一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置制造方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，包括帶有出液口和進(jìn)液口的殼體；設(shè)于殼體內(nèi)用于夾持生物結(jié)構(gòu)的夾緊裝置；對(duì)夾緊裝置提供驅(qū)動(dòng)力的驅(qū)動(dòng)電機(jī)；用于對(duì)殼體內(nèi)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱的加熱裝置；用于檢測培養(yǎng)液溫度的溫度傳感器，并將溫度信號(hào)輸出；用于檢測生物結(jié)構(gòu)所受拉力的拉力傳感器，并將拉力信號(hào)輸出；控制器，同于接收所述溫度信號(hào)和拉力信號(hào)，同時(shí)根據(jù)接收的信號(hào)信息，對(duì)驅(qū)動(dòng)電機(jī)和加熱裝置輸出控制信號(hào)。本發(fā)明的裝置結(jié)構(gòu)簡單，制造成本低，易于操作，將混有細(xì)胞的生物結(jié)構(gòu)安裝在細(xì)胞培養(yǎng)裝置中，通過液晶顯示屏的操作，裝置就會(huì)按照設(shè)定的程序?qū)ζ溥M(jìn)行力可控的往復(fù)拉伸操作，模擬體內(nèi)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)。
【專利說明】一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是涉及一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力
培養(yǎng)裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著社會(huì)的發(fā)展，越來越多的人從事到生命科學(xué)領(lǐng)域，促進(jìn)了生命科學(xué)的迅速發(fā)展。機(jī)體的器官、組織、細(xì)胞和生物大分子在力學(xué)作用下發(fā)生相應(yīng)的形態(tài)和功能改變，這是機(jī)體對(duì)力學(xué)刺激的響應(yīng)過程，而機(jī)體對(duì)一定范圍力學(xué)刺激的自適應(yīng)，對(duì)于維持正常生理功能具有重要作用。細(xì)胞由生物大分子構(gòu)成，是生命活動(dòng)的基本單位。研究力對(duì)細(xì)胞的作用，是揭示器官、組織生物力學(xué)特性的基礎(chǔ)，也是進(jìn)一步研究細(xì)胞內(nèi)生物大分子的生物力學(xué)特性的出發(fā)點(diǎn)。研究表明，力可以通過影響細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)和蛋白質(zhì)合成來調(diào)節(jié)細(xì)胞功能，在細(xì)胞的生理、病理過程中發(fā)揮著重要作用。目前，細(xì)胞培養(yǎng)已成為細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)和免疫學(xué)等學(xué)科研究的重要基礎(chǔ)。因此，開發(fā)出具有不同針對(duì)性的細(xì)胞培養(yǎng)方法，對(duì)于深入探討細(xì)胞的生長活動(dòng)規(guī)律具有重要意義。
[0003]當(dāng)前，細(xì)胞培養(yǎng)廣泛使用各種培養(yǎng)瓶，但局限于單一靜態(tài)培養(yǎng)環(huán)境，實(shí)際上，在正常的生理?xiàng)l件下，細(xì)胞往往處于復(fù)雜的力學(xué)環(huán)境當(dāng)中，如骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及心肌細(xì)胞等等，這些細(xì)胞在生長過程中受到一些物理因素的影響如:血流的流體剪切應(yīng)力、拉伸力和液體壓力等。在常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)條件下，此類細(xì)胞的真實(shí)生長環(huán)境無法模擬。因此，需要開發(fā)新的細(xì)胞培養(yǎng)方法提供與體內(nèi)細(xì)胞生長環(huán)境近似的微環(huán)境，較為真實(shí)的反映細(xì)胞的生長情況。
[0004]目前，對(duì)細(xì)胞的拉伸力作用通常是借助使細(xì)胞粘附的基底材料發(fā)生形變來實(shí)現(xiàn)，其中大多數(shù)裝置采用彈性模為基底材料，通過液體或氣體產(chǎn)生的壓力使基底膜變形，然后拉伸細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定范圍的力學(xué)`刺激，通過控制形變量大小來控制細(xì)胞受力大小。例如，Leung等使用馬達(dá)驅(qū)動(dòng)的活塞一聯(lián)動(dòng)裝置拉伸矩形硬蛋白基底，使附著在其上的細(xì)胞受到不同大小、不同周期的拉伸力(Leung D Y, Glagov S, Matthews M B.A new in vitrosystem for studying cell response to mechanical stimulation.Different effectsof cyclic stretching and agitation on smooth muscle cell biosynthesis[J].ExpCell Res，1977，109 (2):285_298)。Carosi 和 Neidlinger-Wilke 等改用 DC 馬達(dá)控制偏心桿使矩形基底膜產(chǎn)生更為規(guī)則的位移(Carosi J A, Eskin S G，Mcintire L V.Cyclicalstrain effects on the production of vasoactive material in endothelialcells[J].J Cell Physiol，1992，151 (1):29-36) (Neidlinger-Wilke C,Grood E S,WangJ H，et al.Cell alignment is induced by cyclic changes in cell length:studiesof cells grown in cyclically stretched subtrates[J].J Orthop Res,2001, 19 (2):286-293)。