本發(fā)明涉及水產(chǎn)類小肽功能性配合飼料,特別是涉及一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料。
背景技術(shù):
石斑魚是一種名貴的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚類,在東南亞國(guó)家、日本、我國(guó)臺(tái)灣及華南沿海石斑魚的養(yǎng)殖規(guī)模不斷增大;但是,快速發(fā)展的石斑魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)依然存在如石斑魚育苗技術(shù)、石斑魚病害防控技術(shù)、石斑魚飼料技術(shù)等技術(shù)瓶頸。其中,石斑魚飼料技術(shù)多年來(lái)未有明顯突破,是石斑魚產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要制約因素。石斑魚配合飼料產(chǎn)品研發(fā)嚴(yán)重滯后,石斑魚配合飼料使用嚴(yán)重不足,與快速發(fā)展的石斑魚養(yǎng)殖業(yè)不相適應(yīng),亟待研發(fā)石斑魚高效配合飼料。目前石斑魚養(yǎng)殖仍嚴(yán)重依賴冰鮮雜魚,每年消耗量約40萬(wàn)噸,占全國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖冰鮮雜魚用量的10%,而采用配合飼料養(yǎng)殖石斑魚的比例不到10%。冰鮮野魚在質(zhì)量方面往往不夠可靠,在供應(yīng)方面還不夠穩(wěn)定,而且,生鮮雜魚的長(zhǎng)期大量投喂還極易造成水質(zhì)惡化,誘發(fā)病原滋生,導(dǎo)致病害頻發(fā)、減產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)虧損等嚴(yán)重不良后果。另一方面,石斑魚配合飼料雖然已經(jīng)在一些養(yǎng)殖企業(yè)使用。但是,由于缺少高效的功能性飼料添加劑產(chǎn)品,目前配合飼料對(duì)于石斑魚健康的改善作用有限,加之養(yǎng)殖密度較大、飼料中大豆蛋白添加比例高,海水魚細(xì)菌性腸炎和營(yíng)養(yǎng)性腸炎頻發(fā),導(dǎo)致動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育受阻、營(yíng)養(yǎng)不良甚至死亡,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此,研究開發(fā)營(yíng)養(yǎng)全面的功能性配合飼料,已成當(dāng)務(wù)之急。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
為了解決上述存在的問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種能縮短石斑魚養(yǎng)殖周期、提高石斑魚生長(zhǎng)速度、成活率和抗病力、降低環(huán)境污染的專用小肽功能性配合飼料,該飼料能提高石斑魚的生長(zhǎng)速度,且有效解決當(dāng)今石斑魚養(yǎng)殖過(guò)程中對(duì)生鮮雜魚的依賴及現(xiàn)有配合飼料營(yíng)養(yǎng)不平衡的問(wèn)題,并且降低養(yǎng)殖過(guò)程中對(duì)環(huán)境的污染和破壞,實(shí)現(xiàn)石斑魚養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
本發(fā)明的目的在于提供一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料。
本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:
一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料,該飼料中含有石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽,編碼該石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽的核酸序列由引物1、引物2和石斑魚cDNA模板通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得;上述引物序列分別為:
引物1:5’-TTCGTTGTRAASCCAAARGGTAG-3’(SEQ ID NO:1);
引物2:5’-TACCATCATCTGGCGACACCCACGAG-3’(SEQ ID NO:2)。
進(jìn)一步的,一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料,該飼料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:蛋白源原料70~75份,脂肪源原料10~12份,糖源原料9~10份,石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽0.2~0.5份,飼料黏合劑1~2份,抗氧化劑0.2~0.3份,復(fù)合維生素2~4份,復(fù)合礦物鹽2~4份,誘食劑1~2份。
進(jìn)一步的,所述蛋白源原料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:魚粉37~43份,蛋白水解物15~20份,豆粕2~10份,磷蝦粉3~6份,啤酒酵母3~6份。
