專利名稱：包括堿性鞘磷脂酶的用作飲食制劑、食品添加劑或藥物制劑的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及堿性鞘磷脂酶用于制備旨在營養(yǎng)、飲食或嚴(yán)格地治療性用途的組合物的用途，和用這種方法制造的組合物。
因此，取決于此組合物所面向的特定個體，根據(jù)它們是否旨在充當(dāng)合適的基料或預(yù)防性治療或者充當(dāng)治療性制劑，這些組合物可以是如下形式并可充當(dāng)合適的食品添加劑(food supplement)、飲食基料或藥物制劑。
到目前為止已經(jīng)鑒定了三種不同類型的鞘磷脂酶(SMase)。
有一種酸性鞘磷脂酶，它是一種溶酶體酶(具有最適pH4.5-5)，其缺乏引起尼曼氏病，有一種中性鞘磷脂酶，具有最適pH7.5，它的兩種同工型已被描述。這些同工型之一定位在細(xì)胞膜并且依賴于鎂，而另一種被容納于細(xì)胞漿并且不依賴于陽離子。酸性鞘磷脂酶和中性鞘磷脂酶都在許多組織和細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，是普遍存在的酶，涉及許多細(xì)胞功能。
第三種類型被稱為堿性鞘磷脂酶，因?yàn)樗饕趐H9有活性。它不依賴于鎂，并且在腸刷狀緣中和在膽汁中都有發(fā)現(xiàn)。堿性鞘磷脂酶不存在于胃、十二指腸或胰腺，但是在腸，特別是在空腸的遠(yuǎn)端被發(fā)現(xiàn)。在結(jié)腸和直腸也觀察到一個顯著的堿性鞘磷脂酶活性。還在膽汁中發(fā)現(xiàn)了高水平的堿性鞘磷脂酶活性，但是，這似乎是人類特有的。鞘磷脂酶的這個雙重來源使得人類與其它生物相比較，在水解通過飲食引進(jìn)的鞘磷脂(SM)方面非常有效。迄今為止，認(rèn)為堿性鞘磷脂酶不能由腸的細(xì)菌產(chǎn)生，因?yàn)樵诔Ｒ?guī)動物和無菌動物之間沒有發(fā)現(xiàn)差異(參見R.D.Duan，斯堪的納維亞胃腸學(xué)雜志(Scand.J.Gastroenterology)，33(1998)pp.673-683)。
除了存在于腸和存在于膽汁中的堿性鞘磷脂酶之外，已知沒有其它堿性鞘磷脂酶可以用來生產(chǎn)旨在營養(yǎng)、飲食或嚴(yán)格地治療性用途的組合物。而且，酸性和中性鞘磷脂酶由于他們的不同特征而不能被使用(參見下表)。
表酸性SMase 中性SMase 堿性SMase位置溶酶體 細(xì)胞膜 人的腸和膽汁最適pH 5.57.4 9Mg++-依賴性否 是 否胰蛋白酶抗性否 否 是熱穩(wěn)定性＜40℃ - ＜50-60℃底物細(xì)胞內(nèi)吞的SM 膜SM食物中的SM就美容和皮膚學(xué)而言，鞘磷脂酶的用途已經(jīng)公知。
日本專利No.63 216,813描述了含有鞘磷脂酶并且旨在抵消存在于皮膚中的這種酶隨著衰老生理性減少以及促進(jìn)其轉(zhuǎn)化成神經(jīng)酰胺而神經(jīng)酰胺又對表皮有增加水分之作用的美容組合物。
國際專利申請PCT WO 98/22.082描述了鞘磷脂酶用于制備適合于治療諸如皮炎、牛皮癬、魚鱗癬和相似情形的病癥的組合物。進(jìn)一步地，此PCT申請描述了從革蘭氏陰性細(xì)菌、革蘭氏陽性細(xì)菌和乳酸細(xì)菌的菌株制備鞘磷脂酶，具有清晰的優(yōu)越于先前所公知的使用諸如腦和肝的高等動物器官作為啟始材料的過程的優(yōu)點(diǎn)。
令人驚訝地是，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些細(xì)菌擁有高水平的堿性鞘磷脂酶，并且，他們的攝取可以有益于宿主。這些細(xì)菌可能與其它諸如乳酸細(xì)菌的細(xì)菌、與SM和/或與含有SM的食物組合，活著或以提取物的形式攝取，只要這些有酶活性。
因此，本發(fā)明的目的之一是提供一種包括足以在需要它的個體中發(fā)揮飲食、營養(yǎng)或治療性作用的量的堿性鞘磷脂酶的飲食、營養(yǎng)或藥物組合物。
特別地，此組合物適合于預(yù)防和/或治療與腸發(fā)育有關(guān)的病癥、癌性過程、免疫應(yīng)答的病癥、腸及其相關(guān)結(jié)構(gòu)的炎性和凋亡過程、與膽固醇合成有關(guān)的病癥、由胃腸道表面的疏水特性所引起的病癥、胃腸道的變應(yīng)性病癥、涉及消化過程的病癥、炎性腸疾病、息肉病、特別是家族性息肉病、高膽固醇血癥、幽門螺桿菌感染、新生兒生長的病癥、與腸內(nèi)穩(wěn)態(tài)有關(guān)的病癥以及中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的病癥。
本組合物對在小兒科食物和/或腸內(nèi)營養(yǎng)中使用也是有用的。在小兒科食物中，本組合物可以，例如，總的來說，與人造奶、煉乳、豆奶、奶粉、部分人源化奶(umanized milk)以及嬰兒食品組合給食。
