專利名稱：共軛的精神抑制藥及其用途的制作方法
背景技術：
本發(fā)明涉及精神抑制藥與有機酸的新的化學共軛物及其用途。更具體地，本發(fā)明涉及精神抑制藥(其也可具有抗增殖活性和/或化學敏化活性)與為了減少由精神抑制藥引起的副作用和/或為了產生抗增殖活性而選擇的有機酸的新的化學共軛物，以及其在治療精神性和/或增殖性紊亂和疾病中的用途和在化學敏化作用中的用途。本發(fā)明的新化學共軛物的特征在于，與現有技術中的精神抑制藥相比，可使有害的副作用最小。
神經安定藥、也稱之為精神抑制藥或安定藥、為經典的精神抑制藥，其可廣泛用于治療中樞神經系統(tǒng)的精神疾病和紊亂，例如精神分裂癥。神經安定藥的精神抑制效力歸因于其對抗/阻斷中樞多巴胺受體的能力。已知神經安定藥為典型的精神抑制藥，其包括例如酚噻嗪類、其中為脂肪族化合物(例如氯丙嗪)，哌啶類(例如硫利噠嗪)和哌嗪類(例如氯奮乃靜)；丁酰苯(例如氟哌啶醇)；噻噸(例如三氟噻噸)；氧化吲哚(例如嗎茚酮)；二苯氧氮平類(例如洛沙平)和二苯哌啶類(例如匹莫齊特)。
然而，給予目前可得的神經安定藥經常伴隨有有害的副作用。在本領域眾所周知的是，神經安定藥可引起錐體外系癥狀，所述癥狀包括強直、震顫、運動過慢(運動緩慢)、智力遲鈍(思維緩慢)、以及遲發(fā)性運動紊亂、急性張力紊亂反應和靜坐不能。實際上，約5％用神經安定藥長期治療的患者在一年后出現遲發(fā)性運動紊亂的病狀。
一類不同的精神抑制藥包括非典型精神抑制藥。非典型精神抑制藥具有結合受體的性質，包括除結合多巴胺D2受體外還可結合中樞5-羥色胺2受體(5-HT2)。非典型精神抑制藥包括例如氯氮平、奧氮平和利哌利酮，并且通常以較高的抗5-羥色胺活性及相對較低的多巴胺D2受體親和力為特征。已知一些非典型精神抑制藥如氯氮平還可對抗粘連的膽堿能受體和組胺能受體。
與神經安定藥不同，非典型精神抑制藥可最小限度地引起錐體外系癥狀，并且因此很少引起遲發(fā)性運動紊亂、靜坐不能或急性張力紊亂反應。然而，給予非典型精神抑制藥會涉及其它副作用，例如體重增加、情緒紊亂、性功能紊亂、鎮(zhèn)靜作用、體位性高血壓、唾液過多、癲癇發(fā)作閾值降低、以及尤其是粒細胞缺乏癥。
與典型和非典型精神抑制藥兩者、此處也稱之為精神抑制藥有關的嚴重副作用極大地限制了它們的應用，并且已經作出很大努力來開發(fā)沒有這些副作用的精神抑制藥。
美國專利No.6,197,764公開了氯氮平(非典型精神抑制藥)與含12-26個碳原子、優(yōu)選16-22個碳原子的脂肪酸的化學共軛物。這些共軛物的特征在于其治療效力擴大，這使得給予較低劑量的化學共軛物而產生精神抑制的治療效果、且因此降低出現嚴重副作用的機會成為可能。因此這些共軛物是有益的，并且優(yōu)于非共軛的非典型精神抑制藥。然而美國專利No.6,197,764沒有公開含其它精神抑制藥的有益共軛物，并且還局限于含長鏈脂肪酸的共軛物。應當提到的是，其它精神抑制藥、主要是神經安定藥與長鏈脂肪酸的酯共軛物在本領域是眾所周知的。然而，該共軛物主要致力于促進藥物滲透入腦，而不能主動地減少或防止副作用。
美國專利No.3,966,930公開了氟取代的吩噻嗪衍生物，其具有顯著的精神抑制性質，且不期望的副作用的程度相對較低。然而，雖然美國專利No.3,966,930請求保護的氟取代吩噻嗪衍生物有些包含其鏈含1-17個碳原子的?；鶊F，但是實驗數據局限于僅含來自于草酸或馬來酸(即分別含2和4個碳原子的有機酸)的酰基基團的吩噻嗪衍生物。與其它已知神經安定藥相比，所公開的吩噻嗪衍生物的治療效力較長，因此其特征在于所引起的副作用的程度相對較低。這些化合物延長的治療效力主要歸因于吩噻嗪的取代基(例如氟和三氟甲基)，而吩噻嗪與有機酸的共軛主要致力于使其藥物制劑易于制得。
關于錐體外系癥狀的出現是精神抑制藥、主要是神經安定藥治療的結果的最新研究已經暗示了涉及多巴胺能受體D1和D2失調的機理，其還伴隨有腦內γ-氨基丁酸(GABA)體系的活性降低。
GABA為腦內重要的抑制性神經遞質，其已知可影響情緒穩(wěn)定藥、抗焦慮藥以及肌肉松弛藥的活性，并且還已知與一些中樞神經系統(tǒng)紊亂和疾病有關。關于錐體外系癥狀的最新研究表明，GABA促進劑還可用于減少神經安定藥引起的副作用，因此具有額外的治療潛能。
以前的研究已經表明，GABA促進劑可干擾其它腦神經遞質，具體是干擾多巴胺體系。因此，發(fā)現GABA促進劑可對抗神經安定藥引起的多巴胺受體敏感性增強，并且由此能改善神經安定藥引起的運動紊亂[1]。此外，還發(fā)現一些已知的直接GABA促進劑(例如蠅蕈醇和SL76002)可產生對氟哌啶醇引起的強直性昏厥的雙相效應，即較低劑量的促進劑抑制刻板性強直性昏厥行為，而高劑量的促進劑使氟哌啶醇引起的強直性昏厥成為可能。已經報道了GABA促進劑還可引起抗驚厥活性的其它研究。
由于GABA促進劑含有親水性官能團(例如游離羧酸基團和游離氨基基團)且因此不易于穿過血腦屏障(BBB)，其應用受到了限制。然而，發(fā)現含脂肪氨基酸或肽的化合物的化學共軛物基本上可使其易于穿過血腦屏障(BBB)[3]。
確實，美國專利No.3,947,579、3,978,216、4,084,000、4,129,652和4,138,484公開了已知可穿過血腦屏障的類GABA化合物(與GABA藥理學相關的化合物)，例如γ-羥基丁內酯、γ-羥基丁酸鹽、氨基氧乙酸、5-乙基-5-苯基-2-吡咯烷酮、1-羥基-3-氨基-2-吡咯烷酮和β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸，當其與神經安定藥共同給藥時，允許使用多少較低劑量的神經安定藥，以獲得與使用較高劑量的神經安定藥且不給予這些類GABA化合物所獲得的精神抑制效力相同的效力，并且同時多少可減少錐體外系的副作用。盡管使用了較低劑量的神經安定藥，據說仍可獲得相同的精神抑制效力，因為類GABA化合物據說使共同給藥的精神抑制藥的精神抑制活性成為可能。
最新研究表明，一些神經安定藥、具體是吩噻嗪類、在不同細胞系中還表現出強有力的抗增殖活性，例如神經元細胞、神經膠質細胞、黑色素瘤細胞、乳腺細胞、結腸細胞、前列腺細胞、淋巴瘤和非白血性白血病、以及人初期角膜細胞[4]。國立癌癥研究所(NCI)檢測了已知對鈣調節(jié)蛋白起特定抑制作用的“新的部分芥子化型吩噻嗪(newhalf mustard type phenothiazines)”。在60種不同人癌癥細胞系的體外篩選中觀察了吩噻嗪的抗增殖活性。一些吩噻嗪類化合物在動物模型中還表現出對腫瘤生長顯著的抑制作用。這些發(fā)現與神經安定藥治療中精神分裂患者的癌癥發(fā)生率較一般人群低是一致的。
WO02/43652教導了各種典型和非典型精神興奮藥在治療增殖性疾病中的用途，其在此處全文引入作為參考。具體地，WO02/43652教導，循周期性精神興奮藥可有效用于治療各種腫瘤，包括神經膠質瘤、黑素瘤、結腸癌、肺癌和前列腺癌，以及有效用于治療多向性抗藥(MDR)癌癥細胞，例如B16黑色素瘤細胞(已知耐多柔比星和秋水仙堿)和成神經細胞瘤(SH-SY5T，耐5-FU和多柔比星)。而且，除了教導精神興奮藥在MDR癌癥治療中的活性外，WO02/43652還教導了精神興奮藥作為化學敏化劑、即可有效敏化癌細胞、尤其是MDR癌細胞的化合物用作細胞毒類藥物的用途。
然而，雖然WO02/43652中的教導、具體是關于精神興奮藥在治療MDR癌癥中的抗增殖活性和化學敏化活性的教導是有益的，但是這些精神興奮藥物的應用由于其所引起的有害副作用而受到較大限制。
也已知GABA為其衍生物的丁酸(BA)和4-苯基丁酸(PBA)在體外光譜腫瘤細胞中可作為分化劑(differentiating agent)和抗增殖劑起作用[5]。也已知丁酸和4-苯基丁酸兩者均為pleotropic agents，其最顯著的活性之一是能可逆地增加核內組蛋白的乙?；?，其導致染色質釋放和轉錄活性變化[6]。可以假定，該作用機理還與丁酸和4-苯基丁酸的抗癌活性有關。
因此，現有技術教導了典型和非典型精神抑制藥在治療精神分裂癥和有關的中樞神經系統(tǒng)精神紊亂和疾病中的用途，以及教導了在治療增殖性紊亂和疾病、如惡性和良性腫瘤以及MDR癌癥中作為抗增殖劑和化學敏化劑的用途?，F有技術還教導了GABA促進劑(包括GABA本身)作為減少神經安定藥引起的副作用的可能藥物的用途和丁酸及其衍生物作為抗增殖劑的用途。
然而，仍然公認地需要有一種以改善治療活性和減少副作用為特征的精神抑制藥，其也可作為抗增殖劑和化學敏化劑，這也是非常有利的。
發(fā)明簡述根據本發(fā)明，提供了(i)精神抑制藥與為了減少由精神抑制藥引起的副作用和/或產生抗增殖活性而選擇的有機酸的化學共軛物；(ii)精神抑制藥與GABA促進劑(包括GABA本身)的化學共軛物；(iii)精神抑制藥與抗增殖劑的化學共軛物；(vi)合成它們的方法；(v)其在治療和/或預防精神紊亂和疾病而減少常規(guī)精神抑制藥物的副作用中的用途；(v)其在治療和/或預防增殖性紊亂和疾病中的用途；和(vi)其作為化學敏化劑的用途。
此處表明，精神抑制藥的化學共軛物的特征在于副作用(例如錐體外系癥狀)減至最少，精神抑制治療活性和抗增殖活性增強，化學敏化作用。此處還表明，與其源化合物相比，在其治療效力和最小化副作用方面，該化學共軛物還出人意料地具有協(xié)同效果。
因此，根據本發(fā)明的一個方面，提供了含有與第二化學部分共價連接的第一化學部分的化學共軛物，其中第一化學部分為精神抑制藥殘基，第二化學部分為為了減少當精神抑制藥本身給藥而引起的副作用和/或為了產生抗增殖活性而選擇的有機酸殘基。
根據本發(fā)明的另一方面，提供了含有作為活性成分的本發(fā)明的化學共軛物和可藥用載體的藥物組合物。
本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選包裝在包裝材料中，并且可通過包裝材料上或其中的印刷加以區(qū)分，用于治療精神紊亂或疾病，用于治療增殖性紊亂或疾病，和/或在與化療藥聯(lián)合和/或在化學敏化作用是有利的醫(yī)療條件下用于化學敏化作用。
根據本發(fā)明的另一方面，提供了一種治療患者精神紊亂或疾病的方法，該方法包括給予患者治療有效量的本發(fā)明的化學共軛物。
根據如下所述的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的另一特征，所述的精神紊亂或疾病選自精神分裂癥、妄想癥、兒童精神病、亨延頓氏舞蹈病和吉累斯·德拉圖雷特氏綜合征。
根據本發(fā)明的另一方面，還提供了一種治療或預防患者中增殖性紊亂或疾病的方法，該方法包括給予患者治療有效量的本發(fā)明的化學共軛物。
根據如下所述的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的另一特征，增殖性紊亂或疾病選自腦腫瘤、腦轉移瘤和外周腫瘤。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，增殖性疾病為癌癥，例如多重耐藥癌癥。
根據本發(fā)明的另一方面，還提供了化學敏化方法。該方法包括給予需要其的患者化學治療有效量的一種或多種化療藥以及化學敏化有效量的本發(fā)明的化學共軛物。
根據如下所述的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的另一特征，患者患有癌癥，如多重耐藥癌癥。
根據如下所述的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的另一特征，第二化學部分通過酯鍵與第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，第二化學部分選自抗增殖藥殘基和GABA促進劑殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氯奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，抗增殖劑殘基選自丁酸殘基和4-苯基丁酸殘基。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-，其中R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
根據所述優(yōu)選實施方案中的另一特征，R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
根據所述優(yōu)選實施方案中的另一特征，有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
根據本發(fā)明的另一方面，還提供了合成本發(fā)明的化學共軛物的方法。該方法包括將有機酸與精神抑制藥反應，從而得到與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基。
根據如下所述的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的另一方面，有機酸殘基與精神抑制藥通過羧酸酯鍵共價連接，并且該方法還包括在反應前將有機酸轉化為其酰氯衍生物。
根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，有機酸殘基通過硫酯鍵與精神抑制藥殘基共價連接，并且該方法還包括在反應前將有機酸轉化為其酰氯衍生物和將精神抑制藥轉化為其硫醇衍生物。根據所述優(yōu)選實施方案的另一特征，有機酸殘基通過酰胺鍵與精神抑制藥殘基共價連接，并且該方法還包括在反應前將有機酸轉化為其酰氯衍生物和將精神抑制藥轉化為其胺類衍生物。上述方法中所用的有機酸和精神抑制藥優(yōu)選來自于上述本發(fā)明的有機酸殘基和精神抑制藥殘基。
