本發(fā)明涉及水產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種富硒虹鱒飼料及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
硒，自1817年被瑞典化學(xué)家berzelius發(fā)現(xiàn)以來(lái)，很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)都被認(rèn)為是一種有毒元素。直到1957年，schwarz和foltz發(fā)現(xiàn)抑制大鼠由進(jìn)食引發(fā)的肝壞死第三因子的主要成分中就含有硒，硒作為動(dòng)物體內(nèi)必需的微量元素的身份才逐漸被人們所認(rèn)識(shí)。隨后，大量的研究表明，硒在各種正常的機(jī)體功能中扮演著重要角色，缺硒將導(dǎo)致克山病，白肌病以及心血管疾病等多種疾病。
硒廣泛地分布于土壤中，可由植物吸收轉(zhuǎn)化，通過(guò)食物鏈控制著動(dòng)物及人類(lèi)的硒營(yíng)養(yǎng)狀況，因此人類(lèi)的硒營(yíng)養(yǎng)狀況與硒的分布緊密相關(guān)。盡管我國(guó)存在有“世界硒都”之稱(chēng)的恩施，但是我國(guó)的土壤硒資源分布嚴(yán)重不均，我國(guó)存在一條包括黑、吉、遼東北三省地區(qū)，北京、河北、山東等華北地區(qū)，內(nèi)蒙古、甘肅等北部及西北部地區(qū)，云、貴、川及西藏等西南地區(qū)在內(nèi)的由東北向西南的低硒地帶。如何解決低硒地帶人民的補(bǔ)硒問(wèn)題越來(lái)越受到關(guān)注。
硒的存在形式分為無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒兩大類(lèi)，無(wú)機(jī)硒包括硒酸鹽、亞硒酸鹽等，無(wú)機(jī)硒對(duì)于動(dòng)物及人來(lái)說(shuō)，生物利用率較低，毒性風(fēng)險(xiǎn)大，不當(dāng)使用極易造成硒中毒。而有機(jī)硒則主要指與生物分子形態(tài)結(jié)合的硒，可由無(wú)機(jī)硒經(jīng)動(dòng)植物、微生物吸收轉(zhuǎn)化而來(lái)，包括硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸等，有機(jī)硒在動(dòng)物體內(nèi)的生物利用率高，毒性小，更適合補(bǔ)硒要求。
隨著硒在生物體內(nèi)各種有益功能的陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，人們補(bǔ)硒的欲望也越來(lái)越強(qiáng)烈，隨之而來(lái)的關(guān)于富硒食品的研發(fā)也越來(lái)越多。魚(yú)類(lèi)作為一種優(yōu)質(zhì)的食物蛋白來(lái)源，關(guān)于其富硒產(chǎn)品的研究也相對(duì)較多，諸如申請(qǐng)?zhí)枮閏n201010579798.1的中國(guó)專(zhuān)利所公布的富硒有機(jī)魚(yú)及其培育方法，申請(qǐng)?zhí)枮?01110392618.3的中國(guó)專(zhuān)利所公布的用于培育富硒魚(yú)的富硒飼料及其制備方法和應(yīng)用，這些專(zhuān)利所公布的富硒飼料均能培育出富硒魚(yú)，但是各種不同魚(yú)類(lèi)具有不同的營(yíng)養(yǎng)需求，因此這些專(zhuān)利并不一定適用于本發(fā)明所關(guān)注的虹鱒。另外，申請(qǐng)?zhí)枮?01410532760.7的中國(guó)專(zhuān)利公布了一種富硒冷水魚(yú)飼料，盡管該發(fā)明所提供的飼料能在短期內(nèi)使虹鱒肌肉達(dá)到硒富集，但其飼料硒含量相對(duì)較高(5-20mg/kg)，大量研究表明，盡管以有機(jī)硒形式存在，較高的飼料硒含量仍會(huì)對(duì)虹鱒造成毒性作用，降低虹鱒的生長(zhǎng)性能、飼料利用及免疫機(jī)能等諸多方面，降低產(chǎn)量，而此發(fā)明并未對(duì)虹鱒本身的健康狀況作出評(píng)價(jià)。因此單純?yōu)榱诉_(dá)到富硒目的，而忽略了過(guò)高飼料硒含量所帶來(lái)的減產(chǎn)，將得不償失。因此，獲得一種安全，高效又與虹鱒適配的富硒飼料迫在眉睫。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種富硒虹鱒飼料，該飼料在確保在培育出富硒虹鱒的同時(shí)不會(huì)對(duì)虹鱒的生長(zhǎng)性能、飼料利用及肌肉品質(zhì)等造成負(fù)面影響，確保合適的硒添加，避免過(guò)量添加，從而帶來(lái)減產(chǎn)及魚(yú)類(lèi)肉品質(zhì)的下降。
