一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置制造方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，該裝置包括培養(yǎng)氣體室、恒溫水浴、恒溫系統(tǒng)、灌流槽、培養(yǎng)液超濾器和灌流液收集容器，所述培養(yǎng)氣體室、恒溫水浴、恒溫系統(tǒng)和灌流槽設于培養(yǎng)容器中，同時在培養(yǎng)容器上還設有培養(yǎng)氣體輸入孔和培養(yǎng)氣體溢出孔，所述灌流槽的下部位于恒溫水浴中，并通過其流入管道與培養(yǎng)液超濾器連接，灌流槽的上部位于培養(yǎng)氣體室中，并通過其流出管道與灌流液收集容器連接。本實用新型集自動供液、自動供氣、自動連續(xù)收集代謝產物為一體，可避免污染和實驗損失，并能簡化操作過程和提高實驗結果的精度。
【專利說明】一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置【背景技術】:
[0002]進行細胞培養(yǎng)時由于需要間隔一定時間更換培養(yǎng)液和清除代謝廢物，因此可能增加實驗的系統(tǒng)誤差。尤其是人工更換培養(yǎng)液時，不僅使污染機率增大，還可能因加樣時的液流沖擊而攪動細胞，影響細胞貼壁，甚至還可能出現(xiàn)將細胞抽吸或沖掉而造成實驗損失。另外，目前體外細胞培養(yǎng)代謝物的檢測，是采用即時的代謝產物來進行檢測的，其檢測方法是將細胞培養(yǎng)一段時間后，提取培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)液來進行檢測，這種檢測方法存在如下缺點:(I)實驗結果有可能受到次生代謝產物的干擾而存在誤差；(2 )為了收集代謝產物進而延長培養(yǎng)時間，反而導致代謝廢物影響細胞代謝類型而影響實驗預期，甚至還可能因代謝物過多而導致細胞代謝異?；蛩劳?。目前還未見有集自動供液、自動供氣、自動連續(xù)收集代謝產物為一體的裝置的報道。

【發(fā)明內容】

[0003]本實用新型的目的在于提供一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，該裝置可持續(xù)供給培養(yǎng)液，并自動收集代謝產物。
[0004]為達到上述目的，本實用新型采用的解決方案是:一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，包括培養(yǎng)氣體室、恒溫水浴、恒溫系統(tǒng)、灌流槽、培養(yǎng)液超濾器和灌流液收集容器，所述培養(yǎng)氣體室、恒溫水浴、恒溫系統(tǒng)和灌流槽設于培養(yǎng)容器中，其中培養(yǎng)氣體室位于培養(yǎng)容器的上部，恒溫水浴和恒溫系統(tǒng)分別位于培養(yǎng)容器的中部和下部，同時在培養(yǎng)容器上還設有培養(yǎng)氣體輸入孔和培養(yǎng)氣體溢出孔,所述灌流槽的下部位于恒溫水浴中，并通過其流入管道與培養(yǎng)液超濾器連接，灌流槽的上部位于培養(yǎng)氣體室中，并通過其流出管道與灌流液收集容器連接。
[0005]上述灌流槽的流入管道或/和培養(yǎng)液超濾器的流入管道上還設有加藥器。所述加藥器為閥門式加藥器，由Y型管道、閥門支架、螺母和加壓板構成，Y型管道的其中兩個端口連接于灌流槽的流入管道或培養(yǎng)液超濾器的流入管道上，另一端口由橡膠膜封閉，構成加藥刺入部位，螺母和加壓板通過閥門支架安裝在Y型管道上，通過旋轉螺母推進加壓板可減小管徑。
[0006]上述灌流槽為多個，培養(yǎng)液超濾器通過灌流分液器與每個灌流槽的流入管道連接，在培養(yǎng)液超濾器的流入管道和灌流槽的每個流入管道上均設有加藥器。
[0007]上述灌流槽呈漏斗狀，其下部培養(yǎng)液流入口處設有緩沖球，中部設有緩沖過濾膜，微孔玻璃細胞培養(yǎng)板位于緩沖過濾膜上。