當有機酸為含游離氨基基團的GABA促進劑時，該方法還包括在反應前將該游離氨基基團用保護基保護，以便通過與精神抑制藥共價連接的有機酸的氨基保護殘基的反應和得到與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸的氨基保護殘基之后除去保護基而得到。優(yōu)選地，該方法還包括在反應前將有機酸轉化為其酰基咪唑化合物。
本發(fā)明通過提供一種新的和有效的精神抑制藥化學共軛物而成功地克服了目前已知構型的缺點，該共軛物在治療和預防精神性和/或增殖性紊亂和疾病以及用作化學敏化劑中可最小限度地引起有害的副作用。
附圖簡述此處僅通過實施例、并參考附圖描述本發(fā)明?，F在具體參考詳細的附圖，應當強調的是，細節(jié)以實施例的方式給出，并且僅用于解釋本發(fā)明優(yōu)選實施方案的討論，并且出于假定其確信為最有用的和易于理解本發(fā)明原則和概念方面的說明的原因而給出。在此方面，沒有試圖給出比原則性理解本發(fā)明所必需的細節(jié)更詳細的本發(fā)明的結構細節(jié)，實際中可以具體化帶有使本領域技術人員清楚本發(fā)明的多種形式的附圖的說明。
附圖中附

圖1a和1b顯示了通過構效關系(SAR)研究得到的條形圖和曲線圖，其表示了在腹膜內注射5mg/Kg體重奮乃靜和等摩爾劑量的其化學共軛物的大鼠中，奮乃靜及其根據本發(fā)明的化學共軛物(AN167、AN168和AN130)對總強直性昏厥(圖1a)和對催乳素血中濃度(圖1b)的影響。
附圖2為表示在用5mg/Kg奮乃靜及其等摩爾劑量的根據本發(fā)明的化學共軛物治療的大鼠中總強直性昏厥的條形圖(SAR研究)；附圖3a和3b的條形圖和曲線圖表示了奮乃靜(5mg/Kg)、氯奮乃靜(7.5mg/Kg)及它們根據本發(fā)明的化學共軛物(AN167，AN168，AN180和AN187)(等摩爾劑量給予)對大鼠總強直性昏厥的影響(圖3a)以及奮乃靜、氯奮乃靜及它們的GABA化學共軛物AN168和AN187對大鼠催乳素血中濃度的影響(圖3b)。
附圖4a-b為表示大鼠中強直性昏厥時間過程的比較曲線圖，所述強直性昏厥由奮乃靜及其根據本發(fā)明的化學共軛物(圖4a)和氯奮乃靜及其及其根據本發(fā)明的化學共軛物(圖4b)引起；附圖5a和5b的條形圖和比較曲線圖表示了本發(fā)明的奮乃靜與GABA(化合物AN168)化學共軛物以及等劑量奮乃靜與GABA的混合物對大鼠強直性昏厥的影響；附圖6為表示本發(fā)明的化學共軛物AN167和AN168對大鼠強直性昏厥影響的條形圖(四個獨立試驗的平均值)；
附圖7a和7b的條形圖表示了化學共軛物AN168、等劑量奮乃靜和等劑量奮乃靜和GABA的混合物對大鼠強直性昏厥的影響，以2分鐘內達到靶點的動物百分數(圖7a)和動物達到靶點所需的時間(圖7b)測定；附圖8a和8b的比較曲線圖表示口服給予奮乃靜及其化學共軛物AN168對大鼠強直性昏厥的影響，以“鋼琴”測試測定(圖8b給出了在圖8a所示試驗3個月后進行的試驗中得到的數據)；附圖9a和9b的條形圖表示了大鼠中口服給予不同濃度的奮乃靜及其化學共軛物AN168引起的總強直性昏厥，以“鋼琴”測試測定(圖9b給出了在圖9a所示試驗3個月后進行的試驗中得到的數據)；附圖10a和10b的比較曲線圖表示了口服給予不同濃度的奮乃靜及其化學共軛物AN168對大鼠強直性昏厥時間過程的影響(圖10a)和對總強直性昏厥的影響(圖10b)，以24小時內的“鋼琴”測試測定；附圖11為表示口服給予不同濃度的奮乃靜和AN168對大鼠總強直性昏厥影響的條形圖，以“壁”測試測定；附圖12給出了表示口服給予奮乃靜和AN168對大鼠催乳素血中濃度影響的比較曲線圖；附圖13給出了表示奮乃靜及其根據本發(fā)明的化學共軛物AN130、AN167和AN168對B16鼠黑色素瘤細胞影響的比較曲線圖；附圖14給出了表示奮乃靜、AN168、GABA和長春新堿和順鉑對C6大鼠神經膠質瘤細胞存活能力影響的比較曲線圖；附圖15給出了表示奮乃靜、AN168、地塞米松對Jurkat T淋巴瘤細胞存活能力影響的比較曲線圖；附圖16給出了表示不同濃度的奮乃靜和AN168對用30μM長春新堿處理的C6大鼠神經膠質瘤細胞存活能力影響的條形圖；附圖17為表示順鉑(5-50μM)和順鉑(5-50μM)與AN168的聯(lián)合對C6大鼠神經膠質瘤細胞存活能力影響的條形圖；附圖18為表示奮乃靜、AN168和順鉑對C6大鼠神經膠質瘤細胞DNA片段影響的條形圖；附圖19為表示奮乃靜及其化學共軛物AN130、AN167和AN168對正常腦細胞影響(IC50)的條形圖；
附圖20為表示等摩爾劑量奮乃靜和AN168對肌細胞影響的條形圖；和附圖21為表示在腹膜注射奮乃靜和本發(fā)明的AN167化合物的大鼠和死亡率時間過程的比較曲線圖。
發(fā)明詳述本發(fā)明為與有機酸共價連接的精神抑制藥化學共軛物，其制備方法，以及其在治療精神紊亂和疾病(例如但不局限于精神分裂癥)和增殖性紊亂和疾病(例如但不局限于腦腫瘤、腦轉移瘤、外周腫瘤、MDR癌癥和其它增殖性疾病)中以及作為化學敏化劑中的用途。
本發(fā)明的化學共軛物的原則和操作可參考附圖及相應的說明而更好地理解。
在詳細解釋本發(fā)明的至少一個實施方案之前，應當理解的是，本發(fā)明的申請不局限于下述說明中給出組分的詳細結構和排列，或者由實施例解釋。本發(fā)明可包括其它實施方案，或者能以多種方式實踐或完成。同樣應當理解的是，此處所用的詞組和術語是為了說明本發(fā)明而不應當看作是對本發(fā)明的限制。
當考慮到本發(fā)明，可以假定共價耦合了精神抑制藥(其也可具有抗增殖活性和/或化學敏化活性)與GABA促進劑或抗增殖劑的化學共軛物可表現出與最小的有害副作用有關的高度精神抑制活性和/或抗增殖治療活性以及化學敏化活性。
該假定的根本基礎如下精神紊亂和疾病如精神分裂癥可用多種類型的精神抑制藥治療，所述藥物可分為典型精神抑制藥、如神經安定藥和非典型精神抑制藥。然而，給予精神抑制藥一般伴隨有短期和長期的有害副作用，例如錐體外系癥狀(主要由典型精神抑制藥引起)和粒細胞缺乏癥(主要由非典型精神抑制藥引起)。出現這些有害的副作用、尤其是出現錐體外系癥狀、可歸因于多巴胺能D1和D2受體中引起的失調和腦內GABA體系活性的降低。
因此，可以猜測，將精神抑制藥與GABA促進劑共價耦聯(lián)可生成具有精神抑制活性且副作用最小的化學共軛物。
特別地，可以假定精神抑制藥與GABA促進劑的耦聯(lián)在此方面是非常有利的，既然其可生成同時具有精神抑制活性和增加GABA活性的化合物。
已知GABA體系活性的增加可減少由精神抑制藥引起的副作用，并且還可具有與GABA體系有關的其它治療優(yōu)點(例如情緒穩(wěn)定和放松)，所述的GABA體系活性的增加目前可通過給予GABA促進劑或類GABA化合物得到。已知GABA還可拮抗由精神抑制藥引起的多巴胺能受體敏感性增強。然而，某種GABA促進劑的給予受其親水性質的限制。
因此，還可假定，通過共價耦聯(lián)精神抑制藥和GABA促進劑而得的化學共軛物的特征在于(i)由精神抑制藥部分和GABA促進劑部分兩者引起的協(xié)同精神抑制活性和增加GABA活性；(ii)精神抑制藥引起的副作用減少；(iii)與源化合物相比，耦合的精神抑制藥與GABA促進劑穿過血腦屏障的藥動學性質改善；和(iv)對腦部多巴胺能受體較高的親和力，其從而可提高精神抑制活性。
此外，在現有技術中已知一些精神抑制藥、具體是神經安定藥如吩噻嗪、為有效的抗增殖劑，并且當與化療藥聯(lián)合使用時還可用作化學敏化劑。因此，還可假定，將精神抑制藥和具有抗增殖活性的化學部分共價耦合的化學共軛物具有更高的抗增殖活性和/或化學敏化活性。在治療增殖性紊亂和疾病、尤其是在腦部的增殖性紊亂和疾病時，該化學共軛物是非常有利的，其歸因于精神抑制藥衍生物對腦部受體的親和力以及其改善的腦部藥動學性質。
當實際應用本發(fā)明時，如下述實施例部分中另外解釋的，發(fā)現將精神抑制藥和為了減少由精神抑制藥引起的副作用而選擇的化學部分、如GABA促進劑、或為了產生精神抑制活性而選擇的化學部分共價耦聯(lián)，可生成具有下述協(xié)同特征的化學共軛物(i)有害副作用最??；(ii)高度精神抑制活性；(iii)高度抗增殖活性；(vi)高度化學敏化活性；和(iv)毒性降低，所有這些特征與已知的精神抑制藥相比。包括GABA促進劑的化學共軛物還以協(xié)同的精神抑制活性和GABA誘導活性為特征。
因此，根據本發(fā)明，化學共軛物可用于治療精神紊亂或疾病，以及作為抗增殖劑和/或作為化學敏化劑用于增殖性紊亂和疾病。根據本發(fā)明，用于治療精神性和/或增殖性紊亂和疾病的每種化學共軛物包括與第二化學部分共價連接的第一化學部分。第一化學部分是精神抑制藥殘基，而第二化學部分是為了減少當給予精神抑制藥本身時而引起的副作用和/或為了產生抗增殖活性而選擇的有機酸。
如此處所用的，術語“化學部分”指來源于化學化合物的殘基，該殘基保持其功能。
術語“殘基”此處指與其它分子共價連接的分子主要部分，如本領域普遍接受的。
因此，術語“精神抑制藥殘基”指與其它化學部分共價連接的精神抑制藥主要部分，該術語如上定義。
本發(fā)明的精神抑制藥殘基來源于典型精神抑制藥或非典型精神抑制藥，包括例如氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯哌噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、苯哌利多殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
根據本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，精神抑制藥殘基還可具有抗增殖活性。該雙功能精神抑制藥包括例如吩噻嗪及其衍生物。
根據本發(fā)明的另一優(yōu)選實施方案，精神抑制藥殘基還可具有化學敏化活性。該雙功能精神抑制藥包括例如吩噻嗪及其衍生物、如此處所用的術語“化學敏化性”指當有化學敏化劑存在時，與沒有化學敏化劑存在時化療藥產生的細胞毒性水平相比，所測得的化療藥對癌癥細胞、尤其是多耐藥性癌癥細胞的細胞毒性增加或提高。
此處可互換使用的術語“化學敏化劑”和“化學敏化劑”描述了使癌癥細胞對化療藥更敏感的化合物。
如上所指出的，根據本發(fā)明，精神抑制藥與第二化學部分、即有機酸殘基共價耦聯(lián)。
如此處所用的短語“有機酸殘基”指來源于含游離羧酸基團的有機酸的殘基，所述殘基如本文定義。
術語“游離羧酸基團”包括其質子化、離子化或鹽狀態(tài)的“-C(＝O)OH”基團。
根據本發(fā)明，或者為了減少當精神抑制藥單獨給藥時引起的副作用，或者為了產生抗增殖活性，選擇有機酸殘基。根據本發(fā)明，有機酸殘基可以例如是具有同時-R-C(＝O)-的殘基，其中R可例如是含1-20個碳原子的烴類殘基。
如此處所用的術語“烴類”指包括碳原子和氫原子共價連接的鏈作為其基本骨架的有機化合物。
因此，本發(fā)明的烴類殘基可以是烷基或環(huán)烷基。
如此處所用的術語“烷基”指含直鏈和支鏈基團的脂肪烴。優(yōu)選烷基基團含1-20個碳原子。
無論何時此處提到數目范圍，例如“1-20”，其指當為烷基基團時，該基團可含1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等等，直到含20個碳原子。更優(yōu)選的，烷基為含1至10個碳原子的中等大小的烷基。更優(yōu)選的，烷基含3至5個碳原子。
如此處所用的術語“環(huán)烷基”包括全碳的單環(huán)或稠環(huán)(即共享相鄰碳原子對的環(huán))基團，其中一個或多個環(huán)不含有完全共軛的π電子體系。環(huán)烷基基團非限制性的實例包括環(huán)丙烷、環(huán)丁烷、環(huán)戊烷、環(huán)戊烯、環(huán)己烷、環(huán)己二烯、環(huán)庚烷、環(huán)庚三烯和金剛烷。
根據本發(fā)明，烴類殘基可以是直鏈或支鏈的。烴類殘基還可以是飽和或未飽和的。當烴類殘基為未飽和的時，其碳鏈中可包括雙鍵或三鍵。未飽和的烴類殘基還可包括芳基。
如此處所用的“芳基”基團指全碳單環(huán)或稠環(huán)的多環(huán)(即共享相鄰碳原子對的環(huán))基團有完全共軛的π電子體系。芳基基團非限制性的實例包括苯基、萘基和蒽基。
烴類殘基還可以是取代的或未取代的。當為取代的時，取代基可例如是烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜脂肪烴、羥基、烷氧基、芳氧基、氰基、鹵素、氧代、酰氨基和氨基。
“雜芳基”基團指環(huán)中含一個或多個原子、如例如氮、氧和硫的單環(huán)或稠環(huán)基團(即共享相鄰碳原子對的環(huán))，并且另外含有完全共軛的π電子體系。雜芳基基團非限制性的實例包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、惡唑、噻唑、吡唑、嘧啶、喹啉、異喹啉和嘌呤。雜芳基基團可以是取代或未取代的。當為未取代的時，取代基基團可以例如是烷基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、氰基、鹵素、氧代、酰氨基和氨基。
“雜脂肪基”基團指環(huán)中含一個或多個原子如氮、氧和硫的單環(huán)或稠環(huán)基團。該環(huán)也可含有一個或多個雙鍵。此外，該環(huán)不含有完全共軛的π電子體系。雜脂肪基可以是取代或未取代的。當為取代的時，取代基基團可以例如是烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、三鹵素甲基、羥基、烷氧基、芳氧基、氰基、氧代、酰氨基和氨基。
