專利名稱：紅螺菌制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物制劑，特別是利用紅螺菌科菌類的制劑及其制備方法和治療某些消化道疾病的應(yīng)用。
目前用于治療消化道疾病的微生態(tài)制劑主要有雙岐桿菌、蠟樣芽孢桿菌、地衣牙孢桿菌、乳酸桿菌、糞鏈球菌等，未見應(yīng)用紅螺菌的報道。上述諸菌作為治療消化道疾病制劑的主要不足是1.療效不甚顯著，只能作為輔助治療劑或預(yù)防劑。2.單位重量或體積細胞數(shù)少，一般僅0.1-2億/g(ml)。由于細胞生物量小，因而導(dǎo)致療效不佳。3.保存期短.室溫下保存半年，細胞衰亡即過半。液態(tài)制劑開蓋后僅能保存1-5天。
本發(fā)明的目的是提供一種紅螺菌科菌類制劑及其制備方法，以及應(yīng)用該制劑提高治療某些消化道疾病的療效，特別是結(jié)腸炎的療效，同時提高該制劑單位重量(體積)細胞數(shù)，延長保存期，保證該制劑質(zhì)量。
本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案來實現(xiàn)的紅螺菌制劑，是用紅螺菌科三個屬紅螺菌屬(Rhodospirillum)紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)紅微菌屬(Rhodomicrobium)其中的任何一種或幾種作為菌種，經(jīng)一級菌種、二級菌種、三級培養(yǎng)液培養(yǎng)并加入少量食品添加劑而制成的液態(tài)制劑和以大米粉、玉米粉、牛奶粉、麩皮、糖、無機鹽、微量元素和維生素等為基料接種三級培養(yǎng)液經(jīng)培養(yǎng)、干燥、粉碎而制成的固態(tài)制劑。
上述紅螺菌的液態(tài)和固態(tài)制劑的制備方法和具體操作過程是一.液態(tài)制劑1.一級菌種制作①培養(yǎng)基牛肉膏或酵母膏為一組，磷酸二氫鉀(K2H2PO4)、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)、乙酸鈉(C2CooNa)、氯化鈉(Nacl)為一組，碳酸鈉(Na2CO3)為一組。
②操作將三組培養(yǎng)基的各組成份分別化入熱的自來水中，高壓(0.14MPa)滅菌30秒，冷卻后補無菌水至所要求的量，其中各成份在水中的體積百分比為牛肉膏或酵母膏0.01％ 磷酸二氫鉀0.03-0.05％硫酸鎂0.01％ 乙酸鈉0.2-0.4％氯化鈉2％ 碳酸鈉0.1-0.2％然后將三組成份按所需比例混合，在無菌條件下裝入經(jīng)滅菌的50-250ml三角瓶中，無菌條件下接種5％(以下均為體積百分比)的前述菌種，蓋上無菌橡皮塞，在28°±2℃自然或白熾燈光(500-2200lux)下培養(yǎng)2-3天，待細胞數(shù)達40億/ml時終止培養(yǎng)，即為一級菌種，保存?zhèn)溆谩?br> 2.二級菌種制作培養(yǎng)基和操作同一級菌種。不同之處是①接入一級菌種10％；②培養(yǎng)容器為500ml細口無色玻璃瓶。細胞數(shù)達30億/ml。
3.三級培養(yǎng)液制作培養(yǎng)基和操作同一級菌種。不同點是①接入二級菌種20％；②培養(yǎng)容器為1000-5000ml無色玻璃瓶，用玻璃蓋封口。要求細胞數(shù)達30億/ml。
4.液態(tài)制劑制作按照三級培養(yǎng)液100ml，糖精鈉0.01g，桔子香精0.001ml的比例，將糖精鈉溶于三級培養(yǎng)液中，再加入桔子香精。搖勻、裝瓶、封口、包裝。
二、固態(tài)制劑1.接種與培養(yǎng)將大米粉26％、玉米粉24％、牛奶粉(脫脂)10％、麩皮38％、糖1.8％、無機鹽和維生素0.2％的混合物用自來水和勻為基料，在0.14MPa下滅菌一小時，冷卻后接種三級培養(yǎng)液(基料∶三級培養(yǎng)液＝1∶0.5)，裝入糖瓷盤中，上覆無菌塑料薄膜，在28°±2℃無菌、500-2700lux自然光或白烘燈光照條件下培養(yǎng)2-3天，待細胞數(shù)達80億/g以上終止培養(yǎng)。
2.干燥在≤80℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干，或凍干、真空干燥。物料含水量≤5％。
3.粉碎用中藥粉碎機粉碎至40目。
4.封裝以膠囊機分裝，然后壓成鋁板，包裝。
本發(fā)明制劑的主要技術(shù)指標1.外觀及感觀指標①外觀液態(tài)制劑為肉紅色粘稠狀，固態(tài)制劑為深褐色粉末。
②氣味液態(tài)制劑稍有二氧化硫氣味，固態(tài)制劑具有發(fā)酵物特殊氣味。
③滋味略帶甜、咸味。
2.微生物指標細胞總數(shù)液態(tài)制劑≥20億/ml，固態(tài)制劑≥80億/g。
