一種植物超氧化物歧化酶富氧厭氧交替催化生產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種植物超氧化物歧化酶富氧厭氧交替催化生產(chǎn)方法，該方法主要包括如下步驟：選取植物種子并進(jìn)行除雜，消毒滅菌，將經(jīng)過消毒滅菌處理的植物種子進(jìn)行預(yù)浸泡；預(yù)浸泡后對植物種子進(jìn)行富氧催化；將富氧催化后的植物種子進(jìn)行厭氧催化；將進(jìn)行厭氧催化后的植物種子進(jìn)行均質(zhì)處理，得到植物種子的料漿；均質(zhì)后的植物種子的料漿進(jìn)行脫水處理，收集料液；對料液進(jìn)行過濾，干燥，得到SOD產(chǎn)品。采用本發(fā)明所述方法可大幅度提高SOD的產(chǎn)量，彌補了現(xiàn)有提取工藝收率低的缺點，與普通發(fā)芽方法相比，該工藝可以使超氧化物歧化酶的回收率提高60%-120%，且SOD的活性也相對較高。該生產(chǎn)方法適宜于大規(guī)模生產(chǎn)超氧化物歧化酶。
【專利說明】一種植物超氧化物歧化酶富氧厭氧交替催化生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于酶生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種植物超氧化物歧化酶的生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]超氧化物歧化酶(SOD:Superoxide Dismutase)是生物體內(nèi)催化氧自由基(O2一.)發(fā)生歧化反應(yīng)的重要酶，分子量約為3.4萬道爾頓。它對超氧的催化速度是化學(xué)能的I萬倍，能夠清除氧自由基對人體的毒害，是國際上公認(rèn)氧自由基的清除劑。自1969年McCord和Fridovich首次從牛血液中發(fā)現(xiàn)超氧化物岐化以來，引起了各國生化界和醫(yī)學(xué)界的重視。自90年代，科學(xué)界已經(jīng)認(rèn)識到氧自由基是在人體疲勞、生病時產(chǎn)生的多余的自由基，它們會破壞人體的細(xì)胞核內(nèi)DNA物質(zhì)，促使人衰老，或細(xì)胞癌變。20世紀(jì)，科學(xué)家們提出了人體疾病衰老的幾種學(xué)說，自由基學(xué)說是其中唯一被證實且最為可靠的一種學(xué)說，它比較清楚地闡述了機體疾病衰老的過程。由于呼吸，機體組織器官時刻都在進(jìn)行氧代謝，在正常生理情況下，自由基的產(chǎn)生與清除處于動態(tài)平衡，當(dāng)某種因素使氧自由基生成過多、或超出清除能力、或清除能力減弱時，過多的氧自由基通過損傷生命大分子，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能，導(dǎo)致疾病的發(fā)生與發(fā)展，從而加速機體老化。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已經(jīng)證實:氧自由基引起的疾病，已超過一百多種，嚴(yán)重的威脅著我們的健康與長壽。導(dǎo)致氧自由基產(chǎn)生的因素很多，包括:
(I)人體利用氧氣的過程中每日約可產(chǎn)生大量的活性氧(自由基)；(2)衰老:25歲以后，人體內(nèi)的超氧化物歧化酶隨著人體組織的老化而逐漸降低；(3)體力透支；(4)精神壓力:急躁、焦慮，郁悶；(5)過度飲酒；(6)疾病、手術(shù)；(7)輻射線:核能、日光照射、X光、復(fù)印機、計算機；(8)電磁波:微波爐、吹風(fēng)機、手機；(9)污染:汽車排放的廢氣、工業(yè)廢氣廢水，香煙、二手煙；(10 )藥物濫用、食品添加劑；(11)農(nóng)藥殘留、殺蟲劑。
[0003]超氧化物歧化酶作`為清除人體負(fù)氧自由基的清除劑，已成為二十世紀(jì)醫(yī)藥學(xué)最熱門研究課題。很長一段時間內(nèi)，超氧化物歧化酶主要從動物血液中提取，例如申請?zhí)枮?02147888.0，名稱為《超氧化物歧化酶的制備方法》的中國發(fā)明專利，它公開了一種從豬血中的超氧化物歧化酶進(jìn)行提取的方法，其制備步驟如下:I)分離血球，2)洗滌血球，3)溶解破裂血球，4)去血紅蛋白，得粗酶液，再將粗酶液在60-65°C條件下加熱20分鐘，得到高純度的超氧化物歧化酶，該方法簡單，成本低，效率高，極大地提高了酶的純度。
