本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑的制備方法和用途。
背景技術(shù)：
雙向性固體發(fā)酵技術(shù)是將藥用真菌發(fā)酵菌種(例如靈芝、槐耳、姬松茸等)和發(fā)酵基質(zhì)(具一定活性成分的中藥材或藥渣)構(gòu)成發(fā)酵組合,雙方如相適應(yīng)則在一定條件下進(jìn)行固體發(fā)酵。芝芪菌質(zhì)是將靈芝菌種接種于黃芪藥渣中進(jìn)行固體發(fā)酵得到的靈芝菌絲體與黃芪藥渣的發(fā)酵復(fù)合體。一方面培養(yǎng)基中黃芪藥渣的化學(xué)成分為靈芝真菌的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面靈芝真菌的酶又可改變黃芪藥渣的組織和成分，故具有雙向性。
中藥藥材加工為中成藥后剩留大量尚含有各種殘余成分的藥渣，但它大多被廢棄。雙向固體發(fā)酵技術(shù)是目前開(kāi)發(fā)藥渣最有希望的途徑，可被用來(lái)開(kāi)發(fā)藥渣，以產(chǎn)生各種有用的藥性菌質(zhì)(藥渣與真菌菌絲發(fā)酵復(fù)合體)，它作為一種新資源可繼續(xù)研發(fā)成新藥或保健品、功能性食品等。黃芪精口服液是國(guó)家保護(hù)中藥品種，收載于部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十六冊(cè)WS3-B-3101-98，目前國(guó)內(nèi)有多個(gè)廠家生產(chǎn)該產(chǎn)品，每年有大量黃芪藥渣作為廢棄物待處理。黃芪藥渣已被證實(shí)是有效的藥性基質(zhì)，可通過(guò)雙向性固體發(fā)酵技術(shù)進(jìn)行再開(kāi)發(fā)利用。
目前，利用靈芝菌-黃芪藥渣雙向性固體發(fā)酵復(fù)合物制備免疫增強(qiáng)劑的報(bào)道尚未見(jiàn)報(bào)道，其中中國(guó)專利200810156224.6公開(kāi)了一種6-O-β-D-葡萄糖基-3,6,16,25-四羥基環(huán)菠蘿蜜烷的制備方法，該方法也采用了靈芝菌和黃芪藥渣的雙向性固體發(fā)酵技術(shù)，但與本專利的發(fā)酵方法不一樣，與本專利的發(fā)酵產(chǎn)物的處理方法也不一樣，與本專利的發(fā)明目的也不一樣。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑的制備方法和用途。該方法可有效利用黃芪藥渣，減少環(huán)境污染，合理利用廢棄資源。
發(fā)明內(nèi)容：
一：一種基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法包括下述步驟：
(1)芝芪菌質(zhì)的制備：
(a)將20-40％乙醇提取后的黃芪藥渣，烘干，粉碎，過(guò)篩，混勻，調(diào)節(jié)含水量至55％-65％，裝于發(fā)酵瓶中，物料體積占發(fā)酵瓶容器體積的1/3-1/2，121℃高壓滅菌120min，得黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)備用，
(b)取靈芝菌種接種于黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)中，于恒溫發(fā)酵室培養(yǎng)，待菌絲體長(zhǎng)滿瓶時(shí)記為0天，15-35天后終止發(fā)酵，
(c)收集整瓶發(fā)酵產(chǎn)物，干燥，得芝芪菌質(zhì)；
(2)芝芪菌質(zhì)水提液的制備：
芝芪菌質(zhì)和水按質(zhì)量比1:10-1:12混合，加熱回流提取，提取液過(guò)濾，濾液為芝芪菌質(zhì)水提液；
(3)免疫增強(qiáng)劑的制備：
使用芝芪菌質(zhì)水提液制成功能性食品及藥品常規(guī)劑型中的一種。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(1)中，
方法(a)所述的黃芪藥渣干燥溫度為50-60℃；
方法(b)所述的恒溫發(fā)酵室溫度為25℃，25～30天后終止發(fā)酵；
方法(c)所述的干燥方式為冷凍干燥。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(2)中，
加熱回流提取時(shí)間為1-2小時(shí)，提取次數(shù)為2-3次；
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(3)中，芝芪菌質(zhì)水提液制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液中的一種。
二：一種基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法包括下述步驟：
(1)芝芪菌質(zhì)的制備：
