專利名稱：一種多糖免疫藥物的制備的制作方法
一種多糖免疫藥物的制備，屬于制藥工程領(lǐng)域。
現(xiàn)有的藥品的研發(fā)，生產(chǎn)總是不能滿足于人類健康的需要，特別是一些頑固的、對人類生存危害極其嚴(yán)重的疾病，如腫瘤、艾滋病及病毒、細(xì)菌等，科學(xué)工作者、相關(guān)研發(fā)機構(gòu)一直在進(jìn)行研究，以期尋求高效低毒的藥品。
以惡性腫瘤為例，現(xiàn)在全世界普遍采用的治療方法是放射性療法、手術(shù)切除和化學(xué)療法。手術(shù)療法具有不徹底性；放射療法和化學(xué)療法，在治療過程中可直接殺傷腫瘤細(xì)胞，但也不可避免地對正常身體細(xì)胞同樣具有殺傷力。經(jīng)治療后，會使人體的白細(xì)胞顯著下降，具有較大的毒副作用。
目前，世界范圍內(nèi)業(yè)內(nèi)人士都在共同尋求一種新的療法——免疫療法。
免疫療法是通過刺激機體的各種免疫活性細(xì)胞的成熟、分化和衍生，使機體免疫系統(tǒng)趨于平衡，當(dāng)機體具有正常的生理功能時，這些免疫活性細(xì)胞能吞噬和清除衰亡、突變的細(xì)胞(如惡性腫瘤細(xì)胞)，各種病原體，如細(xì)菌、病毒、血脂，甚至寄生蟲。在治療過程中不會損傷人體的正常細(xì)胞。因此，免疫療法被認(rèn)為是制服惡性腫瘤、艾滋病及其它疾病的最有前途的治療方法。其中引起各國高度重視的是多糖免疫療法。
尋找、生產(chǎn)活性高、對腫瘤、艾滋病更有效的多糖藥物成為藥物工作者共同的目標(biāo)。
但是由于東、西方兩種不同的制藥原則有很大的不同，因此按中醫(yī)配制的藥物，往往不被認(rèn)可。西方國家要求藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確性，中醫(yī)講究多種物質(zhì)的協(xié)調(diào)作用。本發(fā)明人認(rèn)為隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)步，且人類在不斷了解藥物代謝的過程中，兩種原則都應(yīng)相互借鑒。不但要在多種物質(zhì)的協(xié)調(diào)中，找出其規(guī)律性原則，也要加強對藥物本身活性成份的了解。本發(fā)明人經(jīng)過不斷研究發(fā)現(xiàn)，不同藥物的組成，有時可以產(chǎn)生出更高的藥物活性，包括不同物質(zhì)的多糖的組成，可以得到單一物質(zhì)不能達(dá)到的藥物效果。
多糖具有復(fù)雜的、多方面的生物活性與功能，多糖的糖鏈能控制細(xì)胞的分裂與分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與衰老，作為廣譜免疫調(diào)節(jié)劑在免疫疾病治療上的應(yīng)用，不僅能治療機體免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p傷的惡性腫瘤、艾滋病，還能治療多種免疫缺損疾病及由某些細(xì)菌、病毒引起的疾病。多糖的免疫療法已給近代腫瘤、艾滋病治療及其它疾病的治療開辟了新的研究方向。
本發(fā)明的目的就是提供一種多糖免疫藥物的制備方法。
本發(fā)明是這樣來實現(xiàn)的，采集天然的真菌類中的側(cè)耳，經(jīng)過化學(xué)處理過程，將側(cè)耳中的多糖分離出來，也可以針對不同疾病的需要，再進(jìn)行化學(xué)處理，使其變異為活性極高的多糖。使用時，可將側(cè)耳多糖單獨使用，也可與黃芪多糖配合作用，以適應(yīng)對不同的疾病的治療。