本發(fā)明還有一個(gè)目的在于提供一種富硒虹鱒飼料的制備方法，方法簡(jiǎn)單，易行。
本發(fā)明的最后一個(gè)目的在于一種富硒虹鱒飼料在制備富硒虹鱒飼料中的應(yīng)用。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種富硒虹鱒飼料，包括：
秘魯魚(yú)粉300-350g
豬血粉40-70g
磷蝦粉30-50g
雞肉粉120-180g
玉米蛋白粉40-60g
豆粕50-80g
大豆分離蛋白40-60g
谷朊粉30-50g
預(yù)糊化淀粉30-50g
魷魚(yú)油100-140g
大豆卵磷脂3-7g
甜菜堿3-7g
氯化膽堿0.8-1.2g
礦物質(zhì)預(yù)混料35-50g
維生素預(yù)混料2-3g
硒1.65-7.00mg
每1000g礦物質(zhì)預(yù)混料包括：五水乳酸鈣350g，磷酸氫二鉀250g，一水磷酸二氫鈣175g，氯化鈉75g，碘化鉀0.125g，五水硫酸銅37.5g，一水硫酸錳2.5g，一水硫酸鋅14.05g及碳酸鉀35g，其余為輔料。
每1000g維生素預(yù)混料包括：維生素a60g，維生素b18g，維生素b212g，維生素b38g，維生素b524g，維生素b612g，維生素b70.4g，維生素b120.02g，維生素c600g，維生素d30.04g，維生素e96g，維生素k38g及葉酸4g，其余為輔料。
所述硒為有機(jī)硒，優(yōu)選的以酵母硒的形式添加；
所述的輔料為本領(lǐng)域的常規(guī)輔料，優(yōu)選為α-纖維素。
以上所述的方案中，優(yōu)選的，富硒虹鱒飼料包括：
秘魯魚(yú)粉334g
豬血粉50g
磷蝦粉40g
雞肉粉150g
玉米蛋白粉50g
豆粕60g
大豆分離蛋白50g
谷朊粉40g
預(yù)糊化淀粉40g
魷魚(yú)油130g
大豆卵磷脂5g
甜菜堿5g
氯化膽堿1g
礦物質(zhì)預(yù)混料40g
維生素預(yù)混料2.5g
硒4mg。
一種富硒虹鱒飼料的制備方法，包括：
1)將以上所有組分粉碎過(guò)60目篩；
2)維生素預(yù)混料的配制：分別按維生素預(yù)混料配比中各組維生素含量的高低，從低到高，逐一向輔料中進(jìn)行添加原料，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，既得維生素預(yù)混料；
3)礦物質(zhì)預(yù)混料的配制：分別按礦物質(zhì)預(yù)混料中各組維生素含量的高低，從低到高，逐一向輔料中進(jìn)行添加原料，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，既得礦物質(zhì)預(yù)混料；
4)根據(jù)飼料配方中原料所占比例，除魷魚(yú)油外，其余原料按飼料配方中各組分含量的高低，從低到高進(jìn)行添加，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，得混合物1；
5)向混合物1中加入魷魚(yú)油，并混合均勻，得混合物2；
6)向每kg混合物2中加入0.25kg清水，混合均勻，得混合物3；
7)將混合物3經(jīng)75℃膨化，制粒既得飼料顆粒；
8)將得到的飼料顆粒置于通風(fēng)處攤開(kāi)，避免陽(yáng)光照射，自然風(fēng)干，保證水分＜10％，既得本發(fā)明的富硒虹鱒飼料。
一種富硒虹鱒飼料在制備富硒虹鱒飼料中的應(yīng)用，包括利用本發(fā)明提供的飼料喂養(yǎng)虹鱒，或是與其他飼料配合喂養(yǎng)虹鱒。
相比于現(xiàn)有的技術(shù)方案，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：
本發(fā)明的富硒虹鱒飼料嚴(yán)格按照虹鱒的營(yíng)養(yǎng)需求而設(shè)計(jì)，營(yíng)養(yǎng)均衡，適口性好，能滿(mǎn)足虹鱒正常生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要，并添加磷蝦粉及甜菜堿作為誘食劑，促進(jìn)魚(yú)類(lèi)攝食。并且，本發(fā)明的富硒虹鱒飼料不僅具有保肝護(hù)膽之功效，而且還能增強(qiáng)虹鱒的抗氧化能力及非特異性免疫機(jī)能。飼料基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)成分如表1所示：
