本發(fā)明涉及一種飼料的制備方法，尤其涉及一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法。
背景技術(shù)：
我國(guó)是世界上最大的甘薯生產(chǎn)國(guó)，常年甘薯種植面積為7500～8000萬(wàn)畝，占我國(guó)耕地總面積的4.2%，占世界60%左右的種植面積，產(chǎn)量占世界總產(chǎn)80%左右。甘薯渣是甘薯淀粉加工過(guò)程中產(chǎn)生的殘?jiān)?，其含水量高、自帶菌多，容易腐敗變質(zhì)，干物質(zhì)中蛋白含量低、纖維含量高，通常被當(dāng)作廢棄物丟棄或作為低質(zhì)飼料原料加以簡(jiǎn)單利用，造成資源的浪費(fèi)和環(huán)境的污染，如何開(kāi)發(fā)和利用甘薯渣資源已成為當(dāng)前我國(guó)淀粉行業(yè)迫切需要解決的難題。用生物技術(shù)，特別是微生物發(fā)酵技術(shù)處理飼料原料、提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，是低質(zhì)飼料資源開(kāi)發(fā)的安全高效方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，通過(guò)利用復(fù)合益生菌采用固態(tài)發(fā)酵的方式，選擇一定的發(fā)酵條件，可改變甘薯渣和米糠粕混合飼料化學(xué)組成，提高了飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，降低了飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子含量，不僅可以提高動(dòng)物的免疫力，還有防治豬水腫的作用。
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨13-17份、碘化鉀7-9份、甜菜堿4-5份、二丁基羥基甲苯8.5-10.5份、乙氧基喹啉5-6份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌180-220克、植物乳酸桿菌25-35克、枯草芽孢桿菌40-60克、堿性蛋白酶45-55克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：4.5-5.5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1-2%，前三天的發(fā)酵溫度為30-35℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為5-7天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
植物乳酸桿菌可以在山東寶來(lái)利來(lái)生物工程股份有限公司購(gòu)買(mǎi)，枯草芽孢桿菌和堿性蛋白酶可以在河北邢臺(tái)倍思特生物科技有限公司購(gòu)買(mǎi)，啤酒酵母菌可以在安琪酵母股份有限公司購(gòu)買(mǎi)。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：
本發(fā)明先利用復(fù)合益生菌（啤酒酵母菌、植物乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌）進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，然后在發(fā)酵過(guò)程中采用分階段溫度發(fā)酵及通入氧氣和氬氣的混合氣體，發(fā)酵原料及發(fā)酵條件聯(lián)合作用，改變了甘薯渣和米糠粕混合飼料化學(xué)組成，制得的甘薯渣發(fā)酵飼料可以提高飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，降低飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子含量，不僅可以提高動(dòng)物的免疫力，還有防治豬水腫的作用。
具體實(shí)施例：
實(shí)施例1：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨13份、碘化鉀7份、甜菜堿4份、二丁基羥基甲苯8.5份、乙氧基喹啉5份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌180克、植物乳酸桿菌25克、枯草芽孢桿菌40克、堿性蛋白酶45克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：4.5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1%，前三天的發(fā)酵溫度為30℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為5天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
實(shí)施例2：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨15份、碘化鉀8份、甜菜堿4.5份、二丁基羥基甲苯9.5份、乙氧基喹啉5.5份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌200克、植物乳酸桿菌30克、枯草芽孢桿菌50克、堿性蛋白酶50克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1.5%，前三天的發(fā)酵溫度為33℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為6天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
