專利名稱：用作選擇性細(xì)菌dhfr抑制劑的新的雜環(huán)化合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的雜環(huán)化合物及其應(yīng)用，例如在預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染中的應(yīng)用，以及其作為防腐劑、滅菌劑或消毒劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
為了對(duì)抗感染而進(jìn)行的研究正在不斷增多以跟上抗藥性微生物增殖的步伐。細(xì)菌不斷地以給現(xiàn)有治療帶來增加的抗藥性的方式突變和進(jìn)化。這在醫(yī)院中是令人特別驚恐的，因?yàn)樵谀莾河^測(cè)到高比例的病原體對(duì)一種或多種標(biāo)準(zhǔn)治療方案有抗藥性。此外，免疫缺陷患者中機(jī)會(huì)感染發(fā)生率的增加已導(dǎo)致非常迫切需要抗感染疾病和疾病癥狀的新治療。結(jié)果是非常需要與現(xiàn)有藥物相比通常具有更強(qiáng)的效力，更有效地抗耐藥菌株，和引起更少副作用的治療劑。為了滿足該不斷增加的需要，抗微生物研究的焦點(diǎn)包括研究通過新機(jī)制起作用的新活性劑、克服已知抗藥性的新活性劑以及經(jīng)由已知機(jī)制起作用的新的或改善的活性劑。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及雜環(huán)化合物，包含所述化合物的組合物，和使用所述化合物和組合物的方法。本發(fā)明化合物和包含它們的組合物可用于治療疾病或疾病癥狀。本發(fā)明還提供了制備所述化合物以及鑒定具有所需生物活性的化合物的方法。
本發(fā)明基于下述發(fā)現(xiàn)一些雜環(huán)化合物具有強(qiáng)的抗菌活性。因此，本發(fā)明涉及新的雜環(huán)化合物及其在預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染中的應(yīng)用或作為防腐劑、滅菌劑或消毒劑的應(yīng)用。本發(fā)明還基于下列發(fā)現(xiàn)一些雜環(huán)化合物，一般包括取代的喋啶基、喹唑啉基和嘧啶并嘧啶基雜環(huán)具有強(qiáng)的抗菌活性，并且可用于治療各種人疾病和微生物感染。因?yàn)檫@些雜環(huán)化合物表現(xiàn)出相對(duì)于人二氫葉酸還原酶(hDHFR)選擇性地抑制細(xì)菌DHFR(bDHFR)的活性，所以本發(fā)明化合物可用于治療微生物感染，而不會(huì)引起與抑制hDHFR有關(guān)的對(duì)人類的毒性。
本發(fā)明一個(gè)方面涉及下式所示化合物 或 其中A是N、CH或CR15；R14是-(CH2)n-X-Y，其中n是1、2、3、4、5或6；X是O、NH或NR15；且Y是芳基或雜芳基，其中每個(gè)Y可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。每個(gè)R15獨(dú)立地為低級(jí)烷基；每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、S(O)2NR17R17、S(O)2R17、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；每個(gè)R17獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R18獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R19獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R20獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R2或S(O)2R21；每個(gè)R21獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及下式所示化合物 其中A是N、CH或CR15；每個(gè)R14獨(dú)立地為-(CH2)n-X-Y，其中n是1、2、3、4、5或6；X是O、NH或NR15；且Y是芳基或雜芳基，其中每個(gè)Y可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。每個(gè)R15獨(dú)立地為低級(jí)烷基；每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、S(O)2NR17R17、S(O)2R17、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；每個(gè)R17獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R18獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R19獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R20獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R21獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。在一個(gè)方面，本發(fā)明化合物(以及組合物和涉及它們的方法)是其中每個(gè)R14都相同的那些。在另一個(gè)方面，本發(fā)明化合物(以及組合物和涉及它們的方法)是其中每個(gè)R14不同的那些。
術(shù)語“鹵素”是指任何氟、氯、溴或碘。術(shù)語“烷基”是指烴鏈，其可以是直鏈或支鏈，并含有指定數(shù)目的碳原子。例如，C1-10是指可具有1-10個(gè)(包括1和10個(gè))碳原子的基團(tuán)。術(shù)語“低級(jí)烷基”是指C1-C8烷基鏈。術(shù)語“烷氧基”是指-O-烷基。術(shù)語“亞烷基”是指二價(jià)烷基(即-R-)。術(shù)語“亞烷基二氧基”是指結(jié)構(gòu)式-O-R-O-所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R代表亞烷基。術(shù)語“氨基烷基”是指被氨基取代的烷基。術(shù)語“巰基”是指-SH基團(tuán)。術(shù)語“硫代烷氧基”是指-S-烷基。
術(shù)語“芳基”是指具有6個(gè)碳的單環(huán)或具有10個(gè)碳的二環(huán)芳環(huán)系，其中每個(gè)環(huán)中有0、1、2、3或4個(gè)原子可以被取代基取代。芳基的實(shí)例包括苯基、萘基等。術(shù)語“芳基烷基”或術(shù)語“芳烷基”是指被芳基取代的烷基。術(shù)語“芳基烷氧基”是指被芳基取代的烷氧基。
術(shù)語“雜芳基”是指芳族5-8元單環(huán)、8-12元二環(huán)或11-14元三環(huán)環(huán)系，其中如果是單環(huán)，則包含1-3個(gè)雜原子，如果是二環(huán)，則包含1-6個(gè)雜原子，如果是三環(huán)，則包含1-9個(gè)雜原子，所述雜原子選自O(shè)、N或S，其中每個(gè)環(huán)中有0、1、2、3或4個(gè)原子可以被取代基取代。雜芳基的實(shí)例包括吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、噻唑基等。術(shù)語“雜芳基烷基”或術(shù)語“雜芳烷基”是指被雜芳基取代的烷基。術(shù)語“雜芳基烷氧基”是指被雜芳基取代的烷氧基。
含有碳、氮、硫、鹵素和/或氧的官能團(tuán)是取代或未取代的、直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基或烷芳基，或其中一個(gè)或多個(gè)碳和/或氫原子被雜原子替代的一個(gè)或多個(gè)這些基團(tuán)的衍生物(例如氨基、烷基氨基、羥基和烷氧基、巰基、鹵素、硝基、酚基、或其它取代的芳族或脂族基團(tuán)))。
其它實(shí)施方案包括其中A是N的本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示化合物；其中n是1的那些；其中Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些；其中Y是苯基的那些；其中Y是被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些；其中Y是下式所示結(jié)構(gòu)的那些 其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16是鹵素、烷基、亞烷基二氧基、芳基、芳烷基、硝基、羥基、巰基、胺、烷氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基；其中Y是下式所示基團(tuán)的那些 其中A是CH或CR15；其中每個(gè)R6獨(dú)立地為C(O)NR19R20的那些[每個(gè)R19獨(dú)立地為氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基；且每個(gè)R20獨(dú)立地為氨基烷基、芳基或芳基烷基；其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R16、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21]；其中Y是雜芳基的那些；定義如下的那些其中n是1且X是NH或NR15，且Y是被一個(gè)R16取代的苯基，其中R16不是-COOH；以及其中n是1且X是NH或NR15，且Y是被2-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些。
其它實(shí)施方案包括其中n是1，且X是O的本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示化合物；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15且R15是CH3的那些；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15，R15是CH3，且Y是下式所示基團(tuán)
其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代；其中n是1，X是NH或NR15且R15是CH3，且Y可選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16是鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；以及其中Y是苯基(可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代)，且A是N的那些。