(a)將20-40％乙醇提取后的黃芪藥渣，烘干，粉碎，過(guò)篩，混勻，調(diào)節(jié)含水量至55％-65％，裝于發(fā)酵瓶中，物料體積占發(fā)酵瓶容器體積的1/3-1/2，121℃高壓滅菌120min，得黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)備用，
(b)取靈芝菌種接種于黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)中，于恒溫發(fā)酵室培養(yǎng)，待菌絲體長(zhǎng)滿瓶時(shí)記為0天，15-35天后終止發(fā)酵，
(c)收集整瓶發(fā)酵產(chǎn)物，干燥，得芝芪菌質(zhì)；
(2)芝芪菌質(zhì)水浸液的制備：
芝芪菌質(zhì)和水按適宜比例混合，在適宜狀態(tài)下研磨，過(guò)濾，濾液為芝芪菌質(zhì)水浸液；
(3)免疫增強(qiáng)劑的制備：
芝芪菌質(zhì)水浸液制成功能性食品及藥品常規(guī)劑型中的一種。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(1)中，
方法(a)所述的黃芪藥渣干燥溫度為50-60℃；
方法(b)所述的恒溫發(fā)酵室溫度為25℃，25～30天后終止發(fā)酵；
方法(c)所述的干燥方式為冷凍干燥。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(2)中，
適宜狀態(tài)為冰敷狀態(tài)或4℃狀態(tài)。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(3)中，芝芪菌質(zhì)水浸液制成口服液。
三：一種基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法包括下述步驟：
(1)芝芪菌質(zhì)的制備：
(a)將20-40％乙醇提取后的黃芪藥渣，烘干，粉碎，過(guò)篩，混勻，調(diào)節(jié)含水量至55％-65％，裝于發(fā)酵瓶中，物料體積占發(fā)酵瓶容器體積的1/3-1/2，121℃高壓滅菌120min，得黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)備用，
(b)取靈芝菌種接種于黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)中，于恒溫發(fā)酵室培養(yǎng)，待菌絲體長(zhǎng)滿瓶時(shí)記為0天，15-35天后終止發(fā)酵，
(c)收集整瓶發(fā)酵產(chǎn)物，干燥，得芝芪菌質(zhì)；
(2)芝芪菌質(zhì)活性部位的制備：
(a)芝芪菌質(zhì)和水按質(zhì)量比1:10-1:12混合，加熱回流提取，提取液過(guò)濾，濾液為芝芪菌質(zhì)水提液；
(b)(a)項(xiàng)下的芝芪菌質(zhì)水提液經(jīng)大孔樹(shù)脂分離處理后，采用洗脫液得到不同洗脫系列的免疫活性部位；
(3)免疫增強(qiáng)劑的制備：
芝芪菌質(zhì)水提液各免疫活性部位制成功能性食品及藥品常規(guī)劑型中的一種。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(1)中，
方法(a)所述的黃芪藥渣干燥溫度為50-60℃；
方法(b)所述的恒溫發(fā)酵室溫度為25℃，25～30天后終止發(fā)酵；
方法(c)所述的干燥方式為冷凍干燥。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(2)中，
方法(a)中的加熱回流提取時(shí)間為1-2小時(shí)，提取次數(shù)為2-3次；方法(b)中洗脫液為水或40％乙醇或95％乙醇。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑3，制備方法(2)(b)中，洗脫液為40％乙醇。
所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑，制備方法(3)中，芝芪菌質(zhì)水提液大孔樹(shù)脂分離后的各免疫活性部位，制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液中的一種。
四：所述基于芝芪菌質(zhì)的免疫增強(qiáng)劑在制備增強(qiáng)人體機(jī)體免疫力的功能性食品及藥品中的應(yīng)用。
本發(fā)明靈芝菌種從中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC購(gòu)得。