“羥基”基團指-OH基團。
“烷氧基”基團指如此處定義的-O-烷基和-O-環(huán)烷基兩者。
“芳氧基”基團指如此處定義的-O-芳基和-O-雜芳基兩者。
“氧代”基團指-C(＝O)-R’基團，其中R’例如可以是烷基、環(huán)烷基或芳基。
“鹵素”基團指氟、氯、溴或碘。
“三鹵素甲基”基團指-CX3-基團，其中X為如此處定義的鹵素基團。
“氨基”基團指-NH2基團。
“酰氨基”基團指-C(＝O)NRaRb基團，其中Ra和Rb可例如是氫、烷基、環(huán)烷基和芳基。
根據本發(fā)明，烴類殘基還可包括分布在其鏈中的一個或多個雜原子。雜原子例如是氧、氮和/或硫。
烴類殘基還可以是具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中Z例如可以是單鍵或如上所述的取代或未取代烴類殘基；R2例如可以是氫或含1-10個碳原子的烷基殘基；R3例如可以是氫或如上定義的烴類殘基。
因此，由其能得到本發(fā)明的有機酸殘基的有機酸的代表性實例包括乙二酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、馬來酸、富馬酸、鄰苯二甲酸、異鄰苯二甲酸、四鄰苯二甲酸、丁酸、4-苯基丁酸、4-氨基丁酸(GABA)、戊酸、丙酸、視黃酸、乙酰水楊酸和布洛芬。
根據本發(fā)明目前最優(yōu)選的實施方案，化學共軛物的第二化學部分為GABA促進劑殘基。
如此處所用的短語“GABA促進劑殘基”指GABA促進劑的殘基，該術語如上定義，而術語“GABA促進劑”描述了能活化腦內GABA體系并且因此與GABA藥理學相關的化合物。術語“GABA促進劑”因此可理解為包括GABA本身，而術語“GABA促進劑殘基”因此可理解為包括GABA本身的殘基。
因此，根據本發(fā)明，GABA促進劑殘基除了GABA(γ-氨基丁酸)殘基本身外，還包括其它能與精神抑制藥共價耦聯(lián)的GABA促進劑的殘基。
該GABA促進劑殘基的實例包括(±)巴氯芬殘基、六氫異煙酸殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞磷酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
根據本發(fā)明目前優(yōu)選的另一實施方案，本發(fā)明的化學共軛物中的第二化學部分為抗增殖劑殘基。
如此處所用的術語“抗增殖劑殘基”指以抗增殖活性為特征的化合物的殘基，所述殘基如此處定義。
根據本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，抗增殖劑為丁酸或4-苯基丁酸。已知這些化合物可產生抗癌活性，并且還以GABA為其衍生物的化合物為特征，并此因此還可作為GABA模擬藥起作用。
因此，本發(fā)明的化學共軛物的第二化學部分包括有機酸殘基，所述的有機酸殘基優(yōu)選為GABA促進劑殘基或抗增殖劑殘基，這些術語如上定義且如上舉例。
本發(fā)明化學共軛物的第二化學部分優(yōu)選通過酯鍵與第一化學部分共價連接。酯鍵可以是羧酸酯鍵、酰氨鍵或硫酯鍵。
如此處所用的短語“羧酸酯鍵”包括“-O-C(＝O)-”鍵。
短語“酰氨鍵”包括“-SH-C(＝O)-”鍵。
已知該酯鍵可被腦源酶氫碘化(hydrolizable)，例如酯酶和酰氨酶，因此可假定并進一步通過此處描述的實驗結果(例如見附圖5a-b)證明本發(fā)明的化學共軛物可作為在腦內代謝的前藥起作用，并且因此可同時釋放精神抑制藥和有機酸，因此，而使精神抑制藥和有機酸具有有利的共同藥動學性質。
該方法具有很大的優(yōu)點，因為其提供了(i)精神抑制藥和有機酸同時作用，其協(xié)同地減少了由藥物引起的副作用并具有兩部分的雙重功能；(ii)前藥與多巴胺能受體的親和力較高，其導致對腦增殖性疾病具有較高的協(xié)同精神抑制活性和較高的協(xié)同抗增殖活性；和(iii)兩個化學部分的腦穿透性改善。
另一方面，本發(fā)明還提供了一種合成如上所述的化學共軛物的方法。該方法通常通過將有機酸與精神抑制藥反應、以獲得與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基而完成。
其中，術語“有機酸的殘基”和“精神抑制藥的殘基”分別與術語“有機酸殘基”和“精神抑制藥殘基”等同，如這些術語在上文中定義的。對熟練技術人員顯而易見的是，將有機酸與精神抑制藥反應，從而在它們之間形成共價連接，生成包括有機酸殘基和精神抑制藥殘基的終產品。
因此，在本發(fā)明該方面的方法中反應的有機酸包括任何與如上所述的有機酸殘基相應的化合物，并此因此可包括如上所述的有機酸殘基來源于其的所有有機酸。
例如，可用于本發(fā)明該方面內容中的有機酸包括與如上所述優(yōu)選的GABA促進劑殘基相應的GABA促進劑。同樣的，有機酸可包括抗增殖劑，如丁酸和4-苯基丁酸，其與如上所述的抗增殖劑殘基相對應。
同樣的，與在本發(fā)明該方面的方法中反應的精神抑制藥與如上所述的任意精神抑制藥殘基相對應。
如上所述的合成本發(fā)明的化學共軛物的方法還可根據所用有機酸的類型和/或有機酸殘基與精神抑制藥殘基之間的共價連接的類型而進行。
如上所詳細討論的，本發(fā)明優(yōu)選的有機酸例如包括，抗增殖劑如丁酸及其衍生物，具有通式R-C(＝O)-OH(與有機酸殘基R-C(＝O)-O相應)的有機酸等等。這些優(yōu)選的有機酸大多數不包括游離氨基基團，并且因此不需要其它操作而用于本發(fā)明的合成。
如上所另外詳細討論的，在本發(fā)明的化學共軛物中，有機酸殘基和精神抑制藥殘基通過酯鍵共價連接，所述的酯鍵為羧酸酯鍵、硫酯鍵或酰胺鍵，如這些術語在上文中所定義的。
當殘基通過羧酸酯鍵共價連接時，合成本發(fā)明的化學共軛物的方法優(yōu)選通過首先將有機酸轉化為其相應的酰氯衍生物、從而活化有機酸的方式進行。接著按照所熟知的親核加成反應，將酰氯衍生物與通常含有游離羥基的精神抑制藥反應，以得到含有通過羧酸酯鍵與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基的預期化學共軛物。該反應優(yōu)選在堿性條件下進行，以活化精神抑制藥和/或中和以其鹽酸鹽形式存在的化合物。然而，有機酸和/或精神抑制藥可通過其它任意已知的方法活化。
當殘基通過硫酯鍵共價連接時，合成本發(fā)明的化學共軛物的方法優(yōu)選通過將精神抑制藥轉化為其相應的硫醇衍生物和將有機酸轉化為其酰氯衍生物或其任意的其它活化衍生物來進行。接著通過熟知的方法將硫醇化合物與活化的有機酸反應，以得到含通過硫酯鍵與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基的預期化學共軛物。應當注意的是，一些目前已知的精神抑制藥含有游離的硫醇基團，并且因此該化合物可直接與有機酸的酰氯衍生物反應。不含游離硫醇基團的精神抑制藥易于通過本領域熟知的方法反應，從而得到其硫醇衍生物。
當殘基通過酰胺鍵共價連接時，合成本發(fā)明的化學共軛物的方法優(yōu)選首先將有機酸轉化為其相應的酰氯衍生物以活化有機酸和還通過將精神抑制藥轉化為其酰胺衍生物來進行。接著通過熟知的親核加成反應或其它任意已知的生成酰胺鍵的方法將酰氯衍生物與精神抑制藥的氨基基團反應，以得到含通過酰胺鍵與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基的預期化學共軛物。應當注意的是，一些目前已知的精神抑制藥含有游離的氨基基團，并且因此該化合物可直接與有機酸的酰氯衍生物反應。不含游離氨基基團的精神抑制藥易于通過本領域熟知的方法反應，從而得到其酰胺衍生物。
當有機酸不含有游離氨基基團時，上述方法特別有效。然而，當有機酸中含有有機氨基基團時，例如為GABA促進劑時，在上述與精神抑制藥的反應中，氨基基團應當被保護起來。由于游離氨基基團是具有相對化學活性、因此會違愿地參與反應的基團，因此需要將游離基團進行保護。
因此，合成含具有游離氨基基團的GABA促進劑殘基的化學共軛物的優(yōu)選方法優(yōu)選首先通過將游離氨基基團進行保護而進行。保護氨基基團可通過將有機酸與已知的保護基反應而進行，所述的保護基例如然而不限制于叔丁氧羰基(Boc)和苯氧羰基(Cbz)。接著將氨基保護的有機酸與精神抑制藥反應，從而得到與精神抑制藥殘基共價連接的氨基保護的有機酸殘基。接著除去保護基。此外還優(yōu)選將氨基包含的有機酸轉化為其酰咪唑衍生物，從而在與精神抑制藥反應前將有機酸活化。
根據本發(fā)明還提供了含本發(fā)明的化學共軛物作為活性成分的藥物組合物。
如此處所用的“藥物組合物”指含一種或多種此處描述的化學共軛物以及其它化學組分如可藥用載體和賦形劑的制劑。藥物組合物的目的是為了使化合物易于對患者給藥。
下文中，術語“可藥用載體”指對患者不引起顯著刺激、不消除所給予化合物的生物活性和性質的載體或稀釋劑。所述載體非限制性的實例為丙二醇、鹽水、有機溶劑與水的乳劑和混合物。
此處術語“賦形劑”指加入藥物組合物中、使化合物易于給藥的惰性物質。賦形劑非限制性的實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和淀粉類型、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。
根據本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，藥物載體為乳酸水溶液。
在此方面，應當指出的是，根據優(yōu)選實施方案，本發(fā)明的化學共軛物易溶于含水介質中，并且因此易于制備。該易于制備的性質使本發(fā)明的化學共軛物對已知的精神抑制藥酯共軛物而言，具有額外的優(yōu)點，所述的已知精神抑制藥酯共軛物通常含有長鏈脂肪酸且因此不溶于水性介質，因而以油性制劑給藥。
制備和給予藥物的技術可在“Remington’s PharmaceuticalSciences(Remington’s制藥科學)”Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版本中找到，其此處引入作為參考。
適宜的給藥途徑例如包括口服，直腸，透粘膜，透皮，腸內或非胃腸道轉運，包括肌內、皮下、髓內注射和鞘內注射、直接心室內注射、靜脈注射、腹膜內注射、鼻內或眼球內注射。本發(fā)明的藥物組合可通過本領域眾所周知的方法制備，例如通過常規(guī)的混合、溶解、制粒、糖包衣、研磨、乳化、膠囊、裹入或冷凍干燥方法制備。
用于本發(fā)明的藥物組合物可通過常規(guī)方法、使用一種或多種含賦形劑和輔助劑的可藥用載體來制備，所述的可藥用載體可使活性化合物易于加工成可藥用制劑。適當的制劑取決于所選擇的給藥途徑。
對于注射液，本發(fā)明的化學共軛物可制成水性溶液，優(yōu)選為可生物兼容的緩沖液，如Hank’s溶液、Ringer’s溶液、或含或不含有機溶劑如丙二醇、聚乙二醇的生理鹽水緩沖液。對于透粘膜給藥，可在制劑中使用滲透促進劑。該滲透促進劑在本領域通常是已知的。
對于口服給藥，所述化學共軛物可通過將活性化合物與本領域熟知的可藥用載體聯(lián)合來制備。該載體可使本發(fā)明的共軛物制成對患者口服給藥的片劑、烷基、糖衣片、膠囊、液體、凝膠、糖漿、膏劑、懸浮液等等。用于口服的藥物組合物可通過如下制備使用固體賦形劑，可選將所得混合物研磨，如果需要的話，加入適宜的輔助劑，之后加工顆?；旌衔?，得到片劑或糖衣片芯。適宜的賦形劑具體是填充劑，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纖維素產品，如例如玉米淀粉、小麥淀粉、米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、西黃葺膠、甲基纖維素、羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或可生物兼容的聚合物如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果希望的話，可加入分散劑，例如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、海藻酸或其鹽如海藻酸鈉。
糖衣片芯有適宜的包衣。為此目的，可使用濃縮的糖溶液，其可任意的含有阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、carbopol gel、聚乙二醇、二氧化鈦、漆溶液和適宜的有機溶劑或溶劑混合物。片或糖衣片包衣液中可加入染料或色素，以區(qū)分或賦予活性化合物不同劑量聯(lián)合以特征。
可口服使用的藥物組合物包括由明膠制成的推入配合膠囊和由明膠和增塑劑如丙三醇或山梨醇制成的密封軟膠囊。推入配合膠囊可含有與填充劑如乳糖、粘合劑如淀粉、潤滑劑如滑石粉或硬脂酸鎂和任選穩(wěn)定劑混合的活性成分。軟膠囊中，活性成分可溶解或懸浮于適宜液體中，如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。此外還可加入穩(wěn)定劑。所有用于口服給藥的制劑應當是適于所選擇給藥途徑的劑型。
對于口腔給藥，組合物可以是以常規(guī)方法制成的片或錠的形式。