進(jìn)一步的,所述脂肪源原料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:魚油4~5份,豆油3~5份,卵磷脂1~4份。
進(jìn)一步的,所述糖源原料為а-淀粉。
進(jìn)一步的,所述抗氧化劑由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:維生素C磷酸酯0.1~0.2份和蝦青素0.1~0.2份。
進(jìn)一步的,所述復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:維生素A1~1.5份,維生素D30.7~1.1份,維生素K3 2.5~3.5份,維生素E 18~22份,維生素B1 0.7~0.9份,維生素B21~1.2份,維生素B6 1.1~1.3份,維生素B12 0.2~0.3份,葉酸0.3~0.4份,泛酸鈣4~5份,生物素1~2份,煙酸4~6份,肌醇13~17份,氯化膽堿28~32份和介質(zhì)玉米芯粉15~16份。
進(jìn)一步的,所述復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:ZnSO4·7H2O 15~2份,MnSO4·H2O 1~1.5份,CuSO4·5H2O 0.3~0.6份,CoSO4·7H2O 0.3~0.6份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6~7份,Na2SeO3 0.6~0.8份,Ca(IO3)2 0.25~0.35份,KCl 12~13份,MgSO4·H2O 6~6.5份,Na2SO4 11~13份,Ca(H2PO4)2·2H2O 35~45份和介質(zhì)沸石粉17~19份。
進(jìn)一步的,所述誘食劑由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:蛋氨酸0.8~1.2份,色氨酸0.4~0.6份,甜菜堿0.05~0.15份。
進(jìn)一步的,上述任一所述飼料含有以下質(zhì)量百分比的成分:蛋白質(zhì)44~46%,脂肪16~19%,糖11~12%,灰分9~10%和水分8~10%。
本發(fā)明的有益效果是:
1)本發(fā)明飼料的配方是在對(duì)石斑魚營(yíng)養(yǎng)需求及石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽對(duì)石斑魚生長(zhǎng)及免疫的影響進(jìn)行全面系統(tǒng)的研究并在反復(fù)對(duì)比試驗(yàn)的基礎(chǔ)上而形成的,因而具有廣泛的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
2)本發(fā)明飼料含有多種蛋白源,克服了單一蛋白源氨基酸不平衡的問(wèn)題,有利于提高飼料利用率,降低氨氮排放,減少環(huán)境污染。
3)本發(fā)明提供了一種石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽在飼料中的添加,能夠顯著促進(jìn)生長(zhǎng)及縮短養(yǎng)殖周期,有效提高石斑魚的天然免疫力和抗應(yīng)激能力,提高石斑魚在應(yīng)激期間的成活率等,其效果明顯優(yōu)于現(xiàn)有市售商業(yè)飼料。
4)本飼料生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單可行,便于大規(guī)模推廣。
5)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,用本發(fā)明小肽功能性配合飼料養(yǎng)殖石斑魚,整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程,魚體活力好,生長(zhǎng)速度快,成活率高,抗病力強(qiáng),氨氮排放量低。
6)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本發(fā)明飼料中加入0.2~0.5%的可促進(jìn)魚體生長(zhǎng)作用的石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽,能顯著的提高石斑魚的生長(zhǎng)速度,提高魚體的抗病力。
7)本發(fā)明飼料具有誘食作用的營(yíng)養(yǎng)與免疫活性物質(zhì),除可提高石斑魚苗的免疫力及細(xì)胞活化作用,還可增進(jìn)抗病力。
8)本發(fā)明飼料不僅能有效地解決當(dāng)今石斑魚養(yǎng)殖過(guò)程中由于魚體自身含有的生長(zhǎng)抑制肽所導(dǎo)致的魚體生長(zhǎng)速度慢及養(yǎng)殖周期過(guò)長(zhǎng)等問(wèn)題,同時(shí)也能有效解決養(yǎng)殖環(huán)境惡化導(dǎo)致的石斑魚免疫力下降和配合飼料營(yíng)養(yǎng)不平衡的問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)石斑魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)鏈的快速可持續(xù)發(fā)展,具有極大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
具體實(shí)施方式