其它實(shí)施方案包括其中n是1，X是O，且A是N的本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示化合物；其中n是1，X是O，且Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些；其中n是1，X是O，且Y是被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些；其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N的那些；其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，且Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的那些；其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，且Y是苯基的那些；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為C(O)OR18；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為C(O)OR18，并且每個(gè)R18是H或烷基；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為C(O)NR19R20。
其它實(shí)施方案包括其中n是1，X是O，A是N，且Y是可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代的苯基的本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示化合物；定義如下的那些其中n是1，X是O，A是N，且Y是下式所示基團(tuán)
定義如下的那些其中n是1，X是O，A是N，且Y是下式所示基團(tuán) 其中每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；定義如下的那些其中n是1，X是O，A是N，且Y是下式所示基團(tuán) 定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR15(其中R15是CH3)，A是N，且Y是下式所示基團(tuán) 其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；定義如下的那些其中n是1，X是NH或NR16(其中R15是CH3)，A是N，且Y是下式所示基團(tuán)
或表1中的任何化合物。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及具有下式的化合物 其中A和B獨(dú)立地選自N和CR7，其中R7是氫或含有碳、氮、硫、鹵素和/或氧的官能團(tuán)；R1和R2是-NR5R6基團(tuán)，其中R5和R6獨(dú)立地為氫或含有碳的官能團(tuán)；R3是氫；R4是含有碳、氮、硫、鹵素和/或氧的官能團(tuán)，條件是，如果A和B都是氮，并且R5和R6都是氫，則R4不是-NH2、-N(H)(甲基)、-N(H)(丁基)、-N(H)(己基)、-N(H)(苯基)、-N(H)(芐基)、-N(H)(NH2)、-N(H)(CH2CH2OH)、-N(CH2CH2OH)2、苯基、N-哌啶基或-S(乙基)；如果A是CH，B是氮，并且R5和R6都是氫，則R4不是甲基、異丁基、苯基、4-甲基苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-(2，5-二甲氧基苯基)乙基或-CH(OCH3)2；和如果A和B都是CH基，則R4是不同于-NH2、(3，4-二氯苯基)甲基氨基或(3，4-二氯苯基)亞甲基亞氨基的氨基。
在其它方面，化合物是定義如下的式III化合物，其中R5和R6獨(dú)立地為氫；且A和B分別獨(dú)立地為N；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R4是NR7R8；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R4是NR7R8；R7是被芳基或雜芳基取代的C1-C6烷基；且R8是任選被鏈烯基、羥基、烷氧基、環(huán)烷基或芳基取代的C1-C6烷基；
本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7是被芳基取代的C1-C6烷基；R8是C1-C6烷基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7是被雜芳基取代的C1-C6烷基；R8是C1-C6烷基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7被芳基取代的C1-C6烷基；R8被羥基或烷氧基取代的C1-C6烷基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R4是NR7R8；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R4是NR7R8；R7是C1-C6烷基；R8是被環(huán)烷基取代的C1-C6烷基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R4是NR7R8；R7獨(dú)立地為被芳基取代的C1-C6烷基；R8獨(dú)立地為被芳基取代的C1-C6烷基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、鹵素、硫烷基、羥基、烷氧基、氨基、烷基或NR5R6；其中氮原子上的每個(gè)R5和R6獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基烷基或烷基羰基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7是被萘基取代的C1-C6烷基，其中所述萘基可任選被烷基、鹵素、羥基、烷氧基、硫烷基或氨基取代；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中所述萘基是在2-或4-位上被取代的；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中
R8是甲基或乙基；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R7是被苯并噻吩基取代的C1-C6烷基，所述苯并噻吩基可任選被烷基、鹵素、羥基、烷氧基、硫烷基或氨基取代；本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物，其中R8是甲基或乙基。
本發(fā)明的其它方面涉及本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物與可藥用載體的組合物；或本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物、另外的治療劑與可藥用載體的組合物；或本文所述任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物、另外的治療劑與可藥用載體的組合物，其中所述另外的治療劑是抗菌劑。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及治療被一種或多種細(xì)菌感染(包括但不限于泌尿道感染、全身和局部感染、膿毒癥、抗生素介導(dǎo)的結(jié)腸炎、胃腸道潰瘍、局部消毒、防腐、滅菌、傷口護(hù)理和手術(shù)清潔)的個(gè)體(例如哺乳動(dòng)物)的方法。該方法包括給所述個(gè)體(包括鑒定為需要這樣的治療的個(gè)體)施用有效量的本發(fā)明化合物或本發(fā)明組合物以產(chǎn)生這樣的作用。
本發(fā)明化合物和組合物也可用作抗寄生蟲劑。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及治療被一種或多種寄生蟲感染的個(gè)體(例如哺乳動(dòng)物)的方法。該方法包括給所述個(gè)體(包括鑒定為需要這樣的治療的個(gè)體)施用有效量的本發(fā)明化合物或本發(fā)明組合物來治療寄生蟲、或其疾病、感染或癥狀。
本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明化合物的方法。該方法包括取用2，4-二氨基喋啶基(或2，4-二氨基嘧啶并嘧啶基)化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成本發(fā)明化合物?；蛘?，該方法包括取用任一種本文所述的中間體化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還涉及通過上述方法制得的產(chǎn)品(即任何結(jié)構(gòu)式所示的化合物)。
還包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的是鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)；b)獲得步驟a)的化合物的衍生化合物；和c)評(píng)價(jià)衍生化合物的抗菌活性；和鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)取用候選化合物；b)在DHFR(例如bDHFR、hDHFR)酶模型中評(píng)價(jià)候選化合物的結(jié)合親合力；和c)評(píng)價(jià)候選化合物的抗菌活性?？咕钚缘脑u(píng)價(jià)可通過多種本領(lǐng)域已知的方法，包括本文所描述的方法來進(jìn)行。
相對(duì)于人DHFR可選擇性地抑制細(xì)菌DHFR的化合物可給細(xì)菌疾病或疾病癥狀提供有利的治療選擇。6-取代的喋啶已在文獻(xiàn)中作為有效的人DHFR抑制劑(例如用作抗癌劑的甲氨喋呤)或細(xì)菌DHFR抑制劑(例如用于治療細(xì)菌和寄生蟲感染的三甲曲沙)描述過。使用化合物例如三甲曲沙的現(xiàn)有治療具有和抑制DHFR有關(guān)的嚴(yán)重副作用和毒性。本發(fā)明化合物是強(qiáng)的bDHFR抑制劑，并且抑制hDHFR的活性要小得多。因此，這些化合物可通過抑制bDHFR而選擇性地作用于(例如殺死、抑制其生長/增殖)微生物，同時(shí)減輕或消除了對(duì)個(gè)體(例如人、動(dòng)物、哺乳動(dòng)物)的實(shí)質(zhì)性副作用，包括與抑制hDHFR有關(guān)(完全或部分)的副作用。
本發(fā)明所能包括的取代基和變量的組合僅是導(dǎo)致形成穩(wěn)定化合物的那些。本文所用術(shù)語“穩(wěn)定的”是指這樣的化合物，其具有足以容許生產(chǎn)的穩(wěn)定性，并且在可用于本文所述目的(例如治療或預(yù)防性地施用給個(gè)體或防腐、傷口敷料浸滲、滅菌或消毒應(yīng)用)的充分時(shí)間內(nèi)保持化合物的完整性。
