一種耐輻射鐮孢霉菌及在吸附銫生物處理中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種耐輻射鐮孢霉菌及其在放射性核素銫吸附中應(yīng)用，通過(guò)提供一種自篩選的耐輻射鐮孢菌（ Fusariumsp .）F54CGMCCNo.8359及其應(yīng)用，通過(guò)試驗(yàn)證明該耐輻射鐮孢菌（ Fusariumsp .）F54CGMCCNo.8359菌種對(duì)多種金屬具有耐受性，其中對(duì)Pb2+、Zn2+、Ni+的耐受濃度最大，分別可達(dá)1000mg/L、500mg/L和500mg/L；對(duì)Co2+、Cr2+、Hg2+的耐受性次之，都可達(dá)200mg/L。同時(shí)菌株在放射性核素銫吸附中應(yīng)用獲得顯著明顯的技術(shù)效果，從而證明了該菌種在吸附銫生物處理中具有良好的應(yīng)用前景。CGMCC No835920131022
【專利說(shuō)明】一種耐輻射鐮孢霉菌及在吸附銫生物處理中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種微生物菌種應(yīng)用于生物吸附放射性核素【技術(shù)領(lǐng)域】，具體的，本發(fā) 明涉及一種耐輻射鐮孢霉菌及其在放射性核素銫吸附中應(yīng)用的【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 城市化、工業(yè)化及人口增長(zhǎng)造成全球性能源危機(jī)，可持續(xù)發(fā)展需求使得人類越來(lái) 越依賴于新能源。核能以其極低的二氧化碳排放和巨大的發(fā)展?jié)摿Χ絹?lái)越受到眾多國(guó)家 的重視。核能高速發(fā)展的同時(shí)，也給全球環(huán)境造成巨大的壓力，使放射性污染成為當(dāng)前重大 的環(huán)境問(wèn)題之一，特別是以切爾諾貝利和日本福島核電站為代表的核事故向環(huán)境釋放了大 量的放射性，造成當(dāng)?shù)丶爸苓叚h(huán)境嚴(yán)重的放射性污染，對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康造成長(zhǎng)期巨 大的潛在威脅。
[0003] 作為生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，微生物種群數(shù)量大、分布廣、比表面積大、繁殖快， 對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力強(qiáng)，對(duì)放射性輻射表現(xiàn)出高度的耐受性。利用生物作用清除、修復(fù)和 治理放射性污染具有選擇性強(qiáng)、處理時(shí)間短、成本低，不造成二次污染和不破壞生態(tài)環(huán)境等 優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)已成為放射性污染治理的熱點(diǎn)研究技術(shù)之一。
[0004] 銫137(mCs)是重要的裂變產(chǎn)物之一，也是核彈、核武器試驗(yàn)和核反應(yīng)堆內(nèi)核裂 變的副產(chǎn)品之一，其半衰期較長(zhǎng)，具有較高的遷移性，易通過(guò)生物鏈轉(zhuǎn)移造成輻射危害，它 會(huì)釋放伽瑪射線，在環(huán)境放射性污染修復(fù)中備受關(guān)注。銫137的半衰期較長(zhǎng)達(dá)30年，會(huì)在 環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)中存留、積累和遷移，造成嚴(yán)重的環(huán)境污染和生態(tài)危害。如果透過(guò)進(jìn)食或呼 吸，攝入了銫137,或受到沉降在地面上的銫137所照射，都會(huì)對(duì)身體有較持久的影響。
[0005] 在治理放射性環(huán)境污染方面，傳統(tǒng)方法是工程法、化學(xué)法。工程法是物理性地收集 和隔離放射性物質(zhì)的方法，化學(xué)法是采用特殊的化學(xué)品來(lái)固定和清除放射性污染。上述方 法雖然已得到成功的應(yīng)用，如日本的廣島和長(zhǎng)崎兩個(gè)城市、馬紹爾群島共和國(guó)的比基尼環(huán) 礁核試驗(yàn)場(chǎng)和澳大利亞的馬拉林加核試驗(yàn)場(chǎng)的修復(fù)與重建，但其成本很高，難以用于大面 積輻射區(qū)的修復(fù)，因此，工程與化學(xué)的方法局限性很大。生物修復(fù)是利用特殊的生物富集和 固定放射性污染物的方法，主要是微生物和植物，特別是微生物功能利用最受關(guān)注，因其 成本低，適合于大面積修復(fù)，因而生物修復(fù)放射性污染成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。
