1^容量瓶中， 加蒸餾水至5 mL，再各加入5 mL酒石酸鐵溶液，用pH 7.5磷酸緩沖溶液定容至25 mL，混勻， 靜止15 min，在540 nm波長處測吸光度。結(jié)果表明，以對照品溶液濃度(X)與吸光度值(Y)進(jìn) 行線性回歸，得回歸方程為Y = 0.0258X -0.003，r= 0.9996(n=6)，對照品濃度與吸光度值 呈良好的線性關(guān)系。
[0023] 1.1.4精密度試驗(yàn)分別取高、中、低三種不同濃度的沒食子酸對照品溶液，于540 nm處測定吸光度，連續(xù)測定5次，記錄吸光度，計(jì)算精密度，結(jié)果表明，在不同濃度水平下， 精密度RSD小于2%。
[0024] 1.1.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液，分別于0,2,4,8，12 1!進(jìn)行測定，結(jié) 果表明，12小時內(nèi)供試品的穩(wěn)定性良好，RSD小于2%。
[0025] 1.1.6重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一批樣品5份，按供試品溶液項(xiàng)下方法制備，依照 上述方法測定，結(jié)果表明，方法的重現(xiàn)性良好，RSD小于2 %。
[0026] 1.1.7加樣回收率試驗(yàn)精密量取6份已知含量的樣品溶液，分別精密加入適量對 照品，按供試品溶液項(xiàng)下方法制備，依照上述方法測定，計(jì)算回收率，本法平均回收率為 98.90 %，RSD=1.23 %，結(jié)果表明本法準(zhǔn)確度較高，方法可行，見表1。
[0027]表1加樣回收率試驗(yàn)
1.1.8樣品含量測定精密稱取取高山紅景天原料，照上述方法測定，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì) 算總多酚含量(以沒食子酸計(jì)），結(jié)果見表2。
[0028] 表2高山紅景天原料中總多酚含量
1.2提取工藝優(yōu)化 1.2.1提取溶劑對總多酚提取率的影響取過10目篩高山紅景天粗粉4組，加入不同溶 劑，在超聲功率500 W，間隔超聲時間比0.6:1.5 s，室溫條件下循環(huán)超聲提取I h，濾過，得 提取液，照上述方法測定總多酚含量。結(jié)果表明，提取溶劑采用40%乙醇提取最佳，見表3。
[0029] 表3不同溶劑總多酚提取率(吏:土 s，n= 3)
1.2.2料液比對總多酚提取率的影響取10目篩高山紅景天粗粉3組，每組3份，各150 g，以40%乙醇為提取溶劑，藥材與提取溶劑分別按1:10，1:12，1:14配比，按"2.1"項(xiàng)下條件 提取，測定總多酚含量，結(jié)果表明，料液比對總多酚提取率有影響，1:12,1:14提取率接近， 明顯高于1:10，故確定料液比為1:12。
[0030] 1.2.3超聲工藝參數(shù)對總多酚提取率的影響選取間隔超聲時間比(A)、提取時間 (B)、超聲功率(C)為考察因素，以提取率為評價(jià)指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)選工藝參數(shù)。因 素水平見表4，試驗(yàn)安排見表5，方差分析結(jié)果見表6。取高山紅景天粗粉150 g，加入12倍量 40%乙醇，按表5方案提取，提取液濾過，濾液定容為樣品液，測定總多酚含量。計(jì)算總多酚提 取率，結(jié)果見表5。
[0031] 表4正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)因素及水平
表5正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)安排及結(jié)果
結(jié)果表明，在所選水平范圍內(nèi)A、B、C 3因素對提取率影響程度一致，均無顯著性差異。 根據(jù)直觀實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定優(yōu)選工藝參數(shù)為A1B2C2，即間隔超聲時間比0.6:0.5，提取時間I h， 超聲功率500 Wd.2.4驗(yàn)證及對比實(shí)驗(yàn) 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn):取高山紅景天粗粉150 g按優(yōu)選工藝條件提取，進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果，總 多酚提取率為28.71±0.75 mg · g-1與正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)最大值接近，表明優(yōu)選的工藝參數(shù)合 理。