除非另有說明，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有本發(fā)明所述領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解的含義。雖然類似于或等同于本文所述方法和物質(zhì)的方法和物質(zhì)可用于實(shí)施或測(cè)試本發(fā)明，但是下文描述合適的方法和物質(zhì)。在矛盾時(shí)，包括定義的本說明書起控制作用。此外，這些物質(zhì)、方法和實(shí)施例僅是舉例說明，而不是限制性的。
通過閱讀下面的詳細(xì)描述和權(quán)利要求書，本發(fā)明的具體特征和優(yōu)點(diǎn)將變得顯而易見。
本發(fā)明還涉及在本文中舉例說明的具體化合物。因此，一個(gè)本發(fā)明實(shí)施方案是本文具體描述的任何化合物，包括下面列出的示例性化合物
表1.化合物及其IDID 結(jié)構(gòu)







作為本發(fā)明一個(gè)方面的下表的化合物具有抗金黃色葡萄球菌(S.aureus)的強(qiáng)抗微生物活性，并且預(yù)計(jì)具有類似于口服吸收且生物可利用的藥物或藥物樣化合物的物化性質(zhì)。表現(xiàn)出了對(duì)多種細(xì)菌的抗菌活性(金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、腸糞球菌、M.catarrhalis和流感嗜血菌)。在該組微生物中，酵母細(xì)胞(啤酒糖酵母S.cerevisiae)是在哺乳細(xì)胞中可能的細(xì)胞毒性的指示標(biāo)準(zhǔn)。所測(cè)定的所有類似物都以大于32μg/mL的濃度表現(xiàn)出“毒性”。
作為本發(fā)明一個(gè)方面的下表的化合物具有抗金黃色葡萄球菌的強(qiáng)抗微生物活性，并且預(yù)計(jì)具有類似于口服吸收且生物可利用的藥物或藥物樣化合物的物化性質(zhì)。MIC是以mg/ml為單位給出的。
本發(fā)明代表性化合物的表共同的IDbDHFR 金黃色葡萄球菌Ki/(μM)avg (μg/ml)avg20 0.0620.521 0.082＜0.12522 0.002＜0.12523 0.027124 0.0150.25
250.004 0.25260.02 1270.008 0.5280.02 ＜0.125290.02 ＜0.125300.028 ＜0.125310.024 1320.011 0.5330.012 0.015
340.0141350.0370.5360.005＜0.125370.003＜0.125380.06 0.5390.0150.25400.004＜0.125410.037＜0.125420.004＜0.125430.004＜0.125
440.004＜0.125450.0082460.0932470.0232480.0072490.02 2500.0042510.0222520.0222
530.03 2540.01 2550.0192560.0932570.0112580.0152590.0052600.0292610.0132

本發(fā)明化合物可用常規(guī)技術(shù)合成。有利的是，這些化合物可由易于獲得的原料容易地合成。一般情況下，本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物可通過在合成方案和實(shí)施例中舉例說明的方法方便地獲得。
因此，一個(gè)實(shí)施方案涉及制備本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物的方法，包括合成在本文的合成方案中舉例說明的一種或多種中間體，然后將中間體轉(zhuǎn)化成本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物。另一個(gè)實(shí)施方案涉及制備本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物的方法，包括合成在本文的實(shí)施例中舉例說明的一種或多種中間體，然后將中間體轉(zhuǎn)化成本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物。另一個(gè)實(shí)施方案涉及制備本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物的方法，包括合成在本文的合成方案中舉例說明的一種或多種中間體，然后使用一種或多種在本文的合成方案或?qū)嵤├忻枋龅幕瘜W(xué)反應(yīng)將中間體轉(zhuǎn)化成本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物。親核試劑是本領(lǐng)域已知的，并且描述在本文所參考的化學(xué)教科書以及論文中。用于上述方法的化學(xué)試劑可包括例如溶劑、試劑、催化劑、保護(hù)基和脫保護(hù)基試劑等。上述方法還可以在本文具體描述的步驟之前或之后包括另外的步驟，以加入或除去合適的保護(hù)基，從而最終合成本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，本文中的合成方案沒有全面地列出可合成本申請(qǐng)中描述且要求保護(hù)的化合物的所有方法。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，其它方法將是顯而易見的。此外，上述各種合成步驟可以以另外的次序或順序進(jìn)行，以給出所需化合物。用于合成本文所述化合物的合成化學(xué)轉(zhuǎn)化和保護(hù)基方法(保護(hù)和脫保護(hù))是本領(lǐng)域已知的，并包括例如在下列文獻(xiàn)中描述的那些R.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2d.Ed.，John Wiley和Sons(1991)；L.Fieser和M.Fieser，F(xiàn)ieser andFieser’s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley和Sons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopedia ofreagentsforOrganic Synthesis，John Wiley and Sons(1995)及其以后的版本。
用于制備類似物的一般方法本發(fā)明化合物一般可通過使用有機(jī)合成領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法和使用文獻(xiàn)中描述的方法和技術(shù)來制得。
合成嘧啶并嘧啶 本發(fā)明的嘧啶并嘧啶化合物可使用多種不同的合成方法制得。嘧啶并嘧啶環(huán)系可在多步反應(yīng)方案中，由適當(dāng)取代的脒(R7-C＝NHNH2)和R5-取代的烷氧基亞甲基丙二腈作為原料制得?？蓪⑺们杌被奏づc胍縮合，以形成嘧啶并嘧啶環(huán)系。當(dāng)氰基氨基嘧啶中的R7是-Cl、-Br、-S-低級(jí)烷基時(shí)，可用取代的氮或氧親核試劑取代這些離去基團(tuán)，以提供R7-N(或O)-取代的烷基或芳基中間體?？蓪⑦@些中間體環(huán)合成在7-位被適當(dāng)取代的其相應(yīng)的嘧啶并嘧啶。
合成7-氨基取代的嘧啶并嘧啶的另一種方法是用胺親核攻擊6-氨基-2-溴嘧啶-5-腈(氯或硫甲基或硫乙基也可用作2-位的離去基團(tuán))，然后用胍將所得適當(dāng)取代的氰基氨基嘧啶環(huán)合。
如果攻擊性的適當(dāng)取代的親核性胺不是商購獲得的，則其可以用標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)化學(xué)方法制備。用于制備本發(fā)明化合物的一種這樣的標(biāo)準(zhǔn)方法是還原胺化。
在該眾所周知的方法中，在弱還原劑例如氰基硼氫化鈉或氰基硼氫化鋅存在下，將醛或酮與適當(dāng)取代的胺縮合。
直接的雜環(huán)取代方法 本發(fā)明化合物可通過芳族親核置換在2，4-二氨基嘧啶并嘧啶的7-位上的離去基團(tuán)來制得。離去基團(tuán)[LG]包括但不限于-Cl、-Br、-SCH3、-SC2H5和-N(CH3)3。用于該置換反應(yīng)的親核試劑可以是-N-烷基、-N-芳基或取代的烷基或芳基胺，或-O-烷基、-O-芳基或取代的醇或苯酚。
合成喋呤類似物6-或7-取代的喋呤類似物可通過將活化的試劑例如6-或7-氯甲基喋呤與親核試劑例如胺反應(yīng)來制得，并且通過文獻(xiàn)中描述的多種其它方法，在喋呤6-和7-位的其它官能團(tuán)例如溴甲基、碘甲基、羥基甲基、活化的羥基甲基、羰基、活化的羰基、羥基、氯、溴或甲基可用作制備6-或7-取代的類似物的合成試劑。
上述一般反應(yīng)方法可用于合成很多種7-取代的喋啶類似物。在一般方法中，將7-氯甲基與合適的胺在適當(dāng)溶劑例如DMF或2-甲氧基乙醇中反應(yīng)所需時(shí)間，并通過HPLC、TLC或NMR分析該反應(yīng)混合物。然后除去溶劑，并通過合適的方法純化產(chǎn)物，通常用堿將鹽形式的產(chǎn)物沉淀、重結(jié)晶或再沉淀出來，或通過色譜法純化。
在合適的溶劑中，在合適的堿存在下，將在C-6被含有烷基的離去基團(tuán)取代的2，4-二氨基喋啶基與起親核試劑功能的胺、苯胺、苯酚或醇化物偶聯(lián)(見下面的反應(yīng)方案)。離去基團(tuán)是在反應(yīng)期間可從分子上脫離下來的化學(xué)基團(tuán)。在從最初的分子上脫離下來之后，離去基團(tuán)可以是離子形式(例如OH、-SMe、-OAc、-O甲苯基、Cl-、Br-、I-)或者可以是中性形式(例如H2O、HOAc)。然后分離出所得產(chǎn)物，并用標(biāo)準(zhǔn)和已知的技術(shù)純化。
Lv＝離去基團(tuán)Nu＝親核基團(tuán)類似地，可用類似的方法處理二氨基嘧啶基吡啶基化合物，以制備其中A是CH或C-低級(jí)烷基的化合物。
本發(fā)明化合物可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心，并因此可作為外消旋體和外消旋混合物、單一對(duì)映體、單獨(dú)的非對(duì)映體和非對(duì)映體混合物存在。所有這樣的異構(gòu)體形式的這些化合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物還可以以其多種互變異構(gòu)體形式提供(見舉例說明)，在這樣的情況下，本發(fā)明包括所有互變異構(gòu)體形式的本發(fā)明化合物(例如環(huán)系的烷基化可導(dǎo)致在多個(gè)位點(diǎn)上的烷基化，本發(fā)明包括所有這樣的反應(yīng)產(chǎn)物)。所有這樣的異構(gòu)體形式的這些化合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。所有晶體形式的本發(fā)明化合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