[0008]本實用新型的使用過程是:先將系統(tǒng)的恒溫水浴加熱后維持在細胞培養(yǎng)的最佳溫度，然后將培養(yǎng)系統(tǒng)氣體通入，并調節(jié)好氣流量，打開微灌流培養(yǎng)液的微量注射器，通過自動微量注射器調整好流量，持續(xù)微量進行培養(yǎng)液供給，并使液體全部通過微型灌流槽流入灌流液收集容器，使培養(yǎng)液充滿灌流的整個管道系統(tǒng)。接著將粘附有待培養(yǎng)實驗細胞的微孔玻璃細胞培養(yǎng)板放置在微灌流槽中的緩沖過濾膜上，并淹沒在培養(yǎng)液中，進入灌流，注意無菌操作。如需收集一般代謝產物，則選定灌流時間段內收集的培養(yǎng)液即可。如需加入藥物觀察代謝影響，則通過灌流閥門加藥器進行加藥，用移液器尖端刺入橡膠囊推入即可，其中如是對所有微灌流槽的細胞給予相同的藥物干預，則可通過總通道灌流閥門加藥器進行加藥；如是針對不同的微灌流槽細胞進行不同的藥物處理，則選擇在單通道灌流閥門加藥器注入相對應的藥物，此時可同時安置多個灌流液收集容器，同步開始灌流、干預、收集灌流液并分析，可減少環(huán)境不均一導致的結果不真實。如果是與蛋白質分析系統(tǒng)配合，則在連續(xù)灌流干預后，收集不同時間段的產物進行分析，可以顯示細胞對某一刺激源刺激后代謝隨時間發(fā)生的變化規(guī)律，從而可通過代謝產物的時間順序研究藥物對細胞代謝的影響規(guī)律。
[0009]本實用新型集自動供液、自動供氣、自動連續(xù)收集代謝產物為一體，并可在不同時間點給予藥物干預并即時收集代謝產物，從而可避免污染和實驗損失，并能簡化操作過程和提聞實驗結果的精度。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1為本實用新型的結構示意圖。
[0011]圖2為培養(yǎng)液超濾器、分液器、加藥器、灌流液收集容器和多個灌流槽的連結示意圖。
[0012]圖3為灌流槽的結構示意圖。
[0013]圖4為培養(yǎng)液超濾器的結構示意圖。
[0014]圖5為閥門式加藥器的結構示意圖。
[0015]圖中:I一培養(yǎng)容器2—培養(yǎng)氣體室3—恒溫系統(tǒng)4一恒溫水浴5—培養(yǎng)液超濾器6—灌流槽7—灌流液收集容器8—培養(yǎng)氣體輸入孔9一培養(yǎng)氣體溢出孔10—灌流分液器11一緩沖球12—緩沖過濾膜13—微孔玻璃細胞培養(yǎng)板14一超濾膜15—加藥器16—加藥器17 — Y型管道18—螺母19一加壓板20—閥門支架21—橡膠膜
【具體實施方式】
[0016]如圖1所示，本實用新型主要由培養(yǎng)容器1、培養(yǎng)氣體室2、恒溫系統(tǒng)3、恒溫水浴
4、培養(yǎng)液超濾器5、灌流槽6、灌流液收集容器7、灌流分液器10和加藥器15、16組成，培養(yǎng)容器I的頂部為邊緣有密封條的蓋子，培養(yǎng)氣體室2、恒溫水浴4、恒溫系統(tǒng)3和微型灌流槽6設于培養(yǎng)容器I中，其中培養(yǎng)氣體室2位于培養(yǎng)容器I的上部，恒溫水浴4和恒溫系統(tǒng)3分別位于培養(yǎng)容器I的中部和下部，同時在培養(yǎng)容器I的蓋子上還設有輸入CO2等培養(yǎng)氣體的輸入孔8和培養(yǎng)氣體溢出孔9，溢出孔9與廢氣回收系統(tǒng)連接。微型灌流槽6呈漏斗狀，其圓錐部分位于恒溫水浴4中，其錐尖部分通過流入管道和適配插頭、接頭與培養(yǎng)液超濾器5連接，圓柱部分位于培養(yǎng)氣體室2中，并通過其流出管道和適配插頭、接頭與灌流液收集容器7連接。
[0017]灌流槽6可采用一個或多個，當灌流槽6為多個時，如圖2所示，培養(yǎng)液超濾器5通過灌流分液器10與每個灌流槽6的連接，此時灌流液收集容器7根據(jù)需要，可為一個，也可每個灌流槽6接一個灌流液收集容器7。從圖3可以看出，在灌流槽6的錐尖開口處還設有一緩沖球11，在圓錐與圓柱部分交界處設有半透的緩沖過濾膜12，緩沖過濾膜12上放置微孔玻璃細胞培養(yǎng)板13，緩沖球11可防止灌流液反流，并能緩沖灌流液沖擊細胞培養(yǎng)玻璃板13，緩沖過濾膜12能減少灌流液體流動對細胞的沖擊脫落。