對于吸入給藥，用于本發(fā)明的化學共軛物可以以下方式方便地轉運使用適宜的拋射劑如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷或二氧化碳從加壓罐或霧化罐中噴射出氣溶膠噴霧。當為加壓氣溶膠時，單位劑量可通過轉運定量劑量的閥來確定。膠囊和藥液桶、如用于吸入器或吹入器的明膠膠囊和藥液桶可制成含化合物和適宜粉末基質如乳糖或淀粉的粉末混合物。
此處描述的化學共軛物可制成用于非胃腸道給藥的形式，例如通過推注或輸注給藥。注射用制劑可以是單位劑量形式，例如在安瓿或多劑量容器，任選加入防腐劑。組合物可以是懸浮液、溶液或油性或水性介質中的乳劑，還可含有制藥組分，如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。
用于非胃腸道給藥的藥物組合物包括含水溶性形式的活性化合物的水溶液。此外，可將活性化合物的懸浮液制成適宜的油性注射懸浮液。適宜的親脂性溶劑或載體包括脂肪油如芝麻油，或者合成脂肪酸酯，如油酸乙酯、甘油三酯或脂質體。水性注射懸浮液可含有能增加懸浮液粘度的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或右旋糖酐。懸浮液可選還含有適宜的穩(wěn)定劑或能增加共軛物溶解度、從而能制備高濃縮溶液的物質。
可選擇地，活性成分使用前可以是用于與適宜載體、例如無菌無熱原的水、組成組分的粉末形式。
本發(fā)明的化學共軛物也可使用如常規(guī)栓劑基質、如可可酯或其它甘油酯制成直腸組合物，如栓劑或保留灌腸。
此處描述的藥物組合物也可含有適宜的固態(tài)凝膠相載體或賦形劑。該載體或賦形劑的實例包括但不局限于碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖、淀粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物如聚乙二醇。
適合用于本發(fā)明上下文中的藥物組合物包括其中含有有效量的活性成分、以達到預期目的組合物。更具體的，藥物有效量指化學共軛物能有效防止、緩和或改善疾病癥狀或延長所治療患者生命的量。
確定治療有效量是在本領域技術人員能力范圍內的，特別是參考此處詳細公開的內容。
對于本發(fā)明的方法中所用的任意化學共軛物，治療有效量或劑量最初可從細胞培養(yǎng)物和/或動物的活性分析中估計。例如，劑量可制成在動物模型能達到包括通過活性分析測定的IC50(例如達到半數抑制增殖活性的測試化合物的濃度)在內的循環(huán)濃度范圍的量。該信息可用于更精確地測定在人中的有用劑量。
此處描述的化學共軛物的毒性和治療效果可在實驗動物中通過標準藥學方法來測定，例如通過測定目標化合物的IC50和LD50(測試動物50％致死的劑量)來測定。從這些活性分析和動物研究中得到的數據可用于確定對人的劑量范圍。
劑量可根據所用劑型和所采用的給藥途徑而變化?？捎伤饺酸t(yī)師根據患者的狀況選擇正確的制劑、給藥途徑和劑量。(例如參見Fingl等人，1975，“The Pharmacological Basis of Therapeutica(治療的藥理學基礎)“第一章，第一頁)。
可根據個體調節(jié)劑量和給藥間隔，以得到活性部分足以維持精神抑制和/或抗增殖效應的血漿濃度，術語稱之為最低有效濃度(MEC)。每種制劑的MEC可能不同，但可根據體外和/或體內數據估計，例如達到50％-90％抑制某種細胞增殖所需的濃度可使用此處所述的分析確定。達到MEC所需的劑量取決于個體的性質和給藥途徑。HPLC分析或生物分析法可用于檢測血漿濃度。
給藥間隔也可使用MEC值來確定。制劑應當按照能維持血漿濃度在10％-90％的時間、優(yōu)選為30％-90％、最優(yōu)選50％-90％的時間內高于MEC的方案給藥。
根據所治療病情的嚴重程度和響應性，也可以是在長達幾天至幾個星期或直到治愈或疾病狀態(tài)消除的治療過程中，單次給予上述緩釋組合物。
當然，所給予組合物的量可根據所治療患者、痛苦的嚴重程度、給藥方式、處方醫(yī)師的判斷等等而變化。
如果希望的話，本發(fā)明的組合物可放在包裝或配藥裝置中，如FDA認可的成套包裝中，所述的包裝或配藥裝置可含一種或多種含活性成分的單位劑量形式。包裝例如可含有金屬或塑料薄片，如透明包裝。包裝或配藥裝置中還可有給藥說明。包裝或配藥裝置中也可有與政府代理商規(guī)范的藥廠給出的容器形式、藥物的使用或銷售有關的注意事項，該注意事項可反映代理商對組合物形式或對人或獸給藥的認可。該注意事項例如是貼美國食品藥品監(jiān)督管理局對處方藥物認可的標簽，或者是認可的產品插入。也可制備含有本發(fā)明的化學共軛物的組合物，放于適宜容器中并標記出所治療的適應癥，其中本發(fā)明的化學共軛物與相容的藥物載體一起制備。標簽上適宜的適應癥包括例如治療精神分裂癥、妄想癥、兒童精神病、亨延頓氏舞蹈病和吉累斯·德拉圖雷特氏綜合征、腦增殖性疾病和MDR癌癥和化學敏化作用，如這些術語在上文中定義的。
因此，根據本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，該藥物組合物可包裝在包裝材料中，并且可通過包裝材料上或其中的印刷加以區(qū)分，用于治療精神紊亂或疾病，用于治療腦或外周增殖性紊亂或疾病，用于治療癌如MDR癌癥，和/或在與化療藥聯(lián)合和/或在化學敏化作用是有利的醫(yī)療條件下用于化學敏化作用。
根據本發(fā)明，還提供了在患者(例如人)中治療或預防精神紊亂或疾病的方法。該方法通過給予所治療患者治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化學共軛物來進行。
如此處所用的術語“方法”指完成給定任務的方式、方法、技術和過程，包括但不局限于已知的或者化學、藥動學、生物學、生物化學和醫(yī)學領域的從業(yè)者易于從已知的方式、方法、技術或過程中得到的方式、方法、技術和過程。
此處，術語“治療”包括消除、基本上抑制、減緩或逆轉疾病的發(fā)展、基本上改善疾病的臨床癥狀或基本上預防疾病臨床癥狀的出現。
如此處所用的短語“精神紊亂或疾病”指由于中樞神經系統(tǒng)受損而以精神狀態(tài)為特征的紊亂或疾病。可用本發(fā)明的化學共軛物治療的精神紊亂或進步的實例包括但不局限于精神分裂癥、妄想癥、兒童精神病、亨延頓氏舞蹈病和吉累斯·德拉圖雷特氏綜合征。
如此處所用的術語“給藥”指將本發(fā)明的化學共軛物轉運到受精神紊亂或疾病影響的腦部區(qū)域或部位的方法。
本發(fā)明的化學共軛物可通過腹膜內給藥。更優(yōu)選地，可口服給藥。
術語“患者”指動物，主要是指有血腦屏障的哺乳動物，包括人。
術語“治療有效量”指所給予的化學共軛物能一定程度地緩和所治療精神紊亂或疾病的一種或多種癥狀的量。
根據本發(fā)明的方法，治療有效量優(yōu)選為1mg/kg體重至50mg/kg體重，更優(yōu)選為2mg/kg體重至30mg/kg，更優(yōu)選為2mg/kg體重至20mg/kg，最優(yōu)選為2mg/kg體重至10mg/kg。
因此本發(fā)明涉及具有精神抑制活性的化學共軛物。由于其具有增強的精神抑制活性且以由此引起的副作用最小為特征，本發(fā)明的化學共軛物具有很高的優(yōu)越性。
如此處所用的術語“副作用”指對患者給予某種藥物而出現的有害癥狀。所述癥狀例如包括錐體束外癥狀，如上詳細描述的，并且一般與給予精神抑制藥有關。
根據本發(fā)明，還提供了治療或預防患者(例如人)中增殖性紊亂或疾病的方法。該方法通過給予所治療患者治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化學共軛物而進行。
如此處所用的術語“增殖性紊亂或疾病”指以細胞增殖為特征的紊亂或疾病?？赏ㄟ^本發(fā)明預防或治療的細胞增殖病情例如包括惡性腫瘤如癌癥和良性腫瘤。
如此處所用的術語“癌癥”指各種類型的惡性贅生物，其中大多數可侵入周圍組織，并且可轉移至不同位點，如Stedman’s medicaldictionary第25版(Hensyl ed.1990)中定義的。可用本發(fā)明的化學共軛物治療的癌癥的實例包括但不局限于腦癌和皮膚癌。這些癌癥還可細分。例如，腦癌包括多形性惡性膠質瘤、多形性成膠質細胞瘤、星形細胞瘤、室管膜瘤(ependyoma)、間膠質瘤、成神經管細胞瘤、腦(脊)膜瘤、肉瘤、成血管細胞瘤、松果腺薄壁組織(pinealparenchymal)。同樣，皮膚癌也包括黑素瘤和Kaposi’肉瘤。其它可用本發(fā)明的化學共軛物治療的癌癥疾病包括乳頭狀瘤、胚神經膠質瘤(blastoglioma)、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀上皮細胞癌、星形細胞瘤、頭癌、頸癌、膀胱癌、乳腺癌、肺癌、結腸直腸癌、甲狀腺癌、胰腺癌、胃癌、肝細胞癌、非白血性白血病、淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤。其它非癌性增殖性疾病也可用本發(fā)明的化學共軛物治療。該非癌性增殖性疾病包括例如狹窄、再狹窄、支架狹窄、血管移植再狹窄、關節(jié)炎、風濕性關節(jié)炎、糖尿病性視網膜病、血管生成、肺纖維化、肝硬化、動脈粥樣硬化、腎小球性腎炎、糖尿病性腎炎、凝血性微血管病綜合癥和移植排斥反應。
如下述實施例部分所證明的，本發(fā)明的化學共軛物對廣譜癌癥細胞、包括NDR癌癥細胞具有高的和有力的抗增殖活性。
如下述實施例部分所另外證明的，當本發(fā)明的化學共軛物與各種化療藥聯(lián)用時，還表現出化學敏化活性。
因此，根據本發(fā)明還提供了化學敏化活性的方法，如該術語在上文中所定義的。該方法通過給予患者治療有效量的一種或多種化療藥和化學敏化有效量的本發(fā)明的化學共軛物來進行。
如此處所用的，短語“化學敏化有效量”指當有治療量化療藥存在時足以產生可測定的化學敏化作用的量。
當患者患有MDR癌癥、例如但不局限于非白血性白血病、淋巴瘤、癌瘤或肉瘤時，該方法特別有效。根據本發(fā)明，化療藥例如可以是下述之一烷化劑，如氮芥、乙撐亞胺、安乃近、烷基磺酸鹽、亞硝脲、三氮烯；抗代謝藥，如葉酸類似物、嘧啶類似物和嘌呤類似物；天然產物，如長春花堿、鬼臼乙叉甙、抗生素、酶、紫杉醇、生物應答調節(jié)劑；各種藥物如鉑配合物、蒽二酮(anthracenedione)、蒽環(huán)類抗生素、取代脲、甲肼衍生物或腎上腺皮質抑制劑；或激素或拮抗劑，如腎上腺皮質類固醇、黃體酮、雌激素、抗雌激素藥、雄激素、抗雄激素藥或促性激素釋放激素類似物?；熕巸?yōu)選為氮芥、鬼臼乙叉甙、抗生素或鉑配合物。優(yōu)選的化療藥為順鉑和長春新堿(vincistine)。
因此，本發(fā)明教導了精神抑制藥的新的化學共軛物，其與相應的非軛合精神抑制藥相比，可產生較高的抗增殖活性，且副作用基本上較少、毒性較低。這些新的共軛物還表現出抗增殖活性和化學敏化活性，因此可作為以減少副作用、毒性降低和對腦細胞有較高親和力為特征的前藥、或者作為與化療藥聯(lián)用的化學敏化劑而有利地用于治療增殖疾病。
通過下述非限制性實施例的解釋，本發(fā)明的其它目的、優(yōu)點和新特征對本領域普通技術人員來說是顯而易見的。另外，如上所述和如下述權利要求部分請求保護的本發(fā)明的多個實施方案和方面可從下述實施例參考下述實施例，所述實施例與上述說明一起非限制性地解釋本發(fā)明。
化學合成及分析本發(fā)明的示范化學共軛物如下合成將神經安定藥吩噻嗪和氟奮乃靜與短鏈脂肪酸丙酸、丁酸和戊酸以及和4-苯基丁酸和γ-氨基丁酸(GABA)反應。制備得高產率的化合物，并分離出結晶固體，溶解于1％乳酸水溶液中。
由吩噻嗪或氟奮乃靜以及有機酸制備的化學共軛物的合成—一般方法將神經安定藥吩噻嗪或氟奮乃靜(1當量)、短鏈脂肪酸的酰氯衍生物(1.1當量)和可選Et3N(2當量)(用于使原料的鹽酸鹽游離出)在5-10ml二甲基酰胺(DMF)的混合物于室溫、氮氣氛圍下攪動24小時。接著將混合物于乙酸乙酯和水中分配。之后有機層用5％NaHCO3和鹽水沖洗，MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)，得到預期產品。
4-苯基丁酸吩噻嗪酯(AN130)的合成將吩噻嗪和4-苯基丁酰氯(4-苯基丁酸的酰氯)如上所述進行反應。所得殘基粗品用1∶10的甲醇∶乙酸乙酯的混合物作為洗脫液、通過硅膠色譜柱純化。得到黃色油狀產品(產率78％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.94(quint，J＝6Hz，4H，CO2CH2CH2，ArNCH2CH2)，2.32(t，J＝6Hz，2H，CO2CH2)，2.64(m，12H，six NCH2)，3.93(t，J＝5.6Hz，2H，ArNCH2)，4.17(t，J＝5.3Hz，2H，NCH2CH2O)，6.82-7.30(m，12H，Ar，Ph)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝23.25(CH2CH2CO2)，26.46(ArNCH2CH2)，33.56(CH2Ph)，35.06(CH2CO2)，45.10(ArNCH2)，52.23(two NCH2)，52.72(two NCH2)，55.25(ArNCH2CH2CH2)，57.04(NCH2CH2O)，61.32(NCH2CH2O)，116.00(C1，C10)，122.51(C3)，123.15(C8)，123.86(CH2C(CH)2)，125.13(C2)，126.02(p-Ph)，127.56(C9)，127.63(C7)，128.01(o-Ph)，128.41(m-Ph)，128.49(C4)，173.33(CO2)ppm.
