亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

互花米草木質(zhì)素生物降解方法

文檔序號(hào):10668241閱讀:479來(lái)源:國(guó)知局
互花米草木質(zhì)素生物降解方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%~24%的尿素水溶液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封5~8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為0.26~0.31:1,氨化完成后在暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為5%~15%,發(fā)酵時(shí)間5~20天。本發(fā)明利用黃孢原毛平革菌對(duì)互花米草木質(zhì)素實(shí)施生物降解,顯著降低互花米草木質(zhì)素含量,同時(shí)提高互花米草的飼用效率。
【專利說(shuō)明】
互花米草木質(zhì)素生物降解方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及外來(lái)入侵生物防控與利用技術(shù)領(lǐng)域,具體地說(shuō)是一種互花米草木質(zhì)素 生物降解方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 互花米草自1979年引入我國(guó)沿海灘涂后呈現(xiàn)爆發(fā)增長(zhǎng),對(duì)海灘生態(tài)環(huán)境造成損 害,2003年3月被收錄到入侵我國(guó)的16種外來(lái)入侵種名單。當(dāng)前對(duì)互花米草的防治方法主要 是通過(guò)物理、化學(xué)、天敵生物和生物替代等方式,控制互花米草的生長(zhǎng)與擴(kuò)散,這些方法通 常因?yàn)楦叱杀?、?duì)環(huán)境造成污染等原因很難得到推廣運(yùn)用。將有害的互花米草進(jìn)行資源化 利用是有效防控措施之一,互花米草因富含蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素等可做為家蓄飼料加以開 發(fā)利用。
[0003] 互花米草富含纖維素、半纖維素和木質(zhì)素。木質(zhì)素與纖維素?fù)胶显谝黄?,將纖維素 緊緊包裹在里面,保護(hù)纖維素免遭微生物襲擊和降解酶進(jìn)攻,而草食動(dòng)物的瘤胃微生物缺 乏降解木質(zhì)素的酶,所以互花米草細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能釋放出來(lái),從而限制了動(dòng)物對(duì)纖 維素和半纖維素等成分的降解和利用。因此,提高互花米草消化率的關(guān)鍵是降解木質(zhì)素,黃 孢原毛平革菌富含木質(zhì)素降解酶,利用黃孢原毛平革菌對(duì)互花米草木質(zhì)素實(shí)施降解,可以 提尚互花米草的伺用效率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題和/或缺陷,并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu) 點(diǎn)。
[0005] 本發(fā)明的還有一個(gè)目的是提供一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法。其通過(guò)將互花 米草碎成粉粒進(jìn)行氨化處理,在暗環(huán)境下再接種黃孢原毛平革菌發(fā)酵,利用黃孢原毛平革 菌對(duì)互花米草木質(zhì)素實(shí)施降解,顯著降低木質(zhì)素含量,同時(shí)提高互花米草的飼用效率。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn),提供了互花米草木質(zhì)素生物降解方 法:將互花米草風(fēng)干至含水量低于18 %后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6 %~24 %的尿素水溶液噴 灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封5~8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比 為0.26~0.31:1,氨化完成后在暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為5 % ~15%,發(fā)酵時(shí)間5~20天。
[0007] 優(yōu)選的是,黃孢原毛平革菌在接種前的培養(yǎng)具體為:將黃孢原毛平革菌菌種劃線 至roA培養(yǎng)基上,在25~30 °C暗環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)5~7天,之后在3~4°C冷藏備用,所述roA培 養(yǎng)基由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆4000~6000份、葡萄糖400~600份、瓊脂300~ 450份、純凈水30000份,在90~110°C熬制成稀狀物,再加入KH 2P〇4 60~80份、MgS(k · 7H2〇 30~45份、維生素 B1 0.008~0.012份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基。
[0008] 優(yōu)選的是,尿素水溶液噴灑前加入檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素水溶 液中,檸檬酸、蘋果酸、磷酸二氫銨與尿素水溶液質(zhì)量比為0.01:0.01:0.02:100。
[0009] 優(yōu)選的是,尿素水溶液噴灑后在粉粒中加入質(zhì)量為粉粒質(zhì)量1~1.5%的添加物形 成第一混合物,所述添加物為質(zhì)量比3:1:2的豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,第一混合物壓實(shí)密 封5~8天進(jìn)行氨化處理的溫度控制為30~35°C,第一混合物氨化處理后取出選擇陰涼通風(fēng) 處放置12~14h。
