新型C5a結合性核酸的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及能夠結合人C5a的核酸分子，其中所述核酸分子包含中央核苷酸區(qū)段，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列：5’AUGn1GGUGKUn2n3RGGGHUGUKGGGn4Gn5CGACGCA?3’[SEQ?ID?NO:61]，其中n1為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n5為U或dU，并且G、A、U、C、H、K和R為核糖核苷酸，和dU、dG和dA為2’-脫氧核糖核苷酸。
【專利說明】新型C5a結合性核酸
[0001] 本發(fā)明涉及能夠結合C5a和/或C5的核酸分子、其用于分別制造藥劑、診斷劑和 檢測劑的用途、包含這樣的核酸分子的組合物、包含這樣的核酸分子的復合物、用于使用這 樣的核酸分子篩選由C5a和/或C5介導的活性的拮抗劑的方法以及用于檢測這樣的核酸 分子的方法。
[0002] 人過敏毒素 C5a(補體因子5a ;SwissProt entry P01031)的一級結構于1978年 被測定（Fernandez&Hugli 1978)。其由74個氨基酸組成，這構成了 8, 200Da的分子量，同 時碳水化合物部分占約3, OOODa。C5a的碳水化合物部分作為連接于位置64上的天冬酰胺 的單個復雜型寡糖單元存在。3個二硫鍵賦予分子穩(wěn)定的剛性結構。
[0003] 盡管來自不同哺乳動物物種的C5a形式的三維結構通常已得到維持，但氨基酸序 列在進化過程中不是特別保守。序列比對顯示64%的人與小鼠 C5a的總體序列同一性。人 C5a與來自下列物種的C5a共有下列百分比的相同氨基酸：
[0004] ?恒河猴（Macaca mulatta)(稱猴）85%
[0005] ?成束猴（Macaca fascicularis)(食蟹猴）85%
[0006] ?歐洲牛（Bos taurus)(牛族動物）69%
[0007] ?野豬（Sus scrofa)(豬）68%
[0008] ?小家鼠 （Mus musculus)(小鼠）64%
[0009] ?褐家鼠 （Rattus norvegicus)(大鼠）61 %
[0010] 除了有限的序列同源性以外，糖基化也是不同的。雖然人C5a在天冬酰胺64上被 糖基化，但鼠同源物根本未被糖基化。更遠緣的人蛋白C3a和C4a分別與C5a共有僅35和 40%的同一 1f生。
[0011] 補體系統(tǒng)在上個世紀開始時被發(fā)現為熱敏感性血清級分，該級分"補充"抗血清介 導的細胞和細菌的裂解。作為天然非特異性（先天性）免疫反應的體液組分，其在抗傳染 原的宿主防御中和在炎癥性過程中起著重要作用。補體可通過3個不同途徑活化：（i)在 抗體將其自身附著于細胞表面或細菌后（稱為經典途徑），（ii)直接通過細菌或病毒的糖 脂（稱為旁路途徑），或（iii)通過細菌上的碳水化合物（稱為凝集素途徑）。所有這些活 化途徑在補體組分C3和C5的活化的點上匯合，在該點上開始共同的末端途徑，最終終于膜 攻擊復合物（縮寫MAC)的裝配。補體系統(tǒng)由超過20種可溶性蛋白組成，其用作蛋白水解 酶類或用作結合蛋白，并且構成約10 %的脊椎動物血清中的總球蛋白類。此外，補體系統(tǒng)包 括多個不同的細胞表面受體，所述受體顯示對于補體蛋白的蛋白水解片段的特異性，并且 由炎癥細胞和調節(jié)適應性免疫反應的細胞表達。存在數種抑制補體活化，從而保護宿主細 胞免受意外補體攻擊的調節(jié)蛋白。補體系統(tǒng)可被獨立地活化或與適應性免疫反應一起被活 化。
[0012] 補體的功能包括調理作用的過程（即，使細菌對吞噬作用更易感），通過將孔插入 它們的膜中裂解細菌和外來細胞（稱為膜攻擊復合物），趨化性活性物質的產生，血管通透 性的增強，平滑肌收縮的誘發(fā)以及肥大細胞脫粒的促進。與凝血級聯類似，在也稱為酶促級 聯的連續(xù)酶促步驟中組織補體活化的過程（Sim和Laich，2000)。這些相互作用的詳細順序 概述于下文中。
[0013] 經典途徑。該抗體依賴性激活途徑補充特定抗體反應。其與旁路途徑一樣受到 精細地控制，但缺乏自發(fā)起始能力；即不依賴于抗體的識別功能，和反饋放大機制。在經典 途徑的激活物中有抗原-抗體復合物、β -淀粉樣蛋白、DNA、聚肌苷酸、聚陰離子-聚陽離 子復合物如肝素/魚精蛋白、一些有包膜病毒、尿酸單鈉晶體、細菌細胞壁的脂質Α、大側柏 酸、蟻毒液多糖、亞細胞膜（例如線粒體）以及細胞-和血漿來源的酶例如纖溶酶、激肽釋 放酶、激活的Hageman因子、彈性蛋白酶或組織蛋白酶。抗體誘導的經典途徑始于C1，其結 合連接于細胞表面抗原的抗體（IgM>IgG3>IgGl?IgG2)的Fc-片段。C1是由分為3個亞單 位：Clq、Clr、Cls的22個多肽鏈組成的識別復合物。Clq是實際的識別部分，其為看起來 象一束郁金香的含膠原蛋白樣結構域（顯示羥脯氨酸和羥賴氨酸殘基）的糖蛋白。在通過 Clq結合后，Clr被激活成為蛋白酶，其將Cls切割成將C2和C4激活（通過切割）成C2a/ b和C4a/b的形式。C2a和C4b組合以產生C4b2a，即C3轉化酶（C3激活酶）。C4a僅具有 弱過敏毒素活性但無趨化性。C3是所有3個活化途徑的中樞。在經典途徑中，C4b2a轉化 酶將C3切割成C3a/b。C3a為過敏毒素。C3b與C4b2a組合形成C4b2a3b復合物（C5轉化 酶）。C3b還可直接結合細胞，從而使它們對吞噬作用易感（調理作用）。
[0014] 旁路途徑。該途徑不需要抗體來活化并且在宿主抗細菌和病毒感染防御中具有極 大的重要性，因為與經典途徑不同，其被侵入微生物的表面結構例如細菌/病毒糖脂或內 毒素直接活化。其它活化物是菊粉、兔紅細胞、去唾液酸的人紅細胞、眼鏡蛇毒因子或硫代 磷酸寡核苷酸。6種蛋白C3、因子B、D、H、I和備解素（properdin) -起行使導致激活物結 合的C3/C5轉化酶的形成的途徑的起始、識別和活化的功能。級聯始于C3。作為C3的自 發(fā)切割的結果，總是在循環(huán)中發(fā)現少量C3b( "C3-慢速運轉（tickover)")，但因隨后降解， 濃度通常保持極低。然而，當C3b結合細胞表面上的糖時，其可用作旁路途徑活化的核心。 隨后因子B結合C3b。在因子D存在的情況下，結合的因子B被切割成Ba和Bb ;Bb包含C3 轉化酶的活性部位。隨后，備解素結合C3bBb以穩(wěn)定細胞表面上的C3bBb轉化酶，從而導致 其它C3分子的切割。最后，形成將C5切割成C5a/b的替代C5轉化酶C3bBb3b。一旦出現， C5b就起始如上文中描述的膜攻擊復合物的裝配。通常地，僅革蘭陰性細胞可被抗體+補體 直接裂解；革蘭陽性細胞最具抗性。然而，吞噬作用通過利用C3b (吞噬細胞在其表面上具 有C3b受體）的調理作用得到極大增強，并且抗體并非總是需要的。此外，補體可通過直接 裂解或通過阻止病毒穿過宿主細胞來中和病毒顆粒。
[0015] 凝集素途徑。最近發(fā)現的凝集素或甘露糖結合凝集素（縮寫MBL)途徑依賴于外 來物質（即，細菌表面）的先天識別。該途徑與經典途徑具有結構和功能相似性。凝集素 途徑的活化由急性期蛋白MBL起始，所述蛋白識別細菌上的甘露糖、IgA和可能地由受損內 皮暴露的結構。MBL與Clq同源并且觸發(fā)MBL相關絲氨酸蛋白酶（縮寫MASP)，所述蛋白酶 的3個形式MASPUMASP2和MASP3已有描述。進一步的凝集素途徑的活化實際上與經典途 徑的活化相同，形成相同的C3和C5轉化酶。此外，一些證據表明MASP在一些條件下可直 接激活C3。
[0016] 末端途徑。所有3個活化途徑匯合于C5轉化酶（在經典和凝集素途徑中為 C4b2a3b，在旁路途徑中為C3bBb3b)的形成，所述轉化酶將C5切割成C5a/b。C5a具有強有 力的過敏毒素活性并且具有趨化性。另一個C5片段C5b通過其疏水性結合部位在靶細胞 表面上用作形成裂解性膜攻擊復合物（MAC或末端補體復合物，縮寫TCC)的錨。MAC從5種 前體蛋白：〇513、06、07、08和09裝配而成。終事件是09寡聚體的形成，該寡聚體將其自身 作為跨膜通道插入質膜，從而導致細胞的滲透性裂解。MAC裝配受到可溶性血漿因子S蛋白 (也稱為玻連蛋白）和SP-40, 40 (也稱為簇連蛋白），以及宿主細胞膜上的⑶59和HRF(同 源限制性因子）的控制。許多種類的細胞對補體介導的裂解敏感：紅細胞、血小板、細菌、具 有脂蛋白包膜的病毒和淋巴細胞。
[0017] 補體系統(tǒng)是起始和擴大炎癥的有效機制。這是通過補體組分的片段介導的。過敏 毒素是定義最明確的片段，并且是補體系統(tǒng)的絲氨酸蛋白酶的蛋白水解片段：C3a、C4a和 C5a。過敏毒素不僅在補體活化過程中產生，而且還從可直接切割C3、C4和C5的其它酶系 統(tǒng)的活化產生。這樣的酶包括凝血酶、纖溶酶、激肽釋放酶、組織和白細胞溶酶體酶以及細 菌蛋白酶。過敏毒素對血管壁具有強大的作用，引起平滑肌（例如回腸、支氣管、子宮和血 管肌肉）的收縮和血管通透性的增加。這些作用顯示特殊的快速耐受（tachyphylaxis)(即 重復刺激誘導逐漸減弱的反應）并且可被抗組胺藥阻斷；它們可能通過組胺從肥大細胞和 嗜堿性粒細胞的釋放間接介導。C5a是C5血漿蛋白α鏈的74個氨基酸的N末端切割產 物。其被受體C5aR(也稱為C5R1或⑶88)(存在于許多不同細胞類型：最主要地存在于嗜 中性粒細胞、巨噬細胞、平滑肌細胞和內皮細胞上的分子）以高親和力結合。C5a是目前最 強的過敏毒素，比C3a更有效約100倍，且比C4a更有效1000倍。該活性以C5a>組胺〉乙 酰膽堿〉C3a?C4a的順序減弱。
[0018] C5a在刺激嗜中性粒細胞趨化性、粘附、呼吸爆發(fā)產生和脫粒上極其有效。C5a還 刺激嗜中性粒細胞和內皮細胞提供更多粘附分子；C5a的靜脈內注射例如在動物實驗中通 過觸發(fā)嗜中性粒細胞至血管壁的附著而迅速導致嗜中性粒細胞減少癥。在嗜中性粒細胞 C5a受體連接之后，調動膜花生四烯酸，所述膜花生四烯酸被代謝成前列腺素和白三烯，包 括LTB4,嗜中性粒細胞和單核細胞的另一種有效化學吸引劑。在單核細胞C5a受體連接 后，釋放IL-1。因此，C5a在炎癥部位的局部釋放導致強效的促炎癥刺激。事實上，C5a的 釋放與許多急性或慢性病況直接或間接相關，例如一般免疫復合物相關疾?。℉eller等 人，1999);哮喘（Kohl，2001);膿毒性休克（Huber-Lang等人，2001);全身性炎癥反應綜 合征（縮寫SIRS);多器官衰竭（縮寫M0F);急性呼吸窘迫綜合征（縮寫ARDS);炎性腸病 (縮寫IBD) (Woodruff等人，2003);感染；重度燒傷（Piccolo等人，1999);器官例如心臟 (van der Pals等人2010)、脾、膀胱、胰腺、胃、肺、肝、腎、四肢、腦、骨骼肌或腸（Riley等 人，2000)的再灌注損傷；銀屑?。˙ergh等人，1993);心肌炎；多發(fā)性硬化（Muller-Ladner 等人，1996);和類風濕關節(jié)炎（縮寫RA) (Woodruff等人，2002)。
[0019] 關于補體系統(tǒng)與疾病之間的關系的許多綜述已公開（Kirschfink，1997 ; Kohl,2001 ;Makrides, 1998 ;Walport, 2001a ;Walport, 2001b)。
[0020] 補體造成的細胞損傷作為經典或旁路途徑的活化的后果在細胞表面上發(fā)生。MAC 構成由將近20個蛋白質分子組成并且代表約170萬Da的分子量的超分子組織。完全裝配 的MAC包含C5b、C6、C7和C8各一個分子和數個C9分子。所有這些MAC組分是糖蛋白。當 C5被C5轉化酶切割并產生C5b時，MAC的自裝配開始。C5b和C6形成穩(wěn)定的可溶性雙分子 復合物，其結合C7并且誘導其表達亞穩(wěn)定部位，當新生三分子復合物（C5b-7)存在于靶脂 雙層上或靠近靶脂雙層時，其可通過該部位將其自身插入膜。插入由C5b-7復合物上的在 C7結合C5b-6后出現的疏水性區(qū)域介導。膜結合C5b-7將MAC裝配體提交給膜部位，形成 C8的受體。一個C8分子對每一個C5b-7復合物的結合產生具有小于lnm功能性直徑的小 跨膜通道，所述通道可擾亂靶細菌和紅細胞的膜。每一個膜結合C5b-8復合物用作多個C9 分子的受體，并且似乎促進C9至細胞膜的碳氫化合物核心的插入。一個C9分子的結合在膜 攻擊部位起始C9寡聚化的過程。在至少12個分子被整合進入復合物后，形成離散的通道 結構。因此終產物由四分子C5b-8復合物（具有約550kDa的分子量）和管狀多聚C9 (具 有約1，lOOkDa的分子量）組成。MAC的該形式，一旦插入細胞膜，就產生完整的跨膜通道， 從而導致細胞的滲透性裂解。形成的跨膜通道視整合入通道結構的C9分子的數目而在尺 寸上有所變化。然而多聚-C9的存在對于紅血細胞或有核細胞的裂解不是絕對必需的，其 對于細菌的殺死可能是必需的。
[0021] 補體系統(tǒng)主要有益于抗侵入微生物的身體防御。補體級聯的早期組分對于病原體 的調理作用，隨后將它們從身體清除是非常重要的。此外，它們行使免疫系統(tǒng)的幾個正常功 能，如控制免疫復合物的形成和清除或清除碎片、死亡組織和外來物質。所有3個識別不同 分子模式的活化途徑幫助控制侵入者，所述分子模式（在健康身體中）確定了大量非自身 結構。末端補體途徑-其終止于MAC的裝配-代表了通過裂解細菌和外來細胞進行的其它 線的防御。
[0022] 當考慮補體缺陷的影響時，功能性補體系統(tǒng)的重要性就變得清楚明了。例如，失去 旁路途徑蛋白或晚期組分（C3-C9)之一的個體傾向于患上化膿性細菌特別地奈瑟球菌屬 (Neisseria)種類的嚴重感染。經典途徑組分（例如C1、C2、C4)的缺乏也與增加的（盡管 不是強升高的）感染風險相關。補體組分如C1和MBL還具有通過干擾病毒與宿主細胞膜 的相互作用，從而阻止進入細胞來中和病毒的能力。
[0023] 值得注意的是，盡管C5的切割導致C5a以及MAC，但缺乏C5的臨床特征與缺乏其 它末端組分（例如C6, C7, C8, C9)的臨床特征并無顯著差異，這表明C5a的不存在對C5缺 乏型患者的臨床表現無顯著貢獻。因此，C5a的選擇性拮抗有成為最佳杠桿作用的希望，以 便補體正常的上下游疾病預防功能保持完整。因此，僅促炎過敏毒素的有害過度產生被阻 斷。
[0024] C5aR_缺陷型小鼠（盡管它們對銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa)感染更 加易感）在其它方面表現正常的事實，表明C5a功能的阻斷無有害作用。
[0025] 幾種靶向C5a或C5或各自的受體的化合物是已知的并且在體內模型中進行了成 功地測試。它們中的一些已在臨床試驗中進行了進一步測試。C5-特異性人源化抗體依庫 珠單抗被批準用于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥，并且已在治療非典型溶血尿毒癥（aHUS)、 急性抗體介導的腎同種異體移植排斥和冷凝集素疾病中顯示功效。其阻止C5的切割并 且抑制C5a和C5b的作用。除了相似的研究階段的C5抗體和抗體片段以外，選擇性破壞 C5a: C5aR (⑶88)相互作用并使C5切割和C5b依賴性MAC形成不受影響的抗體特別吸引人。 實例為人源化抗_C5a mAb MEDI-7814,其處于用于炎癥障礙和組織損傷的潛在iv治療的I 期臨床開發(fā)中，和C5a抗體TNX-558,然而自2007年以來沒有關于其的報道。用于類風濕性 關節(jié)炎和中風的針對C5a受體的抗體neutrazumab正在開發(fā)之中（Ricklin&Lambris 2007 ; ffagner&Frank 2010)〇
[0026] PEG化抗C5適體（ARC-1905)處于用于AMD的臨床前開發(fā)中。CCX168是目前處于 用于抗嗜中性粒細胞細胞質自身抗體相關血管炎病的II期臨床開發(fā)中的小分子C5aR抑制 劑（ChemoCentryx Press Release Oct 17, 2011)。處于臨床開發(fā)中的另一種C5aR拮抗劑 是用于治療類風濕關節(jié)炎的MP-435。
[0027] 最近未報導關于小分子/擬肽類C5a受體拮抗劑JPE-1375、JSM-7717的開發(fā) (Ricklin&Lambris 2007)。C5a受體⑶88的另一種抑制劑環(huán)狀六肽PMX53在炎癥動物模型 中是有效的，但在類風濕性關節(jié)炎患者的以安慰劑為對照的雙盲臨床研究中不滿足終點。 AMD的臨床開發(fā)也已中斷（Wagner&Frank 2010)。已公布PMX53的研究階段變體PMX205在 阿爾茨海默氏癡呆癥的鼠模型中具有活性（Fonseca等人2009)。其它臨床階段化合物為 C5a受體（C5aR)拮抗劑CCX-168。已于2010年1月開始了針對炎癥和自身免疫性疾病的 I期試驗。
[0028] 除了如上所述的C5a的作用以外，新的數據使得假定在腫瘤微環(huán)境中產生C5a可 通過抑制抗腫瘤CD8+T-細胞介導的反應增強腫瘤生長，其中所述抑制似乎與髓源抑制細 胞至腫瘤內的募集和它們的定向T細胞的抑制能力的增強相關。Markiewski等人顯示肽 類C5a受體拮抗劑對C5a受體的阻斷在小鼠模型中導致延遲的腫瘤生長（Markiewski等 人，2008)。
[0029] 大多數肽類化合物易于被肽酶降解和修飾，并且另外地顯示從身體，優(yōu)選人體快 速的清除率。因此，這些肽類化合物不能被當作藥物樣分子（通常開發(fā)藥物以上市的前提 條件）。
[0030] 過去已開發(fā)了數種特異性結合人C5a，但不結合其它物種的C5a的Spiegelmer (參 見 W02009/040113 和 W02010/108657)。
[0031] 因為對于臨床前和臨床開發(fā)來說，動物模型是必需的，因此本發(fā)明要解決的問題 是提供與小鼠 C5a相互作用的化合物。更具體地，本發(fā)明要解決的問題是提供與小鼠 C5a 和人C5a都相互作用的化合物。
[0032] 本發(fā)明要解決的其它問題是提供用于制造用于人和/或非人疾病的治療的藥劑 的化合物，其中疾病的特征在于C5a直接或間接參與這樣的疾病的發(fā)病機制。
[0033] 本發(fā)明要解決的其它問題是提供用于制造用于疾病的治療的診斷劑的化合物，其 中疾病的特征在于C5a直接或間接參與這樣的疾病的發(fā)病機制。
[0034] 本發(fā)明要解決的這些和其它問題通過所附獨立權利要求的主題得以解決。優(yōu)選實 施方案可米自從屬權利要求。
[0035] 本發(fā)明要解決的問題在第一方面、也是第一方面的第一實施方案中通過能夠結合 人C5a的核酸分子得以解決，其中所述核酸分子包含中央核苷酸區(qū)段，其中所述中央核苷 酸區(qū)段包含如下核苷酸序列：
[0036] AUGn1GGUGKUn2n3RGGGHUGUKGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:61],
[0037] 其中
[0038] 為U或dU, n2為G或dG, n3為A或dA, n4為U或dU, n5為U或dU并且
[0039] G、A、U、C、H、K和R為核糖核苷酸，和
[0040] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0041] 在第一方面的第2實施方案、也是第一方面的第1實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含選自如下核苷酸序列的核苷酸序列：
[0042] a)5, AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:62],
[0043] b)5, AUGn1GGUGUUn2n3GGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:63],
[0044] c)5, AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUUGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:64],
[0045] d)5, AUGn1GGUGGUn2n3AGGGUUGUUGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:65],
[0046] e)5, AUGn1GGUGGUn2n3GGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:66],
[0047] fOS'AUGr^GGUGGUr^r^GGGGAUGUGGGGr^GnsCGACGCAS'BEQIDNCheTlJP
[0048] g)5，AUGn1GGUGUUn2n3GGGGCUGUGGGGn 4Gn5CGACGCA3，[SEQIDN0:68]，其中
[0049] 為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n 5為U或dU并且
[0050] G、A、U和C為核糖核苷酸，和
[0051] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0052] 在第一方面的第3實施方案、也是第一方面的第2實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含核苷酸序列：