Kaspar等用電磁驅(qū)動(dòng)矩形硅膠膜產(chǎn)生四點(diǎn)彎曲低應(yīng)力循環(huán)拉伸細(xì)胞基底(Kaspar D，Seidl W，Neidlinger-Wilke C，et al.Dynamic cell stretching increaseshuman osteoblast proliferation and CICP synthesis but decreases osteocalcinsynthesis and alkaline phosphatase activity[J].J Biomech,2000, 33 (I):45-51)?Flexercell公司的拉伸裝置，由真空底座和密封墊、正負(fù)壓力控制模塊、柔性細(xì)胞培養(yǎng)板、計(jì)算機(jī)監(jiān)控系統(tǒng)等組成，通過計(jì)算機(jī)監(jiān)控系統(tǒng)控制氣體流入速率，通過調(diào)節(jié)柔性細(xì)胞培養(yǎng)板基底膜的垂直形變來控制細(xì)胞受力大小。
[0005]專利申請?zhí)枮镃N201310043685.3的專利文獻(xiàn)公開了一種可機(jī)械拉伸的微流控芯片細(xì)胞培養(yǎng)裝置，利用微量注射泵控制其微通道內(nèi)的液體流量，進(jìn)而控制細(xì)胞粘附的基底材料應(yīng)變量，實(shí)現(xiàn)在微流控芯片條件下，為細(xì)胞提供一個(gè)具有機(jī)械拉伸作用的生長環(huán)境。但該裝置提供的細(xì)胞生長環(huán)境與以前的裝置沒有很明顯的改善。
[0006]目前現(xiàn)有的發(fā)明及裝置中，細(xì)胞多處在培養(yǎng)液中，和人體內(nèi)細(xì)胞所處在的一個(gè)三維受力環(huán)境還有很大的區(qū)別，因而目前的細(xì)胞培養(yǎng)裝置中細(xì)胞的分化、細(xì)胞間的通訊方式和體內(nèi)細(xì)胞存在較大的差別，不能夠?yàn)獒t(yī)學(xué)研究、細(xì)胞生物力學(xué)研究等提供很好的借鑒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，可使細(xì)胞培養(yǎng)處在一個(gè)擬體內(nèi)環(huán)境，并可根據(jù)不同細(xì)胞應(yīng)力刺激的需要，施加不同頻率，不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷，以更好的模擬體內(nèi)的各種受力環(huán)境 ，能夠?qū)︶t(yī)學(xué)研究、細(xì)胞生物力學(xué)研究等提供很好的借鑒。
[0008]—種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，包括用于盛放培養(yǎng)液的殼體；還包括:
[0009]設(shè)于殼體內(nèi)用于夾持生物結(jié)構(gòu)的夾緊裝置，包括一個(gè)或多個(gè)固定夾具、以及與所述固定夾具相互對(duì)正的移動(dòng)夾具，所述生物結(jié)構(gòu)夾持于固定夾具與移動(dòng)夾具之間；
[0010]對(duì)移動(dòng)夾具提供驅(qū)動(dòng)力的驅(qū)動(dòng)電機(jī)；
[0011]用于對(duì)殼體內(nèi)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱的加熱裝置；
[0012]用于檢測培養(yǎng)液溫度的溫度傳感器，并將溫度信號(hào)輸出；
[0013]用于檢測生物結(jié)構(gòu)所受拉力的拉力傳感器，并將拉力信號(hào)輸出；
[0014]控制器，同于接收所述溫度信號(hào)和拉力信號(hào)，同時(shí)根據(jù)接收的信號(hào)信息，對(duì)驅(qū)動(dòng)電機(jī)和加熱裝置輸出控制信號(hào)。
[0015]為便于對(duì)殼體內(nèi)運(yùn)行狀況的觀察，作為優(yōu)選，所述的殼體上至少設(shè)有一塊區(qū)域?yàn)橥该鳉?。同時(shí)，透明殼的設(shè)置，便于在人工進(jìn)行培養(yǎng)液加注時(shí)對(duì)液面的控制。
[0016]為便于實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的自動(dòng)加注，提高控制精度，所述優(yōu)選，所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置還包括:用于對(duì)殼體注入培養(yǎng)液的加料裝置；用于檢測培養(yǎng)液的液面高度的液位傳感器，并將高度信號(hào)輸出；所述控制器同時(shí)接收所述的高度信號(hào)，并對(duì)加料裝置輸出控制信號(hào)。通過液位傳感器和控制器可實(shí)現(xiàn)對(duì)培養(yǎng)液的自動(dòng)注入，避免人工操作帶來的不穩(wěn)定因素影響。同時(shí)，根據(jù)需要所述的進(jìn)液口和出液口設(shè)有電控閥，通過液位傳感器、進(jìn)液口和出液口處電控閥開度的控制，可實(shí)現(xiàn)在流動(dòng)培養(yǎng)液環(huán)境中的檢測操作，進(jìn)一步提高了本發(fā)明的培養(yǎng)裝置的功能性。