MS(CI，i-Bu)m/z(％)＝550(MH+，1.7).
丁酸吩噻嗪酯(AN167)的合成將吩噻嗪和丁酰氯(丁酸的酰氯)如上所述進行反應。得到黃色油狀產品(產率74％)，不需要另外純化可直接使用。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.93(t，J＝7.36Hz，3H，Me)，1.63(sext，J＝7.44Hz，2H，CH2Me)，1.95(quint，J＝6.7Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.27(t，J＝7.46Hz，2H，CO2CH2)，2.43(m，10H，five NCH2)，2.57(t，J＝5.96Hz，2H，NCH2CH2O)，3.66(t，J＝5.96Hz，2H，ArNCH2)，4.18(t，J＝5.9Hz，2H，NCH2CH2O)，6.66(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝13.54(CH3CH2)，18.29(MeCH2)，24.06(ArNCH2CH2)，36.03(CH2CO2)，45.15(ArNCH2)，53.09(two NCH2)，53.23(two NCH2)，55.30(ArNCH2CH2CH2)，56.51(NCH2CH2O)，61.48(NCH2CH2O)，115.64(C1，C10)，122.02(C3)，122.69(C8)，123.27(C5)，124.52(C6)，127.23(C7)，127.29(C9)，127.68(C4)，133.00(C2)，14432(C12)，146.29(C11)，173.37(CO2)ppm.
MS(CI，NH3)m/z(％)＝473(M+，100)，474(MH+，82.64).
丙酸吩噻嗪酯(AN170)的合成將吩噻嗪和丙酰氯(丙酸的酰氯)如上所述進行反應。得到黃色油狀產品(產率85％)，不需要另外純化可直接使用。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(t，J＝7.53Hz，3H，Me)，1.95(quint，J＝6.8Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.32(q，J＝7.57Hz，2H，CO2CH2)，2.51(m，10H，fiveNCH2)，2.61(t，J＝5.95Hz，2H，NCH2CH2O)，3.89(t，J＝6.8Hz，2H，ArNCH2)，4.16(t，J＝9.92Hz，2H，NCH2CH2O)，6.98(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝9.01(CH3)，24.08(ArNCH2CH2)，27.44(CH2CO2)，45.18(ArNCH2)，53.09(two NCH2)，53.26(two NCH2)，55.32(ArNCH2CH2CH2)，56.50(NCH2CH2O)，61.63(NCH2CH2O)，115.67(C1，C10)，122.05(C3)，122.72(C8)，123.30(C5)，124.56(C6)，127.26(C7)，127.33(C9)，127.71(C4)，133.03(C2)，144.35(C12)，146.32(C11)，174.24(CO2)ppm.
MS(CI，NH3)m/z(％)＝459(MH+，100)，458(M，47.63).
戊酸吩噻嗪酯(AN178)的合成將吩噻嗪和戊酰氯(戊酸的酰氯)如上所述進行反應。所得殘基粗品用7∶4的乙酸乙酯∶己烷的混合物作為洗脫液、通過硅膠色譜柱純化。得到淺黃色油狀產品(產率75％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.86(t，J＝7.23Hz，3H，Me)，1.29(sext，J＝6.97Hz，2H，CH2Me)，1.56(quint，J＝7.09Hz，2H，CH2CH2CO2)，1.87(quint，J＝6.79Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.26(t，J-7.64Hz，2H，CH2CO2)，2.37(m，10H，five NCH2)，2.54(t，J＝5.93Hz，2H，ArNCH2)，4.14(t，J＝5.95Hz，2H，NCH2CH2O)，6.53-7.14(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝13.51(CH3CH2)，22.02(CH2Me)，23.89(CH2CH2Me)，26.82(ArNCH2CH2)，33.80(CH2CO2)，45.07(ArNCH2)，53.00(two NCH2)，53.16(two NCH2)，55.09(ArNCH2CH2CH2)，56.46(NCH2CH2O)，61.42(NCH2CH2O)，111.68(q，J＝3.77Hz，C1)，115.73(C10)，118.74(q，J＝3.77Hz，C3)，122.85(C8)，123.77(C6)，124.02(q，J＝272Hz，CF3)，127.20(C7)，127.29(C9)，127.42(C4)，129.34(q，J＝32Hz，C2)，129.69(C5)，144.08(C11)，145.51(C12)，173.45(CO2)ppm.
MS(CI/NH3)m/z(％)＝522(MH+，100).
丙酸氟奮乃靜酯(AN179)的合成將氟奮乃靜和丙酰氯(丙酸的酰氯)如上所述進行反應。得到淺黃色油狀產品(產率95％)，不需要另外純化可直接使用。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.12(t，J＝7.55Hz，3H，Me)，1.91(quint，J＝7.18Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.32(q，J＝7.56Hz，2H，CO2CH2)，2.45(m，10H，five NCH2)，2.59(t，J＝5.92Hz，2H，NCH2CH2O)，3.93(t，J＝7.12Hz，2H，ArNCH2)，4.17(t，J＝5.95Hz，2H，NCH2CH2O)，6.67-7.14(m，7H，Ar).
13C-NMR(CDCl3)δ＝8.91(Me)，23.87(ArNCH2CH2)，27.33(CH2CO2)，45.05(ArNCH2)，52.98(two NCH2)，53.17(two NCH2)，55.07(ArNCH2CH2CH2)，56.42(NCH2CH2O)，61.54(NCH2CH2O)，111.65(q，J＝3Hz，C1)，115.71(C10)，118.73(q，J＝3.77Hz，C3)，122.84(C8)，123.73(C6)，123.99(q，J＝272Hz，CF3)，127.18(C7)，127.27(C9)，127.41(C4)，129.30(q，J＝32Hz，C2)，129.65(C5)，144.05(C11)，145.48(C12)，174.10(CO2).
MS(CI/NH3)m/z(％)＝494(MH+，100).
丁酸氟奮乃靜酯(AN180)的合成將氟奮乃靜和丁酰氯(丙酸的酰氯)如上所述進行反應。得到淺黃色油狀產品(產率97％)，不需要另外純化可直接使用。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.93(t，J＝7.4Hz，3H，Me)，1.32(sext，J＝7.4Hz，2H，CH2Me)，1.92(quint，J＝7.18Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.27(t，J＝7.4Hz，2H，CO2CH2)，2.45(m，10H，five NCH2)，2.58(t，J＝5.9Hz，2H，NCH2CH2O)，3.93(t，J＝7.2Hz，2H，ArNCH2)，4.17(t，J＝5.98Hz，2H，NCH2CH2O)，6.67-7.13(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝13.42(CH3CH2)，18.20(MeCH2)，23.85(ArNCH2CH2)，35.92(CH2CO2)，45.02(ArNCH2)，52.97(two NCH2)，53.14(two NCH2)，55.04(ArNCH2CH2CH2)，56.43(NCH2CH2O)，61.39(NCH2CH2O)，111.62(q，J＝3Hz，C1)，115.68(C10)，118.68(q，J＝3.77Hz，C3)，122.80(C8)，123.70(C6)，123.98(q，J＝272Hz，CF3)，127.15(C7)，127.24(C9)，127.38(C4)，129.27(q，J＝32Hz，C2)，129.62(C5)，144.03(C11)，145.46(C12)，173.23(CO2)ppm.
MS(CI/CH4)m/z(％)＝507.18(M+，75.3)，508.18(MH+，57.57)，419.13(M-C4H8O2，82).
戊酸氟奮乃靜酯(AN181)的合成將氟奮乃靜和戊酰氯(戊酸的酰氯)如上所述進行反應。所得殘基粗品用7∶4的乙酸乙酯∶己烷的混合物作為洗脫液、通過硅膠色譜柱純化。得到淺黃色油狀產品(產率75％)。
1H-NMR.(CDCl3)δ＝0.86(t，J＝7.23Hz，3H，Me)，1.29(sext，J＝6.97Hz，2H，CH2Me)，1.56(quint，J＝7.09Hz，2H，CH2CH2CO2)，1.87(quint，J＝6.79Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.26(t，J-7.64Hz，2H，CH2CO2)，2.37(m，10H，five NCH2)，2.54(t，J＝5.93Hz，2H，ArNCH2)，4.14(t，J＝5.95Hz，2H，NCH2CH2O)，6.53-7.14(m，7H，Ar).
13C-NMR(CDCl3)δ＝13.51(Me)，22.02(CH2Me)，23.89(CH2CH2Me)，26.82(ArNCH2CH2)，33.80(CH2CO2)，45.07(ArNCH2)，53.00(two NCH2)，53.16(two NCH2)，55.09(ArNCH2CH2CH2)，56.46(NCH2CH2O)，61.42(NCH2CH2O)，111.68(q，J＝3.77Hz，C1)，115.73(C10)，118.74(q，J＝3.77Hz，C3)，122.85(C8)，123.77(C6)，124.02(q，J＝272Hz，CF3)，127.20(C7)，127.29(C9)，127.42(C4)，129.34(q，J＝32Hz，C2)，129.69(C5)，144.08(C11)，145.51(C12)，173.45(CO2).
MS(CI/NH3)m/z(％)＝522(MH+，100).
由吩噻嗪或氟奮乃靜以及氨基有機酸制備的化學共軛物的合成——一般方法將N-保護的氨基酸(1當量)和羰基二咪唑(CDI)(1.1當量)在5-10ml DMF中的混合物于氮氣氛圍下攪動1小時。之后加入吩噻嗪或氟奮乃靜(1當量)，該混合物于90℃、氮氣氛圍下攪動24小時。將所得漿液蒸發(fā)，于乙酸乙酯和水中分配。將水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，并用NaHCO3沖洗兩次，鹽水沖洗兩次，MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)。得到淺黃色油狀的N-保護產品。
N-保護基從產品中如下除去將4N HCl在乙酸乙酯中的溶液逐滴加入N-保護產品在乙酸乙酯中的溶液中。該混合物于室溫下攪動2小時。之后蒸發(fā)溶劑，殘余物于高真空中另外干燥。將所得三鹽酸鹽形式的產品在甲醇/乙醚混合物中重結晶，過濾和干燥。
N-boc-4-氨基丁酸吩噻嗪酯的合成將吩噻嗪與N-t-boc-GABA(N-t-boc-保護的4-氨基丁酸)如上所述進行反應。所得粗產品用20∶1的乙酸乙酯∶乙醇的混合物作為洗脫液、通過硅膠色譜柱純化。得到淺黃色油狀產品(產率63％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.43(s，9H，t-Bu)，1.82(quint，J＝7.18Hz，2H，CH2CH2NHBoc)，1.90(quint，J＝7.18Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.35(t，J＝8.97Hz，2H，CO2CH2)，2.42(m，10H，five NCH2)，2.60(t，J＝5.98Hz，2H，NCH2CH2O)，3.16(q，J＝6.85Hz，2H，CH2NHBoc)，3.84(t，J＝7.2Hz，2H，ArNCH2)，4.18(t，J＝5.98Hz，2H，NCH2CH2O)，5.10(bs，1H，NH)，6.83(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝23.92(CH2CH2NHBoc)，24.98(ArNCH2CH2)，28.21(t-Bu)，39.50(CH2CO2)，45.05(ArNCH2)，52.89(two NCH2)，53.03(twoNCH2)，55.15(ArNCH2CH2CH2)，56.34(NCH2CH2O)，60.13(CH2NHBoc)，61.29(NCH2CH2O)，78.80(CMe3)，115.60(C1，C10)，121.96(C3)，122.65(C8)，123.22(C5)，124.45(C6)，127.21(C7，C4)，127.62(C9)，132.93(C2)，144.23(C12)，146.23(C11)，155.79(NCO2)，172.92(CO2)ppm.
N-boc-4-氨基丁酸氟奮乃靜酯的合成將氟奮乃靜與N-t-boc-GABA(N-t-boc-保護的4-氨基丁酸)如上所述進行反應。所得粗產品用20∶1的乙酸乙酯∶乙醇的混合物作為洗脫液、通過硅膠色譜柱純化。得到淺黃色油狀產品(產率75％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.49(s，9H，t-Bu)，1.77(quint，J＝6.38Hz，2H，CH2CH2NHBoc)，1.90(quint，J＝6.96Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.35(t，J＝6.38Hz，2H，CO2CH2)，2.45(m，10H，five NCH2)，2.58(t，J＝5.8Hz，2H，NCH2CH2O)，3.14(q，J＝5.8Hz，2H，CH2NHBoc)，3.94(t，J＝6.38Hz，2H，ArNCH2)，4.2(t，J＝5.8Hz，2H，NCH2CH2O)，4.92(bs，1H，NH)，6.8-7.2(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝23.88(CH2CH2NHBoc)，25.07(ArNCH2CH2)，28.28(t-Bu)，39.60(CH2CO2)，45.13(ArNCH2)，52.94(two NCH2)，53.04(twoNCH2)，55.13(ArNCH2CH2CH2)，56.43(NCH2CH2O)，60.22(CH2NHBoc)，61.36(NCH2CH2O)，78.92(CMe3)，111.77(q，J＝3Hz，C1)，115.82(C10)，118.85(q，J＝3.77Hz，C3)，122.97(C8)，123.91(C6)，124.05(q，J＝272Hz，CF3)，127.30(C7)，127.39(C9)，127.52(C4)，129.42(q，J＝32Hz，C2)，129.82(C5)，144.12(C11)，145.58(C12)，155.82(NCO2)，173.01(CO2)ppm.