[0010] 優(yōu)選的是,接種黃孢原毛平革菌前第一混合物在氨化處理后需與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合 形成第二混合物,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與第一混合物質(zhì)量比為1:10,基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于第一混 合物表面,然后將第二混合物進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,發(fā)酵溫度為30~ 35°C,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)液配置方法如下:首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度 如下KH 2P〇4 1.35X10-2~1.47X10-2mol/L,MgS〇4 · 7H20 1.96X 10-3~2.03X10-3mol/L以 及CaCl2 · 7Η20 5.9ΧΠΓ4~6.8X10_4mol/L,然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 B1,每升第一 培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為100~120mg,再加入第一培養(yǎng)液總質(zhì)量0.05%~0.06%的吐 溫-80,最后加入微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素混合液體積比為9:1,混勻后即為 基礎(chǔ)培養(yǎng)液。
[0011] 優(yōu)選的是,所述微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaMo〇4 · 2Η203.6Χ 10-5~ 4.1X10-5mol/L,MgS〇4 · 7Η20 1.8X10-2~2X10-2mol/L,MnS〇4 · Η20 1.35X 10-2~1.47Χ 10-2mol/L,NaCl 1.5X10-2~1.7X10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4 · 7Η20 3.46X 10-4~3.59X10-4mol/L, CoCl2 7.62X 10-4~7.75X10-4mol/L,CaCl2 8.7X10-4~9.0X10-4mol/L,ZnS04*H20 3.35 X10-4~3.48X10-4mol/L,CuS04*7H20 3.2X 10-5~4.0X10-5mol/L,AlK(S04)2*7H20 1.9 X 10-5~2 · 1 X 10-5mol/L,H3B〇3l ·4X 10-4~1 ·6 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 5 X 10-3~7 ·8 X 10-3mol/L〇
[0012] 優(yōu)選的是,發(fā)酵過(guò)程中每隔5天噴灑一次配方液,配方液中包括以下重量份數(shù)的原 料:木醋液1~2份、蘋果酸2~3份、蜂蜜8~12份以及純凈水100份,噴灑過(guò)程中不斷上下翻 動(dòng)接種了黃孢原毛平革菌的第二混合物使第二混合物濕度均勻,噴灑完成后第二混合物濕 度達(dá)到50~56%。
[0013] 本發(fā)明的至少包括以下有益效果:
[0014] 第一、本發(fā)明將氨化處理與發(fā)酵接種相結(jié)合,先氨化然后接種黃孢原毛平革菌發(fā) 酵,氨化處理可防止互花米草粉粒腐敗,具有殺滅腐敗細(xì)菌的作用,氨吸附在粉粒上,也增 加了粉粒非蛋白氨的含量,更重要的是氨化處理具有堿化粉粒的作用,可使粉粒內(nèi)部的木 質(zhì)素和纖維素之間的酯鍵斷裂,打破木質(zhì)素和纖維素的鑲嵌結(jié)構(gòu),黃孢原毛平革菌發(fā)酵產(chǎn) 生木質(zhì)素降解酶,由此利用生物降解方法將木質(zhì)素進(jìn)一步降解,將互花米草細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)釋放出來(lái),從而提高了粉粒的消化率;
[0015] 第二、本發(fā)明在尿素水溶液噴灑前加入檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素 水溶液中,檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨能加速尿素水解釋放出氨,加快氨化處理的進(jìn)程, 同時(shí)檸檬酸、蘋果酸具有防腐抗菌功能,能抑制粉粒中霉菌的生長(zhǎng)繁殖,磷酸二氫鉀能用作 水分保持劑,增強(qiáng)氨化處理過(guò)程的穩(wěn)定性;
[0016] 第三、本發(fā)明中尿素水溶液噴灑后在粉粒中加入豆渣、菜籽餅和脫脂奶液物,豆 渣、菜籽餅和脫脂奶液物都富含蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)氨化分解出氨,與尿素分解出的氨產(chǎn)生相互 協(xié)同作用,同時(shí)剩余的蛋白質(zhì)也能增加粉粒中蛋白質(zhì)的含量;
[0017] 第四、本發(fā)明將氨化處理后的第一混合物與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合形成第二混合物,再 進(jìn)行高壓滅菌然后接種黃孢原毛平革菌發(fā)酵,基礎(chǔ)培養(yǎng)液中富含黃孢原毛平革菌生長(zhǎng)繁殖 的必需元素,能為第二混合物的發(fā)酵過(guò)程提供持續(xù)的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng),保障發(fā)酵的穩(wěn)定快速進(jìn)行;
[0018] 第五、本發(fā)明將維生素 B1添加于TOA培養(yǎng)基和基礎(chǔ)培養(yǎng)液中,將維生素 B1作為生長(zhǎng) 因子使用,能顯著促進(jìn)黃孢原毛平革菌細(xì)胞質(zhì)里三羧酸循環(huán)系統(tǒng)的進(jìn)行,三羧酸循環(huán)系統(tǒng) 將黃孢原毛平革菌吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)換成能量,為黃孢原毛平革菌的生長(zhǎng)繁殖活動(dòng)提供能 量,加快木質(zhì)素的生物降解;
[0019] 第六、發(fā)酵過(guò)程中每隔5天噴灑一次含木醋液、蘋果酸、蜂蜜的配方液,低濃度木醋 液、蘋果酸能抑制霉菌的繁殖,對(duì)黃孢原毛平革菌的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,蜂蜜富含葡萄糖、果 糖和維生素,能為黃孢原毛平革菌發(fā)酵過(guò)程提供營(yíng)養(yǎng),加速黃孢原毛平革菌的生長(zhǎng)繁育,進(jìn) 一步加快木質(zhì)素的生物降解。
[0020] 本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn),部分還將通過(guò)對(duì)本 發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)說(shuō)明,以令本領(lǐng)域普通技術(shù)人員參閱本說(shuō)明書后 能夠據(jù)以實(shí)施。
[0022] 〈實(shí)施例1>
[0023] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0024]將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)24%的尿素水溶液噴 灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為 0.26:1,氨化完成后在暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為5 %,發(fā)酵時(shí) 間5天。
