專利名稱：口服活性雄激素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及口服活性雄激素領(lǐng)域，更具體地說涉及19-去甲睪酮Δ14衍生物。
睪酮衍生物是已知的。就給藥方法而言，作為藥物睪酮本身，該天然雄性激素具有很多已知的缺點。其具有持續(xù)時間短的活性，在常規(guī)的藥學(xué)可接受介質(zhì)中不溶解，并且不是非常有效。更有效的二氫睪酮(睪酮的5α-還原形式)被認為對健康有害，特別是對前列腺。
更有效的雄激素是在FR4521M和US5342834中公開的7α-甲基-19-去甲睪酮(MANT)。但是MANT的一個重要的缺點是其不好的藥物動力學(xué)性質(zhì)，這限制其作為口服活性雄激素的用途。
通常在藥物制劑領(lǐng)域，人們一般期望藥物具有口服活性?？诜┝啃问?，例如固體劑量形式，例如片劑和膠囊，是最普遍被接受的給藥形式。在雄激素領(lǐng)域，特別期望口服給藥與象男性節(jié)育這樣的用途結(jié)合起來。因為在女性節(jié)育領(lǐng)域“口服避孕藥”幾乎成了可靠避孕的同義詞，但是事實表明在雄性節(jié)育領(lǐng)域也期望口服活性以使提供男性“口服避孕藥”。
在該領(lǐng)域中占據(jù)特殊地位的雄激素被稱之為“Segaloff甾族化合物”，其是如在MENT中具有一個7α-甲基，并且在14和15碳原子之間具有雙鍵(Δ14)的19-去甲睪酮衍生物。這種特殊地位是由于其長期以來被認為是已知的最有效的口服雄激素這一事實。參見，int.al.Avery等，甾族化合物(Steroids)55，59(1990)。從GB1341601也已知該化合物和7α-H類似物。
除該領(lǐng)域中占據(jù)特殊地位以外，“Segaloff甾族化合物”還沒有發(fā)現(xiàn)實際應(yīng)用，這可能由于其對于臨床應(yīng)用有幾個缺點。例如，使用19-去甲睪酮，代謝穩(wěn)定性是一個問題。因此，從GB1341601已知這些化合物易于被肝臟17β-羥基甾族化合物脫氫酶代謝滅活。對該問題的常規(guī)答案，認為17α位的烷基的引入是例如有限活性這樣的令人不滿意的結(jié)果的原因。
可以提到幾篇非常早的文獻，其作為與包括19-去甲睪酮衍生物的這一組甾族化合物相關(guān)的進一步的背景技術(shù)。這些參考文獻沒有一篇教導(dǎo)口服活性雄激素。
這樣，在1966年公開的FR1432561中，象具有C-7位烷基取代基的MENT這樣的19-去甲睪酮被用作在5和6碳原子之間具有雙鍵的激素物質(zhì)的起始物。沒有公開除了甲基以外的烷基。
BE861224涉及寬范圍17-羥基甾族化合物的所有的可能的酯。1976年以來公開的出版物具體教導(dǎo)了一些酯預(yù)期具有延長的甾族化合物活性。在公開的這些甾族化合物中有雌激素，抗雌激素，雄激素和合成代謝產(chǎn)物。給出了各種位置上很多可能的取代基，其中包括C-7位是甲基和乙基。
化學(xué)文摘(Chemical Abstracts)11095601y(1989)是關(guān)于7-烯丙基-19-去甲睪酮的17-羥基乙酸酯作為7-烯丙基雌二醇合成中的中間體。
EP159739教導(dǎo)了雌甾烷系列免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)，特別包括6或7位具有烷基取代基的Δ4和Δ5(10)-雌甾烯衍生物。所述烷基取代基一般是甲基。
DE2043404涉及具有抗激素活性的7β-甾族化合物。烷基取代基大多是甲基，但是也公開過乙基和丙基。在7β-乙基-19-去甲睪酮(其是DE2043404中公開的一個化合物)的合成中，也生成了7α-異構(gòu)體。其沒有教導(dǎo)利用該異構(gòu)體做任何應(yīng)用，并且該文獻也沒有教導(dǎo)從甲基部分區(qū)別乙基或丙基取代基。
Solo等，甾族化合物(Steroids)40，603-614(1990)也是背景技術(shù)參考文獻。其中公開了睪酮的各種7α-烷基衍生物。
本發(fā)明的一個目的是提供口服活性雄激素，其與Segaloff甾族化合物相比改進之處是它們更好地適合臨床應(yīng)用，并且特別具有足夠的口服活性和代謝穩(wěn)定性。
根據(jù)本發(fā)明，提供滿足下面通式I的化合物 其中R1是O，(H，H)，(H，OR)，NOR，R是氫，(C1-6)烷基，或(C1-6)?；籖2選自(C2-4)烷基，(C2-4)鏈烯基，或(C2-4)炔烴基，各自任選地被鹵原子取代；或者R2是環(huán)丙基，或環(huán)丙烯基，各自任選地被(C1-2)烷基或鹵原子取代；R3是氫，(C1-2)烷基，或乙烯基；R4是(C1-2)烷基；R5是氫或(C1-15)?；?；并且虛線表示任選的鍵。
本發(fā)明包括上述甾族化合物的藥學(xué)可接受鹽或酯，前藥和母體。
在式I的定義中使用的術(shù)語(C1-6)烷基指具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，象甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，戊基和己基。同樣，術(shù)語(C2-4)烷基指具有2-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，術(shù)語(C1-2)烷基指具有1-2個碳原子的烷基。
術(shù)語(C2-4)鏈烯基指至少具有一個雙鍵并且具有2-4個碳原子的直鏈或支鏈鏈烯基。優(yōu)選的鏈烯基具有2-3個碳原子，例如乙烯基和丙烯基。
術(shù)語(C2-4)炔烴基指至少具有一個三鍵并且具有2-4個碳原子的直鏈或支鏈炔烴基。優(yōu)選的炔烴基具有2-3個碳原子，例如乙炔基和丙炔基。
術(shù)語(C1-6)?；笍木哂?-6個碳原子的羧酸衍生的?；?，象甲?；阴；；□；?-甲基丙?；祯；?，新戊?；图乎；?。同樣，術(shù)語(C1-15)?；笍木哂?-15個碳原子的羧酸衍生的酰基。也包括在(C1-6)酰基或(C1-15)?；x內(nèi)的是從二元羧酸衍生的酰基，例如半-丙二?；?琥珀酰基，半-戊二酰基等等。優(yōu)選的是半-琥珀?；?。
術(shù)語鹵原子指氟，氯，溴或碘。當鹵原子是烷基上的取代基時，優(yōu)選Cl和F。最優(yōu)選F。
要理解本發(fā)明的7α-取代的Δ14去甲睪酮(nandrolone)衍生物具有天然構(gòu)象5α，8β，9α，10β，13β和17β。
本發(fā)明的7α-取代的Δ14去甲睪酮衍生物具有天然構(gòu)型5α，8β，9α，10β，13β和17β，并且還可以具有一個或多個另外的手性碳原子。因此可以以純的非對映異構(gòu)體或者作為非對映異構(gòu)體的混合物獲得化合物。獲得純的非對映異構(gòu)體的方法是本領(lǐng)域公知的，例如結(jié)晶或?qū)游觥?br> 與上述已知的“Segaloff甾族化合物”區(qū)別在于7α取代基的長度的本發(fā)明的化合物令人驚奇地好于所述已知的甾族化合物，并且具有出人意料的臨床應(yīng)用的優(yōu)點。特別表現(xiàn)在令人驚奇地更好的口服活性。本發(fā)明的優(yōu)選的化合物進一步表現(xiàn)出比Segaloff甾族化合物好得多的代謝穩(wěn)定性。
本發(fā)明的優(yōu)選的化合物具有選自乙基，乙烯基，乙炔基，丙基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-丙炔基，1，2-丙二烯基和環(huán)丙基的R2。
更優(yōu)選的化合物是其中R1是氧代，R3是氫，R4是甲基，并且虛線表示Δ4雙鍵的化合物。
最優(yōu)選的是其中R2是C2，最優(yōu)選是乙基或乙烯基的那些化合物。
通過普通化學(xué)領(lǐng)域，特別是甾族化合物領(lǐng)域公知的各種方法，可以制備本發(fā)明的化合物(參見，例如Fried，J.等，甾族化合物化學(xué)中的有機反應(yīng)(Organic Reactions in Steroid Chemistry)，第I和II卷，Van Nostrand Reinhold Company，紐約，1972)。
