包含經熱處理的澄清番茄濃縮物的組合物的制作方法
【專利說明】包含經熱處理的澄清番茄濃縮物的組合物 發(fā)明領域
[0001] 本發(fā)明涉及包含經熱處理的番茄衍生的濃縮物的組合物，已發(fā)現(xiàn)所述濃縮物具有 意料不到的高水平的抗炎活性。本發(fā)明還涉及經熱處理的番茄衍生的濃縮物與類胡蘿卜素 的協(xié)同組合。
[0002] 發(fā)明背景 形成非特異性免疫系統(tǒng)的重要部分的炎癥過程的特征在于一系列復雜的化學和細胞 變化，其對于面對微生物試劑和其它潛在有害的環(huán)境因素的宿主防御而言是重要的。然而， 在許多情況下，炎癥可被不當?shù)赜|發(fā)，和/或可持續(xù)至對宿主變得有害的程度。在這類情況 下，可能需要抑制或阻止炎癥過程的一個或更多個方面的發(fā)展，尤其，在非感染性的炎癥疾 病的情況下。
[0003] 已顯示非常多的不同的化學介質參與炎癥過程的發(fā)展和控制。許多不同實驗室的 近期研究已表明一氧化氮（N0)為眾多急性和慢性炎癥疾病的重要調節(jié)劑，所述疾病包括各 種類型的關節(jié)炎、胃腸疾病、中樞神經系統(tǒng)的炎癥和某些形式的哮喘。所以，建議對N0生產 的抑制可對于這些炎癥疾病的治療和/或管理提供有用的治療機理。此外，也已顯示對N0 合成的抑制在一些本質上主要不是炎癥的病癥或狀態(tài)中是有用的。因此，例如，已發(fā)現(xiàn)對NO 合成的抑制降低進入在鍛煉期間的患有2型糖尿病的個體的肢體組織內的葡萄糖吸收。
[0004]N0的體內生產是由一氧化氮合酶（N0S)(包括可誘導的一氧化氮合酶（I-N0S))家 族介導的，所述可誘導的一氧化氮合酶是由多種不同的免疫刺激物包括脂多糖（LPS)、干擾 素Y和白細胞介素1 (IL-1)活化的。
[0005] 通過使用L-W-單甲基精氨酸檸檬酸酯（L-NMMA)可在體內和體外均實現(xiàn)對N0的 抑制。此外，已顯示若干種其它化合物(包括一些天然產物)也抑制N0的生產。后一個群組 包括例如葉黃素[RafiM.M?等人?MolNutrFoodRes. 2007Mar;51(3):333-40;Choi, J.S.Nutrition. 2006Jun;22(6):668-71]和番茄紅素[Rafi,M.M.等人.1?00(15(^. 2007Jan; 72(1):S069-74]的化合物。然而，已證明許多天然產物NO抑制劑的功效和效力 不是特別地高。因此存在對天然來源的改善的抑制N0生產的組合物的需要。
[0006] 另一種極為重要的炎癥介質為腫瘤壞死因子-a(TNF-a)，其為由各種細胞類型 (包括巨噬細胞、嗜中性粒細胞和淋巴細胞）產生的細胞因子。TNF-a在炎癥過程的早期階 段占據關鍵位置并且負責刺激其它因子例如核因子-kB的產生，核因子-kB繼而引起各 種促炎基因的活化。因此，鑒于其關鍵的促炎作用，TNF-a顯然是抗炎劑的一個重要的潛 在治療靶。
[0007] 現(xiàn)在轉到另一個方面，為了保持健康正常的骨結構，骨持續(xù)經受重塑，其中骨被破 骨細胞分解并由成骨細胞重新建造。
[0008] 破骨細胞的分化尤其還受RANKL(NFKB配體受體活化劑)影響，其為由成骨細胞產 生的細胞因子，與破骨細胞祖細胞結合。對這個過程的抑制將導致破骨細胞活性的降低，從 而抑制骨再吸收。
[0009] 用于改變在骨重塑過程中的骨再吸收和新骨產生之間的平衡的替代策略會引起 增加的成骨細胞活性。盡管這種結果可能潛在地以若干種方式實現(xiàn)，一種可能的途徑是通 過活化在成骨細胞內發(fā)信號的抗氧化劑應答元件（ARE/Nrf2 )。
[0010] 骨形成和骨再吸收之間的不平衡可能導致病理病癥例如骨質疏松、關節(jié)炎、牙周 病、多發(fā)性骨髓瘤和轉移性癌癥的發(fā)展。對于患有骨質疏松癥的個體，骨折代表危及生命的 事件，并且當前全球有超過7000萬人處于風險之中。
[0011] 在過多的骨再吸收(例如發(fā)生在骨質疏松癥中）的情況下，能夠改變再吸收和新骨 的形成（layingdown)之間的平衡將是有利的。理想情況下，這將通過使用天然的，無毒物 質而實現(xiàn)，所述物質基本上沒有不利的影響。本發(fā)明的目的之一就是滿足這種需要。
[0012] 本發(fā)明的一個目的是提供一種天然產物組合物，其可用于抑制一種或更多種關鍵 炎癥介質例如N0和TNF-a的生產，作為用于治療或控制所述介質參與其中的病理狀態(tài)和 過程的手段。
[0013] 本發(fā)明的另一個目的是提供具有改善抗炎性質的由番茄衍生的組合物。 本發(fā)明的另一個目的為提供用于改善骨健康的天然產物組合物。
[0014] 隨著描述的進行，其他目的和目標將會變得顯而易見。

【發(fā)明內容】

[0015] 本發(fā)明人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)被稱為澄清番茄濃縮物（CTC)的由番茄衍生的產物的抗炎性 質是通過在使用前使所述CTC經受熱處理來增強的。