此組合物優(yōu)選地含有細(xì)菌來源的堿性鞘磷脂酶，并且從革蘭氏陰性細(xì)菌、革蘭氏陽性細(xì)菌和乳酸細(xì)菌當(dāng)中，或從其混合物中選擇含有堿性鞘磷脂酶的細(xì)菌。
更加特別地，此組合物的堿性鞘磷脂酶從乳酸細(xì)菌獲得，并且這些選自嗜酸乳桿菌(Lactobacillus aeidophilus)、短乳桿菌(Lactobaeillusbrevis)、布赫內(nèi)氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、鏈狀乳桿菌(Lactobacillus catenaforme)、纖維二糖乳桿菌(Lactobacillus cellobiosus)、卷曲乳桿菌(Lactobacillus crispatus)、彎曲乳桿菌(Lactobacillus curvatus)、戴爾布呂克氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckii)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)、詹氏乳桿菌(Lactobacillus jensenii)、萊希曼氏乳桿菌(Lactobacillus leichmannii)、小乳桿菌(Lactobacillus minutus)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、羅氏乳桿菌(Lactobacillus rogosae)、唾液乳桿菌(Lactobacillussalivarius)、青春雙歧桿菌(Bifidobacterium adolescentis)、角雙歧桿菌(Lactobacillus angulatum)、雙歧雙歧桿菌(Bifidobacteriumbifidum)、短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)、鏈狀雙歧桿菌(Bifidobacterium catenulatum)、齒雙歧桿菌(Bifidobacteriumdentium)、埃氏雙歧桿菌(Bifidobacterium eriksonii)、嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)、長雙歧桿菌(Bifidobacterium1ongum)、植物雙歧桿菌(Bifidobacterium plantarum)、假鏈狀雙歧桿菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum)、假長雙歧桿菌(Bifidobacterium pseudolongum)、乳鏈球菌(Streptococcuslactis)、棉子糖乳鏈球菌(Streptococcus raffinolactis)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophi1us)。
在這些乳酸細(xì)菌當(dāng)中特別優(yōu)選的菌株是根據(jù)布達(dá)佩斯條約于1998年2月6日在德國Braunschweig德國微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSM)(“Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH”)以保藏號No.DSM 11，988申報(bào)的短乳桿菌CD2(Lactobacillus brevisCD2)菌株，或其突變體或衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案，乳酸細(xì)菌作為活的、凍干的或超聲處理過的細(xì)菌用于此組合物。
此組合物優(yōu)先地含有每克組合物1×102到1×1013菌落形成單位(CFU)的乳酸細(xì)菌。
一種特別優(yōu)選的組合物每克組合物含有200×109嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)，150×109雙歧桿菌(Bifidobacteria)和4×109嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)。
根據(jù)本發(fā)明的組合物還可以含有膽汁酸，特別是熊去氧膽酸、果膠、鞘磷脂或其復(fù)合物、含有鞘磷脂的藥物或食物、精氨酸脫亞胺酶(deiminase)、脂肪酸、多不飽和脂肪酸、非發(fā)酵的糖、特別是乳果糖、膽固醇抑制劑、神經(jīng)酰胺酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗致癌劑、維生素、生長因子、表面活性劑、谷物、纖維、乳化劑、穩(wěn)定劑、脂類、抗氧化劑、防腐劑、自由基中和劑和/或血管保護(hù)劑。
本發(fā)明的組合物可以作為食品添加劑經(jīng)口給食或者作為藥物經(jīng)口或非經(jīng)胃腸給藥。