[0053] 5，AUGn1GGUGGUn2n3AGGGUUGUUGGGn 4Gn5CGACGCA3，[SEQIDN0:65]，其中
[0054] 為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n 5為U或dU并且
[0055] G、A、U和C為核糖核苷酸，和
[0056] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0057] 在第一方面的第4實施方案、也是第一方面的第3實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含選自如下核苷酸序列的核苷酸序列：
[0058] a)5' AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:73]，
[0059] b)5' AUGUGGUGGUdGAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:74]，
[0060] c)5'AUGUGGUGGUGdAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:75]，
[0061] d)5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:76]，
[0062] e)5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:77]，
[0063] f)5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:78]，
[0064] g)5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:79]，
[0065] h)5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:80]，
[0066] i)5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:81]，
[0067] j)5'AUGdUGGUGGUdGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:82]，
[0068] k)5' AUGdUGGUGGUGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:83]，
[0069] 1)5' AUGdUGGUGGUdGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:84]，
[0070] 優(yōu)選中央核苷酸區(qū)段為 5' AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID NO :78]或
[0071] 5' AUGdUGGUGGUdGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:84]。
[0072] 在第一方面的第5實施方案、也是第一方面的第2實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含核苷酸序列：
[0073] 5，AUGn1GGUGGUn2n3GGGGUUGUGGGGn 4Gn5CGACGCA3，[SEQIDN0:66]，其中
[0074] 為U或dU，n2為G或dG, n3為A或dA, n4為U或dU，n5為U或dU并且
[0075] G、A、U和C為核糖核苷酸，并且
[0076] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0077] 在第一方面的第6實施方案、也是第一方面的第2實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含核苷酸序列：
[0078] 5，AUGn1GGUGGUn2n3GGGGAUGUGGGGn 4Gn5CGACGCA3，[SEQIDN0:67]，其中
[0079] 為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n 4為U或dU，n5為U或dU并且
[0080] G、A、U和C為核糖核苷酸，和
[0081] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0082] 在第一方面的第7實施方案、也是第一方面的第2實施方案的實施方式中，中央核 苷酸區(qū)段包含核苷酸序列：
[0083] 5，AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUUGGGn 4Gn5CGACGCA3，[SEQIDN0:64]，其中
[0084] 為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n 4為U或dU，n5為U或dU并且
[0085] G、A、U和C為核糖核苷酸，并且
[0086] dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0087] 在第一方面的第8實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6和7實施方案的實 施方式中，中央核苷酸區(qū)段由核糖核苷酸和2' -脫氧核糖核苷酸組成。
[0088] 在第一方面的第9實施方案、也是第一方面的第1、2、3、5、6和7實施方案的實施 方式中，中央核苷酸區(qū)段由核糖核苷酸組成。
[0089] 在第一方面的第10實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、7、8和9實施方案的 實施方式中，核酸分子以5' _>3'方向包含第一末端核苷酸區(qū)段、中央核苷酸區(qū)段和第二末 端核苷酸區(qū)段，其中
[0090] 第一末端核苷酸區(qū)段包含1至5個核苷酸，和
[0091] 第二末端核苷酸區(qū)段包含1至5個核苷酸，
[0092] 優(yōu)選地
[0093] 第一末端核苷酸區(qū)段包含3至5個核苷酸，和
[0094] 第二末端核苷酸區(qū)段包含3至5個核苷酸，
[0095] 更優(yōu)選地
[0096] 第一末端核苷酸區(qū)段包含3個核苷酸，和
[0097] 第二末端核苷酸區(qū)段包含3個核苷酸。
[0098] 在第一方面的第11實施方案、也是第一方面的第10實施方案的實施方式中，第一 末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' ZiZ2Z3Z4G 3'并且第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列 5' Z5Z6Z7Z8Z9 3，，
[0099] 其中
[0100] Zi為G或不存在，Z2為S或不存在，Z3為S或不存在，Z4為B或不存在，Z 5為C或 dC，Z6為V或不存在，Z7為S或不存在，Z8為S或不存在，Z 9為C或不存在，并且
[0101] G、S、B、C、V為核糖核苷酸，和
[0102] dC為2 ' -脫氧核糖核苷酸，
[0103] 優(yōu)選地
[0104] a) Zi 為 G，Z2 為 S，Z3 為 S，Z4 為 B，Z5 為 C 或 dC，Z6 為 V，Z7 為 S，Z8 為 S，Z9 為 C，或
[0105] b) Zi 不存在，Z2 為 S，Z3 為 S，Z4 為 B，Z5 為 C 或 dC，Z6 為 V，Z7 為 S，Z8 為 S，Z9 不存 在，或
[0106] dZi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，z7為s，z8不存在， z9不存在，或
[0107] cOZi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7不存在，Z8不 存在，Z9不存在，或
[0108] e) Zi 不存在，Z2 為 S，Z3 為 S，Z4 為 B，Z5 為 C 或 dC，Z6 為 V，Z7 為 S，Z8 為 S，Z9 為 C， 或
[0109] f) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7為S，Z8為S，Z9為 C，或
[0110] g) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7為S，Z8為S， z9為C,或
[0111] tOZiF存在，4不存在，23不存在，24不存在，z5sc或dc，z 6s V，z7s s，z8s s，z9Sc，或
[0112] i) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7為S，Z8為S，Z9不 存在，或
[0113] j)Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7為S，Z8為S， z9不存在，或
[0114] k)Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5為C或dC，Z 6為V，z7為s，z8為 s，z9不存在，或
[0115] 1) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7為S，Z8不存在，Z9不 存在，或
[0116] m) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7不存在，Z8不存在， z9不存在，或
[0117] n) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5為C，Z 6為V，Z7為S，Z8不存在， z9不存在，或
[0118] 0)21不存在，22不存在，23不存在，2 4為^25為（：或(1(：，26為￥，27為5,2 8不存 在，z9不存在，或
[0119] p)Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，Z7不存在，Z8不存 在，z9不存在，或
[0120] qWi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6不存在，Z7不存在，Z8不 存在，29不存在。
[0121] 在第一方面的第12實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCCUG 3'并且第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸 序列 5' CAGGC 3' 或 5' dCAGGC 3'，其中
[0122] C、A、G和U為核糖核苷酸，和
[0123] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0124] 在第一方面的第13實施方案、也是第一方面的第12實施方案的實施方式中，第二 末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGGC 3'。
[0125] 在第一方面的第14實施方案、也是第一方面的第12實施方案的實施方式中，第二 末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CAGGC 3'。
[0126] 在第一方面的第15實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，
[0127] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CCUG 3'或5'CUG 3'或5'UG 3'或5'G 3'，并且
[0128] 第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGGC 3'，其中
[0129] C、A、G和U為核糖核苷酸，和
[0130] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0131] 在第一方面的第16實施方案、也是第一方面的第15實施方案的實施方式中，
[0132] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CCUG 3'。
[0133] 在第一方面的第17實施方案、也是第一方面的第15實施方案的實施方式中，
[0134] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CUG 3'。
[0135] 在第一方面的第18實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，
[0136] a)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCUG 3'并且所述第二末端核苷 酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGC 3'，或
[0137] b)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCCG 3'并且所述第二末端核苷 酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCGGC 3'，或
[0138] c)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GGCG 3'并且所述第二末端核苷 酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCGCC 3' ；其中
[0139] C、A、G和U為核糖核苷酸，和
[0140] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0141] 在第一方面的第19實施方案、也是第一方面的第18實施方案的實施方式中，
[0142] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GGCG 3'并且第二末端核苷酸區(qū)段包含核 苷酸序列5' dCGCC 3'。
[0143] 在第一方面的第20實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，
[0144] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CUG 3'或5' UG 3'或5' CG 3'或5' G 3'，并且
[0145] 第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGC 3'，
[0146] 其中
[0147] C、A、G和U為核糖核苷酸，并且
[0148] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0149] 在第一方面的第21實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，
[0150] 第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCUG 3'，并且
[0151] 第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAC 3'或5' dCC 3'或5' dCA 3'，其中
[0152] C，A，G和U為核糖核苷酸，并且
[0153] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0154] 在第一方面的第22實施方案、也是第一方面的第10和11實施方案的實施方式 中，
[0155] a)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GUG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAC 3'，或
[0156] b)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' UG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCA 3'，或
[0157] c)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCGC 3'，或
[0158] d)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCGC 3'，或
[0159] e)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' G 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū) 段包含核苷酸序列5' dCGC 3'，或
[0160] f)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCC 3'，或
[0161] g)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dC 3'，或
[0162] h)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' dCC 3' ；
[0163] i)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCG 3'并且所述第二末端核苷酸 區(qū)段包含核苷酸序列5' CGC 3' ；其中
[0164] C、A、U和G為核糖核苷酸，并且
[0165] dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
[0166] 在第一方面的第23實施方案、也是第一方面的第22實施方案的實施方式中，第 一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCG 3'，并且第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列 5, dCGC 3，。
[0167] 在第一方面的第24實施方案、也是第一方面的第1、2、3、5、6、7、9、10、11、12和14 實施方案的實施方式中，核酸分子包含選自SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6和SEQ ID N0:90的核苷酸序列，或包含與包含選自SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6和SEQ ID N0:90的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性 的核酸分子，或包含與包含選自SEQIDN0:3、SEQIDN0:4、SEQIDN0:5、SEQIDN0:6和 SEQ ID N0:90的核苷酸序列的核酸分子同源的核酸分子，其中所述同源性為至少85%。
[0168] 在第一方面的第25實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、8、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22和23實施方案的實施方式中，核酸分子包含選自SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:21、SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25、SEQ ID N0:26、SEQ ID N0:27、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 57、SEQ ID NO: 59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:91 和 SEQ ID NO:92 的核 苷酸序列，或包含與包含選自 SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:21、SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25、 SEQ ID NO:26,SEQ ID NO:27,SEQ ID NO:37,SEQ ID NO:57,SEQ ID NO:59,SEQ ID NO:60, SEQ ID N0:91和SEQ ID N0:92的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性的核酸分 子，或包含與包含選自 SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:21、SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID N0:91和SEQ ID N0:92的核苷酸序列的核酸分子同源的核酸分子，其中所述同源性為至少 85%。