[0016] 術語"CTC"指的是通過將番茄材料(例如榨碎的番茄或番茄汁）分離成果肉和漿 液，丟棄所述果肉，和然后濃縮所述漿液至介于約40和80、優(yōu)選在55°Bx以上的白利糖度 (Brix)值所獲得的濃縮番茄漿液。濃縮的漿液被稱為"CTC"。制備CTC的進一步細節(jié)將在 下文提供。
[0017] 因此本發(fā)明主要涉及包含經熱處理的CTC的治療組合物。
[0018] 盡管可使用若干種不同的加熱方案來制備前述的經加熱處理的CTC，在一個優(yōu)選 的實施方案中，在90°C下加熱CTC(濃度對應于約60Bx) -段介于1和3小時之間的時間。 在一個特別優(yōu)選的實施方案中，經熱處理的CTC是通過在90°C下加熱CTC1小時來制備的。
[0019] 在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的治療組合物基本上由經熱處理的CTC組成。
[0020] 應注意的是，如本公開和所附的權利要求各處所使用的術語"基本上由…組成"指 的是以下情況，在其中本發(fā)明的組合物，在除了主要活性物質（加熱的CTC)以外，還可包含 其他化合物、物質和試劑，其實質上不影響本發(fā)明的基本的新穎性和創(chuàng)造性特征。
[0021] 在一個優(yōu)選的實施方案中，包含經熱處理的CTC的上文公開的組合物具有小于2% w/w的總的游離氨基酸濃度。同樣地，包含經熱處理的CTC的所述組合物中的游離谷氨酰胺 濃度優(yōu)選小于〇. 1%w/w。
[0022] 此外，現(xiàn)已出乎意料地發(fā)現(xiàn)，加熱的CTC協(xié)同地與類胡蘿卜素相互作用，從而產生 增強的抗炎效應。因此，本發(fā)明進一步涉及包含經熱處理的CTC和一種或更多種類胡蘿卜 素的協(xié)同組合的治療組合物。 在該組合組合物的一個優(yōu)選實施方案中，總游離氨基酸濃度小于2%w/w。同樣地，游離 谷氨酰胺濃度優(yōu)選小于〇. 1%w/w。
[0023] 雖然許多不同的類胡蘿卜素可結合在本發(fā)明的組合物中，在優(yōu)選的實施方案中， 所述組合物包含選自番茄紅素、八氫番茄紅素、六氫番茄紅素、胡蘿卜素和葉黃素和/ 或它們的衍生物的一種或更多種類胡蘿卜素。然而，要認識到，許多其它類胡蘿卜素也可以 用于制備本發(fā)明的協(xié)同組合物。
[0024] 在特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的組合物包含加熱的CTC和番茄油樹脂，其中 所述油樹脂包含類胡蘿卜素番茄紅素、八氫番茄紅素、六氫番茄紅素和胡蘿卜素。這 類番前油樹脂的商業(yè)可購得的實例為Lyc-0-Mato?，其由申請人，Be'erSheva,Israel的 LycoRedLtd.生產并提供。
[0025] 在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的治療組合物基本上由經熱處理的CTC和一種 或更多種類胡蘿卜素的協(xié)同組合組成。在特別優(yōu)選的實施方案中，治療組合物基本上由經 熱處理的CTC和選自番茄紅素、八氫番茄紅素、六氫番茄紅素、胡蘿卜素和葉黃素的一 種或更多種類胡蘿卜素的協(xié)同組合組成。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，所述組合組合物 包含番茄紅素。最優(yōu)選地，所述組合物基本上由經熱處理的CTC和番茄油樹脂組成。
[0026] 優(yōu)選地，在所述組合組合物中類胡蘿卜素的總濃度為至少0. 1% (w/w)。在另一個 優(yōu)選的實施方案中，其中所述類胡蘿卜素包括番茄紅素，所述番茄紅素的濃度為至少〇. 1% (w/w)〇
[0027] 本發(fā)明還涉及一種或更多種的類胡蘿卜素(如上文所公開）和具有與上文定義的 經熱處理的CTC的相似的化學和/或生化組成的改性CTC一起的組合，或僅涉及所述改性 CTC。因此，在一個方面中，本發(fā)明涉及包含一種或更多種類胡蘿卜素與總游離氨基酸濃度 小于2%w/w的CTC一起的協(xié)同組合的治療組合物。在另一個實施方案中，本申請涉及 一種治療組合物，其包含至少一種類胡蘿卜素與游離谷氨酰胺濃度小于〇.l%w/w的CTC 一起的協(xié)同組合。
[0028] 在另一個方面中，本發(fā)明提供用于抑制或降低一種或更多種抗炎介質在受試者中 生產的方法，作為用于治療或管理所述介質參與其中的病理狀態(tài)和過程的手段，其中所述 方法包括向所述受試者給藥根據任何上文公開的實施方案的治療組合物。雖然所述方法可 用于抑制許多不同的炎癥介質的生產，在一個優(yōu)選的實施方案中，抗炎介質選自NO、TNF-a 和白細胞介素1。
[0029] 在另一方面中，本發(fā)明涉及經熱處理的CTC在生產用于治療響應于炎癥介質，特 別是NO、TNF-a和/或白細胞介素1的抑制的病癥的藥物中的用途。
[0030] 在另一方面中，本發(fā)明涉及經熱處理的CTC和一種或更多種類胡蘿卜素在生產用 于治療響應于NO、TNF-a和/或白細胞介素1的抑制的病癥的藥物中的用途。
[0031] 在又一個方面，本發(fā)明涉及任何上文所公開的組合物在生