[0004]但由于動物血液中可能存在各種致病因子，因此從植物中提取的超氧化物歧化酶比較安全。例如申請?zhí)枮?99112607.6，名稱為《玉米超氧化物歧化酶(SOD)復(fù)合酶大規(guī)模制造方法》，公開了一種以玉米為原料提取超氧化物歧化酶的方法，其制備方法是將原料風(fēng)選、消毒、發(fā)芽、加入磷酸鹽緩沖液打漿、打粗漿后加入纖維素酶再打細(xì)漿，加入氯化鈣、過濾，濾液加入糖化酶，以硅藻土助濾劑過濾，濾液10000轉(zhuǎn)/分離心，過分子量為14萬的膜，濾液再以4000-10000分子量超濾膜超濾，濃縮液按重量加入0.3-0.5%維生素C、
0.1-0.2%維生素E和0.1-0.2%的山梨酸鉀，然后冷凍、融解，再以10000轉(zhuǎn)/分離心，裝瓶，再用Co6°照射殺菌，得成品。雖然用玉米等植物種子為原料，價廉易得、易貯存，安全無毒，但以各種植物種子為原料提取超氧化物歧化酶的主要缺點是產(chǎn)率過低，一般不超過I億單位/噸原料。實際提取率則更低，往往只有幾千萬單位。因此植物超氧化物歧化酶的生產(chǎn)難以形成工業(yè)規(guī)模，不具備產(chǎn)業(yè)化的價值。又例如申請?zhí)枮?200610021614.3，名稱為《一種植物超氧化物歧化酶富氧催化大規(guī)模生產(chǎn)方法》，公開了一種植物超氧化物歧化酶富氧催化大規(guī)模生產(chǎn)方法，其步驟如下:1)選取植物種子并進(jìn)行除雜；2)對除雜后的植物種子以l-5mg/L的臭氧溶液進(jìn)行消毒滅菌處理；3)將經(jīng)過消毒滅菌處理的植物種子置于氧氣含量為22-100 % (重量百分比)環(huán)境中進(jìn)行24-48小時富氧預(yù)催化；4)預(yù)催化后對植物種子置于氧氣含量為30-90 % (重量百分比)環(huán)境中進(jìn)行24-60小時富氧催化；5)進(jìn)行富氧催化后的植物種子進(jìn)行均質(zhì)處理，且在均質(zhì)過程中，將其PH值控制在7-8，得到植物種子的料漿；6)均質(zhì)后的植物種子的料漿進(jìn)行脫水處理，收集料液；7)對料液進(jìn)行過濾，干燥，得到超氧化物歧化酶產(chǎn)品。本發(fā)明方法大幅度提高了超氧化物歧化酶的產(chǎn)量，使超氧化物歧化酶的回收率與現(xiàn)有方法相比提高30-50%，適宜于大規(guī)模生產(chǎn)超氧化物歧化酶。但該方法主要缺點是所采用的兩階段富氧催化耗氧量大，成本較高，超氧化物歧化酶的回收率還有大幅度提升的可能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種植物超氧化物歧化酶富氧厭氧交替催化生產(chǎn)方法，以解決上述技術(shù)問題。
[0006]本發(fā)明所述生產(chǎn)方法主要包括如下步驟:
1)選取植物種子并進(jìn)行除雜；
2)對除雜后的植物種子進(jìn)行消毒滅菌處理；
3)將經(jīng)過消毒滅菌處理的植物種子進(jìn)行預(yù)浸泡，使植物種子吸水膨脹；
4)預(yù)浸泡后對植物種子進(jìn)行富氧催化，使其發(fā)芽；
5)將富氧催化后的植物種子進(jìn)行厭`氧催化，使其繼續(xù)發(fā)芽；
6)將進(jìn)行厭氧催化后的植物種子進(jìn)行均質(zhì)處理，在均質(zhì)過程中，將其pH值控制在7-8，得到植物種子的料漿；
7)均質(zhì)后的植物種子的料漿進(jìn)行脫水處理，收集料液；
8)對料液進(jìn)行過濾，干燥，得到超氧化物歧化酶產(chǎn)品。
[0007]根據(jù)本發(fā)明，所述植物種子包括玉米、小麥、大麥、水稻、高粱、小米、大豆、綠豆。
[0008]優(yōu)選的，所述植物種子為低溫干燥或自然風(fēng)干的植物種子。
[0009]根據(jù)本發(fā)明，所述除雜包括滾筒篩、風(fēng)選、磁選的方式清理雜物。
[0010]根據(jù)本發(fā)明，所述消毒滅菌處理為任意的不損害種子活性的消毒滅菌方法。
[0011]優(yōu)選的，所述消毒滅菌處理為將除雜后的植物種子用臭氧濃度為l_5mg/L的臭氧溶液浸洗15-60分鐘消毒滅菌,之后用清水漂洗干凈。
[0012]根據(jù)本發(fā)明實施方式之一，所述預(yù)浸泡是將植物種子用水噴淋24-48小時。
[0013]優(yōu)選的，所述水的溫度為20_30°C。
[0014]根據(jù)本發(fā)明另一實施方式，所述富氧催化是將植物種子置于氧氣含量為22-100 %(重量百分比)的環(huán)境中，用14-36°C水噴淋24-60小時。
[0015]優(yōu)選的，采用循環(huán)流動的水進(jìn)行噴淋。
[0016]優(yōu)選的，氧氣含量大于30%。[0017]進(jìn)一步優(yōu)選的，氧氣含量為50-90% (重量百分比)；所述水的溫度為20-30°C。