[0169] 在第一方面的第26實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24和25實施方案的實施方式中，核酸分子能夠結合 人C5a和小鼠 C5a。
[0170] 在第一方面的第27實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25和26實施方案的實施方式中，核酸分子包含 至少一個能夠結合人C5a和小鼠 C5a的結合部分，其中這樣的結合部分由L-核苷酸組成。
[0171] 在第一方面的第28實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26和27實施方案的實施方式中，核酸分子的 核苷酸或形成核酸分子的核苷酸為L-核苷酸。
[0172] 在第一方面的第29實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27 和 28 實施方案的實施方式中，核酸分 子為L-核酸分子。
[0173] 在第一方面的第30實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28 和 29 實施方案的實施方式中，核酸 為通過人和/或小鼠 C5a介導的活性的拮抗劑。
[0174] 在第一方面的第31實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29 和 30 實施方案的實施方式中， 核酸分子包含修飾基團，其中包含修飾基團的核酸分子從生物體的排泄率相較于不包含修 飾基團的核酸減小。
[0175] 在第一方面第32實施方案、也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29 和 30 實施方案的實施方式中， 核酸分子包含修飾基團，其中包含修飾基團的核酸分子相較于不包含修飾基團的核酸分子 在生物體中具有增加的停留時間。
[0176] 在第一方面的第33實施方案、也是第一方面的第31和32實施方案的實施方式 中，修飾基團選自生物可降解的和非生物可降解的修飾，優(yōu)選修飾基團選自聚乙二醇、線 性聚乙二醇、分枝聚乙二醇、羥乙基淀粉、肽、蛋白質、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧酰胺和聚 (2-輕乙基）一 L-谷氨酰胺。
[0177] 在第一方面的第34實施方案、也是第一方面的第33實施方案的實施方式中，修飾 基團為聚乙二醇，優(yōu)選由線性聚乙二醇或分枝聚乙二醇組成，其中聚乙二醇的分子量優(yōu)選 為約20, 000至約120, OOODa，更優(yōu)選約30, 000至約80, OOODa和最優(yōu)選約40, OOODa。
[0178] 在第一方面的第35實施方案、也是第一方面的第33實施方案的實施方案中，修飾 基團為羥乙基淀粉，其中優(yōu)選羥乙基淀粉的分子量為約50至約1000kDa，更優(yōu)選約100至約 700kDa 和最優(yōu)選 200 至 500kDa。
[0179] 在第一方面的第36實施方案、也是第一方面的第31、32、33、34和35實施方案的 實施方式中，修飾基團通過接頭偶聯于核酸分子，其中優(yōu)選地接頭是生物可降解接頭。
[0180] 在第一方面的第37實施方案、也是第一方面的第31、32、33、34、35和36實施方案 的實施方式中，修飾基團偶聯于核酸分子的5' -末端核苷酸和/或核酸分子的3' -末端核 苷酸和/或所述核酸分子的5' -末端核苷酸與所述核酸分子的3' -末端核苷酸之間的所 述核酸分子的核苷酸。
[0181] 在第一方面的第38實施方案、也是第一方面的第31、32、33、34、35、36和37實施 方案的實施方式中，生物體是動物體或人體，優(yōu)選人體。
[0182] 本發(fā)明要解決的問題在第二方面、也是第二方面的第一實施方案中通過用于治療 和/或預防疾病的方法的核酸分子得以解決，所述核酸分子是根據第一方面的第1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34、35、36、37和38實施方案的核酸分子。
[0183] 在第2方面的第2實施方案、也是第2方面的第1實施方案的實施方式中，疾病與 補體活化和C5a介導的發(fā)病機制相關，和/或選自自身免疫性疾病、炎性疾病、全身性炎性 反應綜合征、眼病、缺血/再灌注損傷、遲發(fā)性移植物功能、移植排斥、心血管疾病、呼吸性 疾病、急性反應、感染性疾病、神經系統(tǒng)疾病、神經變性疾病、纖維變性疾病、血液病、代謝疾 病、腫瘤和與由生物材料引起的補體活化相關的臨床并發(fā)癥，優(yōu)選全身性炎性反應綜合征 選自膿毒癥和外傷或重度燒傷的繼發(fā)性損傷。
[0184] 本發(fā)明要解決的問題在第3方面、也是第3方面的第1實施方案中通過藥物組合 物得以解決，所述藥物組合物包含根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第二方面的第一實施方案的核酸分子和任選地其它組分，其中所述其它組 分選自藥學上可接受的賦形劑、藥學上可接受的載體和藥物活性劑。
[0185] 在第三方面的第二實施方案、也是第三方面的第一實施方案的實施方案中，藥物 組合物包含根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和第二方面的第 一實施方案的核酸分子以及藥學上可接受的載體。
[0186] 本發(fā)明要解決的問題在第4方面、也是第4方面的第1實施方案中通過核酸分子 用于制造藥劑的用途得以解決，所述核酸分子是根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第一實施方案的核酸分子。
[0187] 在第4方面的第2實施方案、也是第4方面的第1實施方案的實施方案中，藥劑用 于人類醫(yī)學或用于獸醫(yī)醫(yī)學。
[0188] 在第四方面的第3實施方案、也是第四方面的第1和2實施方案的實施方式中，藥 劑用于治療和/或預防自身免疫性疾病、炎性疾病、全身性炎性反應綜合征、眼病、缺血/再 灌注損傷、遲發(fā)性移植物功能、移植排斥、心血管疾病、呼吸性疾病、急性反應、感染性疾病、 神經系統(tǒng)疾病、神經變性疾病、纖維變性疾病、血液病、代謝疾病、腫瘤和與由生物材料引起 的補體活化相關的臨床并發(fā)癥，優(yōu)選全身性炎性反應綜合征選自膿毒癥和外傷或重度燒傷 的繼發(fā)性損傷。
[0189] 本發(fā)明要解決的問題在第5方面、也是第5方面的第1實施方案中通過核酸分子 用于制造診斷工具的用途得以解決，所述核酸分子是根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸分子。
[0190] 本發(fā)明要解決的問題在第6方面、也是第6方面的第1實施方案中通過包含核酸 分子和C5a的復合物得以解決，所述核酸分子是根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸分子，其中優(yōu)選所述復合物 是晶體復合物。
[0191] 本發(fā)明要解決的問題在第7方面、也是第7方面的第1實施方案中通過核酸分子 用于檢測C5a的用途得以解決，所述核酸分子是根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸分子。
[0192] 本發(fā)明要解決的問題在第8方面、也是第8方面的第1實施方案中通過方法得以 解決，所述方法用于篩選由C5a介導的活性的拮抗劑，其包括下列步驟：
[0193] -提供由C5a介導的活性的候選拮抗劑，
[0194] -提供根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第 2方面的第1實施方案的核酸分子，
[0195] -提供在由C5a介導的活性的拮抗劑存在的情況下提供信號的測試系統(tǒng)，和
[0196] -確定由C5a介導的活性的候選拮抗劑是否是由C5a介導的活性的拮抗劑。
[0197] 本發(fā)明要解決的問題在第9方面、也是第9方面的第一實施方案中通過試劑盒得 以解決，所述試劑盒用于檢測C5a，其中試劑盒包含根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、 9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第2方面的第1實施方案的核酸分子，以及至少說明書或反 應容器。
[0198] 本發(fā)明要解決的問題在第10方面、也是第10方面的第1實施方案中通過方法得 以解決，所述方法用于檢測樣品中的根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸，其中所述方法包括步驟：
[0199] a)提供捕獲探針，其中所述捕獲探針與根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、 11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第2方面的第1實施方案的核酸分子的第一部分至少部分 互補，和檢測探針，其中檢測探針與根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸分子的第二部分至少部分互補；或者，可 選擇地，捕獲探針與根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根 據第二方面的第1實施方案的核酸分子的第二部分至少部分互補，以及檢測探針與根據第 一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的 核酸分子的第一部分至少部分互補；
[0200] b)將捕獲探針和檢測探針分別地或組合地添加至樣品，所述樣品包含根據第一方 面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核 酸分子或假定包含根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第 二方面的第1實施方案的核酸分子；
[0201] c)使捕獲探針和檢測探針同時或以任意順序依次與核酸分子或其部分反應，所述 核酸分子是根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第二方面 的第1實施方案的核酸分子；
[0202] d)任選地檢測步驟a)中提供的捕獲探針是否與核酸分子雜交，所述核酸分子是 根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施 方案的核酸分子；和
[0203] e)檢測步驟c)中形成的由核酸分子與捕獲探針和檢測探針組成的復合物，所述 核酸分子是根據第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37 和 38 實施方案和根據第二方面 的第1實施方案的核酸分子。
[0204] 在第10方面的第2實施方案、也是第10方面的第1實施方案的實施方式中，檢測 探針包括檢測工具，和/或其中捕獲探針被固定于支持物，優(yōu)選固體支持物。
[0205] 在第10方面的第3實施方案、也是第10方面的第1和2實施方案的實施方式中， 從反應中除去不為步驟c)中形成的復合物的部分的任何檢測探針以便在步驟e)中僅檢測 是所述復合物的部分的檢測探針。
[0206] 在第10方面的第4實施方案、也是第10方面的第1、2和3實施方案的實施方案 中，步驟e)包括步驟：比較當捕獲探針與檢測探針在根據第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37和38實施方案和根據第二方面的第1實施方案的核酸分子或其部分存在的情況 下，和在所述核酸分子或其部分不存在的情況下雜交時，通過檢測工具產生的信號。
[0207] 然而不希望受任何理論束縛，本發(fā)明人已令人驚訝地發(fā)現根據本發(fā)明的核酸分子 以高親和力特異性結合小鼠 C5a和人C5a，從而抑制C5a對其C5a受體的結合，盡管小鼠 C5a 和人C5a的序列同源性在同源區(qū)域僅為64%并且小鼠 C5a具有3個額外的N末端氨基酸。 此外，與人C5a相反，小鼠 C5a未被糖基化。天冬酰胺64 (人C5a中的糖基化位點）在小鼠 中被突變成谷氨酸。特別地，皮摩爾范圍內的數種單個C5a結合性核酸顯示的親和力不可 預見。
[0208] 此外，本發(fā)明人已令人驚訝地發(fā)現根據本發(fā)明的核酸分子適合于阻斷C5a與C5a 受體的相互作用。在這個范圍內，根據本發(fā)明的核酸分子還可被視為C5a受體的拮抗劑和， 分別地被視為C5a的作用，具體地C5a對其受體的作用的拮抗劑。針對C5a的拮抗劑是優(yōu) 選在如實施例中描述的體外測定或體內模型中結合C5a(例如根據本發(fā)明的核酸分子）和 抑制C5a的功能的分子。
[0209] 在本發(fā)明的范圍內，根據本發(fā)明的核酸是核酸分子。在這個范圍內，術語核酸和核 酸分子在本文中以同義的方式使用，如果無相反說明的話。此外，這樣的核酸優(yōu)選在本文中 也被稱為根據本發(fā)明的核酸分子，根據本發(fā)明的核酸，本發(fā)明核酸或本發(fā)明核酸分子。
[0210] 如本文中描述的根據本發(fā)明的核酸的特性可在其中單獨地或以任意組合地使用 所述核酸的本發(fā)明的任何方面中實現。
[0211] 對于可通過使用根據本發(fā)明的核酸分子和組合物，優(yōu)選包含所述核酸分子的藥物 組合物治療或預防的各種疾病、病況和障礙，必須認識到這樣的疾病、病況和障礙是本文中 描述的那些疾病、病況和障礙，包括，特別是本申請的引文部分描述和所示的那些疾病、病 況和障礙。在這個范圍內，說明書的各個段落和說明書的引文部分形成了本公開內容的完 整部分，該部分教導本發(fā)明的核酸分子分別用于所述疾病、病況和障礙的預防和治療的適 合性。此外，根據本發(fā)明的核酸分子是優(yōu)選的，如果C5a - C5a受體軸的生理作用與更高水 平的血漿C5a相關的話。
[0212] 如本文中所用，術語C5a是指任何C5a，包括但不限于哺乳動物C5a。優(yōu)選地，哺 乳動物C5a選自人、大鼠、小鼠、猴C5a(參見圖11的C5a物種比對）。更優(yōu)選地，C5a是人 C5a。人C5a是具有根據SEQ. ID. No. 50的氨基酸序列的堿性蛋白。小鼠 C5a是具有根據 SEQ. ID. No. 52的氨基酸序列的堿性蛋白。
[0213] 如權利要求和實施例1中更詳細地概述的，本發(fā)明人可更令人驚訝地鑒定許多不 同的能夠結合人和小鼠 C5a的結合性核酸分子。
[0214] 如本文中更詳細概述的，本發(fā)明人已鑒定了許多不同的能夠結合人和小鼠 C5a的 C5a結合性核酸分子，其中可以用核苷酸區(qū)段的方式（在本文中也被稱為公開的）表征所述 核酸分子（參見實施例1)。如實施例8和9中在實驗上顯示的，本發(fā)明人可令人驚訝地在 幾個系統(tǒng)中顯示根據本發(fā)明的核酸分子適合用于治療膿毒癥。
[0215] 結合C5a的本發(fā)明的C5a結合性核酸分子的不同類型的每一個包括3個不同的核 苷酸的區(qū)段：第一末端核苷酸區(qū)段、中央核苷酸區(qū)段和第二末端核苷酸區(qū)段。一般而言，本 發(fā)明的C5a結合性核酸分子在其5' -末端和3' -末端包含末端核苷酸區(qū)段的各一個，即第 一末端核苷酸區(qū)段或第二末端核苷酸區(qū)段（也稱為5' -末端核苷酸區(qū)段和3' -末端核苷 酸區(qū)段）。第一末端核苷酸區(qū)段和第二末端核苷酸區(qū)段可原則上因其堿基互補性而彼此雜 交，從而在雜交后，形成雙鏈結構。然而，這樣的雜交在生理和/或非生理條件下在分子中 不一定實現。C5a結合性核酸分子的3個核苷酸區(qū)段-第一末端核苷酸區(qū)段、中央核苷酸區(qū) 段和第二末端核苷酸區(qū)段-彼此以5' 一 3' -方向排列：第一末端核苷酸區(qū)段中央核苷 酸區(qū)段第二末端核苷酸區(qū)段。或者，第二末端核苷酸區(qū)段、中央核苷酸區(qū)段和第一末端核 苷酸區(qū)段彼此以5' 一 3' -方向排列。
[0216] 根據本發(fā)明的核酸的中央核苷酸區(qū)段的長度優(yōu)選為34。
[0217] 根據本發(fā)明的核酸的第一末端核苷酸區(qū)段的長度為1至5個核苷酸，優(yōu)選3至5 個核苷酸，更優(yōu)選3個核苷酸。
[0218] 根據本發(fā)明的核酸的第二末端核苷酸區(qū)段的長度為1至5個核苷酸，優(yōu)選3至5 個核苷酸，更優(yōu)選3個核苷酸。
[0219] 術語'區(qū)段'和'核苷酸的區(qū)段'在本文中以同義的方式使用，如果沒有相反指明 的話。
[0220] 不同的C5a結合性核酸分子之間的確定的區(qū)段的序列的差異可影響對C5a的結合 親和力?；诒景l(fā)明的不同C5a結合性核酸分子的結合分析，中央區(qū)段和形成中央區(qū)段的 核苷酸單個地、更優(yōu)選在其整體上對于對C5a結合核酸分子對C5a的結合是必需的。
[0221] 在優(yōu)選實施方案中，根據本發(fā)明的核酸分子是單個核酸分子。在其它實施方案中， 單個核酸分子以許多單個核酸分子或以許多單個核酸分子種類的形式存在。
[0222] 本領域技術人員將認識到根據本發(fā)明的核酸分子優(yōu)選由彼此共價連接（優(yōu)選通 過磷酸二酯連接或鍵）的核苷酸組成。
[0223] 在本發(fā)明的范圍內，根據本發(fā)明的核酸分子包含兩個或更多個區(qū)段或其部分，所 述區(qū)段或其部分原則上可彼此雜交。在這樣的雜交后，形成雙鏈結構。本領域技術人員將 認識到，這樣的雜交可以存在或可以不存在，特別地在體外和/或體內條件下。同樣的，在 雜交的情況下，這樣的雜交不一定在兩個區(qū)段的整個長度上存在，其中，至少基于堿基配對 法則，這樣的雜交和從而雙鏈結構的形成在原則上可以發(fā)生。如本文中優(yōu)選使用的，雙鏈結 構是核酸分子的部分或通過兩個或更多個單獨的鏈或核酸分子的單鏈的兩個空間上分開 的區(qū)段形成的結構，其中至少一個，優(yōu)選2個或更多個優(yōu)選按照沃森-克里克堿基配對法則 進行堿基配對的堿基對存在。本領域技術人員還將認識到，其它堿基配對例如Hoogsten堿 基配對可存在于這樣的雙鏈結構中或可形成這樣的雙鏈結構。還將認識到，兩個區(qū)段雜交 的特性優(yōu)選地表示這樣的雜交假定因兩個區(qū)段的堿基互補性而發(fā)生，無論這樣的雜交在體 內和/或體外實際上是否發(fā)生。與本發(fā)明相關，這樣的區(qū)段是第一末端核苷酸區(qū)段和第二 末端核苷酸區(qū)段，所述核苷酸區(qū)段，在實施方案中，可如上定義地雜交。
[0224] 在優(yōu)選實施方案中，如本文中所用，術語排列意指與本文中公開的核酸分子相關 的本文中描述的結構或功能特性或元件的順序或序列。
[0225] 本領域技術人員將認識到，根據本發(fā)明的核酸能夠結合C5a和C5。該結合特征通 過這樣的事實產生：對于核酸的鑒定，使用存在于C5a和C5中的C5a的部分。因此，根據 本發(fā)明的核酸適合于C5a或C5或兩者的檢測。同樣地，本領域技術人員將認識到，根據本 發(fā)明的核酸分子是C5a和C5的拮抗劑。由此，根據本發(fā)明的核酸適合用于分別地治療和預 防與C5a或C5或兩者相關或由C5a或C5或兩者引發(fā)的任何疾病?？茖W原理可來自于確定 C5a和C5分別地參與多種疾病和病況或與其相關的現有技術，并將所述技術通過引用并入 本文。
[0226] 已顯示本文中公開的本發(fā)明的C5a結合性核酸分子識別C5背景中的C5a(參見實 施例1)。因此，研究C5至過敏毒素 C5a和C5b (其中C5b是膜攻擊復合物（MAC)的部分） 的切割是否被C5a結合性核酸抑制。MAC是補體級聯的終產物：由C5b-9組成的孔。MAC據 信插入病原體的細胞質膜并通過誘導細胞質滲漏殺死它們。通過使用補體依賴性綿羊紅細 胞溶血測試來實現C5切割的測定。本發(fā)明的C5a結合性分子不抑制溶血作用（參見實施 例6)。本發(fā)明的C5a結合性核酸分子不干擾C5切割和MAC形成，因而僅為C5a的選擇性拮 抗齊U。如果用作藥劑，這在許多疾病中可以是有利的，因為在病原體防御中有益的MAC的形 成在它們存在的情況下未被損壞。
[0227] 根據本發(fā)明的核酸分子還將包含與本文中公開的特定序列基本上同源的核酸。術 語基本上同源的應當被理解為例如同源性為至少75%，優(yōu)選85%，更優(yōu)選90%，最優(yōu)選超 過 95%、96%、97%、98% 或 99%。
[0228] 根據本發(fā)明的核酸中存在的同源核苷酸的實際百分比將取決于存在于核酸中的 核苷酸的總數。百分比變化可基于存在于核酸中的核苷酸的總數。
