專利名稱：紅景天和冬蟲夏草組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以紅景天和冬蟲夏草為原料的組合物配方，該組合物具有抗輻射、免疫增強(qiáng)功能。
紅景天，屬景天科，紅景天屬(Rhodiola L.)植物，是生長在海拔3500米-5000米極端環(huán)境下的一類天然藥用植物，其主要藥用部位為根及根莖。紅景天的醫(yī)藥保健功效早在藏醫(yī)經(jīng)典《四部醫(yī)典》和《本草綱目》就有記載，近年來國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)紅景天苷為紅景天提取物中的主要有效成份，實(shí)驗(yàn)和臨床數(shù)據(jù)表明紅景天提取物具有廣泛的藥理作用，主要有(1)使受輻射骨髓有核細(xì)胞數(shù)和存活率增加，具有明顯的抗輻射作用(2)提高血液紅細(xì)胞載氧量，緩解和消除各種疲勞癥狀，提高體力和腦力勞動的效率。
冬蟲夏草，為麥角菌科真菌冬蟲夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)寄生在蝙蝠科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體，其菌絲體已被分離和人工培養(yǎng)。經(jīng)過中外醫(yī)學(xué)專家和生物學(xué)家的深入研究發(fā)現(xiàn)蟲草是一座神奇的營養(yǎng)保健寶庫，它含有人體所需的絕大部分營養(yǎng)成份，其主要功效成份為蟲草素即腺嘌呤核苷。冬蟲夏草的藥理作用主要表現(xiàn)在(1)免疫調(diào)節(jié)和免疫增強(qiáng)功能顯著激活單核巨噬細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的作用，明顯提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬百分率，拮抗可的松所致小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的抑制，通過對巨噬細(xì)胞表面Fc受體數(shù)目的增多增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對抗原信息的識別、處理和傳遞能力，并通過Fc受體實(shí)現(xiàn)對靶細(xì)胞ADCC效應(yīng)；促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖，提高脾臟淋巴細(xì)胞E-玫瑰花形成率，并能明顯拮抗強(qiáng)的松龍及環(huán)磷酰胺所致小鼠T淋巴細(xì)胞E-玫瑰花結(jié)形成的抑制；促進(jìn)淋巴細(xì)胞有絲分裂，對T、B淋巴細(xì)胞的增殖有顯著的誘導(dǎo)活性；顯著增強(qiáng)小鼠脾臟NK活性，并能明顯拮抗環(huán)磷酰胺所致NK活性的抑制。(2)促進(jìn)造血功能冬蟲夏草具有顯著的促進(jìn)生血作用。明顯提高小鼠骨髓造血干細(xì)胞(CFU-S)的周期狀態(tài)，促進(jìn)CFU-S增殖。有效拮抗三尖杉酯堿所致小鼠骨髓紅系祖細(xì)胞(CFU-E)的抑制；促進(jìn)小鼠脾巨核細(xì)胞增殖分化成熟，升高血小板，并能顯著保護(hù)60Coγ射線照射所致小鼠的血小板損傷，減少血小板數(shù)下降幅度，使血小板超微結(jié)構(gòu)保持基本正常。
本發(fā)明的目的在于提供一種以紅景天和冬蟲夏草為原料的組合物配方，以提高紅景天和冬蟲夏草的抗輻射免疫增強(qiáng)的功效。
本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理論結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果，將紅景天提取物和冬蟲夏草提取物或冬蟲夏草菌絲體純粉按一定比例配制所得組合物，或?qū)⒓t景天和冬蟲夏草按一定比例混合后再用水和乙醇提取所得組合物，突破了單方紅景天和單方冬蟲夏草的局限性，其顯效更加迅速，作用更加強(qiáng)大持久(1)具有明顯抗輻射作用(2)明顯促進(jìn)紅細(xì)胞合成的作用(3)顯著提高人體免疫球蛋白水平，增強(qiáng)人體免疫功能。