[0018]培養(yǎng)液超濾器5如圖4所示，呈飛碟狀，其上設有液體流入口，其中粘附有超濾膜14，用于過濾細菌等雜質，其下連接灌流分液器10。
[0019]本實用新型在培養(yǎng)液超濾器5的流入管道和每個灌流槽6的流入管道上還設有閥門式加藥器15和16，所述閥門式加藥器15和16由Y型管道17、閥門支架20、螺母18和加壓板19構成，Y型管道17的其中兩個端口連接于灌流槽6的流入管道或培養(yǎng)液超濾器5的流入管道上，另一端口由橡膠膜21封閉，加藥時槍頭從橡膠膜21中刺入，加藥完畢拔出槍頭后，穿刺孔可自行閉合，從而可防止液體反流，構成加藥刺入部位。螺母18和加壓板19通過閥門支架20安裝在Y型管道17上，旋轉螺母18可推進加壓板19，從而可減小管徑直至關閉，以實現(xiàn)控流和開關。
[0020]以上所述僅為本實用新型優(yōu)選實施例之一，需要指出的是，對本領域普通技術人員在不脫離本實用新型使用原理的前提下，還可以做若干變型及改進，也應視為本實用新型保護范圍。
【權利要求】
1.一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，包括培養(yǎng)氣體室(2)、恒溫系統(tǒng)(3)、恒溫水浴(4)、培養(yǎng)液超濾器(5)、灌流槽(6)和灌流液收集容器(7)，其特征在于:所述培養(yǎng)氣體室(2)、恒溫系統(tǒng)(3)、恒溫水浴(4)和灌流槽(6)設于培養(yǎng)容器(I)中，其中培養(yǎng)氣體室(2)位于培養(yǎng)容器(I)的上部，恒溫水浴(4)和恒溫系統(tǒng)(3)分別位于培養(yǎng)容器(I)的中部和下部，同時在培養(yǎng)容器(I)上還設有培養(yǎng)氣體輸入孔(8)和培養(yǎng)氣體溢出孔(9)，所述灌流槽(6)的下部位于恒溫水浴(4)中，并通過其流入管道與培養(yǎng)液超濾器(5)連接，灌流槽(6)的上部位于培養(yǎng)氣體室(I)中，并通過其流出管道與灌流液收集容器(7)連接。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，其特征在于:在灌流槽(6)的流入管道或/和培養(yǎng)液超濾器(5)的流入管道上還設有加藥器(15、16)。
3.根據(jù)權利要求2所述的一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，其特征在于:所述加藥器(15、16)為閥門式加藥器，由Y型管道(17)、螺母(18)、加壓板(19)和閥門支架(20 )構成，Y型管道(17 )的其中兩個端口連接于灌流槽(6 )的流入管道或培養(yǎng)液超濾器(5 )的流入管道上，另一端口由橡膠膜(21)封閉，構成加藥刺入部位，螺母(18)和加壓板(19)通過閥門支架(20)安裝在Y型管道(17)上，通過旋轉螺母(18)推進加壓板(19)可減小管徑。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，其特征在于:所述灌流槽(6)為多個，培養(yǎng)液超濾器(5)通過灌流分液器(10)與每個灌流槽(6)的流入管道連接。
5.根據(jù)權利要求4所述的一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，其特征在于:在培養(yǎng)液超濾器(5)的流入管道和灌流槽(6)的每個流入管道上均設有加藥器。
6.根據(jù)權利要求1所述的一種微灌流細胞培養(yǎng)及產物收集集成裝置，其特征在于:灌流槽(6)呈漏斗狀，其下部培養(yǎng)液流入口處設有緩沖球(11)，中部設有緩沖過濾膜(12)，微孔玻璃細胞培養(yǎng)板(13)位于緩沖過濾膜(12)上。
【文檔編號】C12M3/00GK203700381SQ201420055861
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年1月28日 優(yōu)先權日:2014年1月28日
【發(fā)明者】郭文杰, 楊林, 茍小軍, 王躍锜, 史鈾, 李波, 劉冰花 申請人:成都大學