本發(fā)明屬于預(yù)防調(diào)理養(yǎng)護(hù)品領(lǐng)域，特別涉及一種制備具有減肥瘦身去脂功效的發(fā)酵組合物及制法。
背景技術(shù)：
植物酵素一直是酵素類(lèi)產(chǎn)品的暢銷(xiāo)品。植物酵素是將數(shù)十種不同的蔬果、谷類(lèi)、海藻類(lèi)及菇類(lèi)等植物，經(jīng)自然發(fā)酵研制而成，保留了植物中的營(yíng)養(yǎng)精華，含有人體需要的各種酵素、寡糖及多種維他命和礦物質(zhì)，又可產(chǎn)生豐富的sod抗氧化酶成分，提高體內(nèi)抗氧化能力，進(jìn)而增強(qiáng)免疫力?，F(xiàn)有酵素出現(xiàn)了一些添加益生菌的酵素以及酵素制備的保健食品。益生菌發(fā)酵果蔬，可激活果蔬中的有效功能成分，溶出更精華的活性功效物質(zhì)。但是，傳統(tǒng)的酵素工藝無(wú)法大范圍的靈活使用，或無(wú)功效性發(fā)酵組合物可在不同酵素的工業(yè)制備過(guò)程中靈活使用；為了提高酵素在促進(jìn)體內(nèi)新陳代謝、調(diào)理腸胃功能等方面的作用，以及適應(yīng)大范圍的使用，申請(qǐng)人對(duì)制備酵素的發(fā)酵物進(jìn)一步改良，并研制出提高酵素的功能性作用的配方。
功能性低聚糖是一類(lèi)具有生理活性、不被人體胃酸、胃酶降解，不在小腸吸收，可到達(dá)大腸部的低聚糖；低聚糖是益生元，是益生菌的生長(zhǎng)的底物，具有促進(jìn)人體益生菌的增殖等生理功能。通過(guò)將益生菌和功能性低聚糖共同使用，兩者之間具有協(xié)同作用，能促進(jìn)對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)功能。益生菌和低聚糖之間的協(xié)作效應(yīng)，即是合生元中的益生素和益生元之間的協(xié)作效應(yīng)，它們相鋪相成，共同發(fā)揮作用，促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)增殖，抑制有害菌生長(zhǎng)；研究表明，兩者使用可增加健康人糞便中雙歧桿菌的數(shù)量，但單獨(dú)服用益生菌并未見(jiàn)此效果。如專(zhuān)利cn106174179a涉及的酵素組合物，將益生菌和功能性低聚糖結(jié)合使用，并且添加中藥成分，達(dá)到其特定功效。但其配方的制備適用于個(gè)人直接服用，且固定的植物酵素原液再使用時(shí)無(wú)法滿(mǎn)足不同口味人的需求，且其制備方法粗糙，制備得的酵素泡騰片中中藥藥渣感強(qiáng)烈，口感不佳。
另一方面，現(xiàn)有的酵素桶，以水果、糖和水為原料制備植物酵素，使得植物酵素的在家庭即可制備，操作簡(jiǎn)便。但是也有很多不足之處，1.酵素制備的時(shí)間仍然較長(zhǎng)，而且容易制備失?。?.制得的植物酵素功效不明確，使用者無(wú)法自己控制制備植物酵素的功效，比如具有瘦身減肥去脂功效的植物酵素；3.水果等植物中的低分子糖和多聚糖多數(shù)無(wú)法利用，不能轉(zhuǎn)化為特定功效的低聚糖。針對(duì)所述不足，申請(qǐng)人著力研究具有縮短酵素制備時(shí)間、使用便捷且具有瘦身減肥去脂功效的發(fā)酵組合物，即酵素包；同時(shí)為提高酵素的功能性，在現(xiàn)有技術(shù)的酵素發(fā)酵物中添加有效的藥食同源食材成分，使其制備的酵素能夠有效調(diào)節(jié)腸道菌群，增強(qiáng)免疫力，且具有功能作用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問(wèn)題之一。為此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提出一種制備具有瘦身減肥去脂功效的發(fā)酵組合物，為直投式發(fā)酵菌劑，該發(fā)酵組合物將益生菌和功能性低聚糖結(jié)合使用，同時(shí)添加藥食同源食材成分，使該組合物在具有良好的腸道菌群調(diào)節(jié)功能的同時(shí)，能夠促進(jìn)小分子糖和多聚糖向低聚糖的轉(zhuǎn)化。該發(fā)酵組合物制備的植物酵素起到減肥去脂的功效，對(duì)肥胖人群具有提高身體質(zhì)量的功效。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種制備具有瘦身減肥去脂功效的植物酵素的發(fā)酵組合物，為直投式植物酵素發(fā)酵菌劑，該發(fā)酵組合物包括如下重量份數(shù)的組分：啤酒酵母0.05～1份、功能性低聚糖3～22份、益生菌0.1～5份和藥食同源食材0.01～10份；
所述藥食同源食材主要由下列重量份的原料制備而成：10～45份的左旋肉堿、8～40份的綠咖啡豆提取物、8～35份的茶多酚以及0.5～10份的絞股藍(lán)；
所述發(fā)酵組合物的制備方法至少包括下述步驟：
將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖和藥食同源食材制成的細(xì)粉均勻混合殺菌，殺菌后與益生菌粉混合均勻，造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物。
該方案中，所述功能性低聚糖為選自殼聚糖、低聚木糖、魔芋甘露低聚糖、甘露低聚糖、乳酮糖、棉籽糖、大豆低聚糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、魔芋葡甘露糖、海藻糖、帕拉金糖和菊粉中的一種或幾種；
益生菌選自雙歧桿菌(bifidobacterium)、鼠李糖乳桿菌(l.rhamnosus)、干酪乳桿菌(lactobacilluscasei)、嗜酸乳桿菌(l.acidophilus)、植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)、唾液乳桿菌(lactobacillussalivarius)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、布氏乳桿菌(lactobacillusbuchneri)、保加利亞乳桿菌(lactobacillus.bulgaricus)、副干酪乳桿菌(lactobacillusparacasei)和羅伊氏乳桿菌(lactobacillusreuteri)中的一種或幾種。
益生菌和功能性低聚糖合理結(jié)合使用，兩者具有相互促進(jìn)作用，能夠倍增對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)功能，從而基于腸道菌群的作用發(fā)揮更好的增強(qiáng)免疫力。啤酒酵母中幾乎不含脂肪、淀粉和糖，而含有絕佳的蛋白質(zhì)、完整的b族維生素、多種生物態(tài)礦物質(zhì)及優(yōu)質(zhì)膳食纖維；其低脂、低糖、低熱量(不含膽固醇)，含優(yōu)質(zhì)功能性膳食纖維，瘦身效果顯著。
