專利名稱：游霉素的回收的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從發(fā)酵液中回收游霉素的快速而廉價(jià)的方法。
背景技術(shù)：
游霉素(又稱為匹馬菌素或tenecetin)是一種廣為人知的抗菌素(Florey，″Analytical Profiles of Drug Substances″，Vol.10，1981；Merck Index，8th ed，″Pimaricin″，p.834)。雖然人們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到它的有價(jià)值的抗菌性質(zhì)，由于極其高昂的生產(chǎn)費(fèi)用，游霉素的研究及商業(yè)化幾乎沒(méi)有進(jìn)行。因?yàn)橛蚊顾厝芙庥诟鞣N液體，它的回收還沒(méi)有達(dá)到經(jīng)濟(jì)可行。有必要開(kāi)發(fā)一種經(jīng)濟(jì)可行的游霉素回收工藝。
游霉素已通過(guò)發(fā)酵法制備，例如英國(guó)專利846,933所公開(kāi)的使用鏈霉素gilvosporeus。在這一工藝中，用甲醇萃取的方法回收游霉素，后續(xù)煩瑣的吸附和洗脫步聚。Bridger的美國(guó)專利3,378,441號(hào)公開(kāi)了通過(guò)鹽析法將其從發(fā)酵液中分離、用甲醇萃取、除去固體然后蒸發(fā)液體來(lái)回收游霉素的工藝。Struyk的美國(guó)專利3,892,850號(hào)公開(kāi)了通過(guò)用酸化甲醇萃取后蒸餾、沉淀的方法來(lái)回收游霉素的工藝。Struyk同時(shí)公開(kāi)了用溶解于甲醇的氯化鈣提高游霉素可溶性。每一種工藝都需要一個(gè)昂貴的回收步聚，如吸附和洗脫、蒸餾或蒸發(fā)。英國(guó)專利844,289號(hào)給出了用加水的方法從醋酸中沉淀游霉素的方法。Millis的PCT公報(bào)WO92/10580號(hào)，公開(kāi)了從一種含有至少2g/L游霉素的發(fā)酵液中回收游霉素的工藝，包括加入甲醇和調(diào)節(jié)萃取介質(zhì)的pH值至1.0-4.5以溶解沉淀下的游霉素；除去固體，并且將pH值升至6.0-9.0以沉淀游霉素。但是用該工藝回收的游霉素包含一種不希望得到的副產(chǎn)物--游霉素甲酯。
發(fā)明概述高純度游霉素可以用甲醇在控制下的pH值和溫度條件下萃取的方法，從一種含有游霉素的發(fā)酵液中回收。工藝包括步驟(1)將甲醇加入一股含有至少2g/L固體懸浮游霉素進(jìn)料物流中，以形成一種萃取介質(zhì)，并且維持萃取介質(zhì)溫度在0-25℃，優(yōu)選不超過(guò)15℃；(2)在維持溫度在0-25℃下的同時(shí)，調(diào)節(jié)萃取介質(zhì)的pH值到1.0-4.5，保持0.5-30小時(shí)，但是溫度為15-25℃時(shí)優(yōu)選不超過(guò)0.5小時(shí)；(3)從萃取介質(zhì)中除去固體以形成一種萃取液；(4)將萃取液的pH值升高至6.0-9.0；并且(5)回收沉淀的游霉素。
在另一項(xiàng)實(shí)施方案中，該工藝包括步驟(1)將里面含有約10-50g/L溶解度加強(qiáng)鹽的甲醇，加入一股含有至少2g/L固體懸浮游霉素的游霉素進(jìn)料物流中，以形成一種萃取介質(zhì)；(2)從萃取介質(zhì)中除去固體以形成一種萃取液；(3)將水加入萃取液中以沉淀游霉素；并且
(4)回收沉淀的游霉素。
在每種實(shí)施方案中，較高純度游霉素可以經(jīng)由下列方法得到(1)通過(guò)用水沖洗在最后一個(gè)步驟中回收的沉淀游霉素；(2)通過(guò)在游霉素沉淀前用活性炭處理萃取液；(3)上述步驟結(jié)合使用。優(yōu)選的溶解度加強(qiáng)鹽是氯化鈣。