[0025]〈實(shí)施例2>
[0026] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0027]將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)16%的尿素水溶液噴 灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為 0.28:1,氨化完成后在暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為15 %,發(fā)酵時(shí) 間12天。
[0028]〈實(shí)施例3>
[0029] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0030]將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%的尿素水溶液噴 灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為 0.31:1,氨化完成后在暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為10%,發(fā)酵時(shí) 間20天。
[0031]〈實(shí)施例4>
[0032] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0033] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆6000份、葡萄糖600份、 瓊脂450份、純凈水30000份,在90°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 80份、MgS〇4 · 7H20 45份、 維生素 B1 0.012份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0034] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至roA培養(yǎng)基上,在25 °C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)5天,之 后在3 C冷減備用;
[0035] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)24%的尿素水溶 液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比 為0.26:1;
[0036] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaM〇04 · 2H20 3.6X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.8X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.35 X 10-2mol/L,NaCl 1.5X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.46X 10-4mol/L,CoCl2 7.62X 10-4mol/L,CaCl2 8.7X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.35 X 10-4mol/L,CuS〇4.7H2〇 3.2X10-5mol/L,AlK(S〇4)2.7H20 1.9X10- 5mol/L,H3B〇3l · 4 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 5 X 10-3mol/L;
[0037] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.35X10-2mol/L,MgS〇4,7H20 1.96X 10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 5.9X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為120mg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 06 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0038] S6、將基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于S3中氨化后粉粒表面,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與氨化后粉粒質(zhì) 量比為1:10,然后進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為5%,發(fā)酵時(shí)間5天, 發(fā)酵溫度為30°C。
[0039] 〈實(shí)施例5>
[0040] -種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0041 ] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆5000份、葡萄糖500份、 瓊脂400份、純凈水30000份,在100°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 70份、MgS〇4· 7H20 40 份、維生素 B1 0.01份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0042] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至roA培養(yǎng)基上,在28 °C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)6天,之 后在4 C冷減備用;
[0043] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)16%的尿素水溶 液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封7天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比 為0.28:1;
