燕麥干細胞啤酒的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提出了燕麥干細胞啤酒的制備方法，它是以燕麥籽粒的原細胞系形成層細胞進行放大培養(yǎng)后，乙醇提取、冷凍、干燥與啤酒的有機組合，制備的燕麥干細胞啤酒，這種燕麥干細胞啤酒除含有啤酒的原有營養(yǎng)物質外，增加了燕麥全能干細胞和微量元素鍺、硒等礦物微量成份，對軟化血管、抗氧化、延緩細胞衰老、抑制變異細胞轉癌有較好的益處。
【專利說明】燕麥干細胞啤酒的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明是涉及食品【技術領域】中的一種燕麥干細胞啤酒，是一種具有能夠軟化血管，調節(jié)免疫力，抑制變異細胞轉癌的養(yǎng)生保健食品。
【背景技術】
[0002]本發(fā)明作為生物工程學技術中的植物干細胞分離培養(yǎng)方法被世界生物界評價為不會誘發(fā)環(huán)境問題，且作為可穩(wěn)定的供給植物來源作為抗氧化物質添加到多種食品中最理想的技術。根據(jù)韓國公開專利:1995-0000870(1995.01.03) ；2008801112097 (2008.10.10)；2010800289233(2010.05.26)。
[0003]從各種植物細胞系中提取有價值的物質與從植物中直接提取生產方法相比有諸多的優(yōu)點，尤其是與往的提取方法不同，它不受外界的影響，可持續(xù)的大量的培育和生產，被認為可解決如生態(tài)系統(tǒng)被破壞的最好的方法。但是盡管也有對于植物細胞培養(yǎng)的企業(yè)對此生物工程的認知，但真正產業(yè)化的成功例并不多。尤其是那些具有較好抗氧化作用的植物果實資源的細胞培育與大量傳代擴增更不為多見，這是因為在復雜的細胞培養(yǎng)基中，離體材料的褐化、細胞在增殖與生產過程中細胞變異仍是失敗的主要原因。
[0004]在植物全息。全能表達系統(tǒng)中，在利用植物果實細胞及分化組織。例如葉、莖、根系及果實等都是以具有喪失能力的永久組織，所以，為將轉變?yōu)榫哂蟹至涯芰Φ募毎当叵冗M行脫分化過程是指用植物體內的一種組織或某器官組織培養(yǎng)時，解決組織或細胞系的已經(jīng)施行特定功能而分化的狀態(tài)。即使這樣的脫分化過程中，由染色體變異還會出現(xiàn)細胞系細胞變異的壞象。尤其是通過植物細胞培養(yǎng)過程中，只要能保證在長期培養(yǎng)期間能夠穩(wěn)定的維持較快的細胞增殖并與高的代謝物質時，其生產能力可產業(yè)化，克服細胞變異問題，在通過植物細胞培養(yǎng)有較高應用價值物質生產中，能夠獲得遺傳穩(wěn)定的細胞系的最佳工藝是切實可行的。
[0005]對此，本發(fā)明是從燕麥籽粒的內皮層誘導，形成細胞中的脫分化的形成層未分化的細胞系進行培養(yǎng)，獲得了遺傳較穩(wěn)定的植物干細胞，并確認為培養(yǎng)過程無細胞變異，利用小分子活性水培養(yǎng)，先進的提取工藝，制備具有較高生理活性的番茄，干細胞制備口服液和飲料，從而完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供燕麥干細胞分離培養(yǎng)，以其國內外現(xiàn)有的技術相比，能夠解決細胞變異和離體材料易褐化的技術難題。
[0007]本發(fā)明的一個目的是提供燕麥干細胞分離、培養(yǎng)、提取方法。
[0008]本發(fā)明的另一目的是提供燕麥干細胞分離培養(yǎng)提取制備與燕麥干細胞啤酒的制備方法。
[0009]本發(fā)明別的特征及實施方式將通過以下詳述及隨附的權利要求書中更加明晰。
[0010]1、本發(fā)明的選材[0011 ] 本發(fā)明選用純有機方式種植的燕麥籽粒，作為燕麥干細胞形成層的培養(yǎng)材料。
[0012]2、固態(tài)培養(yǎng)基的組成成分:
[0013](I)可選擇的無機鹽類:
[0014]硝酸鉀2480-2500mg/L，硫酸鎂 120_122mg/L，硫酸錳 ΙΟ-llmg/L，硫酸鋅 L 8_3mg/L。硫酸銅 0.02-0.06mg/L，硫酸胺 130_140mg/L，氯化鈣 112_114mg/L，碘化鉀 0.6-0.75mg/L,氯化鈷 0.023-0.025mg/L,磷酸二氫鈉 130_135mg/L，硼酸 2.6_3mg/L，鑰酸鈉 0.2-0.25，乙二胺四乙酸鐵鈉鹽35-37mg/L。
[0015](2)可選擇的維生素:
[0016]肌醇200-230mg/L，硫胺素 18_21mg/L，煙酸 1.8-2.lmg/L，吡哆醇 1.8-2.lmg/L，L-抗壞血酸 50_55mg/L,朽1 檬酸 70_80mg/L。