附圖簡(jiǎn)述

圖1是在控制的pH和溫度條仵下回收工藝的示意圖。
圖2是采用溶解鹽的回收工藝的示意圖。
發(fā)明詳述甲醇萃取游霉素發(fā)酵液的進(jìn)料物流發(fā)酵法生產(chǎn)游霉素在Eisenschink的美國(guó)專利5,231,014號(hào)、英國(guó)專利846,933號(hào)和1991年8月5日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)07/740,545和07/740,536號(hào)上已經(jīng)公開(kāi)。在這些發(fā)酵法中產(chǎn)生的發(fā)酵液包含固體懸浮游霉素、生物體和水。例如Eisenschink所公開(kāi)的工藝產(chǎn)生的發(fā)酵液一般含有約7-12g/L游霉素。
發(fā)酵液用作回收工藝的進(jìn)料物流，或者直接地或者通過(guò)除去一部分或幾乎全部的水濃縮后使用。進(jìn)料物流中至少應(yīng)當(dāng)含每升2g的游霉素，但優(yōu)選更高的濃度。由于發(fā)酵液含水，固體懸浮游霉素和生物體固體，部分或基本上全部的水，可以用任何方便的常規(guī)固/液分高技術(shù)，例如離心、過(guò)濾或傾析來(lái)除去(參見(jiàn)實(shí)施例1，其中舉以過(guò)濾實(shí)例說(shuō)明)。如果需要，固體可以采用諸如熱空氣、噴霧干燥或用機(jī)械方法將水?dāng)D出等常規(guī)方法進(jìn)一步干燥。如果固體用加熱法干燥，應(yīng)使用約20-80℃的溫度。高于95℃的溫度應(yīng)當(dāng)避免。
游霉素在萃取介質(zhì)(進(jìn)料物流與甲醇)中的溶解度隨著水含量增加而降低。由于萃取介質(zhì)中的水含量取決于進(jìn)料物流中水的量，最好在第一步實(shí)施前盡可能多地除去水。如果進(jìn)料物流中含大約70％體積的水，所需要的甲醇量是以非常干燥的進(jìn)料物流開(kāi)始時(shí)所需要的甲醇量的約3倍。如果進(jìn)料物流中含大約40％體積的水，需要的甲醇是其約2倍。
進(jìn)料物流中的固含量可以低至約20％(Wt)或更低，如果幾乎不或根本不除去水，或者如果約98％(Wt)高含量的水被除去的話。為了達(dá)到高度回收所需的游霉素濃度，可能需要在甲醇加入之前濃縮發(fā)酵液。與設(shè)備情況有關(guān)，尤其是為了回收甲醇，在甲醇加入之前從發(fā)酵液中除去幾乎所有的水可能是需要的。這樣就將回收所需的甲醇量降至最低。如果經(jīng)濟(jì)考慮處主導(dǎo)地位，應(yīng)當(dāng)從發(fā)酵液中除去絕大部分水。這就使得回收過(guò)程可能在沒(méi)有大量副產(chǎn)物生成的較高pH值下進(jìn)行。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，除去水產(chǎn)生了含有至少50％(Wt)固體的進(jìn)料物流。
甲醇的加入?yún)⒄請(qǐng)D1，在第1步中，甲醇被加入進(jìn)料物流中。在合適的條件下，游霉素在這種廉價(jià)溶劑中有著優(yōu)異的溶解性，而且甲醇的回收有簡(jiǎn)易的方法。為得到最優(yōu)的游霉素回收率，加入足夠的甲醇于進(jìn)料物流中以得到含約20-150g/L游霉素的萃取介質(zhì)。由于游霉素在高濃度下易于從酸化萃取介質(zhì)中沉淀(第2步)，優(yōu)選游霉素在萃取介質(zhì)中的濃度為20-120g/L 。
酸的加入在第2步中，通過(guò)加入一種酸將萃取介質(zhì)的pH值調(diào)節(jié)至約1.0-4.5。這使得游霉素在萃取介質(zhì)中高度可溶。雖然任何常規(guī)可兼容的酸性物料都可以使用，但鹽酸是一種優(yōu)秀的選擇。雖然不是一種優(yōu)選技術(shù)，第1和第2步可以通過(guò)將酸直接加入甲醇的方法結(jié)合起來(lái)。