本發(fā)明的有益效果是：以實(shí)現(xiàn)資源利用最大化為目的，將黃芪藥渣作為二次中藥資源利用，不僅變廢為寶，減少環(huán)境污染，而且得到的芝芪菌質(zhì)提取物及各分離部位具有免疫增強(qiáng)活性，可作為功能性食品及藥品，使黃芪藥渣再次在人類醫(yī)藥保健方面發(fā)揮作用，實(shí)現(xiàn)了較高的生態(tài)學(xué)效益和社會(huì)效益。
具體實(shí)施方式
以下通過(guò)實(shí)施例形式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1：芝芪菌質(zhì)的制備：
將30％乙醇提取后的黃芪藥渣1000g，置于60℃電熱鼓風(fēng)干燥箱烘干，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)10目篩，混勻，加水，調(diào)節(jié)含水量至55％，裝于發(fā)酵瓶中，物料體積占發(fā)酵瓶容器體積的1/2，121℃高壓滅菌120min，得黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)備用。取固體培養(yǎng)基干重量10-15％的靈芝菌種接種于黃芪藥渣發(fā)酵基質(zhì)中，于25℃恒溫發(fā)酵室培養(yǎng)，待菌絲體長(zhǎng)滿瓶時(shí)記為0天，25天后終止發(fā)酵。收集整瓶發(fā)酵產(chǎn)物，冷凍干燥，得芝芪菌質(zhì)。
實(shí)施例2：芝芪菌質(zhì)水提液的制備：
芝芪菌質(zhì)和水按質(zhì)量比(1:10-1:12)混合，加熱回流提取2次，每次1.5h，提取液過(guò)濾，濾液合并為芝芪菌質(zhì)水提液。
實(shí)施例3：芝芪菌質(zhì)水浸液的制備：
取實(shí)施例1方法制備的芝芪菌質(zhì)和水按適宜比例混合，在冰敷狀態(tài)下研磨，過(guò)濾，濾液為芝芪菌質(zhì)水浸液。
實(shí)施例4：芝芪菌質(zhì)采用大孔樹(shù)脂水洗脫液提取活性部位：
取實(shí)施例2方法制備的芝芪菌質(zhì)水提液，使其流經(jīng)大孔樹(shù)脂，用水洗脫液(4倍大孔樹(shù)脂體積量)洗脫，得到水洗脫液活性部位。
實(shí)施例5：芝芪菌質(zhì)采用大孔樹(shù)脂40％乙醇洗脫液提取活性部位：
取實(shí)施例2方法制備的芝芪菌質(zhì)水提液，使其流經(jīng)大孔樹(shù)脂，用40％乙醇洗脫液(5倍大孔樹(shù)脂體積量)洗脫，得到40％乙醇洗脫液活性部位。
實(shí)施例6：芝芪菌質(zhì)采用大孔樹(shù)脂95％乙醇洗脫液提取活性部位：
取實(shí)施例2方法制備的芝芪菌質(zhì)水提液，使其流經(jīng)大孔樹(shù)脂，用95％乙醇洗脫液(4倍大孔樹(shù)脂體積量)洗脫，得到95％乙醇洗脫液活性部位。
實(shí)施例7：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例2制備的芝芪菌質(zhì)水提液，減壓濃縮至稠狀，倒出，冷凍干燥，粉碎，過(guò)200目篩，混勻，裝入空膠囊殼中，即得。
實(shí)施例8：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例3制備的芝芪菌質(zhì)水浸液，過(guò)濾，濾液備用；另取蔗糖500g制成糖漿，與濾液合并，加入防腐劑適調(diào)整總量，靜置，濾過(guò)，灌裝，即得。
實(shí)施例9：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例4制備的芝芪菌質(zhì)水洗脫液，減壓濃縮至稠狀，倒出，冷凍干燥，粉碎，過(guò)200目篩，混勻，裝入空膠囊殼中，即得。
實(shí)施例10：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例5制備的芝芪菌質(zhì)40％乙醇洗脫液，減壓濃縮至稠狀，倒出，冷凍干燥，粉碎，過(guò)200目篩，混勻，裝入空膠囊殼中，即得。
實(shí)施例11：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例6制備的芝芪菌質(zhì)95％乙醇洗脫液，減壓濃縮至稠狀，倒出，冷凍干燥，粉碎，過(guò)200目篩，混勻，裝入空膠囊殼中，即得。
實(shí)施例12：免疫增強(qiáng)劑的制備：
取實(shí)施例5制備的芝芪菌質(zhì)40％乙醇洗脫液，減壓濃縮至干，加水溶解，溶液備用；取蔗糖500g制成糖漿，與溶液合并，加入防腐劑適調(diào)整總量，靜置，濾過(guò)，灌裝，即得。
實(shí)施例13：實(shí)驗(yàn)名稱：非特異性免疫功能實(shí)驗(yàn)----小鼠碳粒廓清實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)藥品：取上述實(shí)施例7、8、9、10、11制備的免疫增強(qiáng)劑，除實(shí)施例8直接使用外，其余制劑剝?nèi)タ漳z囊殼，將干燥細(xì)分直接加水溶解，得相應(yīng)給藥組。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