本發(fā)明的目的還在于提供所述紅景天和冬蟲夏草組合物的制備方法。
本發(fā)明所涉及的紅景天和冬蟲夏草組合物的制備方法包括紅景天和冬蟲夏草按一定比例混合后用水和乙醇提取制備本組合物；紅景天提取物的制備、冬蟲夏草提取物制備、紅景天提取物和冬蟲夏草提取物或冬蟲夏草按一定的比例混合得本組合物；該組合物可制成膠囊、片劑、口服液或顆粒劑。
本發(fā)明的紅景天和冬蟲夏草組合物的制備工藝如下(1)紅景天提取物的制備以紅景天的根及根莖為原料切片干燥后粉碎成粗粉，粗粉用50-75％的乙醇回流提取，提取液過濾、濃縮、干燥即得紅景天提取物，該提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，可以得到純化的紅景天提取物。
(2)冬蟲夏草提取物的制備冬蟲夏草或冬蟲夏草菌絲體用水浸泡2-4小時后，煎提2-3次，每次2-3小時，提取液過濾后，減壓濃縮，干燥即得冬蟲夏草提取物。
(3)紅景天和冬蟲夏草組合物的制備將紅景天和冬蟲夏草按一定的比例混合后分別用水和乙醇提取、濃縮、干燥即可制得本組合物；或?qū)⒓t景天提取物和冬蟲夏草提取物或冬蟲夏菌絲體純粉按一定比例混合得本組合物，該組合物可制成膠囊、片劑、口服液或顆粒劑；急性毒性實(shí)驗(yàn)昆明種小鼠，體重20-22g，；SD大鼠，體重182-220g，雌雄各10只，實(shí)驗(yàn)劑量為10g/kg.bw，灌胃量每只小鼠按0.02ml/10g.bw，大鼠按2.0ml/10g.bw，經(jīng)口灌胃兩次，兩次間隔2小時，灌胃后，觀察兩周，記錄動物的毒性反應(yīng)和死亡情況。
對小鼠和大鼠的經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果動物品種性別 數(shù)量 途徑劑量 死亡LD50結(jié)論(g/kg.bw) 動物數(shù) (g/kg.bw)昆明種小鼠 雄10 經(jīng)口10.0 0 ＞10.0實(shí)際無毒雌10 經(jīng)口10.0 0 ＞10.0實(shí)際無毒SD大鼠 雄10 經(jīng)口10.0 0 ＞10.0實(shí)際無毒雌10 經(jīng)口10.0 0 ＞10.0實(shí)際無毒結(jié)果表明各實(shí)驗(yàn)劑量組經(jīng)口灌胃后，無特殊中毒表現(xiàn)，兩周內(nèi)無動物死亡。昆明種小鼠和SD大鼠經(jīng)口急性毒性均大于10g/kg.bw，屬于實(shí)際無毒類，所以本發(fā)明的紅景天和冬蟲夏草組合物是安全無毒的。
抗輻射功效學(xué)試驗(yàn)選雌性昆明種小鼠，隨機(jī)分為對照組、輻射對照組和本組合物試驗(yàn)組。試驗(yàn)組動物分別按推薦劑量1.0g/人/日(16.66mg/kg.bw)的10、20、30倍劑量(166.6、333、500mg/kg.bw)每天灌胃一次，共30天?？瞻讓φ战M和輻射對照組每天用蒸餾水灌胃。于灌胃后第三周將輻射對照組和三個試驗(yàn)組動物用60Coγ射線進(jìn)行照射，每天一次，1.0Gy/次，共10次。輻射距離80cm。吸收劑量0.01cGy/min。末次輻射后5天取血并處死一批動物測定外周血白細(xì)胞數(shù)(WBC)，取股骨骨髓測定有核細(xì)胞數(shù)、取胸骨骨髓按《食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法》中，“微核實(shí)驗(yàn)‘規(guī)定的方法制片、染色、鏡檢；另一批動物留作觀察第一次輻射后30天存活率及平均存活時間。
本組合物對小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)、骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響組別 劑量 動物數(shù)白細(xì)胞數(shù) 有核細(xì)胞數(shù)(mg/kg.bw)(只) ×109/L ×106/L空白對照 0.0 12 7.88±1.28 18.51±5.72輻射對照 0.0 12 0.53±0.25*1.14±0.41*組合物 166.66 12 0.25±0.10*▲ 1.34±.38*333.3 12 0.20±0.07*▲ 1.88±0.66*▲500.0 12 0.21±0.09*▲ 2.43±1.05*▲*P＜0.01(與空白組對照比較)；▲P＜0.01(與輻射對照組比較)