本發(fā)明還涉及堿性鞘磷脂酶用于制備適合于預(yù)防和/或治療與腸發(fā)育有關(guān)的病癥、癌性過程、免疫應(yīng)答的病癥、腸及其相關(guān)結(jié)構(gòu)的炎性和凋亡過程、與膽固醇合成有關(guān)的病癥、由胃腸道表面的疏水特性所引起的病癥、胃腸道的變應(yīng)性病癥、涉及消化過程的病癥、炎性腸病、息肉病、特別是家族性息肉病、高膽固醇血癥、幽門螺桿菌感染、新生兒生長的病癥、與腸內(nèi)穩(wěn)態(tài)有關(guān)的病癥以及中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的病癥的飲食、營養(yǎng)或藥物組合物的用途。
此組合物還對在小兒科食物和/或腸內(nèi)營養(yǎng)中使用有用。在小兒科食物中，此組合物一般可以，例如，與人造奶、煉乳、豆奶、奶粉、部分人源化的奶(umanized milk)和嬰兒食品組合給食。
所使用的堿性磷脂酶優(yōu)選地是細(xì)菌來源的，并且含有它的細(xì)菌從革蘭氏陰性細(xì)菌、革蘭氏炎性細(xì)菌和乳酸細(xì)菌當(dāng)中或從其混合物中選擇。
更加特別地，所使用的乳酸細(xì)菌選自嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)、短乳桿菌(Lactobacillus brevis)、布赫內(nèi)氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、鏈狀乳桿菌(Lactobacillus catenaforme)、纖維二糖乳桿菌(Lactobacillus cellobiosus)、卷曲乳桿菌(Lactobacilluscrispatus)、彎曲乳桿菌(Lactobacillus curvatus)、戴爾布呂克氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckii)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)、詹氏乳桿菌(Lactobacillus jensenii)、萊希曼氏乳桿菌(Lactobacillus leichmannii)、小乳桿菌(Lactobacillus minutus)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、羅氏乳桿菌(Lactobacillusrogosae)、唾液乳桿菌(Lactobacillus salivarius)、青春雙歧桿菌(Bifidobacterium adolescentis)、角雙歧桿菌(Lactobacillusangulatum)、雙歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)、短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)、鏈狀雙歧桿菌(Bifidobacteriumcatenulatum)、齒雙歧桿菌(Bifidobacterium dentium)、埃氏雙歧桿菌(Bifidobacterium eriksonii)、嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacteriuminfantis)、長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)、植物雙歧桿菌(Bifidobacterium plantarum)、假鏈狀雙歧桿菌(Bifidobacteriumpseudocatenulatum)、假長雙歧桿菌(Bifidobacterium pseudolongum)、乳鏈球菌(Streptococcus lactis)、棉子糖乳鏈球菌(Streptococcusraffinolactis)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)。
在這些乳酸細(xì)菌當(dāng)中特別優(yōu)選的菌株是根據(jù)布達(dá)佩斯條約于1998年2月6日在德國Braunschweig德國微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSM)(“Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH”)以保藏號No.DSM 11，988保藏的短乳桿菌CD2(Lactobacillus brevisCD2)菌株或其突變體或衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案，乳酸細(xì)菌作為活的、凍干的或超聲處理過的細(xì)菌使用于此組合物。
使用的組合物優(yōu)選地每克組合物含有1×102到1×1013CFU的乳酸細(xì)菌。