基本的是向甾族化合物環(huán)結(jié)構(gòu)加上飽和的或不飽和的7α-取代基(任選地被鹵原子取代)，和引入Δ14雙鍵。用于制備其中R1是氧代，R2，R3和R4具有上文給出的定義，R5是氫，并且虛線表示Δ4雙鍵的式I的化合物的方便的起始物是例如通式II的甾-4-烯-3-酮衍生物，其中R3和R4具有上文給出的定義，R6是氧代，(17α-H，17β-OR7)，或(17α-C≡CH，17β-OR7)，其中R7是羥基保護基，例如?；?，象乙酰基，苯甲酰基或新戊?；檠趸榛?，象乙氧基乙基或四氫吡喃基(THP)，或甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基，它們的合成是文獻中已知的，或者可以使用標準方法制備。 可能的合成途徑如下。通過使用標準方法，例如通過轉(zhuǎn)化為3-乙?；趸?或3-烷氧基甾-3，5-二烯衍生物，接著與2，3，5，6-四氯-1，4-苯并醌反應(yīng)能夠?qū)⑹絀I的甾-4-烯-3-酮衍生物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的甾-4，6-二烯-3-酮衍生物[Solyom，S.等，甾族化合物(Steroids)35，361(1980)]。然后通過共軛加成(1，6-加成)引入7α-取代基或者其母體。對于該反應(yīng)，本領(lǐng)域已知幾種方法，其中包括1)-有機銅試劑的共軛加成[關(guān)于有機銅試劑的共軛加成，參見Lipshutz，B.H.等，有機反應(yīng)(Org.Reaction)41，p.135，Wiley，紐約，1992]。
2)-過渡金屬介導(dǎo)的(TiCl4，AlCl3，ZrCl4，等)有機硅化合物的反應(yīng)[一般的1，6-加成，參見例如Nickisch，K等，四面體快報(TetrahedronLett.)29，1533(1988)]。
3)-丙二酸二烷基酯，2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮或者氰基乙酸烷基酯的堿-催化的共軛加成[參見例如Cruz，R.等，Austr.J.Chem.35，451(1982)]。
4)-合適的氰化物(MC≡N，M是Li，Na，K，AlR2，SiR3等)的共軛加成。一般情況下，這些方法主要地或大量地產(chǎn)生7α-異構(gòu)體。
因此可以將這樣獲得的7α-取代的甾-4-烯-3-酮芳構(gòu)化為3-羥基-甾-1，3，5(10)-三烯[Yuan，S.S.等，甾族化合物(Steroids)39，279(1982)]，其然后甲基化為3-甲氧基衍生物。也可以直接實現(xiàn)向3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯的轉(zhuǎn)化[Brito，M.等，合成通訊(Synth.Commun)26，623(1996)]。當R6是(17α-H，17β-OR7)時，17-羥基被保護并且被氧化產(chǎn)生3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物[對于氧化反應(yīng)，參見Hudlichy，M.，有機化學(xué)中的氧化作用(Oxidation in Organic Chemistry)，ACS Monograph 186，華盛頓，DC，1990]。當R6是(17α-C≡CH，17β-OR7)時，17-羥基也是被保護并且17α-乙炔基-17β-羥基衍生物被轉(zhuǎn)化為17-酮，例如通過在C鹽上與碳酸銀反應(yīng)[Rao，P.N.等，甾族化合物(Steroids)59，621(1994)]或者本領(lǐng)域已知的其它方法。在兩種情況下，向17-酮的轉(zhuǎn)化也可以在芳構(gòu)化之前完成。這樣獲得的3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物可以直接溴化，例如通過在苯/甲醇中與溴化銅(II)反應(yīng)[Segaloff，A.等，甾族化合物(Steroids)22，99(1973)]。3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物也可以被轉(zhuǎn)化為乙酸烯醇酯，然后用溴處理[Johnson，W.S.等，美國化學(xué)學(xué)會雜志(J.Am.Chem.Soc.)79，2005(1957)]，或者烯醇甲硅烷基醚接著與例如N-溴代琥珀酰亞胺反應(yīng)[Heathcock，C.H.等，美國化學(xué)學(xué)會雜志(J.Amer.Chem.Soc.)104，6081(1982)]。16α-溴代酮的脫氫溴化作用，例如通過與LiBr/Li2CO3/DMF反應(yīng)[Bull，J.R.等，J.Chem.Soc.，PerkinTrans.I，241(1990)]，通常產(chǎn)生(14β)-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮和3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物。通過使用氫硼化鈉，氫化鋁鋰或其它還原劑將后者還原為相應(yīng)的(17β)-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇之后可以將它們分離。
7α-取代的3-甲氧基甾-1，3，5(10)三烯-17-酮衍生物也可以被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的環(huán)醛縮1，2-乙二醇，其然后被溴化得到(16α)-16-溴-3-甲氧基甾-1，3，5(10)三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇衍生物。可以使用吡啶鎓三溴化物，苯基三甲基銨三溴化物或者本領(lǐng)域公知的其它溴化劑完成相互作用[Rasmusson，G.H.等，甾族化合物(Steroids)22，107(1973)]。該16α-溴代化合物通過在二甲苯或二甲亞砜這與堿例如叔丁醇鉀反應(yīng)而脫氫溴化，得到Δ15化合物[Johnson，上文；Poirier，D.等，四面體(Tetrahedron)47，7751(1991)]。乙縮醛的溫和水解，例如，通過在丙酮和水的混合物中用對甲苯磺酸處理[Johnson，上文]，產(chǎn)生3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮衍生物，其然后通過與乙酸酐，乙酸異丙烯酯或者其它酰化試劑酸催化反應(yīng)而被轉(zhuǎn)化為乙酸3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14，16-五烯-17-酯[Rasmusson，上文；Bull，上文]。用氫硼化鈉或者其它還原劑處理該乙酸酯[Rasmusson，上文]導(dǎo)致生成(17β)-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇衍生物。任選地，3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇可以通過酸催化的異構(gòu)化作用轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的Δ14衍生物[Ponsold，K.等，J.Prakt.Chem.323，819(1981)]。乙縮醛的去除和17-氧代的還原產(chǎn)生(17β)-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇衍生物。3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮可以經(jīng)異構(gòu)化作用得到(14β)-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮和3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物，其可以如上所述進行處理。
引入Δ15雙鍵的其它方法包括3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物轉(zhuǎn)化為乙酸烯醇酯并且與鈀(II)鹽反應(yīng)[Takahashi，T.等，四面體(Tetrahedron)41，5747(1985)]，或者該烯醇酯與2-吡啶亞磺酸甲酯反應(yīng)[Dinne，P.等，甾族化合物(Steroids)62，674(1997)]。
這樣得到的7α-取代的(17β)-3-甲氧基甾(gona)-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇衍生物的Birch還原[Caine，D.，有機反應(yīng)(Org.Reactions)23，p.1，Wiley，紐約，1976]和得到的(17β)-3-甲氧基甾-1，5(10)，14-三烯-17-醇衍生物的水解然后提供了本發(fā)明的7α-取代的(17β)-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮衍生物。在其中7α-取代基是從其母體得出的情況下(即不飽和的7α-取代基，丙二酸酯片段或者氰基，參見上文)，能夠使用標準方法完成的該項操作，經(jīng)常一定會與Δ14雙鍵的引入同時發(fā)生。引入7α-取代基和引入Δ14雙鍵需要精確順序的反應(yīng)步驟，包括合成策略中的通用方法涉及的Birch還原和將得到的甾-2，5(10)-二烯轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的7α-取代的(17β)-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮衍生物(參見實施例4和5)。
