一種含有花青素的復合物的制備方法【專利摘要】本發(fā)明提供了一種含有花青素的復合物的制備方法，所述方法包括如下步驟：1)提供第一緩沖溶液、第二緩沖溶液、含有花青素的溶液、含有金屬離子的溶液、含有類黃酮的溶液；2)將第一緩沖溶液與含有花青素的溶液及含有金屬離子的溶液混合，得到花青素?金屬離子混合溶液；3)將步驟2)得到的花青素?金屬離子混合溶液與第二緩沖溶液及含有類黃酮的溶液混合得到所述的含有花青素的復合物。按照本發(fā)明所提供的制備方法制得的含有花青素的復合物可以提高花青素的抗氧化性?！緦＠f明】一種含有花青素的復合物的制備方法
技術領域：
[0001]本發(fā)明涉及食品、藥品制備領域，具體涉及一種含有花青素的復合物的制備方法。【
背景技術：
】[0002]花青素因其在食品工業(yè)中廣泛的應用前景而備受關注，它是具有著色性的天然物質，成為代替人工著色劑的首選，還具有抗氧化性及抗癌變等生物活性，可作為功能食品開發(fā)應用。[0003]花青素因其酚羥基和共輒芳香結構可以失去氫原子或轉移電子給自由基，因此具有良好的自由基清除能力；同時，花青素的鄰苯二酚和沒食子酸結構通過螯合Fe2+Xu1+或Cu2+等金屬離子使其自氧化，減少由金屬離子引發(fā)的氧自由基的形成，達到抗氧化的目的。大量研究表明花青素具有良好的抗氧化活性。Li等采用DPPH法、ORAC法及FRAP法研究了幾種蔬菜中植物提取物的抗氧化能力，并發(fā)現植物提取物的DPPH自由基清除能力及Fe3+還原能力與總花青素含量正相關。（LiH.,DengZ.，ZhuH.，etal.Highlypigmentedvegetables:Anthocyanincompositionsandtheirroleinantioxidantactivities[J].FoodResearchInternational,2012,46(I):250-259.)[0004]共色現象是由花青素與其他小分子有機物發(fā)生分子間作用引起的，通過范德華力與小分子物質的極性核相作用，可以使花青素的理化性質發(fā)生一定改變，如穩(wěn)定性、呈色性等。(BrouillardR.Theinvivoexpressionofanthocyanincolorinplants[J].Phytochemistry,1983,22:1311-1323；MoonJ.H.,PanC.,Yoonff.B.Dryingcharacteristicsandthermaldegradationkineticsofhardness,anthocyanincontentandcolourinpurpleandredfleshedpotato(SolanumtuberosumL.)duringhotairdrying[J].InternationalJournalofFoodScience&Technology,2015,50(5):1255-1267.)[0005]本發(fā)明利用共色效應，構建了一種共色體的含有花青素的復合物，具有良好的抗氧化性?！?br/>發(fā)明內容】[0006]有鑒于現有技術的上述缺陷，本發(fā)明提供了一種新的含有花青素的復合物的制備方法，要解決的技術問題是提高花青素的抗氧化性。[0007]為解決上述問題，本發(fā)明采取的技術方案是:一種含有花青素的復合物的制備方法，所述方法包括如下步驟：[0008]1)提供第一緩沖溶液、第二緩沖溶液、含有花青素的溶液、含有金屬離子的溶液、含有類黃酮的溶液；[0009]2)將第一緩沖溶液與含有花青素的溶液及含有金屬離子的溶液混合，得到花青素-金屬離子混合溶液；[0010]3)將步驟2)得到的花青素-金屬離子混合溶液與第二緩沖溶液及含有類黃酮的溶液混合得到所述的含有花青素的復合物。[0011]優(yōu)選地，所述第一緩沖溶液的pH值為6·5~7·5。[0012]優(yōu)選地，所述第一緩沖溶液為磷酸緩沖溶液。[0013]優(yōu)選地，所述金屬離子為Mg2+、Zn2+及Cu2+中的一種或多種的混合。[0014]優(yōu)選地，在所述步驟2)所得到的花青素-金屬離子混合溶液中，花青素濃度為4-5mmol/L，所有金屬離子的總的濃度為2-3mmol/L。[0015]優(yōu)選地，所述第二緩沖溶液的PH值為4.5~5.5。[0016]優(yōu)選地，所述第二緩沖溶液為醋酸緩沖溶液。[0017]優(yōu)選地，所述的含有類黃酮的溶液為蘆丁溶液。[0018]優(yōu)選地，在所述步驟3)所得到的含有花青素的復合物中，花青素的濃度為0.4_0.5mmol/L，類黃酮的濃度為0.4_0.5mmol/L，金屬離子濃度為0.2_0.3mmol/L。[0019]本發(fā)明還提供了本發(fā)明所提供的制備方法所制得的含有花青素的復合物。[0020]本發(fā)明的有益效果為：（1)本發(fā)明利用共色效應，構建了花青素-類黃酮-金屬離子復合物，改善了花青素的性質。（2)本發(fā)明目的是提供一種花青素共色體復合物的構建方法，經該方法構建的共色體復合物具有良好的抗氧化功效。（3)經本發(fā)明方法構建的花青素共色體復合物，增強了原有花青素的呈色性。[0021]以下將結合附圖對本發(fā)明的構思、具體結構及產生的技術效果作進一步說明，以充分地了解本發(fā)明的目的、特征和效果。【附圖說明】[0022]圖1是本發(fā)明實施例1-2和對比例1-5的抗氧化活性對比試驗結果示意圖。【具體實施方式】[0023]實施例1制備含有花青素的復合物[0024]用0.2mol/L磷酸緩溶液(pH=7)分別混合20mmol/L花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷<^73]1丨(1；[11-3-(1丨8111008丨(16-5-8111008丨(16)溶液、201]11]1〇1/1醋酸鎂溶液，使花青素濃度為5mmol/L，醋酸鎂濃度為2mmol/L。在0.2mol/L醋酸緩沖體系(pH=5)中，混合上述花青素-Mg2+及蘆丁溶液，使花青素和蘆丁的濃度為0.5mm〇l/L，Mg2+濃度為0.2mmol/L，樣品靜置30min〇[0025]實施例2制備含有花青素的復合物[0026]用0.2mol/L磷酸緩溶液(pH=7)分別混合20mmol/L花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(〇5^11丨(1;[11-3-(1丨8111008丨(16-5-8111008丨(16)溶液、201]11]1〇1凡七水合硫酸鋅溶液，使花青素-3_二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷（〇5^11丨(1;[11-3-(1丨8111(308丨(16-5-8111(308丨(16)濃度為51111]1〇1凡，七水合硫酸鋅濃度為2mmol/L。在0.2mol/L醋酸緩沖體系(pH=5)中，混合上述花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷-Zn2+(Cyanidin-3-diglucoside-5-glucoside_Zn2+)及蘆丁溶液，使-Zn2+和蘆丁的濃度為0.5mmol/L，Zn2+濃度為0.2mmol/L，樣品靜置30min。[0027]實施例3制備對比例1[0028]用0.2mol/L磷酸緩溶液(pH=7)稀釋20mmol/L花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(Cyanidin-3-diglucoside-5-glucoside)溶液，使花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(Cyanidin-3-diglucoside_5-glucoside)濃度為5mmol/L，再用O·2mol/L醋酸緩沖體系(pH=5)中稀釋花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(Cyanidin-3-diglucoside_5-glucoside)溶液，使其濃度為〇.5mmol/L，樣品靜置30min。[0029]實施例4制備對比例2[0030]用0.2mol/L磷酸緩溶液(pH=7)稀釋20mmol/L花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(〇5^11丨(1;[11-3-(1丨8111(308丨(16-5-8111(308丨(16)溶液，使其濃度為51111]1〇1/1^，再用0.21]1〇1凡醋酸緩沖體系化^1=5)中稀釋花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(〇7311丨(1;[11-3-(1丨8111008丨(16-5-glucoside)溶液，并加入與其等摩爾濃度的蘆丁溶液，使花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(Cyanidin-3-diglucoside_5-glucoside)及蘆丁的濃度為0·5mmol/L，樣品靜置30min。[0031]實施例5制備對比例3[0032]用0.2mol/L磷酸緩溶液(pH=7)分別混合20mmol/L花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(〇5^11丨(1;[11-3-(1丨8111008丨(16-5飛111008丨(16)溶液、201111]1〇1凡氯化|15溶液，使花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷(〇5^111(1;[11-3-(118111(3081(16-5飛111(3081(16)濃度為51111]1〇1凡，氯化|丐濃度為2mmol/L。在0.2mol/L醋酸緩沖體系(pH=5)中，混合上述花青素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷_Ca2+(Cyanidin-3-diglucoside-5-glucoside_Ca2+)及蘆丁溶液，使花青素-3-二葡萄糖苷_5-葡萄糖苷(〇5^11丨(1;[11-3-(1丨8111(308丨(16-5-8111(308丨(16)和蘆丁的濃度為0.5mmol/L,Ca2+濃度為0.2mmol/L，樣品靜置30min。[0033]實施例6制備對比例4[0034]在0.2mol/L醋酸緩沖體系(pH=5)中，混合蘆丁溶液及醋酸鎂溶液，使蘆丁的濃度為0·5mmol/L，Mg2+濃度為0·2mmol/L，樣品靜置30min。