利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高豬生長(zhǎng)性能的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高豬生長(zhǎng)性能的方法。本發(fā)明所提供的提高豬生長(zhǎng)性能的方法，包括用含微生態(tài)制劑日糧飼喂豬；所述含微生態(tài)制劑日糧由豬普通日糧和動(dòng)物用微生態(tài)制劑組成，所述含微生態(tài)制劑日糧中所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑的質(zhì)量是所述豬普通日糧的0.75％，所述豬普通日糧不含有所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑；所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑，它的活性成分是用發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)復(fù)合菌劑得到的培養(yǎng)物；所述復(fù)合菌劑的活性成分由枯草芽胞桿菌和黑曲霉組成。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以促進(jìn)育肥豬的生長(zhǎng)性能，顯著提高豬的總增重和日增重，顯著降低料肉比，節(jié)約飼料成本，但對(duì)血常規(guī)等指標(biāo)沒有顯著性(P＞0.05)影響。
【專利說明】
利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高豬生長(zhǎng)性能的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[000? ]本發(fā)明涉及一種提尚豬生長(zhǎng)性能的方法，特別涉及利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提尚豬 生長(zhǎng)性能的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 微生態(tài)制劑(Probioties )，也叫活菌制劑(Bigone)或生菌劑，是指運(yùn)用微生態(tài)學(xué) 原理，利用對(duì)宿主有益無害的益生菌或益生菌的促生長(zhǎng)物質(zhì)，經(jīng)特殊工藝制成的制劑。
[0003] 微生態(tài)制劑是綠色、安全的添加劑，無藥物殘留、不引起環(huán)境危害，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量安 全和人類生存環(huán)境不會(huì)造成現(xiàn)實(shí)和潛在威脅，是安全飼料添加劑的發(fā)展方向之一。
[0004] 中藥藥渣是中藥材提取其有效成分后的殘留物，在中藥提取工業(yè)上一般作為廢棄 物處理。目前工業(yè)上對(duì)中藥藥渣的處理方法主要為堆放、填埋以及焚燒等，如果采用焚燒方 式處理，藥渣在焚燒過程中會(huì)產(chǎn)生大量的有毒有害氣體，污染大氣，而且濕物料也會(huì)給焚燒 帶來困難;如果采用堆放、填埋等方式處理，藥渣會(huì)發(fā)生腐敗，產(chǎn)生大量的刺激性氣味，嚴(yán)重 污染了周邊的環(huán)境。中藥材中有效成分含量較低，加上提取工藝落后，中成藥生產(chǎn)往往產(chǎn)生 大量的中藥藥渣，所以中藥藥渣具有體積大、產(chǎn)量多等特點(diǎn)。由于中藥藥渣具有體積大，產(chǎn) 量多的特點(diǎn)，所以中藥藥渣以堆放為主，對(duì)中藥藥渣進(jìn)行堆放處理，不僅浪費(fèi)了藥渣中殘留 的有效成分，造成了資源浪費(fèi)，同時(shí)對(duì)周邊的水土資源造成污染，對(duì)人們的生產(chǎn)生活帶來嚴(yán) 重的危害。
[0005] 根據(jù)《2010版中華人民共和國(guó)藥典第一部》對(duì)黃芪的規(guī)定可知，黃芪為豆科植物蒙 古黃苗（Astragalus membranaceus(Fisch · )Bge · var ·mongholicus(Bge · )Hsiao)或膜英黃 "^(Astragalus membranaceus(Fisch. )Bge)的干燥根。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明所要解決的一個(gè)技術(shù)問題是如何提高豬的生長(zhǎng)性能。
[0007] 為了解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明提供了提高豬生長(zhǎng)性能的方法。