[0044] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaM〇04 · 2H20 3.8X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.9X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.41X10-2mol/L,NaCl 1.6X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.51 X 10-4mol/L,CoCl2 7.7X10-4mol/L,CaCl2 8.9X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.41 X 10-4mol/L,CuS〇4.7H2〇 3.5X10-5mol/L,AlK(S〇4)2.7H20 2.0X 10- 5mol/L,H3B〇3l · 5 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 6 X 10-3mol/L;
[0045] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.40X10-2mol/L,MgS〇4,7H20 2.01 X 10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 6.2X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為llOmg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 05 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0046] S6、將基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于S3中氨化后粉粒表面,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與氨化后粉粒質(zhì) 量比為1:10,然后進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為15%,發(fā)酵時(shí)間12 天,發(fā)酵溫度為33 °C。
[0047]〈實(shí)施例6>
[0048] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0049] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆4000份、葡萄糖400份、 瓊脂300份、純凈水30000份,在110°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 60份、MgS〇4· 7H20 30 份、維生素 B1 0.008份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0050] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至roA培養(yǎng)基上,在30°C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)7天,之 后在3 C冷減備用;
[0051] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%的尿素水溶液 噴灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為 0.31:1;
[0052] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaM〇0 4 · 2H20 3.6X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.8X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.35 X 10-2mol/L,NaCl 1.5X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.46X 10-4mol/L,CoCl2 7.62X 10-4mol/L,CaCl2 8.7X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.35X 10-4mol/L,CuS〇4*7H2〇 3.2X10-5mol/L,AlK(S〇4)2*7H20 1.9X10-5, H3BO31 · 4 X 10-4mo 1 /L 以及氨基乙酸 7 · 5 X 10-3mo 1 /L;
[0053] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.35X10-2mol/L,MgS〇4,7H2〇 1.96X10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 5.9X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為100mg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 05 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0054] S6、將基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于S3中氨化后粉粒表面,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與氨化后粉粒質(zhì) 量比為1:10,然后進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為10%,發(fā)酵時(shí)間20 天,發(fā)酵溫度為35 °C。
[0055]〈實(shí)施例7>
[0056] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0057] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆6000份、葡萄糖600份、 瓊脂450份、純凈水30000份,在90°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 80份、MgS〇4 · 7H20 45份、 維生素 B1 0.012份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0058] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至roA培養(yǎng)基上,在25 °C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)5天,之 后在3 C冷減備用;
[0059] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)24%的尿素水溶 液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為〇. 26:1,尿素水溶液噴灑前加 入檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素水溶液中,檸檬酸、蘋果酸、磷酸二氫銨與尿素 水溶液質(zhì)量比為〇. 01: 〇. 01: 〇. 02:100,尿素水溶液噴灑后在粉粒中加入質(zhì)量為粉粒質(zhì)量 1 %的添加物形成第一混合物,所述添加物為質(zhì)量比3:1:2的豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,第一 混合物壓實(shí)密封5天進(jìn)行氨化處理的溫度控制為30°C,第一混合物氨化處理后取出選擇陰 涼通風(fēng)處放置12h;