一個特別優(yōu)選的組合物每克組合物含有200×109嗜熱鏈球菌，150×109雙歧桿菌和4×109嗜酸乳桿菌。
進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)以確認(rèn)在根據(jù)本發(fā)明的細(xì)菌中堿性鞘磷脂酶的存在及效率。這些實(shí)驗(yàn)涉及堿性鞘磷脂酶—負(fù)責(zé)人皮膚中神經(jīng)酰胺之形成的酶—的檢測。
方法乳酸細(xì)菌中和腸活組織檢查材料中酸性、中性和堿性鞘磷脂酶的分析將10mg凍干的嗜熱鏈球菌細(xì)菌懸浮于500μl的一種含有50mMTris-HCl，pH7.4，10mM MgCl2，2mM EDTA，5mM DTT，0.1mM Na3Vo4，0.1mM Na2MoO4，30mM磷酸對硝基苯酯，10mMβ-磷酸甘油，750mM ATP，1μMPMSF，10μM亮肽素，10μM抑肽素(購自希格瑪化學(xué)公司(SigmaChemical Co.))和0.2％Triton X-100(為了分析中性SMase的活性)或500μl的0.2％Triton X-100(為了分析酸性SMase的活性)的緩沖液。為了分析堿性鞘磷脂酶活性，將細(xì)菌和(勻漿的)腸的活組織檢查材料懸浮在含有5mM MgCl2，0.15M KCl，50mM KH2PO4，1mM PMSF和1mM苯甲脒(pH7.4)的0.25M蔗糖緩沖液中。此后使用一臺Vibracell超聲儀(美國康涅狄格州丹伯利，聲學(xué)材料公司(Sonic and MaterialsInc.，Danbury，CT))通過超聲對以這種方法制備的樣品進(jìn)行裂解(持續(xù)30分鐘，其中10-sec“開”時間段與10-sec“關(guān)”時間段交替)。此后將超聲過的樣品在4℃以14,000rpm離心30分鐘，去除上清，并用美國加利福尼亞州伯樂公司(Bio-Rad Laboratories，(Richmond，CA))的一種試劑盒確定了蛋白的濃度。
為了確定中性SMase，將100μg的樣品在一種含有50mM Tris-HCl，1mM MgCl2，pH7.4，和2.25μl的[N-甲基-14碳]-鞘磷脂(SM)(0.2μCi/ml，比活56.6mCi/mmol，Amersham)的緩沖液(終體積50μl)中在37℃溫育2小時。
為了確定酸性鞘磷脂酶，將100μg的細(xì)菌裂解物在37℃在一種含有250mM乙酸鈉，1mM EDTA，pH5.0，和2.25μl的[N-甲基-14C]-SM的緩沖液中(終體積50μl)溫育2小時。
為了分析堿性SMase，將這些樣品加入375μl的Tris-EDTA緩沖液中(pH9)至終體積為0.4ml，含有50mM Tris，0.5M NaCl，2mM EDTA和一種TC∶TDC∶GC∶GCDC摩爾比為3∶2∶1.8∶1的3mM膽汁鹽的混合物。膽汁鹽的這種混合物被發(fā)現(xiàn)對堿性SMase具有最高的刺激效應(yīng)。向緩沖液中加入EDTA用來抑制Mg++-依賴性的最適pH為7.5的中性SMase的活性。14C-SM被溶解在乙醇中，在氮?dú)庵懈稍锊腋≡诤?％TritonX-100和3mM膽汁鹽的混合物的分析緩沖液。
通過加入2ml的氯仿和甲醇2∶1混合物終止反應(yīng)。提取磷脂并在TLC板上分析，而SM的水解通過放射自顯影和液體閃爍計(jì)數(shù)定量。存在于超聲過的細(xì)菌中和腸活組織檢查材料中的SMase表示成每小時每毫克蛋白被水解的SM的皮摩爾數(shù)。來自嗜熱鏈球菌的SMase的活性

圖1說明超聲過的乳酸細(xì)菌中鞘磷脂酶的活性水平。沒有發(fā)現(xiàn)由酸性SMase引起的活性，但是，在所使用的實(shí)驗(yàn)條件下(各種pH值和具有以及沒有MgCl2)在被測試的細(xì)菌樣品中中性和堿性SMase都觀察到了明顯的水平。在腸的活組織檢查材料中發(fā)現(xiàn)的堿性鞘磷脂酶圖2說明，腸的活組織檢查材料中的SMase活性的分析顯示了依賴于膽汁鹽類型的堿性SMase的一個高活性水平，這在缺少膽汁鹽時不能被檢測到。在一位患局限性回腸炎的患者的組織中的酶活性的水平顯示了比對照樣品更低的堿性SMase水平。嗜熱鏈球菌對腸的堿性SMase的作用如圖3所示，在確定腸SMase所使用的實(shí)驗(yàn)條件下嗜熱鏈球菌的樣品中SMase活性的分析，說明了此細(xì)菌酶不受膽汁鹽之存在或不存在的影響。進(jìn)一步地，當(dāng)同時測定細(xì)菌SMase活性和腸SMase活性時，SM的水解加和性地提高。用根據(jù)布達(dá)佩斯條約于1998年2月6日在德國Braunschweig德國微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSM)(“DeutscheSammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH”)以保藏號No.DSM 11，988保藏的短乳桿菌CD2(Lactobaillus brevis CD2)菌株或其突變體或衍生物獲得了相似的結(jié)果(沒有顯示)。