一種不希望得到的副產(chǎn)物游霉素甲酯的生成取決于pH值、游霉素-甲醇接觸時(shí)間和溫度(見(jiàn)表1)。保證這一步在約0-25℃的溫度下進(jìn)行很重要，因?yàn)檫@樣可以將游霉素甲酯和其它不希望得到的副產(chǎn)物的生成降至最低。溫度越高或接觸時(shí)間越長(zhǎng)，在給定的pH值下生成副產(chǎn)物的可能越多。為避免游霉素甲酯在15-25℃下生成，應(yīng)采用短的接觸時(shí)間，即0.5小時(shí)或更短。在約15℃，萃取時(shí)間不應(yīng)超過(guò)1.5小時(shí)。優(yōu)選的萃取溫度為約0-15℃。
一般來(lái)講，在pH值接近2以及約0℃下，萃取可以持續(xù)12小時(shí)而沒(méi)有過(guò)量副產(chǎn)物生成。在約25℃下萃取可以在0.5小時(shí)后停止。當(dāng)pH值增加至4.5，較長(zhǎng)的時(shí)間是可以接受的。在pH值接近4以及溫度在約4℃時(shí)，時(shí)間可以在30小時(shí)左右。
表1游霉素甲酯在甲酯中的生成溫度 時(shí)間 游霉素甲酯(℃) pH(hr) (g/l)(％產(chǎn)品重量)232.4044 0232.4142 3.9232.4241 7.3232.4338 9.7233.2038 0233.2138 2.3233.2237 3.9233.2434 7.4233.2632 9.216 23 14234.0041 0234.0240 2.3234.0439 3.74 2.4042 0.44 2.4242 1.34 2.48.5 39 2.74 2.419 37 5.2
對(duì)于商業(yè)上可接受的生產(chǎn)，需要將甲酯含量維持在總產(chǎn)品(游霉素、甲酯和任何雜質(zhì))重量的約5％以下，優(yōu)選低于其重量的約3％。
有可能通過(guò)冷卻物流和/或甲醇的方法在所需的低溫下進(jìn)行甲醇萃取以使萃取介質(zhì)在加入酸時(shí)在低溫范圍之內(nèi)。
萃取進(jìn)行的合適時(shí)間/溫度/pH值的關(guān)系可以容易地通過(guò)試驗(yàn)確定，記下在一個(gè)特定pH值下產(chǎn)生所需產(chǎn)品純度的時(shí)間和溫度，并記住所使用的特定設(shè)備的最優(yōu)的經(jīng)濟(jì)性。
pH值在某種程度上取決于萃取介質(zhì)中的水含量和所希望的產(chǎn)率。為了達(dá)到約90％或更高的沉淀產(chǎn)率，游霉素在萃取介質(zhì)中的濃度應(yīng)當(dāng)在約40g/L。在沒(méi)有水存在的情況下，所需的pH值是約4.5。在約30％水/70％甲醇(體積)的情況下，所需的pH值是約2.5(表2)。
表2游霉素在甲醇及甲醇/水的混合物中的溶解度水含量 游霉素(％) pH (g/L)07.0604.55003.87802.09430 7.0430 3.31830 2.455
懸浮固體的除去在第3步中，剩余的懸浮固體可用任何方便的固/液分離技術(shù)除去，例如過(guò)濾或離心分離，留下一種萃取液。固體從萃取介質(zhì)中除去后，仍然可能含有大量游霉素。因此，在一項(xiàng)優(yōu)選實(shí)施方案中，用甲醇或甲醇與水的混合物沖洗固體，以回收至少一部分包含在固體中的游霉素。沖洗溶液加入萃取液中。
游霉素的沉淀和回收在第4步中，任何一種兼容的基本材料都可用于將萃取液的pH值提高至約6.0-9.0。這樣就使得高純度游霉素沉淀下來(lái)，然后被移出和干燥。典型的適用、廉價(jià)而且兼容的基本材料是鈉和鉀的氫氧化物。如果需要，也可以在第4步加入水以幫助游霉素沉淀。進(jìn)料物流含有高濃度游霉素和少量水時(shí)，這樣做可能更好。含有有用的游霉素、發(fā)酵殘余物、甲醇、無(wú)機(jī)鹽和水的剩余液體副產(chǎn)物(殘余液)被送去回收甲醇。甲醇可以用溶劑回收的常規(guī)蒸餾方法進(jìn)行。