分組方法----取昆明雄性小鼠96只(18-22g)，隨機(jī)分成8組，每組12只：正常組、模型(環(huán)磷酰胺)組、陽(yáng)性(匹多莫德，0.32g/kg)組、給藥組5組(實(shí)施例7、8、9、10、11制備的免疫增強(qiáng)劑)。除正常組外，其它各組均采用環(huán)磷酰胺復(fù)制免疫缺陷小鼠模型。
造模方法----實(shí)驗(yàn)第1-3d腹腔注射環(huán)磷酰胺(80mg/kg)，1次/d，連續(xù)3d。第6d再以相同劑量強(qiáng)化一次。
給藥方法----第1天開(kāi)始灌胃給藥，0.1mL/10g/d給藥，400mg/kg，1次/d，連續(xù)給藥7d，第6d晚禁食12h后，第7d上午最后1次給藥，進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)方法----每只鼠尾靜脈注射5倍稀釋的印度墨汁0.05mL/10g體重，分別于第2、12min用毛細(xì)采血管在小鼠眼眶后靜脈叢取血20μL溶于2mL 0.1％Na2CO3溶液中，搖勻。以0.1％Na2CO3溶液作空白，于600nm處測(cè)定吸光度。
檢測(cè)指標(biāo)----取小鼠肝、脾臟，稱重。計(jì)算廓清指數(shù)K、校正廓清指數(shù)α。
K＝(log OD1-log OD2)/(t2-t1)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
表1實(shí)驗(yàn)各組的碳粒廓清實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n＝10)
注：※p<0.05；※※p<0.01
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，實(shí)施例7、8、10藥品可顯著提高免疫缺陷小鼠的非特異免疫吞噬功能，表明其均有免疫增強(qiáng)作用。
實(shí)施例14：實(shí)驗(yàn)名稱：非特異性免疫功能實(shí)驗(yàn)----雞紅細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)藥品：同實(shí)施例13。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
分組、給藥、造模方法----同實(shí)施例13。
檢測(cè)方法----最后一次給藥后1h，每只小鼠腹腔注射1％雞紅細(xì)胞懸液1mL。間隔30min頸椎脫臼處死，將其仰位固定于鼠板上，正中剪開(kāi)腹壁皮膚，經(jīng)腹腔注入生理鹽水1mL，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1min。然后吸出腹腔液0.5mL，平均分滴于2片玻片上，用生理鹽水漂洗，自然干燥，以甲醇溶液固定，加入瑞氏染液染色1min，滴加pH 6.5的PBS與染液混勻，靜置5min，純凈水沖去染料，干燥后鏡下觀察計(jì)數(shù)，計(jì)算吞噬率和吞噬指數(shù)。
檢測(cè)指標(biāo)----吞噬百分率(％)＝吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)×100％；吞噬指數(shù)＝被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞數(shù)×100％。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
表2實(shí)驗(yàn)各組的雞紅細(xì)胞吞噬功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n＝10)
注：※p<0.05；※※p<0.01
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，實(shí)施例7、8、10藥品可顯著提高免疫缺陷小鼠的非特異免疫吞噬功能，表明其具有免疫增強(qiáng)作用。
實(shí)施例15：實(shí)驗(yàn)名稱：特異性免疫功能實(shí)驗(yàn)----小鼠血清溶血素實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)藥品：同實(shí)施例13。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
分組、給藥、造模方法----同實(shí)施例13。