[0018]根據(jù)本發(fā)明再一實施方式，所述厭氧催化是將植物種子置于氧氣含量為0-20%(重量百分比)的環(huán)境中，用14-36°C水噴淋24-60小時。
[0019]優(yōu)選的，采用循環(huán)流動的水進(jìn)行噴淋。
[0020]優(yōu)選的，氧氣含量為0-10% (重量百分比)；所述水的溫度為20_30°C。
[0021]根據(jù)本發(fā)明再一實施方式，所述均質(zhì)處理為將植物種子放入均質(zhì)機中均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力10-25Mpa，出料粒度≤1 μ m。
[0022]在均質(zhì)過程中，可以采用任意的方法對pH值進(jìn)行調(diào)節(jié)，只要將其控制在7-8即可，控制PH值的目的是保護(hù)超氧化物歧化酶不失活不被破壞，并提高回收率；例如可在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液控制其pH值；磷酸鹽緩沖液最好用等重量比的Na2HP04+NaH2P04或等重量比的1(2即04+腿2?04溶液構(gòu)成，濃度為50-100mmol/L ;也可以加入其它溶液將其pH值控制在7-8。
[0023]根據(jù)本發(fā)明再一實施方式，所述脫水方法為用高速離心機或自動板框脫水機進(jìn)行脫水。
[0024]脫水后，所得的濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料。
[0025]根據(jù)本發(fā)明再一實施方式，所述過濾為采用膜分離技術(shù)、或過濾設(shè)備對料液進(jìn)行多級過濾。
[0026]過濾的目的在于去除料液中的大分子物質(zhì)及雜質(zhì)、純化S0D.多級過濾還可以得到含量不同的超氧化物歧化酶產(chǎn)品，，例如將步驟8中過濾所得的料液A再進(jìn)行微米級過濾，截留分子量為5萬-10萬，以去除分子大于SOD的顆粒及雜質(zhì)，收集料液B，所得的料液B經(jīng)冷凍干燥可制成中等含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品；還可以將經(jīng)過微米級過濾的料液B，再進(jìn)行納米級過濾，截留分子量約為I萬以下，以達(dá)到進(jìn)一步純化SOD的目的，所得的料液C經(jīng)冷凍干燥可制成高含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品。所述的微米級過濾和納米級過濾均可采用現(xiàn)有的可進(jìn)行微米級或納米級過濾的過濾設(shè)備進(jìn)行操作，根據(jù)現(xiàn)有的膜分離技術(shù)按膜孔徑或所分離的粒徑劃分，微米級過濾為5 μ m-100nm，納米級過濾< IOnm0當(dāng)然還可以在對料液進(jìn)行過濾后，再對料液進(jìn)行純化處理，所述純化處理可以采用任意的提純處理方法，例如可以將料液上Sephadex G-100層析柱進(jìn)行純化，以得到高純度的超氧化物歧化酶產(chǎn)品。
[0027]根據(jù)本發(fā)明再一實施方式，所述干燥使用低溫冷凍干燥。
[0028]低溫冷凍干燥可以提高超氧化物歧化酶的酶活率。
[0029]本發(fā)明在利用植物種子為原料提取超氧化物歧化酶的工藝中，采用富氧厭氧交替催化方法，因而可以大大提高超氧化物歧化酶的生產(chǎn)率，縮短催化時間，節(jié)約浸泡用水，減少氧氣消耗，簡化了生產(chǎn)設(shè)備，降低了生產(chǎn)成本，減少了對環(huán)境的污染，使得利用植物種子大規(guī)模生產(chǎn)超氧化物歧化酶成為現(xiàn)實。采用本發(fā)明所述方法可大幅度提高超氧化物歧化酶的產(chǎn)量，彌補了現(xiàn)有提取工藝收率低的缺點，與普通發(fā)芽方法相比，該工藝可以使超氧化物歧化酶的回收率提高60%-120%，且SOD的活性也相對較高。該生產(chǎn)方法工藝簡便，成本低廉，原料適應(yīng)性廣，適宜于大規(guī)模生產(chǎn)超氧化物歧化酶。
【具體實施方式】[0030]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實施例。
[0031]實施例1
將風(fēng)干的玉米籽粒I噸以滾筒篩、磁選器除雜，用臭氧含量2mg/L的水溶液浸泡60分鐘消毒滅菌，然后用清水漂洗干凈；
將經(jīng)過消毒滅菌處理的原料進(jìn)行預(yù)浸泡，使種子吸水膨脹；所述預(yù)浸泡是將原料用25°C水噴淋24小時。