[0006] 研究表明：微生物不僅可通過(guò)溶解和沉淀、生物吸附和吸收、氧化還原等作用來(lái)治 理環(huán)境中的放射性核素污染，并且可以通過(guò)改變植物根際微環(huán)境，從而提高植物對(duì)重金 屬離子和放射性核素的吸收、揮發(fā)或固定的效率。相關(guān)的研究也取得了積極進(jìn)展，如Jana Sitte等研究證明放射性核素鈾（U)在土壤中的遷移率受環(huán)境中微生物及環(huán)境因子的影 響，ifcrMart/i研究表明Fe(III)還原菌的增生有利于包括U在內(nèi)的重金屬離 子由土壤向地下水遷移。?和ftiforee/s等的研究表明，細(xì)菌菌群可促使可溶態(tài) U (VI)向穩(wěn)定的U (IV)轉(zhuǎn)化，等研究顯示硫酸鹽還原菌可固定U， 等分離獲得可大量積累iCs、2?24^!!等放射性核素的微生物菌株，Hu等的研究表明 許多微生物都能吸附 U，如和 cererisiae。Entry等研究發(fā)現(xiàn)施用AM菌根菌可促進(jìn)行植物對(duì)mCs^Sr 的積累，希瓦氏菌MR-I，可以有效將可溶性浐、Cr21和Tcli還原為不溶性U氣Cr 21和Tc41。
[0007] 利用微生物修復(fù)放射性環(huán)境污染已經(jīng)有成功的例子，Groudev在2001年利用土著 微生物對(duì)保加利亞南部含有放射性元素鈾、鐳和釷同重金屬銅、鎘和鉛污染土壤，進(jìn)行原位 修復(fù)，經(jīng)過(guò)8個(gè)月的時(shí)間，污染物的水平下降到人體安全范圍。
[0008] 利用微生物修復(fù)放射性的污染環(huán)境必須考慮到以下兩個(gè)方面：第一，必須是強(qiáng)耐 輻射的微生物；第二，微生物修復(fù)環(huán)境時(shí)不能威脅到公共安全，也不能產(chǎn)生二次污染。由 于大多數(shù)的細(xì)菌對(duì)放射性比較敏感，因此它們修復(fù)放射性污染環(huán)境的能力會(huì)受到較大的限 制。因此，需要從自然環(huán)境中去分離具有輻射抗性的微生物，或者通過(guò)基因工程技術(shù)來(lái)改造 一些微生物使之獲得輻射抗性。目前尚無(wú)有關(guān)耐輻射鐮孢霉菌及其在放射性核素吸附中應(yīng) 用的報(bào)導(dǎo)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 針對(duì)目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)關(guān)于鐮孢菌及其在放射性核素吸附中應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道，特 別是沒(méi)有耐輻射鐮孢霉菌在銫生物處理中的應(yīng)用相關(guān)報(bào)道。本發(fā)明目的旨在于提供一 種耐輻射鐮孢霉菌及在吸附放射性銫生物處理中的應(yīng)用，特別是本發(fā)明提供一種鐮孢菌 5/7. )F54 CGMCC No. 8359在吸附銫生物處理中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明采用的主要技術(shù)方案： 本發(fā)明從新疆某地輻射污染環(huán)境中取樣，以不同的培養(yǎng)溫度、PH值、培養(yǎng)基為富集條 件，篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為F54的菌株，經(jīng)過(guò)微生物菌 種的生理生化特性、菌落形態(tài)、菌種的分子水平等系列試驗(yàn)驗(yàn)證確定，該菌種是一種耐輻射 鐮孢菌5/7. )F54,經(jīng)菌種指定保藏機(jī)構(gòu)保藏，保藏號(hào)為CGMCC No. 8359,利用該菌 種在放射性銫生物處理中應(yīng)用。通過(guò)試驗(yàn)證明該耐福射鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359菌種對(duì)多種金屬具有耐受性，其中對(duì)Pb2+、Zn 2+、Ni+的耐受濃度最大，分別可達(dá)1000 mg/L、500 mg/L 和 500 mg/L;對(duì) Co2+、Cr2+、Hg2+的耐受性次之，都可達(dá) 200 mg/L。同時(shí)菌 株在放射性核素銫吸附中應(yīng)用獲得顯著明顯的技術(shù)效果，從而證明了該菌種在吸附銫生物 處理中具有良好的的應(yīng)用前景。