對小鼠骨髓細(xì)胞微核率的影響組別 劑量 動物數(shù) 嗜多紅細(xì)胞數(shù) 微核數(shù) 微核率(mg/kg.bw) (只) (個/只) (個) ‰空白對照 0.00 101000 1.91±1.1 1.9輻射對照 0.00 101000 23.1±3.8*23.1組合物 166.6 101000 12.7±3.8*▲ 12.7333.3 101000 13.0±3.6*▲ 13.0500.0 1010007.8±2.1*▲ 7.8*P＜0.01(與空白組對照比較)；▲P＜0.01(與輻射對照組比較)對小鼠受輻射后30天存活率的影響組別 劑量 觀察動物數(shù) 30天存活動物數(shù) 存活率(mg/kg.bw) (只) (只) (％)空白對照0.0 15 15 100.0輻射對照0.0 15 00.0*組合物166.6 15 2 13.3*333.3 15 00.0*500.0 15 4 26.7*▲*P＜0.001(與空白組對照比較)；▲P＜0.05(與輻射對照組比較)結(jié)果表明紅景天提取物和冬蟲夏草菌絲體純粉組合物能使受輻射小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)增加(P＜0.01)，30天存活率增加(P＜0.05)骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率降低(P＜0.01)，具有明顯抗輻射作用。
人體實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)對象中長跑運(yùn)動員20名，均為男性，根據(jù)身高和體重隨機(jī)分為兩組(1)實(shí)驗(yàn)組10人，每天服用由本發(fā)明組合物制成的膠囊六粒(每粒含紅景天提取物180mg，冬蟲夏草菌絲體純粉120mg)，連續(xù)服用4個星期。(2)對照組10人，服用等量空白對照品。實(shí)驗(yàn)期間兩組受試者均進(jìn)行正常訓(xùn)練。
血細(xì)胞分析于實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時進(jìn)行運(yùn)動測試的當(dāng)天進(jìn)行早晨抽取空腹靜脈血，置于肝素鋰抗凝試管中。用ADVIA-120型全血細(xì)胞分析儀(美國拜爾公司)測定紅細(xì)胞記數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(KBG)和紅細(xì)胞比積(HCT)。
血清免疫球蛋白測定用透射比濁法測定G型免疫球蛋白(IgG)、A型免疫球蛋白(IgA)和M型免疫球蛋白(IgM)含量。測定儀器為KEYSYS，試劑羅氏試劑。
血細(xì)胞分析結(jié)果組別RBC計數(shù)HB HCT(×1012cells/l)(g/l) (l/l)對照組 實(shí)驗(yàn)前4.61±0.196148.7±7.07 0.41±0.03(n＝10) 實(shí)驗(yàn)后4.66±0.175151.1±5.38 0.42±0.02實(shí)驗(yàn)組 實(shí)驗(yàn)前4.59±0.208139.2±9.37 0.40±0.02(n＝10) 實(shí)驗(yàn)后4.81±0.178*165.4±6.00*0.48±0.03服用前后有顯著性差異，P＜0.05對照組受試者的紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白和紅細(xì)胞比積，實(shí)驗(yàn)后和實(shí)驗(yàn)前相比，均無明顯差異。實(shí)驗(yàn)組受使者的紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白和紅細(xì)胞比積，實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前相比，均有明顯差異(P＜0.05)。結(jié)果表明服用本組合物對受試者具有顯著的促進(jìn)紅細(xì)胞合成的作用。