表1一種富硒虹鱒飼料營(yíng)養(yǎng)成分表
本發(fā)明所添加硒源為新興有機(jī)硒源酵母硒，毒性小，生物利用率高；
本發(fā)明嚴(yán)格控制酵母硒的添加量，在培育富硒虹鱒的前提下，保證虹鱒的健康，最大限度確保生長(zhǎng)性能、飼料利用及肉品質(zhì)。
本發(fā)明的富硒虹鱒飼料具有保肝護(hù)膽功效，并能從一定程度上提升虹鱒的抗氧化能力及非特異性免疫機(jī)能。
利用本發(fā)明所提供的飼料養(yǎng)殖虹鱒70天，虹鱒肌肉總硒含量(以濕重計(jì))可達(dá)到0.57-1.12mg/kg，全魚(yú)硒含量可達(dá)到0.58-1.06mg/kg。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何人在本發(fā)明權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。本發(fā)明所述技術(shù)方案，如未特別說(shuō)明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)；所用試劑或材料，如未特別說(shuō)明，均來(lái)源于商業(yè)渠道。
實(shí)施例1：
一種富硒虹鱒飼料(飼料1)，包括：
每1000g礦物質(zhì)預(yù)混料包括：五水乳酸鈣350g，磷酸氫二鉀250g，一水磷酸二氫鈣175g，氯化鈉75g，碘化鉀0.125g，五水硫酸銅37.5g，一水硫酸錳2.5g，一水硫酸鋅14.05g及碳酸鉀35g，其余為輔料。
每1000g維生素預(yù)混料包括：維生素a60g，維生素b18g，維生素b212g，維生素b38g，維生素b524g，維生素b612g，維生素b70.4g，維生素b120.02g，維生素c600g，維生素d30.04g，維生素e96g，維生素k38g及葉酸4g，其余為輔料。
所述硒以酵母硒的形式添加，本發(fā)明使用的酵母硒，經(jīng)電感耦合等離子質(zhì)譜測(cè)定，其硒含量為4000mg/kg；
所述的輔料為α-纖維素。
一種富硒虹鱒飼料(飼料2)，包括：
其余與飼料1相同。
一種富硒虹鱒飼料(飼料3)，包括：
其余與飼料1相同。
一種富硒虹鱒飼料的制備方法，包括：
1)將飼料1、飼料2或飼料3的組分粉碎過(guò)60目篩；
2)維生素預(yù)混料的配制：分別按維生素預(yù)混料配比中各組維生素含量的高低，從低到高，逐一向α-纖維素中進(jìn)行添加原料，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，既得維生素預(yù)混料；
3)礦物質(zhì)預(yù)混料的配制：分別按礦物質(zhì)預(yù)混料中各組維生素含量的高低，從低到高，逐一向α-纖維素中進(jìn)行添加原料，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，既得礦物質(zhì)預(yù)混料；
4)根據(jù)飼料配方中原料所占比例，除魷魚(yú)油外，其余原料按飼料配方中各組分含量的高低，從低到高進(jìn)行添加，每添加一種原料后迅速混勻，再進(jìn)行下一種原料的添加，直至所有原料添加完畢，充分混勻，得混合物1；
5)向混合物1中加入魷魚(yú)油，并混合均勻，得混合物2；
6)向每kg混合物2中加入0.25kg清水，混合均勻，得混合物3；
7)將混合物3經(jīng)75℃膨化，制粒既得飼料顆粒；
將得到的飼料顆粒置于通風(fēng)處攤開(kāi)，避免陽(yáng)光照射，自然風(fēng)干，保證水分＜10％，既得富硒虹鱒飼料。
按照上述配方和方法，制得了三種硒含量不同的富硒飼料，分別為飼料1、飼料2和飼料3。用于以下實(shí)施例。
實(shí)施例2：
一種富硒虹鱒飼料在培育富硒虹鱒中的應(yīng)用：
本實(shí)施例以實(shí)施例1中所獲得的3種飼料作為實(shí)驗(yàn)飼料，進(jìn)行養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，對(duì)飼料1～3的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、灰分及總硒含量進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果如表2：
表2實(shí)驗(yàn)飼料近似成分及總硒含量