實(shí)施例3：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨16份、碘化鉀9份、甜菜堿4.5份、二丁基羥基甲苯8.5份、乙氧基喹啉5份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌210克、植物乳酸桿菌30克、枯草芽孢桿菌55克、堿性蛋白酶50克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：5.5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1%，前三天的發(fā)酵溫度為32℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為6天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
實(shí)施例4：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨17份、碘化鉀9份、甜菜堿5份、二丁基羥基甲苯10.5份、乙氧基喹啉6份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌220克、植物乳酸桿菌35克、枯草芽孢桿菌60克、堿性蛋白酶55克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：5.5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為2%，前三天的發(fā)酵溫度為35℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為7天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
對(duì)比例1：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨10份、碘化鉀10份、甜菜堿8份、二丁基羥基甲苯5份、乙氧基喹啉2份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌150克、植物乳酸桿菌40克、枯草芽孢桿菌30克、堿性蛋白酶60克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：4l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為3%，前三天的發(fā)酵溫度為38℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為8天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
其余同實(shí)施例1。
對(duì)比例2：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨13份、碘化鉀7份、甜菜堿4份、二丁基羥基甲苯8.5份、乙氧基喹啉5份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加面包酵母菌180克、植物乳酸桿菌25克、枯草芽孢桿菌40克、堿性蛋白酶45克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：4.5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1%，前三天的發(fā)酵溫度為30℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為5天，即得。
其中，面包酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
對(duì)比例3：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨15份、碘化鉀8份、甜菜堿4.5份、二丁基羥基甲苯9.5份、乙氧基喹啉5.5份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌200克、植物乳酸桿菌30克、枯草芽孢桿菌50克、堿性蛋白酶50克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氬氣和氧氣的混合氣體，混合氣體流量為：5l/min，混合氣體中氬氣的體積含量為1.5%，前三天的發(fā)酵溫度為32℃，發(fā)酵時(shí)間為5-7天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
對(duì)比例4：
一種甘薯渣發(fā)酵飼料的制備方法，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：甘薯渣100份、米糠粕100份、丙酸銨17份、碘化鉀9份、甜菜堿5份、二丁基羥基甲苯10.5份、乙氧基喹啉6份，具體制備過(guò)程為：將各個(gè)原料混合均勻，得到混合飼料，每噸混合飼料添加啤酒酵母菌220克、植物乳酸桿菌35克、枯草芽孢桿菌60克、堿性蛋白酶55克，采用固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵過(guò)程中通入氧氣，氧氣流量為：5.5l/min，前三天的發(fā)酵溫度為35℃，后期溫度為室溫，全部發(fā)酵時(shí)間為7天，即得。
其中，啤酒酵母菌的含菌量為3億cfu/克，植物乳酸桿菌的含菌量為3億cfu/克，枯草芽孢桿菌的含菌量為1000億cfu/克。
1、本發(fā)明制得的甘薯渣發(fā)酵飼料營(yíng)養(yǎng)成份檢測(cè)結(jié)果