[0032]將預(yù)浸泡后的原料放入含氧量為70% (重量百分比)的密閉環(huán)境中，用25°C循環(huán)流動的水噴淋48小時進(jìn)行富氧催化，使其發(fā)芽，催化后即開始進(jìn)行厭氧催化，即將其放入含氧量為0% (重量百分比)的密閉環(huán)境中，用30°C循環(huán)流動的水噴淋48小時使其充分發(fā)芽；
經(jīng)富氧一厭氧交替催化后的原料上現(xiàn)有的大型均質(zhì)機均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力20Mpa，出料粒度< I μ m,在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液，維持pH值在7.6，磷酸鹽緩沖液是由等重量的Κ2ΗΡ04+ΚΗ2Ρ04溶液構(gòu)成，濃度為lOOmmol/L，均質(zhì)后的料漿上現(xiàn)有的高速離心機脫水，收集料液A，濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料；
料液A經(jīng)過濾，冷凍干燥制成低含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品12595.2g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為22.36U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.82億U/噸原料玉米。
[0033]實施例2
將實施例1中的料液A用現(xiàn)有的微米級過濾機過濾，截留分子量為5萬，收集料液B，料液B經(jīng)冷凍干燥可制成中等含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品1145.0 g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為2`11.26 U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.42億U/噸原料玉米。
[0034]實施例3
將實施例2中的料液B用現(xiàn)有的納米級過濾機過濾，截留分子量約為I萬，收集料液C，料液C經(jīng)冷凍干燥可制成高含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品148.7g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為1521.10 U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.26億U/噸原料玉米。
[0035]實施例4
將實施例3中的超氧化物歧化酶含量為1521.10U/mg的產(chǎn)品上S^hadex G-100層析柱進(jìn)一步純化，制成高純度的超氧化物歧化酶產(chǎn)品28.7g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為7149.18U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.06億U/噸原料玉米。
[0036]實施例5
將風(fēng)干大豆I噸以滾筒篩、磁選器除雜。用臭氧含量4mg/L的水溶液浸泡30分鐘消毒滅菌，然后用清水漂洗干凈；
將原料用20°C循環(huán)流動的水噴淋24小時進(jìn)行預(yù)浸泡，使其吸水膨脹；預(yù)浸泡后開始進(jìn)行富氧催化，即在含氧量為80 %的密閉環(huán)境中，用20°C循環(huán)流動的水噴淋24小時使其發(fā)芽；富氧催化后進(jìn)行厭氧催化，即在含氧量為5% (重量百分比)的條件下，用20°C循環(huán)流動的水噴淋48小時使其充分發(fā)芽。
[0037]富氧催化后的原料上現(xiàn)有的大型均質(zhì)機均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力25Mpa，出料粒度(I μ m，在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液，維持pH值在7.2，磷酸鹽緩沖液是由等重量的Κ2ΗΡ04+ΚΗ2Ρ04溶液構(gòu)成，濃度為50mmol/L，均質(zhì)后的料漿上現(xiàn)有的高速離心機脫水，收集料液A，濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料；料液A經(jīng)過濾，冷凍干燥制成低含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品27072g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為9.28U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.51億U/噸原料大豆。