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將180尾平均體重為144.87±26.45g的虹鱒隨機(jī)放入9口環(huán)形塑料缸(1000l)中，9口缸隨機(jī)分為3組，所有魚(yú)饑餓24小時(shí)并逐條稱(chēng)重。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，4組魚(yú)每天分別飽食投喂四種實(shí)驗(yàn)飼料兩次(9：00和16:00)，詳細(xì)記錄攝食量，水溫控制在9-11℃，溶氧6.5±0.5mg/l。經(jīng)過(guò)70天養(yǎng)殖后，停食24小時(shí)，并逐條稱(chēng)重，量體長(zhǎng)。并每缸隨機(jī)取6尾魚(yú)，其中3尾取用于肌肉樣品采集，并稱(chēng)量肝臟及內(nèi)臟團(tuán)重量，其余3尾用于全魚(yú)指標(biāo)測(cè)定。所有結(jié)果通過(guò)spss19.0(spssinc.,chicago,il,usa)進(jìn)行單因素方差分析，在具有顯著性差異情況下進(jìn)行duncan’s多重比較，顯著性水平設(shè)定為0.05。
虹鱒生長(zhǎng)性能及飼料利用如表3所示：
表3生長(zhǎng)性能及飼料利用
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，三個(gè)處理組中，虹鱒各項(xiàng)生長(zhǎng)及飼料利用相關(guān)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明本發(fā)明所提供的一種富硒虹鱒飼料中的酵母硒添加水平在虹鱒能夠適應(yīng)的安全范圍內(nèi)，并未對(duì)虹鱒造成毒性作用，從而降低虹鱒生長(zhǎng)性能及飼料利用。本實(shí)驗(yàn)中，各組虹鱒存活率為100％，說(shuō)明本發(fā)明的基礎(chǔ)飼料及富硒飼料能夠滿(mǎn)足虹鱒的基本需求，均能保證虹鱒的存活；另外，飼料1,2,3的餌料系數(shù)均達(dá)到了1.4以下，特別是飼料2達(dá)到了1.27，說(shuō)明本發(fā)明提供的富硒虹鱒飼料具有較高的飼料轉(zhuǎn)化率，能很好地被虹鱒所消化吸收，而本實(shí)驗(yàn)所用養(yǎng)殖溫度為9-11℃，相對(duì)較低，故而魚(yú)的生長(zhǎng)速度較慢，如果在更加理想的水溫中使用本發(fā)明的富硒虹鱒飼料，餌料系數(shù)還能降低。這些結(jié)果均說(shuō)明，本發(fā)明的富硒虹鱒飼料均能很好地滿(mǎn)足虹鱒的生長(zhǎng)需求，并且飼料利用率較高，且所添加酵母硒含量在虹鱒所能承受的安全范圍內(nèi)，對(duì)虹鱒無(wú)毒性，投喂本發(fā)明所提供的一種富硒虹鱒飼料不會(huì)影響虹鱒的生長(zhǎng)性能、飼料利用及肌肉品質(zhì)，而帶來(lái)減產(chǎn)及肌肉品質(zhì)的下降。
虹鱒肌肉及全魚(yú)總硒含量如表4所示：
表4肌肉及全魚(yú)總硒含量(mg/kg濕重)
每一行中，不同上標(biāo)字母表示具有顯著性差異(p＜0.05)。
經(jīng)過(guò)70天的養(yǎng)殖，本發(fā)明所提供的飼料1，飼料2，飼料3顯著提高了虹鱒肌肉及全魚(yú)總硒含量，并且肌肉和全魚(yú)的總硒含量的增加具有劑量效應(yīng)，說(shuō)明本發(fā)明所提供的富硒虹鱒飼料能夠有較好的富硒效果。
虹鱒肌肉品質(zhì)如表5所示
表5肌肉品質(zhì)
每一行中，不同字母代表顯著性差異(p＜0.05)。
結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)中，除滴水損失外，其余肌肉品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明本發(fā)明所提供的富硒虹鱒飼料的硒添加量并未降低虹鱒的肌肉品質(zhì)，本發(fā)明所推薦的硒添加量是可接受的。盡管各指標(biāo)(除滴水損失外)均無(wú)顯著性差異，從各項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)值結(jié)果來(lái)看，在肌肉品質(zhì)方面，以4mg硒每kg飼料的添加水平為最優(yōu)。
