專利名稱：細(xì)菌芽孢染色紙片及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種微生物檢驗(yàn)試品，特別是鑒定芽孢桿菌科細(xì)菌的試品。
在微生物檢驗(yàn)工作中，細(xì)菌芽孢染色是鑒定芽孢桿菌不可缺少的重要步驟。過(guò)去我國(guó)微生物實(shí)驗(yàn)室均采用液體染液進(jìn)行染色。此種染液一旦放置時(shí)間稍長(zhǎng)，容易干涸并析出沉淀物，需過(guò)濾后使用、或作廢，因此染液的配制、貯存和運(yùn)輸都給檢驗(yàn)工作帶來(lái)許多不便，尤其對(duì)類脂含量高、含水量低和外膜通透性差的芽孢，用常規(guī)方法不易著色，必須采用特殊的方法。
本發(fā)明的目的是提供一種細(xì)菌芽孢染色紙片及其使用方法，以替代染液，它能有效地避免上述不足。
本發(fā)明的技術(shù)方案是1、紙片的組成及制法將孔雀綠紙溶液吸附到定性濾紙上，晾干，制成孔雀綠紙片;將番紅溶液吸附到定性濾紙上，晾干，制成番紅紙片。
2、使用方法芽孢染色用菌種，共7株蠟樣芽孢桿菌由沈陽(yáng)市防疫站中心實(shí)驗(yàn)室供給;
蠟樣芽孢桿菌S-1變種由遼寧省防疫站細(xì)菌病科供給;
枯草芽孢桿菌由遼寧省衛(wèi)生防疫站細(xì)菌病科供給;
短小芽孢桿菌中國(guó)科學(xué)院微生物研究所二室供給;
產(chǎn)氣莢膜梭菌遼寧省防疫站細(xì)菌病科供給;
蘇云金芽孢桿菌東北農(nóng)學(xué)院微生物教研組供給;
環(huán)狀芽孢桿菌哈爾濱防疫站微生物科供給。
將上述7株菌，在37℃中，經(jīng)48小時(shí)培養(yǎng)，同時(shí)用染液和本發(fā)明對(duì)比作芽孢染色2.1 使用染液作芽孢常規(guī)染色法將上述菌種制成涂抹標(biāo)本，火焰固定后，首先用5%孔雀綠溶液，在微火焰上加溫染色3分鐘，冷卻后水洗，用吸水紙吸干。再滴加0.5%番紅溶液30-60秒，然后水洗、干燥、油浸、鏡驗(yàn)。
結(jié)果芽孢染成綠色，菌體染成紅色。
2.2 使用本發(fā)明染色法2.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)物涂片，火焰固定;
2.2.2 將孔雀綠紙片放在涂抹標(biāo)本面上，加滅菌蒸餾水2-3滴，使紙片潤(rùn)濕，在微火焰上加溫染5-6分鐘，冷卻后水洗;
2.2.3 將番紅紙片放在涂抹標(biāo)本面上，加滅菌蒸餾水1-2滴，染色40-60秒，水洗;
2.2.4 干燥、油浸、鏡驗(yàn)。
結(jié)果與2.1常規(guī)方法相同，即芽孢染成綠色，菌體染成紅色。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有使用方便，便于貯存、運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)。
下面給出一個(gè)實(shí)施例。
定性濾紙新華造紙廠生產(chǎn)。
孔雀綠由沈陽(yáng)市試劑廠生產(chǎn)。
番紅北京化工廠生產(chǎn)。
將9%孔雀綠和0.8%番紅溶液分別吸附到定性濾紙上，置暗處晾干，制成孔雀綠紙片和番紅紙片，然后裁成2.5cm×1.5cm規(guī)格的長(zhǎng)方形紙片，兩種紙片分別盛入褐色玻璃瓶?jī)?nèi)，密封，放在干燥處貯存、備用，初步觀察，一年有效。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)菌芽孢染色紙片，有孔雀綠溶液和番紅溶液，其特征是將孔雀綠溶液吸附到定性濾紙上，晾干，制成孔雀綠紙片，將番紅溶液吸附到定性濾紙上，晾干，制成番紅紙片。
2.一種使用按照權(quán)利要求1所述的染色紙片對(duì)芽孢染色的方法，其特征是(1)、細(xì)菌培養(yǎng)物涂片，火焰固定;(2)、將孔雀綠紙片放在涂抹標(biāo)本面上，加滅菌蒸餾水2-3滴，使紙片潤(rùn)濕，在微火焰上加溫染5-6分鐘，冷卻后水洗;(3)、將番紅紙片放在涂抹標(biāo)本面上，加滅菌蒸餾水1-2滴，染色40-60秒，水洗;(4)、干燥、油浸、鏡驗(yàn)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種細(xì)菌芽孢染色紙片及其使用方法，其技術(shù)要點(diǎn)是將孔雀綠溶液和番紅溶液吸附到定性濾紙上，晾干，制成孔雀綠紙片和番紅紙片。使用方法是將孔雀綠紙片和番紅紙片先后放在涂抹本面上，加滅菌蒸餾水，使紙片濕潤(rùn)，加熱后再冷卻，水洗，最后干燥、油浸、鏡驗(yàn)。本發(fā)明克服了染液不便貯存、不便配制和不便檢驗(yàn)的缺點(diǎn)，它適合于微生物實(shí)驗(yàn)室里使用。
文檔編號(hào)C12Q1/00GK1062551SQ90106478
公開日1992年7月8日 申請(qǐng)日期1990年12月18日 優(yōu)先權(quán)日1990年12月18日
發(fā)明者韓桂榮, 樸文芝, 杜曉嵐, 汪芹, 于柏英, 陳剛, 王玉, 李延軍 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)市皇姑區(qū)衛(wèi)生防疫站