檢測(cè)方法----給藥7d后，每鼠腹腔注射20％綿羊紅細(xì)胞懸液0.2mL致敏，給藥14d后眼眶取血制備血清，用于溶血素的檢測(cè)。將收集好的血清做系列稀釋，確定最佳稀釋度。吸取稀釋的血清0.5mL放入另一試管中，依次加入20％SRBC、1:10稀釋補(bǔ)體、0.9％生理鹽水各0.5mL，空白管用生理鹽水代替血清，混勻，置37℃溫箱溫1h，然后置冰浴中5min以終止反應(yīng)，離心，取上清液于540nm處測(cè)定OD值，計(jì)算出溶血素含量。
檢測(cè)指標(biāo)----溶血素含量＝樣本血清的OD值×稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
表3實(shí)驗(yàn)各組小鼠血清溶血素的含量(n＝10)
注：※p<0.05；※※p<0.01
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，實(shí)施例7、8、10藥品可顯著提高免疫缺陷小鼠的特異性免疫功能，表明其具有免疫增強(qiáng)作用。
實(shí)施例16：實(shí)驗(yàn)名稱：特異性免疫功能實(shí)驗(yàn)----小鼠血清IgM、IgG含量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)藥品：同實(shí)施例13。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
分組、給藥、造模方法----同實(shí)施例13。
檢測(cè)方法----采用ELISA法，按照說(shuō)明書(shū)要求測(cè)定血清中IgG、IgM含量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
表4實(shí)驗(yàn)各組小鼠血清的IgM、IgG含量(n＝10)
注：※p<0.05；※※p<0.01
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，實(shí)施例7、8、9、10、11藥品可顯著提高免疫缺陷小鼠的特異性體液免疫功能，表明其具有免疫增強(qiáng)作用。
實(shí)施例17：實(shí)驗(yàn)名稱：特異性免疫功能實(shí)驗(yàn)----小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖
實(shí)驗(yàn)藥品：同實(shí)施例13。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
含藥血清的制備----實(shí)驗(yàn)各組大鼠連續(xù)灌胃7d后，頸動(dòng)脈取血，制備含藥血清。
脾細(xì)胞原代培養(yǎng)----小鼠用75％乙醇浸泡5min，無(wú)菌操作取脾臟，用完全RPMI-1640培養(yǎng)液制備2.0×106/mL的脾細(xì)胞懸液，臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活力＞95％以上，備用。
實(shí)驗(yàn)方法----將100μL脾細(xì)胞懸液分別加入96孔培養(yǎng)板中，Con A(終濃度為5μg/mL)及含藥血清，總體積200μL。設(shè)置只加200μL RPMI-1640培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每實(shí)驗(yàn)組設(shè)10個(gè)復(fù)孔。加液后把培養(yǎng)板置于微量振蕩器上振蕩2min混勻，于37℃含5％CO2培養(yǎng)箱中溫育72h，變色后用MTT法于酶標(biāo)儀測(cè)吸光值A(chǔ)(λ＝490nm)。增殖指數(shù)SI＝給藥組A/ConA組A。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
表5實(shí)驗(yàn)各組對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響
注：※p<0.05；※※p<0.01
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，實(shí)施例7、8、10藥品可顯著提高免疫缺陷小鼠的特異性細(xì)胞免疫功能，表明其具有免疫增強(qiáng)作用。
以上實(shí)施例的說(shuō)明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。
對(duì)所公開(kāi)的實(shí)施例的上述說(shuō)明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對(duì)這些實(shí)施例的多種修改對(duì)本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會(huì)被限制于本文所示的這些實(shí)施例，而是要符合與本文所公開(kāi)的原理和新穎特點(diǎn)相一致的最寬的范圍。