[0038]實施例6
將實施例5中的料液A先用現(xiàn)有的微米級過濾機過濾，得料液B ;料液B再用現(xiàn)有的納米級過濾機過濾，截留分子量約為I萬，得料液C，料液C經(jīng)冷凍干燥可制成高含量超氧化物歧化酶產(chǎn)品282.0g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為696.15U/mg，超氧化物歧化酶得率為1.96億U/噸原料大豆。
[0039]實施例7
將綠豆I噸以滾筒篩、磁選器除雜，以常規(guī)方法消毒滅菌，然后用水漂洗干凈；
將原料以25°C循環(huán)水預(yù)浸泡24小時，使其吸水膨脹；然后放入含氧量為100% (重量百分比)的密閉環(huán)境中，用30°C循環(huán)流動的水噴淋24小時進(jìn)行富氧催化，使其發(fā)芽；富氧催化后即開始進(jìn)行厭氧催化，即在含氧量為5% (重量百分比)的密閉環(huán)境中，用25°C循環(huán)流動的清水噴淋48小時使其充分發(fā)芽；
經(jīng)富氧一厭氧交替催化后的原料上現(xiàn)有的大型均質(zhì)機均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力25Mpa，出料粒度< I μ m,在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液，維持pH值在8，磷酸鹽緩沖液是由等重量的Κ2ΗΡ04+ΚΗ2Ρ04溶液構(gòu)成，濃度為50mmol/L。均質(zhì)后的料漿上現(xiàn)有的高速離心機脫水，收集料液A，濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料；
料液A經(jīng)過濾，冷凍干燥制成超氧化物歧化酶產(chǎn)品30018.3g，經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為6.81U/mg，超氧化物歧化酶得率為2.04億U/噸原料綠豆。
[0040]實施例8` 將風(fēng)干的大豆I噸以滾筒篩、磁選器除雜，用臭氧含量4mg/L的水溶液浸泡40分鐘消毒滅菌，然后用清水漂洗干凈；
將原料用36°C循環(huán)流動的清水噴淋30小時進(jìn)行預(yù)浸泡，使其吸水膨脹；預(yù)催化后開始進(jìn)行富氧催化，即在含氧量為22%的密閉環(huán)境中，用20°C循環(huán)流動的清水噴淋50小時使其發(fā)芽；富氧催化后進(jìn)行厭氧催化，即在氧含量為0% (重量百分比)條件下，用20°C循環(huán)流動的清水噴淋24小時使其充分發(fā)芽。
[0041]經(jīng)富氧一厭氧交替催化后的原料上現(xiàn)有的大型均質(zhì)機均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力25Mpa，出料粒度< I μ m,在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液，維持pH值在7，磷酸鹽緩沖液是由等重量的Κ2ΗΡ04+ΚΗ2Ρ04溶液構(gòu)成，濃度為50mmol/L，均質(zhì)后的料漿上現(xiàn)有的高速離心機脫水，收集料液A，濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料；
料液A經(jīng)過濾，冷凍干燥制成超氧化物歧化酶產(chǎn)品25524.0g,經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為7.15U/mg，超氧化物歧化酶得率為1.82億U/噸原料黃豆。
[0042]實施例9
將小米I噸除雜，并用臭氧含量3mg/L的水溶液浸泡30分鐘消毒滅菌，然后用清水漂洗干凈；