側(cè)耳屬擔(dān)子菌綱，傘菌目側(cè)耳科，側(cè)耳屬，是一種來源廣泛的天然可食用菌類，歷史上側(cè)耳就有相當(dāng)?shù)乃幱脙r值，其香氣濃郁、營養(yǎng)豐富，具有高蛋白、低脂肪、低熱量聚糖，富含維生素、氨基酸，常食用有降低膽固醇、防止血管硬化，增進(jìn)人體免疫功能，提高人體的生理活性功能，并能顯著增強對惡性腫瘤的抵抗力，這種生理活性物質(zhì)就是側(cè)耳多糖。
側(cè)耳多糖是一種雜多糖，一般多糖的定義是含十個以上的單糖稱為多糖。單糖的羥基可以被取代，并通過苷鍵連接起來，形成多糖鏈。而側(cè)耳多糖還有肽鏈和脂類成分，所以定為雜多糖，分子量在6000～1000000之間，其結(jié)構(gòu)呈β-1.3支鏈和β-1.3-葡聚糖，雖然分子量較大，但由于含多個極性基團(主要是羥基和其它極性取代基)，所以水溶性較好，特別是在熱水中溶解度較大。不溶解的部分一般分散性也較好，并且其水溶液在濃縮的情況下，可用極性有機溶劑如乙醇、丙酮等將其析出。其基本的制備流程為側(cè)耳采購→干燥→篩選→粉碎→清水漂洗→溫水浸泡→蒸煮→濃縮→逐次沉析，其中逐次沉析可按量添加有機溶劑，分幾次進(jìn)行，如加30％的有機溶劑時，可沉析出側(cè)耳多糖中大分子量部分，再使分離出大分子量后的母液中的有機溶劑濃度增加到50％時，便能將中等分子量的多糖沉析出來，再增加有機溶劑濃度，可將小分子量部分沉析出來，還可以進(jìn)一步采用深層發(fā)酵的方法，得到不同結(jié)構(gòu)的菌絲體多糖。
側(cè)耳多糖的構(gòu)效關(guān)系
由于側(cè)耳多糖是由許多單糖基以糖苷鍵相連接而形成的高聚物，相對分子量也較大，糖基環(huán)化的方式不同(五元環(huán)或六元環(huán))，糖苷鍵連接方式不同(1→2，1→3，1→4……等)，糖基上羥基被取代的種類、位置和數(shù)量發(fā)生變化，可使一級結(jié)構(gòu)出現(xiàn)千差萬別，而它的高級結(jié)構(gòu)(二、三、四級結(jié)構(gòu))，則主要取決于它的一級結(jié)構(gòu)。而結(jié)構(gòu)的不同，其功能就不同，即構(gòu)效成一一對應(yīng)的關(guān)系。高級結(jié)構(gòu)的變化就會帶來活性的改變，側(cè)耳多糖由于其結(jié)構(gòu)是四層的右手三股螺旋立體結(jié)構(gòu)，因此具有極強的生理活性，處理后的多糖具顯著的抗腫瘤作用，雖然，目前技術(shù)手段尚不能定量的與其它多糖，如香菇多糖，從結(jié)構(gòu)立體圖上鑒別它們的差異，但從生理活性和對腫瘤的抵御能力上，可以認(rèn)為側(cè)耳多糖與香菇多糖在免疫功能上相類似，但其成本相對低廉，制備相對容易。側(cè)耳多糖在加入其它物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化后，則發(fā)現(xiàn)其對艾滋病具有抵御能力，并對其它細(xì)菌、病毒類引起的各種疾病同樣具有免疫能力，研究證明就像其它真菌多糖一樣，側(cè)耳多糖對多種惡性腫瘤均有明顯的抑制作用，如乳腺癌、胃癌等，側(cè)耳多糖具有延緩衰老的功能，側(cè)耳多糖具有降血脂、抗血栓及對心血管疾病有預(yù)防作用，同樣也具有降血糖作用，并有增強骨髓造血功能的作用，能對各種感染和各種化學(xué)因素對臟器的損傷有抵御作用。
實施例1取側(cè)耳(糙皮側(cè)耳)新鮮子實體200kg，經(jīng)水洗后搗碎，加入100L沸水中浸漬8～15小時，用LS-2型離心機分離去渣，得到無渣溶液，放入反應(yīng)釜中減壓濃縮，溫度為50℃左右。濃縮液至1∶15后先加入一倍量的乙醇，靜至24小時后去上清液得沉淀物350克，設(shè)為A部分。