[0060] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaMo〇4 · 2H20 3.6X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.8X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.35 X 10-2mol/L,NaCl 1.5X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.46X 10-4mol/L,CoCl2 7.62X 10-4mol/L,CaCl2 8.7X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.35 X 10-4mol/L,CuS〇4.7H2〇 3.2X10-5mol/L,AlK(S〇4)2.7H20 1.9X10- 5mol/L,H3B〇3l · 4 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 5 X 10-3mol/L;
[0061] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.35X10-2mol/L,MgS〇4,7H20 1.96X 10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 5.9X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為120mg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 06 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0062] S6、接種黃孢原毛平革菌前S3中第一混合物在氨化處理后需與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合形 成第二混合物,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與第一混合物質(zhì)量比為1:10,基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于第一混合 物表面,然后將第二混合物進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為5%,發(fā)酵 時(shí)間5天,發(fā)酵溫度為30 °C。
[0063]〈實(shí)施例8>
[0064] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0065] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆5000份、葡萄糖500份、 瓊脂400份、純凈水30000份,在100°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 70份、MgS〇4· 7H20 40 份、維生素 B1 0.01份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0066] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至TOA培養(yǎng)基上,在28 °C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)6天,之 后在4 C冷減備用;
[0067] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)16%的尿素水溶 液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為〇. 28:1,尿素水溶液噴灑前加 入檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素水溶液中,檸檬酸、蘋果酸、磷酸二氫銨與尿素 水溶液質(zhì)量比為〇. 01: 〇. 01: 〇. 02:100,尿素水溶液噴灑后在粉粒中加入質(zhì)量為粉粒質(zhì)量 1.2%的添加物形成第一混合物,所述添加物為質(zhì)量比3:1:2的豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,第 一混合物壓實(shí)密封7天進(jìn)行氨化處理的溫度控制為33°C,第一混合物氨化處理后取出選擇 陰涼通風(fēng)處放置13h;
[0068] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaM〇04 · 2H20 3.8X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.9X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.41X10-2mol/L,NaCl 1.6X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.51 X 10-4mol/L,CoCl2 7.7X10-4mol/L,CaCl2 8.9X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.41 X 10-4mol/L,CuS〇4.7H2〇 3.5X10-5mol/L,AlK(S〇4)2.7H20 2.0X 10- 5mol/L,H3B〇3l · 5 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 6 X 10-3mol/L;