[0229] 可如本領域技術人員已知的，測定兩個核酸分子之間的同源性。更具體地，序列比 較算法可用于基于指定的程序參數計算測試序列相對于參照序列的百分比序列同源性。測 試序列優(yōu)選是被認為針對不同核酸分子是同源的或待測試其是否是同源的，并且如果是， 達到什么程度的序列或核酸分子，其中這樣的不同核酸分子也稱為參照序列。在實施方案 中，參照序列是如本文中描述的核酸分子，優(yōu)選具有根據SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:21、SEQ ID N0:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:59、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:91和SEQ ID N0:92的任一個的序列的核酸分子。用于比較的序列 的最佳比對可以例如通過Smith&Waterman的局部同源性算法（Smith&Waterman, 1981)，通 過 Needleman&Wunsch 的同源性比對算法（Needleman&Wunsch, 1970)，通過 Pearson&Lipman 的相似性搜索法（Pearson&Lipman, 1988)，通過這些算法的計算機化執(zhí)行（Wisconsin Genetics 軟件包，Genetics Computer Group, 575Science Dr.，Madison, Wis.中的 GAP、 BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通過目測觀察來進行。
[0230] 適合用于測定百分比序列同一性的算法的一個實例是用于基本局部比對搜索工 具（在下文中稱為"BLAST")中的算法，參見，例如，Altschul等人（Altschul等人1990和 Altschul等人，1997)。用于進行BLAST分析的軟件是可通過國家生物技術信息中心（在 下文中稱為"NCBI")公共獲得的。用于使用可從NCBI獲得的軟件例如BLASTN(用于核苷 酸序列）和BLASTP (用于氨基酸序列）測定序列同一性的缺省參數描述于McGinnis等人 (McGinnis 等人，2004)中。
[0231] 根據本發(fā)明的核酸還將包括相對于本文中公開的和根據其核苷酸序列確定的核 酸具有一定程度的同一性的核酸。更優(yōu)選地，本發(fā)明還包括相對于本文中公開的和根據其 核苷酸序列確定的核酸或其部分具有至少75 %，優(yōu)選85 %，更優(yōu)選90 %，最優(yōu)選超過95 %、 96%、97%、98%或99%的同一性的那些核酸分子。
[0232] 術語本發(fā)明的核酸或根據本發(fā)明的核酸還將包括這樣的核酸，所述核酸包含本文 中公開的核酸序列或其部分，優(yōu)選達到所述核酸或所述部分參與結合人C5a的程度。這樣 的核酸分子在實施方案中為本文中描述的核酸分子之一或其衍生物和/或代謝物，其中這 樣的衍生物和/或代謝物優(yōu)選相較于本文中描述的核酸分子為截短的核酸。截短可涉及本 文中公開的核酸的任一個或兩個末端。截短還可涉及核酸的內部核苷酸序列，即其可分別 地涉及5'與3'末端核苷酸之間的核苷酸。此外，截短將包括小至單個核苷酸從本文中公 開的核酸的序列的缺失。截短還可涉及超過一個本發(fā)明的核酸的區(qū)段，其中區(qū)段可小至1 個核苷酸長。可由本領域技術人員使用常規(guī)實驗或通過使用或采用本文中描述的方法，優(yōu) 選在本文中實施例部分描述的方法來測定根據本發(fā)明的核酸的結合。
[0233] 根據本發(fā)明的核酸分子可以是D-核酸分子或L-核酸分子。優(yōu)選地，根據本發(fā)明 的核酸分子為L-核酸分子。更優(yōu)選，本發(fā)明的核酸分子為Spiegelmer。
[0234] 還在本發(fā)明范圍內的是，在實施方案中，本文中描述的核酸分子的每一個和任一 個根據其核酸序列在其整體上限定于特定指定的核苷酸序列。換句話說，術語"包含"或"含 有"在這樣的實施方案中應當以包括或由……組成的含義來解釋。
[0235] 也在本發(fā)明范圍內的是，根據本發(fā)明的核酸是更長的核酸的部分，其中該更長的 核酸包含幾個部分，其中至少一個這樣的部分為根據本發(fā)明的核酸或其部分。這些更長的 核酸的其它部分可以是一個或數個D-核酸或一個或數個L-核酸?？蓪⑷我饨M合與本發(fā)明 結合使用。這些更長核酸的其它部分單獨地或一起地在其整體性上或以特定組合顯示與結 合、優(yōu)選與對C5a的結合不同的功能。一個可能的功能是允許與其它分子相互作用，其中這 樣的其它分子優(yōu)選與C5a不同，例如用于固定、交聯、檢測或擴增。在本發(fā)明的其它實施方 案中，根據本發(fā)明的核酸作為單個部分或組合部分包括幾個本發(fā)明的核酸。這樣的包含幾 個本發(fā)明的核酸的核酸也包括在術語更長的核酸內。
[0236] 如本文中所用，L-核酸為由L-核苷酸組成，優(yōu)選完全由L-核苷酸組成的核酸或 核酸分子。
[0237] 如本文中所用，D-核酸為由D-核苷酸組成，優(yōu)選完全由D-核苷酸組成的核酸或 核酸分子。
[0238] 術語核酸和核酸分子在本文中以可互換的方式使用，如果未明確地指出相反的 話。
[0239] 同樣的，如果無相反說明的話，任何核苷酸序列在本文中以5' 一 3'方向顯示。
[0240] 如本文中優(yōu)選使用的，核苷酸的任何位置是相對于包含這樣的核苷酸的序列、區(qū) 段或子區(qū)段的5'末端測定的或提及的。因此，第二核苷酸為分別從序列、區(qū)段和子區(qū)段的 5'末端計數的第二核苷酸。同樣地，與其一致地，倒數第二核苷酸為分別從序列、區(qū)段和子 區(qū)段的3'末端計數的第二核苷酸。
[0241] 不論本發(fā)明的核酸分子由D-核苷酸、L-核苷酸組成還是由兩者的組合組成（所 述組合為由至少一個L-核苷酸和至少一個D-核酸組成的區(qū)段的隨機組合或確定的序列）， 核酸都可由脫氧核糖核苷酸、核糖核苷酸或其組合組成。
[0242] 也在本發(fā)明范圍內的是，核酸分子由核糖核苷酸和2'脫氧核糖核苷酸組成。2' 脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸示于圖22和23中。為了區(qū)分根據本發(fā)明的核酸分子的序列 中的核糖核苷酸與2'脫氧核糖核苷酸，在本文中使用下列參考碼。
[0243] 根據本發(fā)明的核酸分子由2'脫氧核糖核苷酸組成，其中
[0244] dG為2'脫氧-鳥苷-5' -單磷酸，
[0245] dC為2 '脫氧-胞苷-5 ' -單磷酸，
[0246] dA為2 '脫氧-腺苷-5 ' -單磷酸，
[0247] dU為2 '脫氧-尿苷-5 ' -單磷酸，
[0248] 根據本發(fā)明的核酸分子由核糖核苷酸組成，其中
[0249] G為鳥苷-5'-單磷酸，
[0250] C為胞苷5' -單磷酸，
[0251] A為腺苷-5' -單磷酸，
[0252] U為尿苷-5'單磷酸。
[0253] 關于核糖核苷酸序列基序的定義，使用針對不明確的核苷酸的IUPAC縮寫：
[0254] S 強 G 或 C ;
[0255] W 弱 A 或 U ;
[0256] R 嘌呤 G 或 A ;
[0257] Y 嘧啶 C 或 U ;
[0258] K 酮類 G或U;
[0259] M 亞胺基Α或C;
[0260] B 非 A C 或U 或G;
[0261] D 非 C A 或G 或U;
[0262] H 非 G A 或C 或U;
[0263] V 非 U A 或C 或G;
[0264] N 全部A或G或C或U
[0265] 將本發(fā)明的核酸分子設計為L_核酸分子因若干原因是有利的。L_核酸分子是天 然存在的核酸的對映體。然而，D-核酸分子在水溶液中，特別地在生物系統(tǒng)或生物樣品中因 核酸酶的廣泛存在而不是特別穩(wěn)定。天然存在的核酸酶，特別地來自動物細胞的核酸酶不 能降解L-核酸。因此，L-核酸分子的生物半衰期在這樣的系統(tǒng)包括動物體和人體中顯著 增加。由于缺乏L-核酸分子的降解能力，在這樣的系統(tǒng)包括動物體和人體中，無核酸酶降 解產物產生，從而未觀察到從其產生的副作用。這個方面使L-核酸分子區(qū)別于實際上所有 其它用于治療牽涉C5的存在的疾病和/或障礙的化合物。通過與沃森-克里克堿基配對 不同的機制特異性結合靶分子的L-核酸分子，或部分地或完全地由L-核苷酸組成的適體， 特別地對于參與適體對祀分子的結合的適體的那些部分，也稱為spiegelmer。這樣的適體 和spiegelmer對于本領域技術人員來說也是已知的，并且除其它以外描述于'The Aptamer Handbook，（eds.Klussmann，2006)中。
[0266] 也在本發(fā)明范圍內的是，本發(fā)明的核酸分子，不論其以D_核酸、L_核酸還是 D，L-核酸存在，或不論其為DNA還是RNA，都可以以單鏈或雙鏈核酸分子的形式存在。通常 地，核酸分子是單鏈核酸分子，其因其一級序列而顯示確定的二級結構，從而也可形成三級 結構。然而，核酸分子還可以是雙鏈的，意即彼此互補或部分互補的兩條鏈彼此雜交。
[0267] 可修飾本發(fā)明的核酸分子。這樣的修飾可涉及核酸分子的單個核苷酸，并在本領 域是公知的。這樣的修飾的實例除其它以外由Venkatesan等人（Venkatesan等人，2003) 和Kusser(Kusser，2000)進行了描述。這樣的修飾可以是所有組成核酸分子的單個核苷酸 的一個、數個的2'位置上的Η原子、F原子或〇-CH 3基團和或NH2-基團。根據本發(fā)明的核 酸分子還可包含至少一個LNA核苷酸。在實施方案中，根據本發(fā)明的核酸分子由LNA核苷 酸組成。
[0268] 在實施方案中，根據本發(fā)明的核酸分子可以是多部分核酸分子。如本文中所用，多 部分核酸分子是由至少兩個單獨的核酸鏈組成的核酸分子。這至少兩個核酸鏈形成功能單 位，其中在本發(fā)明的C5a的情況下，功能單位為靶分子的配體和，優(yōu)選地，靶分子的拮抗劑。 至少兩個核酸鏈可通過切割本發(fā)明的核酸分子以產生至少兩條鏈或通過合成一個對應于 本發(fā)明的全長核酸分子的第一部分的核酸分子和對應于本發(fā)明的全長核酸分子的另一部 分的另一個核酸分子來從本發(fā)明的任意核酸分子產生。取決于形成全長核酸分子的部分的 數目，合成對應數目的具有期望核苷酸序列的部分。應認識到切割法和合成法都可被用于 產生其中存在超過兩個上文例舉的鏈的多部分核酸分子。換句話說，至少兩條單獨的核酸 鏈通常與彼此互補和雜交的兩條鏈不同，盡管所述至少兩個單獨的核酸鏈之間可存在一定 程度的互補性以及由這樣的互補性可導致所述單獨的鏈的雜交。
[0269] 最后，也在本發(fā)明范圍內的是，實現了根據本發(fā)明的核酸分子的完全閉合的，即環(huán) 狀的結構，即根據本發(fā)明的核酸分子在實施方案中是閉合的，優(yōu)選地通過共價連接閉合，其 中更優(yōu)選這樣的共價連接在本文中公開的本發(fā)明的核酸分子或其任何衍生物的核酸序列 的5'末端與3'末端之間產生。
[0270] 測定根據本發(fā)明的核酸分子的結合常數的可能性是使用實施例3和4中描述的方 法，其確認根據本發(fā)明的核酸顯示有利的K D值范圍的上述發(fā)現。為了表達單個核酸分子與 靶（在本發(fā)明中為C5a)之間的結合強度的適當量度是所謂的KD值，該值本身以及用于其 測定的方法對于本領域技術人員來說是已知的。
[0271] 優(yōu)選地，根據本發(fā)明的核酸顯示的KD值低于1 μ M。約1 μ Μ的KD值被認為是核酸 對靶的非特異性結合的特征。如將由本領域技術人員認識到的，一組化合物例如根據本發(fā) 明的核酸的K D值在一定范圍之內。上述約1 μ Μ的KD是KD值的優(yōu)選上限。靶結合核酸的KD 的下限可小至約10皮摩或可更高。在本發(fā)明范圍內，結合C5a的單個核酸KD值優(yōu)選在該范 圍內。優(yōu)選范圍可通過選擇該范圍內的任意第一數值和該范圍內的任意第二數值來界定。 優(yōu)選較高的K D值為250nM和ΙΟΟηΜ，優(yōu)選較低的KD值為50ηΜ、ΙΟηΜ、ΙηΜ、ΙΟΟρΜ和10pM。更 優(yōu)選較高的K D值為10nM，更優(yōu)選較低的KD值為ΙΟΟρΜ。
[0272] 除了根據本發(fā)明的核酸分子的結合性質以外，根據本發(fā)明的核酸分子還抑制各自 革巴分子（在本情況下為C5a)的功能。C5a的功能-例如先前描述的各自受體的刺激-的抑 制通過根據本發(fā)明的核酸分子對C5a的結合并形成根據本發(fā)明的核酸分子和C5a的復合物 來實現。核酸分子與C5a的這樣的復合物不能刺激通常被C5a(即不以與本發(fā)明的核酸分 子的復合物形式存在的C5a)刺激的受體。因此，根據本發(fā)明的核酸分子對受體功能的抑制 不依賴可被C5a刺激的各自受體，而是因根據本發(fā)明的核酸分子阻止C5a對受體的刺激而 引起。
[0273] 測定根據本發(fā)明的核酸分子的抑制常數的可能性是實施例5中描述的方法的使 用，其確認了上述發(fā)現：根據本發(fā)明的核酸顯示允許在治療性治療方案中使用所述核酸的 有利的抑制常數。為了表達單個核酸分子對靶（其在本發(fā)明中為C5a)與各自受體的相互 作用的抑制作用的強度的適當量度為所謂的半最大抑制濃度（縮寫IC 5(I)，所述半最大抑制 濃度本身以及用于其測定的方法對于本領域技術人員來說是已知的。
[0274] 優(yōu)選地，根據本發(fā)明的核酸分子顯示的IC5(I值低于1 μ M。約1 μ Μ的IC5(I值被認為 是通過核酸分子產生的靶功能的非特異性抑制的特征。如將由本領域技術人員認識到的， 一組化合物例如根據本發(fā)明的核酸分子的IC 5(I值在一定范圍之內。上述約1 μ Μ的IC5(I是 IC5Q值的優(yōu)選上限。靶結合核酸分子的IC5(I的下限可小至約10皮摩或可更高。在本發(fā)明 范圍內，結合C5a的單個核酸IC 5(I值優(yōu)選在該范圍內。優(yōu)選范圍可通過選擇該范圍內的任 意第一數值和該范圍內的任意第二數值來界定。優(yōu)選較高的IC 5(I值為250nM和100nM，優(yōu) 選較低的1(：5(|值為501^、101^、11^、100?1和10?1。更優(yōu)選較高的1(： 5(|值為51^，更優(yōu)選較 低的IC5Q值為ΙΟΟρΜ。
[0275] 根據本發(fā)明的核酸分子可具有任意長度，只要它們仍然能夠結合靶分子。在本領 域應認識到，存在根據本發(fā)明的核酸的優(yōu)選長度。通常地，長度為15至120個核苷酸。本 領域技術人員將認識到，15與120之間的任意整數為根據本發(fā)明的核酸的可能長度。根據 本發(fā)明的核酸的長度的更優(yōu)選范圍為約20至100個核苷酸，約20至80個核苷酸，約20至 60個核苷酸，約38至44個核苷酸以及約40個核苷酸的長度。
[0276] 在本發(fā)明范圍內，本發(fā)明的核酸分子包含部分，所述部分優(yōu)選為1?分子量部分和/ 或優(yōu)選允許在除其它以外，在動物體優(yōu)選人體中的停留時間方面修飾核酸分子的特征。這 樣的修飾的特別優(yōu)選實施方案為根據本發(fā)明的核酸的PEG化和HES化。如本文中所用，PEG 代表聚（乙二醇），HES代表羥乙基淀粉。如本文中優(yōu)選地使用的，PEG化為根據本發(fā)明的 核酸分子的修飾，其中這樣的修飾由連接于根據本發(fā)明的核酸分子的PEG部分組成。如本 文中優(yōu)選地使用的，HES化為根據本發(fā)明的核酸分子的修飾，其中這樣的修飾由連接于根據 本發(fā)明的核酸分子的HES部分組成。這些修飾以及使用這樣的修飾來修飾核酸分子的方法 描述于歐洲專利申請EP 1 306 382中，將其公開內容通過引用整體并入本文。
[0277] 在PEG為這樣的高分子量部分的情況下，分子量優(yōu)選為約20, 000至約120, OOODa， 更優(yōu)選約30, 000至約80, OOODa，最優(yōu)選約40, OOODa。在HES為這樣的高分子量部分的情 況下，分子量優(yōu)選為約50kDa至約1000kDa，更優(yōu)選約100kDa至約700kDa和最優(yōu)選200kDa 至500kDa。HES顯示0. 1至1. 5,更優(yōu)選地1至1. 5的摩爾取代度，并且顯示表達為C2/C6 比率的約0. 1至15,優(yōu)選約3至10的置換等級。HES修飾的方法例如描述于德國專利申請 DE 1 2004 006 249. 8中，將其公開內容通過引用整體并入本文。
[0278] 原則上可在其任意位置上對本發(fā)明的核酸分子進行修飾。優(yōu)選地對核酸分子的 5' -末端核苷酸、3' -末端核苷酸和/或5'核苷酸與3'核苷酸之間的任意核苷酸進行這 樣的修飾。
[0279] 可直接或間接地，優(yōu)選通過接頭間接地將修飾、優(yōu)選PEG和/或HES的部分連接于 本發(fā)明的核酸分子。也在本發(fā)明范圍內的是，根據本發(fā)明的核酸分子包含一個或多個修飾， 優(yōu)選一個或多個PEG和/或HES部分。在實施方案中，單個接頭分子將超過一個PEG部分 或HES部分連接于根據本發(fā)明的核酸分子。與本發(fā)明相關地使用的接頭可本身為線性的或 分枝的。該類型的接頭對于本領域技術人員來說是已知的，并進一步描述于國際專利申請 W02005/074993 和 W02003/035665 中。
[0280] 在優(yōu)選實施方案中，接頭為生物可降解接頭。生物可降解接頭允許在除其它以外 在動物體，優(yōu)選人體中的停留時間方面因修飾從根據本發(fā)明的核酸分子的釋放而修飾根 據本發(fā)明的核酸分子的特征。生物可降解接頭的使用可允許更好地控制根據本發(fā)明的核 酸分子的停留時間。這樣的生物可降解接頭的優(yōu)選實施方案為但不限于在國際專利申請 W02006/052790、W02008/034122、W02004/092191 和 W02005/099768 中所描述的生物可降解 接頭。
[0281] 在本發(fā)明范圍內，修飾或修飾基團為生物可降解修飾，其中可直接或間接地，優(yōu) 選通過接頭將生物可降解修飾連接于本發(fā)明的核酸分子。生物可降解修飾允許在除其它 以外在動物體，優(yōu)選人體中的停留時間方面因修飾從根據本發(fā)明的核酸分子的釋放或降 解修飾根據本發(fā)明的核酸分子的特征。生物可降解修飾的使用可允許更好地控制根據本 發(fā)明的核酸分子的停留時間。這樣的生物可降解修飾的優(yōu)選實施方案為但不限于在國際 專利申請 W02002/065963、W02003/070823、W02004/113394 和 W02000/41647 中，優(yōu)選地在 W02000/41647,第18頁，第4至24行中所描述的生物可降解修飾。
[0282] 除了上述修飾外，可將其它修飾用于修飾根據本發(fā)明的核酸分子的特征，其中這 樣的其它修飾可選自蛋白質、脂質例如膽固醇和糖鏈例如淀粉酶、葡聚糖等。
[0283] 不希望受任何理論束縛，通過用高分子量部分例如聚合物，更具體地一個或數個 本文中公開的聚合物修飾根據本發(fā)明的核酸分子（優(yōu)選所述聚合物是生理上可接受的）， 改變本發(fā)明的這樣修飾的核酸分子從對其施用了本發(fā)明的修飾核酸分子的動物體或人體 排出的排泄動力學。更具體地，由于本發(fā)明的這樣修飾的核酸分子的增加的分子量以及由 于本發(fā)明的核酸分子未經歷代謝（特別地當以L型存在時，即為L-核酸分子時），從動物 體，優(yōu)選從哺乳動物體，更優(yōu)選從人體的排泄減少。由于排泄通常通過腎發(fā)生，因此本發(fā)明 人假定這樣修飾的核酸分子的腎小球濾過率相較于不具有該類型的高分子量修飾的核酸 分子顯著減小，這導致修飾的核酸分子在動物體內的停留時間增加。與其相關，特別值得注 意的是，盡管存在這樣的高分子量修飾，但根據本發(fā)明的核酸分子的特異性不以有害方式 受到影響。在這個范圍內，根據本發(fā)明的核酸分子具有除其它以外令人驚訝的特征-所述 特征通常不能從藥學活性化合物預期-即提供持續(xù)釋放的藥物制劑不是提供根據本發(fā)明 的核酸分子的持續(xù)釋放所必需的。相反地，包含高分子量部分的以其修飾形式存在的根據 本發(fā)明的核酸分子因其修飾而本身可已被用作持續(xù)釋放制劑，如其已表現為如同從持續(xù)釋 放制劑釋放一樣。在這個范圍內，本文中公開的根據本發(fā)明的核酸分子的修飾和這樣修飾 的根據本發(fā)明的核酸分子以及包含所述修飾核酸分子的任何組合物可提供其獨特的，優(yōu)選 受控的藥代動力學及生物分布。這還包括在動物和人體的循環(huán)中的停留時間，以及在這樣 的動物和人中至組織的分布。這樣的修飾進一步描述于專利申請W02003/035665中。
[0284] 然而，也在本發(fā)明范圍內的是，根據本發(fā)明的核酸分子不包含任何修飾，特別地無 高分子量修飾例如PEG或HES。當根據本發(fā)明的核酸分子顯示至身體的任何靶器官或組織 的優(yōu)先分布時或當期望在施用后從身體快速清除根據本發(fā)明的核酸分子時，這樣的實施方 案是特別優(yōu)選地。具有至身體的任何靶器官或組織的優(yōu)先分布特征的本文中公開的根據本 發(fā)明的核酸分子會允許在靶組織中建立有效的局部濃度，同時使核酸分子的全身性濃度保 持低水平。這會允許低劑量的使用，這不僅從經濟的觀點來看是有有益的，而且還減少其它 組織對核酸分子的不必要暴露，從而減小副作用的潛在風險。除其它以外在使用根據本發(fā) 明的核酸分子或包含所述核酸分子的藥劑的體內成像或特定的治療劑量要求的情況下可 能期望根據本發(fā)明的核酸分子在施用后從身體的快速清除。