[0017]作為優(yōu)選，所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置還包括設(shè)置在殼體內(nèi)用于對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行殺毒的紫外燈。紫外燈一般設(shè)置在殼體內(nèi)壁，設(shè)置的數(shù)量可根據(jù)需要設(shè)置，一般沿殼體內(nèi)壁周向均勻設(shè)置。[0018]為便于現(xiàn)場檢測人員實(shí)時(shí)讀取檢測數(shù)據(jù)，作為優(yōu)選，所述的殼體上設(shè)有用于顯示所述溫度信號(hào)、拉力信號(hào)和高度信號(hào)的液晶顯示屏，該液晶顯示屏上設(shè)有對(duì)所述控制器進(jìn)行參數(shù)設(shè)定的輸入?yún)^(qū)域。用戶通過液晶顯示屏讀取和設(shè)置培養(yǎng)裝置內(nèi)部的信息。通過控制器實(shí)現(xiàn)對(duì)各部件的控制，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0019]為便于生物結(jié)構(gòu)的夾持和拆卸，同時(shí)便于裝置的維修和清理，作為優(yōu)選，所述的殼體包括頂端敞口的筒體、以及蓋設(shè)在筒體頂端的頂板；所述的頂板底端固定有用于支撐所述驅(qū)動(dòng)電機(jī)的電機(jī)底座，所述驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸通過所述拉力傳感器與所述移動(dòng)夾具固定連接。頂板與筒體之間通過鎖緊裝置相互鎖定，所述鎖緊裝置為分布在頂板四個(gè)角落上的鎖，當(dāng)把鎖旋轉(zhuǎn)90度時(shí)，鎖的上端位于筒體頂端的上表面，鎖的下端位于筒體內(nèi)壁設(shè)置的槽內(nèi)，實(shí)現(xiàn)頂板與筒體的固定。
[0020]所述的電機(jī)底座可通過多種方式實(shí)現(xiàn)與頂板的固定，作為優(yōu)選，所述的頂板下表面固定有電機(jī)水平支架，電機(jī)水平支架上固定有電機(jī)垂直支架，所述的電機(jī)底座固定在電機(jī)垂直支架之間，驅(qū)動(dòng)電機(jī)布置在電機(jī)底座上。
[0021]為保證電機(jī)輸出軸按照預(yù)定的方向移動(dòng)，作為優(yōu)選，所述的電機(jī)底座底端固定有拉力導(dǎo)軌；所述的驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸上固定有穿套在所述拉力導(dǎo)軌上的導(dǎo)軌滑塊。拉力導(dǎo)軌一般設(shè)置兩個(gè)或者兩個(gè)以上，且沿電機(jī)輸出軸周向均勻設(shè)置。拉力導(dǎo)軌一般為外壁光滑的金屬軸結(jié)構(gòu)。通過控制器控制電機(jī)的工作頻率，在控制器和拉力傳感器的配合下，拉力傳感器反饋當(dāng)前的拉伸力 大小，實(shí)現(xiàn)可控的，不同頻率和不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷。
[0022]所述的固定夾具與移動(dòng)夾具可選用多種具有夾持功能的夾具結(jié)構(gòu)，作為優(yōu)選，所述的固定夾具與移動(dòng)夾具結(jié)構(gòu)相同，包括:固定座；固定在固定座一側(cè)的固定桿；固定在固定座內(nèi)的夾緊頭，該夾緊頭與固定桿的夾緊端之間構(gòu)成夾持所述生物結(jié)構(gòu)的夾持位；設(shè)置在固定座另一側(cè)用于將夾緊頭向固定桿的夾緊端方向推進(jìn)的推桿，該推桿與所述固定座之間為螺紋配合；將推桿與固定座相對(duì)固定的固定件；以及設(shè)于固定座與夾緊頭之間實(shí)現(xiàn)夾緊頭向遠(yuǎn)離推桿的夾緊端方向回位的復(fù)位彈簧。
[0023]針對(duì)生物結(jié)構(gòu)的特殊結(jié)構(gòu)構(gòu)造，一般生物結(jié)構(gòu)采用圓柱形，為便于生物結(jié)構(gòu)的夾持，作為優(yōu)選，所述的夾緊頭夾緊端端面為圓柱面，夾緊頭的材質(zhì)為硅膠，所夾生物結(jié)構(gòu)的直徑為2~40mm。
[0024]為提高夾緊頭對(duì)生物結(jié)構(gòu)的夾緊力，避免生物結(jié)構(gòu)脫落，作為優(yōu)選，所述的夾緊頭夾緊端端面設(shè)有與所述固定桿夾緊端配合夾緊槽。為便于推桿順利的將夾緊頭向固定桿夾緊端方向推進(jìn)，作為優(yōu)選，所述的夾緊頭背向夾緊端的一端設(shè)有容納推桿端部的凹槽，凹槽的直徑一般大于推桿的直徑，防止推桿與夾緊頭卡牢。
[0025]所述的推桿與固定座之間為螺紋配合，所述的固定件一般為套設(shè)在推桿上與其螺紋配合的螺母。為便于螺母的鎖緊，作為優(yōu)選，所述的推桿遠(yuǎn)離夾緊頭的一端端部設(shè)有防滑紋，或者在該端端部設(shè)置扳手卡接口等。
[0026]安裝在固定座一側(cè)的固定桿橫穿夾持物，夾持過程中固定桿的一端位于夾緊頭內(nèi)，通過固定桿固定螺栓將固定桿固定在固定座中，在固定座內(nèi)安裝有夾緊頭，夾緊頭背對(duì)固定桿的一側(cè)與推桿相連，推桿上安裝有推桿固定螺母，推桿與固定座采用螺紋連接，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)推桿帶動(dòng)夾緊頭運(yùn)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)夾持物的夾緊時(shí)，用推桿固定螺母實(shí)現(xiàn)對(duì)推桿當(dāng)前位置的固定，在固定夾具和夾緊頭之間安裝有2個(gè)復(fù)位彈簧，當(dāng)松開推桿時(shí)，通過復(fù)位彈簧實(shí)現(xiàn)夾緊頭的復(fù)位，在固定座的上表面安裝有蓋板，用來防止夾緊頭的脫落。通過固定桿橫穿夾持物，使得在夾緊頭夾緊夾持物的同時(shí)，又受到固定桿的作用力，保證夾具的夾緊作用，防止在拉伸過程中，夾持物的脫落。