血清免疫球蛋白測試結(jié)果組別 IgA IgG IgM(g/l) (g/l) (g/l)對照組 實(shí)驗(yàn)前 1.08±0.21 1.72±0.38 1.33±0.21(n＝10) 實(shí)驗(yàn)后 1.06±0.18 1.64±0.19 1.38±0.38實(shí)驗(yàn)組 實(shí)驗(yàn)前 0.96±0.16 1.05±0.18 1.39±0.21(n＝10) 實(shí)驗(yàn)后 1.65±0.25*1.80±0.45*1.46±0.56服用前后有顯著性差異，P＜0.05實(shí)驗(yàn)組和對照組受試者的血清IgM水平，實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前相比，沒有顯著性差異。實(shí)驗(yàn)組受試者的IgA，IgG水平，實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前相比，均有顯著性提高(P＜0.05)。結(jié)果表明服用本組合物能顯著提高受試者免疫球蛋白水平。
實(shí)施例紅景天根及根莖干燥、切片、粉碎成粗粉，取1KG粗粉，用75％乙醇分四次，每次4000ml，30分鐘浸取，減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液約1200g，再用等量的蒸餾水?dāng)噭?，靜置，過濾處理多次，減壓濃縮得濃縮水液，濃縮水液干燥可直接得紅景天提取物。該提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取可得到進(jìn)一步純化。利用高效液相色譜確定紅景天提取物和冬蟲夏草菌絲體純粉中主要功效成份紅景天苷和腺苷的含量。最后將紅景天提取物180mg(含紅景天苷4.2mg)，冬蟲夏草菌絲體純粉120mg(含腺苷0.18mg)混合制成膠囊。即得本發(fā)明所述的組合物中的一種。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明提供一種以紅景天和冬蟲夏草為原料的組合物配方。
2.如權(quán)利要求1所述該組合物是由紅景天提取物和冬蟲夏草提取物或冬蟲夏草菌絲體純粉按一定的比例混合而成。
3.如權(quán)利要求1所述該組合物是由紅景天和冬蟲夏草按一定比例混合后用水和乙醇提取制備而成。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物中各組份的重量百分比為紅景天提取物10-90％，冬蟲夏草提取物或冬蟲夏草菌絲體純粉為10-90％。
5.如權(quán)利要求1所述的紅景天和冬蟲夏草組合物是膠囊、片劑、口服液和顆粒劑中的一種。
6.如權(quán)利要求2所述的紅景天提取物的制備方法，其特征包括將紅景天根及根莖干燥粉碎成粗粉；粗粉用50-75％乙醇提取，提取液經(jīng)濃縮、干燥，得紅景天提取物，該提取物用有機(jī)溶劑萃取可進(jìn)一步純化。
7.如權(quán)利要求6所述的有機(jī)溶劑為石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇。
8.如權(quán)利要求2所述的紅景天提取物，包括從50-75％乙醇提取液濃縮干燥得到的紅景天提取物；或?qū)⒃撎崛∥镉糜袡C(jī)溶劑萃取純化得到的紅景天提取物。
9.如權(quán)利要求2所述的冬蟲夏草提取物制備方法，其特征為將冬蟲夏草和冬蟲夏草菌絲體用水浸泡、煎提、過濾、減壓濃縮干燥即得冬蟲夏草提取物。
全文摘要
本發(fā)明提供紅景天和冬蟲夏草組合物及其制備方法。本發(fā)明以紅景天根及根莖為原料制備紅景天提取物，以冬蟲夏草和冬蟲夏草菌絲體為原料制備冬蟲夏草提取物，最后將紅景天提取物與冬蟲夏草提取物或冬蟲夏草菌絲體純粉按一定比例混合制備該組合物；或?qū)⒓t景天和冬蟲夏草按一定比例混合后再用水和乙醇提取制備該組合物，該組合物可制成膠囊、片劑、口服液、顆粒劑等。實(shí)驗(yàn)表明該組合物具有明顯抗輻射、增強(qiáng)人體免疫的功能。
文檔編號A61P43/00GK1480206SQ0213368
公開日2004年3月10日 申請日期2002年9月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月2日
發(fā)明者劉宏璧 申請人:成都浦泓生物科技開發(fā)有限公司