權(quán)利要求
1.飲食、營養(yǎng)或藥物組合物，其特征在于它包括足以在需要它的個體中發(fā)揮飲食、營養(yǎng)或治療性效應(yīng)的量的堿性鞘磷脂酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，適合于預(yù)防和/或治療與腸發(fā)育有關(guān)的病癥、癌性過程、免疫應(yīng)答的病癥、腸及其相關(guān)結(jié)構(gòu)的炎性和凋亡過程、與膽固醇合成有關(guān)的病癥、由胃腸道表面的疏水特性引起的病癥，胃腸道的變應(yīng)性病癥、涉及消化過程的病癥，炎性腸疾病、息肉病、特別是家族性息肉病、高膽固醇血癥、幽門螺桿菌感染、新生兒生長的病癥、與腸內(nèi)穩(wěn)態(tài)有關(guān)的疾病以及中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的病癥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，適合在小兒科飲食中使用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，適合在腸內(nèi)營養(yǎng)中使用。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其特征在于此組合物一般與人造奶、煉乳、豆奶、奶粉、部分人源化的奶和嬰兒食品聯(lián)合給食。
6.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于此堿性磷脂酶是細(xì)菌來源的，并且該含有此堿性磷脂酶的細(xì)菌從革蘭氏陽性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌和乳酸細(xì)菌或從其混合物中選擇。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其特征在于乳酸細(xì)菌選自嗜酸乳桿菌、短乳桿菌、布赫內(nèi)氏乳桿菌、干酪乳桿菌、鏈狀乳桿菌、纖維二糖乳桿菌、卷曲乳桿菌、彎曲乳桿菌、戴爾布呂克氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、詹氏乳桿菌、萊希曼氏乳桿菌、小乳桿菌、植物乳桿菌、羅氏乳桿菌、唾液乳桿菌、青春雙歧桿菌、角雙歧桿菌、雙歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、鏈狀雙歧桿菌、齒雙歧桿菌、埃氏雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、長雙歧桿菌、植物雙歧桿菌、假鏈狀雙歧桿菌、假長雙歧桿菌、乳鏈球菌、棉子糖乳鏈球菌、嗜熱鏈球菌。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其特征在于使用根據(jù)布達(dá)佩斯條約于1998年2月6日在德國Braunschweig德國微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSM)(“Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und ZellkulturenGmbH”)以保藏號No.DSM 11，988保藏的短乳桿菌CD2菌株或其突變體或衍生物。
9.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于此乳酸細(xì)菌作為活的、凍干的或者超聲處理過的細(xì)菌在此組合物中使用。
10.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于它每克組合物含有1×102到1×1013CFU的乳酸細(xì)菌。
11.根據(jù)權(quán)利要求7到9中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于它每克組合物含有200×109嗜熱鏈球菌，150×109雙歧桿菌和4×109嗜酸乳桿菌。
12.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其特征在于它還含有膽汁酸，特別是熊去氧膽酸、果膠、鞘磷脂或其復(fù)合物、含有鞘磷脂的藥物或食物、精氨酸脫亞胺酶、脂肪酸、多不飽和脂肪酸、非發(fā)酵的糖、特別是乳果糖、膽固醇抑制劑、神經(jīng)酰胺酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、免疫調(diào)劑劑、抗致癌劑、維生素、生長因子、表面活性劑、谷物、纖維、乳化劑、穩(wěn)定劑、脂類、抗氧化劑、防腐劑、自由基中和劑和/或血管保護(hù)劑。