[0285] 在本文中也稱為根據本發(fā)明的核酸的本發(fā)明的核酸和/或根據本發(fā)明的拮抗劑 可用于產生或制造藥劑。這樣的根據本發(fā)明的藥劑或藥物組合物包含本發(fā)明的核酸的至少 一種（任選地與其它藥物活性化合物一起），其中本發(fā)明的核酸優(yōu)選本身用作藥物活性化 合物。這樣的藥劑在優(yōu)選實施方案中包含至少藥學上可接受的載體。這樣的載體可以是例 如水、緩沖液、PBS、葡萄糖溶液，優(yōu)選地5 %的葡萄糖鹽平衡溶液、淀粉、糖、明膠或任何其它 可接受的載體物質。這樣的載體對于本領域技術人員來說通常是已知的。本領域技術人員 將認識到，本發(fā)明的藥劑的或與其相關的任何實施方案、用途和方面也適用于本發(fā)明的藥 物組合物并且反之亦然。
[0286] 利用根據本發(fā)明的或根據本發(fā)明制備的核酸、藥物組合物和藥劑治療和/或預防 的適應癥、疾病和障礙因 C5a直接或間接牽涉于各自的發(fā)病機制而引起。
[0287] C5a在炎癥部位的局部釋放導致強效的促炎癥刺激。因此，C5a的中和在許多急性 或慢性病況例如一般免疫復合物相關疾?。℉eller等人，1999);神經變性和炎癥，例如阿 爾茨海默?。˙onifati&Kishore，2007)中可以是有益的，其中補體C5a受體拮抗劑PMX205 改善了行為參數和減少病理學標志物例如纖維狀沉積物和活化的神經膠質（Fonseca等 人2009)。牽涉C5a的其它炎性疾病為系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Jacob等人2010a Jacob等人 2010b)、哮喘（Kohl，2001);外傷的繼發(fā)性損傷（Yao等人1998);膿毒性休克（Huber-Lang 等人，2001);全身性炎癥反應綜合征（SIRS);多器官衰竭（M0F);急性呼吸窘迫綜合征 (ARDS);炎性腸?。↖BD) (Woodruff等人，2003);免疫復合物介導的腎?。╓ang，2006)，例 如系統(tǒng)性紅斑狼瘡的并發(fā)癥（Manderson等人，2004);感染及其后果（例如血管滲漏或骨 丟失例如牙周炎繼發(fā)性骨丟失（Breivik等人2011));重度燒傷（Piccolo等人，1999); 器官例如心臟、脾、膀胱、胰腺、胃、肺、肝、腎、四肢、腦、骨骼肌或腸的再灌注損傷（Riley等 人，2000) (Gueler 等人 2008 ;Khan 等人 2011 ;van der Pals 等人 2010 ;Zheng 等人 2008)， 所述器官的再灌注損傷可導致，除其它以外，遲發(fā)性移植物功能（Lewis等人，2008)或器官 的纖維化和/或重塑，從而例如在心臟、腦或肺梗塞后導致繼發(fā)性損傷；銀屑?。˙ergh等 人，1993);心肌炎；多發(fā)性硬化（Muller-Ladner等人，1996);陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥 (PNH)、溶血、血栓栓塞（Hillmern等人2007)和類風濕關節(jié)炎（RA) (Woodruff等人，2002)、 腎細胞癌的切除和促進骨破壞的破骨細胞的活化，例如導致骨性關節(jié)炎或延期愈合。在年 齡相關性黃斑變性中，已發(fā)現補體C5a的量在玻璃疣中升高，已顯示補體C5a導致增加的 VEGF表達和促進脈絡膜新血管生成，這可導致導致視力受損和喪失（Nozaki等人，2006)。
[0288] 還已顯示補體系統(tǒng)的活化在小鼠模型中增加對發(fā)生腦型瘧疾的易感性。使用來自 利用這些分子免疫的小鼠的血清阻斷C5a或C5a受體賦予對腦型瘧疾的抗性。因此，阻斷 C5 - C5a軸在預防人的瘧疾，尤其腦型瘧疾的發(fā)生中可以是有益的（Patel等人2008)。
[0289] 最近已綜述了牽涉補體的自身免疫炎性疾?。–hen等人2010)。關于可能的和已 進行的補體祀向療法的專家評議見于Nature Biotechnology (Ricklin&Lambris, 2007)。最 新資料公布于 2011 年的 Molecular Medicine (Ehrnthaller 等人 2011)中。
[0290] 當然，因為根據本發(fā)明的C5a結合性核酸與人C5a相互作用或與其結合，所以本領 域技術人員將通常理解，根據本發(fā)明的C5a結合性核酸可容易地用于治療、預防和/或診斷 本文中描述的人和動物的任何疾病。與此有關地，應認識到根據本發(fā)明的核酸分子可用于 治療和預防本文中描述的任何疾病、障礙或病況，不論這樣的疾病、障礙和病況深層的作用 模式如何。
[0291] 在下文中，并且不希望受任何理論束縛，提供了將根據本發(fā)明的核酸分子與各種 疾病、障礙和病況結合使用的合理性，從而使得要求保護的根據本發(fā)明的核酸分子的治療、 預防和診斷適用性是合理的。為了避免任何不必要的重復，應當認識到由于C5a - C5受體 軸的參與（如與其相關地概述的），所述軸可通過根據本發(fā)明的核酸分子來尋址，以便實現 所要求保護的治療、預防和診斷作用。還應當認識到，可將患者的疾病、障礙和病況的特性 和結合其描述的治療方案的任何細節(jié)經歷本申請的優(yōu)選實施方案。
[0292] 髓源抑制（縮寫MDS)細胞最初在早于30年前在癌癥患者中被觀察到，它們作為 抗腫瘤免疫的破壞者的作用僅在現在才被意識到。正常髓樣細胞的異質群體被捕獲在分化 的中間期，MDS細胞在實際上所有癌癥患者的血液、淋巴結中以及在腫瘤部位積累。在健康 個體中，這些細胞分化成巨噬細胞、樹突細胞和嗜中性粒細胞，但腫瘤分泌一系列破壞免疫 祖細胞的分化的因子（Ostrand-Rosenberg, 2008)。如來自健康小鼠的外周血和脾的分離的 MSD細胞所顯示的，MDS細胞在它們的表面上表達C5a受體至與它們的成熟對應物粒細胞和 單核細胞表達的C5a受體相似的程度-豐富的表達。同樣地在荷瘤小鼠中，MDS細胞表達 C5a受體，但在腫瘤相關MSD細胞的表面上的表達水平比在外周血和脾中的MSD細胞上的 低。原因是C5a受體在腫瘤相關細胞中被內化，如由Markiewski等人顯示的，C5a受體拮 抗劑可阻斷MSD細胞表面上的C5a受體的功能并且導致受損的腫瘤生長（Markiewski等人 2008)。C5a還用作天然殺傷細胞（NK細胞）功能的抑制劑，從而提供補體對具有某些免疫 疾病的患者的腫瘤監(jiān)督和NK功能障礙的負面影響的解釋（Li等人2012 ;Min等人2012)。
[0293] 因此，對于其的治療和/或預防可使用根據本發(fā)明的藥劑的疾病和/或障礙和/ 或病況包括但不限于腫瘤相關疾病和/或障礙和/或病況。
[0294] 在優(yōu)選實施方案中，腫瘤或腫塊是通過細胞的異常生長形成的腫脹或損傷（稱為 贅生物）的名稱。腫瘤可以是良性腫瘤、惡變前的腫瘤或惡性腫瘤。此外，腫瘤可以是實體 瘤，優(yōu)選癌、肉瘤、aoteoma、纖維肉瘤和軟骨瘤（chondrosoma)。
[0295] 可特別地通過根據本發(fā)明的藥劑或核酸分子來治療的腫瘤優(yōu)選為選自內分泌系 統(tǒng)、眼、胃腸道、生殖系統(tǒng)、造血系統(tǒng)（包括混合和胚胎腫瘤）、乳腺、神經系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、骨 骼、皮膚、軟組織、尿流出系統(tǒng)的腫瘤的那些腫瘤。
[0296] 優(yōu)選地，這些腫瘤選自乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、骨肉瘤、膠質母細胞瘤、黑色素 瘤、小細胞肺癌和結直腸癌。
[0297] 在本發(fā)明范圍內，分別包含根據本發(fā)明的核酸的藥劑和藥物組合物可以以這樣的 方式用于治療。
[0298] 在其它實施方案中，藥劑包含用于治療腫瘤的其它藥物活性劑。這樣的其它藥物 活性化合物，除其它以外，為（但不限于其）已知為抗腫瘤活性物質如烷化劑、抗代謝劑、抗 血管生成劑、有絲分裂抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、細胞信號轉導的抑制劑、激素、抗體、免 疫綴合物和融合蛋白的那些藥物活性化合物。
[0299] 其它藥物活性化合物，除其它以外，為（但不限于其）已知為博來霉素、胸苷酸合 酶抑制劑（例如雷替曲塞和培美曲塞）、酶例如L-天冬酰胺酶，米替福新和阿那格雷，蛋白 酶體的抑制劑例如硼替佐米。
[0300] 此外，根據本發(fā)明的藥劑可用于治療和/或預防慢性阻塞性肺疾病。
[0301] 慢性阻塞性肺疾?。s寫C0PD)是特征在于肺部氣流的持續(xù)性阻斷的肺疾病。其 為診斷不足的威脅生命的肺疾病，該疾病干擾正常呼吸并且不可完全逆轉。coro包括少數 肺?。鹤畛Ｒ姷氖锹灾夤苎缀头螝饽[。許多患有coro的人同時患有這兩種疾病。肺氣 腫是對氣道頂端的氣囊的損傷，這使得身體難以吸入其需要的氧氣。在慢性支氣管炎過程 中，氣道被刺激、發(fā)紅，并且產生許多粘液。氣道壁腫脹并且部分阻斷氣體通過。
[0302] 嗜中性粒細胞被吸引朝向C5a梯度，在炎癥部位上釋放超氧化物自由基以殺死病 原體和釋放β葡萄糖苷酸酶以水解復雜葡萄糖醛酸苷綴合物。然而，如果嗜中性粒細胞被 招募至無病原體炎癥部位（例如，在梗塞（infaction)、中風或器官移植后的再灌注部位或 在自身免疫性疾病、阿爾茨海默病和下文所列的其它疾病的情況下），則這些有價值的防御 機制可損害身體。
[0303] 進而，過度高的C5a濃度-特別地如果它們不僅局部升高（如它們在膿毒癥過程 中所表現的）_導致嗜中性粒細胞的全身性活化（導致器官損害）和隨后的通過嗜中性粒 細胞的細胞表面上的減少的C5a受體表達而耗盡和失活。這使得患者更加容易受到保持其 體內的病原體的傷害（Huber-Lang等人2002)。
[0304] 對于C5a介導的對其受體（⑶88)的作用也是抑制性的（如通過使用分化的BAF-3 細胞的趨化測定顯示的）C5a結合性核酸因而具有阻斷上文命名的C5a信號轉導后果的潛 能，并且可證明在許多牽涉異常C5a信號轉導的疾病和病況中作為藥劑的部分是有益的。 這些病況之一是多種微生物膿毒癥。存在大量的收集C5a信號轉導在膿毒癥中的有害作用 的證據的文獻（Ward 2010b)。根據本發(fā)明的核酸經發(fā)現在盲腸結扎穿孔（CLP)研究中改善 小鼠的存活和器官功能參數。CLP是已良好確立的多種微生物膿毒癥的嚙齒類動物模型。 最近在野生型和C5缺陷型小鼠中研究了補體C5在通過盲腸結扎穿孔術誘發(fā)的膿毒癥中的 作用（Flierl等人2008)。C5-/-小鼠相較于WT小鼠不具有生存優(yōu)勢，并且當與野生型小 鼠相比較時顯示400倍的血液傳播細菌的增加。這些作用與C5(-/_)小鼠不能裝配最終的 膜攻擊復合物（MAC)相關。本發(fā)明人得出，在膿毒癥過程中，C5a或其受體（而非C5)的選 擇性阻斷似乎是更有前景的策略，因為C5a阻斷仍然允許MAC形成，同時C5a的有害作用被 阻止。一致地，已顯示C5a受體⑶88和C5L2的遺傳缺失、⑶88的藥理學阻斷或C5a的藥 理學中和在盲腸結扎穿孔術（CLP)誘發(fā)的膿毒癥中是具有保護性的（Czermak等人1999 ; Rittirsch等人2008)。使用人全血的腦膜炎球菌膿毒癥的轉變的體外模型確認選擇性C5a 抑制（與C5切割的阻斷相反）阻止?jié)撛谟泻Φ陌准毎罨话毦宄⊿prong等 人2003)。C5a的抑制通過限制全身性炎癥、凝血和其它致病機制在實驗性膿毒癥中阻止多 器官衰竭（Huber-Lang 等人 2001 ;Huber_Lang 等人 2002 ;Laudes 等人 2002 ;Rittirsch 等 人2008;Ward 2010a)。根據本發(fā)明的核酸，盡管結合C5,但不阻斷C5切割成C5a和MAC形 成所需的C5b。相反地，本發(fā)明的核酸占據蛋白C5,這也增加了終端血漿半衰期，并且當C5a 被例如C5轉化酶釋放時選擇性阻斷C5a的作用。在膿毒癥模型中，已顯示根據本發(fā)明的核 酸限制炎癥，阻止多器官衰竭和水腫形成，以及改善存活。
[0305] 膿毒癥患者通常因急性肺損傷（ALI)和急性呼吸窘迫綜合征（ARDS)而需要機械 通氣。ALI/ARDS也可通過肺炎的社區(qū)獲得性感染或醫(yī)院獲得性感染從肺的直接感染發(fā)展而 來。存在C5a在ALI/ARDS中的致病作用的大量證據。C5a誘導的組織因子表達促成ALI/ ARDS患者的肺泡內血纖蛋白沉積（Kambas等人2008)。實驗性ALI在C5-/-小鼠中減弱， 肺中C5a的中和或C5aR的沉默抑制炎癥反應并阻止血管滲漏（Bosmann&Ward 2012)。
[0306] 此外，可使用根據本發(fā)明的藥劑對于其進行治療和/或預防的其它疾病和/或 障礙和/或病況包括但不限于自身免疫性疾病例如類風濕關節(jié)炎（縮寫RA)、強直性脊椎 炎（縮寫AS)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（縮寫SLE)、多發(fā)性硬化（縮寫MS)、銀屑病、斑禿、溫和冷 自體免疫溶血性貧血（縮寫AIHA)、非典型溶血性尿毒癥、惡性貧血、急性炎性疾病、自身 免疫性腎上腺炎、慢性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經?。s寫CIDP)、Churg-Strauss綜合 征、Cogan綜合征、CREST綜合征、尋常型天皰瘡和落葉型天皰瘡、大皰性類天皰瘡、風濕性 多肌痛、多肌炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變、胰腺炎、腹膜炎、牛皮癬關節(jié)炎、風濕熱、肉瘤樣病、 Sjdrgensen綜合征、硬皮病、乳糜瀉、僵人綜合征、高安氏動脈炎、短暫麩質不耐受性、 自身免疫性葡萄膜炎、白癜風、多軟骨炎、皰疹樣皮炎（縮寫dh)或杜林氏病、纖維肌痛、 古德帕斯丘綜合征、格-巴二氏綜合征、橋本甲狀腺炎、自身免疫性肝炎、炎性腸?。s寫 IBD)、克羅恩病、潰瘍性結腸炎、重癥肌無力、免疫復合物病、腎小球腎炎、結節(jié)性多發(fā)性動 脈炎、抗磷脂綜合征、多腺性自身免疫性綜合征、特發(fā)性肺纖維化、特發(fā)性血小板減少性紫 癜（縮寫ITP)、蕁麻疹、自身免疫性不育、幼年型類風濕關節(jié)炎、肉瘤樣病、自身免疫性心肌 病、Lambert-Eaton綜合征、硬化性苔癬、萊姆病、格雷夫斯病、白塞病、美尼爾氏病、反應性 關節(jié)炎（Reiter's綜合征）；病毒例如HIV、HBV、HCV、CMV或細胞內寄生物例如利什曼原蟲 屬、立克次體屬、衣原體屬、考克斯體屬、瘧原蟲屬、布魯桿菌屬、分枝桿菌屬、利斯特菌屬、 弓形蟲屬和錐蟲屬的感染；外傷繼發(fā)性損傷；局部炎癥、休克、過敏性休克、燒傷、膿毒性休 克、失血性休克、全身性炎癥反應綜合征（縮寫SIRS)，多器官衰竭（縮寫M0F)，哮喘和 過敏癥、血管炎例如顳動脈炎、脈管炎、血管滲漏和動脈粥樣硬化；中樞神經系統(tǒng)的急性損 傷、心肌炎、皮肌炎、牙齦炎、急性呼吸功能不全、慢性阻塞性肺疾病、中風、心肌梗塞、再灌 注損傷、神經認知功能障礙、燒傷、眼的炎性疾病例如葡萄膜炎、年齡相關性黃斑變性（縮 寫AMD)、糖尿病視網膜病變（縮寫DR)、糖尿病黃斑水腫（縮寫DME)、眼天皰瘡、角結膜 炎、Stevens-Johnson綜合征和Graves眼??；全身性疾病的局部表現、脈管系統(tǒng)炎癥性疾 病、中樞神經系統(tǒng)的急性損傷、1型和2型糖尿病、糖尿病的表現、SLE和眼、腦、脈管系統(tǒng)、 心臟、肺、腎、肝、胃腸道、脾、皮膚、骨、淋巴系統(tǒng)、血液或其它器官系統(tǒng)的風濕性疾病，用于 冠狀動脈旁路搭橋術（縮寫CABG)、非體外循環(huán)冠狀動脈旁路搭橋術（ο---pump coronary artery bypass graft)(縮寫OPCABG)、微創(chuàng)直接冠狀動脈旁路搭橋術（縮寫MIDCAB)、經 皮腔內冠狀動脈成形術（縮寫PTCA)、溶栓、器官移植和血管夾手術的預防和/或支持和/ 或術后治療；用于移植器官或待移植的器官的器官損傷的預防或用于移植器官例如肝、腎、 腸、肺、心臟、皮膚、四肢、角質層、郎罕氏胰島、骨髓、血管和胰腺的移植排斥的治療；胎兒排 斥。
[0307] 可如下將可使用核酸對其進行治療和/或預防的各種疾病和障礙歸類：
[0308] 1.自身免疫性/炎癥性疾病
[0309] 1. 1全身性自身免疫性和/或炎性疾病，包括過敏癥、膿毒性休克、外傷的繼發(fā)性 損傷、溫和冷自身免疫性溶血性貧血（縮寫AIHA)、全身性炎癥反應綜合征（縮寫SIRS)、失 血性休克、1型糖尿病、2型糖尿病、糖尿病的表現、彌散性硬皮病、牙周炎及其相關骨丟失、 多軟骨炎、多腺性自身免疫性綜合征、類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（縮寫SLE)及其表 現、反應性關節(jié)炎（也稱為Reiter's綜合征）。
[0310] 1.2胃腸道的自身免疫性和/或炎性疾病包括克羅恩病、潰瘍性結腸炎、 乳糜瀉、短暫麩質不耐受性、炎性腸?。s寫IBD)、胰腺炎、胃腸道變應性超敏反應 (gastrointestinal allergic hypersensitivity)、壞死性小腸結腸炎。
[0311] 1. 3皮膚的自身免疫性和/或炎性疾病，包括銀屑病、蕁麻疹、皮肌炎、尋常型天皰 瘡、落葉型天皰瘡、大皰性類天皰瘡、硬斑病/線形硬皮病、白癜風、皰疹樣皮炎（縮寫DH) 或杜林氏病、硬化性苔癬。
[0312] 1. 4脈管系統(tǒng)的自身免疫性和/或炎性疾病，包括血管炎病（優(yōu)選顳動脈炎）、脈 管炎、過敏性紫癜（Henoch Schdnlein purpura)、抗嗜中性粒細胞胞質抗體（ANCA)相關 脈管炎、血管滲漏、風濕性多肌痛、動脈粥樣硬化、Churg-Strauss綜合征、高安氏動脈炎、古 德帕斯丘綜合征（=抗腎小球基膜病；最影響腎小球和肺）、腎小球腎炎、結節(jié)性多發(fā)性動 脈炎、白塞病
[0313] 1. 5神經系統(tǒng)的自身免疫性和/或炎性疾病，包括多發(fā)性硬化（縮寫MS)、慢性炎 癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經病（縮寫CIDP)、神經認知功能障礙、僵人綜合征、格-巴二氏綜合 征、重癥肌無力、Lambert-Eaton綜合征、視神經脊髓炎（Devic綜合征）。
[0314] 1.6骨骼肌自身免疫性和/或炎性疾病，包括類風濕性關節(jié)炎、眼、腦、肺、腎、心 臟、肝、胃腸道、脾、皮膚、骨、淋巴系統(tǒng)、血液或其它器官的風濕性疾病、強直性脊椎炎（縮 寫AS)、肉瘤樣病、牙周炎和相關骨丟失、風濕性多肌痛、多肌炎、牛皮癬關節(jié)炎、風濕熱、多 軟骨炎、纖維肌痛、幼年型類風濕關節(jié)炎、萊姆病、反應性關節(jié)炎（也稱為Reiter's綜合 征）。
[0315] 1. 7其它自身免疫性和/或炎性疾病，包括Cogan綜合征、自身免疫性腎上腺炎、 免疫復合物障礙、Μ?η--Γθ' s病、局部炎癥、斑禿、急性炎性疾病、原發(fā)性膽汁性肝硬變、 Sjdrgef s綜合征、硬皮病、彌散性硬皮病、crest綜合征、硬斑病/線形硬皮病、自身免 疫性葡萄膜炎、橋本甲狀腺炎（自身免疫性甲狀腺破壞）、格雷夫斯病、自身免疫性肝炎、非 酒精性脂肪性肝炎、腎小球腎炎、腹膜炎、抗磷脂綜合征、特發(fā)性肺纖維化、腎臟纖維化、肝 纖維化、自身免疫性不育、胎兒排斥或流產以及移植物抗宿主病。
[0316] 2.眼的疾病，包括葡萄膜炎、結膜炎、年齡相關性黃斑變性（縮寫AMD)，糖尿病視 網膜病變（縮寫DR)、糖尿病黃斑水腫（縮寫DME)，視網膜血管閉塞、青光眼、白內障、自身 免疫性視網膜和眼內炎性疾病、眼天皰瘡、角結膜炎、Stevens-Johnson綜合征和Graves眼 病。
[0317] 3.再灌注損傷和移植物排斥，包括中風、心肌梗塞、再灌注損傷、移植后血栓性微 血管病或對移植的器官例如肝（Arumugam等人2004)、腎（Arumugam等人2003)、腸、肺、心 臟、皮膚、四肢、角質層、郎罕氏胰島（Tokodai等人2010)、骨髓、血管和胰腺的器官損害、器 官或骨髓移植后腎損傷。
[0318] 4.移植物排斥的預防，所述移植物排斥包括移植的器官例如肝、腎、腸、肺、心臟、 皮膚、四肢、角質層、郎罕氏胰島、骨髓、血管和胰腺的移植物排斥。
[0319] 5.心血管疾病，包括動脈粥樣硬化、心肌炎、心肌梗塞、中風、肺動脈高壓（PAH)、 腹主動脈瘤、脈管系統(tǒng)的炎癥性疾病、血管炎病、優(yōu)選地顳動脈炎、脈管炎，血管滲漏、糖尿 病的表現、驚厥前期，自身免疫性心肌病，靜脈宿主病、致心律失常型右心室發(fā)育不全/心 肌病（arrythmogenic right ventrivular dysplasia/cardiomyopathy)，用于冠狀動脈旁 路搭橋術（縮寫CABG)的預防和/或支持和/或術后治療。
[0320] 6.代謝功能障礙，包括胰島素抗性、葡糖耐受不良、脂肪炎癥和食物誘導的肥胖癥 的心血管功能障礙。
[0321] 7.呼吸性疾病，包括哮喘、急性呼吸功能不全、急性肺損傷、輸液相關肺損傷、成人 呼吸性窘迫綜合征、慢性阻塞性肺疾病、呼吸機所致肺損傷、肺炎及其并發(fā)癥。
[0322] 8.炎性疾病，包括眼的炎性疾病、自身免疫性葡萄膜炎（Copland等人2010)、結膜 炎、春季結膜炎、全身性疾病的局部表現。
[0323] 9.急性反應，包括外傷和骨折的繼發(fā)性損傷、休克、燒傷、過敏性休克、失血性休 克、多器官衰竭（縮寫M0F)、中樞神經系統(tǒng)的急性損傷、中樞神經系統(tǒng)的急性損傷、因活化 凝血系統(tǒng)（例如在器官或胰島移植后）產生過量C5a而引起的急性損傷，