同時(shí)，本發(fā)明的發(fā)酵組合物中的左旋肉堿是脂肪代謝過(guò)程中一種必需的輔酶，能促進(jìn)脂肪酸進(jìn)入線粒體進(jìn)行氧化分解；綠咖啡豆提取物具有燃燒脂肪、提高人體代謝率的功效；茶多酚可防止血管內(nèi)壁脂肪沉積，有降血脂、降血糖的作用。此外，配伍絞股藍(lán)對(duì)脂質(zhì)代謝產(chǎn)生很大的影響，顯著降低血清中性脂肪、總膽固醇。這幾味藥食同源食材的配伍，使本發(fā)明的發(fā)酵組合物具有極好的瘦身去脂的功效。本發(fā)明中采用的啤酒酵母、左旋肉堿、綠咖啡豆提取物以及茶多酚均為市面銷(xiāo)售的成品。另一方面，本發(fā)明將發(fā)酵組合物制成粉狀，實(shí)現(xiàn)階段式生產(chǎn)，便于后期的直接投入使用或是家庭化使用。
進(jìn)一步地，所述藥食同源食材還包括下述重量份的原料提取而成：1～20份的荷葉、3～30份的茯苓、3～30份的決明子、5～20份的山楂、3～20份的香櫞以及2～15份的菊花。
進(jìn)一步地，所述發(fā)酵組合物由重量份數(shù)為0.1～0.5份的啤酒酵母、5～10份的功能性低聚糖、1～3份的益生菌和0.5～1份的藥食同源食材組成；
所述藥食同源食材由下列重量份的原料提取而成：20～32份的左旋肉堿、18～26份的綠咖啡提取物、18～24份的茶多酚、1.5～5份的絞股藍(lán)、3～9份的荷葉、9～15份的茯苓、9～15份的決明子、9～12份的山楂、3～9份的香櫞以及5～9份的菊花。
本發(fā)明的發(fā)酵組合物的優(yōu)選方案，還包括重量份數(shù)為10～30份的抗性糊精，抗性糊精與其他組分共同使用，進(jìn)一步促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，保持腸道健康，并控制油脂和糖的吸收。
進(jìn)一步地，所述功能性低聚糖為魔芋葡甘露糖；
所述益生菌為益生菌粉劑，由如下重量份數(shù)的粉劑均勻混合而成：雙歧桿菌45～60份、鼠李糖乳桿菌50～60份、干酪乳桿菌22～30份、嗜酸乳桿菌18～26份以及植物乳桿菌23～30份，所述益生菌粉劑的活菌含量為2×106～2×1010cfu/g；通過(guò)合理配置各類(lèi)菌種和用量，優(yōu)化本專(zhuān)利產(chǎn)品質(zhì)構(gòu)的菌種，能有效縮短發(fā)酵組合物在制備植物酵素的時(shí)間，且可使其制備出質(zhì)構(gòu)穩(wěn)定的植物酵素。
上述各類(lèi)益生菌粉劑的來(lái)源：均為市售的的各類(lèi)菌種的粉劑或通過(guò)將市售的各類(lèi)菌種經(jīng)液體培養(yǎng)，離心收集和洗滌菌體后，干燥制備成活性粉劑。
本發(fā)明的發(fā)酵組合物其中一個(gè)優(yōu)選方案中，所述發(fā)酵組合物還包括重量份數(shù)為1～3份的醋酸桿菌和1～5份的乳酸菌；
所述發(fā)酵組合物的制備方法還包括：
(1)將1/2量的所述粉狀的發(fā)酵組合物制成軟材，與所述重量份的乳酸菌混合均勻后進(jìn)行擠出造丸，制成丸芯；
(2)將1/2量的所述粉狀的發(fā)酵組合物與所述重量份的醋酸桿菌混合均勻，制成軟材物，備用；
(3)將制得的丸芯置于預(yù)先配制的包衣液中，進(jìn)行包衣；
(4)對(duì)包衣處理后的包衣丸芯在步驟(2)的軟材物中滾圓擠壓，再進(jìn)行干燥，即得丸狀發(fā)酵組合物；
其中，所述包衣液為由重量份數(shù)為0.4-10份的聚丙烯酸樹(shù)脂l100-55、0.1-2份的鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素以及0.05-0.2份蓖麻油加入適量純化水配制成的水分散體。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種上述發(fā)酵組合物的制備方法，所述方法包括以下步驟：
1)藥食同源食材的制備：
將所述重量份的茯苓和決明子分別粉碎，過(guò)60目篩，制得茯苓粉末和決明子粉末；
將茯苓粉末、決明子粉末和預(yù)定重量份的絞股藍(lán)、荷葉、山楂、香櫞以及菊花用8倍重量的水，在溫度80-90℃下保持4h，然后降溫至40℃，加2倍重量濃度為75％的乙醇回流4h，過(guò)濾，得第一濾液；添加濾渣3倍重量的水，在溫度80-90℃下保持2.5h，然后降溫至30℃，過(guò)濾，的第二濾液；合并濾液，減壓濃縮、冷凍干燥，低溫粉碎成中藥粗粉；
將左旋肉堿、綠咖啡提取物、茶多酚以及中藥粗粉均勻混合，粉碎成0.05-0.2mm的細(xì)粉；
2)將步驟1)中的細(xì)粉與乳化劑、水混合后用剪切機(jī)進(jìn)行3000-5000轉(zhuǎn)的高速剪切，邊攪拌邊滴加壁材單體進(jìn)行造壁，形成納米級(jí)的微粒；
3)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、啤酒酵母、抗性糊精和步驟2)中的微粒均勻混合，通過(guò)換熱器進(jìn)行殺菌，條件為99℃，300s；
4)殺菌后混合物降溫至40-45℃，加入預(yù)定量的益生菌凍干劑，混合均勻后加入干法造粒機(jī)造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌打包即得。
本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供一種具有減肥瘦身去脂功效的植物酵素，是針對(duì)個(gè)人或家庭自制植物酵素而制定的，該植物酵素的制備方法包括以下步驟：
(a)制備粉狀發(fā)酵組合物
(b)混合原料：凈選1kg的植物原料，與0.3～0.6kg重量的糖放入酵素桶內(nèi)，加入5～6l的純凈水，混合均勻，同時(shí)添加重量為20～50g的步驟(a)制備的發(fā)酵組合物至酵素桶內(nèi)，封蓋，于發(fā)酵溫度為28～30℃的環(huán)境中進(jìn)行避光發(fā)酵；
(c)發(fā)酵：對(duì)酵素桶內(nèi)的發(fā)酵物進(jìn)行每天早晚一次的攪拌，發(fā)酵5～8d后，過(guò)濾，即得植物酵素。
該方法簡(jiǎn)單快捷，實(shí)現(xiàn)各種功能植物酵素的自制，該方法優(yōu)選使用酵素桶進(jìn)行制備，酵素桶選用市面銷(xiāo)售的即可；亦可使用密閉環(huán)境的器皿進(jìn)行制備。
本發(fā)明植物酵素的制備方法的另一個(gè)優(yōu)選方案，所述方法包括以下步驟：
a)制備粉狀的發(fā)酵組合物