通過使用本領(lǐng)域公知的方法，由其中R1是氧代的式I的化合物獲得其中R1是(H，H)，(H，OR)，NOR，R是氫，(C1-6)烷基，(C1-6)?；谋景l(fā)明的化合物。
通過使用本領(lǐng)域公知的方法，由其中R5是氫的式I的化合物獲得其。中R5是(C1-15)?；谋景l(fā)明的化合物。
由Birch還原后獲得的Δ2，5(10)二烯制備其中虛線是Δ5(10)雙鍵的本發(fā)明的化合物?；蛘撸鼈兛梢酝ㄟ^異構(gòu)化作用從Δ4衍生物制備。從Δ4衍生物制備本發(fā)明的5α-還原的化合物。
下面參照下面的實施例進一步解釋本發(fā)明。
實施例1(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌-4，14-二烯-3-酮(a)和(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌-5(10)，14-二烯-3-酮(b)i)在5分鐘內(nèi)向(17α)-17-羥基-19-去甲孕甾-4，6-二烯-20-炔-3-酮[Syntex S.A.，GB935116(1958)；18.0克]在二氯甲烷(300毫升)和吡啶(25毫升)的混合物中的懸浮液加入氯三甲基硅烷(19毫升)，冷卻到0℃。0℃下攪拌2小時之后將該反應(yīng)混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中。將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中；合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(17α)-17-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-19-去甲孕甾-4，6-二烯-20-炔-3-酮(22.3克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
ii)將鋰(5.0克)和無水二乙醚(200毫升)的混合物冷卻到-30℃。將得到的乙基鋰溶液轉(zhuǎn)移給無水四氫呋喃(140毫升)中碘化銅(30.6克)的懸浮液之后滴加溴乙烷(26.9毫升)，并且冷卻到-30℃。室溫下將得到的銅酸鹽溶液攪拌45分鐘滴加無水四氫呋喃(160毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(20.0克)的溶液。45分鐘之后，在-25℃下攪拌，加入氯三甲基硅烷(20毫升)并且又繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物倒入飽和的氯化銨水溶液中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17α)-7-乙基-3，17-二[(三甲基甲硅烷基)氧基]-19-去甲孕甾-3，5-二烯-20-炔(29.5克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
iii)用鹽酸(2.3M，20毫升)處理丙酮(400毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(29.5克)的溶液。室溫下攪拌1.5小時之后用飽和的碳酸氫鈉水溶液中和反應(yīng)混合物。減壓下去除丙酮并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17α)-7-乙基-17-羥基-19-去甲孕甾-4-烯-20-炔-3-酮(19.5克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
iv)向甲醇(1200毫升)中代卡利特(240克)的懸浮液滴加鹽酸(6M，240毫升)。室溫下攪拌20分鐘之后，過濾收集代卡利特并且用水洗滌直到中性。然后，將其懸浮于水(960毫升)。劇烈攪拌下，加入硝酸銅(II)三水合物(145克)，接著小心加入水(360毫升)中碳酸鈉(72.2克)溶液。攪拌30分鐘后，過濾收集產(chǎn)物并且用水洗滌直到中性。在80℃下減壓下干燥產(chǎn)物，得到代卡利特上的碳酸銅(II)(310克)。通過使用迪安-斯達克榻分水器，將甲苯(330毫升)中iii中獲得的產(chǎn)物(19.5克)和代卡利特上的碳酸銅(II)(70克)的混合物在回流溫度下加熱9小時去除水。過濾反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯充分洗滌殘余物，并且減壓濃縮濾液。柱層析得到(7α)-7-乙基雌甾-4-烯-3，17-二酮(9.14克)。
v)室溫下將乙腈(285毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(9.14克)，溴化銅(II)(13.6克)和溴化鋰(2.64克)的溶液攪拌4小時。將反應(yīng)混合物倒入水中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙基-3-羥基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(6.54克)。
vi)室溫下將前一步驟獲得的產(chǎn)物(6.54克)，無水碳酸鉀(18.6克)，碘甲烷(5.6毫升)和無水二甲基甲酰胺(22毫升)的混合物攪拌3.5小時。將反應(yīng)混合物倒入水中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水，飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(6.77克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
vii)將無水四氫呋喃(70毫升)中二異丙基胺(6.15毫升)的溶液冷卻到-30℃。滴加n-BuLi(1.6M己烷溶液，27.5毫升)，并且繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻到-50℃并且滴加無水四氫呋喃(100毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(6.95克)溶液。繼續(xù)攪拌1小時。冷卻到-60℃后，加入氯三甲基硅烷(11.1毫升)。將混合物攪拌20分鐘之后用無水吡啶(31毫升)中苯基三甲基銨三溴化物(10.0克)的溶液處理。-60℃下攪拌1小時之后，將混合物倒入水中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α，16α)-16-溴-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(8.75克)。
viii)將無水二甲基甲酰胺(77毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(8.75克)，溴化鋰(12.7克)和碳酸鋰(10.9克)和無水二甲基甲酰胺(22毫升)的混合物回流加熱3.25小時。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入水中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(4.31克)和(7α，14β)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(1.0克)。
ix)向二氯甲烷(12毫升)中(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(4.31克)的溶液滴加甲醇(50毫升)中氫硼化鈉(0.21克)和氫氧化鈉(0.44克)的溶液，冷卻到0℃。將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時，用丙酮(4毫升)中止反應(yīng)，然后倒入飽和的氯化銨水溶液。產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17β)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(4.28克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