[0324] 10.疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、神經性疼痛、嗎啡耐受和停藥誘發(fā)的痛覺過敏。
[0325] 11.神經性和神經變性障礙，包括神經病、肌萎縮側索硬化（ALS)、阿爾茨海默病 和帕金森?。‵arkas等人1998)。
[0326] 12.感染性疾病，包括：
[0327] 12. 1細菌感染，優(yōu)選腦膜炎、萊姆病、反應性關節(jié)炎（也稱為Reiter's綜合征）， 泌尿道和腎感染、膿毒癥及其并發(fā)癥例如器官衰竭、心功能障礙、全身性灌注不足、酸中毒、 成人呼吸性窘迫綜合征、細胞內病原體引起的感染（Kl 〇s等人2009)，
[0328] 12. 2病毒感染，優(yōu)選地HIV、HBV、HCV、CMV感染、病毒性腦膜炎
[0329] 12. 3細胞內寄生物、優(yōu)選地利什曼原蟲屬、立克次體屬、衣原體屬、考克斯體屬、瘧 原蟲屬、尤其地腦型瘧疾、布魯桿菌屬、分枝桿菌屬、利斯特菌屬、弓形蟲屬和錐蟲屬。
[0330] 13.血液性疾病，包括與凝血和血纖蛋白溶解系統(tǒng)的活化相關的疾病彌漫性血管 內凝血（DIC)和/或血栓形成、惡性貧血、溫和冷自身免疫性溶血性貧血（縮寫AIHA)、抗磷 脂綜合征及其相關并發(fā)癥、動脈和靜脈血栓形成、妊娠并發(fā)癥例如復發(fā)流產和胎兒死亡、先 兆子癇、胎盤功能不全、胎兒生長受限、頸部再塑形和早產、特發(fā)性血小板減少性紫癜（縮 寫ITP)、非典型溶血尿毒癥綜合征（aHUS)、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH)和過敏性輸 血反應。
[0331] 14.與在過程（包括血液透析、血漿分離置換法（apheresis)、關節(jié)炎關節(jié)的粘度 補充、心肺轉流術、人工血管移植和心血管裝置的使用）中發(fā)生的補體和凝血級聯的由生 物材料引起的活化相關的臨床并發(fā)癥。
[0332] 根據本發(fā)明的核酸還可以以手術中方式用于避免患者免疫系統(tǒng)的有害作用， 更優(yōu)選用于冠狀動脈旁路搭橋術（縮寫CABG)、非體外循環(huán)冠狀動脈旁路搭橋術（縮寫 0PCABG)、微創(chuàng)直接冠狀動脈旁路搭橋術（縮寫MIDCAB)、經皮腔內冠狀動脈成形術（縮寫 PTCA)、溶栓、器官移植、腦和脊髓手術、重建外科手術和血管夾手術的預防和/或支持和/ 或術后治療，在利用人工通氣或通氣輔助設備以避免肺呼吸機所致肺損傷或繼發(fā)性損害例 如血管滲漏和/或肺氣腫的任何治療過程中使用，用于移植器官或待移植器官的器官損害 的預防，或針對移植器官例如肝、腎、腸、肺、心臟、皮膚、四肢、角質層、郎罕氏胰島、骨髓、血 管和胰腺的移植排斥和再灌注損傷的治療。
[0333] 在本發(fā)明范圍內，可以以這樣的方式將分別包含根據本發(fā)明的核酸的藥劑和藥物 組合物用于治療。
[0334] 在其它實施方案中，藥劑包含其它藥物活性劑。這樣的其它藥物活性化合物，除其 它以外，為（但不限于其）已知抑制免疫系統(tǒng)的那些藥物活性化合物，例如神經鈣蛋白抑 制劑，環(huán)孢菌素 A、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、他羅利姆、雷帕霉素、苯丁酸氮芥、來氟米特、嗎替 麥考酚酯、布喹那、咪唑立賓、沙立度胺或脫氧精胍菌素。其它藥物活性化合物在其它實施 方案中還可以是減少組胺產量的那些化合物之一，例如敏克靜、氯馬斯汀、二甲茚定、巴米 品、酮替芬、西替利臻、左旋西替利嗪（lovecetirizin)、地氯雷他定（cesloratadin)、氮卓 斯汀、咪唑斯汀、左卡巴斯汀、特非那定、非索非那定或依巴斯汀。這樣的化合物還可以是 但不限于類固醇，優(yōu)選選自皮質類固醇如潑尼松、甲潑尼龍、氫化可的松、地塞米松、曲安西 龍、倍他米松、泡騰劑或布地奈德。此外，這樣的化合物可以是一種或數種抗生素例如但不 限于氨基糖苷類、β-內酰胺抗生素類、旋轉酶抑制劑、糖肽類抗生素、林肯胺、大環(huán)內酯抗 生素類、硝基咪唑衍生物、多肽抗生素、磺胺、甲氧芐啶和四環(huán)素。此外，可將更特異的抗炎 或抗血管生成生物制品組合使用：貝伐單抗、雷珠單抗、IL-10、厄利珠單抗（erlizumab)、 tolermab、利妥昔單抗、gomiliximab、巴利昔單抗、達珠單抗、HuMax-TAC、維西珠單抗 (visilizumab)、HuMaxCD4、克立昔單抗、MAX16H5、TNX 100、托利珠單抗（toralizumab)、阿 侖珠單抗、CY 1788、加利昔單抗、培克珠單抗、依庫珠單抗、PMX-53、ETI 104、FG 3019、柏 替木單抗、249417(抗因子IX)阿昔單抗、YM 337、奧馬佐單抗、他利珠單抗、芳妥珠單抗、 J695(抗IL12)、HuMaxIL-15、美泊利單抗、伊斯利莫、HuDREG、阿那白滯素、Xoma-052、阿達 木單抗、英夫利昔單抗、賽妥珠單抗、阿非莫單抗、CytoFab、ΑΜΕ 527、伐利昔單抗、貝伐單 抗、雷珠單抗、vitaxin、貝利木單抗、MLN 1202、伏洛昔單抗、F200(抗-α5β 1)、依法珠單 抗、m60. 11 (抗Q)llb)、依那西普、奧那西普、利洛納塞（rilonacept)、阿巴他塞、那他珠單 抗或西利珠單抗（siplizumab)、托珠單抗、烏司奴單抗、ABT-874。最后，其它藥物活性劑可 以是任何其它趨化因子的活性的調節(jié)劑，其可以是趨化因子激動劑或拮抗劑，或趨化因子 受體激動劑或拮抗劑，其中趨化因子還可以是趨化脂質。實例是S1P受體調節(jié)劑芬戈莫德。 或者，或另外地，這樣的其它藥物活性劑是根據本發(fā)明的其它核酸。或者，藥劑還包含至少 一種結合與C5a不同的靶分子或顯示與根據本發(fā)明的核酸之一不同的功能的核酸。
[0335] 一般而言，可將C5a拮抗劑與其它促炎分子或它們的受體的抑制劑組合。其作用 可通過與C5a拮抗劑組合而減弱的促炎分子的實例為IL-1、IL-2、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、 IL-12、IL-13、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-23、TNF、α 4β 7、α 5β 1、BlyS、鈣粘蛋白、 CCR2、CDlla、CDllb、CD125、CD130、CD16、CD18、CD2、CD20, CD22、CD23、CD25、CD28、CD3、 CD30、CD4、CD40、CD40L、CD44、CD45R、CD54、CD62E、CD62L、CD68、CD8、CD80、CD86、CD95、CEP、 胃泌素-R、Cl、Cl-酯酶、C5、因子D、MBL、補體受體1、CRTH2-受體、CTGF、E-和P-選擇蛋 白、嗜酸細胞活化趨化因子（eotaxin)、因子IX、FGF-20、Fgl-2、GM-CSF、GP Ilb/IIIa受體、 HMG1、ICAM-1、IgE、胸腺細胞、IFNy、IFNr、IP-10、MCP-1、M-CSF 受體、MIF、MMP9、PDGF-D、 SDF-1、TGF0 1、組織因子、酪氨酸激酶受體、VAP-1、VCAM-1、VEGF、VLA1、血管性血友病因子 (von Willebrandt factor)、鞘氨醇1磷酸、神經酰胺-1磷酸鹽以及有絲分裂原的抑制劑 例如溶血磷脂酸的抑制劑。
[0336] 最后，其它藥物活性劑可以是任何其它趨化因子的活性的調節(jié)劑，其可以為趨化 因子激動劑或拮抗劑或趨化因子受體激動劑或拮抗劑?；蛘?，或另外地，這樣的其它藥物活 性劑是根據本發(fā)明的其它核酸?；蛘?，藥劑包含至少一種結合與C5a不同的靶分子或顯示 與根據本發(fā)明的核酸分子之一不同的功能的核酸。
[0337] 在本發(fā)明范圍內，藥劑原則上可選擇地或另外地結合用于預防公開的與藥劑用于 治療所述疾病的用途有關的疾病中的任何疾病。因而，各自的標志物即針對各自的疾病的 標志物，對于本領域技術人員來說是已知的。優(yōu)選地，各自的標志物為C5a。
[0338] 在本發(fā)明的藥劑的一個實施方案中，將這樣的藥劑與用于本文中公開的疾病中的 任何疾病的其它治療，特別地會對其使用本發(fā)明的藥劑的那些治療組合使用。
[0339] 〃聯合治療〃（或〃協同治療（co-therapy)")包括本發(fā)明的藥劑和至少第二試劑 的施用以作為意在從這些治療劑（即本發(fā)明的藥劑和所述第二試劑）的協同作用提供有益 作用的特異治療方案的部分。組合的有益作用包括但不限于由治療劑的組合產生的藥代動 力學或藥效共同作用。通常通過在一段確定的時間（通常數分鐘、數小時、數天或數周，取 決于選擇的組合）內進行這些治療劑的組合施用。
[0340] 〃聯合治療〃可能會，但通常不會期望包括這些治療劑的兩種或更多種的施用以 作為偶然地和任意地導致本發(fā)明的組合的分開的單一療法方案的部分。"聯合治療"意欲 包括以連續(xù)方式施用這些治療劑，即，其中在不同的時間施用每種治療劑，以及以大體上同 時的方式施用這些治療劑，或所述治療劑的至少兩種。大體上同時的施用可以例如通過給 受試者施用具有固定比率的每一種治療劑的單個膠囊或多個每個具有一種治療劑的單個 膠囊來實現。
[0341] 每一種治療劑的連續(xù)或大體上同時施用可通過任何適當的途徑來實現，所述途徑 包括但不限于局部途徑、口服途徑、靜脈內途徑、肌內途徑和通過粘膜組織的直接吸收。治 療劑可通過相同途徑或通過不同途徑施用。例如，選擇的組合的第一治療劑可通過注射施 用，而組合的其它治療劑可局部施用。
[0342] 或者，例如，可局部施用所有治療劑，或可通過注射施用所有治療劑。除非另外指 出，否則施用治療劑所按的順序不是嚴格地至關重要的。〃聯合治療〃還可包括與其它生 物活性成分進一步組合的上述治療劑的施用。當聯合治療還包括非藥物治療時，可在任何 適當的時間進行非藥物治療，只要可從治療劑與非藥物治療的組合的共同作用獲得有益作 用。例如，在適當的情況下，當非藥物治療從治療劑的施用暫時移除（可能數天或甚至數 周）時，仍可獲得有益作用。
[0343] 如上文概述的，根據本發(fā)明的藥劑原則上可以以本領域技術人員已知的任何形式 施用。優(yōu)選施用途徑為全身性施用，更優(yōu)選通過胃腸外施用，優(yōu)選通過注射。或者，可局部 施用藥劑。其它施用途徑包括肌內、腹膜內和皮下、口服、鼻內、氣管內或經肺，優(yōu)先考慮侵 入性最小然而確保功效的施用途徑。
[0344] 胃腸外施用通常用于皮下、肌內或靜脈內注射和輸注。此外，用于胃腸外施用的一 個方法使用緩釋或持續(xù)釋放系統(tǒng)的植入，這確保了劑量的恒定水平得到維持，這對于本領 域技術人員來說是公知的。
[0345] 此外，本發(fā)明的優(yōu)選藥劑可通過適當的鼻內媒介物、吸入劑的局部使用以鼻內形 式施用，或使用對于本領域技術人員來說是公知的經皮貼劑的那些形式通過經皮膚途徑來 施用。為了以透皮遞送系統(tǒng)的形式施用，劑量施用當然在給藥方案中從始至終是連續(xù)的而 非間歇性的。其它優(yōu)選局部用制劑包括乳膏劑、軟膏、洗劑、氣溶膠噴霧劑和凝膠，其中活性 成分的濃度通常會在〇.〇1 %至15% w/w或w/v的范圍內。
[0346] 本發(fā)明的藥劑通常會包含有效量的治療的活性組分，包括但不限于本發(fā)明的核酸 分子，其溶解于或分散在藥學上可接受的介質中。藥學上可接受的介質或載體包括任何和 所有溶劑、分散介質、包衣、抗菌和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。這樣的介質和試劑用 于藥物活性物質的用途在本領域是公知的。還可將補充活性成分摻入本發(fā)明的藥劑。
[0347] 在其它方面，本發(fā)明涉及藥物組合物。這樣的藥物組合物包含根據本發(fā)明的核酸 的至少一種和優(yōu)選藥學上可接受的媒介物。這樣的媒介物可以是本領域使用和/或已知的 任何媒介物或任何粘合劑。更具體地，這樣的粘合劑或媒介物是與本文中公開的藥劑的制 備相關論述的任何粘合劑或媒介物。在其它實施方案中，藥物組合物包含其它藥物活性劑。
[0348] 根據本公開內容，藥劑和藥物組合物的制備對于本領域技術人員來說將是已知 的。通常地，可將這樣的組合物制備為血管注射劑（液體溶液或懸浮液）；適合在注射之前 溶于或懸浮于液體中的固定形式；片劑或用于口服施用的其它固體；定時釋放膠囊；或目 前使用的任何其它形式，包括滴眼劑、乳膏、洗劑、軟膏、吸入劑等。由外科醫(yī)生、內科醫(yī)生 或醫(yī)護人員使用無菌制劑例如基于鹽水的洗滌，處理手術區(qū)的特定區(qū)域也可以是特別有用 的。還可通過微工具、微粒或海綿遞送組合物。
[0349] 配制后，將以與劑量配方相容的方式，并且以這樣的藥理學上有效的量施用藥劑。 以多種劑型例如上述可注射溶液的類型容易地施用制劑，但也可使用藥物釋放膠囊等。
[0350] 在該背景中，待施用的活性成分的量和組合物的體積取決于待治療的個體或受試 者。施用所需的活性化合物的具體量取決于醫(yī)生的判斷并且對于每一個個體是獨特的。
[0351] 通常使用分散活性化合物所需的藥劑的最小體積。適當的施用方案也是可變的， 但通常是最初施用化合物，監(jiān)控結果，隨后以更長的間隔給予進一步受控的劑量。
[0352] 例如，對于以片劑或膠囊（例如，明膠膠囊）的形式進行的口服施用，可將活性 藥物成分，即根據本發(fā)明的核酸分子和/或任何其它藥物活性劑，在本文中也稱為治療劑 或活性化合物，與口服、無毒、藥學上可接受的惰性載體（例如乙醇、甘油、水等）組合。此 夕卜，當期望或必需時，還可將適當的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻入混合物。適當的 粘合劑包括淀粉、硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯 烷酮、天然糖類例如葡萄糖或β -乳糖、玉米增甜劑、天然和合成樹膠例如阿拉伯膠、黃蓍 膠或海藻酸鈉、聚乙二醇、石蠟等。以這些劑型使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸 鎂、笨甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉、二氧化硅、滑石、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽和/或聚乙二醇等。 崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠淀粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽、 或泡騰合劑等。稀釋劑包括例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸。
[0353] 本發(fā)明的藥劑還可以以這樣的口服劑型如定時和持續(xù)釋放片劑或膠囊、丸劑、粉 齊?、粒劑、酏劑、酊劑、懸浮劑、糖漿劑和乳劑進行施用。有利地從脂肪乳劑或懸浮劑配制栓 劑。
[0354] 藥物組合物或藥劑可被滅菌和/或包含佐劑例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑或乳化 齊IJ、溶液促進劑、用于調節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。此外，它們還可包含其它治療上有價 值的物質。組合物可按照常規(guī)的混合、?；虬路▉碇苽洌ǔ０s0.1 %至75%，優(yōu) 選地約1 %至50 %的活性成分。
[0355] 液體，特別地可注射組合物可以例如通過溶解、分散等來制備。將活性化合物溶解 在藥用純溶劑（例如水、鹽水、含水葡萄糖、甘油、乙醇等）中或與其混合，從而形成可注射 溶液或懸浮液。此外，可配制適合在注射之前溶解于液體中的固體形式。
[0356] 對于固體組合物，賦形劑包括藥品級甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、 纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等。還可使用例如聚亞烷基二醇，例如丙醇作為載體將上文中 定義的活性化合物配制為栓劑。在一些實施方案中，有利地從脂肪乳劑或懸浮劑制備栓劑。
[0357] 還可將本發(fā)明的藥劑和核酸分子分別地以脂質體遞送系統(tǒng)的形式例如小的單層 囊泡、大的單層囊泡以及多層囊泡施用。脂質體可從多種磷脂，包括膽固醇、硬脂酰胺或磷 脂酰膽堿形成。在一些實施方案中，利用藥物的水溶液水化脂質組分的薄膜以形成封裝藥 物的脂質層，這對于本領域技術人員來說是公知的。例如，可以以使用本領域已知的方法 構建的與親脂化合物或非免疫原性高分子量化合物的復合物的形式提供本文中描述的本 發(fā)明的核酸分子。此外，脂質體可在其表面上具有這樣的核酸分子，以將細胞毒素劑靶向和 運載至內部，從而介導細胞殺傷。核酸締合的復合物的實例提供于美國專利No. 6, 011，020 中。
[0358] 本發(fā)明的藥劑和核酸分子分別地還可與可溶性聚合物如可靶向的藥物載體偶聯。 這樣的聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥基丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚、聚 羥基乙基天冬酰胺苯酚或被棕櫚?；鶜埢〈木垩趸蚁┚圪嚢彼?。此外，本發(fā)明的藥 劑和核酸分子分別地可偶聯至一類用于實現藥物的受控釋放的生物可降解聚合物，例如聚 乳酸、聚ε -己內酯、聚羥基丁酸、多正酯類、縮醛樹脂、聚二氫吡喃、聚腈基丙烯酸酯和水 凝膠的交聯的或兩親性嵌段共聚物。
[0359] 必要時，待施用的藥物組合物和藥劑分別地還可包含少量無毒輔助物質例如濕潤 劑或乳化劑、pH緩沖劑以及其它物質例如醋酸鈉和三乙醇胺油酸酯。
[0360] 分別地使用本發(fā)明的核酸分子和藥劑的給藥方案按照多個因素來選擇，所述因素 包括患者的類型、物種、年齡、體重、性別和醫(yī)學狀況；待治療的病況的嚴重度；施用途徑； 患者的腎和肝功能；以及使用的本發(fā)明的特定適體或其鹽。普通熟練醫(yī)生或獸醫(yī)可容易地 確定和開出防止、抵御或停止病況的進展所需的藥物的有效量。
[0361] 在本文中公開的疾病的任何疾病的治療中，根據本發(fā)明的核酸的有效血漿水平范 圍優(yōu)選在500fM與500 μ Μ之間。
[0362] 本發(fā)明的核酸分子和藥劑分別地可優(yōu)選地以單個日劑量、每兩天或每三天一次、 每周一次、每兩周一次、以單個月劑量或每三個月一次來進行施用。
[0363] 在本發(fā)明范圍內，本文中描述的藥劑組成本文中公開的藥物組合物。
[0364] 在其它方面，本發(fā)明涉及用于治療需要這樣的治療的受試者的方法，其中所述方 法包括施用藥物活性量的根據本發(fā)明的核酸的至少之一。在實施方案中，受試者患有疾病 或處于發(fā)生這樣的疾病的風險中，其中所述疾病為本文中公開的那些疾病的任何疾病，特 別地結合根據本發(fā)明的核酸的任一種用于制造藥劑的用途而公開的那些疾病的任何疾病。
[0365] 應理解，根據本發(fā)明的核酸以及拮抗劑不僅可用作藥劑或用于制造藥劑，而且還 可用于美容目的，特別地在C5a參與局部發(fā)炎皮膚病變方面。因此，可使用根據本發(fā)明的核 酸、藥劑和/或藥物組合物對其進行治療或預防的其它病況或疾病為局部發(fā)炎皮膚病變。
[0366] 如本文中優(yōu)選地使用的，診斷法或診斷試劑或診斷工具適合用于直接或間接地檢 測C5a，優(yōu)選如本文中描述的C5a，更優(yōu)選如本文中描述的與本文中描述的各種障礙和疾病 有關的C5a。診斷法適合用于分別地檢測和/或隨訪本文中描述的障礙和疾病的任何一 種。這樣的檢測可通過根據本發(fā)明的核酸對C5a的結合來進行。這樣的結合可被直接或間 接地檢測。各自的方法和工具對于本領域技術人員來說是已知的。除其它以外，根據本發(fā) 明的核酸可包含允許檢測根據本發(fā)明的核酸，優(yōu)選結合于C5a的核酸的標記。這樣的標記 優(yōu)選選自放射性標記、酶促標記和熒光標記。原則上，針對抗體開發(fā)的所有已知測定可用于 根據本發(fā)明的核酸，其中靶結合抗體被替代成靶結合核酸。在使用未標記靶結合抗體的抗 體-測定中，檢測優(yōu)選通過利用第二抗體來進行，所述第二抗體已用放射性標記、酶促標記 和熒光標記修飾，并且在其Fc-片段上結合靶結合抗體。在核酸、優(yōu)選根據本發(fā)明的核酸的 情況下，利用這樣的標記修飾核酸，其中優(yōu)選地這樣的標記選自生物素、Cy-3和Cy-5,并且 這樣的標記通過針對這樣的標記的抗體例如抗-生物素抗體、抗_Cy3抗體或抗-Cy5抗體 來檢測，或在標記是生物素的情況下，標記通過天然地結合生物素的鏈霉抗生物素蛋白或 抗生物素蛋白來檢測。這樣的抗體、鏈霉抗生物素蛋白或抗生物素蛋白繼而優(yōu)選地利用各 自的標記例如放射性標記、酶促標記或突光標記（如第二抗體）來修飾。
[0367] 在其它實施方案中，通過第二檢測工具檢測或分析根據本發(fā)明的核酸分子，其中 所述檢測工具為分子信標。分子信標的方法對于本領域技術人員來說是已知的。簡而言 之，也稱為分子信標的核酸探針與待檢測的核酸樣品反向互補并且由此與待檢測的核酸樣 品的部分雜交。在與核酸樣品結合后，分子信標的熒光基團分離，這導致熒光信號的改變， 優(yōu)選強度的改變。該改變與存在的核酸樣品的量相關。