[0008] 本發(fā)明所提供的提高豬生長(zhǎng)性能的方法，包括用含微生態(tài)制劑日糧飼喂豬;所述 含微生態(tài)制劑日糧由豬普通日糧和動(dòng)物用微生態(tài)制劑組成，所述含微生態(tài)制劑日糧中所述 動(dòng)物用微生態(tài)制劑的質(zhì)量是所述豬普通日糧的〇. 75%，所述豬普通日糧不含有所述動(dòng)物用 微生態(tài)制劑;所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑，它的活性成分是用發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)復(fù)合菌劑得到的 培養(yǎng)物;所述復(fù)合菌劑的活性成分由枯草芽胞桿菌和黑曲霉組成。
[0009]上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述復(fù)合菌劑中，所述枯草芽胞桿菌為枯草芽胞 桿菌ACCC 03291，所述黑曲霉為黑曲霉ACCC 30583。
[0010]上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述復(fù)合菌劑中，所述枯草芽胞桿菌和所述黑曲 霉的菌落形成單位數(shù)目比為(1-3): 1，如1: 3。
[0011]上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述微生態(tài)制劑的菌體含量為5 X 108-8 X 109cfu/
[0012] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基含有黃芪藥渣。
[0013] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基按照如下方法制備:將含水量為 50 %-60 %的物料進(jìn)行滅菌得到所述發(fā)酵培養(yǎng)基;所述物料由下述質(zhì)量份的原料組成：10質(zhì) 量份的黃芪藥渣、〇 . 03-0.12質(zhì)量份的氮源、1.2質(zhì)量份的KH2P〇4和0.6質(zhì)量份的MgS〇4 · 7H20〇
[0014] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述氮源為尿素、KN〇3、（NH4)2S〇4、酵母粉、牛肉膏 或/和蛋白胨；
[0015] 和/或，
[0016]所述培養(yǎng)是在28 °C培養(yǎng)5-8天或5天。
[0017]上述提尚豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述提尚豬生長(zhǎng)性能可為提尚豬日增重和/或降 低豬料肉比。
[0018] 上述方法中，用含微生態(tài)制劑日糧飼喂豬可為在育肥期(豬的生長(zhǎng)肥育階段）用所 述含微生態(tài)制劑日糧飼喂豬，具體可為從體重30千克至出欄的任何時(shí)期，如從體重33千克 至50千克的時(shí)期等
[0019] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述含微生態(tài)制劑日糧可由豬普通飼料和所述動(dòng) 物用微生態(tài)制劑組成，所述含微生態(tài)制劑日糧中所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑的質(zhì)量是所述豬普 通飼料的0.75%，所述豬普通飼料不含有所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑。
[0020] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法中，所述豬普通飼料除不含有所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑 外，其它原料均可與豬常規(guī)飼料相同，如含有能量飼料、蛋白質(zhì)飼料、礦物質(zhì)飼料和維生素 飼料;進(jìn)一步，所述豬普通飼料還可含有抗氧化劑。所述豬普通飼料可由能量飼料、蛋白質(zhì) 飼料、礦物質(zhì)飼料和維生素飼料組成，也可由能量飼料、蛋白質(zhì)飼料、礦物質(zhì)飼料、維生素飼 料和抗氧化劑組成，當(dāng)然，還可以在所述豬普通飼料中再加入防腐劑、著色劑、調(diào)味劑、藥物 保健劑、生長(zhǎng)促進(jìn)劑等非營(yíng)養(yǎng)性添加劑。
[0021] 所述能量飼料可為常用的豬能量飼料，如可選自下述物質(zhì)中的至少一種:谷實(shí)、糠 麩、薯、草籽和樹實(shí)等。
[0022] 所述蛋白質(zhì)飼料可為常用的豬蛋白質(zhì)飼料，如可選自下述物質(zhì)中的至少一種：大 豆柏、棉籽柏、玉米胚芽柏、肉骨粉、菜籽柏、花生柏和葵柏等。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所 述蛋白質(zhì)飼料為大豆柏、棉籽柏、玉米胚芽柏和肉骨粉。
[0023] 所述礦物質(zhì)飼料可選自石粉、碳酸氫鈣、食鹽、貝殼粉、骨粉、磷酸氫鈣、碳酸鈣、食 鹽、硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、碘化鉀、氧化鋅、亞硒酸鈉和氯化鈷等。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施 例中，所述礦物質(zhì)飼料為石粉、碳酸氫鈣和食鹽。