在環(huán)部分(例如苯基、噻吩基等)上的取代基可連接在特定原子上，這是表示它們固定在該原子上，或者它們可以繪制成沒有連接在特定原子上(見下面)，這是表示它們可連接在沒有被除H(氫)以外的原子取代的任何可利用的原子上。例如，繪制成下述形式的結(jié)構(gòu) 是想包括所有(但不限于)下列結(jié)構(gòu)
本文所引用的所有參考文件，不論其是印刷、電子、計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)媒質(zhì)，還是其它形式，都全文引入本文以供參考，包括但不限于摘要、文章、雜志、出版物、教科書、論文、因特網(wǎng)地點(diǎn)、數(shù)據(jù)庫、專利和專利出版物。
制劑、組合物和前藥包括本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示化合物在內(nèi)的如本文所用的本發(fā)明化合物被定義為包括其可藥用衍生物或前藥?！翱伤幱醚苌锘蚯八帯笔侵冈谑┯媒o接受者后能夠提供(直接或間接)本發(fā)明化合物的本發(fā)明化合物的任何可藥用鹽、酯、酯的鹽或其它衍生物。特別合適的衍生物和前藥是這樣的，當(dāng)把這樣的化合物施用給哺乳動(dòng)物時(shí)，其能提高本發(fā)明化合物的生物利用度(例如使得口服給藥的化合物能更容易吸收到血液中)，或者與母化合物相比，能提高母化合物遞送到生物隔室(例如腦或淋巴系統(tǒng))中的能力。優(yōu)選的前藥包括其中本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示結(jié)構(gòu)上掛接有提高水溶解度或經(jīng)由腸膜活性運(yùn)輸力的基團(tuán)的衍生物。
可通過連接上用于增強(qiáng)選擇性生物性質(zhì)的適當(dāng)官能團(tuán)來修飾本發(fā)明化合物。這樣的修飾是本領(lǐng)域已知的，并且包括能提高向生物隔室(例如血液、淋巴系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng))內(nèi)的生物穿透、提高口服利用度、提高溶解度以容許注射給藥、改變代謝和改變排泄速度的修飾。
本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括衍生自可藥用無機(jī)和有機(jī)酸和堿的那些。合適的酸加成鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、甘醇酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酯酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其它酸，例如草酸，雖然自身不是可藥用的，但是可用于制備在獲得本發(fā)明化合物及其可藥用酸加成鹽過程中用作中間體的鹽。衍生自合適的堿的鹽包括堿金屬(例如鈉)、堿土金屬(例如鎂)、銨和N(烷基)4+鹽。本發(fā)明還包括本文所公開的任何化合物的堿性含氮基團(tuán)的季銨化形式。通過這樣的季銨化可獲得水或油可溶性或可分散的產(chǎn)物。
抗菌活性體外測(cè)定可使用標(biāo)準(zhǔn)方法篩選本發(fā)明化合物的抗菌活性。
在一個(gè)如下所示的實(shí)例中，使用肉湯微量稀釋技術(shù)來測(cè)定化合物抗給定的細(xì)菌培養(yǎng)物的體外活性，以獲得最小抑制濃度(MIC)數(shù)據(jù)。
下表2中提供了某些代表性化合物的MIC。
表2.某些化合物對(duì)于多種不同細(xì)菌的MIC(μg/mL)(數(shù)據(jù)以mg/l為單位給出，n.t.未測(cè)試)。
微稀釋抗微生物敏感性測(cè)試被測(cè)試化合物的貯備液是在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中以5mg/ml的濃度制備的。被測(cè)試化合物的工作溶液是由貯備液在Mueller-Hinton肉湯(MHB)中以64μg/ml的起始濃度制備的。
細(xì)菌接種物是由過夜培養(yǎng)物制備的(即在5ml MHB中的得自瓊脂板的一個(gè)新鮮菌落；流感嗜血菌在加入酵母提取物、正鐵血紅素和NAD的MHB中生長)，離心2×5分鐘/3000rpm(對(duì)于肺炎鏈球菌和流感嗜血菌，2×10分鐘/3000rpm)，每次分配在5ml新鮮的MHB中，這樣將細(xì)菌懸浮液稀釋以在一個(gè)微量滴定板孔(總體積100μl)中獲得100個(gè)菌落形成單位(cfu)。
給微量滴定板孔填充由64μg/ml開始的2倍稀釋的測(cè)試化合物(50μl)。然后給孔中填充50μl細(xì)菌接種物(最終體積100μl/孔)。將微量滴定板在37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)(將肺炎鏈球菌在富含CO2的氣氛下生長)。
然后用TECAN SpectroFluor Plus測(cè)定在590nm的每個(gè)孔的光密度(OD590)。最小抑制濃度(MIC)定義為表現(xiàn)出90％生長抑制的濃度。
測(cè)定抗細(xì)菌和人DHFR的活性的生化分析材料和方法人和細(xì)菌DHFR大腸桿菌DHFR是由Eric Brown of MacMasterUniversity友情提供的。
克隆、表達(dá)、純化人DHFR由購自Clontech的Human Universal QuickcloneTM cDNA通過PCR克隆人DHFR cDNA。由以登記號(hào)XM-003991在GenBank(1)中保存的人序列設(shè)計(jì)PCR引物。引物序列如下，并導(dǎo)致186氨基酸hDHFR編碼區(qū)域的擴(kuò)增
oAlt-92(5’)PCR引物gatcgatcgatccatatggttggttcgctaaactgcoAlt-93(3’)PCR引物gatcgatcaagcttcattaatcattcttctcatatacttc將PCR片段用限制酶NdeI和HindIII消化，然后連接到pKK223-3表達(dá)載體的衍生物(Amersham Pharmacia)內(nèi)。將最終的表達(dá)載體(pFW96.2)轉(zhuǎn)化成E.coli Top10 F’，通過加1mM IPTG，然后在37℃培養(yǎng)4小時(shí)來誘導(dǎo)hDHFR蛋白。根據(jù)以前出版的方法(2)純化重組的人DHFR。
酶測(cè)定二氫葉酸和NADPH購自Sigma。改動(dòng)酶測(cè)定以使其與以前出版的方法(2，3)的微量滴定形式相適應(yīng)。所有測(cè)定都是以250μl體積在96-孔微量滴定板中進(jìn)行的。典型測(cè)定包括20nM DHFR(人或大腸桿菌)、100μM NADPH和50μM二氫葉酸，在100mM HEPES pH 8中，10mM KCl和10mM MgCl2中。通過使用分光光度法測(cè)定NADPH向NADP+的轉(zhuǎn)化來檢測(cè)該測(cè)定，其中這種轉(zhuǎn)化導(dǎo)致在340nm的吸收度下降。使用該反應(yīng)在340nm的消光系數(shù)(12,300M-1cm-1)(4)來將吸收度轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物濃度。
Ki測(cè)定將化合物在DMSO中系列稀釋至25mM-1μM的濃度范圍。將5微升抑制劑化合物在DMSO中的溶液加到120μl酶溶液(40nM DHFR和200μM NADPH)中。通過加入125μl 100μM二氫葉酸來開始該反應(yīng)。在該測(cè)定中的最終濃度是20nM DHFR，100μM NADPH，50μM二氫葉酸和500μM-20nM的抑制劑化合物。最終的DMSO濃度為占總體積的2％。如上所述監(jiān)測(cè)反應(yīng)。
將觀測(cè)的速度(nM/秒)對(duì)抑制劑濃度在log標(biāo)度上繪圖，通過將所得曲線與下述方程擬合來確定Ki值V＝(Vmax[S])/(Km(1+I/Kj)+[S])，其中S＝二氫葉酸，Km＝二氫葉酸的Michaelis常數(shù)，I＝抑制劑濃度。
一般情況下，本發(fā)明化合物抑制細(xì)菌DHFR(bDHFR)酶的效力大于抑制人DHFR(hDHFR)酶的效力。這種抑制的選擇性在抗菌藥物中是有用的性質(zhì)。抗菌藥物甲氧芐啶是一個(gè)實(shí)例。甲氧芐啶以＜0.002μM抑制細(xì)菌DHFR。甲氧芐啶在抑制人DHFR酶方面基本上無效。在人患者中，抑制人DHFR會(huì)引起顯著的副作用。具有高的人與細(xì)菌DHFR抑制比例的化合物在主要副作用機(jī)制方面可視為“更安全的”；即抑制hDHFR。甲氨蝶呤是一種用于治療癌癥的藥物。其主要作用機(jī)制是通過抑制存在于癌細(xì)胞中的hDHFR酶來起作用。該形式的癌癥化療的很多副作用是由于抑制hDHFR所致。藥物例如三甲曲沙(未顯示)是具有顯著hDHFR抑制作用的抗微生物劑(6-取代的-喹唑啉)。需要給患者施用/聯(lián)合施用稱為“解救”藥物的藥物例如leukovorin來對(duì)抗很強(qiáng)的、致命的抑制hDHFR所致的副作用。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述結(jié)構(gòu)式所示的化合物是這樣的，其以比表現(xiàn)出hDHFR酶抑制的劑量低得多的劑量抑制細(xì)菌DHFR(高效力)，或具有大于10(例如＞50、＞100、＞1000、＞10,000、＞20,000、＞25,000)的治療指數(shù)(即hDHFRKi/bDHFR Ki比例)。
下表3中總結(jié)了本發(fā)明代表性化合物的細(xì)菌與人DHFR Ki值的比較。本發(fā)明化合物相對(duì)于人對(duì)細(xì)菌DHFR抑制的高選擇性表明這些類似物在效力比例(抗微生物活性)和毒性比較(與hDHFR抑制有關(guān)的人副作用)方面可具有高的治療指數(shù)。
表3.比較本發(fā)明代表性化合物的細(xì)菌與人DHFR Ki值(nM)(n.t.未測(cè)試)化合物IDbDHFR Ki hDHFR1＜100500-999
2100-499 1000-49993＜1001000-49994＜100500-9995＜100500-99961000-4999＞50007100-499 ＞500081000-4999＞50009100-499 ＞500010 100-499 ＞500011 500-999 ＞500012 100-499 1000-499913 500-999 ＞500014 ＜100＞500015 100-499 ＞500016 ＜100＞500017 ＜100n.t.