[0368] 應認識到使用根據本發(fā)明的核酸進行的C5a的檢測特別允許檢測本文中定義的 C5a〇
[0369] 與C5a的檢測相關，優(yōu)選方法包括下列步驟：
[0370] (a)提供將測試其C5a的存在的樣品，
[0371] (b)提供根據本發(fā)明的核酸，
[0372] (c)將樣品優(yōu)選地在反應容器中與核酸反應
[0373] 其中可在步驟（b)之前進行步驟（a)，或可在步驟（a)之前進行步驟（b)。
[0374] 在優(yōu)選實施方案中，提供了另外的步驟d)，所述步驟在于檢測樣品與核酸的反應。 優(yōu)選地，將步驟b)的核酸固定于表面。表面可以是反應容器例如反應管、板的孔的表面，或 包含在這樣的反應容器中的工具例如珠粒的表面。核酸至表面的固定可通過本領域技術人 員已知的任何方式包括但不限于非共價或共價連接來進行。優(yōu)選地，連接通過表面與核酸 之間的共價化學鍵來建立。然而，也在本發(fā)明范圍內的是，將核酸間接固定于表面，其中這 樣的間接固定包括其它組分或一對相互作用伴侶的使用。這樣的其它組分優(yōu)選為與待固定 的核酸特異性相互作用的化合物，其也被稱為相互作用伴侶，從而介導核酸至表面的連接。 相互作用伴侶優(yōu)選選自核酸、多肽、蛋白質和抗體。優(yōu)選地，相互作用伴侶為抗體，更優(yōu)選單 克隆抗體?；蛘撸嗷プ饔冒閭H為核酸，優(yōu)選功能性核酸。更優(yōu)選，這樣的功能性核酸選自 適體、spiegelmer和與所述核酸至少部分互補的核酸。在其它可選擇的實施方案中，核酸 至表面的結合由多部分相互作用伴侶介導。這樣的多部分相互作用伴侶優(yōu)選為一對相互作 用伴侶或由第一成員和第二成員組成的相互作用伴侶，其中第一成員由核酸包含或連接于 所述核酸，并且第二成員連接于表面或被表面包含。多部分相互作用伴侶優(yōu)選選自包括生 物素與抗生物素蛋白、生物素與鏈霉抗生物素蛋白以及生物素與neutravidin的相互作用 伴侶對的組。優(yōu)選地，相互作用伴侶對的第一成員為生物素。
[0375] 這樣的方法的優(yōu)選結果為C5a與核酸的固定復合物的形成，其中更優(yōu)選檢測到所 述復合物。在實施方案內，從復合物檢測到C5a。
[0376] 順從該要求的各自檢測工具是例如特異于C5a的那部分/那些部分的任何檢測工 具。特別優(yōu)選的檢測工具為選自核酸、多肽、蛋白質和抗體的檢測工具，所述檢測工具的產 生對于本領域技術人員來說是已知的。
[0377] 用于檢測C5a的方法還包括從已優(yōu)選地用于進行步驟c)的反應容器除去樣品。
[0378] 方法還在其它實施方案中包括將C5a的相互作用伴侶固定在表面，優(yōu)選上文中定 義的表面上的步驟，其中相互作用伴侶是如本文中定義的，優(yōu)選如上文中結合各自方法定 義的，更優(yōu)選在它們的各種實施方案中包括核酸、多肽、蛋白質和抗體。在該實施方案中，特 別優(yōu)選的檢測工具為根據本發(fā)明的核酸，其中這樣的核酸可優(yōu)選地是標記的或非標記的。 如果這樣的核酸分子被標記，則其可被直接或間接檢測。這樣的檢測還可包括使用第二檢 測工具，其優(yōu)選地也選自本文中描述的核酸分子、多肽、蛋白質和不同實施方案中的實施方 案。這樣的檢測工具優(yōu)選特異于根據本發(fā)明的核酸。在更優(yōu)選實施方案中，第二檢測工具 為分子信標。核酸或第二檢測工具或兩者可在優(yōu)選實施方案中包含檢測標記。檢測標記優(yōu) 選選自生物素、溴代脫氧尿苷標記、地高辛標記、熒光標記、UV-標記、放射性-標記和螯合 劑分子?；蛘?，第二檢測工具與檢測標記相互作用，所述檢測標記優(yōu)選由核酸包含、包括或 連接于所述核酸。特別優(yōu)選的組合如下：
[0379] 檢測標記是生物素并且第二檢測工具為針對生物素的抗體，或其中
[0380] 檢測標記是生物素并且第二檢測工具為抗生物素蛋白或具有抗生物素蛋白的分 子，或其中
[0381] 檢測標記是生物素并且第二檢測工具為鏈霉抗生物素蛋白或具有鏈霉抗生物素 蛋白的分子，或其中
[0382] 檢測標記是生物素并且第二檢測工具為neutravidin或具有neutravidin的分 子，或
[0383] 其中檢測標記為溴代脫氧尿苷并且第二檢測工具為針對溴代脫氧尿苷的抗體，或 其中
[0384] 檢測標記為地高辛并且第二檢測工具針對地高辛的抗體，或其中
[0385] 檢測標記是螯合劑，并且第二檢測工具為放射性核素，其中優(yōu)選地所述檢測標記 連接于核酸。應認識到該類型的組合也適用于其中核酸連接于表面的實施方案。在這樣的 實施方案中，優(yōu)選檢測標記連接于相互作用伴侶。
[0386] 最后，也在本發(fā)明內的是使用第三檢測工具檢測第二檢測工具，優(yōu)選第三檢測工 具為酶，更優(yōu)選在第二檢測工具的檢測后顯示酶促反應，或第三檢測工具為用于檢測放射 線的工具，更優(yōu)選由放射性核素發(fā)射的放射線。優(yōu)選地，第三檢測工具特異性地檢測第二檢 測工具和/或與其相互作用。
[0387] 在其中C5a的相互作用伴侶固定在表面上并且優(yōu)選地將根據本發(fā)明的核酸添加 至在相互作用伴侶與C5a之間形成的復合物的實施方案中，還可從反應中，更優(yōu)選從其中 進行步驟c)和/或d)的反應容器中除去樣品。
[0388] 在實施方案中，根據本發(fā)明的核酸包括突光部分，并且其中突光部分的突光在核 酸與C5a和與游離C5a之間的復合物形成后不同。
[0389] 在其它實施方案中，核酸是根據本發(fā)明的核酸的衍生物，其中核酸的衍生物包含 至少一個替代腺苷的腺苷的熒光衍生物。在優(yōu)選實施方案中，腺苷的熒光衍生物為亞乙烯 基腺苷。
[0390] 在其它實施方案中，使用熒光檢測由根據本發(fā)明的核酸的衍生物和C5a組成的復 合物。
[0391] 在方法的實施方案中，信號在步驟（c)或步驟（d)中產生，優(yōu)選信號與樣品中的 C5a濃度相關。
[0392] 在優(yōu)選方面，可在96孔板中進行測定，其中如上所述將組分固定在反應容器中， 孔用作反應容器。
[0393] 本發(fā)明的核酸還可用作用于藥物設計的起始材料。大體上存在兩個可能的方法。 一個方法是篩選化合物文庫，其中這樣的化合物文庫優(yōu)選是低分子量化合物文庫。在實施 方案中，篩選是高通量篩選。優(yōu)選地，高通量篩選是在基于靶的測定中進行的化合物的快 速、高效的試錯評價。在最佳情況下通過色度測量進行分析。與其結合使用的文庫對于本 領域技術人員來說是已知的。
[0394] 或者，根據本發(fā)明的核酸可用于藥物的合理設計。優(yōu)選地，合理的藥物設計是藥物 前導結構（pharmaceutical lead structure)的設計。始于通常通過方法例如X射線晶體 學或核磁共振光譜學鑒定的靶的3維結構，使用計算機程序搜索包含許多不同化合物的結 構的數據庫。利用計算機進行選擇，隨后可在實驗室測試鑒定的化合物。
[0395] 藥物的合理設計可始于根據本發(fā)明的任何核酸，并且涉及結構，優(yōu)選三維結構，所 述結構與本發(fā)明的核酸的結構相似或與本發(fā)明的核酸的結構的結合介導部分相同。在任何 情況下，這樣的結構仍然顯示與本發(fā)明的核酸相同或相似的結合特征。在藥物的合理設計 的其它步驟中或作為替代步驟，利用與核苷酸和核酸不同的化學基團模擬結合神經遞質的 核酸的那些部分的優(yōu)選三維結構。通過該模擬，可設計與核酸不同的化合物。這樣的化合 物優(yōu)選是小分子或肽。
[0396] 在篩選化合物文庫的情況下，例如通過使用競爭性測定，這對本領域技術人員來 說是已知的，可發(fā)現適當的C5a類似物、C5a激動劑或C5a拮抗劑。這樣的競爭性測定可如 下建立。將本發(fā)明的核酸，優(yōu)選地為靶結合性L-核酸的spiegelmer，偶聯于固相。為了鑒 定C5a類似物，可將標記的C5a添加至測定。潛在類似物可與C5a分子競爭對spiegelmer 的結合，這可伴隨通過各自標記獲得的信號的減弱。激動劑或拮抗劑的篩選可包括本領域 技術人員已知的細胞培養(yǎng)測定的使用。
[0397] 根據本發(fā)明的試劑盒可包括至少一種或數種本發(fā)明的核酸。此外，試劑盒可包括 至少一個或數個陽性或陰性對照。陽性對照可以例如是C5a，特別地本發(fā)明的核酸是針對其 選擇的或本發(fā)明的核酸所結合的C5a，優(yōu)選地其以液體形式存在。陰性對照可以例如是按照 與C5a相似的生物物理性質定義的但不被本發(fā)明的核酸識別的肽。此外，所述試劑盒還可 包括一種或數種緩沖液?？梢砸愿稍锘騼龈傻男问交蛉芙庥谝后w中的形式將各種成分包含 在試劑盒中。試劑盒可包含一種或數種容器，其進而可包含試劑盒的一種或數種成分。在 其它實施方案中，試劑盒包括給用戶提供關于如何使用試劑盒及其各種成分的信息的說明 或說明書。
[0398] 根據本發(fā)明的核酸的藥物和生物分析測定對于其在人體和非人體的幾種體液、組 織和器官中的藥代動力學和生物動力學特征譜的估量是非常必要的。為此目的，可使用任 何本文中公開的或本領域技術人員已知的檢測法。在本發(fā)明的其它方面，提供了用于檢測 根據本發(fā)明的核酸的夾心雜交測定。在該檢測測定內，使用捕獲探針和檢測探針。捕獲探針 與根據本發(fā)明的核酸的第一部分互補，并且檢測探針與其第二部分互補。捕獲和檢測探針 都可由DNA核苷酸、修飾DNA核苷酸、修飾RNA核苷酸、RNA核苷酸、LNA核苷酸和/或PNA 核苷酸形成。
[0399] 因此，捕獲探針包含與根據本發(fā)明的核酸的5' -末端互補的序列區(qū)段，以及檢測 探針包含與根據本發(fā)明的核酸的3' -末端互補的序列區(qū)段。在該情況下，將捕獲探針通過 其5' -末端固定于表面或基質，其中可在其5' -末端直接固定捕獲探針，或通過其5' -末 端與表面或基質之間的接頭固定捕獲探針。然而，原則上可將接頭連接于捕獲探針的每一 個核苷酸。接頭可由本領域熟知的親水性接頭形成，或由D-DNA核苷酸、修飾D-DNA核苷酸、 D-RNA核苷酸、修飾D-RNA核苷酸、D-LNA核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA核苷酸、L-DNA核苷酸、 修飾L-RNA核苷酸、修飾L-DNA核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成。
[0400] 或者，捕獲探針包含與根據本發(fā)明的核酸的3' -末端互補的序列區(qū)段，并且檢測 探針包含與根據本發(fā)明的核酸的5' -末端互補的序列區(qū)段。在該情況下將捕獲探針通過 其3' -末端固定于表面或基質，其中可直接在其3' -末端固定或通過其3' -末端與表面 或基質之間的接頭固定捕獲探針。然而，原則上，可將接頭連接于與根據本發(fā)明的核酸互補 的序列區(qū)段的每一個核苷酸。接頭可由本領域中熟知的親水性接頭或由D-DNA核苷酸、修 飾D-DNA核苷酸、D-RNA核苷酸、修飾D-RNA核苷酸、D-LNA核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA核苷 酸、L-DNA核苷酸、修飾L-RNA核苷酸、修飾L-DNA核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成。
[0401] 可與根據本發(fā)明的核酸雜交的捕獲和檢測探針的核苷酸的數目是可變的，并且可 取決于捕獲和/或檢測探針和/或根據本發(fā)明的核酸本身的核苷酸的數目。可與根據本發(fā) 明的核酸雜交的捕獲和檢測探針的核苷酸的總數應當是由根據本發(fā)明的核酸包含的核苷 酸的最大數目。檢測和捕獲探針的核苷酸的最小數目（2至10個核苷酸）應當允許分別與 根據本發(fā)明的核酸的5' -末端或3' -末端雜交。為了實現根據本發(fā)明的核酸與被分析的 樣品中存在的其它核酸之間的高特異性和選擇性，捕獲和檢測探針的核苷酸的總數應當是 由根據本發(fā)明的核酸包含的核苷酸的最大數目。
[0402] 此外，檢測探針優(yōu)選具有標志物分子或標記，可如本文中先前所述檢測所述標志 物分子或標記。原則上可將標記或標志物分子連接于檢測探針的每一個核苷酸。優(yōu)選，標 記或標志物位于檢測探針的5'末端或3'末端，其中可在檢測探針內的與根據本發(fā)明的核 酸互補的核苷酸與標記之間插入接頭。接頭可由本領域熟知的親水性接頭或由D-DNA核苷 酸、修飾D-DNA核苷酸、D-RNA核苷酸、修飾D-RNA核苷酸、D-LNA核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA 核苷酸、L-DNA核苷酸、修飾L-RNA核苷酸、修飾L-DNA核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成。
[0403] 可如下進行根據本發(fā)明的核酸的檢測：
[0404] 根據本發(fā)明的核酸以其末端之一與捕獲探針雜交并以另一末端與檢測探針雜交。 隨后，通過例如一次或數次洗滌步驟除去未結合的檢測探針。可隨后測量結合的優(yōu)選具有 標記或標志物分子的檢測探針的量，如例如在W0/2008/052774(將其通過引用并入本文） 中更詳細概述的。
[0405] 如本文中優(yōu)選使用的，術語治療，在優(yōu)選實施方案中，包括額外地或可選擇地預防 和/或隨防。
[0406] 如本文中優(yōu)選地使用的，術語疾病和障礙應當以可互換的方式使用，如果沒有相 反指明的話。
[0407] 如本文中所用，術語包括優(yōu)選地不意欲限定所述術語之后或由其描述的主題。然 而，在可選擇的實施方案中，術語包括應當理解為意指包含，從而理解為限定所述術語之后 或由其描述的主題。
[0408] 不同的SEQ ID N0 :，根據本發(fā)明的核酸分子和本文中使用的靶分子C5a的化學性 質，其實際序列和內部名稱編號概述于下表中。
[0409]
【權利要求】
1. 一種能夠結合人C5a的核酸分子，其中所述核酸分子包含中央核苷酸區(qū)段，其中所 述中央核苷酸區(qū)段包含如下核苷酸序列： 5'AUGn1GGUGKUn2n3RGGGHUGUKGGGn 4Gn5CGACGCA3'[SEQIDN0:61]，其中 h為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n 5為U或dU并且 G、A、U、C、Η、K和R為核糖核苷酸，和 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
2. 權利要求的1核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含選自如下核苷酸序列的核苷 酸序列 a) 5, AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:62], b) 5, AUGn1GGUGUUn2n3GGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:63], c) 5, AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUUGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:64], d) 5, AUGn1GGUGGUn2n3AGGGUUGUUGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:65], e) 5, AUGn1GGUGGUn2n3GGGGUUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:66], fOS'AUGniGGUGGUr^r^GGGGAUGUGGGGr^GnsCGACGCAS'BEQIDNOzeTlJP g)5, AUGn1GGUGUUn2n3GGGGCUGUGGGGn4Gn 5CGACGCA [SEQ ID NO:68], 其中 h為U或dU, n2為G或dG, n3為A或dA, n4為U或dU, n5為U或dU并且 G、A、U和C為核糖核苷酸，和 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
3. 權利要求2的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列： 5'AUGn1GGUGGUn2n 3AGGGUUGUUGGGn4Gn5CGACGCA3'[SEQIDN0:65]，其中 h為U或dU，n2為G或dG, n3為A或dA, n4為U或dU，n5為U或dU并且 G、A、U和C為核糖核苷酸，和 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
4. 權利要求3的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含選自如下核苷酸序列的核苷 酸序列： a) 5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:73]， b) 5'AUGUGGUGGUdGAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:74]， c) 5'AUGUGGUGGUGdAAGGGUUGUUGGGUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:75]， d) 5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:76]， e) 5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:77]， f) 5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:78]， g) 5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:79]， h) 5'AUGUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:80]， i) 5'AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:81]， j) 5'AUGdUGGUGGUdGAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:82]， k) 5'AUGdUGGUGGUGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:83]， l) 5'AUGdUGGUGGUdGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:84]， 優(yōu)選地所述中央核苷酸區(qū)段為 5' AUGdUGGUGGUGAAGGGUUGUUGGGdUGUCGACGCA 3' [SEQ ID NO :78]或 5'AUGdUGGUGGUdGdAAGGGUUGUUGGGdUGdUCGACGCA 3' [SEQ ID N0:84]。
5. 權利要求2的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列： 5'AUGn1GGUGGUn2n3GGGGUUGUGGGGn 4Gn5CGACGCA3'[SEQIDN0:66]，其中 h為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n 5為U或dU并且 G、A、U和C為核糖核苷酸，并且 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
6. 權利要求2的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列： 5'AUGn1GGUGGUn2n3GGGGAUGUGGGGn 4Gn5CGACGCA3'[SEQIDN0:67]，其中 h為U或dU，n2為G或dG，n3為A或dA，n4為U或dU，n 5為U或dU并且 G、A、U和C為核糖核苷酸，和 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
7. 權利要求2的核酸分子。其中所述中央核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列 5'AUGn1GGUGUUn2n3AGGGUUGUUGGGn 4Gn5CGACGCA3'[SEQIDN0:64]，其中 h為U或dU，n2為G或dG, n3為A或dA, n4為U或dU，n5為U或dU并且 G、A、U和C為核糖核苷酸，并且 dU、dG和dA為2' -脫氧核糖核苷酸。
8. 權利要求1至7的任一項的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段由核糖核苷酸和 2' -脫氧核糖核苷酸組成。
9. 權利要求1至3和5至7的任一項的核酸分子，其中所述中央核苷酸區(qū)段由核糖核 苷酸組成。