[0024] 所述維生素飼料可為常用的維生素飼料，如可選自下述物質(zhì)中的至少一種:維生 素 A，維生素 D3，維生素 E，維生素 K3，維生素 Big，維生素 B2，維生素 B6，維生素 B12，煙酸，D-泛 酸鈣，生物素，氯化膽堿所述抗氧化劑可為維生素 Ε(α_生育酚)或丁基羥基茴香醚(BHA)。
[0025] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法或所述方法中的動(dòng)物用微生態(tài)制劑或所述方法中的 所述復(fù)合菌劑在提高豬生長(zhǎng)性能中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0026] 上述提高豬生長(zhǎng)性能的方法或所述方法中的動(dòng)物用微生態(tài)制劑或所述方法中的 所述復(fù)合菌劑在提高豬日增重和降低豬料肉比中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0027]實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以促進(jìn)育肥豬的生長(zhǎng)性能，顯著提高豬 的總增重和日增重，顯著降低料肉比，節(jié)約飼料成本，但對(duì)血常規(guī)等指標(biāo)沒有顯著性(P> 0.05)影響。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述，給出的實(shí)施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為 常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0029] 下述實(shí)施例中的黑曲霉(Aspergillus niger)ACCC 30583于2006年7月21日收藏 于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)農(nóng)業(yè)微生物中心(簡(jiǎn)稱ACCC，地址:北京市海淀區(qū)中關(guān)村 南大街12號(hào)，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所，郵編100081)，自該收藏日起公 眾可從中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)農(nóng)業(yè)微生物中心獲得該菌株。黑曲霉(Aspergillus niger)ACCC 30583在下文中簡(jiǎn)稱黑曲霉ACCC 30583。
[0030] 下述實(shí)施例中的枯草芽胞桿菌(枯草芽孢桿菌）（Bacillus subtilis)ACCC 03291 于2007年6月9日收藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)農(nóng)業(yè)微生物中心（簡(jiǎn)稱ACCC，地址： 北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號(hào)，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所，郵編 100081)，自該收藏日起公眾可從中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)農(nóng)業(yè)微生物中心獲得該 菌株?？莶菅堪麠U菌(枯草芽孢桿菌）（Bacillus subtilis)ACCC 03291在下文中簡(jiǎn)稱枯草 芽胞桿菌ACCC 03291。
[0031] PDA:馬鈴薯去皮，200g切成小塊，加水煮沸30min，4層紗布過濾，加20g葡萄糖，瓊 脂17g，蒸餾水定容到1000mL，煮沸混勻，121°C條件下滅菌20分鐘，得到PDA培養(yǎng)基。
[0032] PD:馬鈴薯去皮，200g切成小塊，加水煮沸30min，4層紗布過濾，加20g葡萄糖，蒸餾 水定容到l〇〇〇mL，煮沸混勻，121°C條件下滅菌20分鐘，得到培養(yǎng)基。
[0033] LB液體培養(yǎng)基:蛋白胨5g、牛肉膏5g、KH2P〇4 4g、MgS〇4 · 7H20 0.5g、水 1000mL。
[0034] LB固體培養(yǎng)基：蛋白胨5g、牛肉膏5g、KH2P〇4 4g、MgS〇4 · 7H20 0.5g、瓊脂17g，蒸餾 水定容到l〇〇〇mL。
[0035] 黃芪渣固體發(fā)酵培養(yǎng)基:粒徑(直徑)為2mm至4mm的黃芪藥渣10.0 g (以干重計(jì)），尿 素0.038，1〇12?04 1.28，]\^304.7!120 0.68，調(diào)整這些物料的含水量為60%、？!1值為7.0，121 °C條件下滅菌20分鐘，得到黃芪渣固體發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0036] 本實(shí)施例所用的黃芪藥渣均按照如下方法制備：
[0037] 將100g黃芪飲片(合肥樂家老鋪中藥飲片有限公司，產(chǎn)地四川，批號(hào)13060501)置 于燒杯中，加冷純水浸泡lh(加水量以剛好泡透藥材為準(zhǔn)）；煎煮時(shí)再加藥物總量的10倍冷 純水(約1000mL)。先武火煮沸，沸騰后改用文火保持微沸60min，濾取藥液。藥渣再加50°C左 右溫水進(jìn)行第二次煎煮，方法同前，濾取藥液，留取藥渣，得到黃芪藥渣。將黃芪藥渣晾干， 粉碎得到粒徑(直徑)為2mm至4mm的黃芪藥渣。
[0038] 實(shí)施例1、動(dòng)物用微生態(tài)制劑的制備
[0039] 1、動(dòng)物用復(fù)合菌劑的制備
[0040] 從PDA培養(yǎng)基上挑取適量黑曲霉ACCC 30583孢子，用無菌水稀釋成IX 108CFU/mL 的懸濁液，按1 %接種量接種PD培養(yǎng)基進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，160rpm，28°C培養(yǎng)5天，得到黑曲霉 ACCC 30583含量為1013CFU/mL的黑曲霉ACCC 30583發(fā)酵液。
[0041 ] 從LB培養(yǎng)基上挑取枯草芽胞桿菌ACCC 03291菌落，用無菌水稀釋成lX108CFU/mL 的懸濁液，按1 %接種量接種LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，160rpm，37 °C培養(yǎng)3天，得到枯草 芽胞桿菌ACCC 03291含量為1012CFU/mL的枯草芽胞桿菌ACCC 03291發(fā)酵液。
[0042] 將黑曲霉ACCC 30583發(fā)酵液和枯草芽胞桿菌ACCC 03291發(fā)酵液混合得到動(dòng)物用 復(fù)合菌劑。該動(dòng)物用復(fù)合菌劑中，黑曲霉ACCC 30583和枯草芽胞桿菌ACCC 03291的菌落形 成單位數(shù)目比為3:1。
[0043] 2、利用動(dòng)物用復(fù)合菌劑發(fā)酵黃芪藥渣制備動(dòng)物用微生態(tài)制劑
[0044] 動(dòng)物用微生態(tài)制劑是采用黃芪渣固體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)步驟1的動(dòng)物用復(fù)合菌劑得 至_培養(yǎng)物。具體制備方法如下:將步驟1的動(dòng)物用復(fù)合菌劑按照1% (體積比）的接種量(接 入的動(dòng)物用復(fù)合菌劑的體積與黃芪渣固體發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比）接入裝有50g黃芪渣固體 發(fā)酵培養(yǎng)基的500ml錐形瓶中28°C培養(yǎng)5天，收集培養(yǎng)容器內(nèi)的所有物質(zhì)，得到動(dòng)物用微生 態(tài)制劑。每次重復(fù)設(shè)10個(gè)錐形瓶。該動(dòng)物用微生態(tài)制劑中的總菌體(黑曲霉ACCC 30583菌體 和枯草芽胞桿菌ACCC 03291菌體)含量為109cfu/g。
[0045] 實(shí)施例2、利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高豬的生長(zhǎng)性能
[0046] 1、豬日糧
[0047] 本實(shí)施例提供了四種豬的育肥期日糧，分別是基礎(chǔ)日糧(表1)、1 %黃芪藥渣日糧、 0.75%動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧和1 %動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧。1 %黃芪藥渣日糧是在基礎(chǔ)日 糧中添加是基礎(chǔ)日糧質(zhì)量的1 %的黃芪藥渣得到的日糧，〇. 75 %動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧是 在基礎(chǔ)日糧中添加是基礎(chǔ)日糧質(zhì)量的〇. 75%的實(shí)施例1的動(dòng)物用微生態(tài)制劑得到的日糧， 1 %動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧是在基礎(chǔ)日糧中添加是基礎(chǔ)日糧質(zhì)量的1 %的實(shí)施例1的動(dòng)物用 微生態(tài)制劑得到的日糧。
[0048] 表1、豬基礎(chǔ)日糧的原料組成及其營(yíng)養(yǎng)水平
[0049]
[0050] 11.58克預(yù)混料為每千克日糧提供:維生素4 400011]，維生素03 125011]，維生素82 lmg，維生素 E 50IU，維生素 K3 2.5mg，泛酸17.5mg，葉酸0.75mg，生物素40yg。