21 ＜100＞500022 ＜2 ＞75,00066 ＜1000 ＞500,000
抗菌活性的體內(nèi)測(cè)定還在實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物中測(cè)試化合物的抗菌效力。這些體內(nèi)實(shí)驗(yàn)包括但不限于全身和局部感染模型，泌尿道感染模型，螺旋桿菌感染包括胃腸道潰瘍、膿毒癥、抗生素介導(dǎo)的結(jié)腸炎和傷口護(hù)理。還可以在動(dòng)物中評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物以評(píng)定其藥動(dòng)學(xué)特征例如口服生物利用度、口服吸收、化學(xué)半衰期、代謝物鑒定、在不同時(shí)間的血清水平和排泄速度。
全身細(xì)菌感染動(dòng)物模型文獻(xiàn)中描述了全身感染模型。使用下列條件來分析本申請(qǐng)中的化合物。讓細(xì)菌在Mueller-Hinton瓊脂中于37℃生長24小時(shí)。對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)，細(xì)菌懸浮液是這樣制備的將4-5個(gè)細(xì)菌菌落接種到Mueller-Hinton肉湯(MHB)中，在37℃培養(yǎng)24小時(shí)以產(chǎn)生約109CFU/ml。BalbC雌性小鼠是由Charles River提供的。通過在尾靜脈中單次注射LD100劑量的細(xì)菌培養(yǎng)懸浮液(1×108CFU/100μl/動(dòng)物)來將動(dòng)物感染。每天進(jìn)行幾次小心的臨床檢查，記錄明顯的臨床癥狀和死亡率。在6天的時(shí)間內(nèi)觀察動(dòng)物存活。將阿奇霉素溶解在0.5％甲基纖維素的鹽水溶液中，并口服給藥。用研缽和研杵將測(cè)試化合物微?；?，然后溶解在含有3％DMF的甲基纖維素鹽水溶液中。首次劑量是在感染30分鐘后給予，以后的劑量在3天時(shí)間內(nèi)每12小時(shí)施用1次。
體內(nèi)效力測(cè)試-金黃色葡萄球菌小鼠敗血癥模型在金黃色葡萄球菌小鼠保護(hù)模型中測(cè)定幾種化合物的效力。當(dāng)口服給藥時(shí)，25和62這兩種化合物以40％的比例保護(hù)了所治療的動(dòng)物不發(fā)生致死感染。
雜環(huán)化合物的臨床應(yīng)用本發(fā)明化合物可治療或預(yù)防性地用于治療或預(yù)防細(xì)菌感染和/或疾病。
本發(fā)明還涉及在個(gè)體中破壞微生物生長內(nèi)部調(diào)節(jié)的方法，包括給所述個(gè)體施用本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物或包含本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物的組合物的步驟。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及在個(gè)體中抑制微生物或細(xì)菌活性的方法，包括給所述個(gè)體施用本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物或包含本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物的組合物的步驟。所述個(gè)體優(yōu)選為人或動(dòng)物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及在個(gè)體中治療疾病或疾病癥狀的方法，包括給所述個(gè)體施用本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物或包含本文所述的任何結(jié)構(gòu)式所示化合物的組合物的步驟。所述個(gè)體優(yōu)選為人或動(dòng)物。
感染和感染性疾病是由多種不同的微生物引起的。本發(fā)明化合物可用于細(xì)菌的感染性疾病的治療中。
殺死或限制微生物生長的化合物可用于治療感染和感染疾病。已知具體的細(xì)菌微生物與這類感染或感染疾病有關(guān)。下面列出細(xì)菌感染的某些實(shí)例及其最常見的病原體。
上和下呼吸道感染包括但不限于支氣管炎、竇炎、肺炎、咽喉痛、慢性鏈球菌感染、白喉、急性會(huì)厭炎、流感、慢性支氣管炎、中耳感染(中耳炎)、肺炎、支氣管肺炎、軍團(tuán)病、非典型肺炎、百日咳和結(jié)核病。
引起呼吸道感染的細(xì)菌微生物包括但不限于釀膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血菌、M.catarrhalis、腦膜炎奈瑟氏球菌、百日咳博德特氏菌、腸桿菌(Enterobacteriaceae)、厭氧菌、諾卡氏菌屬(Nocardia)、假單胞菌屬、鸚鵡熱衣原體(C.psittaci)和白喉棒狀桿菌(C.diphtheriae)。
泌尿道感染包括但不限于尿道炎、膀胱炎、腎孟腎炎(腎感染)、無癥狀細(xì)菌尿、間質(zhì)性膀胱炎、急性尿道癥狀和復(fù)發(fā)性泌尿道感染。
引起泌尿道感染的細(xì)菌微生物包括但不限于大腸桿菌、變形桿菌屬(Proteus)、天命菌屬(Providentia)、假單胞菌屬、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)、腸桿菌屬(Enterobacter)、沙雷氏菌屬(Serratia)、Coag陰性葡萄球菌(Coag.neg.Staphylococci)、腸球菌(Enterococci)和砂眼衣原體。
皮膚和傷口感染包括但不限于紅癬(erythrasma)、甲溝炎、膿皰病、濾泡炎、丹毒、蜂窩織炎和壞死性筋膜炎。
引起皮膚和傷口感染的細(xì)菌微生物包括但不限于鏈球菌、葡萄球菌、銅綠假單胞菌、P.acnes、梭狀芽孢桿菌(Clostridia)、厭氧菌和脆弱擬桿菌(B.fragilis)。
引起全身感染(菌血癥)的細(xì)菌微生物包括但不限于鏈球菌、葡萄球菌、腸桿菌(Enterobacteriaceae)、假單胞菌屬、擬桿菌屬(Bacteroides sp.)、奈瑟氏菌屬(Neisseria)、流感嗜血菌、布魯氏桿菌屬(Brucella)、利斯特氏菌屬(Listeria)和傷寒沙門氏菌(S.typhi)。
細(xì)菌起源的性傳播疾病包括但不限于子宮附件炎、子宮頸炎、軟下疳、尿道炎、龜頭炎、淋病、性病性淋巴肉芽腫、梅毒和腹股溝肉芽腫。
引起性傳播感染的細(xì)菌微生物包括但不限于衣原體屬(Chlamydia)、淋病奈瑟氏球菌、U.urealyticum、蒼白密螺旋體(T.pallidium)、陰道加德納氏菌(G.vaginalis)、C.granulomatis、杜氏嗜血菌、鏈球菌、葡萄球菌和腸桿菌。
細(xì)菌起源的胃腸道感染包括但不限于食物引起的感染、腸炎、大腸炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胰腺炎、膀胱感染、霍亂和thyphus。引起胃腸道感染的幽門螺桿菌、C.pylori、C.duodeni、傷寒沙門氏菌、副傷寒沙門氏菌(S.paratyphi)、霍亂弧菌、厭氧菌、腸桿菌、葡萄球菌和鏈球菌。
治療患者的方法本文所描述的結(jié)構(gòu)式所示雜環(huán)化合物可施用給患者以例如治療感染如細(xì)菌感染。本發(fā)明雜環(huán)化合物可以例如在可藥用載體如生理鹽水中給藥，與其它藥物聯(lián)合給藥，和/或與合適的賦形劑一起給藥。本發(fā)明雜環(huán)化合物可例如通過注射給藥、靜脈內(nèi)給藥、動(dòng)脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腹膜內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥或皮下給藥；或口服給藥、頰給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)粘膜給藥、局部給藥、在眼用或耳用制劑中給藥或通過吸入給藥，劑量為約0.001-約100mg/kg體重，劑量?jī)?yōu)選為10mg-5000mg/次給藥，每4-120小時(shí)給藥一次，或依據(jù)特定藥物的需要進(jìn)行給藥。本發(fā)明方法包括施用有效量的化合物或組合物來實(shí)現(xiàn)所需或所規(guī)定的作用。一般情況下，本發(fā)明藥物組合物可每天給藥約1-約6次，或者以連續(xù)輸注的形式給藥。這樣的給藥可用作長期或急性治療?？梢耘c載體材料合并以產(chǎn)生單一劑型的活性組分的量將根據(jù)所治療的個(gè)體和特定的給藥方式而變。典型的制劑含有約5％-約95％活性化合物(w/w)?；蛘撸@樣的制劑含有約20％-約80％活性化合物。
可能需要低于或高于上述范圍的劑量。對(duì)于任何特定患者，具體的劑量和治療方案將取決于多種因素，包括所用具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄速度、聯(lián)合用藥物，疾病、病癥或癥狀的嚴(yán)重程度和病程，患者對(duì)疾病、病癥或癥狀的生理傾向以及臨床醫(yī)師的判斷。
在患者的病癥好轉(zhuǎn)時(shí)，如果需要的話，可施用維持劑量的本發(fā)明化合物、組合物或聯(lián)合用藥物。然后可根據(jù)病癥將給藥劑量或頻率或二者都降至其中好轉(zhuǎn)的病癥得以保持的水平，當(dāng)癥狀已減輕至所需水平時(shí)，應(yīng)當(dāng)停止治療。然而，根據(jù)疾病癥狀的任何復(fù)發(fā)，患者可能需要長期的間歇治療。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在哺乳動(dòng)物中治療、預(yù)防或減輕疾病癥狀的方法，包括給所述哺乳動(dòng)物施用任何上述藥物組合物和聯(lián)合用藥物的步驟。所述哺乳動(dòng)物優(yōu)選是人。如果藥物組合物僅包含本發(fā)明化合物作為活性組分，則所述方法還可以包含給所述哺乳動(dòng)物施用另外的治療劑的步驟，所述另外的治療劑是例如磺胺類藥物(例如新諾明)、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(例如克拉霉素)、質(zhì)子泵抑制劑(例如奧美拉唑)、利福霉素類藥物(例如利福平)、氨基糖苷類藥物(例如鏈霉素、慶大霉素、妥布霉素)、青霉素類藥物(例如青霉素G、青霉素V、替卡西林)、β-內(nèi)酰胺抑制劑、頭孢菌素類藥物(例如頭孢唑啉、頭孢克洛、頭孢他啶)和抗分支桿菌劑(例如異煙肼、乙胺丁醇)。其它合適的治療劑描述于感染性疾病教科書和出版物中，包括例如Principlesand Practice of Infectious Diseases，G.L.Mandell等人.eds.，3rded.，Churchhill Livingstone，New York，(1990)。這樣的另外的治療劑可在施用包含任何本發(fā)明化合物的組合物之前、同時(shí)或之后施用給哺乳動(dòng)物。