b)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
c)植物酵素原液的制備：接種復(fù)合菌群至植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，進(jìn)行避光發(fā)酵1～2個(gè)月，得到植物酵素原液；
其中接種量為8～12％；復(fù)合菌群為釀酒酵母、德氏乳桿菌乳亞種、植物乳桿菌、革蘭氏乳桿菌、嗜酸性乳桿菌和醋酸桿菌中的幾種；
d)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物原料0.5kg，加入150ml的植物酵素原液于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～30℃，每天放氣1～2次，發(fā)酵1～2d后；添加30g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物，發(fā)酵溫度不變，繼續(xù)發(fā)酵3-4d，過(guò)濾，即得植物酵素。
該方式適用于工業(yè)生產(chǎn)，結(jié)合植物酵素原液初次發(fā)酵和本發(fā)明發(fā)酵組合物的二次發(fā)酵實(shí)現(xiàn)多級(jí)深層液態(tài)發(fā)酵；大大提高發(fā)酵效率。發(fā)酵過(guò)程中可釋放出封閉在中藥或植物結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物素，對(duì)植物原有的活性物質(zhì)進(jìn)行保留，植物中不溶性纖維變?yōu)榭扇苄陨攀忱w維提高原有植物的功效。
再一個(gè)植物酵素的制備方法的優(yōu)選方案，亦為雙層丸狀構(gòu)造的發(fā)酵組合物的使用方法，所述制備方法包括以下步驟：
i)制備丸狀的發(fā)酵組合物
ii)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
iii)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物提取液1kg，加入30g的步驟ii)制備的丸狀的發(fā)酵組合物，于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵；發(fā)酵溫度為30～32℃，每天放氣1～2次；發(fā)酵1～2d后，插入導(dǎo)管通入空氣，每天通氣2-4次，每次10-30min，并控制發(fā)酵溫度為35～37℃；發(fā)酵5～7d后過(guò)濾，即得植物酵素。
該方法簡(jiǎn)單快捷，實(shí)現(xiàn)各種功能植物酵素的自制，且發(fā)酵過(guò)程簡(jiǎn)單深入，一次操作實(shí)現(xiàn)二級(jí)發(fā)酵，甚至多級(jí)發(fā)酵；制備得的植物酵素營(yíng)養(yǎng)成分豐富，人體吸收率高，進(jìn)一步提高其功效。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)：
本發(fā)明研制的發(fā)酵組合物為新型發(fā)酵產(chǎn)品，是用于制備酵素的“發(fā)酵菌包”，改良了直接添加益生菌制備植物酵素的傳統(tǒng)工藝，該菌包使用方便，可直接以顆粒劑的菌包在市面上售賣(mài)，亦可投入各類(lèi)植物酵素的工業(yè)化生產(chǎn)，實(shí)現(xiàn)植物酵素的即配即用和多元化的功能性配置，極大地提高植物酵素的制備效率。
本發(fā)明的發(fā)酵組合物中添加的藥食同源食材組分具有其生理活性和保健作用，同時(shí)為益生菌在發(fā)酵中補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，具有較高的實(shí)用價(jià)值，而本發(fā)明的藥食同源食材成分具有瘦身去脂、降血脂的功效；益生菌、功能性低聚糖以及藥食同源食材各組分之間配伍合理，療效明確，具有協(xié)同增效的作用。
本發(fā)明的植物酵素符合保健品的要求和發(fā)展趨勢(shì)，植物酵素可產(chǎn)生大量對(duì)人體有益的植物綜合酶，這些酶對(duì)人體的代謝和機(jī)能調(diào)整起著重要作用，同時(shí)還含有維生素、礦物質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸、低聚糖等營(yíng)養(yǎng)成分。本發(fā)明通過(guò)添加上述發(fā)酵組合物進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵組合物中的藥食同源食材成分經(jīng)益生菌轉(zhuǎn)換，由大分子變成小分子，極易被人體吸收；益生菌的添加可改善藥食同源食材口味，發(fā)酵過(guò)程中能分解毒性，實(shí)現(xiàn)真正的無(wú)毒副作用，同時(shí)該發(fā)酵組合物制備的植物酵素相較于傳統(tǒng)的藥食同源食材，提高了藥效，能非常顯著的降低血液中的總膽固醇、甘油三酯的含量，達(dá)到降血脂、調(diào)節(jié)腸道菌群的功效。該植物酵素用于調(diào)理改善肥胖人群的身體健康質(zhì)量，其作為日常飲品服用，從治本的角度改善脂質(zhì)代謝，提高人體免疫力等，實(shí)現(xiàn)保健的目的。
此外，發(fā)酵組合物直接添加制備植物酵素的工藝過(guò)程簡(jiǎn)單，成本低廉，易于實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，相較于現(xiàn)有技術(shù)，縮短了制備和發(fā)酵的時(shí)間，且制備過(guò)程安全。
本發(fā)明其中的中藥原料成分的來(lái)源：
絞股藍(lán)：葫蘆科絞股藍(lán)屬植物絞股藍(lán)gynostemmapentaphyllum(thunb.)makino，以根狀莖入藥。
荷葉：本品為睡蓮科植物蓮nelumbonuciferagaertn.的干燥葉。
茯苓：本品為多孔菌科真菌茯苓poriacocos(schw.)wolf的干燥菌核。
決明子：本品為豆科植物決明cassiaobtusifolial.或小決明cassiatoral.的干燥成熟種子。
山楂：本品為薔薇科植物山里紅crataeguspinnatifidabge.var.majorn.e.br.或山楂crataeguspinnatifidabge.的干燥成熟果實(shí)。
香櫞：本品為蕓香科植物枸櫞citrusmedical.或香圓(西南香圓)citruswilsoniitanaka的干燥成熟果實(shí)。