[0051 ] 2、利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提尚豬的生長(zhǎng)性能
[0052] 2.1、飼喂方法
[0053] 用相同的不含本申請(qǐng)動(dòng)物用微生態(tài)制劑的飼料在相同的飼養(yǎng)條件下飼養(yǎng)至體重 為35kg ± 2kg的24頭杜長(zhǎng)大三元雜交育肥豬，隨機(jī)分為4個(gè)處理組：CK組（空白組）（基礎(chǔ)日 糧）、試驗(yàn)I組(基礎(chǔ)日糧+1 %黃芪藥渣）、試驗(yàn)Π 組(基礎(chǔ)日糧+0.75%動(dòng)物用微生態(tài)制劑)和 試驗(yàn)m組(基礎(chǔ)日糧+1%動(dòng)物用微生態(tài)制劑），每組6只，試驗(yàn)時(shí)間為30天。其中，CK組用上述 基礎(chǔ)日糧進(jìn)行飼喂，試驗(yàn)I組用上述1%黃芪藥渣日糧進(jìn)行飼喂，試驗(yàn)Π 組用上述0.75%動(dòng) 物用微生態(tài)制劑日糧飼喂，試驗(yàn)m組用上述1 %動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧飼喂。
[0054] 將所有仔豬置于同一豬舍不同豬欄進(jìn)行統(tǒng)一飼養(yǎng)，由專門人員進(jìn)行飼養(yǎng)管理，保 證飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致。試驗(yàn)期間，仔豬自由采食，每天清晨清理料槽一次，稱好剩料，并做好 投料工作，投料量均以稍有余料為準(zhǔn)。按照豬場(chǎng)常規(guī)制度做好日常管理工作，保證仔豬自由 飲水，并定期對(duì)料槽和豬舍進(jìn)行清洗消毒，豬舍溫度控制在18-20°C，濕度控制50 % - 75 %。 上述四個(gè)處理組試驗(yàn)期間除飼喂的日糧不同外，其它飼養(yǎng)條件完全相同。
[0055] 2.2樣品米集
[0056]于試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早上8: 00對(duì)所有試驗(yàn)仔豬進(jìn)行空腹采前腔靜脈血，采血量為 10mL，采血后及時(shí)將血液置于試管中冷凝，并于3000r/min離心15min，取血清，并將血清均 勻分為3份，然后置于_20°C的冰箱中保存、待測(cè)。
[0057] 2.3生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定
[0058]仔豬生長(zhǎng)性能測(cè)定指標(biāo)主要包括采食量、日增重、料重比。
[0059] 日采食量：日均采食量=仔豬試驗(yàn)期間采食量/試驗(yàn)天數(shù)*試驗(yàn)仔豬頭數(shù)
[0060] 日均增重=(仔豬試驗(yàn)?zāi)┲匾蛔胸i試驗(yàn)初重)/試驗(yàn)天數(shù) [0061 ]料肉比=日均采食量/日均增重
[0062] 所有數(shù)據(jù)采用SpSS 13.0軟件進(jìn)行處理，用One-Way AN0VA進(jìn)行方差分析，差異顯 著性用Duncan's法進(jìn)行多重比較。
[0063] 2.4結(jié)果與分析
[0064] 2.4.1對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響
[0065]表2、飼喂30天對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響
[0066]
[0067] ~注：同列相比，具有相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不具有相同字母表示差異_ 顯著(P〈0.05)。
[0068] 由表2可知，在總增重和日增重方面，試驗(yàn)組Π 組與其他組都有顯著性差異（P< 0.05);在料肉比方面，試驗(yàn)組Π 組顯著（P<0.05)小于空白組（CK組）和試驗(yàn)m組（發(fā)酵 1%)。結(jié)果表明，本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以促進(jìn)育肥豬的生長(zhǎng)性能，顯著提高豬的總 增重和日增重，顯著降低料肉比，節(jié)約飼料成本。
[0069] 2.4.2對(duì)育肥豬血常規(guī)的影響
[0070] 表3-4分別表示飼喂第10天和第30天對(duì)育肥豬血常規(guī)的影響。表明在第10天本發(fā) 明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑會(huì)對(duì)育肥豬部分血常規(guī)指標(biāo)造成影響，但是隨著飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)， 試驗(yàn)組Π 組與空白組(CK組)相比沒有顯著性影響。
[0071] 表3飼喂第10天對(duì)育肥豬血常規(guī)的影響
[0072]
