阿氏芽孢桿菌及其在防治煙草黑脛病中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】阿氏芽孢桿菌及其在防治煙草黑脛病中的應(yīng)用，本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌命名為阿氏芽孢桿菌J-6（Bacillus?aryabhattai?J-6），已在保藏單位保藏，保藏單位名稱：中國典型培養(yǎng)物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2013年10月17日，保藏編號為CCTCC?NO：M2013475。該阿氏芽孢桿菌J-6（Bacillus?aryabhattai?J-6）應(yīng)用于防治煙草黑脛病。本發(fā)明的優(yōu)點在于阿氏芽孢桿菌J-6具有對人、畜、農(nóng)作物安全和環(huán)境友好的特點，對煙草黑脛病防治有顯著效果。
【專利說明】阿氏芽孢桿菌及其在防治煙草黑脛病中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種具有較好防治煙草黑脛病能力的微生物菌株及其在防治煙草黑脛病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]煙草是我國重要的經(jīng)濟作物之一，黑脛病是煙草生產(chǎn)中危害最嚴(yán)重的病害之一，每年因黑脛病造成的經(jīng)濟損失達(dá)I億元以上。煙草黑脛病的致病菌為煙草黑脛病菌(Phytophthora parasitca var.nicotianae Tucker),主要表現(xiàn)為煙草矮化、萎焉、葉片發(fā)黃、根和莖基部壞死，平均發(fā)病率為5%~14%，重者損失達(dá)到75%，甚至絕收。目前對該病主要采用化學(xué)防治為主，抗病品種和栽培措施為輔的綜合防治方法。由于長期使用甲霜靈和代森錳鋅及其混劑等此類化學(xué)農(nóng)藥，使病原菌產(chǎn)生不同程度的抗藥性，導(dǎo)致防治效果差，甚至難以控制病原菌危害。另外過多施用化學(xué)藥劑，造成的農(nóng)藥殘留對人畜危害和環(huán)境污染，對生態(tài)環(huán)境造成 不可逆轉(zhuǎn)的影響。
[0003]針對施用化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生的抗藥性給煙草黑脛病防治工作帶來阿氏困難，同時也給農(nóng)藥的開發(fā)和生產(chǎn)帶來嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，近年來應(yīng)用生物方法預(yù)防植物病害的研究越來越受到人們的關(guān)注，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性的方法就是一種比較成功的方法。誘導(dǎo)植物抗性是指利用物理、化學(xué)以及生物的方法，預(yù)先處理植物，誘導(dǎo)植物啟動自身的防御機制，增強對后續(xù)病原物的抵抗力，是植物防御植食者的基本策略之一，它使得植物只在需要的時候、需要的部位產(chǎn)生必要數(shù)量的防御物質(zhì)，從而節(jié)省能量，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生的抗性在反應(yīng)、效果、信息等方面具有很高的特異性。
[0004]微生物方法中利用芽孢桿菌誘導(dǎo)植物植株抗病性已有較多報道。芽孢桿菌普遍存在于環(huán)境中，芽孢桿菌中的許多菌株都有一些特別的功能，在工業(yè)、農(nóng)業(yè)及醫(yī)學(xué)上均有廣泛的應(yīng)用。近年來農(nóng)業(yè)上芽孢桿菌作為生防菌來減輕有害動物、植物的危害程度成為研究關(guān)注熱點、重點之一，如國內(nèi)外關(guān)于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)具有抑制植物病害的功能已有較多的研究報道，以及應(yīng)用在一些生物肥和農(nóng)藥上。但阿氏芽孢桿菌抑制植物病害的研究較少，利用阿氏芽孢桿菌誘導(dǎo)煙葉產(chǎn)生黑脛病的抗病性或抑制煙葉黑脛病鮮見報道。
[0005]應(yīng)用微生物方法，誘導(dǎo)植物抗性具有多抗、高抗和安全等優(yōu)點，對煙草安全生產(chǎn)及可持續(xù)性發(fā)展具有極大的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供一種可從燈盞花中分離到的內(nèi)生芽孢桿菌一阿氏芽孢桿菌J-6 (Bacillus aryabhattai J_6)以及將其用于防治煙
草黑脛病。