x)向回流的液氨(98毫升)中的鋰(2.12克)溶液加入無水四氫呋喃(24毫升)中前一步驟獲得的醇(1.5克)。-35℃下攪拌4.5小時之后在30分鐘內(nèi)加入2-丙醇。使氨蒸發(fā)。加入水并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17β)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇(1.65克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xi)室溫下將二氧化硅(5.2克)，飽和的草酸(0.52毫升)水溶液和二氯甲烷(14毫升)的混合物攪拌10分鐘。加入二氯甲烷(5毫升)中前一步驟得到的產(chǎn)物(1.6克)的溶液，并且繼續(xù)攪拌1.5小時。加入固體碳酸氫鈉并且繼續(xù)攪拌10分鐘。過濾混合物并且減壓濃縮濾液。粗產(chǎn)物經(jīng)柱層析，得到(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-5(10)，14-二烯-3-酮(1.03克)。1H-NMR(CDCl3)δ5.04(bs，1H)，4.03(t，1H，J＝8.4Hz)，2.76(bs，2H)，0.98(s，3H)，0.93(t，3H，J＝6.6Hz)。
xii)根據(jù)類似于iii描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.45克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(0.24克)。M.p.102-105℃。
實施例2(7α，17β)-7-乙烯基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮i)將無水四氫呋喃(167毫升)中(17β)-17-(乙酰氧基)雌甾-4，6-二烯-3-酮[Syntex，DE1143199(1963)；50.0克]，鋰硫代苯酚鹽(1.0M四氫呋喃溶液，16毫升)，溴化銅(I)-二甲基硫化物復(fù)合物(3.18克)和溴化鋰(1.38克)的溶液冷卻到-15℃。滴加乙烯基氯化鎂(2M四氫呋喃溶液，159毫升)(T≤15℃)并且繼續(xù)攪拌30分鐘。滴加飽和的氯化銨水溶液并且又繼續(xù)攪拌15分鐘。反應(yīng)混合物經(jīng)代卡利特過濾，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相減壓濃縮，殘余物溶解于丙酮(1000毫升)。加入鹽酸(4M，100毫升)，并且將混合物在室溫下攪拌30分鐘。加入飽和的碳酸氫鈉水溶液并且減壓去除丙酮。將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到(7α，17β)-17-(乙酰氧基)-7-乙烯基雌甾-4-烯-3-酮和(7β，17β)-17-(乙酰氧基)-7-乙烯基雌甾-4-烯-3-酮(57.3克，比例85∶15)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
ii)向四氫呋喃(833毫升)，甲醇(738毫升)和水(238毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(57.3克)的溶液分批加入氫氧化鉀(26.7克)。室溫下將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘之后用濃鹽酸(20毫升)中和。減壓下部分去除四氫呋喃和甲醇，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-7-乙烯基-17-羥基雌甾-4-烯-3-酮(36.7克)。
iii)將前一步驟獲得的產(chǎn)物(66.2克)，原甲酸三甲酯(80毫升)，溴化銅(II)(65.2克)和甲醇(1788毫升)的混合物在回流下加熱50分鐘。冷卻后，過濾反應(yīng)混合物。減壓濃縮濾液并且殘余物溶解于乙酸乙酯。乙酸乙酯溶液用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-醇(42.9克)。
iv)向丙酮(1080毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(41.1克)和4-甲基嗎啉N-氧化物(46.2克)的溶液加入四丙基銨過鐐酸鹽(2.76克)。室溫下攪拌1小時后，反應(yīng)混合物經(jīng)代卡利特和二氧化硅過濾。將濾液減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(38.1克)。
v)向乙二醇(108毫升)和原甲酸三乙酯的混合物中前一步驟獲得的產(chǎn)物(36.05克)溶液加入對甲苯磺酸(3.21克)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。加入水(1800毫升)并且繼續(xù)攪拌1小時。產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(41.37克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
vi)向無水四氫呋喃(114毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(21.37克)溶液分批加入苯基三甲基銨三溴化物(22.60克)。將反應(yīng)混合物攪拌40分鐘，然后分批加入苯基三甲基銨三溴化物處理直到反應(yīng)完全。攪拌30分鐘后將混合物倒入硫代硫酸鈉水溶液(10％)中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到(7α，16α)-16-溴-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(34.91克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
vii)用叔丁醇鉀(13.5克)處理無水二甲亞砜(178毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(34.91克)溶液并且將反應(yīng)混合物在40℃下攪拌3小時。分別在30分鐘和1小時后再加入另外量的(13.5克)叔丁醇鉀。將混合物倒入飽和的氯化銨水溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(17.54克)。
viii)用對甲苯磺酸(1.48克)處理丙酮(507毫升)和水(43毫升)的混合物中前一步驟獲得的產(chǎn)物(31.47克)溶液并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(23.92克)。
ix)用對甲苯磺酸(13.5克)處理無水甲苯(970毫升)的混合物中前一步驟獲得的產(chǎn)物(23.9克)溶液并且回流下加熱15分鐘。冷卻后，將混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮，柱層析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(14.9克)和(7α，14β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(7.32克)。
x)向四氫呋喃(27.8毫升)，乙醇(27.8毫升)和水(4.55毫升)的混合物中前一步驟獲得的(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(1.50克)的溶液加入氫硼化鈉(1.47克)。將反應(yīng)混合物攪拌50分鐘之后倒入水中。將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且濃縮，得到(7α，17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(1.47克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xi)向回流的液氨(105毫升)中加入無水四氫呋喃(26毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(1.47克)溶液。加入鋰顆粒(0.95克)，并且將反應(yīng)混合物攪拌1.25小時。加入無水叔丁醇(9.2毫升)，并且將反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘。加入固體氯化銨并且使氨蒸發(fā)。加入水并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇(1.48克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xii)根據(jù)類似于實施例iii描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(1.48克)水解，柱層析和結(jié)晶后得到(7α，17β)-7-乙烯基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(0.419克)。M.p.129-136℃。