[0011] 本發(fā)明具體提供一種利用耐福射鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 5/7. ) F54 CGMCC No. 8359及 在吸附放射性銫生物處理中的應(yīng)用。本發(fā)明所使用的耐福射鐮孢菌5/7.)由新 疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所從新疆某地放射性污染土壤中取樣分離，以不同的培養(yǎng)溫 度、PH值、培養(yǎng)基為富集條件，篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為 F54的菌株保藏于布達(dá)佩斯條約微生物國(guó)際保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普 通微生物中心（CGMCC)保藏，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物 研究所，郵編：1〇〇1〇1，保藏日期為2013年10月22日，菌種保藏號(hào)為CGMCC No. 8359,該菌 株培養(yǎng)溫度28-30°C，最適培養(yǎng)溫度28°C左右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯200g、葡 萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水1L，pH自然)，經(jīng)28°C、48h培養(yǎng)，F(xiàn)54初生菌落白色，絨毛狀，生長(zhǎng) 繁茂。4天后呈灰白色荔肉白色，背面蛘肉白色。在培養(yǎng)基表面逐漸形成絲束交織的厚膜， 高低不平呈點(diǎn)片狀，用接種針不易挑下。顯微鏡下菌絲分隔，老菌絲內(nèi)有許多球形孢子。6 天后氣絲頂端開始膨大成形狀不規(guī)整的孢囊，囊內(nèi)有許多大小不一的孢子，孢囊無(wú)囊軸，無(wú) 外壁及囊被。根據(jù)以上形態(tài)特征，初步鑒定該菌株為半知菌綱叢梗孢目瘤座孢科鮮色多孢 族鐮孢霉屬的一個(gè)種。參照《真菌鑒定手冊(cè)》進(jìn)行鑒定，結(jié)合對(duì)F54菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生理 生化鑒定，命名為鐮孢5/7.)，是一種耐福射鐮孢霉菌5/7.)。
[0012] 經(jīng)biolog實(shí)驗(yàn)，該菌株可利用N-乙?；?β-D-葡萄糖胺，核糖醇，杏苷，L-阿拉 伯糖，D-阿拉伯醇，熊果苷，D-纖維二糖，糊精，D果糖，D-半乳糖，龍膽二糖，D-葡萄糖胺， a-D-葡萄糖，a-D-葡萄糖-1-磷酸鹽，D-葡萄醛酸，丙三醇，肝糖，纖維醇，2-酮-D-葡萄 糖酸，a-D-乳糖，麥芽糖醇，麥芽糖，麥芽三糖，D-甘露醇，D苷露糖，D-松三糖，D-蜜二糖， a-甲基-D-半乳糖苷，β-甲基-D-半乳糖苷，a-甲基-D-葡萄糖苷，β-甲基-D-葡萄糖 苷，6-0-D-吡喃葡萄糖酰-D-呋喃果糖，D-蜜三糖，L-鼠李糖，D-核糖，水楊苷，D-山梨 醇，L-山梨糖，水蘇糖，蔗糖，D-海藻糖，松二糖，木糖醇，D-木糖，Y-氨基丁酸，溴代琥珀 酸，反丁烯二酸，β-羥基丁酸，Y-羥基丁酸，P-羥苯乙酸，a-酮戊二酸，D-乳酸甲基酯， L-乳酸，D-蘋果酸，蘋果酸，奎尼酸，D-葡萄糖二酸，琥珀酸，琥珀酸甲基酯，L-丙胺酸酰 胺，L-丙胺酸，L-丙胺酰氨基乙酸，L-天冬酰胺，L-天冬氨酸，L-谷氨酸，甘氨酰-L-谷氨 酸，鳥氨酸，L-苯基柄氨酸，脯氨酸，焦谷氨酸，L-絲氨酸，L-蘇胺酸，2-氨基乙醇，腐苷，腺 苷，尿苷，腺苷 _5磷酸鹽。
[0013] 本發(fā)明通過(guò)總DNA的提取、ITS序列的PCR擴(kuò)增和測(cè)序，根據(jù)測(cè)序結(jié)果，用Blast 搜索軟件從GenBank、EMBL等數(shù)據(jù)庫(kù)中調(diào)出相似性較高的相關(guān)菌株的ITS基因序列，用 Clustal X 2.0進(jìn)行多序列比對(duì)，用MEGA 5.0軟件選取Saitou和Nei的鄰接法(yVfcigAAor 進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建和同源性比較。經(jīng)測(cè)定，鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 577. )F54 CGMCC No. 8359的ITS基因序列長(zhǎng)度為442bp。通過(guò)上述結(jié)果及ITS基因同源分析、系統(tǒng) 發(fā)育分析結(jié)果，將純化的菌株鐮孢菌沙.）F54 CGMCC No. 8359進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化 樹的構(gòu)建及多樣性分析，菌種編號(hào)為F54與ATCC MYA-3931 同源性最高，將菌種編號(hào)為F54菌株鑒定為鐮孢菌577.)。將增殖培養(yǎng)的鐮孢 菌謂5/7. )F54 CGMCC No. 8359 接種于 PDA 培養(yǎng)基中（添加 CsCl 終濃度 20mg/L)， 180-200rpm、28°C、培養(yǎng)70h，以達(dá)到吸附溶液中銫離子的目的，最大去除率達(dá)到80%以上。