本發(fā)明藥物組合物包含本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物或其可藥用鹽；選自抗癌劑、抗病毒劑、抗真菌劑、抗生素、質(zhì)子泵抑制劑的其它治療劑和任何可藥用載體、輔料或介質(zhì)。另外的本發(fā)明組合物包含本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物或其可藥用鹽；和可藥用載體、輔料或介質(zhì)。這樣的組合物還可任選包含另外的治療劑，包括例如選自抗癌劑、抗病毒劑、抗真菌劑、抗生素的另外的治療劑和任何可藥用載體、輔料或介質(zhì)。另外的本發(fā)明藥物組合物包含本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物或其可藥用鹽；和可藥用載體、輔料或介質(zhì)。這樣的組合物還可任選包含另外的治療劑，包括例如選自抗癌劑、抗微生物劑、抗病毒劑、抗真菌劑、質(zhì)子泵抑制劑或抗生素的另外的治療劑。本發(fā)明組合物包含其量能有效地實(shí)現(xiàn)微生物或細(xì)菌水平調(diào)節(jié)的本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物，以及如果存在的話另外的治療劑。
術(shù)語“可藥用載體或輔料”是指這樣的載體或輔料，其可以與本發(fā)明化合物一起施用給患者，不破壞本發(fā)明化合物的藥理活性，并且當(dāng)以足以遞送治療量的化合物的劑量給藥時(shí)，沒有毒性。
可用于本發(fā)明藥物組合物中的可藥用載體包括但不限于離子交換劑、礬土、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物遞送系統(tǒng)(SEDDS)例如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯，用于藥物劑型中的表面活性劑例如吐溫或其它類似的聚合的遞送基質(zhì)，血清蛋白例如人血清白蛋白，緩沖物質(zhì)例如磷酸鹽，甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)例如魚精蛋白硫酸鹽、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽，膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。環(huán)糊精例如α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精和γ-環(huán)糊精，或其化學(xué)改性衍生物例如羥基烷基環(huán)糊精，包括2-和3-羥基丙基-β-環(huán)糊精，或其它可溶性衍生物也可有利地用于增強(qiáng)本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物的遞送。
本發(fā)明藥物組合物可口服給藥、非胃腸道給藥、通過吸入噴霧給藥、局部給藥、直腸給藥、經(jīng)鼻給藥、頰給藥、陰道給藥或經(jīng)由植入的貯藥庫給藥，優(yōu)選口服給藥或通過注射給藥。本發(fā)明藥物組合物可含有任何常規(guī)無毒的可藥用載體、輔料或介質(zhì)。在某些情況下，可用可藥用酸、堿或緩沖劑調(diào)節(jié)制劑的pH以提高所配制的化合物或其給藥形式的穩(wěn)定性。本文所用術(shù)語“非胃腸道給藥”包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑液內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、損傷內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。
本發(fā)明藥物組合物可以呈無菌可注射制劑例如無菌可注射水或油質(zhì)懸浮液的形式。這些懸浮液可依據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)，使用合適的分散劑或潤濕劑(例如吐溫80)和懸浮劑來配制而成。無菌注射制劑還可以是在無毒非胃腸道可接受的稀釋劑或溶劑中的溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的介質(zhì)和溶劑有甘露醇、水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌固定油常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。對(duì)于此，可使用任何溫和的固定油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，也可以使用天然可藥用油例如橄欖油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙基化的變型。這些油溶液或懸浮液還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑或羧甲基纖維素或常用于可藥用劑型例如乳劑和/或懸浮液的制劑中的類似分散劑。其它常用的表面活性劑例如吐溫或司盤和/或常用于制備可藥用固體、液體或其它劑型的其它類似乳化劑或生物利用度提高劑也可用于制劑中。
本發(fā)明藥物組合物可以以任何口服可接受的劑型，包括但不限于膠囊、片劑、乳液和水懸浮液、分散液和溶液形式口服給藥。對(duì)于口服使用的片劑，常用載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還加入潤滑劑例如硬脂酸鎂。對(duì)于以膠囊形式口服給藥，適用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)需要水懸浮液和/或溶液來口服給藥時(shí)，可將活性組分懸浮或溶解在油相中，并與乳化劑和/或懸浮劑合并在一起。如果需要的話，還可以加入一些甜味劑和/或風(fēng)味劑和/或著色劑。
本發(fā)明藥物組合物還可以直腸給藥的栓劑形式施用。這些組合物可通過將本發(fā)明化合物與在室溫是固體，但是在直腸溫度是液體，并因此將在直腸中熔化而釋放出藥物的合適的非刺激性賦形劑混和來制得。這樣的賦形劑包括但不限于椰子油、蜂蠟和聚乙二醇。
當(dāng)所需治療涉及易于通過局部施藥來進(jìn)入的區(qū)域或器官時(shí)，本發(fā)明藥物組合物的局部給藥是尤其有用的。對(duì)于給皮膚局部給藥，應(yīng)當(dāng)將藥物組合物配制成合適的軟膏劑，其中含有懸浮或溶解在載體里的活性組分。用于局部施用本發(fā)明化合物的載體包括但不限于礦物油、液體石蠟、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水?；蛘?，可用合適的乳化劑將藥物組合物配制成洗劑或霜?jiǎng)?，其中含有懸浮或溶解在載體里的活性化合物。合適的載體包括但不限于礦物油、山梨聚糖單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟基酯蠟、鯨蠟硬脂醇(cetearyl alcohol)、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。本發(fā)明藥物組合物還可以通過直腸栓劑或在合適的灌腸劑中局部施用到下腸道中。本發(fā)明還包括局部給藥用透皮貼劑。
本發(fā)明藥物組合物還可以通過鼻用氣霧劑或吸入劑來給藥。這樣的組合物是依據(jù)藥物制劑領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)制得的，并且可用苯甲醇或其它合適的防腐劑、用于提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或本領(lǐng)域已知的其它助溶劑或分散劑制成在鹽水的溶液。
本發(fā)明化合物和組合物可用作消毒劑、防腐劑、傷口敷料(例如繃帶)中的助劑和傷口清潔方法(擊打法、強(qiáng)飼法等)中的助劑。
當(dāng)本發(fā)明組合物包含本文所述的結(jié)構(gòu)式所示化合物與一種或多種另外的治療劑或預(yù)防劑的聯(lián)合用藥物時(shí)，本發(fā)明化合物和另外的活性劑都應(yīng)當(dāng)通常以在單一治療方案中正常施用劑量的約1-100％，更優(yōu)選約5-95％的劑量水平存在。另外的活性劑可作為多劑量方案的一部分與本發(fā)明化合物分開給藥?；蛘?，這些活性劑可與本發(fā)明化合物混和在一起作為單一劑型的一部分在單一組合物中給藥。
聯(lián)合治療的可能應(yīng)用的實(shí)例包括本文所述的結(jié)構(gòu)式所示任何化合物和下列藥物與大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和質(zhì)子泵抑制劑聯(lián)合使用來治療胃炎以及由幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)引起的相關(guān)疾??；與抗菌劑(例如新諾明、環(huán)丙沙星和阿莫西林)聯(lián)合使用來治療泌尿道感染；例如與利福霉素聯(lián)合使用來治療葡萄球菌感染；例如與利福霉素、異煙肼、乙胺丁醇或氨基糖苷聯(lián)合使用來治療分支桿菌感染；例如與替卡西林、慶大霉素或妥布霉素聯(lián)合使用來首次治療推測(cè)可能患有感染的中性白細(xì)胞減少的患者，例如與青霉素或氨基糖苷聯(lián)合使用來治療腸球菌心內(nèi)膜炎；例如與抗生素聯(lián)合使用來治療腹膜內(nèi)、骨盆或其它多微生物感染；例如與其它DHFR抑制劑(例如甲氧芐啶、本文所述的DHFR抑制劑)聯(lián)合使用。
在下列實(shí)施例中更詳細(xì)地描述本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例僅是為了舉例說明，而不應(yīng)當(dāng)理解為對(duì)以任何方式對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例液相色譜數(shù)據(jù)是用偶聯(lián)到二極管排列檢測(cè)器上的Hewlett-Packard(HP)1090 Series Liquid Chromatograph獲得的[Restek Allure C18柱；粒徑為5μM；柱長為150mm；柱直徑為4.6mm；流速為1ml/分鐘；溶劑方案為在8分鐘內(nèi)從95％H2O(w/0.1％TFA)/5％CH3CN(w/0.1％TFA)到100％CH3CN(w/0.1％TFA)，然后保持恒定3分鐘，檢測(cè)波長為254nm]。質(zhì)譜數(shù)據(jù)是用Agilent 1100LC/MS或Thermofinigan AQA/Gilson LC/MS系統(tǒng)獲得的。1H-和13C-NMR光譜是用Bruker AC-300 MHz儀器獲得的。中壓快速色譜法是在IscoInc.，Combiflash Sg100c系統(tǒng)上進(jìn)行的。薄層色譜是用EM Science硅膠60 F254塑料TLC板進(jìn)行的。熔點(diǎn)是在開口的毛細(xì)管中用Meltemp II儀器進(jìn)行的。使用UV光來檢測(cè)在TLC板上的化合物。用于反應(yīng)的試劑購自Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，WI)，Sigma ChemicalCo.(Saint Louis，MO)，F(xiàn)luka Chemical Corp.(Milwaukee，WI)，F(xiàn)isher Scientific(Pittsburgh，PA)，TCI America(Portland，OR)，Transworld Chemicals，Inc.(Rockville，MD)，Maybridge ChemicalLtd.，(London，England)或Lancaster Synthesis(Windham，NH)。