[0027]所述頂板底面固定有兩個(gè)平行設(shè)置的支撐板，該兩個(gè)支撐板之間固定有用于隔離培養(yǎng)液的隔離板、以及高度可調(diào)的固定夾具底座，所述固定夾具固定在固定夾具底座上；所述溫度傳感器、液位傳感器和加熱裝置均設(shè)置在隔離板上。固定夾具底座與支撐板之間可采用多種可調(diào)結(jié)構(gòu)，作為優(yōu)選，所述的固定夾具底座兩側(cè)設(shè)有若干對(duì)螺紋孔；所述的兩個(gè)支撐板上設(shè)有對(duì)應(yīng)的固定孔，通過螺栓穿過固定孔將固定夾具底座固定在支撐板上。上述固定夾具底座可以在支撐板上運(yùn)動(dòng)，調(diào)節(jié)固定夾具底座與移動(dòng)夾具底座之間的距離，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同長度的生物結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)。
[0028]所述加熱裝置可采用加熱棒，加熱棒對(duì)稱分布在隔離板的兩端，通過加熱棒對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱，液體的溫度通過溫度傳感器反饋回來，實(shí)時(shí)讀取液體的溫度，并在液晶顯示屏上顯示，當(dāng)溫度達(dá)到設(shè)定的溫度時(shí)，控制器關(guān)閉加熱棒。
[0029]所述隔離板的材質(zhì)為亞克力透明板，能讓安裝在支撐板上的紫外燈的紫外光透過隔離板，起到殺菌的效果。
[0030]所述的隔離板與固定夾具底座之間固定有夾具導(dǎo)軌；所述的驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸端部穿過所述隔離板且固定有移動(dòng)夾具底座，該移動(dòng)夾具底座上設(shè)有供夾具導(dǎo)軌穿過的通孔，該通孔內(nèi)設(shè)有套接在夾具導(dǎo)軌的直線軸承；所述的移動(dòng)夾具固定在所述移動(dòng)夾具底座上。
[0031]對(duì)于本發(fā)明的裝置所培養(yǎng)的細(xì)胞，其包含在三維棒料結(jié)構(gòu)內(nèi)部，該結(jié)構(gòu)可以利用已有的技術(shù)，制造含細(xì)胞的活性凝膠棒料。方法1:采用瓊脂糖溶液混入細(xì)胞，澆注入圓柱形模具中，通過4°C的冷藏形成含細(xì)胞的活性瓊脂糖凝膠棒料。方法2:采用典型的三維生物打印設(shè)備打印出來，如可以采用微壓電式噴頭或微熱泡式噴頭噴射混有細(xì)胞的海藻酸鈉溶液到氯化鈣溶液中，形成混有細(xì)胞的海藻酸鈣凝膠棒狀結(jié)構(gòu)，上述細(xì)胞可以是軟骨細(xì)胞。
[0032]本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)方法，通過將細(xì)胞包含在棒狀結(jié)構(gòu)內(nèi)部，利用電機(jī)對(duì)棒狀結(jié)構(gòu)施加不同頻率和不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞施加三維動(dòng)態(tài)載荷，并且加上裝置內(nèi)部液體的流動(dòng)和溫控裝置，實(shí)現(xiàn)對(duì)體內(nèi)環(huán)境的模擬，將混有細(xì)胞的生物棒狀結(jié)構(gòu)安裝在細(xì)胞培養(yǎng)裝置中，根據(jù)不同細(xì)胞應(yīng)力刺激的需要，按照設(shè)定的程序?qū)ζ涫┘涌煽氐?，不同頻率和不同幅值的三維動(dòng)態(tài)載荷，模擬體內(nèi)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0033]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0034](1)本發(fā)明的裝置結(jié)構(gòu)簡單，制造成本低，易于操作，將混有細(xì)胞的生物結(jié)構(gòu)安裝在細(xì)胞培養(yǎng)裝置中，通過液晶顯示屏的操作，裝置就會(huì)按照設(shè)定的程序?qū)ζ溥M(jìn)行力可控的往復(fù)拉伸操作，模擬體內(nèi)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0035](2)本發(fā)明的裝置體積小，便攜，能同時(shí)對(duì)多個(gè)結(jié)構(gòu)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
[0036](3)本發(fā)明的裝置是一個(gè)獨(dú)立的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，使用時(shí)，只需要裝置接上電源，外部提供培養(yǎng)液即可，在一般的實(shí)驗(yàn)室都能進(jìn)行操作。
[0037](4)本發(fā)明的裝置能夠?qū)?xì)胞受到的載荷進(jìn)行控制，按照不同細(xì)胞應(yīng)力刺激的需要，產(chǎn)生不同頻率，不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷，可以長時(shí)間的自動(dòng)工作，而且機(jī)構(gòu)簡單，工作可
靠O
[0038](5)能夠?qū)?xì)胞施加三維動(dòng)態(tài)載荷，并且加上裝置內(nèi)部液體的流動(dòng)和溫控裝置，實(shí)現(xiàn)對(duì)體內(nèi)環(huán)境更好的模擬。
[0039](6)夾緊裝置的獨(dú)特設(shè)計(jì)，可以裝夾不同尺寸的結(jié)構(gòu)。
[0040]( 7 )支撐板的獨(dú)特設(shè)計(jì)，使得固定夾具底座能在支撐板上運(yùn)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同長度的生物結(jié)構(gòu)的拉伸。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0041]圖1是本發(fā)明的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
[0042]圖2是本發(fā)明的鎖緊裝置鎖緊結(jié)構(gòu)示意圖。
[0043]圖3是本發(fā)明的鎖緊裝置松開結(jié)構(gòu)示意圖。
[0044]圖4是本發(fā)明的驅(qū)動(dòng)電機(jī)安裝結(jié)構(gòu)示意圖。