本工藝生產(chǎn)的游霉素的重量純度至少約80％，通常為至少約90％。在一項(xiàng)優(yōu)選實(shí)施方案中，在第5步中回收的游霉素沉淀用水沖洗，然后干燥，得到純度至少約90％重量的游霉素。
本工藝可以用間歇萃取法進(jìn)行。但是對(duì)于大規(guī)模商業(yè)化萃取來(lái)說(shuō)，連續(xù)過(guò)程可能更好。在一項(xiàng)技術(shù)中，游霉素發(fā)酵液，優(yōu)選濃縮至低含水量，連續(xù)地加入混合器中并在低溫下與甲醇徹底混合。pH值通過(guò)加入酸來(lái)控制，游霉素快速溶解。然后將得到的萃取介質(zhì)加入過(guò)濾器中，以將生物體和其它固體從萃取液中分離出來(lái)。將萃取液加入一個(gè)在較高pH值下操作的結(jié)晶器中，游霉素就沉淀下來(lái)。沉淀游霉素和殘余液被連續(xù)地從結(jié)晶器中移出。萃取時(shí)間、水含量、溫度和pH值可以按游霉素生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)合理性加以調(diào)節(jié)。
加入溶解度加強(qiáng)鹽不采用加酸降低pH值后加堿升高pH值并沉淀游霉素的方法，也可能快速得到游霉素的高回收率。在該工藝中，一種甲醇與溶解度加強(qiáng)鹽的混合物，與游霉素發(fā)酵液進(jìn)料物流(濃縮或非濃縮的)混合。得到的萃取介質(zhì)被過(guò)濾以除去生物體和其它固體，得到一種萃取液。水被加入萃取液中沉淀游霉素。
任何在萃取條件下能增加游霉素在甲醇中的溶解度，并且不與游霉素萃取體系反應(yīng)，或不干擾游霉素萃取、回收或產(chǎn)品純度的鹽，都可以使用。氯化鈣(CaCl2)是優(yōu)選的溶解度加強(qiáng)鹽。鹽在甲醇中的量為約10-50g/L時(shí)最為有效。
為了最優(yōu)化游霉素的回收，如上所述，水一般要從進(jìn)料物流中除去。進(jìn)料物流應(yīng)當(dāng)含有足夠多的游霉素，以便在萃取液(甲醇/鹽溶液)加入進(jìn)料物流后，得到的萃取介質(zhì)含有至少2g/L的游霉素。游霉素濃度低于2g/L時(shí)，難以用加水的方法沉淀游霉素。
為了沉淀出高百分比的游霉素，萃取液中水的含量應(yīng)當(dāng)增加到至少50％(Vol.).表3給出了游霉素在甲醇/水/氯化鈣溶液中的溶解度對(duì)水含量的函數(shù)變化。
表3游霉素在甲醇/CaCl2*中的溶解度在不同水濃度的萃取物水含量 游霉素(％.v/v) (g/L)0 9110 4420 1930640550220g/LCaCl2.
本工藝可以在pH2-9，優(yōu)選pH6-8下進(jìn)行。如果pH值低，萃取時(shí)間應(yīng)當(dāng)短，因?yàn)樗嵝原h(huán)境促進(jìn)了游霉素甲酯的生成(見(jiàn)表4)。如果pH值高于6，酯的生成減慢。任何合理的溫度都可以采用(即20-30℃)。
表4酯在含40g/L CaCl2的甲醇中的生成溫度 時(shí)間游霉素甲酯(℃)pH(hr)(g/L)(％產(chǎn)品)23 4.4 0 72 06 675.023 5.3 0 51 020 482.423 6.1 0 51 020 491.15 4.4 0 60 08 600.5圖2概要地示意了本工藝。在步驟(a)，一種甲醇/鹽溶液被加入進(jìn)料物流中。在步驟(b)，殘余懸浮固體用任何固/液分高技術(shù)，例如過(guò)濾或離心分離，從萃取介質(zhì)中除去以得到一種萃取液。固體中可能仍含有大量游霉素，可以用甲醇或甲醇與水的混合物沖洗以回收至少一部分含在固體中的游霉素。甲醇沖洗溶液被加入萃取液中。在步驟(c)，水被加入萃取液以沉淀游霉素。在步驟(d)，沉淀的游霉素得以回收?；厥盏某恋碇兄辽俸?0％重量的游霉素，通常至少含有90％重量的游霉素。較高純度的產(chǎn)品，高達(dá)至少90％重量的游霉素，可以用在步驟(d)中用水沖洗回收的沉淀的方法，或在步驟(c)進(jìn)行之前用活性炭處理萃取液的方法，或兩種方法結(jié)合使用來(lái)得到。