合成喋呤類似物 6-取代的喋呤一般可通過將活化的試劑例如6-氯甲基喋呤與親核試劑例如胺(例如HNR’R”可以是HNHY或HNR16Y)反應(yīng)來制得。在喋呤的6-位上的其它官能團(tuán)例如溴甲基、碘甲基、羥基甲基、活化的羥基甲基、羰基(例如酮或醛)、活化的羰基(例如酯、酰胺或酸酐)、羥基、氯、溴或甲基可用作制備6-取代的類似物的合成試劑。
合成6-(3，5-二氯苯基)氨基甲基-2，4-二氨基喋啶向3，5-二氯苯胺(324mg，2mmol)在無水DMF(5mL)內(nèi)的溶液中加入2，4-二氨基喋啶鹽酸鹽(100mg，0.4mmol)。用干燥氮?dú)獯祾咴摲磻?yīng)容器，密封，在85℃的鋁加熱塊上放置3天。然后將溶劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。加入乙醇(2×15mL)，反復(fù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。向所得粗產(chǎn)物中加入H2O(3mL)、HOAc(0.3mL)和1M HCl(0.1mL)至pH～2。將該混合物離心以除去不溶雜質(zhì)。取上清液，用1M NaOH(～0.1mL)將pH調(diào)節(jié)至～5以沉淀出產(chǎn)物。收集產(chǎn)物，用EtOH(3mL)洗滌，在高度真空下干燥，獲得了純的產(chǎn)物。HPLC rt 6.1分鐘，MS m/z。
核磁共振(NMR)譜分析給出了與產(chǎn)物一致的結(jié)果。
制備化合物64
向3-氨基-4-甲基三氟甲苯(3.35g，4.85mmol)在DMF(10mL)內(nèi)的溶液中加入2，4-二氨基-6-氯甲基喋啶.HCl(1.57g，6.35mmol)和K2CO3(1.76g，12.7mmol)。用氬氣吹掃該反應(yīng)混合物，在劇烈攪拌下在密封的小瓶中于60-65℃加熱24小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入0.5N HCl(～120mL)中。將所得混合物(pH0-1；pH試紙)攪拌15分鐘，然后過濾。將收集的沉淀用5％HCl、MeOH/CH2Cl2和Et2O洗滌。將產(chǎn)物真空干燥，獲得了所需產(chǎn)物(710mg)，為黃色固體。通過RP-HPLC證實(shí)了產(chǎn)物是純的，Rt＝3.25分鐘，m/z＝350(pos)。
制備化合物63 向4-氯-1-萘基胺(3.70g，20.8mmol)在DMF(10mL)內(nèi)的溶液中加入2，4-二氨基-6-氯甲基喋啶.HCl(1.58g，6.39mmol)和K2CO3(1.81g，13.0mmol)。用氬氣吹掃該反應(yīng)混合物，在劇烈攪拌下在密封的小瓶中于60-65℃加熱34小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入過量0.5N HCl中。調(diào)節(jié)所得混合物的pH(NH4OH；pH5；pH試紙)，然后過濾。將收集的沉淀用5H2O、MeOH/CH2Cl2和Et2O洗滌。將該固體懸浮在Et2O中，加入HCl(2N的Et2O溶液，6mL)。將該混合物密封，攪拌0.5小時(shí)。蒸發(fā)，然后真空干燥，獲得了產(chǎn)物，為棕色固體，HPLC表明其具有～90％的純度，并含有較大量的雜質(zhì)。
如下所述進(jìn)一步純化該棕色固體懸浮在0.5N HCl(120mL)中，加入濃的HCl(～5mL)以將該固體溶解。盡管在高酸性下(pH＜0，pH試紙)，但是仍然有大量固體未溶解。收集沉淀，用H2O、MeOH/CH2Cl2和Et2O洗滌。將產(chǎn)物干燥，獲得了1.33克所需產(chǎn)物，為紅色固體，HPLC表明其具有高純度，Rt＝3.39分鐘；m/z＝353(pos)。
合成嘧啶并嘧啶類似物制備化合物25 將2.89g(14.5mmol)嘧啶11、2.87g(15mmol)甲基胺1a和2.5ml(18mmol)三乙胺在25ml 2-甲氧基乙醇中的混合物于80℃攪拌2小時(shí)。將所得混合物冷卻至室溫，將溶劑蒸發(fā)，獲得了油狀殘余物。加入30ml乙酸乙酯以溶解殘余物，將所得溶液用水洗滌3次，然后用無水硫酸鈉干燥。蒸發(fā)，獲得了油狀殘余物，然后通過從乙醚/己烷中重結(jié)晶來純化。獲得了3.95g產(chǎn)物1b，為白色粉末。
向3.71g化合物1a在40ml 2-甲氧基乙醇內(nèi)的溶液中加入24ml1M胍的甲醇溶液和16ml 1.5M CH3ONa的CH3OH溶液。將該混合物在140℃攪拌12小時(shí)，同時(shí)用裝配的迪安-斯榻克分水器除去甲醇溶液。將該反應(yīng)混合物冷卻，真空蒸發(fā)，以生成油狀殘余物，然后溶解在30ml甲醇中。加入50ml水以沉淀出產(chǎn)物。然后將產(chǎn)物從甲醇中重結(jié)晶，將重結(jié)晶的產(chǎn)物在甲醇中攪拌3次。獲得了920mg產(chǎn)物，為白色粉末。根據(jù)HPLC分析，其純度為98.52％。
制備化合物62
按照類似于制備化合物25的方法來制備化合物62。獲得了860mg終產(chǎn)物，為白色粉末，其具有98.80％的HPLC純度。
制備化合物33的方法 制備化合物1在冰水浴內(nèi)，向4.25g(27.2mmol)萘甲醛在30ml無水乙醚內(nèi)的溶液中緩慢地加入13ml溴化乙基鎂的乙醚溶液(3M)。將該混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后通過加入40ml 1N HCl溶液來中止反應(yīng)。將有機(jī)層用水(20ml)、飽和碳酸氫鈉(20ml×2)、鹽水(20ml)洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。將有機(jī)溶劑蒸發(fā)，獲得了粗產(chǎn)物1，其不用進(jìn)一步純化直接用于該反應(yīng)的下一個(gè)步驟。
制備化合物2將粗產(chǎn)物1溶解在30ml丙酮中，向在冰水浴內(nèi)的所得混合物中緩慢地加入Jone’s試劑直至持續(xù)出現(xiàn)棕色。將該溶液在室溫進(jìn)一步攪拌15分鐘，然后加入5ml異丙醇。加入50ml乙酸乙酯后，將所得混合物用水(30ml)、飽和碳酸氫鈉(30ml×2)、飽和NaCl洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。將有機(jī)溶劑蒸發(fā)，獲得了油狀殘余物，然后通過硅膠柱色譜純化。獲得了4.01g酮2。
制備化合物3向4.01g酮2和16.3ml甲基胺的甲醇溶液(2M)的混合物中加入1.61g氰基硼氫化鈉和160mg氯化鋅。將所得混合物在50℃攪拌過夜。加入1N HCl來中止該反應(yīng)。真空除去大部分甲醇后，用二氯甲烷(15ml×2)萃取該溶液。用2N NaOH將水層的pH調(diào)節(jié)至約9。然后用二氯甲烷(15ml×3)萃取產(chǎn)物。將合并的有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。將溶劑蒸發(fā)，獲得了3.54g化合物3。
制備化合物4將2.89g(14.5mmol)嘧啶11、3.54g(15mmol)化合物3和2.5ml(18mmol)三乙胺在25ml 2-甲氧基乙醇中的混合物于80℃攪拌2小時(shí)。將所得混合物冷卻至室溫，將溶劑蒸發(fā)，獲得了油狀殘余物。加入30ml乙酸乙酯以溶解殘余物，將所得溶液用水洗滌3次，然后用無水硫酸鈉干燥。蒸發(fā)，獲得了油狀殘余物，然后通過硅膠柱色譜純化。獲得了3.95g產(chǎn)物4，為白色粉末。
制備化合物33向3.60g化合物4在40ml 2-甲氧基乙醇內(nèi)的溶液中加入24ml1M胍的甲醇溶液和16ml 1.5 M CH3ONa的CH3OH溶液。將該混合物在140℃攪拌12小時(shí)，同時(shí)用裝配的迪安-斯榻克分水器除去甲醇溶液。將該反應(yīng)混合物冷卻，真空蒸發(fā)，以生成油狀殘余物，然后溶解在30ml甲醇中。加入50ml水以沉淀出產(chǎn)物。然后將產(chǎn)物從甲醇中重結(jié)晶，將重結(jié)晶的產(chǎn)物在甲醇中攪拌3次。獲得了1.95g產(chǎn)物，為白色粉末。根據(jù)HPLC分析，其純度大于99％。
應(yīng)當(dāng)理解，雖然已經(jīng)結(jié)合其詳細(xì)說明描述了本發(fā)明，但是上面的描述僅是舉例說明，而不是限制本發(fā)明范圍，本發(fā)明范圍由權(quán)利要求書限定。其它方面、優(yōu)點(diǎn)和變型都在權(quán)利要求書范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.下式所示化合物 或 或 其中A是N、CH或CR15；R14是-(CH2)n-X-Y，其中n是1、2、3、4、5或6；X是O、NH或NR15；且Y是芳基或雜芳基，其中每個(gè)Y可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代；每個(gè)R15獨(dú)立地為低級(jí)烷基；每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、S(O)2NR17R17、S(O)2R17、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20；每個(gè)R17獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R18獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R19獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；每個(gè)R20獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21；以及每個(gè)R21獨(dú)立地為氫、烷基、氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A是N。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中n是1。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
5.權(quán)利要求3的化合物，其中X是O。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中A是N。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中Y是
9.權(quán)利要求8的化合物，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中Y是
11.權(quán)利要求5的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中所述苯基被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
13.權(quán)利要求3的化合物，其中X是NH或NR15，且R15是CH3。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中A是N。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中Y是苯基。