菊花：本品為菊科植物菊chrysanthemummorifoliumramat.的干燥頭狀花序。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母0.8g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖80g
益生菌粉劑：24g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌4.5份、鼠李糖乳桿菌5份、干酪乳桿菌2.2份、嗜酸乳桿菌1.8份以及植物乳桿菌2.3份；
藥食同源食材成分：8g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿2份、綠咖啡提取物1.8份、茶多酚1.8份、絞股藍(lán)0.15份、荷葉0.3份、茯苓0.9份、決明子0.9份、山楂0.9份、香櫞0.3份以及菊花0.5份。
抗性糊精80g
制備方法：
1)藥食同源食材的制備：
將所述重量份的茯苓和決明子分別粉碎，過(guò)60目篩，制得茯苓粉末和決明子粉末；
將茯苓粉末、決明子粉末和預(yù)定重量份的絞股藍(lán)、荷葉、山楂、香櫞以及菊花用8倍重量的水，在溫度80-90℃下保持4h，然后降溫至40℃，加2倍重量濃度為75％的乙醇回流4h，過(guò)濾，得第一濾液；添加濾渣3倍重量的水，在溫度80-90℃下保持2.5h，然后降溫至30℃，過(guò)濾，的第二濾液；合并濾液，減壓濃縮、冷凍干燥，低溫粉碎成中藥粗粉；
將左旋肉堿、綠咖啡提取物、茶多酚以及中藥粗粉均勻混合，粉碎成0.05-0.2mm的細(xì)粉；
2)將步驟1)中的細(xì)粉與乳化劑、水混合后用剪切機(jī)進(jìn)行3000-5000轉(zhuǎn)的高速剪切，邊攪拌邊滴加壁材單體進(jìn)行造壁，形成納米級(jí)的微粒；3)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、啤酒酵母、抗性糊精和步驟2)中的微粒均勻混合，通過(guò)換熱器進(jìn)行殺菌，條件為99℃，300s；
4)殺菌后混合物降溫至40-45℃，加入預(yù)定量的益生菌凍干劑，混合均勻后加入干法造粒機(jī)造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌裝袋，每袋30g。
實(shí)施例2發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母10g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖100g
益生菌粉劑：20g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌6份、鼠李糖乳桿菌6份、干酪乳桿菌3份、嗜酸乳桿菌2.6份以及植物乳桿菌3份；藥食同源食材成分：10g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿3.2份、綠咖啡提取物2.6份、茶多酚2.4份、絞股藍(lán)0.5份、荷葉0.9份、茯苓1.5份、決明子1.5份、山楂1.2份、香櫞0.9份以及菊花0.9份。
制備方法：
1)藥食同源食材的制備：
將所述重量份的茯苓和決明子分別粉碎，過(guò)60目篩，制得茯苓粉末和決明子粉末；
將茯苓粉末、決明子粉末和預(yù)定重量份的絞股藍(lán)、荷葉、山楂、香櫞以及菊花用8倍重量的水，在溫度80-90℃下保持4h，然后降溫至40℃，加2倍重量濃度為75％的乙醇回流4h，過(guò)濾，得第一濾液；添加濾渣3倍重量的水，在溫度80-90℃下保持2.5h，然后降溫至30℃，過(guò)濾，的第二濾液；合并濾液，減壓濃縮、冷凍干燥，低溫粉碎成中藥粗粉；
將左旋肉堿、綠咖啡提取物、茶多酚以及中藥粗粉均勻混合，粉碎成0.05-0.2mm的細(xì)粉；
2)將步驟1)中的細(xì)粉與乳化劑、水混合后用剪切機(jī)進(jìn)行3000-5000轉(zhuǎn)的高速剪切，邊攪拌邊滴加壁材單體進(jìn)行造壁，形成納米級(jí)的微粒；
3)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、啤酒酵母和步驟2)中的微粒均勻混合，通過(guò)換熱器進(jìn)行殺菌，條件為99℃，300s；
4)殺菌后混合物降溫至40-45℃，加入預(yù)定量的益生菌凍干劑，混合均勻后加入干法造粒機(jī)造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌裝袋，每袋30g。
實(shí)施例3發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母0.08g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖60g
益生菌粉劑：2g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌5.5份、鼠李糖乳桿菌5.6份、干酪乳桿菌2.5份、嗜酸乳桿菌2份以及植物乳桿菌2.6份；
藥食同源食材成分：0.2g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿1份、綠咖啡提取物0.8份、茶多酚0.8份、絞股藍(lán)0.05份、荷葉0.1份、茯苓0.3份、決明子0.3份、山楂0.2份、香櫞0.3份以及菊花0.2份；
抗性糊精：200g。
制備方法：按照實(shí)施例1的制備方法制備，制得粉劑，每袋30g。
實(shí)施例4發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母10g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖87g
益生菌粉劑：殼聚糖104g，甘露低聚糖116g；
益生菌粉劑：50g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌5.5份、保加利亞乳桿菌2.4份、嗜酸乳桿菌1.7份以及植物乳桿菌2.4份；
藥食同源食材成分：100g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿4.5份、綠咖啡提取物4份、茶多酚3.5份、絞股藍(lán)1份、荷葉2份、茯苓3份、決明子3份、山楂2份、香櫞2份以及菊花1.5份。
制備方法：按照實(shí)施例2的制備方法制備，制得粉劑，每袋30g。
實(shí)施例5發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母21g
功能性低聚糖：低聚木糖83g、大豆低聚糖粉61g、低聚果糖56g；