13.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，它可以作為食品添加劑經(jīng)口給食。
14.根據(jù)在先權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，它可以作為藥物經(jīng)口或非經(jīng)胃腸給藥。
15.堿性鞘磷脂酶用于制備適合于預(yù)防和/或治療與腸發(fā)育有關(guān)的病癥、癌性過程、免疫應(yīng)答的病癥、腸及其相關(guān)結(jié)構(gòu)的炎性和凋亡過程、與膽固醇合成有關(guān)的病癥、由胃腸道表面的疏水特性引起的病癥、胃腸道的變應(yīng)性病癥、涉及消化過程病癥、炎性腸疾病炎性腸疾病、息肉病、特別是家族性息肉病、高膽固醇血癥、幽門螺桿菌感染、新生兒生長的病癥、與腸內(nèi)穩(wěn)態(tài)有關(guān)的疾病以及中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的病癥的飲食、營養(yǎng)或藥物組合物的用途。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，在小兒科飲食方面。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，在腸內(nèi)營養(yǎng)方面。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，在其特征在于此組合物一般與人造奶、煉乳、豆奶、奶粉，部分人源化的奶以及嬰兒食物組合給食。
19.根據(jù)權(quán)利要求15至18中任何一項(xiàng)的用途，其中堿性鞘磷脂酶是細(xì)菌來源的，并且該含有它的細(xì)菌從革蘭氏陽性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌和乳酸細(xì)菌或從其混合物中選擇。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的用途，其特征在于此乳酸細(xì)菌選自嗜酸乳桿菌、短乳桿菌、布赫內(nèi)氏乳桿菌、干酪乳桿菌、鏈狀乳桿菌、纖維二糖乳桿菌、卷曲乳桿菌、彎曲乳桿菌、戴爾布呂克氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、詹氏乳桿菌、萊希曼氏乳桿菌、小乳桿菌、植物乳桿菌、羅氏乳桿菌、唾液乳桿菌、青春雙歧桿菌、角雙歧桿菌、雙歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、鏈狀雙歧桿菌、齒雙歧桿菌、埃氏雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、長雙歧桿菌、植物雙歧桿菌、假鏈狀雙歧桿菌、假長雙歧桿菌、乳鏈球菌、棉子糖乳鏈球菌、嗜熱鏈球菌。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的用途，其特征在于使用根據(jù)布達(dá)佩斯條約于1998年2月6日在德國Braunschweig德國微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSM)(“Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und ZellkulturenGmbH”)以保藏號No.DSM 11，988保藏的短乳桿菌CD2菌株或其突變體或衍生物。
22.根據(jù)權(quán)利要求15到21中任何一項(xiàng)的用途，其特征在于此乳酸細(xì)菌作為活的、凍干的或超聲處理過的細(xì)菌在此組合物中使用。
23.根據(jù)權(quán)利要求15到21中任何一項(xiàng)的用途，其特征在于每克組合物使用1×102到1×1013CFU的乳酸細(xì)菌。
24.根據(jù)權(quán)利要求15到21中任何一項(xiàng)的用途，其特征在于每克組合物使用200×109嗜熱鏈球菌，150×109雙歧桿菌和4×109嗜酸乳桿菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種取決于使用者,可以作為營養(yǎng)、飲食或嚴(yán)格地治療性制劑的,包括作為其活性物質(zhì)的能夠預(yù)防或治療包括癌性過程、腸的炎性過程、高膽固醇血癥和幽門螺桿菌感染的各種病理?xiàng)l件的堿性鞘磷脂酶的組合物。
文檔編號A61K35/74GK1354672SQ00808645
公開日2002年6月19日 申請日期2000年6月7日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月9日
發(fā)明者C·德西蒙 申請人:Vsl制藥有限公司