[0014] 同時(shí)，本發(fā)明具體提供一種利用耐福射鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359進(jìn)行放射性銫生物處理中應(yīng)用技術(shù)方案： 本發(fā)明所用的菌株鍵抱菌(/^Asariurn 5/?. ) F54 CGMCC No. 8359 對(duì)于 Ni+, Cr2+'、Zn2+、 Co2+、Pb2+、Hg2+六種離子均具有耐受特性，其中對(duì)Pb 2+、Zn 2+、Ni+的耐受濃度最大，分別可 達(dá) 1000 mg/L、500 mg/L 和 500 mg/L;對(duì) Co2+、Cr2+、Hg2+的耐受性次之，都可達(dá) 200 mg/L。 同時(shí)在放射性核素銫吸附中應(yīng)用獲得顯著明顯的技術(shù)效果，從而證明了該菌種在吸附銫生 物處理中具有良好的的應(yīng)用前景。
[0015] 本發(fā)明進(jìn)而提供耐福射鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 5/7. )F54 CGMCC No. 8359的分離和培養(yǎng) 方法。
[0016] 1.分離培養(yǎng)基采用：PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯200g，葡萄糖20g，pH自然。
[0017] 2.分離和篩選條件：采取梯度稀釋法，稱取IOg 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水 中，30° C活化30min后進(jìn)行梯度稀釋，選取10-2、10-3、10-4稀釋液分別涂布于分離培養(yǎng) 基PDA培養(yǎng)基平板，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，置28° C培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色 等不同的菌落分別劃線接種于相應(yīng)的平板，直至無(wú)雜菌落。經(jīng)培養(yǎng)篩選確定的耐輻射鐮孢 菌斤118&1^111118?.)?54 061〇：此.8359在？04培養(yǎng)基初生菌落白色，絨毛狀，生長(zhǎng)繁茂。4 天后呈灰白色荔肉白色，背面蛘肉白色。在培養(yǎng)基表面逐漸形成絲束交織的厚膜，高低不平 呈點(diǎn)片狀，用接種針不易挑下。顯微鏡下菌絲分隔，老菌絲內(nèi)有許多球形孢子。6天后氣絲 頂端開始膨大成形狀不規(guī)整的孢囊，囊內(nèi)有許多大小不一的孢子，孢囊無(wú)囊軸，無(wú)外壁及囊 被。利用biolog實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該菌可利用N-乙?；?β-D-葡萄糖胺，核糖醇，杏苷，L-阿拉 伯糖，D-阿拉伯醇，熊果苷，D-纖維二糖，糊精，D果糖，D-半乳糖，龍膽二糖，D-葡萄糖胺， a-D-葡萄糖，a-D-葡萄糖-1-磷酸鹽，D-葡萄醛酸，丙三醇，肝糖，纖維醇，2-酮-D-葡萄 糖酸，a-D-乳糖，麥芽糖醇，麥芽糖，麥芽三糖，D-甘露醇，D苷露糖，D-松三糖，D-蜜二糖， a-甲基-D-半乳糖苷，β-甲基-D-半乳糖苷，a-甲基-D-葡萄糖苷，β-甲基-D-葡萄糖 苷，6-0-D-吡喃葡萄糖酰-D-呋喃果糖，D-蜜三糖，L-鼠李糖，D-核糖，水楊苷，D-山梨 醇，L-山梨糖，水蘇糖，蔗糖，D-海藻糖，松二糖，木糖醇，D-木糖，Y-氨基丁酸，溴代琥珀 酸，反丁烯二酸，β-羥基丁酸，Y-羥基丁酸，P-羥苯乙酸，a-酮戊二酸，D-乳酸甲基酯， L-乳酸，D-蘋果酸，蘋果酸，奎尼酸，D-葡萄糖二酸，琥珀酸，琥珀酸甲基酯，L-丙胺酸酰 胺，L-丙胺酸，L-丙胺酰氨基乙酸，L-天冬酰胺，L-天冬氨酸，L-谷氨酸，甘氨酰-L-谷氨 酸，鳥氨酸，L-苯基柄氨酸，脯氨酸，焦谷氨酸，L-絲氨酸，L-蘇胺酸，2-氨基乙醇，腐苷，腺 苷，尿苷，腺苷 _5' -磷酸鹽。
[0018] 通過(guò)實(shí)施本發(fā)明具體的技術(shù)指標(biāo)，實(shí)現(xiàn)本
【發(fā)明內(nèi)容】
，可以達(dá)到以下有益效果： 本發(fā)明提供的耐輻射鐮孢菌（Fusarium sp. )F54 CGMCC No. 8359及其在銫吸附中的 應(yīng)用，對(duì)對(duì)于Ni+、Cr2+、Zn2+、Co2+、Pb2+、Hg2+六種離子均具有耐受特性，其中對(duì)Pb2+、 2112+、附+的耐受濃度最大，分別可達(dá)100〇11^/1、50〇11^/1和50〇11^/1;對(duì)(：〇2+、02+、 Hg2+的耐受性次之，都可達(dá)200 mg/L。通過(guò)本法可以利用菌體的生長(zhǎng)吸附穩(wěn)定性銫和放射 性銫。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019] 圖 1 所示為鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359 水壓片圖。