4-氨基丁酸吩噻嗪酯三鹽酸鹽的合成(AN168)將如上所述制得的N-boc-4-氨基丁酸吩噻嗪酯與如上所述的HCl反應。得到粘稠半固體油狀的三鹽酸鹽形式的產品(定量產率)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.93(quint，J＝7.14Hz，2H，CH2CH2NH2)，2.23(m，2H，ArNCH2CH2)，2.61(t，J＝7.14Hz，2H，CO2CH2)，3.01(m，2H，CH2NH2)，3.33(m，2H，ArNCH2CH2CH2)，3.48-3.87(m，10H，five NCH2)，4.10(t，J＝6.4Hz，2H，NCH2CH2O)，4.48(m，2H，ArNCH2)，7-7.31(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝22.34(CH2CH2NH2)，22.93(ArNCH2CH2)，31.11(CH2CO2)，39.56(CH2NH2)，44.76(ArNCH2)，49.42(two NCH2)，49.61(two NCH2)，55.29(ArCH2CH2CH2)，56.08(NCH2CH2O)，58.64(NCH2CH2O)，116.69(C10)，117.20(C1)，123.49(C3)，124.19(C8)，125.44(C5)，126.42(C6)，128.20(C7)，128.56(C9)，128.80(C4)，134.23(C2)，144.97(C12)，147.37(C11)，173.04(CO2)ppm.
MS(CI/CH4)m/z(％)＝403.09(MH+-C4H7NO，100)，489.18(MH+，1.7).
4-氨基丁酸氟奮乃靜酯三鹽酸鹽的合成(AN187)如上所述，將N-boc-4-氨基丁酸氟奮乃靜酯與HCl反應。得到白色固態(tài)產品(產率75％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.93(quint，J＝7.25Hz，2H，CH2CH2NH2)，2.29(quint，J＝5.42Hz，2H，ArNCH2CH2)，2.49(t，J＝7.14Hz，2H，CO2CH2)，2.99(t，J＝7.54Hz，2H，CH2NH2)，3.39(t，J＝4.87Hz，2H，ArNCH2CH2CH2)，3.40(t，J＝5.42Hz，2H，NCH2CH2N)，3.4-4.0(m，8H，four NCH2)，3.91(m，2H，NCH2CH2O)，4.18(t，J＝6.12Hz，2H，ArNCH2)，7.02-7.33(m，7H，Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3)δ＝22.76(ArNCH2CH2)，23.36(CH2CH2NH2)，31.49(CH2CO2)，39.96(CH2NH2)，45.21(ArNCH2)，49.57(two NCH2)，50.02(two NCH2)，55.72(ArNCH2CH2CH2)，56.48(NCH2CH2O)，58.99(NCH2CH2O)，113.41(q，J＝3.77Hz，C1)，117.80(C10)，120.70(q，J＝3.77Hz，C3)，124.89(C8)，126.24(C6)，125.59(q，J＝272Hz，CF3)，128.75(C7)，128.97(C9)，129.25(C4)，130.96(q，J＝32Hz，C2)，132.51(C5)，145.12(C11)，147.25(C12)，173.48(CO2)ppm.
MS(CI/CH4)m/z(％)＝523(MH+，0.5)，280(M-C14H9NF3S，100).
下述表1顯示了通過上述方法合成的化學共軛物。
表1
材料和試驗方法細胞系本研究中使用人前列腺癌(PC-3)、人結腸癌(HT-29)、鼠黑色素瘤(B-16)及其耐藥的亞克隆(B-16MDR)、小鼠纖維母細胞(3T3)、髓樣白血病(HL 60)及其耐藥的亞克隆(HL 60 MX2)、子宮內膜細胞系(MES SA)及其耐藥的亞克隆(MESDX5)、Jurkat T淋巴瘤和單核細胞白血病(U-937)。
大鼠纖維母細胞的原始培養(yǎng)物通過已知方法從新生大鼠中得到[7]。
神經元細胞和神經膠質細胞從ICR妊娠(14-15日)小鼠的胚胎腦髓中制備。分離出腦髓并在Leibowitch L-15介質(Beth Aemek)、75ug/ml的慶大霉素與0.2mM谷酰胺的混合物中使之勻漿化。在聚-D-賴氨酸處理的96孔微量滴定板上以300～500K/孔進行細胞接種。48小時后，將5-氟脫氧尿苷(UFDR)和尿苷加入滴定板的一半孔中，得到所選的神經元培養(yǎng)物。未經處理的培養(yǎng)物包括神經元細胞與神經膠質細胞的混合物。細胞在含10％FCS(胎牛血清)和2mM谷氨酰胺的RPMI或DMEM培養(yǎng)基中生長，丙于37℃、潮濕5％CO2中進行孵育。
大鼠肌細胞培養(yǎng)物從1～2日齡的新生Wistar系大鼠(Harlan)中制備得到。使用30只新生大鼠從而得到2.5～3.0×107個肌細胞。為此目的，將心臟分離，并于室溫下通過RDBTM(從無花果樹提取物分離得到的蛋白水解酶)進行酶催化組織解離。該方案重復5次，直到細胞完全分散。為了減少非肌細胞，將分散的細胞以3×106/ml預鋪于培養(yǎng)瓶中的DMEM培養(yǎng)基中，培養(yǎng)45min，接著轉移至明膠覆蓋的微量滴定板中培養(yǎng)24小時。之后在培養(yǎng)物中加入細胞毒素劑ARO-C，藉此除去分裂細胞而僅留下未分裂肌細胞。將肌細胞孵育4天后進行顯微鏡觀察。
癌細胞和正常細胞的增殖中性紅分析法[8]或測定DNA含量的熒光分析法[9]測定增殖。中性紅分析法中，中性紅被溶酶體吸收因而使活細胞染色。通過比色法(550nm處SLISA測定)進行定量分析。熒光分析法中，以alamar blue作為氧化還原指示劑。于激發(fā)波長為544nm和發(fā)射波長為590nm時測定alamar blue熒光(FLUOstar BMGLabTechnologies，奧芬堡，德國)。
細胞凋亡與DNA斷裂通過流式細胞檢測分析對propidium iodide染色細胞的細胞核斷裂進行研究。該分析通過使用配置有激發(fā)波長為480nm的氬離子激光和偶極子識別模塊(DDM)的FACS掃描(BectonDickinson，Mountain View，CA)進行。使用Lysis II(Becton Dickinson)軟件進行數據采集。根據Nicolletti標準等對凋亡細胞核的變化進行評價。
化學敏化作用體外測定了奮乃靜及其化學共軛物AN168的化學敏化作用。使用不同濃度的奮乃靜或AN168與化療藥對C6大鼠神經膠質瘤細胞或Jurkat T淋巴瘤細胞共同給藥。如上所述測定經下述處理后的細胞生存能力和/或DNA斷裂化療藥、奮乃靜、AN168、化療藥與奮乃靜的聯(lián)合、或者化療藥與AN168的聯(lián)合。
動物健康成年雄性大鼠(150-230克)購自Harlan(以色列)。將動物分為2～5只/籠，實驗前于動物房的控制條件下飼養(yǎng)一周。該實驗用未經實驗的大鼠采用雙盲法進行。每個實驗中檢測各個治療組(每組約5-10只大鼠)。
從Harlan(以色列)購得健康成年雄性或雌性小鼠。實驗前于控制條件下飼養(yǎng)4-7天。以雙盲法進行實驗。每個實驗中檢測各個治療組(每組約10只小鼠)。
大鼠的強直性昏厥由典型神經安定藥引起的錐體外系癥狀的臨床表現可通過經神經安定治療的大鼠的固有強直性昏厥行為來評價。強直性昏厥可通過下述兩種方法確定(i)測定掛在籠壁上的大鼠移動其后腿到達水平面所需的時間(墻壁測試法)；和(ii)將大鼠放在水平面上，其前肢靠在扁平桿上(5.5cm高)，類似演奏鋼琴的姿勢。測定大鼠下來并到達水平面所需的時間(鋼琴測試法)。追蹤觀測的最長時間為兩分鐘，每只動物每小時逐一進行該實驗。這些實驗可用于評價中樞多巴胺(DA)的阻斷活性，并且是神經抑制藥引起的錐體外系癥狀的適用標準[10]。測定奮乃靜、氯奮乃靜、AN167、AN168、AN177、AN178、AN180和AN187引起的總強直性昏厥及其時間過程(見上述表1)，比較不同的化合物和不同的條件。通常，對動物腹膜內注射下述藥物5mg/Kg的源藥物奮乃靜和7.5mg/Kg的氯奮乃靜，以及等摩爾劑量的本發(fā)明中其相關的化學共軛物，所述藥物溶于1％乳酸中。在不同的測定中，對動物口服給予溶于1％乳酸中的AN168和奮乃靜。
小鼠的強直性昏厥經神經安定藥治療的小鼠中其固有強直性昏厥行為以兩種不同的實驗測定。
第一種方法中，將成年雄性小鼠分組，每組用奮乃靜(1.5mg/kg，9只小鼠)、奮乃靜和等摩爾劑量GABA的混合物(7只小鼠)、等摩爾劑量AN-168(8只小鼠)處理或者不經過處理(對照組，6只小鼠)。使用下述裝置測定強直性昏厥兩個籠子，之間由一連接桿連接。給藥1小時、2小時、3小時后，將小鼠懸掛在連接桿中間，監(jiān)測2分鐘內到達靶點的小鼠百分數。
第二種方法中，將健康雌性小鼠分組，每組用2.5mg/kg奮乃靜(6只小鼠)、奮乃靜和等摩爾劑量GABA的混合物(6只小鼠)、等摩爾劑量AN-168(7只小鼠)處理或者不經過處理(對照組，7只小鼠)。使用上述裝置測定強直性昏厥。將小鼠懸掛在連接桿中間，測定小鼠到達靶點所需的時間。
催乳素的分泌典型神經安定藥可引起高催乳素血癥，所述的高催乳素血癥通常與乳溢、性腺受損以及性功能障礙有關[11]。因此，腹膜內或口服給予已知的神經安定藥及其本發(fā)明的化學共軛物后，測定循環(huán)中催乳素血漿濃度可作為所給予藥物精神抑制活性的一項靈敏的生化指標。因此，將大鼠用乙醚麻醉后眼眶取血，用Millennia、即鼠催乳素酶免疫分析試劑盒(DPC，USA)進行該分析。
行為標準觀察經本發(fā)明的化學共軛物處理的動物的鎮(zhèn)靜狀態(tài)，評分如下所述(表2)。各治療組中動物的鎮(zhèn)靜和活動程度以分數0-3來評價，其中0代表活躍且活動的動物，1分代表安靜且活動的動物，2分代表安靜但不動的動物，3分代表完全共濟失調且無警覺性的動物。經治療的動物的行為可用于估計所測試的神經安定藥神及其化學共軛物的精神抑制效力、以及由此引起的錐體外系癥狀的嚴重程度。
毒性體外毒性通過下述方法測定測定所測試化合物(已知的神經安定藥或本發(fā)明的化學軛合物)對來源于新生小鼠腦部的神經元、完整腦神經元和神經膠質細胞的原始培養(yǎng)物的影響。也可使用大鼠肌細胞來確定奮乃靜及其化學軛合物AN168的體外毒性。體內急性毒性通過單次腹膜內給予推注劑量的藥物的2月齡的小鼠來評價，所述的體內急性毒性以LD50來確定。
實驗結果奮乃靜及其化學共軛物的誘發(fā)強直性昏厥性質和精神抑制活性對成年雄性Wistar大鼠(體重150-200克)、每籠5只、以5mg/kg劑量腹膜內注射給予溶于1％乳酸中的奮乃靜及其等摩爾濃度的化學共軛物AN130、AN167和AN168，從而測得上述化合物的誘發(fā)強直性昏厥性質和精神抑制活性，并且通過上述“壁”測試法來確定。對照組僅給予載體(乳酸)。追蹤觀察2小時內所述處理對強直性昏厥和催乳素分泌兩者的效應，結果如圖1a和1b中所示。
圖1a顯示了給藥后0、60和120分鐘時、每個時間點重復測定3次所引起的強直性昏厥的數據之和。每列為5只動物的平均值?？倳r間以奮乃靜為標準(例如100％)。所得數據表明，用奮乃靜和AN120處理可引起強直性昏厥，而AN167和AN168根本不引起強直性昏厥。
圖1b顯示了處理后0、60和120分鐘時所測定的催乳素血中濃度，其表示在每個時間點的3次測定之和。催乳素血中濃度可作為這些化合物精神抑制活性的一項生化指標。所得數據表明，當用奮乃靜、AN130、AN167和AN168處理后，動物的催乳素血中濃度的曲線是相同的，所述曲線在60分鐘時達到峰值，之后下降。用化學共軛物AN130、AN167和AN168處理的動物在每個時間點的催乳素血中濃度與奮乃靜相似，表明這些化學共軛物的精神抑制活性與其源藥物奮乃靜是相似的。在僅用載體(1％乳酸)處理的對照組中，催乳素的濃度沒有變化。
SAR(構效關系)研究對奮乃靜及其同樣的化學共軛物進行SAR研究。如上所述測定所引起的強直性昏厥，并通過“壁”測試法確定。結果如圖2所示。發(fā)現奮乃靜與GABA的共軛物、即AN168最有效，其使所引起的強直性昏厥的下降幾乎最強，之后是含戊酸酯的共軛物AN178、含丙酸酯的共軛物AN177和含丁酸酯的共軛物AN167。該實驗表明，與給予奮乃靜本身所引起的誘因性強直性昏厥相比，用其化學共軛物后引起的誘因性強直性昏厥顯著下降。
由奮乃靜、氯奮乃靜及含其的化學共軛物引起的強直性昏厥和動物行為給予奮乃靜、氯奮乃靜及其含丁酸和含GABA的化學共軛物(AN167、AN168、AN180和AN187，見表1)后，檢測由其引起的總強直性昏厥、該誘因性強直性昏厥的時間過程以及動物行為。腹膜內注射5mg/Kg的奮乃靜、等摩爾濃度的AN167和AN168，7.5mg/Kg氯奮乃靜、等摩爾濃度的AN180和AN187后進行測定。所述強直性昏厥通過“壁”測試法確定。
圖3a表示了由測試化合物引起的總強直性昏厥。所得數據為給藥后0、30、60、90、120、180、240和420分鐘時測定的數據之和，總時間以奮乃靜和氯奮乃靜標準化(＝100％)。含丁酸酯的化學共軛物AN167和AN180能顯著的降低強直性昏厥。奮乃靜含GABA的共軛物AN168能完全消除強直性昏厥，而氯奮乃靜含GABA的共軛物AN187也能顯著降低強直性昏厥。
圖3b顯示了給予奮乃靜、其GABA共軛物AN168、氯奮乃靜、其GABA共軛物AN187后于0、60和120分鐘時所測定的催乳素血中濃度。所得數據表明，當用奮乃靜、氯奮乃靜或者它們的GABA化學共軛物處理后，動物的催乳素血中濃度的曲線是相同的，所述曲線在60分鐘時達到峰值，之后下降。用AN168和AN187處理的動物在每個時間點的催乳素血中濃度分別與奮乃靜和氟奮乃靜相似。
圖4a表示了由奮乃靜及其化學共軛物引起的強直性昏厥歷時7小時的時間過程。由奮乃靜引起的強直性昏厥在2小時時達到峰值，之后減弱。與奮乃靜相比，含丁酸酯的共軛物AN167所引起的強直性昏厥較弱，而由其含GABA的共軛物AN168處理的動物在整個7小時的研究過程中沒有出現強直性昏厥。
圖4b表示了由氯奮乃靜及其化學共軛物引起的強直性昏厥歷時7小時的時間過程。用氯奮乃靜處理的動物在所測定的7小時內出現強直性昏厥，而用AN180和AN187處理的動物引起的強直性昏厥則較弱。AN180所引起的的強直性昏厥在測試期間是上下波動的，而由AN187引起的強直性昏厥經7小時后完全消除。該研究中的所有實驗動物在24小時后其強直性昏厥均消除。
測試化合物對動物行為的影響可通過如上所述的、對處理后動物的鎮(zhèn)靜和活動程度的評估來確定，以0-3分評價。0代表活躍且活動的動物，1分代表安靜且活動的動物，2分代表安靜但不動的動物，3分代表完全共濟失調且無警覺性的動物。所得分數由下述表2概述，其證明，與已知藥物相比，該化學共軛物對動物行為的影響較小。
表2

由AN168和奮乃靜與GABA的混合物引起的大鼠誘因性強直性昏厥將AN168、即奮乃靜的GABA共軛物對大鼠中引起的強直性昏厥的影響與其源藥物——非共軛的奮乃靜和GABA的混合物引起的強直性昏厥進行比較。腹膜內注射共軛物或所述混合物后于60、90和120分鐘時測定強直性昏厥，通過“壁”測試法確定。
圖5a顯示了各種治療引起的總強直性昏厥的數據。用AN168處理的動物組表現出非常低的強直性昏厥，而用奮乃靜與GABA的混合物處理的動物組的強直性昏厥較高。
圖5b顯示了兩種治療后強直性昏厥的時間過程，其證明，用AN168處理的動物中強直性昏厥減弱，所述的強直性昏厥在120分鐘后消除。
AN167和AN168引起的大鼠強直性昏厥測試了AN167和AN168在4個獨立實驗中引起的總強直性昏厥，并將其與在相同實驗條件下由奮乃靜引起的強直性昏厥進行了比較。
圖6顯示了給予等摩爾劑量AN167和AN168后引起的總強直性昏厥，以占奮乃靜引起的強直性昏厥的百分數表示。雖然與奮乃靜相比，AN167引起的強直性昏厥較弱，然而AN168幾乎沒有引起強直性昏厥現象。
奮乃靜、奮乃靜與GABA的混合物和AN168所引起的小鼠強直性昏厥將AN168、即奮乃靜的GABA共軛物對小鼠中引起的強直性昏厥的影響與由奮乃靜單獨和由其源藥物——非共軛的奮乃靜和GABA的混合物引起的強直性昏厥進行比較。腹膜內注射治療后于60、90和120分鐘時測定強直性昏厥，并通過上述方法確定。
圖7a顯示了由各種治療引起的強直性昏厥的數據，以術語2分鐘內到達靶點的動物百分數表示。用AN168處理的實驗組動物表現出基本上較低的失能，而僅用奮乃靜和用奮乃靜與GABA的混合物處理的實驗組動物則表現出較高的強直性昏厥。