10. 權利要求1至9的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子以5' ->3'方向包含第一 末端核苷酸區(qū)段、中央核苷酸區(qū)段和第二末端核苷酸區(qū)段，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含1至5個核苷酸，和 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含1至5個核苷酸， 優(yōu)選地 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含3至5個核苷酸，和 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含3至5個核苷酸， 更優(yōu)選地 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含3個核苷酸，和 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含3個核苷酸。
11. 權利要求10的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列 5' ZiZ2Z3Z4G 3'并且第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' Z5Z6Z7Z8Z9 3'， 其中 Zi為G或不存在，Z2為S或不存在，Z3為S或不存在，Z4為B或不存在，Z 5為C或dC，Z6 為V或不存在，Z7為S或不存在，Z8為S或不存在，Z9為C或不存在，并且 G、S、B、C、V為核糖核苷酸，和 dC為2' -脫氧核糖核苷酸， 優(yōu)選地 a) Zi 為 G，Z2 為 S，Z3 為 S，Z4 為 B，Z5 為 C 或 dC，Z6 為 V，Z7 為 S，Z8 為 S，Z9 為 C，或 b) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7為S，Z8為S，Z9不存在， 或 c) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7為S，Z8不存在，Z 9不 存在，或 d) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7不存在，Z8不存在， Z 9不存在，或 e) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7為S，Z8為S，Z9為C，或 f) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7為S，Z8為S，Z9為C， 或 g) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，z7為s，z8為s，z9為 C，或 h) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5為C或dC，Z 6為V，z7為s，z8為s，z9 為C,或 i) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7為S，Z8為S，Z9不存 在，或 j) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，z7為s，z8為s，z9不 存在，或 k) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5為C或dC，Z 6為V，z7為s，z8為s，z9 不存在，或 l) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，z7為s，z8不存在，z 9不存 在，或 m) Zi不存在，Z2為S，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6為V，Z7不存在，Z8不存在，Z 9不 存在，或 rOZi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5為C，Z 6為V，Z7為S，Z8不存在，Z9不 存在，或 〇) Zi不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，z7為s，z8不存在，z9 不存在，或 P) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z5為C或dC，Z 6為V，z7不存在，z8不存在，z9 不存在，或 q) Zi不存在，Z2不存在，Z3為S，Z4為B，Z 5為C或dC，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在， 冗 9不存在。 r)
12. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸 序列5' GCCUG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CAGGC 3'或5' dCAGGC 3，，其中 C、A、G和U為核糖核苷酸，和 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
13. 權利要求12的核酸分子，其中所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'dCAGGC 3，。
14. 權利要求12的核酸分子，其中所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CAGGC 3，。
15. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CCUG 3'或5' CUG 3'或5' UG 3'或5' G 3'，并且 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGGC 3'，其中 C、A、G和U為核糖核苷酸，和 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
16. 權利要求15的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CCUG 3'。
17. 權利要求15的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CUG 3'。
18. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中 a) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCUG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū) 段包含核苷酸序列5' dCAGC 3' ；或 b) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū) 段包含核苷酸序列5' dCGGC 3' ；或 c) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GGCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū) 段包含核苷酸序列5' dCGCC 3' ；其中 C、A、G和U為核糖核苷酸，和 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
19. 權利要求18的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GGCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段包 含核苷酸序列5' dCGCC 3'。
20. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CUG 3'或5' UG 3'或5' CG 3'或5' G 3'，并且 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAGC 3'，其中 C、A、G和U為核糖核苷酸，并且 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
21. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GCUG 3'，并且 所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCAC 3'或5' dCC 3'或5' dCA 3'，其中 C、A、G和U為核糖核苷酸，并且 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
22. 權利要求10至11的任一項的核酸分子，其中 a)所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GUG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCAC 3'，或 b) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' UG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCA 3'，或 c) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCGC 3'，或 d) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' CG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCGC 3'，或 e) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'G 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段包 含核苷酸序列5' dCGC 3'，或 f) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCC 3'，或 g) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dC 3'，或 h) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' GG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' dCC 3' ； i) 所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCG 3'并且所述第二末端核苷酸區(qū)段 包含核苷酸序列5' CGC 3' ；其中 C、A、U和G為核糖核苷酸，并且 dC為2' -脫氧核糖核苷酸。
23. 權利要求22的核酸分子，所述第一末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5'GCG 3'，并 且所述第二末端核苷酸區(qū)段包含核苷酸序列5' dCGC 3'。
24. 權利要求1至3、5至7、9至12和14的任一項的核酸分子，其中核酸分子包含選自 SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:90 的核苷酸序列，或 包含與包含選自 SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:90 的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性的核酸分子，或包含與包含選自SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:90 的核苷酸序列的核酸分子 同源的核酸分子，其中所述同源性為至少85%。
25. 權利要求1至4、8、10至23的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子包含選自SEQ ID N0:14、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:59、SEQ ID N0:60、SEQ ID NO:91 和SEQ ID NO:92 的核 苷酸序列，或包含與包含選自 SEQ ID N0:14、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、 SEQ ID NO:26,SEQ ID NO:27,SEQ ID NO:37,SEQ ID NO:57,SEQ ID NO:59,SEQ ID NO:60, SEQ ID N0:91和SEQ ID N0:92的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性的核酸分 子，或包含與包含選自 SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:21、SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25、SEQ ID N0:26、SEQ ID N0:27、SEQ ID N0:37、SEQ ID N0:57、SEQ ID N0:59、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:91和SEQ ID N0:92的核苷酸序列的核酸分子同源的核酸分子，其中所述同源性為至少 85%。
26. 權利要求1至25的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子能夠結合人C5a和小鼠 C5a〇
27. 權利要求1至26的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子包含至少一個能夠結合 人C5a和小鼠 C5a的結合部分，其中這樣的結合部分由L-核苷酸組成。
28. 權利要求1至27的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子的核苷酸或形成所述核 酸分子的核苷酸為L-核苷酸。
29. 權利要求1至28的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子為L-核酸分子。
30. 權利要求1至29的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子為通過人和/或小鼠 C5a 介導的活性的拮抗劑。
31. 權利要求1至30的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子包含修飾基團，其中包含 修飾基團的核酸分子從生物體的排泄率相較于不包含修飾基團的核酸分子減小。
32. 權利要求1至30的任一項的核酸分子，其中所述核酸分子包含修飾基團，其中包含 修飾基團的核酸分子相較于不包含修飾基團的核酸分子在生物體中具有增加的停留時間。
33. 權利要求31和32的任一項的核酸分子，其中所述修飾基團選自生物可降解的和非 生物可降解的修飾，優(yōu)選修飾基團選自聚乙二醇、線性聚乙二醇、分枝聚乙二醇、羥乙基淀 粉、肽、蛋白質、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧酰胺和聚（2-羥乙基）-L-谷氨酰胺。
34. 權利要求33的核酸分子，其中所述修飾基團為聚乙二醇，優(yōu)選由線性聚乙二醇 或分枝聚乙二醇組成，其中聚乙二醇的分子量優(yōu)選為約20, 000至約120, OOODa，更優(yōu)選約 30, 000 至約 80, OOODa 和最優(yōu)選約 40, OOODa。
35. 權利要求33的核酸分子，其中所述修飾基團為羥乙基淀粉，其中優(yōu)選地羥乙基淀 粉的分子量為約50至約1000kDa，更優(yōu)選約100至約700kDa和最優(yōu)選200至500kDa。
36. 權利要求31至35的任一項的核酸分子，其中所述修飾基團通過接頭偶聯于核酸分 子，其中優(yōu)選地接頭是生物可降解接頭。
37. 權利要求31至36的任一項的核酸分子，其中所述修飾基團偶聯于核酸分子的 5' -末端核苷酸和/或核酸分子的3' -末端核苷酸和/或所述核酸分子的5' -末端核苷 酸與所述核酸分子的3' -末端核苷酸之間的核酸分子的核苷酸。
38. 權利要求31至37的任一項的核酸分子，其中所述生物體是動物體或人體，優(yōu)選人 體。
39. 權利要求1至38的任一項的核酸分子，其用于用于治療和/或預防疾病的方法。
40. 權利要求39的核酸分子，其中所述疾病與補體活化和C5a介導的發(fā)病機制相關， 和/或選自自身免疫性疾病、炎性疾病、全身性炎性反應綜合征、眼病、缺血/再灌注損傷、 遲發(fā)性移植物功能、移植排斥、心血管疾病、呼吸性疾病、急性反應、感染性疾病、神經系統(tǒng) 疾病、神經變性疾病、纖維變性疾病、血液病、代謝疾病、腫瘤和與由生物材料引起的補體活 化相關的臨床并發(fā)癥，優(yōu)選全身性炎性反應綜合征選自膿毒癥和外傷或重度燒傷的繼發(fā)性 損傷。
41. 一種藥物組合物，其包含權利要求1至39的任一項中定義的核酸分子和任選地其 它組分，其中所述其它組分選自藥學上可接受的賦形劑、藥學上可接受的載體和藥物活性 劑。
42. 權利要求41的藥物組合物，其中所述藥物組合物包含權利要求1至39的任一項中 定義的核酸分子和藥學上可接受的載體。
43. 權利要求1至39的任一項的核酸分子用于制造藥劑的用途。
44. 權利要求43的用途，其中所述藥劑用于人類醫(yī)學或用于獸醫(yī)醫(yī)學。
45. 權利要求1至39的任一項的核酸分子用于制造診斷工具的用途。
46. 權利要求43的用途，其中所述藥劑用于治療和/或預防自身免疫性疾病、炎性疾 病、全身性炎性反應綜合征、眼病、缺血/再灌注損傷、遲發(fā)性移植物功能、移植排斥、心血 管疾病、呼吸性疾病、急性反應、感染性疾病、神經系統(tǒng)疾病、神經變性疾病、纖維變性疾病、 血液病、代謝疾病、腫瘤和與由生物材料引起的補體活化相關的臨床并發(fā)癥，優(yōu)選全身性炎 性反應綜合征選自膿毒癥和外傷或重度燒傷的繼發(fā)性損傷。
47. -種復合物，其包含權利要求1至39的任一項的核酸分子和C5a，其中優(yōu)選地所述 復合物是晶體復合物。
48. 權利要求1至39的任一項的核酸分子用于檢測C5a的用途。
49. 一種用于篩選由C5a介導的活性的拮抗劑的方法，其包括下列步驟： -提供由C5a介導的活性的候選拮抗劑， -提供權利要求1至39的任一項中定義的核酸分子， -提供在由C5a介導的活性的拮抗劑存在的情況下提供信號的測試系統(tǒng)，和 -確定由C5a介導的活性的候選拮抗劑是否是由C5a介導的活性的拮抗劑。
50. -種用于檢測C5a的試劑盒，其中所述試劑盒包括權利要求1至39的任一項的核 酸分子，以及至少說明書或反應容器。
51. -種方法，其用于檢測樣品中的權利要求1至39的任一項中定義的核酸，其中所述 方法包括步驟： a) 提供捕獲探針，其中所述捕獲探針與權利要求1至39的任一項中定義的核酸分子的 第一部分至少部分互補，和檢測探針，其中所述檢測探針與與權利要求1至39的任一項中 定義的核酸分子的第二部分至少部分互補；或者，可選擇地，所述捕獲探針與權利要求1至 39的任一項中定義的核酸分子的第二部分至少部分互補，以及所述檢測探針與權利要求1 至39的任一項中定義的核酸分子的第一部分至少部分互補； b) 將所述捕獲探針和所述檢測探針分別地或組合地添加至樣品，所述樣品包含權利要 求1-39的任一項中定義的核酸分子或假定包含權利要求1至39的任一項中定義的核酸分 子； c) 使所述捕獲探針和所述檢測探針同時或以任意順序依次與權利要求1至39的任一 項中定義的核酸分子或其部分反應； d) 任選地檢測步驟a)中提供的所述捕獲探針是否與權利要求1至39的任一項中定義 的核酸分子雜交；和 e) 檢測步驟c)中形成的由權利要求1至39的任一項中定義的核酸分子與所述捕獲探 針和所述檢測探針組成的復合物。
52. 權利要求51的方法，其中所述檢測探針包括檢測工具，和/或其中所述捕獲探針被 固定于支持物，優(yōu)選固體支持物。
53. 權利要求51或52的方法，其中從反應中除去不為步驟c)中形成的復合物的部分 的任何檢測探針以便在步驟e)中僅檢測是所述復合物的部分的檢測探針。
54. 權利要求51至53的任一項的方法，其中步驟e)包括步驟：比較當所述捕獲探針 與所述檢測探針在權利要求1至39的任一項中定義的核酸分子或其部分存在的情況下，和 在所述核酸分子或其部分不存在的情況下雜交時，通過檢測工具產生的信號。
【文檔編號】C12N15/115GK104145018SQ201380009020
【公開日】2014年11月12日 申請日期:2013年1月10日 優(yōu)先權日:2012年1月10日
【發(fā)明者】K·霍利戈, A·威特, K·布徹訥, C·馬施, S·克魯斯曼 申請人:諾松制藥股份公司