短鏈ve類似物的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種短鏈VE類似物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來隨著養(yǎng)殖集約化程度和養(yǎng)殖密度的增加，病害成為制約養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)一步發(fā)展 的重要因素。隨著人們對環(huán)境保護(hù)及食品安全的關(guān)注度的提高，傳統(tǒng)的依靠頻繁使用抗生 素等藥物的病害防治模式逐漸被摒棄，疫苗的高成本及對病原的專一性也限制了其應(yīng)用， 而通過營養(yǎng)途徑改善養(yǎng)殖動物免疫機(jī)能從而達(dá)到疾病防控越來越受到重視。
[0003] VE是動物必需的營養(yǎng)成分，在動物體內(nèi)具有重要的生理學(xué)功能，VE直接影響體內(nèi) 很多生物化學(xué)性能，可抑制血漿脂質(zhì)過氧化、并對DNA誘發(fā)氧化損傷產(chǎn)生保護(hù)作用、抑制微 核形成及血漿過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛（MDA)的水平。飼料中添加 VE可提高紅細(xì)胞中 還原型谷胱甘肽水平及肝細(xì)胞中SOD活性，具有明顯的量效關(guān)系。
[0004] 長期以來，國際市場對VE的需求一直呈穩(wěn)步增長的態(tài)勢。目前，國外VE用作飼料 添加劑的量占總用量的一半多，達(dá)到2萬噸。世界VE巨頭BASF公司預(yù)計全球VE市場今后 平均每年增幅為4~5%，亞太和東歐地區(qū)的漲幅將會超過平均值。制藥和飼料行業(yè)的穩(wěn)定 發(fā)展將使VE市場長期受益?，F(xiàn)在我國的飼料年產(chǎn)量約為5000萬噸，人均年占有飼料為30 多公斤，而日本人均年占有200公斤，西歐為300公斤。隨著我國人民生活水平的不斷提高， 食品結(jié)構(gòu)的優(yōu)化調(diào)整，養(yǎng)殖業(yè)必將有大的發(fā)展，今后我國飼料添加劑對VE的需求量將是巨 大的。因而篩選另外一種更加高效的VE替代物具有極為重要的經(jīng)濟(jì)、社會意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種短鏈VE類似物作為飼料添加劑、免疫增強(qiáng)劑的應(yīng)用。 所述短鏈VE類似物的分子結(jié)構(gòu)式如式（I)所示：
[0006]
[0007] 本發(fā)明的有益效果是：
[0008] 經(jīng)實驗證明，該短鏈VE類似物也具有抗氧化特性，與天然VE相比，此類似物只需 用50%的量就可達(dá)到相同的生物學(xué)活性。
【附圖說明】
[0009] 圖1為飼料中添加 VEa對小鼠體重的影響；
[0010] 圖2為VEa對小鼠血清SOD的影響；
[0011] 圖3為VEa對小鼠血清GSH-Px的影響；
[0012] 圖4為VEa對小鼠血清MDA的影響；
[0013] 圖5為彗星電泳DNA損傷程度圖；
[0014] 圖6為維生素 E類似物對DNA氧化損傷的影響。
【具體實施方式】
[0015] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但并不局限于此。
[0016] 實施例1
[0017] -種短鏈VE類似物，其CAS號為16146-60-4,分子式為C21H 30O3，其分子結(jié)構(gòu)如式 (I)所示，將其命名為VEa:
[0018]
[0019] 本實施例對VEa在小鼠體內(nèi)的抗氧化功能、生物活性、生物大分子損傷的影響及 其作用機(jī)理進(jìn)行了研究，旨在比較VEa與普通VE對小鼠生長及體內(nèi)生物活性的差別，為VEa 取代常規(guī)VE在飼料中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
[0020] 1材料與方法
[0021] I. 1動物分組及飼養(yǎng)
[0022] 25只2月齡健康昆明種母小鼠由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，體重 28. 71 ± I. 76g，按體重隨機(jī)分成5組，每組5只，分別為陰性對照組（只給予基礎(chǔ)飼料）、陽 性對照組（基礎(chǔ)飼料添加普通VE 120IU/kg，廣東海大集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)）、基礎(chǔ)飼料 添加新型VEa 60IU/kg、基礎(chǔ)飼料添加新型VEa 120IU/kg、基礎(chǔ)飼料添加新型VEa 240IU/ kg。飼養(yǎng)管理采用每組群飼養(yǎng)、自由采食和自由飲水的方式。預(yù)試期7天，正試期8周，每 日記錄采食量，試驗開始和試驗期每周定時空腹稱重。1. 31. 2檢測指標(biāo)與方法