圖7b顯示了上述治療2和3小時后，由各種治療引起的強直性昏厥的數據，以術語動物到達靶點所需時間表示。用AN168處理的的實驗組動物到達靶點的速度明顯快于僅用奮乃靜和用奮乃靜與GABA的混合物處理的實驗組動物。
口服奮乃靜及其GABA共軛物AN168所引起的誘因性強直性昏厥、動物行為和精神抑制活性因為發(fā)現當奮乃靜與GABA的化學共軛物即AN168腹膜內注射時為目前最有效的化學共軛物，為了確定該化學共軛物的口服效力，進行與奮乃靜比較的其它比較實驗。為此目的，對小鼠口服單獨給予AN168或奮乃靜后，如上所述測定其所引起的強直性昏厥、催乳素血中濃度和動物行為。將動物分為每籠5只，口服給予溶于1％乳酸中的奮乃靜或AN168。對照動物僅給予載體(乳酸)。
口服給予不同濃度的AN168和奮乃靜所引起的強直性昏厥可通過上述的“壁”測試法和“鋼琴”測試法進行測定?？诜o予2.5、5、10和20mg/kg的奮乃靜和相應等摩爾劑量3.5、7、14和28mg/kg的AN168后，測定了4-24小時的強直性昏厥的時間過程?？倧娭毙曰柝时硎驹?-24小時追蹤觀察中每個治療組的強直性昏厥平均值的總和。
圖8a顯示了給予不同處理后強直性昏厥的時間過程，以“鋼琴”測試法測定4～6個小時，其證明了各種濃度的AN168均可降低強直性昏厥行為。統(tǒng)計學表明，與等摩爾劑量的奮乃靜相比，低劑量和中劑量(14和28mg/kg)的AN168可顯著降低強直性昏厥(p＜0.05)。當化學共軛物的劑量較高(14與28mg/kg)時，所檢測到的強直性昏厥始終高于奮乃靜所檢測到的癥狀，雖然它們之間差別不大。雖然可以假定，由藥物和較高劑量化學共軛物引起的強直性昏厥之間差異較小確實只是估計。出于實際考慮，限制所測定的最大強制性昏厥信號為120秒。然而在實際中，可以估計，由奮乃靜引起的最大強直性昏厥信號高于由化學共軛物所給促的信號。該估計還可從以下得到支持高劑量時，AN168與奮乃靜在由“壁”測試法確定的強直性昏厥和下文中所述的鎮(zhèn)靜評分方面的差異是較大和重要的。而且，所進行的實驗也表明，僅僅在以中等和較高劑量奮乃靜(10和20mg/kg)處理的動物中觀察到肌強直和呼吸急促，而在以其等摩爾劑量的化學共軛物處理的動物中沒有觀察到這些癥狀。
圖8b顯示了各種治療后強直性昏厥的時間過陳，在圖8a所示試驗3個月后進行的獨立試驗中以“鋼琴”測試法測定4-6小時。所得數據表明，與前述實驗相比，高劑量AN168(14和28mg/kg)引起較強的強直性昏厥。NMR分光鏡檢測顯示，出現有緩慢分解，并因此使化學共軛物的特性受到影響，所述的緩慢分解可能是由于水解引起。這些發(fā)現表明，該化合物應當儲存于封口瓶中，臨用前打開。在此方面應當注意的是，與之相似的氟奮乃靜化學共軛物AN187不易吸潮，因此長期儲存也不會出現分解。
圖9a和9b顯示了口服給予5、10和20mg/kg奮乃靜及其相應的等摩爾劑量7、14與28mg/kg的AN-168所引起的、4-6小時中所觀察到的總強直性昏厥。圖9b給出了在圖9a所示試驗3個月后進行的試驗中得到的數據。雖然根據圖9b中所給出的數據，與奮乃靜相比，由AN168引起的強直性昏厥行為的減弱不明顯，但也能清楚看出，由AN168引起的強直性昏厥總是低于由奮乃靜引起的強直性昏厥。
圖10a和圖10b顯示了各種處理后強直性昏厥的時間過程(圖10a)和總強直性昏厥(圖10b)，其通過“鋼琴”測試法測得。所得數據證明，所有處理組在處理5-6小時后，奮乃靜和AN168的強直性昏厥效應均達到最大值，處理24小時后強直性昏厥減弱。這些數據與對患者給予奮乃靜(每日1次)后觀察大的臨床時間過程成線性關系。
圖11顯示了各種治療后的總強直性昏厥，通過“壁”測試法測得，其清楚地說明用AN168的備測試劑量處理后強直性昏厥癥狀幾乎消失。
口服給予化學共軛物AN168對動物行為的影響可通過如上所述的、口服給予各種濃度AN168和奮乃靜后評估動物的鎮(zhèn)靜和活性程度來確定，以0-3分評價。所得分數在下述表3中給出概述，其證明，與奮乃靜相比，該化學共軛物對動物行為的影響較小。
表3

作為口服給予的化合物的多巴胺能活性的一項指標，在如上所述給予各種治療后于0、90和180分鐘時測定催乳素血中濃度。所得數據在圖12中概括給出，其表明在用奮乃靜和AN168處理的動物中催乳素血中濃度的曲線相似。在低劑量和中劑量時，用AN168處理的動物在各時間點的催乳素血中濃度與奮乃靜相似，而在更高劑量時，用AN168處理的動物的催乳素血中濃度比用奮乃靜處理的動物高得多。
這些結果證明當AN168以低劑量(如3.5和7mg/kg)口服給藥時是非常有效的，因此與臨床應用相關。此處還表明，低劑量AN168引起的錐體外系癥狀最小，因此其對黑質紋狀體途徑幾乎沒有拮抗活性。
抗增殖活性通過使用正常細胞和變異細胞進行(通常多于1個獨立實驗)的增殖實驗，測定了奮乃靜及其化學共軛物AN167、AN168和AN177，氟奮乃靜及其化學共軛物AN179、AN180、AN181和AN187，丁酸(BA)，4-苯丁酸(PBA)，GABA的抗增殖活性。細胞次代培養(yǎng)，并且將測試化合物以濃度遞增的方式加入其中。通過對細胞存活百分數線性回歸測得IC50值。測試化合物對不同測試細胞系的IC50在下述表4和表5概述給出。
表4

*獨立實驗數目。
表5

實驗結果表明，雖然GABA本身沒有表現出明顯的抗增殖活性(IC50＞20mM)，BA(IC50為1-8mM)和PBA(IC50為2-12mM，未給出數據)具有顯著但還是相對較低的抗增值活性，但是其相應的奮乃靜和氟奮乃靜共軛物具有明顯較高的活性(IC50為8-60mM)。
這些結果還表明，本發(fā)明的化學共軛物對廣泛的細胞系均具有多方面的抗增殖活性，所述的細胞系包括多耐藥性(MDR)細胞，例如HL 60MX2、B-16 MDR亞克隆和MES SA DX5。
圖13顯示了在代表性實驗中所得的結果，其測定了奮乃靜及其化學共軛物對B16鼠黑色素瘤細胞增殖的影響。發(fā)現AN167和AN168作為抗增殖劑具有一定的活性。
測定奮乃靜、GABA及其化學共軛物AN168的細胞毒性效力，并且與已知化療藥順鉑和長春新堿(Vincistine)對鼠膠質瘤細胞C6的細胞毒性效力進行了比較。將細胞次代培養(yǎng)，并且將測試化合物濃度遞增地加入其中，至100μM。通過如上所述的中性紅法測定細胞處理24小時后的存活力，結果如圖14中給出。如上所述測定奮乃靜和AN168的IC50值，分別為19.2μM和24.2μM。
如圖14中所示，所得數據證明，本發(fā)明的化學共軛物與已知的代表性化療藥相比，其抗增殖活性更高。已知C6膠質瘤細胞為MDR細胞，事實上，發(fā)現已知的化療藥對其抗增殖活性較低。與之相反，發(fā)現AN168可產生較強的抗增殖活性，在較低濃度(約20μM)即基本上能引起細胞死亡。
圖15給出了用奮乃靜、AN168和地塞米松濃度遞增地用于處理Jurkat T淋巴瘤細胞所得到的數據。該結果以通過alamar blue法測定的細胞存活力表示，其表明與地塞米松相比，AN168和奮乃靜的細胞毒性較強。奮乃靜和AN168的IC50分別是16μM和19μM。
還應當注意的是，雖然奮乃靜、氟奮乃靜及其化學共軛物的抗增殖活性大約是相同程度的，但本發(fā)明化學共軛物的臨床應用高度優(yōu)于神經安定藥的臨床應用，因為給予化學共軛物幾乎可完全避免副作用。
奮乃靜或AN168與化療藥共同給藥的化學敏化效應將5、10和15μM奮乃靜與其等摩爾劑量的化學共軛物AN168與不同濃度的已知化療藥如長春新堿(vincistine)、順鉑和地塞米松共同給予，從而測得其化學敏化效應。按照上文方法部分所描述的方法、在這些聯(lián)合治療后測定細胞存活力和/或DNA斷裂，并將其與僅使用化療藥治療所得的結果進行比較。
圖16給出了用長春新堿(vincistine)(30μM)、奮乃靜、AN168及其聯(lián)合處理大鼠C6膠質瘤細胞系(MDR細胞)24小時后所得的數據。該結果清楚地證明AN1168的化學敏化作用，所述的AN168當與化療藥共同給藥時，與僅單獨給藥時該藥物的細胞毒性效應相比，可基本上增強其細胞毒性效力，甚至是在較低濃度(例如5μM)的化學共軛物時亦是如此。
圖17給出了用濃度為5μM-50μM的不同濃度的順鉑以及順鉑與10和15μM AN168的聯(lián)合處理鼠C6膠質瘤細胞系(MDR細胞)后所得的數據。該結果以通過中性紅法測定的細胞存活力給出，其清楚表明，雖然所有測試濃度的順鉑對該細胞完全無效，但順鉑與AN168的聯(lián)合治療使該細胞對化療藥敏感。
圖18給出了用順鉑(30μM)、奮乃靜(25和50μM)、AN168(25和50μM)以及順鉑(30μM)與AN168(50μM)的聯(lián)合處理鼠C6膠質瘤細胞后所得到的DNA斷裂數據，與未處理細胞比較。所述DNA斷裂通過如上所述的propidium iodide流式細胞檢測分析法進行測定。該結果表明雖然僅使用順鉑對DNA斷裂沒有影響，然而奮乃靜和AN168兩者均使DNA斷裂顯著增加。這些結果表明，本發(fā)明的化學共軛物的化學敏化作用來自于其活性。
毒性通過來源于新生小鼠腦部的神經元細胞原始培養(yǎng)物和神經元細胞與神經膠質細胞混合物的原始培養(yǎng)物來測定奮乃靜、AN167、AN168的體外毒性。所述細胞培養(yǎng)物用測試化合物處理24小時，之后通過中性紅比色法確定細胞的存活力。這些測試中所得的IC50值表明，奮乃靜和AN167具有相似的毒性，而AN168對正常腦細胞的毒性明顯較低，如圖19中所顯示的。還在培養(yǎng)鼠肌細胞上測定了奮乃靜和AN168的體外毒性。圖20給出了在用不同濃度的奮乃靜或AN168處理后、按上述方法測定的細胞存活力。所得數據表明，AN168在所有濃度都不會使細胞存活力降低，而奮乃靜在高濃度時使細胞存活力降低20％。
對小鼠腹膜內給予單劑量奮乃靜和AN1167后，評價其體內毒性。奮乃靜和AN167治療兩周后所測定的LD50分別為109mg/kg和120mg/kg。除了AN167的毒性比奮乃靜低之外，由該化學共軛物引起的死亡率被延遲，如圖21所示。
上述實驗結果證明了本發(fā)明的新化學共軛物在產生精神抑制活性、抗增殖活性和化學敏化活性方面高且有利的效力，所述的化學共軛物對正常細胞毒性最小，副作用最小。
可以理解的是，本發(fā)明的某些特性也可在單個實施方案中聯(lián)合給出，所述特征為了清楚在單個實施方案內容中已有描述。反之，本發(fā)明的各個特性也可單獨給出或以任意適宜的亞聯(lián)合給出，所述特征為了清楚在單個實施方案內容中已有描述。
雖然已經結合其具體實施方案描述了本發(fā)明，顯然多種替換、修改和變形對本領域技術人員來說是顯而易見的。相應地，意欲包括所有落在后面權利要求的精髓和較寬范圍內的替換、修改和變形。本說明書中提到的所有出版物、專利和專利申請此處均全文引入說明書作為參考，如果特別和單獨提到每篇獨立的出版物、專利或專利申請此處引入作為參考，同樣是全文引入。另外，不應當將本申請中任何參考文獻的引文或確證逐字分析為該參考文獻可作為本發(fā)明的現有技術得到的認可。
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權利要求
1.一種含有與第二化學部分共價連接的第一化學部分的化學共軛物，其中所述第一化學部分為精神抑制藥殘基，第二化學部分為有機酸殘基，所述的有機酸殘基是為了減少當精神抑制藥本身給藥而引起的副作用和/或為了產生抗增殖活性而選擇的有機酸殘基。
2.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的第二化學部分選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
3.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的第二化學部分通過酯鍵與所述的第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
4.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
5.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
6.根據權利要求4中所述的化學共軛物，其中所述的精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
7.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
8.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
9.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
10.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的抗增殖劑殘基選自丁酸殘基和4-苯基丁酸殘基。
11.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述的有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
12.根據權利要求11中所述的化學共軛物，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
13.根據權利要求1中所述的化學共軛物，其中所述有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
14.一種藥物組合物，含有作為活性成分的權利要求1中所述的化學共軛物和可藥用載體。
15.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其包裝在包裝材料中，并且可通過在所述包裝材料上或其中的印刷加以區(qū)分，用于治療精神紊亂或疾病。
16.根據權利要求15中所述的藥物組合物，其中所述的精神紊亂或疾病選自精神分裂癥、妄想癥、兒童精神病、亨延頓氏舞蹈病和吉累斯·德拉圖雷特氏綜合征。
17.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其包裝在包裝材料中，并且可通過在所述包裝材料上或其中的印刷加以區(qū)分，用于治療增殖性紊亂或疾病。
18.根據權利要求17中所述的藥物組合物，其中所述的增殖性紊亂或疾病選自腦腫瘤、腦轉移瘤和外周腫瘤。
19.根據權利要求17中所述的藥物組合物，其中所述的增殖性疾病為癌癥。
20.根據權利要求19中所述的藥物組合物，其中所述的增殖性疾病為多耐藥性癌癥。
21.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其包裝在包裝材料中，并且可通過包裝材料上或其中的印刷加以區(qū)分，在與化療藥聯(lián)合和/或在化學敏化作用是有利的醫(yī)療條件下用于化學敏化作用。
22.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的第二化學部分選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
23.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的第二化學部分通過酯鍵與所述的第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
24.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
25.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
26.根據權利要求24中所述的藥物組合物，其中所述的精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
27.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
28.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
29.根據權利要求22中所述的藥物組合物，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
30.根據權利要求22中所述的藥物組合物，其中所述的抗增殖劑殘基選自丁酸殘基和4-苯基丁酸殘基。
31.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述的有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氟和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