[0045]圖5是本發(fā)明的夾緊裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
[0046]圖6是本發(fā)明的夾緊裝置的俯視圖。
[0047]圖7是本發(fā)明的加熱裝置安裝結(jié)構(gòu)主視圖。
[0048]圖8是本發(fā)明的隔離板的俯視圖。
[0049]圖中:1為筒體,2為頂板,3為液晶顯示屏,4為驅(qū)動(dòng)電機(jī),5為控制器,6為加熱裝置，7為進(jìn)液閥,8為夾緊裝置,9為出液閥，10為支撐板,11為隔離板，12為紫外燈，13為鎖，14為電機(jī)水平支架，15為電機(jī)垂直支架，16為電機(jī)本體，17為電機(jī)底座，18為拉力導(dǎo)軌，19為導(dǎo)軌滑塊，20為導(dǎo)軌下板，21為傳感器上端連接器，22為拉力傳感器，23為傳感器下端連接器，24為移動(dòng)夾具底座，25為直線軸承，26為夾具導(dǎo)軌，27為固定夾具底座，28a為固定夾具、28b為移動(dòng)夾具，29為固定座，30為蓋板，31為推桿固定螺母，32為推桿，33為夾緊頭，34為復(fù)位彈簧，35為固定桿固定螺栓，36為固定桿，37為加熱棒，38為溫度傳感器，39為液位傳感器。
【具體實(shí)施方式】
[0050]如圖1、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6、圖7、圖8所示，一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，包括:用于盛放培養(yǎng)液的殼體、用于對(duì)生物結(jié)構(gòu)進(jìn)行夾持的夾緊裝置8、對(duì)夾緊裝置8提供驅(qū)動(dòng)力的驅(qū)動(dòng)電機(jī)4、用于對(duì)殼體內(nèi)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱的加熱裝置6、用于檢測培養(yǎng)液溫度的溫度傳感器38、用于檢測生物結(jié)構(gòu)所受拉力的拉力傳感器22、用于檢測培養(yǎng)液液位的液位傳感器39以及對(duì)培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行殺毒的紫外燈12。夾緊裝置8位于驅(qū)動(dòng)電機(jī)4的下端；驅(qū)動(dòng)電機(jī)4和夾緊裝置8之間安裝有隔離板11。
[0051]上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，如圖1所示，殼體包括頂端敞口的筒體1、以及蓋設(shè)在筒體I頂端的頂板2，頂板2上設(shè)有液晶顯示屏。筒體I的材質(zhì)為亞克力透明板，其形狀為上表面敞開的長方體空心盒，筒體I的左右兩側(cè)分別安裝有出液口和進(jìn)液口，出液口內(nèi)設(shè)有出液閥9，進(jìn)液口內(nèi)設(shè)有進(jìn)液閥7，出液閥9和進(jìn)液閥7均可采用電控閥，出液閥9和進(jìn)液閥7與控制器5相連，通過控制器5控制進(jìn)液閥7的開啟和出液閥9的關(guān)閉，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的流入，當(dāng)液位傳感器39檢測到液體時(shí)，反饋給控制器5，控制器5關(guān)閉進(jìn)液閥。由于筒體I為透明的亞克力板，也可以手動(dòng)給裝置加培養(yǎng)液，當(dāng)觀察到液面達(dá)到一定的高度時(shí)，停止培養(yǎng)液的供應(yīng)。當(dāng)需要實(shí)現(xiàn)裝置內(nèi)液體的流動(dòng)時(shí)，通過在加滿培養(yǎng)液后，即打開進(jìn)液閥7，又打開出液閥9來實(shí)現(xiàn)，通過閥開口的大小來實(shí)現(xiàn)流速的控制。[0052]上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，如圖1、圖2和圖3所示，鎖緊裝置為分布在頂板四個(gè)角落上的鎖13，鎖13為卡合的可拆卸結(jié)構(gòu)，外形為“[”型，如圖2所示，當(dāng)把鎖13旋轉(zhuǎn)90度時(shí)，鎖13的上端位于筒體I的側(cè)壁頂端表面，鎖13的下端位于筒體I內(nèi)兩側(cè)壁設(shè)置的槽內(nèi)，實(shí)現(xiàn)頂板2與筒體I的固定。如圖3所示，當(dāng)需要裝夾夾持物時(shí)，只需要反向旋轉(zhuǎn)鎖90度，就實(shí)現(xiàn)了頂板2與筒體I的分離，可以取出頂板2。
[0053]驅(qū)動(dòng)電機(jī)4安裝在頂板2上。驅(qū)動(dòng)電機(jī)4包括電機(jī)本體16和電機(jī)輸出軸，電機(jī)本體16通過電機(jī)安裝機(jī)構(gòu)與頂板2固定，上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，如圖4所示，電機(jī)安裝機(jī)構(gòu)包括安裝在頂板2下表面的電機(jī)水平支架14、安裝電機(jī)水平支架14底面的電機(jī)垂直支架15，以及安裝在2個(gè)電機(jī)垂直支架15之間的電機(jī)底座17，上述電機(jī)底座17底面上安裝有拉力導(dǎo)軌18，拉力導(dǎo)軌18的另一端安裝在導(dǎo)軌下板20上，拉力導(dǎo)軌18上滑動(dòng)配合安裝有導(dǎo)軌滑塊19，導(dǎo)軌滑塊19固定在驅(qū)動(dòng)電機(jī)的輸出軸上。電機(jī)底座17上安裝有驅(qū)動(dòng)電機(jī)4，驅(qū)動(dòng)電機(jī)4的輸出軸與傳感器上端連接器21相連，傳感器上端連接器21與拉力傳感器22相連，拉力傳感器22與傳感器下端連接器23相連。拉力傳感器22用于檢測生物結(jié)構(gòu)所受到的拉力，并輸出拉力信號(hào)?？刂破?按照用戶設(shè)定的需求，控制驅(qū)動(dòng)電機(jī)的工作頻率和輸出力，在拉力傳感器22反饋當(dāng)前的拉伸力大小的配合下，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞施加可控的，不同頻率和不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷。