[0069] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.40X10-2mol/L,MgS〇4,7H20 2.01 X 10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 6.2X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為llOmg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 05 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0070] S6、接種黃孢原毛平革菌前S3中第一混合物在氨化處理后需與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合形 成第二混合物,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與第一混合物質(zhì)量比為1:10,基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于第一混合 物表面,然后將第二混合物進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為15%,發(fā) 酵時(shí)間12天,發(fā)酵溫度為33°C,發(fā)酵過(guò)程中每隔5天噴灑一次配方液,配方液中包括以下重 量份數(shù)的原料,木醋液1.5份、蘋果酸2.5份、蜂蜜10份以及純凈水100份,噴灑過(guò)程中不斷上 下翻動(dòng)接種了黃孢原毛平革菌的第二混合物使第二混合物濕度均勻,噴灑完成后第二混合 物濕度達(dá)到53 %。
[0071]〈實(shí)施例9>
[0072] 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,包括以下步驟:
[0073] S1、配置PDA培養(yǎng)基,由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆4000份、葡萄糖400份、 瓊脂300份、純凈水30000份,在110°C熬制成稀狀物,再加入KH2P04 60份、MgS〇4· 7H20 30 份、維生素 B1 0.008份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得PDA培養(yǎng)基;
[0074] S2、將黃孢原毛平革菌菌種劃線至TOA培養(yǎng)基上,在30 °C暗環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)7天,之 后在3 C冷減備用;
[0075] S3、將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%的尿素水溶液 噴灑在粉粒上并攪拌均勻,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為〇. 31:1,尿素水溶液噴灑前加入 檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素水溶液中,檸檬酸、蘋果酸、磷酸二氫銨與尿素水 溶液質(zhì)量比為0.01:0.01:0.02:100,尿素水溶液噴灑后在粉粒中加入質(zhì)量為粉粒質(zhì)量 1.5%的添加物形成第一混合物,所述添加物為質(zhì)量比3:1:2的豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,第 一混合物壓實(shí)密封8天進(jìn)行氨化處理的溫度控制為35 °C,第一混合物氨化處理后取出選擇 陰涼通風(fēng)處放置14h;
[0076] S4、配置微量元素混合液,微量元素混合液中各組分摩爾濃度如下NaM〇04 · 2H20 3.6X10-5mol/L,MgS〇4.7H20 1.8X10-2mol/L,MnS〇4.H20 1.35 X 10-2mol/L,NaCl 1.5X 10-2mol/L,F(xiàn)eS〇4*7H20 3.46X 10-4mol/L,CoCl2 7.62X 10-4mol/L,CaCl2 8.7X10-4mol/L, ZnS〇4.H20 3.35X 10-4mol/L,CuS〇4*7H2〇 3.2X10-5mol/L,AlK(S〇4)2*7H20 1.9X10-5, H3BO31 · 4 X 10-4mo 1 /L 以及氨基乙酸 7 · 5 X 10-3mo 1 /L;
[0077] S5、配置基礎(chǔ)培養(yǎng)液,首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾濃度如下 KH2P〇4 1.35X10-2mol/L,MgS〇4,7H20 1.96X 10-3mol/L以及CaCl2,7H2〇 5.9X10-4mol/L, 然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素 Bl,每升第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為100mg,再加入第 一培養(yǎng)液總質(zhì)量〇. 05 %的吐溫-80,最后加入S4中微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素 混合液體積比為9:1,混勻后即為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;
[0078] S6、接種黃孢原毛平革菌前S3中第一混合物在氨化處理后需與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合形 成第二混合物,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與第一混合物質(zhì)量比為1:10,基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于第一混合 物表面,然后將第二混合物進(jìn)行高壓滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,接種量為10%,發(fā) 酵時(shí)間20天,發(fā)酵溫度為35°C,發(fā)酵過(guò)程中每隔5天噴灑一次配方液,配方液中包括以下重 量份數(shù)的原料,木醋液2份、蘋果酸3份、蜂蜜12份以及純凈水100份,噴灑過(guò)程中不斷上下翻 動(dòng)接種了黃孢原毛平革菌的第二混合物使第二混合物濕度均勻,噴灑完成后第二混合物濕 度達(dá)到56 %。
[0079]〈對(duì)比試驗(yàn)〉
[0080] 將互花米草風(fēng)干至含水量低于18%后碎成的粉粒為對(duì)比例1,將互花米草風(fēng)干至 含水量低于18%后碎成粉粒,然后暗環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行常規(guī)發(fā)酵處理作為對(duì) 比例2,將實(shí)施例與對(duì)比例中互花米草木質(zhì)素降解后木質(zhì)素的含量進(jìn)行對(duì)比,得出如下數(shù) 據(jù):
[0081 ]表1各實(shí)施例對(duì)互花米草生物降解木質(zhì)素的影響 [0082]
[0083]從表1可看出,風(fēng)干后互花米草粉粒木質(zhì)素含量為36.8%,在經(jīng)過(guò)常規(guī)方法接種發(fā) 酵處理后木質(zhì)素含量下降到24.5%,按本發(fā)明對(duì)互花米草粉粒先進(jìn)行氨化處理再接種黃孢 原毛平革菌發(fā)酵,顯著降低互花米草木質(zhì)素含量,使木質(zhì)素含量低于17.2%,基礎(chǔ)培養(yǎng)液中 的維生素 B1和其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能促進(jìn)木質(zhì)素的生物降解,使木質(zhì)素含量降到12.1 %~ 15.0 %,檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨,豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,木醋液、蘋果酸和蜂蜜的 加入進(jìn)一步促進(jìn)生物降解,降低木質(zhì)素含量至10.5%~11.7%,同時(shí)提高了互花米草的飼 用效率。
