一種基于藥食同源的驢奶粉配方的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于藥食同源的驢奶粉配方，配方以驢奶粉為主，輔以添加益生元、益生菌及藥食同源可用的山藥、百合、核桃等。該驢奶粉配方能顯著增加免疫低下小鼠的免疫力，具體體現(xiàn)在顯著地提高淋巴細胞的轉(zhuǎn)化能力（細胞免疫功能），增加血清溶血素的生成量（體液免疫功能），增強碳廓清能力（單核巨噬細胞功能）和NK細胞的殺傷活性（NK細胞活性）。
【專利說明】—種基于藥食同源的驢奶粉配方【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于保健領域，具體來說是一種增強機體免疫力的驢奶粉配方。
【背景技術】
[0002]驢奶由于具有良好的藥效，在國內(nèi)外典籍中多有涉及。如在我國《本草綱目》中記載:“驢乳，氣味甘，冷利，無毒，熱頻飲之可治氣郁，解小兒熱毒，不生痘疹”;在維吾爾和蒙古等少數(shù)名族醫(yī)學中，有用驢奶治療結(jié)核病、肝硬化和胃潰瘍、百日咳的記載。此外，秘魯人認為驢奶可治氣喘、氣管炎、糖尿病等疾病。已有科學研究發(fā)現(xiàn)，鮮驢奶對豬霍亂沙門氏菌及志賀氏菌具有顯著的抑制作用；同時Xueying Mao報道，驢奶與人肺癌細胞A549共孵育后，起到抗腫瘤和抑制腫瘤增殖分化的作用；馬龍等研究證實鮮驢奶脂肪在體外具有抑制結(jié)核桿菌生長的作用；蘇德奇研究表明高劑量的鮮驢乳具有抗氧化作用，并猜測與驢奶中富含溶菌酶和維生素C有關。然而，目前對驢奶的研究主要集中于其營養(yǎng)成分的分析，而在驢奶的綜合開發(fā)利用方面上缺乏深入系統(tǒng)的研究。因此，開展驢奶粉復合配方的應用基礎研究，拓寬其應用途徑，具有重要的社會經(jīng)濟效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供如下技術路線:
本發(fā)明旨在為驢奶的市場開發(fā)提供新途徑，以驢奶粉為基質(zhì)，輔以添加益生元、益生菌以及藥食同源的山藥、百合和核桃，尋找一種增強機體免疫力的驢奶粉配方。本發(fā)明包括如下技術方案:
一種基于藥食同源的驢奶粉配方，驢奶粉中添加益生元、益生菌以及山藥、百合和核
桃。`
[0004]所述的益生元為低聚果糖、菊糖和低聚半乳糖的混合物，各按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉。
[0005]所述的益生菌采用菌粉活菌數(shù)為5.0X 10lclcfu/g的鼠李糖乳桿菌,各按0.4 mg/g的劑量添加到驢奶粉。
[0006]所述山藥、百合和核桃,分別按0.9 mg/g、L2 mg/g和0.6 mg/g劑量添加到驢奶粉。
[0007]本驢奶粉配方能顯著增強免疫力。
[0008]為評價本發(fā)明在驢奶粉的基礎上進一步增強機體免疫力，通過對免疫低下小鼠進行分組灌胃，含生理鹽水組，驢奶粉組和驢奶粉配方組。
[0009]在采用腹腔注射環(huán)磷酰胺制備免疫低下小鼠后，按灌胃組別分別連續(xù)灌胃28天。
[0010]灌胃結(jié)束后，取小鼠脾臟，研磨得到脾淋巴細胞，添加ConA刺激淋巴細胞，觀察不同灌胃組別小鼠的淋巴細胞的轉(zhuǎn)化能力。
[0011]灌胃結(jié)束后，通過尾靜脈注射墨汁，評價不同灌胃組別小鼠的碳廓清能力。
[0012]在灌胃結(jié)束前的第四天，腹腔注射綿陽血紅細胞，待灌胃結(jié)束后取小鼠脾臟研磨得到脾淋巴細胞，評價NK細胞對靶細胞YAC-1的殺傷能力。
[0013]在灌胃結(jié)束前的第四天，腹腔注射綿陽血紅細胞，待灌胃結(jié)束后取血，測定血清溶血素的生成。
【具體實施方式】
[0014]實施例1
一種基于藥食同源的驢奶粉配方，驢奶粉中添加益生元、益生菌以及山藥、百合和核桃。所述的益生元為低聚果糖、菊糖和低聚半乳糖的混合物，各按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉。所述的益生菌采用菌粉活菌數(shù)為5.0\101(1(^11/^的鼠李糖乳桿菌，各按0.4 mg/g的劑量添加到驢奶粉。所述山藥、百合和核桃，分別按0.9 mg/g、1.2 mg/g和0.6 mg/g劑量添加到驢奶粉。
[0015]實施例2