32.根據權利要求31中所述的藥物組合物，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
33.根據權利要求14中所述的藥物組合物，其中所述有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
34.一種治療患者精神紊亂或疾病的方法，該方法包括給予患者治療有效量的權利要求1中的化學共軛物。
35.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的精神紊亂或疾病選自精神分裂癥、妄想癥、兒童精神病、亨延頓氏舞蹈病和吉累斯·德拉圖雷特氏綜合征。
36.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的化學共軛物為腹膜內給藥。
37.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的化學共軛物為口服給藥。
38.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的第二化學部分選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
39.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的第二化學部分通過酯鍵與所述的第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
40.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
41.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
42.根據權利要求40中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
43.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
44.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
45.根據權利要求38中所述的方法，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
46.根據權利要求38中所述的方法，其中所述的抗增殖劑殘基選自丁酸殘基和4-苯基丁酸殘基。
47.根據權利要求34中所述的方法，其中所述的有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氨和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
48.根據權利要求47中所述的方法，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
49.根據權利要求34中所述的方法，其中所述有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
50.一種治療或預防患者中增殖性紊亂或疾病的方法，所述方法包括給予患者治療有效量的權利要求1中的化學共軛物。
51.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的增殖性紊亂或疾病選自腦腫瘤、腦轉移瘤和外周腫瘤。
52.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的增殖性疾病為癌癥。
53.根據權利要求52中所述的方法，其中所述的增殖性疾病為多耐藥性癌癥。
54.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的第二化學部分選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
55.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的第二化學部分通過酯鍵與所述的第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
56.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
57.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
58.根據權利要求56中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
59.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
60.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
61.根據權利要求54中所述的方法，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
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63.根據權利要求50中所述的方法，其中所述的有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
64.根據權利要求63中所述的方法，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
65.根據權利要求50中所述的方法，其中所述有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
66.一種化學敏化的方法，該方法包括該方法包括給予需要其的患者化學治療有效量的至少一種化療藥以及化學敏化有效量的權利要求1中的化學共軛物。
67.根據權利要求66中所述的方法，其中所述患者患有癌癥。
68.根據權利要求67中所述的方法，其中所述患者患有多重耐藥癌癥。
69.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的第二化學部分選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
70.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的第二化學部分通過酯鍵與所述的第一化學部分共價連接，所述的酯鍵選自羧酸酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵。
71.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有抗增殖活性。
72.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基具有化學敏化活性。
73.根據權利要求71中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自吩噻嗪殘基和吩噻嗪衍生物殘基。
74.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自典型精神抑制藥殘基和非典型精神抑制藥殘基。
75.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的精神抑制藥殘基選自氯丙嗪殘基、奮乃靜殘基、氟奮乃靜殘基、氯噻噸殘基、奮乃靜醋酯殘基、氟哌啶醇殘基、苯哌唑酮殘基、溴哌利多殘基、氟哌利多殘基、螺哌隆殘基、匹莫齊特殘基、哌西他嗪殘基、阿米舒必利(amilsulpride)殘基、舒必利殘基、氯噻平殘基、齊拉西酮殘基、瑞莫必利殘基、舒托必利殘基、阿立必利殘基、奈莫必利殘基、氯氮平殘基、奧氮平殘基、齊拉西酮殘基、舍吲哚殘基、喹硫平殘基、氟西汀殘基、氟伏沙明殘基、地昔帕明殘基、帕羅西汀殘基、舍曲林殘基、丙戊酸殘基和苯妥英殘基。
76.根據權利要求69中所述的方法，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
77.根據權利要求69中所述的方法，其中所述的抗增殖劑殘基選自丁酸殘基和4-苯基丁酸殘基。
78.根據權利要求66中所述的方法，其中所述的有機酸殘基具有通式-R-C(＝O)-其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基。
79.根據權利要求78中所述的方法，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
80.根據權利要求66中所述的方法，其中所述有機酸殘基選自丁酸殘基、戊酸殘基、4-苯基丁酸殘基、4-氨基丁酸殘基、視黃酸殘基、舒林酸殘基、乙酰水楊酸殘基、布洛芬殘基、丙二酸殘基、琥珀酸殘基、戊二酸殘基、富馬酸殘基和鄰苯二甲酸殘基。
81.一種合成權利要求1中的化學共軛物的方法，該方法包括將有機酸與精神抑制藥反應，從而得到與精神抑制藥殘基共價連接的有機酸殘基。
82.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的有機酸選自GABA促進劑殘基和抗增殖藥殘基。
83.根據權利要求82中所述的方法，其中所述的有機酸為抗增殖藥，其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過羧酸酯鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將有機酸轉化為其酰氯衍生物。
84.根據權利要求83中所述的方法，其中所述反應在堿性條件下進行。
85.根據權利要求83中所述的方法，其中所述的抗增殖劑選自丁酸和4-苯基丁酸。
86.根據權利要求82中所述的方法，其中所述的有機酸為抗增殖藥，其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過硫酯鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將精神抑制藥轉化為其硫醇衍生物；和將有機酸轉化為其酰氯衍生物。
87.根據權利要求86中所述的方法，其中所述的抗增殖劑選自丁酸和4-苯基丁酸。
88.根據權利要求82中所述的方法，其中所述的有機酸為抗增殖藥，其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過酰胺鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將有機酸轉化為其酰氯衍生物；和將精神抑制藥轉化為其胺類衍生物。
89.根據權利要求88中所述的方法，其中所述反應在堿性條件下進行。
90.根據權利要求88中所述的方法，其中所述的抗增殖劑選自丁酸和4-苯基丁酸。
91.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的有機酸具有通式-R-C(＝O)-OH其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基；其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過羧酸酯鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將有機酸轉化為其酰氯衍生物。
92.根據權利要求91中所述的方法，其中所述反應在堿性條件下進行。
93.根據權利要求91中所述的化學共軛物，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
94.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的有機酸具有通式-R-C(＝O)-OH其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基；其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過硫酯鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將精神抑制藥轉化為其硫醇衍生物；和將有機酸轉化為其酰氯衍生物。
95.根據權利要求94中所述的化學共軛物，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
96.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的有機酸具有通式-R-C(＝O)-OH其中，R選自含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基，含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基以及R1，其中R1為具有通式-Z-C(＝O)O-CHR2-R3的殘基，其中，Z選自單鍵、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、含1-20個碳原子和至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烴類殘基；R2選自氫和含1-10個碳原子的烷基；和R3選自氫、含1-20個碳原子的取代或未取代烴類殘基、和含1-20個碳原子及至少一個選自氧、氮和硫的雜原子的取代或未取代烷基；其中所述的有機酸殘基與所述精神抑制藥殘基通過酰胺鍵共價連接，在進行所述反應前，該方法還包括將有機酸轉化為其酰氯衍生物；和將精神抑制藥轉化為其胺類衍生物。
97.根據權利要求96中所述的方法，其中所述反應在堿性條件下進行。
98.根據權利要求96中所述的方法，其中所述R為含3-5個碳原子的取代或未取代烷基。
99.根據權利要求82中所述的方法，其中所述的有機酸為含游離氨基基團的GABA促進劑，且該方法還包括在反應前將該游離氨基基團用保護基保護，以便通過與所述精神抑制藥殘基共價連接的有機酸的氨基保護殘基的反應得到；和在得到與所述精神抑制藥殘基共價連接的有機酸的氨基保護殘基之后，除去保護基。
100.根據權利要求99的方法，該方法還包括，在進行所述保護和進行所述反應之前將有機酸轉化為其?；溥蚧衔?。
101.根據權利要求99中所述的方法，其中所述的GABA促進劑殘基選自(±)巴氯芬殘基、γ-氨基丁酸(GABA)殘基、γ-羥基丁酸殘基、氨基氧乙酸殘基、β-(4-氯苯)-γ-氨基丁酸殘基、4-哌啶羧酸殘基、哌啶-4-磺酸殘基、3-氨基丙基亞膦酸殘基、3-氨基丙基膦酸殘基、3-(氨基丙基)甲基膦酸殘基和3-(2-咪唑基)-4-氨基丁酸殘基。
101.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的精神抑制藥選自吩噻嗪和吩噻嗪衍生物。
103.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的精神抑制藥選自典型精神抑制藥和非典型精神抑制藥。
104.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的精神抑制藥選自氯丙嗪、奮乃靜、氟奮乃靜、氯噻噸、奮乃靜醋酯、氟哌啶醇、苯哌唑酮、溴哌利多、氟哌利多、螺哌隆、匹莫齊特、哌西他嗪、阿米舒必利(amilsulpride)、舒必利、氯噻平、齊拉西酮、瑞莫必利、舒托必利、阿立必利、奈莫必利、氯氮平、奧氮平、齊拉西酮、舍吲哚、喹硫平、氟西汀、氟伏沙明、地昔帕明、帕羅西汀、舍曲林、丙戊酸和苯要英。
105.根據權利要求81中所述的方法，其中所述的有機酸選自丁酸、戊酸、4-苯基丁酸、4-氨基丁酸、視黃酸、舒林酸、乙酰水楊酸、布洛芬、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸和鄰苯二甲酸。
全文摘要
本發(fā)明公開了精神抑制藥與有機酸的新的化學共軛物，其在治療精神和/或增殖性紊亂和疾病中的用途及其作為化學敏化劑的用途，以及合成它們的方法。選擇有機酸，以減少由精神抑制藥引起的副作用和/或產生抗增殖活性。
文檔編號A61P25/18GK1596141SQ02823600
公開日2005年3月16日 申請日期2002年9月29日 優(yōu)先權日2001年9月27日
發(fā)明者A·努德曼, A·雷哈里, I·吉-阿德, A·維茲曼 申請人:特拉維夫大學拉莫特有限公司, 巴爾-伊蘭大學