益生菌粉劑：20g，其中每g益生菌粉中含長(zhǎng)雙歧桿菌4份、干酪乳桿菌1.8份、唾液乳桿菌0.9份、嗜酸乳桿菌1.5份以及植物乳桿菌2.2份；
藥食同源食材成分：50g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿3.2份、綠咖啡提取物1.8份、茶多酚2.4份、絞股藍(lán)0.1份、荷葉0.8份、茯苓0.4份、決明子0.8份、山楂1.1份、香櫞0.4份以及菊花0.9份；
抗性糊精：300g
制備方法：按照實(shí)施例1的制備方法制備，制得粉劑，每袋30g。
實(shí)施例6發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母11.2g
功能性低聚糖：低聚木糖43g、甘露低聚糖40g、低聚果糖23g、低聚半乳糖22g以及海藻糖19g；
益生菌粉劑：10.1g，其中每g益生菌粉中含短雙歧桿菌2.3份、乳雙歧桿菌2份、鼠李糖乳桿菌2.4份、瑞士乳桿菌1.3份、布氏乳桿菌1份、保加利亞乳桿菌1.7份以及副干酪乳桿菌0.9份；
藥食同源食材成分：4.55g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿2份、綠咖啡提取物2.6份、茶多酚1.8份、絞股藍(lán)0.5份、荷葉0.3份、茯苓0.9份、決明子1.5份、山楂0.9份、香櫞0.9份以及菊花0.5份；
抗性糊精70.5g
制備方法：按照實(shí)施例1的制備方法制備，制得粉劑，每袋30g。
實(shí)施例7發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
啤酒酵母0.8g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖80g
益生菌粉劑：24g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌4.5份、鼠李糖乳桿菌5份、干酪乳桿菌2.2份、嗜酸乳桿菌1.8份以及植物乳桿菌2.3份；
藥食同源食材成分：8g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿2份、綠咖啡提取物1.8份、茶多酚1.8份、絞股藍(lán)0.15份。
制備方法：
1)藥食同源食材的制備：
將預(yù)定重量份的絞股藍(lán)用8倍重量的水，在溫度80-90℃下保持4h，然后降溫至40℃，加2倍重量濃度為75％的乙醇回流4h，過(guò)濾，得第一濾液；添加濾渣3倍重量的水，在溫度80-90℃下保持2.5h，然后降溫至30℃，過(guò)濾，的第二濾液；合并濾液，減壓濃縮、冷凍干燥，低溫粉碎成中藥粗粉；
將左旋肉堿、綠咖啡提取物、茶多酚以及中藥粗粉均勻混合，粉碎成0.05-0.2mm的細(xì)粉；
2)將步驟1)中的細(xì)粉與乳化劑、水混合后用剪切機(jī)進(jìn)行3000-5000轉(zhuǎn)的高速剪切，邊攪拌邊滴加壁材單體進(jìn)行造壁，形成納米級(jí)的微粒；
3)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、啤酒酵母和步驟2)中的微粒均勻混合，通過(guò)換熱器進(jìn)行殺菌，條件為99℃，300s；
4)殺菌后混合物降溫至40-45℃，加入預(yù)定量的益生菌凍干劑，混合均勻后加入干法造粒機(jī)造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌裝袋，每袋30g。
實(shí)施例8發(fā)酵組合物
實(shí)施例1制成的粉劑發(fā)酵組合物32g；醋酸桿菌1g；乳酸菌1g；包衣液由聚丙烯酸樹(shù)脂l100-5520g、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素5g以及蓖麻油2.5g添加適量純化水配制；
制備方法：
(1)將1/2量的所述粉劑發(fā)酵組合物制成軟材，與所述重量份的乳酸菌混合均勻后進(jìn)行擠出造丸，制成丸芯；
(2)將1/2量的所述粉劑發(fā)酵組合物與所述重量份的醋酸桿菌混合均勻，制成軟材物，備用；
(3)將制得的丸芯置于預(yù)先配制的包衣液中，進(jìn)行包衣；
(4)對(duì)包衣處理后的包衣丸芯在步驟(2)的軟材物中滾圓擠壓，再進(jìn)行干燥，即得丸狀發(fā)酵組合物，包裝。
其中制得的丸粒直徑為4-7mm，丸芯直徑為2-5mm；優(yōu)選丸粒直徑5mm，丸芯直徑為2.8mm。
實(shí)施例9發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：
實(shí)施例3制成的粉劑發(fā)酵組合物23.1g；醋酸桿菌3g；乳酸菌5g；包衣液由聚丙烯酸樹(shù)脂l100-5510g、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素2g以及蓖麻油0.2g添加適量純化水配制；
制備方法：
(2)將1/2量的所述粉劑發(fā)酵組合物制成軟材，與所述重量份的乳酸菌混合均勻后進(jìn)行擠出造丸，制成丸芯；
(2)將1/2量的所述粉劑發(fā)酵組合物與所述重量份的醋酸桿菌混合均勻，制成軟材物，備用；
(3)將制得的丸芯置于預(yù)先配制的包衣液中，進(jìn)行包衣；
(4)對(duì)包衣處理后的包衣丸芯在步驟(2)的軟材物中滾圓擠壓，再進(jìn)行干燥，即得丸狀發(fā)酵組合物，包裝。
其中制得的丸粒直徑為4-7mm，丸芯直徑為2-5mm；優(yōu)選丸粒直徑5mm，丸芯直徑為2.8mm。
實(shí)施例10植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)發(fā)酵組合物的制備:按照實(shí)施例1的發(fā)酵組合物制備；
b)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
c)植物酵素原液的制備：接種復(fù)合菌群至植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，進(jìn)行避光發(fā)酵2個(gè)月，得到植物酵素原液；
其中接種量為12％；復(fù)合菌群為植物乳桿菌、革蘭氏乳桿菌、嗜酸性乳桿菌和醋酸桿菌中；
d)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物原料0.5kg，加入150ml的植物酵素原液于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～30℃，每天放氣1～2次，發(fā)酵1～2d后；添加30g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物，發(fā)酵溫度不變，繼續(xù)發(fā)酵3-4d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g，洗凈切片使用。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈紅褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