一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料,該飼料中含有石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽,編碼該石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽的核酸序列由引物1、引物2和石斑魚cDNA模板通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得;上述引物序列分別為:
引物1:5’-TTCGTTGTRAASCCAAARGGTAG-3’(SEQ ID NO:1);
引物2:5’-TACCATCATCTGGCGACACCCACGAG-3’(SEQ ID NO:2)。
優(yōu)選的,所述石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽含有376個(gè)氨基酸,編碼該石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽的核酸含有1131個(gè)核苷酸。
優(yōu)選的,一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料,該飼料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:蛋白源原料70~75份,脂肪源原料10~12份,糖源原料9~10份,石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽0.2~0.5份,飼料黏合劑1~2份,抗氧化劑0.2~0.3份,復(fù)合維生素2~4份,復(fù)合礦物鹽2~4份,誘食劑1~2份。
優(yōu)選的,所述蛋白源原料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:魚粉37~43份,魚蛋白水解物15~20份,豆粕2~10份,磷蝦粉3~6份,啤酒酵母3~6份。
優(yōu)選的,所述蛋白水解物為金線魚蛋白水解物。
優(yōu)選的,所述脂肪源原料由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:魚油4~5份,豆油3~5份,卵磷脂1~4份。
優(yōu)選的,所述糖源原料為а-淀粉。
優(yōu)選的,所述抗氧化劑由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:維生素C磷酸酯0.1~0.2份和蝦青素0.1~0.2份。
優(yōu)選的,所述復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:維生素A1~1.5份,維生素D3 0.7~1.1份,維生素K3 2.5~3.5份,維生素E 18~22份,維生素B1 0.7~0.9份,維生素B2 1~1.2份,維生素B6 1.1~1.3份,維生素B12 0.2~0.3份,葉酸0.3~0.4份,泛酸鈣4~5份,生物素1~2份,煙酸4~6份,肌醇13~17份,氯化膽堿28~32份和介質(zhì)玉米芯粉15~16份。
優(yōu)選的,所述復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:ZnSO4·7H2O 15~2份,MnSO4·H2O1~1.5份,CuSO4·5H2O 0.3~0.6份,CoSO4·7H2O 0.3~0.6份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6~7份,Na2SeO30.6~0.8份,Ca(IO3)2 0.25~0.35份,KCl 12~13份,MgSO4·H2O 6~6.5份,Na2SO4 11~13份,Ca(H2PO4)2·2H2O 35~45份和介質(zhì)沸石粉17~19份。
優(yōu)選的,所述誘食劑由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:蛋氨酸0.8~1.2份,色氨酸0.4~0.6份,甜菜堿0.05~0.15份。
優(yōu)選的,所述飼料黏合劑為褐藻酸鈉。
優(yōu)選的,一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料,該飼料含有以下質(zhì)量百分比的成分:蛋白質(zhì)44~46%,脂肪16~19%,糖11~12%,灰分9~10%和水分8~10%。
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明,但并不局限于此。
實(shí)施例1一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料
按表1中實(shí)施例1的原料配方配制顆粒狀石斑魚專用小肽功能性配合飼料:
表1實(shí)施例1~4石斑魚專用小肽功能性配合飼料的配方
表1中所述蛋白水解物為金線魚蛋白水解物。
表1中所述生長(zhǎng)促進(jìn)肽為石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽,含有376個(gè)氨基酸,編碼該石斑魚專用生長(zhǎng)促進(jìn)肽的核酸含有1131個(gè)核苷酸,該核酸序列由引物1、引物2和石斑魚cDNA模板通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得,上述引物序列分別為:
引物1:5’-TTCGTTGTRAASCCAAARGGTAG-3’(SEQ ID NO:1);
引物2:5’-TACCATCATCTGGCGACACCCACGAG-3’(SEQ ID NO:2)。
