該制劑是以利巴韋林超微粉與藥用載體微粉充分混勻后填充膠囊制備而成的須經專用給藥裝置給藥后以干粉形式進入呼吸道的粘膜吸收制劑，可使藥物發(fā)揮靶向、高效、速效、安全的抗病毒感染作用同時又具有使用、攜帶方便，患者依從性好，劑量準確，無超劑量給藥危險，對粘膜無刺激性，不含防腐劑及有機溶媒，無胃腸道降解作用，無肝臟首過效應等優(yōu)點，使利巴韋林的臨床適應癥范圍得到進一步拓展。
文檔編號A61K9/14GK1457796SQ0312235
公開日2003年11月26日 申請日期2003年4月28日 優(yōu)先權日2003年4月28日
發(fā)明者許軍, 錢進, 李平, 彭紅, 劉智, 劉孝樂 申請人:南昌弘益科技有限公司