綜上，本實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明所提供的一種富硒虹鱒飼料能夠滿(mǎn)足虹鱒的正常需求，保證存活率，并且具有較高的飼料轉(zhuǎn)換率，能被虹鱒很好地吸收利用；本發(fā)明的富硒虹鱒飼料的硒添加量在虹鱒的安全范圍內(nèi)，并未對(duì)虹鱒的生長(zhǎng)性能，飼料利用及肌肉品質(zhì)造成不利影響，并且在以每kg飼料添加4mg硒水平時(shí)，虹鱒的肌肉品質(zhì)達(dá)最優(yōu)。
實(shí)施例3：
為了進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明所提供的一種富硒虹鱒飼料的飼用效果，本實(shí)施例通過(guò)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明的一種富硒虹鱒飼料與一種商業(yè)飼料進(jìn)行了養(yǎng)殖效果的對(duì)比。
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將480尾平均體重為12.37±0.03g的虹鱒隨機(jī)放入6口環(huán)形塑料缸(1000l)中，6口缸隨機(jī)分為2組，所有魚(yú)饑餓24小時(shí)并逐條稱(chēng)重。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，2組魚(yú)每天分別飽食投喂一種市售商業(yè)飼料及實(shí)施例1所制得的飼料2，每日投喂3次(7：00，12:30及18:00)，詳細(xì)記錄攝食量，水溫控制在16-17℃，溶氧8.0±0.5mg/l。經(jīng)過(guò)30天養(yǎng)殖后，停食24小時(shí)，并逐條稱(chēng)重，量體長(zhǎng)。另外每缸隨機(jī)取5尾魚(yú)，采集血清，測(cè)量肝臟及內(nèi)臟團(tuán)重量。所有結(jié)果通過(guò)spss19.0(spssinc.,chicago,il,usa)進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，顯著性水平設(shè)定為0.05。
生長(zhǎng)及飼料利用結(jié)果如表6所示：
表6生長(zhǎng)及飼料利用
*表示同一行數(shù)據(jù)存在顯著性差異(p＜0.05)。
生長(zhǎng)及飼料利用結(jié)果表明，飼料2組中虹鱒的存活率為100％，高于商業(yè)飼料組；飼料2顯著增加了虹鱒的增重率及特定生長(zhǎng)率，說(shuō)明本發(fā)明所提供的飼料所飼養(yǎng)的虹鱒具有更好的生長(zhǎng)性能；并且，飼料2的餌料系數(shù)比商業(yè)飼料更低，且數(shù)值上小于1，說(shuō)明本發(fā)明所提供的富硒虹鱒飼料的飼料利用率極高，能很好地被虹鱒所利用。
血清相關(guān)酶活性指標(biāo)結(jié)果如表7所示：
表7血清相關(guān)酶活性指標(biāo)
*表示同一行數(shù)據(jù)存在顯著性差異(p＜0.05)。
血清中，谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的變化反應(yīng)了肝功能的變化，當(dāng)肝受損時(shí)，血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與谷草轉(zhuǎn)氨酶活性會(huì)提升，本實(shí)驗(yàn)中，相比于商業(yè)飼料，投喂飼料2顯著降低了虹鱒血清的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，說(shuō)明本發(fā)明的富硒虹鱒飼料相比于市售商業(yè)虹鱒飼料能更好地維護(hù)虹鱒肝功能，具有保肝護(hù)膽之功效；血清抗氧化相關(guān)酶中，飼料2顯著提升了虹鱒總超氧化物酶活性，說(shuō)明本發(fā)明的飼料相對(duì)于市售商業(yè)虹鱒飼料對(duì)于虹鱒的抗氧化能力有一定提升，丙二醛含量反映了脂質(zhì)過(guò)氧化水平，投喂飼料2的虹鱒血清中顯著降低的丙二醛含量也證實(shí)了本發(fā)明的富硒虹鱒飼料對(duì)于虹鱒抗氧化能力的提升；溶菌酶，堿性磷酸酶和酸性磷酸酶是與非特異性免疫相關(guān)的酶，飼料2顯著增強(qiáng)了虹鱒血清堿性磷酸酶與酸性磷酸酶活性，說(shuō)明投喂本發(fā)明的富硒虹鱒飼料對(duì)于虹鱒的非特異性免疫機(jī)能同樣存在一定的增強(qiáng)作用。
綜上，本實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明了本發(fā)明所提供的一種富硒虹鱒飼料相比于市售商業(yè)飼料具有更加優(yōu)良的性能。