工業(yè)應(yīng)用本工藝是一種從發(fā)酵液，特別是從含有遠(yuǎn)高于2g/L含量游霉素的發(fā)酵液中，快速、廉價(jià)回收游霉素的工藝。
實(shí)施例1該實(shí)施例說(shuō)明了在控制的pH值和溫度條件下游霉素的回收。按照Eisenschink的美國(guó)專利第5,231,014號(hào)所敘述的方法制備的含有游霉素、生物體、水和少量營(yíng)養(yǎng)物和雜質(zhì)的發(fā)酵液，用在Buchner平底瓷漏斗中過(guò)濾的方法被濃縮至含約45％的固體。Celite545被加入其中以提高過(guò)濾率。濾餅中含約7.5％重量的游霉素。
大約74g濾餅與約96ml甲醇混合以生成一種萃取介質(zhì)漿液，并將漿液溫度用冰浴夾套降至約4℃。將鹽酸加入漿液中降低pH值至約2.4，并在此溫度和pH值下將漿液放置3小時(shí)左右。
用平底瓷漏斗過(guò)濾漿液，得到約150ml含約40g/L游霉素的清液(萃取液)。加入5N的氫氧化鈉溶液，使萃取液的pH值升高至約7，并在此pH值下緩慢攪拌保持約1小時(shí)。在這期間，一種粘稠的白色沉淀形成。
用過(guò)濾法分離出沉淀，并在40℃左右真空干燥。得到大約4.1g干產(chǎn)品。產(chǎn)品含約92％重量的游霉素(干基)和1.7％重量的甲酯。
實(shí)施例2該實(shí)施例說(shuō)明了在控制的pH值和溫度條件下游霉素的回收。重復(fù)實(shí)施例1的過(guò)程，但萃取介質(zhì)溫度為約22℃而不是約4℃。干燥后得到3.9g左右的產(chǎn)品。產(chǎn)品含約83％重量的游霉素(干基)和10％重量的甲酯。
實(shí)施例3該實(shí)施例說(shuō)明了采用溶解度加強(qiáng)鹽來(lái)回收游霉素。用在平底瓷漏斗過(guò)濾使發(fā)酵液濃縮至含45％重量的固體。加入Celite545以提高過(guò)濾率。濾餅在一個(gè)流化床干燥器中，在60℃下進(jìn)一步干燥至含98％重量的固體。干燥餅中游霉素的含量為18％(Wt)。
40g的干濾餅被加入3g氯化鈣溶解于150ml甲醇的溶液中，漿液被混合30min。在平底瓷漏斗上過(guò)濾漿液并收集清濾液(萃取液)。
邊攪拌邊緩慢加入水，使濾液中水的體積含量增加至30％。一種粘稠灰白色沉淀形成。用過(guò)濾法分離沉淀，用水沖洗并在30℃下真空干燥。沉淀含88％重量的游霉素(干基)。
實(shí)施例4該實(shí)施例說(shuō)明了采用溶解度加強(qiáng)鹽來(lái)回收游霉素。發(fā)酵液(IL)被加熱至70℃ 15min，冷卻至室溫并靜置沉淀。500ml的上層液體被傾析棄去。用平底瓷漏斗過(guò)濾濃縮剩余固體。20gCelite545被加入以增加過(guò)濾率。用50ml甲醇沖洗濾餅兩次，以除去大部分的水，并留下10％重量的水。濾餅含9％重量的游霉素。40g濾餅被加入2g氯化鈣溶解在50ml甲醇的溶液中并混合0.5小時(shí)。用平底瓷漏斗過(guò)濾漿液并收集清濾液(萃取液)。將3g活性炭加入濾液并將混合物攪拌1小時(shí)。將炭過(guò)濾除去并收集清濾液。
緩慢地邊攪拌邊加入水，使濾液中水的體積含量增加到50％，一種粘稠的白色沉淀形成，將其過(guò)濾，用水沖洗并在30℃下真空干燥。沉淀含95％重量的游霉素(干基)。
權(quán)利要求