表1本發(fā)明制得的甘薯渣發(fā)酵飼料營(yíng)養(yǎng)成份檢測(cè)結(jié)果
從表1可知，本發(fā)明制得的甘薯渣發(fā)酵飼料（實(shí)施例1-4）的18種氨基酸總量、粗蛋白、粗脂肪含量較高，而且明顯高于對(duì)比例1（工藝參數(shù)不同）、對(duì)比例2（添加的菌種不同）、對(duì)比例3（發(fā)酵溫度不同）、對(duì)比例4（發(fā)酵過(guò)程中只通入氧氣），尤其是以實(shí)施例2的效果最優(yōu)，可見(jiàn)本發(fā)明的工藝參數(shù)、菌種種類(lèi)、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)通入的氣體均對(duì)制得的飼料的營(yíng)養(yǎng)成份含量有影響，因此本發(fā)明采用了特定的工藝參數(shù)、選用了一定的菌種、溫度及氣體環(huán)境，制得的甘薯渣發(fā)酵飼料營(yíng)養(yǎng)成份含量高，提高了飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
2、本發(fā)明對(duì)提高免疫力的作用：
取90只小鼠，體重18-24g，隨機(jī)分成9組，每組10只，取8組，分別按實(shí)施例1-4和對(duì)比例1-4喂食實(shí)施例1-4和對(duì)比例1-4組制得的飼料，1g/kg小鼠每天，1組對(duì)照組給予等量蒸餾水，每日一次，連續(xù)給予30天，于第25天腹腔注射2%srbc，免疫5天后，脫臼處死，取脾，200目篩網(wǎng)過(guò)濾，用hanks液洗3次，每次100or/min離心10min，將細(xì)胞懸浮于5mlrpm1640培養(yǎng)液中。將表層培養(yǎng)基加熱溶解，45℃水浴保溫，與等量2倍濃度hanks液混合，分裝小試管，每管o.5ml，加入50μl110%srbc，20μl脾細(xì)胞懸液，混勻，倒片，二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1小時(shí)，加入用sa緩沖液稀釋的補(bǔ)體（1:10)，繼續(xù)培養(yǎng)1小時(shí)，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss13.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果如表1所示。
表2本發(fā)明對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞的影響(
從表2可知，本發(fā)明制得的甘薯渣發(fā)酵飼料（實(shí)施例1-4）可以明顯升高小鼠的抗體生成細(xì)胞，而且效果明顯優(yōu)于對(duì)比例1（工藝參數(shù)不同）、對(duì)比例2（添加的菌種不同）、對(duì)比例3（發(fā)酵溫度不同）、對(duì)比例4（發(fā)酵過(guò)程中只通入氧氣），尤其是以實(shí)施例2的效果最優(yōu)，可見(jiàn)本發(fā)明的工藝參數(shù)、菌種種類(lèi)、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)通入的氣體均對(duì)制得的飼料提高免疫力的療效有影響，因此本發(fā)明采用了特定的工藝參數(shù)、選用了一定的菌種、溫度及氣體環(huán)境，制得的甘薯渣發(fā)酵飼料營(yíng)養(yǎng)有提高抗體生成細(xì)胞的作用，可以提高動(dòng)物的免疫力。
2.本發(fā)明對(duì)水腫豬的影響
選擇養(yǎng)殖場(chǎng)平均體重為20-22kg的患水腫豬90頭，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析體重差異不顯著。隨機(jī)分成對(duì)照組、實(shí)施例1-4組和對(duì)比例1-4組，共8組，每組10頭。對(duì)照組飼喂常規(guī)飼料，實(shí)施例1-4組和對(duì)比例1-4組分別飼喂常規(guī)飼料+10%實(shí)施例1-4和對(duì)比例1-4組制得的飼料，每日3次，限食，每日每頭喂1.5kg，
試驗(yàn)豬自由采食和飲水，試驗(yàn)期內(nèi)每天觀察并記錄豬康復(fù)情況和豬只的精神狀況。試驗(yàn)期共20天，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱體重，并結(jié)料。記錄豬水腫病康復(fù)情況。計(jì)算每個(gè)處理組日增重、日均采食量、料肉比（采食量/增重）和康復(fù)率。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表3所示。
康復(fù)標(biāo)準(zhǔn)：病豬臨床癥狀完全消除，采食、飲水、精神狀態(tài)恢復(fù)正常。
表3本發(fā)明對(duì)水腫豬的影響
從表3可知，本發(fā)明制得的甘薯渣發(fā)酵飼料（實(shí)施例1-4）可以提高豬的生長(zhǎng)速率，還降低了水腫發(fā)病率，而且效果明顯優(yōu)于對(duì)比例1（工藝參數(shù)不同）、對(duì)比例2（添加的菌種不同）、對(duì)比例3（發(fā)酵溫度不同）、對(duì)比例4（發(fā)酵過(guò)程中只通入氧氣），尤其是以實(shí)施例2的效果最優(yōu)，可見(jiàn)本發(fā)明的工藝參數(shù)、菌種種類(lèi)、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)通入的氣體均對(duì)制得的飼料的療效有影響，因此本發(fā)明采用了特定的工藝參數(shù)、選用了一定的菌種、溫度及氣體環(huán)境，制得的甘薯渣發(fā)酵飼料，在提高豬水腫康復(fù)率的同時(shí)還加快了生長(zhǎng)速度，對(duì)豬水腫有一定的治療作用。