本發(fā)明的紅螺菌液態(tài)和固態(tài)制劑，可應(yīng)用于治療某些消化道疾病，主要用于結(jié)腸炎、急慢性腸炎、胃炎、胃潰瘍、便秘、急慢性肝炎、肝硬化、消化道急性腫瘤等。對于急慢性腸炎、尤其是結(jié)腸炎，僅服1-2個療程即可治愈。一個療程為1-7天，視病情和病程而定。每天服兩次，每次服液態(tài)制劑25ml或固態(tài)制劑4個膠囊(每個膠囊含制劑0.32g左右)，也可服液態(tài)制劑25ml加膠囊2個。對于因腸胃炎所引起的胃腸不適，5-40分鐘即見效。對于病程較長的慢性結(jié)腸炎，也只需服用1-3個月就可痊愈。
通過吉林市第二人民醫(yī)院102例臨床療效觀察，結(jié)果本制劑對消化道疾病具有顯著療效。經(jīng)二療程觀察(6天為一療程)總有效率達85％，無任何毒副作用。
通過本發(fā)明方法制成的制劑，其優(yōu)點主要是1.提高了消化道疾病的療效，特別是提高了結(jié)腸炎療效。
2.提高制劑單位重量(體積)的細胞數(shù)。
3.延長保存期，可達一年，以利于運輸、保存和保證產(chǎn)品質(zhì)量。
權(quán)利要求
1.紅螺菌制劑，其特征是，用紅螺菌科三個屬(1)紅螺菌屬Rhodospirillum(2)紅假單胞菌屬Rhodopseudomonas(3)紅微菌屬Rhodomicrobium其中的任何一種或幾種作為菌種，經(jīng)一級菌種、二級菌種、三級培養(yǎng)液培養(yǎng)并加入少量食品添加劑而制成的液態(tài)制劑和以大米粉、玉米粉、牛奶粉、麩皮、糖、無機鹽、微量元素和維生素等為基料接種三級培養(yǎng)液經(jīng)培養(yǎng)、干燥、粉碎而制成的固態(tài)制劑。
2，根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅螺菌的液態(tài)和固態(tài)制劑的制備方法是(1)液態(tài)制劑制作①一級菌種制作取牛肉膏或酵母膏為一組，磷酸二氫鉀(KH2PO4)、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)、乙酸鈉(CH3CooNa)、氯化鈉(Nacl)為一組，碳酸鈉(Na2CO3)為一組分三組作為培養(yǎng)基，分別化入熱的自來水中高壓(0.14MPa)滅菌30秒，冷卻后補無菌水至需要量，其中各成份在水溶液中的體積百分比為牛肉膏或酵母膏0.01％磷酸二氫鉀0.03-0.05％硫酸鎂0.01％乙酸鈉0.2-0.4％氯化鈉2％ 碳酸鈉0.1-0.2％然后將三組成份混合，在無菌條件下接種5％(以下均為體積百分比)的菌種，菌種為紅螺菌科三個屬紅螺菌屬Rhodospirillum紅假單胞菌屬Rhodopseudomonas紅微菌屬Rhodomicrobium中的任何一種或幾種，在28°±2℃自然或白熾燈光(500-2200lux)下無菌培養(yǎng)2-3天，即為一級菌種，保存?zhèn)溆?。②二級菌種制作培養(yǎng)基和操作同一級菌種，不同之處在于接種一級菌種10％。③三級培養(yǎng)液制作培養(yǎng)基和操作同一級菌種，不同之處在于接入二級菌種20％。④液態(tài)制劑制作按照三級液態(tài)培養(yǎng)液100ml、糖精納0.01g、桔子香精0.001ml的比例，將糖精納溶于三級培養(yǎng)液中，再加入桔子香精，搖勻，封裝。(2)固態(tài)制劑制作①將大米粉26％、玉米粉24％、牛奶粉(脫脂)10％，麩皮38％，糖1.8％，無機鹽和維生素0.2％組成混合物混合，用自來水和勻作為基料，在0.14MPa下滅菌一小時，冷卻后接種三級培養(yǎng)液(基料∶三級培養(yǎng)液＝1∶0.5)，在28°±2℃無菌、500-2700lux自然或白熾燈光照條件下培養(yǎng)2-3天。②干燥在≤80℃條件下干燥，物料含水量≤5％。③粉碎。④封裝。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅螺菌制劑，其特征是應(yīng)用于治療某些消化道疾病，主要是結(jié)腸炎、急慢性腸炎、胃炎、胃潰瘍、便秘、急慢性肝炎、肝硬化、消化道惡性腫瘤等。
全文摘要
紅螺菌制劑及其制備方法和應(yīng)用,涉及微生物領(lǐng)域,是用紅螺菌科三個屬中的任何一種或幾個種經(jīng)一、二、三級培養(yǎng)并加入少量食品添加劑制成的液態(tài)制劑和將三級培養(yǎng)液接種在經(jīng)高壓滅菌的以大米粉、玉米粉、麩皮、牛奶粉、糖、無機鹽和維生素等為基料的固體培養(yǎng)基中,在無菌條件下培養(yǎng)2—3天,經(jīng)低溫干燥,粉碎而獲得的固態(tài)制劑,可作為治療人消化道疾病,特別是結(jié)腸炎、胃炎、腸炎、消化道潰瘍的制劑,療程短,無副作用,單位量細胞數(shù)高,保存期長。
文檔編號C12N1/20GK1172653SQ9711221
公開日1998年2月11日 申請日期1997年7月15日 優(yōu)先權(quán)日1997年7月15日
發(fā)明者王厚德, 李盛學(xué) 申請人:李盛學(xué), 王厚德