17.權(quán)利要求15的化合物，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中所述化合物是 或
19.權(quán)利要求17的化合物，其中每個(gè)R16是C(O)OR18。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中每個(gè)R18是H或烷基。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中每個(gè)R18是CH3。
22.權(quán)利要求17的化合物，其中每個(gè)R16是C(O)NR19R20。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中所述化合物是
24.權(quán)利要求14的化合物，其中Y是 其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16是鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中Y是
26.權(quán)利要求13的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
27.權(quán)利要求13的化合物，其中Y是 其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16是鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)OR18、C(O)NH2或C(O)NR19R20。
28.權(quán)利要求4的化合物，其中A是N。
29.權(quán)利要求4的化合物，其中Y是苯基，任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代。
30.權(quán)利要求4的化合物，其中Y是苯基。
31.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是 其中上式所示基團(tuán)可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的R16取代，其中每個(gè)R16是鹵素、烷基、亞烷基二氧基、芳基、芳烷基、硝基、羥基、巰基、胺、烷氧基、芳基烷氧基或雜芳基烷氧基。
32.權(quán)利要求31的化合物，其中Y是
33.權(quán)利要求1的化合物，其中A是CH或CR15。
34.權(quán)利要求1的化合物，其中每個(gè)R16獨(dú)立地為C(O)NR19R20。
35.權(quán)利要求34的化合物，其中每個(gè)R19獨(dú)立地為氨基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基；每個(gè)R20獨(dú)立地為氨基烷基、芳基或芳基烷基；每個(gè)芳基或雜芳基可任選被1-4個(gè)獨(dú)立的下列基團(tuán)取代鹵素、氰基、烷基、三氟甲基、羥基烷基、亞烷基二氧基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、硝基、羥基、巰基、氨基、烷氧基、硫代烷氧基、三氟甲氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳基烷氧基、雜芳基烷氧基、C(O)R15、C(O)OR21、C(O)NR21R21、S(O)2NR21R21或S(O)2R21。
36.包含權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體的組合物。
37.包含權(quán)利要求1的化合物、另外的治療劑和可藥用載體的組合物。
38.包含權(quán)利要求1的化合物、另外的治療劑和可藥用載體的組合物，其中所述另外的治療劑是抗菌劑。
39.預(yù)防細(xì)菌感染和/或治療細(xì)菌感染的生物體的方法，包括給所述生物體施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
40.治療哺乳動(dòng)物感染的方法，包括施用權(quán)利要求36的組合物。
41.制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括取用2，4-二氨基喋啶基化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成權(quán)利要求1的化合物。
42.通過權(quán)利要求41的方法制得的產(chǎn)品。
43.制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括取用任一種本文所述的中間體化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成權(quán)利要求1的化合物。
44.通過權(quán)利要求43的方法制得的產(chǎn)品。
45.鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)評(píng)價(jià)權(quán)利要求1的化合物的結(jié)構(gòu)；b)獲得步驟a)的化合物的衍生化合物；和c)評(píng)價(jià)該衍生化合物的抗菌活性。
46.鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)取用權(quán)利要求1的候選化合物；b)在hDHFR酶模型中評(píng)價(jià)候選化合物的結(jié)合親合力；和c)評(píng)價(jià)該候選化合物的抗菌活性。
47.具有下式的化合物 其中A和B獨(dú)立地選自N和CR7，其中R7是氫或含有碳、氮、硫、鹵素和/或氧的官能團(tuán)；R1和R2是-NR5R6基團(tuán)，其中每個(gè)R5和R6獨(dú)立地為氫或含有碳的官能團(tuán)；R3是氫；R4是含有碳、氮、硫、鹵素和/或氧的官能團(tuán)，條件是，如果A和B都是氮，并且R5和R6都是氫，則R4不是-NH2、-N(H)(甲基)、-N(H)(丁基)、-N(H)(己基)、-N(H)(苯基)、-N(H)(芐基)、-N(H)(NH2)、-N(H)(CH2CH2OH)、-N(CH2CH2OH)2、苯基、N-哌啶基或-S(乙基)；如果A是CH，B是氮，并且R5和R6都是氫，則R4不是甲基、異丁基、苯基、4-甲基苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-(2，5-二甲氧基苯基)乙基或-CH(OCH3)2；和如果A和B都是CH基，則R4是不同于-NH2、(3，4-二氯苯基)甲基氨基或(3，4-二氯苯基)亞甲基亞氨基的氨基。
48.權(quán)利要求47的化合物，其中R5和R6獨(dú)立地為氫；且A和B分別獨(dú)立地為N。
49.權(quán)利要求48的化合物，其中R4是NR7R8；R7是被芳基或雜芳基取代的C1-C6烷基；且R8是C1-C6烷基，任選被鏈烯基、羥基、烷氧基、環(huán)烷基或芳基取代。
50.權(quán)利要求49的化合物，其中R7是被芳基取代的C1-C6烷基；R8是C1-C6烷基。
51.權(quán)利要求49的化合物，其中R7是被雜芳基取代的C1-C6烷基；R8是C1-C6烷基。
52.權(quán)利要求49的化合物，其中R7被芳基取代的C1-C6烷基；R8被羥基或烷氧基取代的C1-C6烷基。
53.權(quán)利要求48的化合物，其中R4是NR7R8；R7是C1-C6烷基；R8是被環(huán)烷基取代的C1-C6烷基。
54.權(quán)利要求48的化合物，其中R4是NR7R8；R7獨(dú)立地為被芳基取代的C1-C6烷基；R8獨(dú)立地為被芳基取代的C1-C6烷基。
55.權(quán)利要求48的化合物，其中R7是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、鹵素、硫烷基、羥基、烷氧基、氨基、烷基或NR5R6；其中氮原子上的每個(gè)R5和R6獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基烷基或烷基羰基。
56.權(quán)利要求50的化合物，其中R7是被萘基取代的C1-C6烷基，其中所述萘基可任選被烷基、鹵素、羥基、烷氧基、硫烷基或氨基取代。
57.權(quán)利要求56的化合物，其中所述萘基在2-或4-位上被取代；
58.權(quán)利要求5 7的化合物，其中R8是甲基或乙基；
59.權(quán)利要求51的化合物，其中R7是被苯并噻吩基取代的C1-C6烷基，所述苯并噻吩基可任選被烷基、鹵素、羥基、烷氧基、硫烷基或氨基取代。
60.權(quán)利要求59的化合物，其中R8是甲基或乙基。
61.包含權(quán)利要求47的化合物和可藥用載體的組合物。
62.包含權(quán)利要求47的化合物、另外的治療劑和可藥用載體的組合物。
63.包含權(quán)利要求47的化合物、另外的治療劑和可藥用載體的組合物，其中所述另外的治療劑是抗菌劑。
64.預(yù)防細(xì)菌感染和/或治療細(xì)菌感染的生物體的方法，包括給所述生物體施用有效量的權(quán)利要求47的化合物。
65.治療哺乳動(dòng)物感染的方法，包括施用權(quán)利要求61的組合物。
66.制備權(quán)利要求47的化合物的方法，包括取用2，4-二氨基嘧啶并嘧啶基化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成權(quán)利要求47的化合物。
67.通過權(quán)利要求66的方法制得的產(chǎn)品。
68.制備權(quán)利要求47的化合物的方法，包括取用任一種本文所述的中間體化合物，并在一個(gè)或多個(gè)步驟中將其與一種或多種化學(xué)試劑反應(yīng)以生成權(quán)利要求47的化合物。
69.通過權(quán)利要求68的方法制得的產(chǎn)品。
70.鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)評(píng)價(jià)權(quán)利要求47的化合物的結(jié)構(gòu)；b)獲得步驟a)的化合物的衍生化合物；和c)評(píng)價(jià)該衍生化合物的抗菌活性。
71.鑒定具有抗菌活性的化合物的方法，所述方法包括a)取用權(quán)利要求47的候選化合物；b)在hDHFR酶模型中評(píng)價(jià)該候選化合物的結(jié)合親合力；和c)評(píng)價(jià)該候選化合物的抗菌活性。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的雜環(huán)化合物及其在預(yù)防和/或治療細(xì)菌感染中的應(yīng)用，以及其作為防腐劑、滅菌劑或消毒劑的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/525GK1543465SQ02815065
公開日2004年11月3日 申請(qǐng)日期2002年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月28日
發(fā)明者S·T·莫, S T 莫, J·J·克萊蒙特, 克萊蒙特, C·法爾曼, 蘩, E·佩羅拉, 納維亞, M·A·納維亞, 阿拉, P·J·阿拉, 馬吉, A·S·馬吉, 威爾, P·M·威爾, 馬奇斯, S·A·馬奇斯, 加扎尼加, J·V·加扎尼加 申請(qǐng)人:醫(yī)賢治療學(xué)公司, 普利瓦股份公司