實施例3(7α，17β)-17-羥基-7-丙基雌甾-4，14-二烯-3-酮根據(jù)類似于實施例1描述的方法，制備標題化合物。1H-NMR(CDCl3)δ5.86(bs，1H)，5.08(m，1H)，4.00(q，1H，J＝7.2Hz)，1.00(s，3H)，0.89(t，3H，J＝6.2Hz)。
實施例4(7α，17β)-17-羥基-7-(2-丙烯基)雌甾-4，14-二烯-3-酮i)將無水二乙醚(250毫升)中鋰顆粒(含有0.5％鈉；5.60克)的混合物冷卻到-30℃。在45分鐘內(nèi)加入1-溴-3-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]丙烷(101.2克)，同時保持溫度低于0℃。加入溴之后，將反應(yīng)混合物在20℃下再攪拌45分鐘。在第二個燒瓶中，將無水四氫呋喃(200毫升)中碘化銅(I)(38.1克)的懸浮液冷卻到-30℃。5分鐘內(nèi)加入有機鋰化合物的溶液(-20℃≤T≤-10℃)，并且又繼續(xù)攪拌5分鐘。然后在5分鐘內(nèi)加入無水四氫呋喃(200毫升)中(17α)-17-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-19-去甲孕甾-4，6-二烯-20-炔-3-酮(實施例1，步驟i；51.6克)，并且將反應(yīng)混合物在-20℃下攪拌1小時。將混合物倒入飽和的氯化銨水溶液和濃氨水(9∶1)中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并濃縮。殘余物溶解于丙酮(500毫升)。加入鹽酸(6M，25毫升)，并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。加入飽和的碳酸氫鈉水溶液，并且去除丙酮。將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且濃縮，柱層析得到(7α，17α)-17-羥基-7-(3-羥基丙基)-19-去甲孕甾-4-烯-20-炔-3-酮(39.4克)。
ii)室溫下將吡啶(215毫升)和乙酸酐(108毫升)的混合物中前一步驟獲得的產(chǎn)物(38.4克)的溶液攪拌1小時。將反應(yīng)混合物倒入水(1000毫升)中并且又繼續(xù)攪拌1小時。將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17α)-17-羥基-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-19-去甲孕甾-4-烯-20-炔-3-酮(40.5克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
iii)根據(jù)類似于實施例1中iv中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(40.5克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-雌甾-4-烯-3，17-二酮(39.0克)。
iv)根據(jù)類似于實施例1中v中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(39.0克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-羥基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(36.8克)。
v)根據(jù)類似于實施例1中vi中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(36.8克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(19.3克)。
vi)根據(jù)類似于實施例2中v中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(19.3克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮縮環(huán)1，2-乙二醇(21.8克)。
vii)向無水四氫呋喃(448毫升)中氫化鋁鋰(6.58克)的懸浮液滴加無水四氫呋喃(224毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(21.8克)的溶液，冷卻到0℃。攪拌1小時后，通過加入飽和的硫酸鈉水溶液中止反應(yīng)。加入乙酸乙酯，混合物經(jīng)代卡利特過濾。減壓濃縮濾液，得到(7α)-7-[3-羥基丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮縮環(huán)1，2-乙二醇(18.9克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
viii)向無水二甲氧基乙烷(80毫升)和乙二醇(28毫升)的混合物中的吡啶鎓三溴化物(35.9克)的溶液滴加無水二甲氧基乙烷(80毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(18.7克)的溶液.同時避免溫度超過室溫。攪拌1小時之后將混合物倒入水(159毫升)中硫代硫酸鈉(27.1克)的溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水，飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮，得到(7α，16α)-16-溴-7-[3-羥基丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮縮環(huán)1，2-乙二醇(24.3克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
ix)根據(jù)類似于實施例2中vii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(24.3克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-羥基丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮縮環(huán)1，2-乙二醇(13.1克)。
x)根據(jù)類似于實施例2中viii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(5.46克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-[3-羥基丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(5.01克)。
xi)將乙酸異丙烯酯(94毫升)中前一步驟獲得的酮(3.19克)和對甲苯磺酸吡啶鎓(0.94克)的溶液在回流下加熱1.5小時。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中。將產(chǎn)物萃取到二乙醚中；合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮，得到乙酸(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14，16-五烯-17-酯(24.3克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xii)根據(jù)類似于實施例2中x中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(3.69克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(2.49克)。