[0023] 飼養(yǎng)試驗結(jié)束后停止飼喂與飲水，稱重后，眼球取血，加入肝素抗凝管中，混勻，留 取100 μ L用于DNA損傷分析，其余全血迅速于低溫2000rpm/min離心15min，取上層血清 置-20°C冰箱中冷凍，待測。測定血液活性酶及抗氧化指標(biāo)，超氧化物歧化酶（SOD)和谷胱 甘肽過氧化物酶（GSH-Px)，以及血漿過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛（MDA)。
[0024] DNA氧化損傷的檢測和分析，方法為堿性單細(xì)胞凝膠電泳法（SCGE)，又稱"彗星" 電泳法，是一種較敏感的DNA斷裂損傷分析技術(shù)。首先是裂解細(xì)胞，使DNA片段在電場力的 作用下從細(xì)胞核迀出，然后通過解旋實現(xiàn)雙鏈DNA變成單鏈和RNA降解，最后通過電泳、中 和、染色三個步驟，就可以在熒光顯微鏡下觀察DNA的損傷情況。
[0025] 1. 3數(shù)據(jù)分析
[0026] 試驗結(jié)果用平均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（X土SD)表示，使用SPSS(17. 0)分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn) 行單因素方差分析（one-wayANONA)和Duncan多重檢驗，P〈0. 05為處理組之間差異顯著， P〈0. 01為處理組之間差異極顯著。
[0027] 2 結(jié)果
[0028] 2. I VEa對小鼠生長發(fā)育狀況的影響
[0029] 飼料中添加 VE和VEa后小鼠攝食正常，飼喂8周后對體重增長沒有影響。體重變 化情況見表1。
[0030] 表1飼喂VEa對小鼠體重的影響（X土SD)
[0031] Table I Effect ofAdding VEa on Weight in Mice(X土SD)
[0033] 注：同一字母表不差異不顯著（Ρ>0· 05)。
[0034] Note:Same letter mean not significant different (P>0. 05)
[0035] 由表1結(jié)果可見，飼喂8周后，小鼠體重均有增加，但各實驗組組小鼠體重與陰性 對照組相比，無顯著差異（P>〇. 05)，說明添加 VE和VEa均不會影響小鼠的食欲和生長。體 重變化曲線見圖1。
[0036] 2. 2VEa對小鼠血清SOD、GSH-Px及MDA的影響
[0037] 實驗結(jié)束后，小鼠眼球采集血清樣本，按照南京建成生物試劑盒操作說明檢測血 清中的GSH-Px、SOD、MDA指標(biāo)，結(jié)果見表2。
[0038] 表2 VE及VEa對小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA的影響比較
[0039] Table 2 Effects ofVEa to SOD, GSH-Px, MDAin Sera ofMice
[0040]
[0041] 注：同一字母表示差異不顯著，（P>0. 05):不同字母表示差異顯著（P〈0. 01)。.
[0042] Note:Same lettesrs mean not significant different(Ρ>0· 05):Different letters mean Significant different(P<0. 01)
[0043] 由表2結(jié)果可見，與陰性對照組和陽性對照組（VE 120IU/kg)相比，VEa 60IU/kg、 VEal20IU/kg、VEa 240IU/kg組均可顯著提高小鼠血清SOD活性（P〈0. 01)(圖2)，同時，可 顯著降低血清MDA水平（P〈0. 01)(圖4);與陰性對照組和陽性對照組（VE 120IU/kg)相比， VEa 60IU/kg、VEa 120IU/kg組可顯著提高小鼠血清GSH-Px活性（P〈0. 01)(圖3)，但是，飼 料中添加更高劑量的VEa時，血清抗氧化狀態(tài)發(fā)生了變化：即添加 VEa 240IU/kg組的血清 GSH-Px活性較陰性對照組、陽性對照組（VE 120IU/kg)和其它兩個實驗組相比，顯著下降 (Ρ〈0· 01)(圖 3)。
[0044] 2. 4 VEa對小鼠 DNA氧化損傷的影響
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