專利名稱:一種多肽營養(yǎng)物質(zhì)的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到用海洋生物分離獲得精氨酸、脯氨酸、亮氨酸、賴氨酸、冬氨酸等氨基酸構(gòu)成的五肽的方法。
背景技術(shù)：
海洋生物中的蛋白質(zhì)、氨基酸含量非常豐富，由于這些生物是生活在液態(tài)、堿性環(huán)境中，其氨基酸、脂肪酸的分子結(jié)構(gòu)與生活在空氣的生物有所不同。對人類增強(qiáng)免疫能力、改善血液循環(huán)產(chǎn)生重要的作用。但到目前還沒能得到人們的充分認(rèn)識和利用。這無疑是對大量的寶貴的海洋生物資源的浪費(fèi)。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種從海洋生物中分離萃取精氨酸、脯氨酸、亮氨酸、賴氨酸、冬氨酸等氨基酸構(gòu)成的五肽的制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種海洋金5肽的制備方法，其特征在于A)采用復(fù)合酶解法1)將鮮活體的海龍、蛤蜊肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海龍、蛤蜊肉與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海龍、蛤蜊肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取精氨酸水解液；2)將鮮活體的海參、海星肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海參、海星肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海參、海星肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取脯氨酸水解液；3)將鮮活體的海龍、扇貝肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海龍、扇貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海龍、扇貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取天門冬氨酸水解液；4)將鮮活的扇貝、貽貝肉體或冷凍肉體，置入反應(yīng)釜中，扇貝、貽貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物扇貝、貽貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取亮氨酸水解液；5)將鮮活牡蠣、貽貝肉體或冷凍肉體，置入反應(yīng)釜中，牡蠣、貽貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海牡蠣、貽貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取賴氨酸水解液；
B)分離經(jīng)酶解所獲得上述五種酶解液均為深褐色混濁體，為除去大分子物質(zhì)、未水解蛋白、部分多糖并脫色，采用超濾分離，將酶解液用蒸餾水稀釋到2～4倍，用超濾膜分離并回收5000～1000D的含脯氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸等氨基酸5肽分子結(jié)構(gòu)較豐富的液體；C)脫鹽將分離液輸入到離子交換器用701#羧酸型的弱堿性陰離子交換樹脂及氫型1×25強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂，借調(diào)節(jié)氨基酸的帶電狀態(tài)，從而通過陰陽交換脫掉分離液的鹽份；D)脫色將脫鹽后的復(fù)合氨基酸液輸入到活性炭脫色釜中，須經(jīng)活性炭脫色處理；E)結(jié)晶為確保復(fù)合后氨基酸的活性，將復(fù)合后的液體在40～70℃，55～90KPa下真空濃縮后，冷卻得粗結(jié)晶體，再將所說的粗結(jié)晶體用95％乙醇洗滌后，重結(jié)晶一次，用蒸發(fā)器收回乙醇，得氨基酸結(jié)晶體。
F)包埋為保持氨基酸組的抗氧化性，將氨基酸結(jié)晶體置于高分子體中，并置入高剪切乳化器中，在50～80℃條件下乳化30～80min，氨基酸結(jié)晶體與高分子包埋體的比為1∶1～4；G)干燥將包埋濃液輸送到干燥塔中，在160～260℃的熱風(fēng)中干燥成粉粒，得海洋金5肽成品粉粒，密封包裝。
所說的高分子體為殼聚糖和β糊精，殼聚糖和β糊精組成氨基酸結(jié)晶的包埋物質(zhì)，這種物質(zhì)的組合比例為1∶1～8。