xiii)用叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.46克)處理無水二氯甲烷(13毫升)中的前一步驟獲得的醇(2.49克)和咪唑(2.20克)的溶液。室溫下攪拌2小時后將反應(yīng)混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中。將產(chǎn)物萃取到二乙醚中；合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮，得到(7α，17β)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯(3.43克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xiv)根據(jù)類似于vii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(3.43克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-7-(3-羥基丙基)-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯(1.96克)。
xv)向無水二氯甲烷(7.5毫升)中三苯基膦(0.32克)和咪唑(0.082克)的溶液加入碘(0.292克)。碘反應(yīng)完全之后，加入無水二氯甲烷(3毫升)中前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.25克)的溶液，室溫下將混合物攪拌30分鐘。然后將其倒入飽和的硫代硫酸鈉水溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到二乙醚中；合并的有機相用水，飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-7-(3-碘丙基)-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯(0.29克)。
xvi)用叔丁醇鉀(1.62克)處理二甲亞砜(5毫升)中前一步驟獲得的碘代物(0.17克)的溶液，并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物倒入飽和的氯化銨水溶液中，并且將產(chǎn)物萃取到二乙醚中；合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-3-甲氧基-7-(2-丙烯基)雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.075克)。
xvii)向回流的液氨(30毫升)中的鋰(0.42克)溶液加入無水四氫呋喃(5毫升)中前一步驟獲得的醇(0.15克)。-40℃下攪拌1小時之后加入叔丁醇(4毫升，并且繼續(xù)攪拌30分鐘)。加入乙醇(8毫升)并且使氨蒸發(fā)。將混合物倒入水中并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，得到(7α，17β)-3-甲氧基-7-(2-丙烯基)雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇和(7α，17β)-3-甲氧基-7-丙基)雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇的混合物(0.144克，比例2∶3)。
xviii)根據(jù)類似于實施例1中iii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.144克)水解，在柱層析和制備HPLC(反相)之后得到(7α，17β)-17-羥基-7-(2-丙烯基)雌甾-4，14-二烯-3-酮(0.018克)，[α]D20＝+6.2°(c＝0.89，二噁烷)。
實施例5(7α，17β)-7-丁基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(a)和(7α，17β)-7-(3-丁烯基)-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(b)i)根據(jù)類似于實施例2中iv中描述的方法，將(7α，17β)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-7-(3-羥基丙基)-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯(實施例4，步驟xiv；0.40克)轉(zhuǎn)化為3-[(7α，17β)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基])氧基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-7-基)丙醛(0.40克)。
ii)回流下將甲基三苯基溴化磷鎓(0.94克)，叔丁醇鉀(0.26克)和無水甲苯(10毫升)加熱1小時。加入無水甲苯(5毫升)中前一步驟獲得的醛(0.40克)溶液，并且又繼續(xù)加熱1小時，冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入飽和的氯化銨水溶液中，將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-7-(3-丁烯基)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯(0.40克)。
iii)根據(jù)類似于實施例1中iii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.40克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-17-(3-丁烯基)-3-甲氧基雌甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.39克)。
iv)根據(jù)類似于實施例4中xvii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.39克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-丁基-3-甲氧基雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇和(7α，17β)-7-(3-丁烯基)-3-甲氧基雌甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇的混合物(0.37克，比例3∶1)。
v)根據(jù)類似于實施例1中iii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(0.37克)水解，在柱層析和制備HPLC(反相)之后得到(7α，17β)-7-丁基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(0.043克)，[α]D20＝+7.6°(c＝0.185，二噁烷)，和(7α，17β)-7-(3-丁烯基)-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(0.077克)，[α]D20＝+4.4°(c＝0.475，二噁烷)。
實施例6(7α，17β)-7，13-二乙基-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮i)在乙醇(600毫升)，二噁烷(800毫升)和原甲酸三乙酯(199毫升)的混合物中13-乙基甾-4-烯-3，17-二酮[Hoffmann-La Roche andCo.；AG，DE1806410(1967)；100克]的溶液加入對甲苯磺酸吡啶鎓(5.0克)。室溫下攪拌4.5小時后加入吡啶(100毫升)，并且將該反應(yīng)混合物倒入飽和的碳酸氫鈉水溶液中。將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并且減壓濃縮，得到3-乙氧基-13-乙基甾-3，5-二烯-17-酮(146.3克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
ii)根據(jù)類似于實施例4中vii中描述的方法，將前一步驟獲得的產(chǎn)物(73.2克)轉(zhuǎn)化為(17β)-3-乙氧基-13-乙基甾-3，5-二烯-17-醇(58.0克)。