[0032] 溫浸提取對比實(shí)驗(yàn):取高山紅景天粗粉150 g，加入12倍量40%乙醇，80 °C攪拌溫 浸提取2次，每次I h，合并提取液，濾過，定容為樣品液，進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果，總多酚提 取率為2.33 ±0.96 mg · g-1，明顯低于上述優(yōu)選工藝提取率，表明超聲循環(huán)提取法優(yōu)于溫浸 提取法。
[0033]高山紅景天中總多酚類成分超聲循環(huán)提取的優(yōu)選工藝為:40%乙醇12倍量，室溫 下提取I h，間隔超聲比為0.6:0.5 S，功率為500 W。與傳統(tǒng)的溫浸提取法相比，超聲循環(huán)法 提取率高，提取時間短，溶劑用量少。
[0034]實(shí)驗(yàn)例2高山紅景天總多酚分散片成型工藝研究 本發(fā)明采用分散片為劑型，與其他劑型相比，分散片生產(chǎn)工藝相對簡單，對生產(chǎn)條件無 特殊要求，生產(chǎn)工藝與普通片劑基本相同，具有生產(chǎn)成本低，崩解快、生物利用度高、吸收 快，服用方便、可咀嚼、吞服、含吮等特點(diǎn)，適于老、幼和吞服藥片及膠囊困難的人群。
[0035] 制備方法 2.1.1高山紅景天總多酚提取物的制備取處方量高山紅景天原料，加40 %乙醇12倍量， 浸泡lh，采用超聲循環(huán)法室溫下提取I h，間隔超聲比為0.6:0.5 s，功率為500 W，得提取 液，提取液高速離心分離料液，濾過，濾液噴霧干燥得浸膏粉，計(jì)算出膏率為15.64 %。
[0036] 2.1.2制粒、壓片取浸膏粉，粉碎，過80目篩，加入處方量MCC、0.5倍處方量L- HPC混合均勻，置于高速攪拌制粒機(jī)中，以PVP(K-30)的20%乙醇溶液為粘合劑，制粒，濕顆 粒在60 °C以下干燥，整粒，得干顆粒，干顆粒中加入0.5倍處方量L-HPC總混，壓片，即得高山 紅景天總多酚分散片。
[0037]制劑輔料篩選 制劑輔料篩選主要依據(jù)高山紅景天總多酚分散片的外觀、硬度、崩解時限、分散均勻度 等指標(biāo)。 2.2.1填充劑的篩選對淀粉、乳糖、MCC3種常用填充劑進(jìn)行篩選。輔料分別過80目篩， 按處方量，用交聯(lián)聚維酮(PVPP)作為內(nèi)加作崩解劑，混勻，按上述制備方法壓片，控制片劑 硬度均為4. Okg，測定崩解時限，結(jié)果見表7。確定填充劑為MCC。
[0038]表7填充劑的篩選
2.2.2崩解劑的篩選對PVPP、L- HPC、羧甲基淀粉鈉 (CMS -Na)、交聯(lián)羧甲基纖維素納 (CCMC -Na)4種分散片常用崩解劑進(jìn)行篩選。將輔料分別過80目篩，按處方量，以MCC為填 充劑，各崩解劑用量相同，壓片，控制片劑硬度均為4.0kg，測崩解時限，結(jié)果見表8。確定崩 解劑為L- HPC。
[0039]表8崩解劑初步篩選
2.2.3粘合劑的篩選根據(jù)對分散片崩解時間的影響，考察不同濃度的淀粉漿和聚乙烯 吡咯烷酮。結(jié)果顯示，淀粉漿不適合用作粘合劑。2% PVP(K-30)20%乙醇溶液為粘合劑利于 制粒，且崩解時間最短。
[0040] 經(jīng)上述輔料篩選，最終確定高山紅景天總多酚分散片的輔料及用量，見表9。
[0041] 表9高山紅景天總多酚分散片的制劑處方(1000片）
2.3壓片成型工藝 2.3.1干顆粒各項(xiàng)指標(biāo)按《中國藥典》(2010版)(一部)要求，測定流動性、粒度分布、含 水量，采用漏斗法測定休止角來測定流動性，采用篩分法測定分布比例來粒度分布，采用烘 干法測定含水量，測定結(jié)果見表10。
[0042] 表10干顆粒各項(xiàng)指標(biāo)測定結(jié)果(n=3)
2.3.2片重計(jì)算本品片重的計(jì)算結(jié)合服用劑量和出膏率，片重計(jì)算方法如下： 理論片重=(原料處方量X出膏率/制劑處方中浸膏所占比例)/2次 = (2X 15.64%/0.56)/2=0.28 g 由計(jì)算得:實(shí)際服用量為〇.3g/片，日服2片，每次1片。符合保健食品中關(guān)于服用量的相 關(guān)規(guī)定。
[0043] 實(shí)驗(yàn)例3高山紅景天總多酚分散片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 為控制高山紅景天總多酚分散片的產(chǎn)品質(zhì)量，對本品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了初步研究。
[0044] 檢查 3.1.1崩解時限檢查照《中國藥典》(2010)二部附錄XA崩解時限測定法為依據(jù)，對高 山紅景天總多酚散片進(jìn)行測定，崩解儀器選用升降式崩解儀，往返頻率為30~32次/min。取 6片高山紅景天總多酚分散片，分別置上述吊籃的玻璃管中，啟動崩解儀進(jìn)行檢查，崩解時 限均小于3min，結(jié)果見表11。
[0045] 表11高山紅景天總多酚分散片的崩解時限
3.1.2分散均勻性照《中國藥典》(2010)二部附錄XA片劑分散均勻性(分散片)的檢查 法為：取6片高山紅景天總多酸分散片，置250mL燒杯中，加15-25攝氏度的水IOOmL，振搖 3m