本發(fā)明的積極效果集海洋多種生物的氨基酸特性，科學(xué)的萃取、分離，復(fù)合成5肽結(jié)構(gòu)的新型營養(yǎng)物質(zhì)，為人們能在日常生活中獲得全面營養(yǎng)、改善血液質(zhì)量，增強(qiáng)免疫能力提供了新資源。
具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明。
實(shí)例1取海龍、蛤蜊鮮活體各10kg，清洗除去殼體得13kg海龍蛤蜊新鮮肉體，置于200L酶解反應(yīng)釜中，加入20kg水，開始加熱，至48℃時(shí)加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶占酶解反應(yīng)底物的2.3％，并不斷攪拌4小時(shí)，采用超高溫瞬間滅菌器在140℃/s的條件下使酶失活，后離心去渣得酶解上層液30kg，水解度達(dá)90％。游離精氨酸與水解液之比為5％左右，得精氨酸水解液30kg。
取海參、海星的鮮活體各10kg，除去海參內(nèi)臟，海星的外殼得肉體10kg。斬碎后置于200L的酶解反應(yīng)釜內(nèi)加水15kg攪拌，加熱50℃恒溫?cái)嚢?，加入酶解反?yīng)底物3％的復(fù)合蛋白酶，酶解2小時(shí)，酶解完全后，采用超高溫滅菌器在140℃/s條件下使酶失活，離心去渣得酶解上層液，水解度達(dá)92％，游離脯氨酸與水解液之比為4％左右，得脯氨酸水解液25kg。
取海龍、扇貝新鮮體各10kg清洗除貝殼得新鮮海龍、扇貝肉體12kg，置于200L酶解反應(yīng)釜內(nèi)加水18kg，加熱至50℃，恒溫加入2.8％的復(fù)合蛋白酶，攪拌6小時(shí)，完全酶解后采用超高溫滅菌器在140℃/s條件下使酶失活，水解度達(dá)95％，游離天門冬氨酸與水解液之比為6％左右，得天門冬氨酸水解液30kg。
取扇貝、貽貝新鮮體各10kg清洗除去貝殼泥沙，得貝肉6kg，置于200L酶解反應(yīng)釜中，加水10kg，加熱至50℃，攪拌加入復(fù)合蛋白酶2.8％，恒溫?cái)嚢?小時(shí)，酶解后在140℃瞬間滅酶，水解度達(dá)86％以上，游離亮氨酸與水解液之比為7％左右，得亮氨酸水解液16kg。
取牡蠣、貽貝新鮮體各10kg，清洗除去貝殼泥沙，得肉體5kg，置于200L酶解反應(yīng)釜中，加水10kg，加熱至50℃，攪拌加入復(fù)合蛋白酶3.2％，恒溫?cái)嚢?小時(shí)，完全酶解后，離心分離渣，上層液通過140℃/S的瞬間滅酶處理，獲取游離賴氨酸與水解液之比為9％左右，得賴氨酸水解液13kg。
將1～5號氨基酸液體114kg加入3倍的蒸餾水稀釋，分別用30000、5000、1000分子質(zhì)量的超微膜過濾分離；取5000～1000分子質(zhì)量的液體342kg，輸入至701#與1×25陰陽離子交換器中，調(diào)節(jié)氨基酸的帶電狀態(tài)，除去鹽分，脫鹽后的氨基酸液體再通過活性炭過濾器脫色處理，得琥珀色的氨基酸液體340kg。采用熱泵噴射真空低溫濃縮器控制溫度為40℃～70℃，真空度55～90KPa，液體流量6kg/min濃縮至干基在30％～80％后，冷卻塔中結(jié)成晶體13.5kg。將13.5kg的粗晶體置于蒸發(fā)器內(nèi)加入95％乙醇20kg，蒸汽加熱，蒸發(fā)乙醇回餾至乙醇收集罐中，取出氨基酸結(jié)晶體7.6kg。
將7.6kg的氨基酸結(jié)晶體置于30％殼聚糖20kg溶液和40％β糊精30kg的溶液中，在高剪切乳化器中控制溫度在60℃，乳化時(shí)間為80min，使氨基酸結(jié)晶體的98％以上被包埋后，再用濃漿泵以150轉(zhuǎn)/分鐘的速度噴射到離心干燥噴霧塔，在240℃的熱風(fēng)中干燥成粉粒，得30kg23.5％的海洋金5肽，然后采用膠囊包裝成商品。
實(shí)例2按實(shí)例1的技術(shù)工藝，取干制的海參2kg加純凈水復(fù)水成10kg，干制海龍8kg加純凈水復(fù)水成20kg，冷凍的牡蠣肉10kg、扇貝肉20kg、貽貝肉20kg、海星肉10kg、蛤蜊肉10kg，加入適量比例的水和蛋白酶，經(jīng)復(fù)合酶解法分別獲取精氨酸、脯氨酸、冬氨酸、亮氨酸、賴氨酸水解液共150kg，稀釋成550kg，再經(jīng)超微膜分離、脫鹽、脫色、真空低溫濃縮、結(jié)晶、包埋，干燥成26kg24％的海洋金5肽成品。
權(quán)利要求