[0035]實施例7制備對比例5[0036]在0.2mo1/L醋酸緩沖體系(pH=5)中，混合蘆丁溶液及七水合硫酸鋅溶液，使蘆丁的濃度為〇.5mmol/L，Zn2+濃度為0.2mmol/L，樣品靜置30min。[0037]實施例8對比試驗[0038]氧自由基清除能力測定（ORAC,OxygenRadicalAbsorbanceCapacity):使用96孔酶標板（黑底）。測量孔中依次加入25yL不同濃度的tr〇l〇x(TE)標準溶液或樣品溶液及150yL4X106mmol/L熒光素鈉溶液，最外周加入300yL去離子水。將酶標板放入酶標儀中，37°C下孵育30min后，加入25yL153mmol/L的AAPH開始熒光淬滅反應。其中空白組以25yL緩沖液代替。每個樣品測定3次。測量的激發(fā)波長485nm，發(fā)射波長528nm;測量循環(huán)次數為120，循環(huán)周期為Imin。以trolox濃度為橫坐標，NetAUC值為縱坐標，繪制標準曲線，得到標準曲線方程。[0039]化合物相互作用指數的計算:通過計算兩種化合物的抗氧能力值共同同作用和單獨作用時所用的化合物濃度的比值加合來判斷化合物的相互作用關系，相互作用指數(InteractionIndex)<1表示詰抗效應，相互作用指數（InteractionIndex)=1表示加合效應，相互作用指數(InteractionIndex)>1表示協(xié)同效應。計算公式為：[0040][0041]實施例1-2和對比例1-5的抗氧化活性如圖1所示。由圖1可知實施例1花青素共色體的ORAC值最高，為90.32±5.42mmolTE/L，即抗氧化活性最好，其次為實施例2，為63.71±3.82mmolTE/L，對比例1的抗氧化值最小，僅為3.52±0.23mmoITE/L。由此可見，由本專利發(fā)明的花青素共色體復合物可以明顯提高花青素的抗氧化活性。[0042]由對比例1及對比例4的ORAC值，可計算出兩者的相互作用指數，并且在氧自由基清除能力方面為協(xié)同作用，致使實施例1的氧自由基清除能力比對比例1及對比例4分別高出25.65倍及8.10倍。[0043]對比例2與實施例1和實施2的ORAC結果如下表1所示。[0044]表1[0046]注：用T-test檢測樣品的相互作用指數的均值與H〇=l(p<0.05)的偏差，括號中的數值為P值。[0047]以上詳細描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應當理解，本領域的普通技術人員無需創(chuàng)造性勞動就可以根據本發(fā)明的構思作出諸多修改和變化。因此，凡本
技術領域：
中技術人員依本發(fā)明的構思在現有技術的基礎上通過邏輯分析、推理或者有限的實驗可以得到的技術方案，皆應在由權利要求書所確定的保護范圍內?！局鳈囗棥?.一種含有花青素的復合物的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：1)提供第一緩沖溶液、第二緩沖溶液、含有花青素的溶液、含有金屬離子的溶液、含有類黃酮的溶液；2)將第一緩沖溶液與含有花青素的溶液及含有金屬離子的溶液混合，得到花青素-金屬離子混合溶液；3)將步驟2)得到的花青素-金屬離子混合溶液與第二緩沖溶液及含有類黃酮的溶液混合得到所述的含有花青素的復合物。2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述第一緩沖溶液的pH值為6.5~7.5。3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第一緩沖溶液為磷酸緩沖溶液。4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述金屬離子為Mg2+、Zn2+及Cu2+中的一種或多種的混合。5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟2)所得到的花青素-金屬離子混合溶液中，花青素濃度為4-5mmoI/L，所有金屬離子的總的濃度為2-3mmoI/L。6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述第二緩沖溶液的pH值為4.5~5.5。7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述第二緩沖溶液為醋酸緩沖溶液。8.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的含有類黃酮的溶液為蘆丁溶液。9.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟3)所得到的含有花青素的復合物中，花青素的濃度為〇.4-0.5mmol/L，類黃酮的濃度為0.4-0.5mmol/L，金屬離子濃度為0.2-0.3mmol/L〇10.按照如權利要求1-9中任一所述的制備方法所制得的含有花青素的復合物。【文檔編號】A61P39/06GK105942520SQ201610284097【公開日】2016年9月21日【申請日】2016年4月29日【發(fā)明人】敬璞,陸漫漫,蔡湛【申請人】上海交通大學