活化:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母分別接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫搖瓶24小時；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)I3D培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(7)枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(8)二步發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌按2.5%、4%、1.5%、2.5%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右通風培養(yǎng)21h，定期攪拌；
(9)三步發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按3%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?35°C厭氧培養(yǎng)
20h ；
(10)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風干燥；
(11)粉碎:將干燥后的發(fā)酵麩皮粉碎即得成品。
[0012]實施例2: 一種混菌多步發(fā)酵制備麩皮蛋白飼料的方法，具體制備步驟如下:
(1)預(yù)處理:選取無霉變的麩皮，粉碎過40目篩，調(diào)整麩皮含水量18%；
(2)酶解:添加麩皮質(zhì)量比的8%α -淀粉酶、3%蛋白酶、5%纖維素酶、3%木聚糖酶，混合均勻，酶解6h，酶解溫度控制在40?50°C ;
(3 )配制固體培養(yǎng)基:向酶解后的麩皮中加入麩皮質(zhì)量比8%糖蜜、3%玉米漿、3%硝酸銨、1.5%硫酸銨、0.2%磷酸二氫鉀，調(diào)整培養(yǎng)基含水量30?40% ；
(4)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細粉，按麩皮:水=1:1.3比例加入水，拌勻至無干粉又無結(jié)團現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約100g，在0.1MPa表壓下滅菌40?60min，冷卻至35°C，每一個三角瓶中接入1-2環(huán)已活化好的斜面里氏木霉、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在35±1°C.每隔12h搖瓶一次，孢子長出后停止制備孢子懸浮液；
(5)—步發(fā)酵:將里氏木霉、黑曲霉按5%、3%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風培養(yǎng)12h，定期攪拌；
(6)產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母分別接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫搖瓶24小時；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)I3D培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(7)枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(8)二步發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌按3%、5%、2%、3%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右通風培養(yǎng)18h，定期攪拌；
(9)三步發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按4%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?35°C厭氧培養(yǎng)
24h ；
(10)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風干燥；
(11)粉碎:將干燥后的發(fā)酵麩皮粉碎即得成品。
[0013] 實施例3:
一種混菌多步發(fā)酵制備麩皮蛋白飼料的方法，具體制備步驟如下:
(1)預(yù)處理:選取無霉變的麩皮，粉碎過40目篩，調(diào)整麩皮含水量12%；
(2)酶解:添加麩皮質(zhì)量比的5%α -淀粉酶、2%蛋白酶、3%纖維素酶、2%木聚糖酶，混合均勻，酶解12h，酶解溫度控制在40?50°C ；
(3)配制固體培養(yǎng)基:向酶解后的麩皮中加入麩皮質(zhì)量比5%糖蜜、2%玉米漿、2%硝酸銨、1%硫酸銨、0.1%磷酸二氫鉀，調(diào)整培養(yǎng)基含水量30?40% ；
(4)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細粉，按麩皮:水=1:1.0比例加入水，拌勻至無干粉又無結(jié)團現(xiàn)象。拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約100g，在0.1MPa表壓下滅菌40?60min，冷卻至35°C，每一個三角瓶中接入1-2環(huán)已活化好的斜面里氏木霉、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在35±1°C.每隔12h搖瓶一次，孢子長出后停止制備孢子懸浮液；
(5)—步發(fā)酵:將里氏木霉、黑曲霉按3%、2%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40°C培養(yǎng)，通風培養(yǎng)18h，定期攪拌；
(6)產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母分別接到Y(jié)H)培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫搖瓶24小時；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)I3D培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子；
(7)枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子；
(8)二步發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌按2%、3%、1%、2%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右通風培養(yǎng)24h，定期攪拌；
(9)三步發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按2%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?35°C厭氧培養(yǎng)
24h ；
(10)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風干燥；
(11)粉碎:將干燥后的發(fā)酵麩皮粉碎即得成品。
[0014]以上實施例僅用于說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其進行限制；盡管參照前述實施例對被發(fā)明進行了詳細的說明，但對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，依然可以對前述實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換；而對這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明所要求保護的技術(shù)方案的精神和范圍。
【主權(quán)項】
1.一種混菌多步發(fā)酵制備麩皮蛋白飼料的方法，其特征在于具體包括以下步驟: (1)預(yù)處理:選取無霉變的麩皮，粉碎過40目篩，調(diào)整麩皮含水量12?18%； (2)酶解:添加麩皮質(zhì)量比的5?8%α-淀粉酶、2?3%蛋白酶、3?5%纖維素酶、2?3%木聚糖酶，混合均勻，酶解6?12h，酶解溫度控制在40?50°C ； (3)配制固體培養(yǎng)基:向酶解后的麩皮中加入麩皮質(zhì)量比5?8%糖蜜、2?3%玉米漿、2?3%硝酸銨、I?1.5%硫酸銨、0.1?0.2%磷酸二氫鉀，調(diào)整培養(yǎng)基含水量30?40% ； (4)曲霉活化:取新鮮麩皮，用60目篩子篩去細粉，按麩皮:水=1:1.0?1.3比例加入水，拌勻至無干粉又無結(jié)團現(xiàn)象；拌勻后，分裝入2000mL三角瓶中，每只2000mL三角瓶裝濕麩皮約100g，在0.1MPa表壓下滅菌40?60min，冷卻至35°C，每一個三角瓶中接入1-2環(huán)已活化好的斜面里氏木霉、黑曲霉sp-1孢子，培養(yǎng)基品溫控制在35±1°C.每隔12h搖瓶一次，孢子長出后停止制備孢子懸浮液； (5)一步發(fā)酵:將里氏木霉、黑曲霉按3?5%、2?3%的比例接種到混合配料中，拌勻35?40 °C培養(yǎng)，通風培養(yǎng)12?18h，定期攪拌； (6)產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母活化:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母分別接到Y(jié)ro培養(yǎng)基中，30°C，180r/min轉(zhuǎn)速下恒溫搖瓶24小時；然后以1:100比例，將種子液接到Y(jié)I3D培養(yǎng)基中，得到釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母液體種子； (7)枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌活化:采用LB培養(yǎng)基在28?32°C條件下培養(yǎng)24h，制得液體種子； (8)二步發(fā)酵:將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌按2?3%、3?5%、1?2%、2?3%接種比例接種至培養(yǎng)基，28°C左右通風培養(yǎng)18?24h，定期攪拌； (9)三步發(fā)酵:將固體乳酸菌粉按2?4%的接種比例接種至培養(yǎng)基，26?35°C厭氧培養(yǎng)16?24h ； (10)干燥:發(fā)酵結(jié)束后低溫通風干燥； (11)粉碎:將干燥后的發(fā)酵麩皮粉碎即得成品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種混菌多步發(fā)酵制備麩皮蛋白飼料的方法，其特征在于所述步驟(3)中固體培養(yǎng)基無需滅菌。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種混菌多步發(fā)酵制備麩皮蛋白飼料的方法，利用微生物發(fā)酵技術(shù)，通過“復(fù)合酶解+多菌種三步固態(tài)發(fā)酵”工藝制備一種營養(yǎng)價值高、適口性好的麩皮蛋白飼料，實現(xiàn)麩皮的飼用營養(yǎng)價值高值化，產(chǎn)品金黃色，有淡淡的乳酸味，適口性好，粗蛋白含量由發(fā)酵前的14.4%提升到發(fā)酵后的19.05%；且富含大量的有益活菌、多種維生素、酶等營養(yǎng)成分，具有促進生長發(fā)育、提高飼料利用率、增強免疫力、改進腸道微生態(tài)、防止疾病等優(yōu)點。該方法采用固態(tài)發(fā)酵，生產(chǎn)工藝簡單，能耗低、無環(huán)境污染、投資小、易于規(guī)?；a(chǎn)。
【IPC分類】A23K1/14, A23K1/00, A23K1/165
【公開號】CN104920806
【申請?zhí)枴緾N201510387611
【發(fā)明人】侯文燕, 董靜靜, 代樹強
【申請人】青島嘉瑞生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年7月6日