上清液再加入3倍量的乙醇，得沉淀物200克為B部分。
將A部分加入22L水?dāng)嚢杈鶆?，在強烈攪拌下滴?.2M氫氧化十六烷基三甲基銨(CTA-OH)水溶液，調(diào)至pH值為7～8時，開始有部分沉淀，直至pH值為10.5～11.5，則析出大量沉淀物，完全停止沉淀，加至pH值為12分離停止，得沉淀物，用乙醇洗滌后，加入20％ 1.2L的醋酸，在0℃下攪拌5分鐘，分成不溶和溶解兩部分L1和L2。L1可溶解部分于0℃下用11.50％醋酸攪拌后，用回流器反復(fù)洗滌后離心。不溶解物L(fēng)2于2L 66％氫氧化鈉溶液中處理攪拌后離心。澄清液加4L乙醇沉淀，收集沉淀，用乙醇、乙醚依次洗滌、干燥，用Sevag法用氯仿、正丁醇去蛋白，水層加入3倍量乙醇沉淀后收集沉淀，用甲醇、乙醚依次洗滌后，置真空干燥器中干燥，即得灰白色側(cè)耳多糖，獲得率為40克。
經(jīng)測定pH5.0，α-萘酚反應(yīng)為陽性，多糖含量見下表總糖含量 還原糖含量 可溶性糖類含量/％％％ 寡糖 蔗糖 葡萄糖 半乳糖 甘露糖 果糖21.0 16.30 1.43 1.28 18.750.081.700.12組成比77.62 6.81 6.11 89.290.388.110.57試驗表明，紫外吸收光譜在200～260nm處有明顯的吸收峰，表明多糖中含有可溶性核苷酸成分。
紅外光譜掃描表現(xiàn)出多糖特征吸收3390cm-1、2930cm-1、1625cm-1、1410cm-1。
利用高效液相色譜法測定糖的組成以葡萄糖為主。
10000～20000之間的小分子量多糖占1098％，相對分子質(zhì)量，在10000～100000之間的大分子量多糖占89.01％。
進(jìn)一步分級處理可以肯定在側(cè)耳子實體中至少含有6種以上的多糖。
實施例2側(cè)耳多糖與黃芪多糖的配合作用。
黃芪為豆科植物，蒙古黃芪的干燥根，它的水溶性物多含黃芪葡聚糖，分子量5000左右，其酸性提取物，也具有顯著的生理免疫促進(jìn)活性，其結(jié)構(gòu)也為多層立體結(jié)構(gòu)，其制備方法同實施例1一樣。
將側(cè)耳多糖按組分的0～90％，與黃芪多糖按混合組分的相應(yīng)比例配合，將得到不同的活性多糖，因此更具有廣泛的免疫、抗感染、抗細(xì)菌及病毒的能力。不同的配比，可以起到抵御惡性腫瘤、消滅艾滋病病毒的作用，能達(dá)到延緩衰老、預(yù)防心血管病的目的。
研究表明，側(cè)耳多糖與其它生物類多糖配合，在某藥理上具有更強的作用。
權(quán)利要求
1.一種多糖免疫藥物的制備，其特征是采用天然菌類植物側(cè)耳和豆科植物黃芪為原料，經(jīng)提取后制備而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的一種多糖免疫藥物的制備，其特征是側(cè)耳提取物和黃芪多糖可以單獨使用也可以混合配制使用。
全文摘要
一種多糖免疫藥物的制備，是用天然的側(cè)耳或黃芪，經(jīng)過一定提取工藝處理，分別得到側(cè)耳多糖或黃芪多糖，這兩種多糖可根據(jù)需要配合使用，或單獨使用，可有效預(yù)防或治療惡性腫瘤、艾滋病，可延緩衰老、提高對心血管病的防御能力等。
文檔編號A61P37/00GK1443567SQ0210404
公開日2003年9月24日 申請日期2002年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月7日
發(fā)明者全龍浩, 王彩平 申請人:北京美華聯(lián)創(chuàng)生物技術(shù)有限公司