表1中,實(shí)施例1所用到的復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:維生素A1.2份,維生素D3 0.9份,維生素K3 3份,維生素E 20份,維生素B1 0.808份,維生素B2 1.02份,維生素B6 1.206份,維生素B12 0.25份,葉酸0.306份,泛酸鈣4.242份,生物素1.5份,煙酸5.051份,肌醇15.152份,氯化膽堿30份和介質(zhì)玉米芯粉15.365份。
實(shí)施例1所用到的復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:ZnSO4·7H2O 1.8份,MnSO4·H2O 1.3份,CuSO4·5H2O 0.4份,CoSO4·7H2O 0.4份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6.5份,Na2SeO30.7份,Ca(IO3)2 0.3份,KCl 12.5份,MgSO4·H2O 6.3份,Na2SO4 12份,Ca(H2PO4)2·2H2O 40份和介質(zhì)沸石粉17.8份。
對(duì)實(shí)施例1制備的石斑魚專用小肽功能性配合飼料進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)分析,發(fā)現(xiàn)其含45.97%蛋白質(zhì),17.62%脂肪,11.31%糖,9.3%灰分,8.3%水分,如表2所示。
表2實(shí)施例1~4所制備的石斑魚專用小肽功能性配合飼料的營(yíng)養(yǎng)成分分析
用本實(shí)施例制備的專用小肽功能性配合飼料養(yǎng)殖石斑魚苗56天,在水質(zhì)、管理及初始體重(初始體重8.2g,下同)相同的情況下,本發(fā)明飼料效果與與投喂市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)石斑魚配合飼料效果相比較,體重增大34%(本發(fā)明飼料喂養(yǎng)的平均末體重為78g,商業(yè)配合粒飼料喂養(yǎng)的平均末體重為58g),增重率(WG)增大40%(本發(fā)明飼料喂養(yǎng)的WG是851,商業(yè)飼料喂養(yǎng)的WG是607),特定增長(zhǎng)率(SGR,%/天)增大15%(本發(fā)明飼料喂養(yǎng)的SGR為4.02,商業(yè)飼料喂養(yǎng)的SGR為3.49),成活率提高25%(本發(fā)明飼料喂養(yǎng)的成活率為92%,商業(yè)飼料喂養(yǎng)的成活率為67%),如表3所示。
表3實(shí)施例1所制備的專用小肽功能性配合飼料的飼養(yǎng)效果
實(shí)施例2:一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料
按表1中實(shí)施例2的原料配方制備顆粒狀石斑魚專用小肽功能性配合飼料。
其中,實(shí)施例2所用到的復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:維生素A1.2份,維生素D3 0.9份,維生素K3 3份,維生素E 20份,維生素B1 0.808份,維生素B2 1.02份,維生素B6 1.206份,維生素B12 0.25份,葉酸0.306份,泛酸鈣4.242份,生物素1.5份,煙酸5.051份,肌醇15.152份,氯化膽堿30份和介質(zhì)玉米芯粉15.365份。
實(shí)施例2所用到的復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:ZnSO4·7H2O 1.8份,MnSO4·H2O 1.3份,CuSO4·5H2O 0.4份,CoSO4·7H2O 0.4份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6.5份,Na2SeO30.7份,Ca(IO3)2 0.3份,KCl 12.5份,MgSO4·H2O 6.3份,Na2SO4 12份,Ca(H2PO4)2·2H2O 40份和介質(zhì)沸石粉17.8份。
對(duì)實(shí)施例2制備的石斑魚專用小肽功能性配合飼料進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)分析,發(fā)現(xiàn)其含45.12%蛋白質(zhì),18.40%脂肪,11.51%糖,9.5%灰分,9.2%水分,如表2所示。
用本實(shí)施例制備的專用小肽功能性配合飼料飼養(yǎng)石斑魚苗56天(初始體重8g),增重率1000,特定增長(zhǎng)率4.28,成活率86%,氨氮排放量為42mg kg-1h-1;市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料的魚苗生長(zhǎng)結(jié)果為,增重率650,特定增長(zhǎng)率3.60,成活率70%,氨氮排放量為62mgkg-1h-1;與投喂市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料相比,增重率提高54%,特定增長(zhǎng)率提高了19%,成活率提高了近16%,氨氮排放量比市場(chǎng)上通用商業(yè)石斑魚配合飼料減少32%。
實(shí)施例3:一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料
按表1中實(shí)施例3的原料配方制備顆粒狀石斑魚專用小肽功能性配合飼料。