[0020] 圖2所示為鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359系統(tǒng)發(fā)育樹狀圖。
[0021] 圖 3 所示為鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359 在 20mg/L Cs+壓力下生 長(zhǎng)曲線及吸附特性圖。
[0022] 圖4所示為pH對(duì)鐮孢菌5/7. )F54 CGMCC No. 8359生長(zhǎng)吸附Cs+的影 響圖。
[0023] 圖5所示為不同金屬離子對(duì)鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 5/7. )F54 CGMCC No. 8359生長(zhǎng)吸附 Cs+影響圖。
[0024] 圖6所示為不同菌體量對(duì)鐮孢菌5/7. )F54 CGMCC No. 8359吸附Cs+的 影響圖。
[0025] 圖7所示為吸附時(shí)間對(duì)鐮孢菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359菌體吸附Cs+ 的影響圖。
[0026] 圖8所示為溫度對(duì)鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 5/7. )F54 CGMCC No. 8359菌體吸附Cs+的影 響圖。
[0027] 圖9所示為鐮孢菌沙.）F54 CGMCC No. 8359對(duì)穩(wěn)定銫和放射性銫的吸 附圖。

【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，當(dāng)然，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而 不用于限制本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
[0029] 本發(fā)明中涉及到的主要原輔材料、試劑和儀器設(shè)備： 培養(yǎng)基選用：PDA培養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水lL，pH自然。
[0030] 主要儀器與試劑：MSSPX-250型生化培養(yǎng)箱，MLS-3020高壓蒸汽滅菌鍋，SW-CJ-IF B型單人雙面凈化工作臺(tái)，E360K離心機(jī)，恒溫?fù)u床HWY-KKLPCR儀Eppendorf No:5345,電 泳儀 Bio-Rad Mode 200/2.0,凝膠成像儀 United-Bio, GK-330C plus，PCR 預(yù)混液（TaKaRa Biotechnology),其余試劑均為分析純。超聲波破碎儀為美國(guó)Sonics，VC130。Xseries II 型電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS)，美國(guó)THERMO公司；Seven Easy Plus S20P型精密pH 計(jì)，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué) 儀器有限公司；THZ-82氣浴恒溫振蕩箱，江蘇金壇誠(chéng)輝儀器廠；GMSX-280壓力蒸汽滅菌器， 北京永光明醫(yī)療儀器有限公司。試劑均為分析純，水為超純水，18.2 ΜΩ ?cm。
[0031] 本發(fā)明中選用的所有試劑和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的，但不限制本發(fā)明的實(shí) 施，其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實(shí)施方式的實(shí)施。
[0032] 實(shí)施例一：鎌抱菌5/7. ) F54 CGMCC No. 8359 的分離、培養(yǎng) 1.分離 本發(fā)明所使用的耐輻射鐮孢菌5/7.)由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所 從新疆某地放射性污染土壤中取樣分離，利用傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法分離出土層中的微生物， 平板劃線法純化菌株，以不同的培養(yǎng)溫度、PH值、培養(yǎng)基為富集條件，篩選出一批生長(zhǎng)良好 的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為F54的菌株。