免疫低下小鼠的制備:購買BALB/c小鼠72只，放置動物房觀察一周后，隔日腹腔注射環(huán)磷酰胺溶液，第一天按100 mg/kg劑量注射,第三天按80 mg/kg劑量注射,制備免疫低下小鼠
小鼠灌胃組別的設置:將小鼠隨機分成3組，每組10只，依次為空白組，驢奶組，保健驢奶粉組。每組小鼠灌喂期均為28天，每只小鼠的灌喂量為300 yL/日?？瞻捉M的小鼠灌胃0.85%的無菌生理鹽水，驢奶粉組和驢奶粉配方組的小鼠按5 g/kg的劑量灌胃。
[0016]脾細胞懸液的制備:采用勁椎脫臼法處死小鼠，用75%的乙醇浸泡2 min中，消毒處理。將小鼠置于解剖托盤中，沿腹膜解剖小鼠，無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank’s液平皿中，去除脾臟上粘連的結(jié)締組`織，并輕輕洗滌后將脾轉(zhuǎn)移至無菌Hank’s液平皿中。用鑷子將脾在40目紗布上輕輕磨碎，經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾后獲得單細胞懸液。細胞懸液經(jīng)1000rpm離心10 min后，按10:1比例加入紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻，裂解時間約5 min左右。1000 rpm離心10 min,去除上清液,細胞沉淀用無菌Hank’s液洗漆2次。將細胞懸浮于I mL RPMI1640完全培養(yǎng)液中，用臺盼蘭染色計數(shù)活細胞數(shù)(應在95%以上)，調(diào)整細胞濃度為3 X IO6個/mL。
[0017]細胞免疫功能的測定——小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗:將每一份脾細胞懸液分4孔加入24孔細胞培養(yǎng)板中，每孔I mL，其中3個孔作為平行樣孔，均加入50 μ L ConA液(相當于5 μ g/mL)，剩余I孔中加入50 μ L細胞培養(yǎng)液代替ConA液作為空白孔。置5% CO2, 37°C孵箱中培養(yǎng)72 h ;培養(yǎng)結(jié)束前4 h，每孔輕輕吸去0.7 mL上清液，再加入0.7 mL不含血清的RPMI1640培養(yǎng)液，同時每孔加入50 μ LMTT溶液(5 mg/mL),繼續(xù)培養(yǎng)4 h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入I mL酸性異丙醇，充分吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解。然后分裝到96孔培養(yǎng)板中，每個孔作3個平行孔，于酶標儀570 nm波長下測量各孔的吸光OD值并記錄。實驗結(jié)果如表1所示，結(jié)果表明:與生理鹽水組相比，灌胃單一組分的驢奶粉不能提高脾淋巴細胞的轉(zhuǎn)化率(P>0.05)，而灌胃驢奶粉配方組小鼠的脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化率顯著高于驢奶粉組的小鼠(P〈0.05)。
[0018]表1不同的灌胃組別對Con-A誘導的脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化的影響(X土SD)
【權(quán)利要求】
1.一種基于藥食同源的驢奶粉配方，其特征在于:驢奶粉中添加益生元、益生菌以及山藥、百合和核桃。
2.如權(quán)利要求1中所述的驢奶粉配方，其特征在于:所述的益生元為低聚果糖、菊糖和低聚半乳糖的混合物，各按0.985 mg/g劑量添加到驢奶粉。
3.如權(quán)利要求1中所述的驢奶粉配方，其特征在于:所述的益生菌采用菌粉活菌數(shù)為5.0X1010cfu/g的鼠李糖乳桿菌，各按0.4 mg/g的劑量添加到驢奶粉。
4.如權(quán)利要求1中所述的驢奶粉配方，其特征在于:所述山藥、百合和核桃，分別按0.9mg/g、L2 mg/g和0.6 mg/g劑量添加到驢奶粉。
【文檔編號】A23C9/156GK103704349SQ201310694005
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月18日
【發(fā)明者】魏華, 徐鋒, 許恒毅, 彭珊珊, 熊勇華, 何麗華, 黃楚楚, 楊棟 申請人:南昌大學