[0073] ~注：同列相比，具有相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不具有相同字母表示差異_ 顯著(P〈0.05)。
[0074] 表4飼喂第30天對(duì)育肥豬血常規(guī)的影響
[0075] _
[0076] 注：同列相比，具有相同字母或不具有字母表示差異不顯著(P>0.05)，不具有相同 字母表示差異顯著(P〈〇.05)。
[0077] 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以促進(jìn)育肥豬的生長(zhǎng)性能，顯 著提高豬的總增重和日增重，顯著降低料肉比，節(jié)約飼料成本，但對(duì)血常規(guī)等指標(biāo)沒有顯著 性(P>0.05)影響。
[0078] 實(shí)施例3、利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高雞的生長(zhǎng)性能和免疫性能
[0079] 1、雞日糧
[0080] 本實(shí)施例提供了四種雛雞日糧，分別是育雛期基礎(chǔ)日糧、育成期基礎(chǔ)日糧、4 %黃 芪藥渣日糧和4%動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧。育雛期基礎(chǔ)日糧和育成期基礎(chǔ)日糧的組成如表5 所示。4%黃芪藥渣日糧是在育成期基礎(chǔ)日糧中添加是育成期基礎(chǔ)日糧質(zhì)量的4%的黃芪藥 渣得到的日糧，4%動(dòng)物用微生態(tài)制劑日糧是在育成期基礎(chǔ)日糧中添加是育成期基礎(chǔ)日糧 質(zhì)量的4%的實(shí)施例1的動(dòng)物用微生態(tài)制劑得到的日糧。
[0081 ]表5、雞基礎(chǔ)日糧的原料組成及其營(yíng)養(yǎng)水平
[0082]
[0083]
[0084] 注：1.5克預(yù)混料為每千克基礎(chǔ)日糧提供Cu 10mg、Fe 75mg、Zn 50mg、Mn 110mg、Se 0.2mg、I 0.4mg、維生素 A 8330IU、維生素 D 1440IU、維生素 E 30IU、維生素2.0mg、維生 素 B2 8mg、維生素 B6 1.2mg、維生素 Bi2 0.03mg、葉酸2.0mg、生物素0.2mg、煙酸40mg、泛酸 20mg〇
[0085] 2、利用動(dòng)物用微生態(tài)制劑提高雛雞的生長(zhǎng)性能、免疫性能和抗氧化性能
[0086] 2.1、飼喂方法
[0087] 1日齡青腳麻雞。
[0088] 試驗(yàn)雞采取籠養(yǎng)，欄舍、用具進(jìn)行嚴(yán)格消毒。1日齡青腳麻雞飲服5 %葡萄糖水，2日 齡開食;前7天飲用涼開水。
[0089] 取1日齡青腳麻雞用相同的不含本申請(qǐng)動(dòng)物用微生態(tài)制劑的飼料在相同的飼養(yǎng)條 件下飼養(yǎng)至25日齡。其中第1-21日齡用上述育雛期基礎(chǔ)日糧飼喂，第22-25日齡用上述育成 期基礎(chǔ)日糧飼喂。取在上述相同的飼養(yǎng)條件下飼養(yǎng)至25日齡青腳麻雞，隨機(jī)均分為3個(gè)處理 組，即對(duì)照組(基礎(chǔ)日糧）、試驗(yàn)I組(基礎(chǔ)日糧+4 %黃芪藥渣）、試驗(yàn)Π 組(基礎(chǔ)日糧+4 %動(dòng)物 用微生態(tài)制劑）。每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只雞。試驗(yàn)時(shí)間為35天。將喂藥前1天的日 齡記為喂藥日齡0天，喂藥當(dāng)天的日齡記為喂藥日齡1天，依次類推，喂藥第35天的日齡記為 喂藥日齡35天。試驗(yàn)期間所有雛雞自由采食和飲水，按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，上述3個(gè) 處理組除飼喂的日糧不同外，其它飼養(yǎng)條件完全相同。其中，上述3個(gè)處理組在第7,14,21， 28和43日齡均按表6進(jìn)行免疫接種。平時(shí)保持欄舍清潔衛(wèi)生和安靜，及時(shí)清理糞便。試驗(yàn)全 程自由采食和飲水。
[0090] 表6、雞免疫程序
[0091]
[0092] 2.2樣品采集方法
[0093] 在喂藥日齡0天至35天每天分別于上午7:00-9:00對(duì)試驗(yàn)雞進(jìn)行空腹稱重，并稱重 剩余的料量，記錄階段飼料消耗量，計(jì)算日采食量、平均日增重和料重比。每組抽取健康雞5 只采集5mL不抗凝血，分離血清，用于新城疫特異性抗體檢測(cè)、抗氧化能力指標(biāo)(總超氧化物 歧化酶(T-S0D))以及總蛋白、白蛋白的測(cè)定。采血后剖殺，取脾臟、法氏囊和胸腺，用濾紙吸 干表面水分后，精密天平稱重，根據(jù)與體重之比計(jì)算免疫器官指數(shù)。
[0094] 2.3檢測(cè)指標(biāo)
[0095] 2.3.1生長(zhǎng)性能
[0096]計(jì)算公式：
[0097] 平均日采食量=(配料總量一剩料量)/試驗(yàn)天數(shù)*每組雞數(shù)
[0098] 平均日增重=(試驗(yàn)?zāi)┢骄w重一試驗(yàn)初平均體重)/試驗(yàn)天數(shù) [0099]料肉比=平均日采食量/平均日增重
[0100]免疫器官指數(shù)=免疫器官鮮重/體重，計(jì)算胸腺、脾臟、法氏囊各自指數(shù)。
[0101 ] 2.3.2生化指標(biāo)的檢測(cè)：白蛋白和總蛋白含量測(cè)定
[0102] 總蛋白（Tp):雙縮脲法。酶標(biāo)儀檢測(cè)。
[0103] 白蛋白（ALB):溴甲酚綠法；
[0104] 2.3.3特性免疫功能檢測(cè)新城疫抗體滴度的測(cè)定。
[0105] 2· 3·4超氧化物歧化酶(S0D):羥胺法；
[0106] 2.3.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
[0107] 所有數(shù)據(jù)采用SpSS 13.0軟件進(jìn)行處理，用One-Way AN0VA進(jìn)行方差分析，差異顯 著性用Duncan's法進(jìn)行多重比較。
[0108] 表7、各組雞生長(zhǎng)性能的變化
[0109]
[0110] 注：同一行比較，具有相同的字母或不標(biāo)字母者表示差異不顯著(P>0.05)，不具有 相同字母者表示差異顯著(P〈〇.05)。
[0111] 結(jié)果表明各組平均日增重在喂藥第0-20d時(shí)，各組之間無顯著性差異。喂藥第21-35d時(shí)，試驗(yàn)組Π 平均日增重水平顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)組I，差異顯著，對(duì)照組與試驗(yàn)組I 相比差異不顯著(表7)。各組之間日采食量在喂藥第0-35d均無顯著差異(表7)。各試驗(yàn)組料 肉比在喂藥第0-30d與對(duì)照組相比差異不顯著，喂藥第31-35d時(shí)，試驗(yàn)組Π 的料肉比顯著低 于對(duì)照組和試驗(yàn)組I，差異顯著，試驗(yàn)組I的料肉比與對(duì)照組相比差異不顯著。說明本發(fā)明的 動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以顯著提高雞的日增重和料肉比。
[0112] 表8、各組雞臟器系數(shù)的變化(g/kg)
[0113]
[0114] 注：同一行比較，具有相同的字母或不標(biāo)字母者表示差異不顯著(p>0.05)，不具有 相同字母者表示差異顯著(P〈〇.05)。
[0115] 喂藥第20d時(shí)，各組之間胸腺指數(shù)相比差異不顯著；喂藥第28d時(shí)，試驗(yàn)組Π 高于對(duì) 照組和試驗(yàn)I組，與對(duì)照組相比差異顯著，與試驗(yàn)I組相比差異不顯著；喂藥第33d時(shí)，試驗(yàn)組 Π 高于對(duì)照組和試驗(yàn)I組，且差異顯著。各處理組對(duì)于脾臟指數(shù)的影響，喂藥第20d時(shí)，各組 之間無顯著差異；喂藥第28d時(shí)，試驗(yàn)組Π 高于對(duì)照組和試驗(yàn)I組，與對(duì)照組相比差異顯著， 與試驗(yàn)I組相比差異不顯著；喂藥第33d時(shí)，試驗(yàn)組Π 高于對(duì)照組和試驗(yàn)組I，且差異顯著。法 氏囊指數(shù)在喂藥第20d和28d時(shí)，各處理組與對(duì)照組相比差異不顯著；喂藥第33d時(shí)，試驗(yàn)組 Ι、Π 高于對(duì)照組，且差異顯著，試驗(yàn)組Π 比試驗(yàn)組I略高，但無顯著差異(表8)。本發(fā)明的動(dòng) 物用微生態(tài)制劑對(duì)雞的脾臟、胸腺和法氏囊的發(fā)育均具有顯著的促進(jìn)作用。
[0116] 表9、各組雞的新城疫抗體滴度
[0117]
[0118] 注：同一行比較，具有相同的字母或不標(biāo)字母者表示差異不顯著(ρ>0.05)，不具有 相同字母者表示差異顯著(Ρ〈〇.05)。
[0119] 在喂藥第20d和23d，各組之間相比，新城疫抗體滴度無顯著差異，給藥28d時(shí)，試驗(yàn) 組Π 新城疫抗體滴度顯著高于對(duì)照組，略高于試驗(yàn)I組。在33d時(shí)，試驗(yàn)組Π 的新城疫抗體滴 度高于對(duì)照組和試驗(yàn)I組且差異顯著(表9)。本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可顯著提高雞血清 中新城疫抗體含量。
[0120] 表10、各組雞的總蛋白含量
[0121]
[0122] 注：同一行比較，具有相同的字母者表示差異不顯著(ρ>0.05)，不具有相同字母者 表不差異顯著(Ρ〈〇 · 05)。
[0123] 在喂藥第20d和23d，各組總蛋白之間相比，無顯著差異，給藥28d時(shí)，對(duì)照組顯著低 于各試驗(yàn)組，但試驗(yàn)I和Π 組之間無顯著差異。在33d時(shí)，試驗(yàn)組Π 總蛋白含量高于對(duì)照組且 差異顯著(表10)。本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可顯著提高雞血清中總蛋白含量。