[0033] 分離步驟：依據(jù)梯度稀釋法，稱取IOg 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水中，30° C活 化30min后進(jìn)行梯度稀釋，選取10=2、ΙΟ=、IO=4稀釋液分別涂布于PDA培養(yǎng)基的平板，每個(gè)處 理3個(gè)重復(fù)，置28° C培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色等不同的菌落分別劃線接 種于新的分離培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基，直至無(wú)雜菌落。將純化后的菌株一部分采用凍干安瓿管、 甘油管和液氮等方式保藏，一部分保存于4° C直接用于后續(xù)研究。
[0034] 2.培養(yǎng)條件 將純化的菌株鐮孢菌5/7. )F54接種到馬鈴薯固體培養(yǎng)基斜面上，于28°C培 養(yǎng)2天，放入4°C冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> [0035] 具體的：該菌株培養(yǎng)溫度28-30°C，最適培養(yǎng)溫度28°C左右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培 養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水lL，pH自然，經(jīng)28°C、48h培養(yǎng)。
[0036] 本發(fā)明所使用的鐮抱菌(/^sarium 5/7. )F54由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所 從新疆某地放射性污染土壤中取樣篩選分離獲得，該菌株已保藏于布達(dá)佩斯條約微生物國(guó) 際保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC)保藏，地址：北京市 朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101，保藏日期為2013年 10月22日'菌種保藏號(hào)為CGMCC No. 8359,該菌株培養(yǎng)溫度28-30°C，最適培養(yǎng)溫度28°C左 右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水IL，pH自然， 經(jīng)28°C、48h培養(yǎng)，菌種F54初生菌落白色，絨毛狀，生長(zhǎng)繁茂。4天后呈灰白色荔肉白色，背 面蛘肉白色。在培養(yǎng)基表面逐漸形成絲束交織的厚膜，高低不平呈點(diǎn)片狀，用接種針不易挑 下。顯微鏡下菌絲分隔，老菌絲內(nèi)有許多球形孢子。6天后氣絲頂端開始膨大成形狀不規(guī)整 的孢囊，囊內(nèi)有許多大小不一的孢子，孢囊無(wú)囊軸，無(wú)外壁及囊被。參見附圖1。根據(jù)以上形 態(tài)特征，初步鑒定該菌株為半知菌綱叢梗孢目瘤座孢科鮮色多孢族鐮孢霉屬的一個(gè)種。參 照《真菌鑒定手冊(cè)》（菌種初步鑒定依據(jù)的參考書）進(jìn)行鑒定，結(jié)合對(duì)F54菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)、 生理生化分析，鑒定為鐮孢菌5/7.)，經(jīng)過(guò)性能、菌落形態(tài)菌種屬性等因素分析， 該菌種鐮孢菌5/7. ) F54是一種耐福射鐮孢霉菌(/7W1Sari-- 5/7.)。
[0037] 菌株鐮孢菌(/7W1Sariiffl? 5/7. ) F54的生理生化指標(biāo)結(jié)果見表1。
[0038] 表1 :溫度、pH等因素對(duì)菌株F54生長(zhǎng)的影響 3.菌種描述：本發(fā)明所述的耐福射鐮孢菌

【權(quán)利要求】
1. 一種耐福射鐮孢菌5/7. ) F54,其特征在于，所述的耐福射鐮孢菌 即.）F54 的保藏編號(hào)為 CGMCC No. 8359。
2. 如權(quán)利要求1所述的耐福射鐮孢菌577. )F54在吸附銫生物處理中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】C12R1/77GK104403951SQ201410688785
【公開日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年11月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月26日
【發(fā)明者】張麗娟, 王瑋, 張志東, 謝玉清, 韓小元, 賴成霞, 唐琦勇, 朱靜, 楚敏 申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所