將原料用24°C循環(huán)流動水噴淋24小時預(yù)浸泡使其吸水膨脹；然后放入含氧量為22%(重量百分比)的密閉環(huán)境中，用24°C循環(huán)流動的清水噴淋35小時進(jìn)行富氧催化發(fā)芽；富氧催化后即開始進(jìn)行厭氧催化，即在含氧量為10%的密閉環(huán)境中，用36°C循環(huán)流動的清水噴淋40小時使其充分發(fā)芽；富氧催化后的原料上現(xiàn)有的大型均質(zhì)機均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力25Mpa,出料粒度^ Iym0在均質(zhì)過程中加入磷酸鹽緩沖液，維持pH值在7.5，磷酸鹽緩沖液是由等重量的Κ2ΗΡ04+ΚΗ2Ρ04溶液構(gòu)成，濃度為50mmol/L，均質(zhì)后的料漿上現(xiàn)有的高速離心機脫水，收集料液A，濾渣可作為工業(yè)原料或用于生產(chǎn)飼料；
料液A經(jīng)過濾，冷凍干燥制成超氧化物歧化酶產(chǎn)品26460.0g,經(jīng)連苯三酚自氧化法檢測，超氧化物歧化酶含量為5`.50U/mg，超氧化物歧化酶得率為1.46億U/噸原料小米。
【權(quán)利要求】
1.一種植物超氧化物歧化酶富氧厭氧交替催化生產(chǎn)方法，其特征在于，主要包括如下步驟: 1)選取植物種子并進(jìn)行除雜； 2)對除雜后的植物種子進(jìn)行消毒滅菌處理； 3)將經(jīng)過消毒滅菌處理的植物種子進(jìn)行預(yù)浸泡，使植物種子吸水膨脹； 4)預(yù)浸泡后對植物種子進(jìn)行富氧催化，使其發(fā)芽； 5)將富氧催化后的植物種子進(jìn)行厭氧催化，使其繼續(xù)發(fā)芽； 6)將進(jìn)行厭氧催化后的植物種子進(jìn)行均質(zhì)處理，在均質(zhì)過程中，將其pH值控制在7-8，得到植物種子的料漿； 7)均質(zhì)后的植物種子的料漿進(jìn)行脫水處理，收集料液； 8)對料液進(jìn)行過濾，干燥，得到超氧化物歧化酶產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述植物種子包括玉米、小麥、大麥、水稻、高粱、小米、大豆、綠豆；優(yōu)選的，所述植物種子為低溫干燥或自然風(fēng)干的植物種子。
3.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述除雜包括滾筒篩、風(fēng)選、磁選的方式清理雜物；所述消毒滅菌處理為任意的不損害種子活性的消毒滅菌方法；優(yōu)選的，所述消毒滅菌處理為將除雜后的植物種子用臭氧濃度為l_5mg/L的臭氧溶液浸洗15-60分鐘消毒滅菌，之后用清水漂洗干凈。
4.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述預(yù)浸泡是將植物種子用水噴淋24-48小時；優(yōu)選的，所述水的溫度為20-30°C。
5.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述富氧催化是將植物種子置于氧氣含量為22-100 %的環(huán)境中，用14-36°C水噴淋24-60小時；優(yōu)選的，采用循環(huán)流動的水進(jìn)行噴淋；優(yōu)選的，氧氣含量大于30% ;進(jìn)一步優(yōu)選的，氧氣含量為50-90% (重量百分比);所述水的溫度為20-30°C。
6.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述厭氧催化是將植物種子置于氧氣含量為0-20%的環(huán)境中，用14-36°C水噴淋24-60小時；優(yōu)選的，采用循環(huán)流動的水進(jìn)行噴淋；優(yōu)選的，氧氣含量為0-10% ;所述水的溫度為20-30°C。
7.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述均質(zhì)處理為將植物種子放入均質(zhì)機中均質(zhì)，控制均質(zhì)壓力10-25Mpa，出料粒度≤I μ m。
8.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述脫水方法為用高速離心機或自動板框脫水機進(jìn)行脫水。
9.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述過濾為采用膜分離技術(shù)、或過濾設(shè)備對料液進(jìn)行多級過濾。
10.如權(quán)利要求1所述生產(chǎn)方法，其特征在于，所述干燥使用低溫冷凍干燥。
【文檔編號】C12N9/02GK103805575SQ201410013731
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年1月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月13日
【發(fā)明者】李健 申請人:李健