iii)向乙醇(525毫升)和水(60毫升)的混合物中的四氯-1，4-苯并醌(49.6克)的懸浮液加入含有吡啶(2.5毫升)的四氫呋喃(215毫升)中的前一步驟獲得的產(chǎn)物(58.0克)的溶液。室溫下將反應(yīng)混合物攪拌4.5小時，然后用水(385毫升)中亞硫酸氫鈉(26.7克)的溶液處理。攪拌30分鐘之后，加入飽和的亞硫酸鈉水溶液，并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中；合并的有機相用飽和的亞硫酸鈉水溶液，水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并且減壓濃縮，得到棕色油狀物(81.0克)。用57.0克3，5-二烯重復(fù)處理，得到79.0克粗產(chǎn)物。將合并的粗產(chǎn)物進行柱層析，得到(17β)-3-乙基-17-羥基甾-4，6-二烯-3-酮(56.3克)。
iv)根據(jù)類似于實施例4中xiii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(56.3克)轉(zhuǎn)化為17β-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-13-乙基甾-4，6-二烯-3-酮(65.6克)。
v)根據(jù)類似于實施例2中i中描述的方法，使用乙基溴化鎂，將前一步驟得到的產(chǎn)物(25.0克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7，13-二乙基-17-羥基甾-4-烯-3-酮(8.13克)。
vi)根據(jù)類似于實施例2中iii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(8.24克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-醇(6.28克)。
vii)根據(jù)類似于實施例2中iv中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(5.72克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(5.61克)。
viii)根據(jù)類似于實施例2中v中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(5.61克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(6.99克)。
ix)根據(jù)類似于實施例2中vi中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(6.27克)轉(zhuǎn)化為(7α，16α)-16-溴-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(8.47克)。
x)根據(jù)類似于實施例2中vii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(8.47克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(5.21克)。
xi)用對甲苯磺酸吡啶鎓(3.18克)處理無水甲苯(120毫升)中前一步驟得到的產(chǎn)物(4.61克)的溶液并且回流下加熱1小時。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入碳酸氫鈉水溶液中并且將產(chǎn)物提取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并且減壓濃縮，得到(7α)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(4.44克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xii)用對甲苯磺酸(2.29克)處理無水甲苯(120毫升)中前一步驟得到的產(chǎn)物(4.44克)的溶液并且回流下加熱45分鐘。冷卻后，將反應(yīng)混合物倒入碳酸氫鈉水溶液中并且將產(chǎn)物提取到乙酸乙酯中。合并的有機相用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并且減壓濃縮，得到(7α)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(3.89克)。該產(chǎn)物不用進一步純化就在下面的步驟中使用。
xiii)根據(jù)類似于實施例4中vii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(3.89克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(2.79克)。
xiv)根據(jù)類似于實施例4中xvii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(2.0克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7，13-二乙基-3-甲氧基甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇(1.77克)。
xv)根據(jù)類似于實施例1中iii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(1.77克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7，13-二乙基-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮(0.367克)，m.p.181.5-183.5℃。
實施例7(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮i)根據(jù)類似于實施例2中i中描述的方法，將(17β)-17-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-13-乙基甾-4，6-二烯-3-酮(實施例6，步驟iv；25.0克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-17-羥基甾-4-烯-3-酮(8.20克)。
ii)根據(jù)類似于實施例2中iii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(7.76克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-醇(5.16克)。
iii)根據(jù)類似于實施例2中iv中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(5.43克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮(5.08克)。
iv)根據(jù)類似于實施例2中v中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(4.92克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(5.42克)。
v)根據(jù)類似于實施例2中vi中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(5.08克)轉(zhuǎn)化為(7α，16α)-16-溴-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(7.41克)。
vi)根據(jù)類似于實施例2中vii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(7.41克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(3.87克)。
vii)根據(jù)類似于實施例6中xi中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(3.42克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮環(huán)醛縮1，2-乙二醇(3.30克)。
viii)根據(jù)類似于實施例6中xii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(3.30克)轉(zhuǎn)化為(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(3.0克)。
