以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備sn-1,3-DAG的方法
【專利摘要】以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備sn-1,3-DAG的方法，步驟如下：（1）按摩爾比為2-4∶1比例稱取反應(yīng)底物游離脂肪酸、sn-1(3)-單甘脂并放入反應(yīng)器中；（2）按反應(yīng)底物游離脂肪酸與sn-1(3)-單甘油酯總質(zhì)量的20%的量，加入脂酶TLIM，密閉反應(yīng)器，在反應(yīng)溫度50℃、攪拌轉(zhuǎn)速220轉(zhuǎn)/分鐘條件下，反應(yīng)0.5-96h；（3）對步驟（2）中反應(yīng)得到的產(chǎn)物通過濾膜過濾方式除去固定化的脂酶，得到sn-1,3-DAG。本發(fā)明避免了大量游離脂肪酸抑制酯酶活性的副反應(yīng)；產(chǎn)物sn-1,3-DAG含量高達68％；反應(yīng)速度快，純度較高；有效減少了反應(yīng)的步驟以及試劑的使用，大大減少了生產(chǎn)成本。
【專利說明】以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備sn-1,3-DAG的 方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用油【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及以無溶劑體系中酶催化合成的sn-1，3甘油二 酯制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] sn-1, 3甘油二酯（Diacylglycerol, DAG)是由一分子甘油與兩分子脂肪酸酯化后 得到的產(chǎn)物。sn-l，3-DAG是天然油脂中的微量成分及體內(nèi)脂肪代謝的內(nèi)源中間產(chǎn)物。在日 常生活中可完全取代食用油脂，不影響口感且能抑制體重的增長，促進體內(nèi)脂肪減少，防止 內(nèi)臟脂肪堆積，降低人和動物餐后血漿甘油，最重要的是在體內(nèi)不會產(chǎn)生蓄積作用。因此， 成為了近年來油脂開發(fā)的主要發(fā)展方向之一。sn-1，3-DAG作為油脂的天然成分，同時也是 一種多功能添加劑，在食品、醫(yī)藥、化工等行業(yè)有廣闊的應(yīng)用前景。
[0003] 目前，制備sn-1, 3-DAG方法主要分為化學(xué)法和生物酶法。傳統(tǒng)化學(xué)法生產(chǎn) sn-1，3-DAG具有成本低，運行經(jīng)濟，容易實現(xiàn)規(guī)模生產(chǎn)等特點。然而由于反應(yīng)缺乏專一性， 所得產(chǎn)品為sn-1，2-DAG、l，3-DAG的混合物，反應(yīng)產(chǎn)率低。雖然通過特異的化學(xué)反應(yīng)也可生 產(chǎn)結(jié)構(gòu)特殊的sn-1，3-DAG，但需保護劑，反應(yīng)步驟繁雜冗長，且需大量的化學(xué)試劑或有機溶 齊U，這顯然不符合當(dāng)今清潔生產(chǎn)、綠色環(huán)保的要求。由于脂肪酶具有較強的選擇性(脂肪酸 專一性、位置專一性、結(jié)構(gòu)專一性、光學(xué)異構(gòu)專一性)，生物酶催化法可對產(chǎn)物實現(xiàn)較為精確 的控制，并可方便的開發(fā)具有特殊結(jié)構(gòu)的產(chǎn)品。與此同時，酶法反應(yīng)條件溫和，所得產(chǎn)品質(zhì) 量好(如色澤、活性等)，而且能耗低。另外，由于酶的高度選擇性，轉(zhuǎn)化率高，副反應(yīng)少，產(chǎn)品 純度高，使得反應(yīng)更有效。具有既可降低純化費用，又可減少環(huán)境污染等優(yōu)點。目前，國內(nèi) 外多采用以酯酶催化水解甘油酯法和脂酶催化甘油與游離脂肪酸法進行合成sn-1，3-DAG， 但產(chǎn)率都較低，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的旨在提供一種以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備 sn-1，3-DAG的方法，以sn-1 (3)-單甘酯為甘油骨架供體，以游離脂肪酸為?；w，建立 一種無溶劑體系中酶催化合成sn-1，3-DAG的制備方法。
[0005] 本發(fā)明所述的以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備sn-1，3-DAG的工藝步驟 如下。
[0006] (1)原料準(zhǔn)備：按摩爾比為2-4:1比例稱取反應(yīng)底物游離脂肪酸、sn-1 (3)-單甘脂 并放入反應(yīng)器中。
[0007] (2)脂酶催化的部分酯化換反應(yīng)：按反應(yīng)底物游離脂肪酸與sn-Ι (3)-單甘油酯總 質(zhì)量的20%的量，加入脂酶TLM (Lipozyme)，密閉反應(yīng)器，在反應(yīng)溫度50°C、攪拌轉(zhuǎn)速220 轉(zhuǎn)/分鐘條件下，反應(yīng)0. 5-96h。
[0008] 部分酯化的反應(yīng)機理如下式所示：

【權(quán)利要求】
1.以專一性脂酶催化的單脂肪酸甘油酯制備sn-1，3-DAG的方法，其特征是步驟如下： (1) 按摩爾比為2-4:1比例稱取反應(yīng)底物游離脂肪酸、sn-Ι (3)-單甘脂并放入反應(yīng)器 中； (2) 按反應(yīng)底物游離脂肪酸與sn-Ι (3)-單甘油酯總質(zhì)量的20%的量，加入脂酶TLIM， 密閉反應(yīng)器，在反應(yīng)溫度50°C、攪拌轉(zhuǎn)速220轉(zhuǎn)/分鐘條件下，反應(yīng)0. 5-96h ; (3) 對步驟（2)中反應(yīng)得到的產(chǎn)物通過濾膜過濾方式除去固定化的脂酶，得到 sn_l，3_DAG〇
【文檔編號】C12P7/64GK104152502SQ201410406076
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年8月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月18日
【發(fā)明者】朱雪梅, 黃楚楚, 龔斌, 熊華, 胡蔣寧, 喻蕓, 馮越, 梁媛 申請人:南昌大學(xué)