實(shí)施例11植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)發(fā)酵組合物的制備：按照實(shí)施例2的發(fā)酵組合物制備；
b)植物提取液的制備：凈選1kg的植物原料，添加0.3～0.6kg重量的糖至植物原料中，并加入5～6l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
c)混合及初步發(fā)酵：添加重量為60g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物至步驟b)中的植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，保持發(fā)酵溫度28℃，進(jìn)行避光發(fā)酵，得到初步發(fā)酵液；
d)發(fā)酵液于密閉環(huán)境中進(jìn)行后熟7d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用獼猴桃100g、草莓90g、山楂40g、芒果220g、胡蘿卜80g、白蘿卜140g、白菜150g、木耳80g以及蘑菇100g。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈深黃色與褐色之間，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
實(shí)施例12植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)發(fā)酵組合物的制備：按照實(shí)施例3的發(fā)酵組合物制備；
b)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
c)植物酵素原液的制備：接種復(fù)合菌群至植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，進(jìn)行避光發(fā)酵1個(gè)月，得到植物酵素原液；
其中接種量為8～12％；復(fù)合菌群為釀酒酵母、德氏乳桿菌乳亞種、植物乳桿菌、革蘭氏乳桿菌、嗜酸性乳桿菌和醋酸桿菌中的幾種；
d)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物原料0.5kg，加入150ml的植物酵素原液于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～30℃，每天放氣1～2次，發(fā)酵1～2d后；添加30g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物，發(fā)酵溫度不變，繼續(xù)發(fā)酵3-4d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用百香果120g、柑橘200g、葡萄100g、山藥50g、南瓜220g、芹菜40g、空心菜50g、豆芽50g、海帶60g、紫菜40g以及金針菇70g。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈深褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
實(shí)施例13植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)發(fā)酵組合物的制備：按照實(shí)施例5的發(fā)酵組合物制備；
b)植物提取液的制備：凈選1kg的植物原料，添加0.3～0.6kg重量的糖至植物原料中，并加入5～6l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
c)混合及初步發(fā)酵：添加重量為30～60g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物至步驟b)中的植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，保持發(fā)酵溫度30℃，進(jìn)行避光發(fā)酵，得到初步發(fā)酵液；
d)發(fā)酵液于密閉環(huán)境中進(jìn)行后熟7d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈紅褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
實(shí)施例14植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)發(fā)酵組合物的制備：按照實(shí)施例1的發(fā)酵組合物制備；
b)混合原料：凈選1kg的植物原料，與0.3～0.6kg重量的糖放入酵素桶內(nèi)，加入5～6l的純凈水，混合均勻，同時(shí)添加重量為20～50g的步驟a)制備的發(fā)酵組合物至酵素桶內(nèi)，封蓋，于發(fā)酵溫度為28～30℃的環(huán)境中進(jìn)行避光發(fā)酵；
c)發(fā)酵：對(duì)酵素桶內(nèi)的發(fā)酵物進(jìn)行每天早晚一次的攪拌，發(fā)酵4～6d后，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈紅褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
實(shí)施例15植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
i)按照實(shí)施例8制備丸狀的發(fā)酵組合物
ii)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
iii)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物提取液1kg，加入30g的步驟ii)制備的丸狀的發(fā)酵組合物，于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵；發(fā)酵溫度為30～32℃，每天放氣1～2次；發(fā)酵1～2d后，插入導(dǎo)管通入空氣，每天通氣2-4次，每次10-30min，并控制發(fā)酵溫度為35～37℃；發(fā)酵5～7d后過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g。