[0124] 表11、各組雞的白蛋白的含量
[0125]
[0126] 注：同一行比較，具有相同的字母表示差異不顯著(p>0.05)，不具有相同字母者表 示差異顯著(P〈〇.〇5)。
[0127] 在喂藥第20d和23d時(shí)，各組白蛋白含量之間相比，對(duì)照組低于試驗(yàn)各組，但差異不 顯著;在喂藥第28d和第33d時(shí)，試驗(yàn)組Π 白蛋白含量高于對(duì)照組且差異顯著。本發(fā)明的動(dòng)物 用微生態(tài)制劑可顯著提高雞血清中白蛋白含量(表11)。
[0128] 表12、各組雞血清的總超氧化物歧化酶(T-S0D)的含量
[0129]
[0130] 注：同一行比較，具有相同的字母者表示差異不顯著(p>0.05)，不具有相同字母者 表不差異顯著(P〈〇 · 05)。
[0131] 在喂藥第20d、23d和28d時(shí)，各組T-S0D含量之間無顯著差異;在第33d時(shí)，試驗(yàn)組Π 的T-S0D含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)組1(表12)。說明本發(fā)明的動(dòng)物用微生態(tài)制劑可以顯著 提高雞血清的總超氧化物歧化酶(T-S0D)的含量，可以顯著提高雞的抗氧化酶含量，可以顯 著提高雞的抗氧化性能。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 提尚豬生長(zhǎng)性能的方法，包括用含微生態(tài)制劑日糧伺喂豬;所述含微生態(tài)制劑日糧 由豬普通日糧和動(dòng)物用微生態(tài)制劑組成，所述含微生態(tài)制劑日糧中所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑 的質(zhì)量是所述豬普通日糧的0.75%，所述豬普通日糧不含有所述動(dòng)物用微生態(tài)制劑;所述 動(dòng)物用微生態(tài)制劑，它的活性成分是用發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)復(fù)合菌劑得到的培養(yǎng)物;所述復(fù)合 菌劑的活性成分由枯草芽胞桿菌和黑曲霉組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述復(fù)合菌劑中，所述枯草芽胞桿菌為枯 草芽胞桿菌ACCC 03291，所述黑曲霉為黑曲霉ACCC 30583。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述復(fù)合菌劑中，所述枯草芽胞桿菌和 所述黑曲霉的菌落形成單位數(shù)目比為(1-3) :1。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述微生態(tài)制劑的菌體含量為5 X 108-8 X109cfu/g〇5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基含有黃芪藥渣。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基按照如下方法制備：將含 水量為50 %-60 %的物料進(jìn)行滅菌得到所述發(fā)酵培養(yǎng)基;所述物料由下述質(zhì)量份的原料組 成：10質(zhì)量份的黃芪藥渣、〇 . 03-0.12質(zhì)量份的氮源、1.2質(zhì)量份的KH2P〇4和0.6質(zhì)量份的 MgS04 · 7H20〇7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于:所述氮源為尿素、KN〇3、（NH4)2S〇4、酵母粉、 牛肉膏或/和蛋白胨； 和/或， 所述培養(yǎng)是在28 °C培養(yǎng)5-8天或5天。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于:所述提高豬生長(zhǎng)性能為提高豬日 增重和/或降低豬料肉比。9. 權(quán)利要求1-8中任一所述的方法或所述方法中的所述復(fù)合菌劑在提高豬生長(zhǎng)性能中 的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求1-8中任一所述的方法或所述方法中的所述復(fù)合菌劑在提高豬日增重和 降低豬料肉比中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A23K50/30GK105995082SQ201610364147
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月23日
【發(fā)明人】韓春楊, 顧金剛, 龔明波, 劉峰, 陳華, 李世貴, 劉翠艷, 張瑞穎
【申請(qǐng)人】安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)