其中,實(shí)施例3所用到的復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:維生素A1.2份,維生素D3 0.9份,維生素K3 3份,維生素E 20份,維生素B1 0.808份,維生素B2 1.02份,維生素B6 1.206份,維生素B12 0.25份,葉酸0.306份,泛酸鈣4.242份,生物素1.5份,煙酸5.051份,肌醇15.152份,氯化膽堿30份和介質(zhì)玉米芯粉15.365份。
實(shí)施例3所用到的復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:ZnSO4·7H2O 1.8份,MnSO4·H2O 1.3份,CuSO4·5H2O 0.4份,CoSO4·7H2O 0.4份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6.5份,Na2SeO30.7份,Ca(IO3)2 0.3份,KCl 12.5份,MgSO4·H2O 6.3份,NaSO4 12份,Ca(H2PO4)2·2H2O 40份和介質(zhì)沸石粉17.8份。
對(duì)實(shí)施例3制備的石斑魚專用小肽功能性配合飼料進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)分析,發(fā)現(xiàn)其含44.71%蛋白質(zhì),18.19%脂肪,11.73%糖,9.7%灰分,8.9%水分,如表2所示。
用本實(shí)施例制備的專用小肽功能性配合飼料飼養(yǎng)石斑魚苗56天(初始體重9g),增重率933,特定增長(zhǎng)率4.17,成活率89%,氨氮排放量為48mg kg-1h-1;市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料的魚苗生長(zhǎng)結(jié)果為,增重率589,特定增長(zhǎng)率3.45,成活率72%,氨氮排放量為65mgkg-1h-1;與投喂市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料相比,增重率提高58%,特定增長(zhǎng)率提高了21%,成活率提高了16%,氨氮排放量比市場(chǎng)上通用商業(yè)石斑魚苗微顆粒飼料減少26%。
實(shí)施例4:一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料
按表1中實(shí)施例4的原料配方制備顆粒狀石斑魚專用小肽功能性配合飼料。
其中,實(shí)施例4所用到的復(fù)合維生素由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:維生素A1.2份,維生素D3 0.9份,維生素K3 3份,維生素E 20份,維生素B1 0.808份,維生素B2 1.02份,維生素B6 1.206份,維生素B12 0.25份,葉酸0.306份,泛酸鈣4.242份,生物素1.5份,煙酸5.051份,肌醇15.152份,氯化膽堿30份和介質(zhì)玉米芯粉15.365份。
實(shí)施例4所用到的復(fù)合礦物鹽由以下質(zhì)量份數(shù)的成分組成:ZnSO4·7H2O 1.8份,MnSO4·H2O 1.3份,CuSO4·5H2O 0.4份,CoSO4·7H2O 0.4份,F(xiàn)eSO4·7H2O 6.5份,Na2SeO30.7份,Ca(IO3)2 0.3份,KCl 12.5份,MgSO4·H2O 6.3份,Na2SO412份,Ca(H2PO4)2·2H2O 40份和介質(zhì)沸石粉17.8份。
對(duì)實(shí)施例4制備的石斑魚專用小肽功能性配合飼料進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)分析,發(fā)現(xiàn)其含44.66%蛋白質(zhì),18.17%脂肪,11.92%糖,9.9%灰分,9.5%水分,如表2所示。
用本實(shí)施例制備的專用小肽功能性配合飼料飼養(yǎng)石斑魚苗56天(初始體重8.6g),增重率947,特定增長(zhǎng)率4.19,成活率90%,氨氮排放量為43mg kg-1h-1;市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料的魚苗生長(zhǎng)結(jié)果為,增重率586,特定增長(zhǎng)率3.44,成活率75%,氨氮排放量為70mgkg-1h-1;與投喂市場(chǎng)上通用的進(jìn)口商業(yè)配合飼料相比,增重率提高62%,特定增長(zhǎng)率提高了22%,成活率提高了近15%,氨氮排放量比市場(chǎng)上通用商業(yè)石斑魚配合飼料減少39%。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式,但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制,其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化,均應(yīng)為等效的置換方式,都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
<110> 共鱗實(shí)業(yè)(深圳)有限公司
<120> 一種石斑魚專用小肽功能性配合飼料
<130>
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工引物
<400> 1
ttcgttgtra asccaaargg tag 23
<210> 2
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工引物
<400> 2
taccatcatc tggcgacacc cacgag 26