感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈紅褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜。
對(duì)實(shí)施例8的丸狀發(fā)酵組合物發(fā)酵過(guò)程的觀察：丸狀發(fā)酵組合物在發(fā)酵過(guò)程中，丸粒外層組分在溶液中迅速溶解，隨后丸芯溶解緩慢，約1-2d后包衣膜逐漸消失，丸芯完全溶解。
對(duì)照實(shí)施例1發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：：
啤酒酵母0.8g
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖80g
益生菌粉劑：24g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌4.5份、鼠李糖乳桿菌5份、干酪乳桿菌2.2份、嗜酸乳桿菌1.8份以及植物乳桿菌2.3份；
抗性糊精80g。
制備方法：
1)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、啤酒酵母、抗性糊精微粒均勻混合，通過(guò)換熱器進(jìn)行殺菌，條件為99℃，300s；
殺菌后混合物降溫至40-45℃，加入預(yù)定量的益生菌凍干劑，混合均勻后加入干法造粒機(jī)造粒，制得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌裝袋，每袋30g。
2)植物酵素的制備
a)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
b)植物酵素原液的制備：接種復(fù)合菌群至植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，進(jìn)行避光發(fā)酵2個(gè)月，得到植物酵素原液；
其中接種量為12％；復(fù)合菌群為植物乳桿菌、革蘭氏乳桿菌、嗜酸性乳桿菌和醋酸桿菌中；
c)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物原料0.5kg，加入150ml的植物酵素原液于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～30℃，每天放氣1～2次，發(fā)酵1～2d后；添加30g的步驟1)制備的發(fā)酵組合物，發(fā)酵溫度不變，繼續(xù)發(fā)酵3-4d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g，洗凈切片使用。
對(duì)照實(shí)施例2發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方為：：
功能性低聚糖：魔芋葡甘露糖80g
益生菌粉劑：24g，其中每g益生菌粉中含雙歧桿菌4.5份、鼠李糖乳桿菌5份、干酪乳桿菌2.2份、嗜酸乳桿菌1.8份以及植物乳桿菌2.3份；
藥食同源食材成分：8g，其中每g提取物由下述重量份數(shù)的原料提取而成：左旋肉堿2份、綠咖啡提取物1.8份、茶多酚1.8份、絞股藍(lán)0.15份、荷葉0.3份、茯苓0.9份、決明子0.9份、山楂0.9份、香櫞0.3份以及菊花0.5份。
抗性糊精80g
制備方法：
1)除未添加啤酒酵母外，按照實(shí)施例1所述方法制備得粉狀的發(fā)酵組合物，無(wú)菌裝袋，每袋30g。
2)植物酵素的制備
a)植物提取液的制備：凈選3kg的植物原料，添加1kg重量的糖至植物原料中，并加入10l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
b)植物酵素原液的制備：接種復(fù)合菌群至植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，進(jìn)行避光發(fā)酵2個(gè)月，得到植物酵素原液；
其中接種量為12％；復(fù)合菌群為植物乳桿菌、革蘭氏乳桿菌、嗜酸性乳桿菌和醋酸桿菌中；
c)植物酵素的制備：選用10l以上的大桶，添加天然麥芽糖125g、維生素c鈉5g、8l水以及植物原料0.5kg，加入150ml的植物酵素原液于密閉環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～30℃，每天放氣1～2次，發(fā)酵1～2d后；添加30g的步驟1)制備的發(fā)酵組合物，發(fā)酵溫度不變，繼續(xù)發(fā)酵3-4d，過(guò)濾，即得植物酵素。
其中，植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g，洗凈切片使用。
對(duì)照實(shí)施例3植物酵素
本實(shí)施例的植物酵素由下述方法制備而成：
a)植物提取液的制備：凈選1kg的植物原料，添加0.3～0.6kg重量的糖至植物原料中，并加入5～6l的純凈水，混合均勻，靜置浸提1～2d后，進(jìn)行高溫滅菌，過(guò)濾，得植物提取液；
b)混合及初步發(fā)酵：接種復(fù)合益生菌至步驟b)中的植物提取液中，混勻置于密閉環(huán)境，保持發(fā)酵溫度30℃，進(jìn)行避光發(fā)酵，得到初步發(fā)酵液；
c)發(fā)酵液于密閉環(huán)境中進(jìn)行后熟7d，取部分發(fā)酵液過(guò)濾，做感觀分析；繼續(xù)后熟14d，取部分發(fā)酵液過(guò)濾，做感觀分析。
其中，復(fù)合益生菌為雙歧桿菌、鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌以及植物乳桿菌；接種量為8％(質(zhì)量百分比)；
植物原料選用蘋(píng)果500g、大豆200g和西紅柿300g。
7天后的發(fā)酵液的感觀分析：該植物酵素色澤呈紅褐色，組織流動(dòng)性大、入口略有刺激、甜膩味較重；14天后的發(fā)酵液的感觀分析：該植物酵素色澤均勻，呈紅褐色，有濃郁的果香與發(fā)酵香氣，口感醇厚，酸甜適宜，入口不刺激，余味甘甜?？芍?，傳統(tǒng)方法制備的植物酵素需要的發(fā)酵時(shí)間比本發(fā)明植物酵素的發(fā)酵時(shí)間更長(zhǎng)。
對(duì)照實(shí)施例4發(fā)酵組合物
本實(shí)施例的發(fā)酵組合物的處方與實(shí)施例1相同
發(fā)酵組合物制備方法：