1.一種海洋金5肽的制備方法，其特征在于A)采用復(fù)合酶解法1)將鮮活體的海龍、蛤蜊肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海龍、蛤蜊肉與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海龍、蛤蜊肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取精氨酸水解液；2)將鮮活體的海參、海星肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海參、海星肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海參、海星肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取脯氨酸水解液；3)將鮮活體的海龍、扇貝肉體或干制復(fù)水肉體，置入反應(yīng)釜中，海龍、扇貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海龍、扇貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取天門冬氨酸水解液；4)將鮮活的扇貝、貽貝肉體或冷凍肉體，置入反應(yīng)釜中，扇貝、貽貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物扇貝、貽貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取亮氨酸水解液；5)將鮮活牡蠣、貽貝肉體或冷凍肉體，置入反應(yīng)釜中，牡蠣、貽貝肉體與水的比例為1∶1～3，加熱到40℃～60℃條件下，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的量是酶解反應(yīng)物海牡蠣、貽貝肉體量的2～4％，攪拌2～6小時(shí)，徹底降解后，在120℃～150℃/s條件下瞬間滅酶，后離心去渣得酶解液，獲取賴氨酸水解液；B)分離經(jīng)酶解所獲得上述五種酶解液均為深褐色混濁體，為除去大分子物質(zhì)、未水解蛋白、部分多糖并脫色，采用超濾分離，將酶解液用蒸餾水稀釋到2～4倍，用超濾膜分離并回收5000～1000D的含脯氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸等氨基酸5肽分子結(jié)構(gòu)較豐富的液體；C)脫鹽將分離液輸入到離子交換器用701#羧酸型的弱堿性陰離子交換樹脂及氫型1×25強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂，借調(diào)節(jié)氨基酸的帶電狀態(tài)，從而通過陰陽交換脫掉分離液的鹽份；D)脫色將脫鹽后的復(fù)合氨基酸液輸入到活性炭脫色釜中，須經(jīng)活性炭脫色處理；E)結(jié)晶為確保復(fù)合后氨基酸的活性，將復(fù)合后的液體在40～70℃，55～90KPa下真空濃縮后，冷卻得粗結(jié)晶體，再將所說的粗結(jié)晶體用95％乙醇洗滌后，重結(jié)晶一次，用蒸發(fā)器收回乙醇，得氨基酸結(jié)晶體。F)包埋為保持氨基酸組的抗氧化性，將氨基酸結(jié)晶體置于高分子體中，并置入高剪切乳化器中，在50～80℃條件下乳化30～80min，氨基酸結(jié)晶體與高分子包埋體的比為1∶1～4；G)干燥將包埋濃液輸送到干燥塔中，在160～260℃的熱風(fēng)中干燥成粉粒，得海洋金5肽成品粉粒，密封包裝。
2.按照權(quán)利要求
1所述的海洋金5肽的制備方法，其特征在于所說的高分子體為殼聚糖和β糊精，殼聚糖和β糊精組成氨基酸結(jié)晶的包埋物質(zhì)，這種物質(zhì)的組合比例為1∶1～8。
專利摘要
一種海洋金5肽的制備方法，其特征在于采用復(fù)合酶解法分別獲取精氨酸水解液、脯氨酸水解液、天門冬氨酸水解液、亮氨酸水解液、賴氨酸水解液；后用超濾膜分離并回收5000～1000D的含脯氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸等氨基酸5肽分子結(jié)構(gòu)較豐富的液體；再脫鹽、脫色處理、結(jié)晶體、及包埋體、干燥成粉粒，得海洋金5肽成品粉粒。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是集海洋多種生物的氨基酸特性，科學(xué)的萃取、分離，復(fù)合成5肽結(jié)構(gòu)的新型營養(yǎng)物質(zhì)。
文檔編號A23J3/34GK1994107SQ200510136812
公開日2007年7月11日 申請日期2005年12月31日
發(fā)明者李長青, 王慶玉, 王云華, 任方方, 王紅 申請人:大連玉璘企業(yè)集團(tuán)有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan