本發(fā)明涉及酵素粉制備領(lǐng)域，尤其涉及一種白刺果酵素的制備方法。

背景技術(shù)：

酵素是日本和臺(tái)灣地區(qū)的說法，通常稱作“酶”，其是催化特定化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì)、rna或其復(fù)合體，也有專家認(rèn)為酵素是由多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì)構(gòu)成的活性物質(zhì)，被稱為“活性的物質(zhì)”和“掌握所有生命活動(dòng)的物質(zhì)”。眾所周知，營養(yǎng)素必須在酵素的作用下分解到15μm左右的小分子，才能穿過腸壁上皮細(xì)胞，被毛細(xì)血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝臟則分泌脂肪酵素，而脾臟則分泌各種綜合酵素，這些酵素通過對(duì)營養(yǎng)素的分解促進(jìn)其吸收，從而達(dá)到全面調(diào)理的綜合作用。由此可知，酵素的作用至關(guān)重要。

傳統(tǒng)酵素加工過程花色苷易被分解，營養(yǎng)損失嚴(yán)重，并且發(fā)酵周期較長，至少數(shù)月至一年。發(fā)酵周期過長，效率低，成本高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種成本低廉、周期短的白刺果酵素的制備方法。

為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經(jīng)超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉；

⑵所述白刺果粉中按1：1的重量比加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25~30分鐘，經(jīng)自然冷卻至室溫，得到白刺果原液；

⑶在所述白刺果原液中先加入預(yù)先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶，攪拌均勻后，于50~60℃酶解3~4小時(shí)，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶，攪拌均勻后，于40~50℃酶解2~4小時(shí)，得到酶解液；

⑷所述酶解液中按其重量依次接種1.5~2%酵母菌、4~5%乳酸菌和0.5~1%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)1~3天，經(jīng)過濾去除殘?jiān)蟮玫缴锨逡?，該上清液中?0g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液；

⑸所述白刺果酵素液經(jīng)冷凍干燥、粉碎至500~1000目后即得白刺果酵素粉。

所述步驟⑶中果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸所述白刺果原液中加入12~15g。

所述果膠酶-纖維素復(fù)合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5~1的重量比混合而成。

所述步驟⑶中果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

所述步驟⑶中蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸所述白刺果原液中加入14~15g；所述蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比混合而成。

所述步驟⑷中酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

所述步驟⑷中乳酸菌為嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌、雙歧桿菌的任意組合。

所述步驟⑸中冷凍干燥的條件是指溫度為-40℃~-80℃，真空度為10~40pa。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、本發(fā)明首次以青藏高原特色漿果白刺果為原料制備酵素，將白刺干果的保健活性功能與酵素生物活性功能相結(jié)合。

2、本發(fā)明采用冷凍干燥技術(shù)，花色苷活性不被破壞，營養(yǎng)得到最大保留，更加天然健康。

3、本發(fā)明采用酵母、乳酸菌和醋酸菌組合而成的純種混合發(fā)酵技術(shù)，實(shí)現(xiàn)發(fā)酵過程的全程精準(zhǔn)控制，所得產(chǎn)品品質(zhì)穩(wěn)定，質(zhì)量安全可控，且大大縮短酵素制備周期（從傳統(tǒng)工藝的數(shù)月至一年縮短至數(shù)周）。且比傳統(tǒng)方法制備的酵素營養(yǎng)價(jià)值更高（生物活性酶含量高）。

4、將實(shí)施例1~3的白刺果酵素分別按照gb/t23527-2009蛋白酶制劑中蛋白酶測定方法；gb/t24401-2009a-淀粉酶制劑中淀粉酶測定方法；gb/t23535-2009脂肪酶制劑中脂肪酶的測定方法和gb/t5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶(sod)活性的測定方法分別測量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及sod活性，取白刺果原液作為對(duì)比例。結(jié)果如表1所示：

表1

結(jié)果顯示，本發(fā)明的白刺果酵素包含豐富的生物酶活性成分，較白刺果汁具有顯著提高，取得了顯著的技術(shù)效果，是一種非常優(yōu)異的保健產(chǎn)品。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經(jīng)超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25分鐘，經(jīng)自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預(yù)先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于50℃酶解3小時(shí)，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶，攪拌均勻后，于40℃酶解2小時(shí)，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入12g。果膠酶-纖維素復(fù)合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入14g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比（kg/kg）混合而成。

⑷酶解液中按其重量依次接種1.5%酵母菌、4%乳酸菌和0.5%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)1天，經(jīng)過濾去除殘?jiān)蟮玫缴锨逡?，該上清液中?0g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

乳酸菌為嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌、雙歧桿菌的任意組合。

⑸白刺果酵素液在溫度為-40℃、真空度為10pa的條件下經(jīng)冷凍干燥、粉碎至500目后即得白刺果酵素粉。

實(shí)施例2一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經(jīng)超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱30分鐘，經(jīng)自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預(yù)先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于60℃酶解4小時(shí)，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶，攪拌均勻后，于50℃酶解4小時(shí)，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入15g。果膠酶-纖維素復(fù)合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：1的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶同實(shí)施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入15g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶同實(shí)施例1。

⑷酶解液中按其重量依次接種2%酵母菌、5%乳酸菌和1%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)3天，經(jīng)過濾去除殘?jiān)蟮玫缴锨逡海撋锨逡褐邪?0g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌、乳酸菌同實(shí)施例1。

⑸白刺果酵素液在溫度為-80℃、真空度為40pa的條件下經(jīng)冷凍干燥、粉碎至1000目后即得白刺果酵素粉。

實(shí)施例3一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經(jīng)超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱28分鐘，經(jīng)自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預(yù)先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于55℃酶解3.5小時(shí)，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶，攪拌均勻后，于45℃酶解3小時(shí)，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入13g。果膠酶-纖維素復(fù)合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.8的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶是同實(shí)施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入14.5g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復(fù)合酶同實(shí)施例1。

⑷酶解液中按其重量依次接種1.8%酵母菌、4.5%乳酸菌和0.8%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)2天，經(jīng)過濾去除殘?jiān)蟮玫缴锨逡?，該上清液中?0g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌、乳酸菌同實(shí)施例1。

⑸白刺果酵素液在溫度為-60℃、真空度為25pa的條件下經(jīng)冷凍干燥、粉碎至800目后即得白刺果酵素粉。