[0084]盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上,但其并不僅僅限于說(shuō)明書和實(shí)施方式中所列 運(yùn)用,它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域,對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言,可容易地 實(shí)現(xiàn)另外的修改,因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下,本發(fā)明并不限 于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實(shí)施例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于:將互花米草風(fēng)干至含水量低于 18%后碎成粉粒,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%~24%的尿素水溶液噴灑在粉粒上并攪拌均勻,然后壓實(shí) 密封5~8天進(jìn)行氨化處理,尿素水溶液與粉粒的質(zhì)量比為0.26~0.31:1,氨化完成后在暗 環(huán)境下接種黃孢原毛平革菌進(jìn)行發(fā)酵處理,接種量為5%~15%,發(fā)酵時(shí)間5~20天。2. 如權(quán)利要求1所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,黃孢原毛平革菌在 接種前的培養(yǎng)具體為:將黃孢原毛平革菌菌種劃線至PDA培養(yǎng)基上,在25~30°C暗環(huán)境中進(jìn) 行培養(yǎng)5~7天,之后在3~4°C冷藏備用; 其中,所述PDA培養(yǎng)基由以下重量份數(shù)的原料制成:選取土豆4000~6000份、葡萄糖400 ~600份、瓊脂300~450份、純凈水30000份,在90~110°C熬制成稀狀物,再加入KH2P〇4 60~ 80份、MgS〇4· 7H20 30~45份、維生素 B1 0.008~0.012份,混勻后調(diào)節(jié)pH至6.0左右,即得 PDA培養(yǎng)基。3. 如權(quán)利要求1所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,尿素水溶液噴灑前 加入檸檬酸、蘋果酸和磷酸二氫銨溶解在尿素水溶液中,檸檬酸、蘋果酸、磷酸二氫銨與尿 素水溶液質(zhì)量比為〇 · 01: · 01: · 02:100。4. 如權(quán)利要求1所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,尿素水溶液噴灑后 在粉粒中加入質(zhì)量為粉粒質(zhì)量1~1.5%的添加物形成第一混合物,所述添加物為質(zhì)量比3: 1:2的豆渣、菜籽餅和脫脂奶液,第一混合物壓實(shí)密封5~8天進(jìn)行氨化處理的溫度控制為30 ~35°C,第一混合物氨化處理后取出選擇陰涼通風(fēng)處放置12~14h。5. 如權(quán)利要求4所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,接種黃孢原毛平革 菌前第一混合物在氨化處理后需與基礎(chǔ)培養(yǎng)液混合形成第二混合物,基礎(chǔ)培養(yǎng)液與第一混 合物質(zhì)量比為1:10,基礎(chǔ)培養(yǎng)液均勻噴灑于第一混合物表面,然后將第二混合物進(jìn)行高壓 滅菌,于暗環(huán)境下再進(jìn)行接種發(fā)酵,發(fā)酵溫度為30~35°C; 其中,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)液配置方法如下:首先配置第一培養(yǎng)液,第一培養(yǎng)液中各組分摩爾 濃度如下冊(cè)2?04 1.35\10-2~1.47\10-2111〇1/1,]\%504.7!120 1.96\10-3~2.03\10-3111〇1/ L以及CaCl2 · 7H20 5.9X 10-4~6.8\10-4111〇1/1,然后于第一培養(yǎng)液中加入維生素81,每升 第一培養(yǎng)液維生素 B1的加入量為100~120mg,再加入第一培養(yǎng)液總質(zhì)量0.05%~0.06%的 吐溫-80,最后加入微量元素混合液,第一培養(yǎng)液與微量元素混合液體積比為9:1,混勻后即 為基礎(chǔ)培養(yǎng)液。6. 如權(quán)利要求5所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,所述微量元素混合 液中各組分摩爾濃度如下似]?〇04.2!120 3.6\10-5~4.1\10-5111〇1/1,]\%504.7!1201.8\10 - 2~2X10-2mol/L,MnS〇4 · H20 1.35 X 10-2~1.47X10-2mol/L,NaCl 1.5X10-2~1.7X10- 2mol/L,F(xiàn)eS〇4 · 7H20 3.46X 10-4~3.59X10-4mol/L,CoCl2 7.62X 10-4~7.75X10-4mol/L, CaCl28.7X 10-4~9.0X 10-4mol/L,ZnS〇4 · H2O 3.35X 10-4~3.48X 10-4mol/L,CuS〇4 · 7H2O3 · 2 X 10-5~4 · 0 X 10-5mol/L,AlK(S〇4)2 · 7H2O 1 · 9 X 10-5~2 · 1 X 10-5mol/L,H3B〇3l · 4 X 10-4~1 · 6 X 10-4mol/L以及氨基乙酸7 · 5 X 10-3~7 · 8 X 10-3mol/L。7. 如權(quán)利要求5所述的互花米草木質(zhì)素生物降解方法,其特征在于,發(fā)酵過(guò)程中每隔5 天噴灑一次配方液,配方液中包括以下重量份數(shù)的原料:木醋液1~2份、蘋果酸2~3份、蜂 蜜8~12份以及純凈水100份,噴灑過(guò)程中不斷上下翻動(dòng)接種了黃孢原毛平革菌的第二混合 物使第二混合物濕度均勻,噴灑完成后第二混合物濕度達(dá)到50~56%。
【文檔編號(hào)】A23K10/30GK106036007SQ201610401814
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月8日
【發(fā)明人】莫竹承
【申請(qǐng)人】莫竹承
網(wǎng)友詢問(wèn)留言 已有0條留言
  • 還沒(méi)有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1