(1)按照實(shí)施例1步驟1)制備提取物：
(2)將預(yù)定重量份數(shù)的功能性低聚糖、酵母β-葡聚糖、益生菌粉劑、抗性糊精均勻混合，將混合粉加入干法造粒機(jī)造粒，制得發(fā)酵組合物的顆粒劑，裝袋，每袋30g。
植物酵素制備方法：按照實(shí)施例10的方法制備得植物酵素。
(2)感觀分析：該植物酵素色澤不均，渾濁，有漂浮物，呈紅褐色，果香味較淡，入口不刺激。
試驗(yàn)例1發(fā)酵組合物的活菌存活檢測(cè)
將本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例8和對(duì)照實(shí)施例4制備的發(fā)酵組合物，用無(wú)菌水制備成活菌數(shù)為2×1010cfu/ml的待測(cè)溶液，于4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
取保存好的10ml的待測(cè)溶液注入到試管1中，采用十倍逐級(jí)稀釋至10-8，取1ml稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45℃的mrs瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌)上，迅速搖勻。再將裝有10ml的待測(cè)溶液的試管2置于80-90℃水浴鍋中加熱15-25min，取加熱后的待測(cè)溶液進(jìn)行十倍逐級(jí)稀釋至10-8，取1ml稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45℃的mrs瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌)上并迅速搖勻。最后將加熱前和加熱后的平板均在35℃條件下培養(yǎng)24h，計(jì)算加熱前后的活菌數(shù)量。
結(jié)果表明，活菌存活率分別為93％、94.1％和59.2％。
試驗(yàn)例2植物酵素的活菌存活檢測(cè)
1、模擬胃液及腸液的耐受試驗(yàn)
取100g/l的鹽酸16.4ml加蒸餾水稀釋?zhuān)筽h值分別為1.5、2.5和3.5，取100ml稀鹽酸溶液，分別加入1g胃蛋白酶，使其充分溶解，得模擬胃液，微孔濾膜除菌(0.22μm)備用。取磷酸二氫鉀6.8g，加水500ml使溶解，用0.1mol/l氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水100ml使溶解，將兩液混合后，加水稀釋至1000ml，得模擬腸液，微孔濾膜除菌(0.22μm)備用。
取1ml保存好的實(shí)施例10和實(shí)施例15植物酵素溶液加入到9ml的模擬胃液中(即十倍逐級(jí)稀釋)，并迅速在振蕩器上充分混勻，然后置于30-45℃靜置培養(yǎng)2-4h。分別在1h、2h、3h、4h的時(shí)候取出培養(yǎng)液并立即計(jì)數(shù)殘存活菌數(shù)，與原活菌數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果表明，活菌存活率分別為97.5％和98.2％。然后取在人工胃液中消化不同時(shí)間的培養(yǎng)液各1ml，分別接種于9mlph值為6.8的人工腸液中，置于30-45℃靜置培養(yǎng)2-4h，并分別在0、3、6、24h取樣，測(cè)定其活菌數(shù)，與原活菌數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果表明活菌存活率均為99％。
試驗(yàn)例3減肥功能檢測(cè)的動(dòng)物試驗(yàn)
1.實(shí)驗(yàn)方法
1.1試驗(yàn)動(dòng)物
選用spf級(jí)sd雄性大鼠，適應(yīng)期結(jié)束時(shí)動(dòng)物體重180-220g。實(shí)驗(yàn)室溫度20-25℃。
1.2試驗(yàn)方法:采用預(yù)防肥胖模型法
選90只大鼠，于屏障系統(tǒng)下大鼠喂飼維持飼料觀察7天。適應(yīng)期結(jié)束后按體重隨機(jī)分成2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對(duì)照組，80只給予高熱量飼料作為模型組。每周記錄給食量、撒食量、剩食量，稱(chēng)量體重1次。喂養(yǎng)2周后，給予高熱量飼料的大鼠按體重增重排序，淘汰體重增重較低的肥胖抵抗大鼠。將篩選出的70只肥胖敏感大鼠按體重隨機(jī)分成7組，分別為模型組和6個(gè)試驗(yàn)組。
1.3給藥方案
模型對(duì)照組和6個(gè)實(shí)驗(yàn)組給予高熱量模型飼料，空白對(duì)照組繼續(xù)給予維持飼料。同時(shí)6個(gè)實(shí)驗(yàn)組灌胃給予不同的受試樣品，模型對(duì)照組和空白對(duì)照組給予等量的蒸餾水，具體受試樣品成分分別為：
組1：實(shí)施例10的植物酵素；
組2：實(shí)施例13的植物酵素；
組3：實(shí)施例14的植物酵素；
組4：實(shí)施例15的植物酵素；
組5：對(duì)照實(shí)施例1的植物酵素；
組6：對(duì)照實(shí)施例2的植物酵素；
受試樣品給予時(shí)間6周，每組大鼠給植物酵素的量按照人體推薦量的10倍。每周記錄給食量、撒食量、剩食量，稱(chēng)量體重1次。
2試驗(yàn)結(jié)果
2.1對(duì)肥胖模型大鼠各周體重的影響，結(jié)果見(jiàn)表2。
表2各試驗(yàn)組對(duì)肥胖模型大鼠體重的影響(體重/g)
由表2可知，所有試驗(yàn)組與模型對(duì)照組相比，各組體重的增加都明顯減少，其中組4在試驗(yàn)周結(jié)束后的總增重最小，其次是組1、組3、組2；組5體重增加較為明顯，可知添加的藥食同源食材具有明顯的抑制肥胖的作用；組6的體重也較明顯，可知啤酒酵母的添加能提高植物酵素的減肥功效。
2.2對(duì)大鼠體內(nèi)脂肪重量、脂/體比的影響，結(jié)果見(jiàn)表3.
表3各試驗(yàn)組對(duì)脂肪重量、脂/體比的影響
由表3可知，所有試驗(yàn)組與模型對(duì)照組相比，各組大鼠的脂肪重量和脂/體比較小，其中組4的脂肪重量和脂/體比最小，其次是組1、組3、組4；組5的脂肪重量和脂/體比較大，抑制肥胖的效果不理想；組6的脂肪重量和脂/體比也較大，抑制肥胖的效果不理想。
盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以理解：在不脫離本發(fā)明的原理和宗旨的情況下可以對(duì)這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求及其等同物限定。