[0007]本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌命名為阿氏芽孢桿菌J-6 (Bacillus aryabhattaiJ-6),已在保藏單位保藏，保藏單位名稱:中國典型培養(yǎng)物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2013年10月17日，保藏編號為CCTCC NO:M2013475。
[0008]本發(fā)明所述阿氏芽孢桿菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-6)應(yīng)用于防治煙草黑脛病。
[0009]本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌J-6菌株經(jīng)PCR技術(shù)，DNA測序儀分析，該菌株的16SrDNA序列由1533個堿基組成。用BLAST程序?qū)-6菌株的16S rDNA序列和GenBank中已登錄的16S rDNA序列進行核苷酸同源性比較，結(jié)果與已報道的阿氏芽孢桿菌Bacillusaryabhattai (登錄號EFl 14313.2)的16S rDNA序列同源性達(dá)到99%，鑒定其為阿氏芽孢桿菌Bacillus aryabhattai。構(gòu)建了 J-6菌株的系統(tǒng)發(fā)育進化樹。
[0010]本發(fā)明的優(yōu)點在于阿氏芽孢桿菌J-6具有對人、畜、農(nóng)作物安全和環(huán)境友好的特點，對煙草黑脛病防治有顯著效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1為本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌J-6在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)特征(正面)。
[0012]圖2為本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌J-6菌體特征(掃描電鏡12000倍)。
[0013]圖3為本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌J-6菌株的系統(tǒng)發(fā)育進化樹。
[0014]圖3中，分支節(jié)點上的數(shù)字表示經(jīng)過1000次bootstrap分析所支持的結(jié)果。線段標(biāo)尺0.005表不0.5%的序列差異的分支長度。
【具體實施方式】
[0015]本發(fā)明是采用從云南燈盞花上分離到的內(nèi)生細(xì)菌——阿氏芽孢桿菌J-6作為發(fā)酵菌株，來進行煙草黑脛病防治效果測定。它是以LB液體培養(yǎng)基為原料，通過液態(tài)發(fā)酵方式，采用實驗室和室外盆栽及大田試驗相結(jié)合，評價菌株J-6誘導(dǎo)煙株產(chǎn)生煙草黑脛病的抗性作用。
[0016]本發(fā)明的阿氏芽孢桿菌命名為阿氏芽孢桿菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-6),已在保藏單位保藏，保藏單位名稱:中國典型培養(yǎng)物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2013 年 10 月 17 日，保藏編號為 CCTCC NO:M2013475。
[0017]1、阿氏芽孢桿菌J-6菌株的鑒定
[0018]阿氏芽孢桿菌菌株J-6的菌落形態(tài)特征:菌株J-6菌落突起，表面有皺褶，呈乳白色，直徑0.32mm~1.91mm。如圖2所示。
[0019]菌株J-6的顯微形態(tài)特征:菌體形態(tài)為桿狀，為無芽孢的革蘭氏陽性菌，兼性厭氧。
[0020]菌株J-6生理生化特征:見表1。
[0021 ] 表1阿氏芽孢桿菌菌株J-6生理生化特征[0022]
【權(quán)利要求】
1.阿氏芽孢桿菌，其特征在于，本發(fā)明所述的阿氏芽孢桿菌命名為阿氏芽孢桿菌J-6(Bacillus aryabhattai J_6),已在保藏單位保藏,保藏單位名稱:中國典型培養(yǎng)物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2013年10月17日，保藏編號為CCTCC NO:M2013475。
2.權(quán)利要求1所述阿氏芽孢桿菌在防治煙草黑脛病中的應(yīng)用，其特征在于，阿氏芽孢桿菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-`6)應(yīng)用于防治煙草黑胚病。
【文檔編號】C12R1/07GK103614319SQ201310559441
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月12日
【發(fā)明者】李祖紅, 曾嶸, 賴泳紅, 張拯研, 高華鋒, 林選知, 張瑞勤 申請人:云南省煙草公司曲靖市公司, 云南大學(xué)