ix)根據(jù)類似于實施例4中vii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(3.00克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(1.70克)。
x)根據(jù)類似于實施例4中xvii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(1.49克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-2，5(10)，14-三烯-17-醇(1.60克)。
xi)根據(jù)類似于實施例1中iii中描述的方法，將前一步驟得到的產(chǎn)物(1.60克)轉(zhuǎn)化為(7α，17β)-7-乙烯基-13-乙基-17-羥基甾-4，14-二烯-3-酮(0.47克)，m.p.141-145℃。
實施例8(3β，7α，17β)-7-乙基雌甾-4，14-二烯-3，17-二醇根據(jù)類似于實施例4中vii中描述的方法，從(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(實施例1a)制備標題化合物。1H-NMR(CDCl3)δ5.39(m，1H)，5.01(m，1H)，4.21(m，1H)，3.96(m，1H)，0.98(s，3H)，0.87(t，3H，J＝7.6Hz)。
實施例9(5α，7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-14-烯-3-酮向回流的液氨(44毫升)中的鋰(0.31克)溶液加入無水四氫呋喃(13毫升)中(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮(實施例1a；0.67克)溶液。-40℃下攪拌30分鐘之后加入固體氯化銨并且使氨蒸發(fā)。加入水并且將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的有機相用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并且減壓濃縮，柱層析得到(5α，7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-14-烯-3-酮(0.21克)。1H-NMR(CDCl3)δ5.02(s，1H)，3.98(t，1H，J＝8.4Hz)，0.99(s，3H)，0.89(t，3H，J＝7.5Hz)。
實施例10LH抑制測定測定口服活性與Segaloff化合物相比，對成熟雄性閹割大鼠模型測定幾種本發(fā)明的雄激素的體內(nèi)效價(po)。
該模型血清LH高(比完整大鼠高50倍，由于不存在睪丸睪酮副反饋)。每天用本發(fā)明給定化合物的花生油懸浮液po處理這些大鼠4天。給藥之前和最后口服給藥之后3小時通過尾靜脈采集血液并且測定血清LH。以抑制血清LH50％(±10％)的雄激素的量(毫克/毫升)表示雄激素的效價(po)(ED50)。
使用在室內(nèi)配制的試劑在室中進行大鼠LH時間-分辨免疫熒光測定(TR-IFMA)，單克隆捕獲抗體定向抗人絨毛膜促性腺激素(hCG，其與大鼠β-亞基起交叉反應(yīng))的β-亞基和生物素標記的檢測抗體(兔多克隆抗體定向抗重組大鼠LH的亞基)。根據(jù)Hakola等(1997)描述的方法制備重組大鼠LH。在兩點-IFMA中，通過與鏈霉抗生物素蛋白-銪最后孵育只測定完整大鼠LH。IFMA中的測定以相對長激發(fā)期中鑭銪的熒光。大鼠LH標準物的濃度范圍是0.001-10ng/毫升，對于血清LH的最精確測定，用測定緩沖液[Hakola，K.Boogaart，P.V.Mulders，J.，deLeeuw，R.，Schoonen，W.，Heyst，J.V.，Swolfs，A.，Casteren，J.V.，Huhtaniemi，I.，和Kloosterboer，H.J.，重組大鼠黃體生成素；通過中國倉鼠卵巢細胞生產(chǎn)，純化和功能表征，分子和內(nèi)分泌學(xué)(Molecular&Cellular Endocrinology)128，47(1997)]將血清樣品稀釋8倍。
結(jié)論表.抑制血清LH50％(±10％)需要的本發(fā)明雄激素的(ED50)(po)。
*(7α，17β)-7-甲基-17-羥基雌甾-1，4-二烯-3-酮在液氮中低溫保存從健康年輕(25-45歲)男性器官捐獻者獲得的肝細胞，并且在使用之前一直保存。在37℃下在水域中解凍，立即置于冰上，在一體積冷的(4℃)孵育培養(yǎng)基中洗滌兩次[William’s培養(yǎng)基E(沒有酚紅)，有Glutamax I§，慶大霉素50微克/毫升，胰島素1μM，氫化可的松半琥珀酰酯10μM，胎牛血清0％(v/v)]，計數(shù)，并且通過錐蟲藍排斥檢測生存力。在37℃下用空氣/O2/CO2混合物(55/40/5)在1.5毫升培養(yǎng)基中以0.5×106細胞/孔的標稱密度在12孔(沒有包被)板上培養(yǎng)作為懸浮液的細胞。將平板放置于以大約10rpm轉(zhuǎn)動的定軌振蕩器中。
肝細胞與10nM終濃度的要測定的化合物孵育。0.5，1和3小時之后，通過將全部孵育混合物移至冰上玻璃管中并且加入1體積丙酮而中止孵育。室溫下通入氮氣流干燥丙酮，將體積調(diào)節(jié)至1.5毫升，并且將試管在4℃下以10000Xg離心30分鐘。收集去蛋白質(zhì)化上清液用于LC-MS/MS分析。結(jié)論表.與人肝細胞孵育之后本發(fā)明的雄激素的t1/2
*(7α，17β)-7-甲基-17-羥基雌甾-1，4-二烯-3-酮
權(quán)利要求
1.滿足結(jié)構(gòu)式I的化合物 其中R1是O，(H，H)，(H，OR)，NOR，R是氫，(C1-6)烷基，或(C1-6)?；籖2選自(C2-4)烷基，(C2-4)鏈烯基，或(C2-4)炔基，各自任選地被鹵原子取代；或者R2是環(huán)丙基，或環(huán)丙烯基，各自任選地被(C1-2)烷基或鹵原子取代；R3是氫，(C1-2)烷基，或乙烯基；R4是(C1-2)烷基；R5是氫或(C1-15)酰基；并且虛線表示任選的鍵。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，特征在于R2選自乙基，乙烯基，乙炔基，丙基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-丙炔基，1，2-丙二烯基和環(huán)丙基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，特征在于R2是C2。
4.一種藥物組合物，含有藥用載體并且含有作為藥物活性成分的滿足結(jié)構(gòu)式I的甾族化合物 其中R1是O，(H，H)，(H，OR)，NOR，R是氫，(C1-6)烷基，或(C1-6)酰基；R2選自(C2-4)烷基，(C2-4)鏈烯基，或(C2-4)炔烴基，各自任選地被鹵原子取代；或者R2是環(huán)丙基，或環(huán)丙烯基，各自任選地被(C1-2)烷基或鹵原子取代；R3是氫，(C1-2)烷基，或乙烯基；R4是(C1-2)烷基；R5是氫或(C1-15)?；徊⑶姨摼€表示任選的鍵。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的藥物制劑，特征在于該甾族化合物的R2選自乙基，乙烯基，乙炔基，丙基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-丙炔基，1，2-丙二烯基和環(huán)丙基。
6.根據(jù)權(quán)利要求4的藥物制劑，特征在于該甾族化合物是(7α，17β)-7-乙基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮或(7α，17β)-7-乙烯基-17-羥基雌甾-4，14-二烯-3-酮。
7.根據(jù)權(quán)利要求5-6任一項的藥物制劑，特征在于其適合口服給藥。
8.滿足式I的化合物在制備用于治療雄激素不足的藥物中的用途。
9.用于雄性節(jié)育的包括用來施用孕激素的工具和用來施用雄激素的工具的試劑盒，特征在于后一種工具是根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項的藥物制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及的新的口服活性的雄激素是7α取代的Δ
文檔編號A61K31/565GK1360589SQ00810310
公開日2002年7月24日 申請日期2000年7月10日 優(yōu)先權(quán)日1999年7月16日
發(fā)明者H·J·J·魯澤, D·雷森, J·范德羅 申請人:阿克佐諾貝爾公司