1.一種回收游霉素的工藝，包括按下列順序的步驟(1)將甲醇加入一股含有固體游霉素的游霉素進(jìn)料物流中，以形成每升含20-150g游霉素的萃取介質(zhì)，并維持萃取介質(zhì)的溫度在0-25℃；(2)維持萃取介質(zhì)的溫度在0-25℃，并調(diào)節(jié)其pH值在1.0-4.5，0.5-30小時(shí)；(3)從萃取介質(zhì)中除去固體以形成一種萃取液；(4)將萃取液的pH值提高至6.0-9.0；并且(5)回收沉淀游霉素。
2.權(quán)利要求1的工藝，其中進(jìn)料物流中含有至少50％重量的固體。
3.權(quán)利要求1的工藝，其中萃取介質(zhì)的溫度維持在0-15℃。
4.權(quán)利要求1的工藝，其中通過(guò)在步驟(1)之前將酸加入甲醇中的方法，將步驟1和2結(jié)合起來(lái)。
5.權(quán)利要求1的工藝，另外包括在步驟(3)之后和步驟(4)之前(6)用甲醇沖洗固體并將甲醇加入萃取液。
6.權(quán)利要求1的工藝，另外包括在步驟(4)之前的步驟(7)用活性炭處理萃取液。
7.權(quán)利要求1的工藝，另外包括在步驟1之前的步驟(8)從游霉素進(jìn)料物流中除去水，以使游霉素進(jìn)料物流中含有少于10％重量的水。
8.權(quán)利要求7的工藝，其中萃取介質(zhì)中含有每升20-150g的游霉素。
9.權(quán)利要求8的工藝，其中萃取介質(zhì)的溫度維持在0-15℃。
10.權(quán)利要求9的工藝，其中萃取介質(zhì)的溫度在0-15℃維持0.5-1.5小時(shí)。
11.權(quán)利要求10的工藝，另外包括在步驟(4)之前的步驟(7)用活性炭處理萃取液。
12.一種回收游霉素的工藝，包括按下列順序的步驟(1)將含有約10-50g/L溶解度加強(qiáng)鹽的甲醇，加入含有至少2g/L固體懸浮游霉素的游霉素進(jìn)料物流中以形成一種萃取介質(zhì)；(2)從萃取介質(zhì)中除去固體以生成一種萃取液；(3)將水加入萃取液中以沉淀游霉素；并且(4)回收沉淀游霉素。
13.權(quán)利要求12的工藝，其中溶解度強(qiáng)化鹽是氯化鈣。
14.權(quán)利要求13的工藝，其中進(jìn)料物流中含有至少50％重量的固體。
15.權(quán)利要求13的工藝，另外包括步驟(3)之前的步驟(7)用活性炭外理萃取液。
16.權(quán)利要求13的工藝，另外包括步驟(1)之前的步驟(6)從游霉素進(jìn)料物流中除去水以便游離素進(jìn)料物流中含有少于10％重量的水。
17.權(quán)利要求16的工藝，其中萃取介質(zhì)中含有每升20-150g的游霉素。
18.權(quán)利要求17的工藝，另外包括在步驟(3)之前的步驟(7)用活性炭處理萃取液。
全文摘要
一項(xiàng)用甲醇萃取的方法從發(fā)酵液中回收高純度游霉素的工藝在此公開(kāi)。在一項(xiàng)實(shí)施方案中，該工藝包括下列步驟(1)將甲醇加入一股含有至少2g/L固體懸浮游霉素的游霉素進(jìn)料物流中以形成一種萃取介質(zhì)，并且維持萃取介質(zhì)溫度在0-25℃，優(yōu)選不超過(guò)15℃；(2)調(diào)節(jié)萃取介質(zhì)的pH值到1.0-4.5，并維持溫度在0-25℃ 0.5-30小時(shí)，但是溫度為15-25℃時(shí)優(yōu)選不超過(guò)0.5小時(shí)；(3)從萃取介質(zhì)中除去固體以形成一種萃取液；(4)將萃取液的pH值提高至6.0-9.0；并且(5)回收沉淀的游霉素。
文檔編號(hào)C12P19/62GK1135239SQ94194150
公開(kāi)日1996年11月6日 申請(qǐng)日期1994年9月16日 優(yōu)先權(quán)日1993年9月17日
發(fā)明者P·T·奧爾森, J·R·米力斯, M·H·萊馬 申請(qǐng)人:生物技術(shù)資源兩合公司