[0054]上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，如圖5所示，夾緊裝置8設(shè)于殼體內(nèi)用于夾持生物結(jié)構(gòu)，包括一個(gè)或多個(gè)固定夾具28a、以及與固定夾具28a相互對(duì)正設(shè)置的移動(dòng)夾具28b，生物結(jié)構(gòu)夾持于固定夾具28a與移動(dòng)夾具28b之間。夾緊裝置8還包括與傳感器下端連接器23相連的移動(dòng)夾具底座24，安裝在上述移動(dòng)夾具底座24上的直線軸承25，上述直線軸承25上安裝有夾具導(dǎo)軌26，在移動(dòng)夾具底座24的正下方安裝有固定夾具底座27。夾具導(dǎo)軌26的一端固定安裝在隔離板11上，另一端固定安裝在固定夾具底座27上，在移動(dòng)夾具底座24上安裝有4個(gè)均勻分布的移動(dòng)夾具28b，固定夾具底座27上安裝有4個(gè)均勻分布的固定夾具28a，移動(dòng)夾具28b和固定夾具28a相互對(duì)正設(shè)置，移動(dòng)夾具底座24在驅(qū)動(dòng)電機(jī)4的作用下沿著夾具導(dǎo)軌26上下運(yùn)動(dòng)`，實(shí)現(xiàn)與固定夾具底座27之間的相對(duì)運(yùn)動(dòng)，完成對(duì)夾持物的拉伸，并且能保證4個(gè)夾持物所受到的拉伸力相同。上述固定夾具底座27安裝在支撐板10上，支撐板10為兩個(gè)，頂端與頂板2相連，實(shí)現(xiàn)固定夾具底座27與頂板2的固定，保證了固定夾具底座27與移動(dòng)夾具底座24之間的相對(duì)運(yùn)動(dòng)。
[0055]如圖6所示，上述移動(dòng)夾具28b和固定夾具28a結(jié)構(gòu)相同，包括安裝在固定夾具底座27或者移動(dòng)夾具底座24上的固定座29，安裝在固定座29左側(cè)的固定桿36，固定桿36的一端穿過固定座29,通過固定桿固定螺栓35將固定桿36固定在固定座29中,在上述固定座29內(nèi)安裝有夾緊頭33，上述夾緊頭33的右側(cè)與推桿32相連，上述推桿32上安裝有推桿固定螺母31，上述推桿32與固定座29采用螺紋連接，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)推桿32帶動(dòng)夾緊頭33向固定桿36運(yùn)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)夾持物的夾緊時(shí)，用推桿固定螺母31實(shí)現(xiàn)對(duì)推桿32當(dāng)前位置的固定，達(dá)到夾緊夾持物的目的。在固定座29和夾緊頭33之間安裝有2個(gè)復(fù)位彈簧34，在夾緊夾持物時(shí)，復(fù)位彈簧34處于壓縮狀態(tài)，當(dāng)松開推桿32時(shí)，復(fù)位彈簧34反彈，實(shí)現(xiàn)夾緊頭33的復(fù)位，卸下夾持物。在固定座29的上表面安裝有蓋板30，用來防止夾緊頭33的脫落。在裝夾時(shí)，通過固定桿36橫穿夾持物，使得在夾緊頭33夾緊夾持物的同時(shí)，又受到固定桿36的作用力，保證夾具的夾緊作用，防止在往復(fù)拉伸過程中，夾持物的脫落。[0056]上述移動(dòng)夾具28b和固定夾具28a中的夾緊頭33端面為半圓柱體，夾緊頭33的材質(zhì)為硅膠，所夾物體的直徑為2~40mm。上述移動(dòng)夾具28b和固定夾具28a中的推桿32頭部為光軸，在夾緊頭33內(nèi)部平動(dòng)，只起水平推動(dòng)作用，中間部位有外螺紋，尾部有防滑紋，便于對(duì)推桿的固定。
[0057]上述固定夾具底座27可以在支撐板10上進(jìn)行高度調(diào)整，通過調(diào)節(jié)固定夾具底座27與移動(dòng)夾具底座24之間的距離，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同長度的生物結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)。固定夾具底座27兩側(cè)設(shè)有螺孔，通過螺栓將固定夾具底座27固定在支撐板10適當(dāng)?shù)奈恢谩?br> [0058]隔離板11的材質(zhì)為亞克力透明板，能讓安裝在支撐板10上的紫外燈12的紫外光透過隔離板11，起到殺菌的效果。紫外燈12位于頂板2與隔離板11之間；溫控裝置6和控制器5安裝在隔離板11上。
[0059]上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，如圖7、圖8所示，加熱裝置6為分別安裝在隔離板11兩端的加熱棒37，溫度傳感器38安裝在隔離板11上，用于檢測培養(yǎng)液溫度，并將溫度信號(hào)輸出。加熱棒37對(duì)稱分布在隔離板11的兩端，在液晶顯示屏3上設(shè)定一個(gè)溫度值，數(shù)據(jù)就會(huì)發(fā)送到控制器5,然后處理后發(fā)給加熱棒37,通過加熱棒37對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱,液體的溫度通過溫度傳感器38反饋給控制器5，實(shí)時(shí)讀取液體的溫度，并在液晶顯示屏3上顯示設(shè)定的溫度值和當(dāng)前的溫度值，控制器5按照一定的算法，控制加熱棒37的開和關(guān)，例如:當(dāng)溫度達(dá)到某個(gè)溫度值時(shí)，控制器5關(guān)閉加熱棒37，當(dāng)溫度低于某一值時(shí)，再次開啟加熱棒37，使液體的溫度控制在一個(gè)設(shè)定的正常小范圍內(nèi)變化。
[0060]上述的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，控制器5與進(jìn)液閥7、出液閥9、驅(qū)動(dòng)電機(jī)4、紫外燈12、拉力傳感器22、加熱棒37、溫度傳感器38、液位傳感器39和液晶顯示屏3相連，用戶通過液晶顯示屏讀取和設(shè)置培養(yǎng)裝置內(nèi)部的信息，通過控制器5實(shí)現(xiàn)對(duì)各部件的控制，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0061]本發(fā)明的模擬體內(nèi)環(huán)境的方法:通過將`細(xì)胞包含在棒狀結(jié)構(gòu)內(nèi)部，利用電機(jī)對(duì)棒狀結(jié)構(gòu)施加不同頻率和不同幅值的動(dòng)態(tài)載荷，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞施加三維動(dòng)態(tài)載荷，并且加上裝置內(nèi)部液體的流動(dòng)和溫控裝置，實(shí)現(xiàn)對(duì)體內(nèi)環(huán)境的模擬。
[0062]本發(fā)明的裝置裝夾生物結(jié)構(gòu)過程:把頂板2上的鎖13打開，抽出頂板2，筒體I中的所有裝置都會(huì)跟著頂板2被抽出，然后把生物結(jié)構(gòu)的一端放進(jìn)移動(dòng)夾具底座24上的移動(dòng)夾具28b里，另一端放進(jìn)位于正下方的固定夾具底座27上的固定夾具28a里，根據(jù)生物結(jié)構(gòu)的不同長度，可以調(diào)節(jié)固定夾具底座27在支撐板10上的位置，固定夾具28a和移動(dòng)夾具28b為同一種夾具，夾緊方法相同，當(dāng)生物結(jié)構(gòu)底部與固定座29接觸后，旋轉(zhuǎn)推桿32，使推桿32帶動(dòng)推桿32前面的夾緊頭33向生物結(jié)構(gòu)運(yùn)動(dòng)，把生物結(jié)構(gòu)夾緊在固定座29與夾緊頭33之間，然后轉(zhuǎn)動(dòng)推桿固定螺母31，鎖住推桿32，接著移動(dòng)固定座29中的固定桿36，使其穿過生物結(jié)構(gòu)，進(jìn)入夾緊頭33內(nèi)部，最后用固定桿固定螺栓35鎖住固定桿36，等裝夾完所有的生物結(jié)構(gòu)后，把頂板2重新放到筒體上，用鎖13鎖住。
[0063]本發(fā)明的裝置載荷施加過程:通過液晶顯示屏3設(shè)置拉伸力的大小和拉伸頻率，數(shù)據(jù)經(jīng)控制器5傳送到驅(qū)動(dòng)電機(jī)4，電機(jī)軸按照設(shè)定的值上下運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)經(jīng)過傳感器上端連接器21，拉力傳感器22，傳感器下端連接器23傳送到移動(dòng)夾具底座24，帶動(dòng)移動(dòng)夾具上下運(yùn)動(dòng)，同時(shí)，拉力傳感器22把當(dāng)前的拉力值反饋給控制器5，控制器5通過一定的算法處理后，發(fā)送新的數(shù)據(jù)給驅(qū)動(dòng)電機(jī)4，實(shí)現(xiàn)閉環(huán)控制，達(dá)到設(shè)定的拉伸力值，完成生物結(jié)構(gòu)的拉伸過程。上述拉伸力不一定是常值，根據(jù)不同細(xì)胞應(yīng)力刺激的需要，可以設(shè)定不同的拉伸力曲線，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0064]本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)過程:把細(xì)胞培養(yǎng)裝置放到一個(gè)合適的位置上，筒體I的右側(cè)連接進(jìn)液端，左側(cè)連接出液端，用液晶顯示屏3開啟紫外燈12，對(duì)裝置內(nèi)部進(jìn)行殺菌處理，經(jīng)過一段時(shí)間后，把混有細(xì)胞的生物結(jié)構(gòu)安裝在夾緊裝置8中，在液晶顯示屏3上設(shè)定拉伸力曲線，拉伸頻率，液體溫度和液體流動(dòng)速度，點(diǎn)擊開始按鈕，培養(yǎng)液進(jìn)入裝置內(nèi)，然后開始對(duì)生物結(jié)構(gòu)施加載荷，模擬體內(nèi)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0065]具體實(shí)例
[0066]用本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)裝置拉伸混有軟骨細(xì)胞的棒狀生物結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0067]步驟一、將軟骨細(xì)胞混入瓊脂糖溶液中，將混合均勻后的溶液澆注入圓柱形模具中，通過4°C的冷藏形成含軟骨細(xì)胞的活性瓊脂糖凝膠棒料。
[0068]步驟二、打開紫外燈，經(jīng)過一段時(shí)間后，打開鎖，抽出細(xì)胞培養(yǎng)裝置內(nèi)部的夾緊裝置，將上述混有軟骨細(xì)胞的海藻酸鈣凝膠棒狀結(jié)構(gòu)裝夾到夾緊裝置中，然后把其放到筒體內(nèi)部，鎖上鎖，在細(xì)胞培養(yǎng)裝置的右側(cè)連接培養(yǎng)液進(jìn)液端，左側(cè)連接出液端。
[0069]步驟三、在液晶顯示屏上，設(shè)定對(duì)棒狀結(jié)構(gòu)的拉伸力曲線，拉伸頻率，培養(yǎng)液的液體溫度和液體流動(dòng)速度，點(diǎn)擊開始按鈕，培養(yǎng)液進(jìn)入裝置內(nèi)部，裝置內(nèi)的液體產(chǎn)生一定的流動(dòng)速度，然后電機(jī)工作，開始對(duì)棒狀生物結(jié)構(gòu)施加載荷，當(dāng)液體溫度低于某個(gè)值時(shí)，加熱棒工作，維持液體溫度在一個(gè)小的范圍內(nèi)，實(shí)現(xiàn)對(duì)軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)。
[0070]上述步驟一也可以采用這種方法，采用三維生物打印設(shè)備，將混有軟骨細(xì)胞的海藻酸鈉溶液通過微壓電噴頭噴射到正下方的氯化鈣溶液中，通過工作面的升降和噴頭的平面運(yùn)動(dòng)，打印出一個(gè)混有軟骨細(xì)胞的海藻酸鈣凝膠棒狀結(jié)構(gòu)。
【權(quán)利要求】
1.一種可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，包括用于盛放培養(yǎng)液的殼體；其特征在于，還包括: 設(shè)于殼體內(nèi)用于夾持生物結(jié)構(gòu)的夾緊裝置，該夾緊裝置包括一個(gè)或多個(gè)固定夾具、以及與所述固定夾具相互對(duì)正的移動(dòng)夾具，所述生物結(jié)構(gòu)夾持于固定夾具與移動(dòng)夾具之間；對(duì)移動(dòng)夾具提供驅(qū)動(dòng)力的驅(qū)動(dòng)電機(jī)； 用于對(duì)殼體內(nèi)培養(yǎng)液進(jìn)行加熱的加熱裝置； 用于檢測培養(yǎng)液溫度的溫度傳感器，并將溫度信號(hào)輸出； 用于檢測生物結(jié)構(gòu)所受拉力的拉力傳感器，并將拉力信號(hào)輸出； 控制器，同于接收所述溫度信號(hào)和拉力信號(hào)，同時(shí)根據(jù)接收的信號(hào)信息，對(duì)驅(qū)動(dòng)電機(jī)和加熱裝置輸出控制信號(hào)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，還包括: 用于對(duì)殼體注入培養(yǎng)液的加料裝置； 用于檢測培養(yǎng)液的液面高度的液位傳感器，并將高度信號(hào)輸出； 所述控制器同時(shí)接收所述的高度信號(hào)，并對(duì)加料裝置輸出控制信號(hào)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，還包括設(shè)置在殼體內(nèi)用于對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行殺毒的紫外燈。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可施加動(dòng)`態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的殼體上設(shè)有用于顯示所述溫度信號(hào)、拉力信號(hào)和高度信號(hào)的液晶顯示屏，該液晶顯示屏上設(shè)有對(duì)所述控制器進(jìn)行參數(shù)設(shè)定的輸入?yún)^(qū)域。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一權(quán)項(xiàng)所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的殼體包括頂端敞口的筒體、以及蓋設(shè)在筒體頂端的頂板；所述的頂板底端固定有用于支撐所述驅(qū)動(dòng)電機(jī)的電機(jī)底座，所述驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸通過所述拉力傳感器與所述移動(dòng)夾具固定連接。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的電機(jī)底座底端固定有拉力導(dǎo)軌；所述的驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸上固定有穿套在所述拉力導(dǎo)軌上的導(dǎo)軌滑塊。
7.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一權(quán)項(xiàng)所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的固定夾具與移動(dòng)夾具結(jié)構(gòu)相同，包括: 固定座； 固定在固定座一側(cè)的固定桿； 固定在固定座內(nèi)的夾緊頭，該夾緊頭與固定桿的夾緊端之間構(gòu)成夾持所述生物結(jié)構(gòu)的夾持位； 設(shè)置在固定座另一側(cè)用于將夾緊頭向固定桿的夾緊端方向推進(jìn)的推桿，該推桿與所述固定座之間為螺紋配合； 將推桿與固定座相對(duì)固定的固定件； 以及設(shè)于固定座與夾緊頭之間實(shí)現(xiàn)夾緊頭向遠(yuǎn)離推桿的夾緊端方向回位的復(fù)位彈簧。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的頂板底面固定有兩個(gè)平行設(shè)置的支撐板，該兩個(gè)支撐板之間固定有用于隔離培養(yǎng)液的隔離板、以及高度可調(diào)的固定夾具底座，所述固定夾具固定在固定夾具底座上；所述溫度傳感器、液位傳感器和加熱裝置均設(shè)置在隔離板上。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的隔離板與固定夾具底座之間固定有夾具導(dǎo)軌；所述的驅(qū)動(dòng)電機(jī)輸出軸端部穿過所述隔離板且固定有移動(dòng)夾具底座，該移動(dòng)夾具底座上設(shè)有供夾具導(dǎo)軌穿過的通孔，該通孔內(nèi)設(shè)有套接在夾具導(dǎo)軌的直線軸承；所述的移動(dòng)夾具固定在所述移動(dòng)夾具底座上。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的可施加動(dòng)態(tài)載荷的細(xì)胞三維受力培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述的夾緊頭夾 緊端端面為圓柱面，夾緊頭的材質(zhì)為硅膠，所夾生物結(jié)構(gòu)的直徑為2~40_。
【文檔編號(hào)】C12M1/36GK103756898SQ201310724947
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2013年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月24日
【發(fā)明者】賀永, 邵惠鋒, 傅建中, 朱偉杰, 賴金濤 申請人:浙江大學(xué)