專利名稱：微生物、微生物棉餅脫毒劑及其制造方法
技術領域：
本發(fā)明屬微生物及其產品的制備。
目前在我國養(yǎng)殖業(yè)已發(fā)展到一定規(guī)模。但與世界上發(fā)達國家相比，人均消費肉、蛋、奶的水平還是較低的，因而養(yǎng)殖業(yè)今后仍然需要有一個大發(fā)展。我國發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)的瓶頸在于飼料蛋白源的缺乏，據估計我國每年生產混合飼料在3000萬噸以上，需植物性蛋白飼料600多萬噸，而我國年生產大豆餅不足400萬噸，形成了200萬噸的缺口，多少年來，許多科技工作者一直在努力尋求開辟新的飼料蛋白來源。我國是個產棉大國，每年可產棉籽餅350多萬噸，由于棉籽餅中粗蛋白含量約在36-42％(相當于豆餅的80％，遠高于小麥、玉米和大米的蛋白質含量)、所以眾多的科技人員早在10多年前就將它作為潛在的飼料蛋白質源進行開發(fā)，但進展卻進展十分緩慢。進展不快的主要原因是棉籽餅中含有毒物質—棉酚，它能嚴重地損傷畜、禽的消化、生殖和視力系統(tǒng)，棉酚的清除又是十分困難的，有些科技人員盡管從技術上找到多種脫酚技術，但由于成本高昂以及脫毒指標不穩(wěn)，或其它營養(yǎng)成份遭到破壞等原因，因而可以說一直到1996年我國仍未找到一種可同時做到投資少、建設快、成本低、無污染、脫毒指標穩(wěn)定，棉籽餅中營養(yǎng)成分不破壞，還能適應廣大農戶的脫毒技術。
本發(fā)明的目的是研制一種價廉、物美、脫毒效果好的脫毒劑，既不需貴重設備，也不需高溫、高壓，也不用化學藥劑或添加劑，只要有5℃以上溫度，不論在盆、缸或水泥地上，均能進行發(fā)酵脫毒，其工藝與制作饅頭相似，脫毒時間3-5天，每公斤棉餅的脫毒率為117.3-140mg，大大低于400mg/公斤的國際標準，脫毒后粗蛋白達到49.42％(較脫毒前升高9.86％)配成全價飼料可以喂任何畜、禽。經對比試驗，用微生物脫毒棉餅可代替豆餅90-94％，對禽、畜的適口性良好，養(yǎng)殖畜禽均不受影響。
本發(fā)明的內容是一種微生物，名叫文01號，它是嗜熱性側孢霉(sporotrichum thermophile)中的一種。
文01號菌種的來源及微生物特征文01號菌種是一種腐生性很強的霉菌，系用Co60γ射線10萬格瑞照射“301”菌種，經分離培養(yǎng)而成，定名為‘文01號’。在生物學系統(tǒng)中的位置為真菌門、半知菌綱、叢梗孢目、叢梗孢科、側孢霉屬、嗜熱性側孢霉種中的一個新菌種。文01號在PDA培養(yǎng)基上菌落常呈絨毯狀、顏色為白色或淺黃色，菌絲比‘301’菌絲略短，寬度為3-10μm，有很多分枝，呈管狀，每節(jié)為一個細胞，菌絲分營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲兩種，在生殖菌絲上著生孢子梗，在梗上側生許多分生孢子形態(tài)各異。文01號既能用菌絲繁殖，也能用分生孢子繁殖，一般24小時繁殖一代。文01號是一種中溫型菌種，適應性很強，最低要求5℃，最適溫度為25-37℃，最高40-50℃，在零下10℃和短期90℃也不會全部死亡。文01號耐濕性強，要求培養(yǎng)基含水量在65-75％，它是一種好氣性的真菌，需氧量較大，菌絲正常的Co2含量為0.03％，菌絲生長階段不需光照，在培養(yǎng)中適于中性至堿性環(huán)境，PH值為6.7-6.9，最佳碳氮比為30-40∶1，可在冷凍或干燥的條件下保藏。
糖化菌的來源及其生物特性糖化菌與301菌種同源，系1994年用Co60γ射線輻照2441菌種后的不同選系，是高溫型菌種，能分泌糖化酶，使多糖分解成單糖，它的外部形態(tài)與301菌種近似，在瓊脂培養(yǎng)基上呈絨毯狀，顏色為黃白色，菌絲比301菌種短而弱，糖化菌的一、二、三級菌種的生產與文01號相同，三級菌種制成后，經晾干粉碎后即成糖化菌菌劑。
AS.1.807菌種的來源及其生物學特性AS.1.807菌種是一種細菌，。它能產生蛋白酶，1994年自科學院微生物所引入，它的各級菌種配方都是微生物所提供的。
一種微生物，其特征是嗜熱性側孢霉(sporotrichum thermophi le)中的一種，名為‘文01’號，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏號為CGMCC№0339。
一種微生物棉餅脫毒劑其特征是以‘文01’號為基礎，加上糖化菌和AS.1.807細菌組成的復合菌劑，它的配方為(重量百分比)(1)‘文01’號菌種 50-70％(2)糖化菌 15-20％(3)AS.1.807 15-20％一種微生物棉餅脫毒劑的制造方法，包括菌種培養(yǎng)和脫毒劑的制造，其特征在于(一)‘文01’號菌種生產的工藝過程(1)一級菌種培養(yǎng)一級菌種由最原始斜面一級菌種擴繁而來，一支斜面菌種可擴接30～40支一級菌種，培養(yǎng)基為PDA或麥芽汁，PH值為6.7～6.9，培養(yǎng)溫度為38°-42℃，培養(yǎng)時間為72小時。
(2)二級菌種培養(yǎng)將一級菌種接種于麥粒培養(yǎng)基上，麥粒培養(yǎng)基的制作方法是先稱取麥粒5Kg，在清水中浸泡12小時，再放入鍋內煮沸，直至麥粒無白心為止，澇出晾干，在通風處晾至無明水，再加入碳酸鈣15克，石膏60克，將麥粒拌勻即可，麥粒用玻璃瓶分裝，PH值為6.7～6.9，一支一級菌種可接兩瓶，培養(yǎng)溫度為38～42℃，培養(yǎng)時間為3～4天。
(3)三級菌種培養(yǎng)可用二級菌種進行擴繁，培養(yǎng)基仍為麥粒，一般一瓶二級種可以擴接30～40瓶，將三級菌種從瓶內掏出，晾干后粉碎即成三級菌種。
(二)糖化菌菌種生產的工藝過程糖化菌與‘文01’號菌種同源，前者系高溫型菌種，主要分泌糖化酶，其作用是將多糖分解為單糖，培養(yǎng)溫度為43～45℃，而‘文01’號系中溫型菌種，它分泌纖維素酶，其作用是分解纖維素和半纖維素，培養(yǎng)溫度為38～42℃，一、二、三級菌種的生產過程和‘文01’號相同。
(三)AS.1.807菌種生產的工藝過程
AS.1.807菌種是一種細菌，它能產生蛋白酶，它的各級菌種生產配方如下(1)一級菌種培養(yǎng)基牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，葡萄糖10克，瓊脂18～20克，清水1000ml，PH值為7，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)時間3～4天。
(2)二級菌種培養(yǎng)基(液體培養(yǎng))葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，碳酸鈣3-5克，清水1000ml，PH值為7。
制成液體培養(yǎng)基后，分裝于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的壓力下滅菌1.5小時，滅菌結束后，待冷至25℃，用無菌水稀釋一級菌種，一般一支一級菌種接兩瓶，每天搖瓶3-4次，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)72小時，當液面出現少許白色菌絲即可。
(3)三級菌種培養(yǎng)采用固體培養(yǎng)基，曲盤大量培養(yǎng)；米糠20％，麥夫60％，豆餅10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％。
按以上比例將料備足，用水將料拌勻，在105℃下滅菌2小時，趁熱分裝于曲盤中，在恒溫室培養(yǎng)，當料溫降至25℃時，按干料重的10％接入液體菌種，在28-32℃培養(yǎng)，每天翻料3-4次，培養(yǎng)料用消過毒的布或纖維袋復蓋，培養(yǎng)5天，當料面長出白色菌絲，料溫降至室溫即可，將培養(yǎng)料取出烘干或陰干備用。
微生物脫毒劑的制造按玉米面30％，麥夫30％，棉餅35％，紅糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三種菌合成，即‘文01’號50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.80715-20％，另加水50％。
先將紅糖溶于少量水中，再加入棉餅、玉米面和麥夫，然后將水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三層發(fā)酵，在一、二層上各撒原種2％，蓋上第三層后撒原種1％，堆成饅頭狀，頂部用手抹平，打上若干通風孔，蓋上麻袋或布保濕，經3-4天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味即成。
本發(fā)明的優(yōu)點一、投資少、成本低、用微生物脫毒劑對棉餅進行脫毒，既不用高溫、高壓或化學藥劑，更不需貴重設備，只要室溫保持5℃以上，可在農舍的盆、缸和水泥地上均能進行發(fā)酵脫毒，脫毒工藝與農村作饅頭近似，一般農民均能掌握，每公斤棉餅脫毒費用0.1元。
二、脫毒效果好據農業(yè)部農業(yè)品質量檢測中心(河南山東)二處測定，脫毒前棉餅的粗蛋白為39.62％，棉酚含量為562mg/kg，脫毒后粗蛋白升至49.48％，棉酚降至117.3-140mg/kg，棉酚含量比國家飼料標準400mg/kg低260-282.7mg/kg，完全可以飼喂各種禽、畜；粗蛋白比豆餅高6.48％，根據一年多飼喂試驗可以代替豆餅90-94％。目前每公斤豆餅值3.3元，每公斤棉餅值1.4元，每公斤差價為1.9元。從而可以大大節(jié)約原料成本。
三、適口性好經微生物脫毒劑脫毒后，棉餅上布滿了白色菌絲，即菌體蛋白，無任何異味，禽、畜都愛吃，經5000只種雞，20000只肉雞，13000只蛋雞，15000只肉鴨，肉豬4000多只，肉牛537頭，蛋雞產蛋正常，肉雞生長周期縮短5-7天，肉鴨生長周期縮短8-10天，種公雞性成熟略早，種蛋育雛正常，在豬牛的飼養(yǎng)上也非常成功。
微生物棉餅脫毒劑實施例實施例一先稱取棉餅100kg，加水50kg，加棉餅脫毒劑1公斤，充分攪拌后，再在干凈的水泥地上堆積，在一、二層上各撒脫毒劑0.4公斤，蓋上第三層后撒脫毒劑0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通氣孔，蓋上麻袋或草簾，經3-5天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味，經曬干粉碎即成脫毒棉餅。
實施例二先稱取棉餅98kg，豆餅2kg，加水50kg，加棉餅脫毒劑1公斤，充分攪拌后，再在大缸中堆積，在一、二層上各撒脫毒劑0.4公斤，蓋上第三層后撒脫毒劑0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通氣孔，蓋上麻袋或草簾，經3-5天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味，經曬干粉碎即成脫毒棉餅。
權利要求
1.一種微生物，其特征是嗜熱性側孢霉(sporotrichum thermophile)中的一種，名為‘文01’號，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏號為CGMCC№0339。
2.一種微生物棉餅脫毒劑其特征是以‘文01’號為基礎，加上糖化菌和AS.1.807細菌組成的復合菌劑。
3.一種微生物棉餅脫毒劑的制造方法，包括菌種培養(yǎng)和脫毒劑的制造，其特征在于(一)‘文01’號菌種生產的工藝過程(1)一級菌種培養(yǎng)一級菌種由最原始斜面一級菌種擴繁而來，一支斜面菌種可擴接30～40支一級菌種，培養(yǎng)基為PDA或麥芽汁，PH值為6.7～6.9，培養(yǎng)溫度為38°-42℃，培養(yǎng)時間為72小時；(2)二級菌種培養(yǎng)將一級菌種接種于麥粒培養(yǎng)基上，麥粒培養(yǎng)基的制作方法是先稱取麥粒5Kg，在清水中浸泡12小時，再放入鍋內煮沸，直至麥粒無白心為止，澇出晾干，在通風處晾至無明水，再加入碳酸鈣15克，石膏60克，將麥粒拌勻即可，麥粒用玻璃瓶分裝，PH值為6.7～6.9，一支一級菌種可接兩瓶，培養(yǎng)溫度為38～42℃，培養(yǎng)時間為3～4天；(3)三級菌種培養(yǎng)可用二級菌種進行擴繁，培養(yǎng)基仍為麥粒，一般一瓶二級種可以擴接30～40瓶，將三級菌種從瓶內掏出，晾干后粉碎即成三級菌種；(二)糖化菌菌種生產的工藝過程糖化菌與‘文01’號菌種同源，前者系高溫型菌種，主要分泌糖化酶，其作用是將多糖分解為單糖，培養(yǎng)溫度為43～45℃，而‘文01’號系中溫型菌種，它分泌纖維素酶，其作用是分解纖維素和半纖維素，培養(yǎng)溫度為38～42℃，一、二、三級菌種的生產過程和‘文01’號相同；(三)AS.1.807菌種生產的工藝過程AS.1.807菌種是一種細菌，它能產生蛋白酶，它的各級菌種生產配方如下(1)一級菌種培養(yǎng)基牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，葡萄糖10克，瓊脂18～20克，清水1000ml，PH值為7，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)時間3～4天；(2)二級菌種培養(yǎng)基(液體培養(yǎng))葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，碳酸鈣3-5克，清水1000ml，PH值為7；制成液體培養(yǎng)基后，分裝于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的壓力下滅菌1.5小時，滅菌結束后，待冷至25℃，用無菌水稀釋一級菌種，一般一支一級菌種接兩瓶，每天搖瓶3-4次，培養(yǎng)溫度為28～32℃，培養(yǎng)72小時，當液面出現少許白色菌絲即可；(3)三級菌種培養(yǎng)采用固體培養(yǎng)基，曲盤大量培養(yǎng)；米糠20％，麥夫60％，豆餅10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％；按以上比例將料備足，用水將料拌勻，在105℃下滅菌2小時，趁熱分裝于曲盤中，在恒溫室培養(yǎng)，當料溫降至25℃時，按干料重的10％接入液體菌種，在28-32℃培養(yǎng)，每天翻料3-4次，培養(yǎng)料用消過毒的布或纖維袋復蓋，培養(yǎng)5天，當料面長出白色菌絲，料溫降至室溫即可，將培養(yǎng)料取出烘干或陰干備用；(四)微生物脫毒劑的制造按玉米面30％，麥夫30％，棉餅35％，紅糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三種菌合成，即‘文01’號50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.807 15-20％，另加水50％；先將紅糖溶于少量水中，再加入棉餅、玉米面和麥夫，然后將水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三層發(fā)酵，在一、二層上各撒原種2％，蓋上第三層后撒原種1％，堆成饅頭狀，頂部用手抹平，打上若干通風孔，蓋上麻袋或布保濕，經3-4天發(fā)酵，白色菌絲布滿料面，有甜香味即成。
全文摘要
本發(fā)明屬微生物及其產品的制備。它是以“文01”號為基礎,再加上糖化菌和細菌AS.1.807組成的復合菌劑,簡稱微生物棉餅脫毒劑,脫毒工藝與作饅頭相似,脫毒前每公斤棉餅含棉酚562ppm,粗蛋白為39.62%,脫毒后每公斤棉餅棉酚殘留量為140ppm,比國家飼料標準400ppm低260ppm,可以代替90%以上的豆餅喂任何禽、畜;若全面推廣微生物脫毒棉餅將立即緩解我國飼料蛋白的緊張狀態(tài)。
文檔編號A23J1/14GK1189536SQ9810082
公開日1998年8月5日 申請日期1998年2月18日 優(yōu)先權日1998年2月18日
發(fā)明者何策熙, 肖文琳, 何琳 申請人:何策熙