[0017](3)可選擇的氨基酸:
[0018]L-天冬氨酸 130-140mg/L，L-精氨酸 170_180mg/L，甘氨酸 75_85mg/L，脯氨酸115-125mg/L。
[0019](4)可選擇的生長素:a-萘乙酸1.5-3.0mg/L。
[0020](5)可選擇的糖類:蔗糖或果糖10.000mg/Lo
[0021](6)可選擇的炭:活性炭400_500mg/L。
[0022](7)可選擇的固化劑`:瓊脂3.600-3.800mg/L。
[0023](8)可選擇的水:為磁化水I升。
[0024]3、液態(tài)培養(yǎng)基的組成成分:
[0025](I)可選擇的無機鹽類:
[0026]硫酸鉀990-995mg/L，磷酸氫鉀 160_170mg/L，硫酸鎂 180_185mg/L，硫酸錳20-25mg/L，硫酸鋅 8-lOmg/L，硫酸銅 0.2-0.3mg/L，氯化鈣 70_75mg/L，硝酸鈣 460_490mg/L，鑰酸鈉0.2-0.4mg/L,硼酸6_8mg/L，硝酸胺400_420mg/L，乙二胺四乙酸鐵鈉鹽35_38mg/L0
[0027](2)可選擇的維生素類:
[0028]肌醇195_230mg/L,硫胺素 21_22mg/L,煙酸 2_4mg/L,吡卩多醇 2_4mg/L, L-抗壞血酸 55-65mg/L，檸檬酸 72_82mg/L。
[0029](3)可選擇的氨基酸類:
[0030]L-天冬氨酸 132-142mg/L，L-精氨酸 172_182mg/L，甘氨酸 76_86mg/L，脯氨酸115-125mg/L。
[0031](4)可選擇的生長素類:
[0032]a-萘乙酸 2_3mg/L。
[0033](5)可選擇的糖類:鹿糖 31.000mg-32.000mg/L。
[0034](6)可選擇的添加物:麥飯石顆粒60.000mg/L,鍺石顆粒60.000mg/L。
[0035](7)可選擇的水:為磁化水I升。
[0036]本發(fā)明無機鹽類包括植物細胞生長所需的氮、磷、鉀、鎂、硫等大中量元素及鐵、錳、鋅、硼、鑰、鈷等微量元素。大中量幾乎在任何培養(yǎng)基中都是不可缺少的，它們是植物細胞生長所需的最基本的無機元素營養(yǎng)源。
[0037]本發(fā)明培養(yǎng)基中的有機物質，有維生素、氨基酸兩大類。維生素能夠直接參與植物細胞生命活動中最重要的營養(yǎng)過程，如醇的合成，細胞蛋白質和脂肪的代謝等。植物離體材料或細胞培養(yǎng)的自身雖有合成維生素能力，但還不能滿足細胞快速生長的需要。因此，在培養(yǎng)基中常添加一些維生素能夠促進培養(yǎng)物形成層的細胞快速生長和一些器官的分化。
[0038]基中氨基酸類，氨基酸是植物離體材料形成層細胞系的氮元素營養(yǎng)補充源，它能夠促進植物細胞蛋白質及細胞核的形成。
[0039]其中肌醇，為環(huán)乙六醇，它本身沒有直接的生長促進作用，但能協(xié)助其它營養(yǎng)活性物質發(fā)揮出許多作用，并能參與糖代謝，有間接的促進不定胚細胞生長的作用。
[0040]其中糖類:糖作為碳源在植物離體材料及形成層細胞系培養(yǎng)中是不可缺少的。常用的糖類有蔗糖、葡萄糖、果糖等，在本發(fā)明的培養(yǎng)基中采用蔗糖為好，它對燕麥細胞的生長和一些化合物的轉化合成要好于其它糖種。
[0041]本發(fā)明中的生長素為a-萘乙酸(NAA)是本發(fā)明培養(yǎng)基中促進植物細胞生長至關重要的元素，尤其對細胞形態(tài)健成起著極其重要的作用。
[0042]其活性炭:在植物離體材料培養(yǎng)與細胞系形成層的形成，這一培養(yǎng)過程看似比較簡單，但在某些草木植物尤其是燕麥籽粒的離體材料的內層組織培養(yǎng)過程中常會出現(xiàn)許多問題。燕麥內層組織容易褐化的主要原因是通過含銅的氧化酶和多酚氧化酶以及氨基酸中某些成分起作用所致，其作用的底物通常是某些氨基酸和培養(yǎng)基中鄰位羥酚尖化合物綠源酸等，酶和底物在植物細胞正常生長的情況下是在組織中不同位置存在，當細胞組織受損垂死時，酶和底物又很快被氧化和變成復雜的抑制物質，從而導致燕麥離體材料內層組織褐化壞變并導致誘導失敗。
[0043]本發(fā)明經(jīng)多年微生物研究實驗表明，將活性炭放入固態(tài)培養(yǎng)基中可有效的吸附酚及其它有害物質，能夠確保培養(yǎng)材料的褐化，因此，也就促使了形成層細胞系細胞的生長。
[0044]其中固化劑:本發(fā)明采用的瓊脂作為固態(tài)培養(yǎng)基中起固化作用。瓊脂是一種從海藻中提取的一種凝膠劑，植物與細胞生長并不能利用它，但由于其無毒、可塑、遇熱溶化、冷卻后固形化等特征，它能使培養(yǎng)基中各種養(yǎng)分均勻的分散分布，因此，固態(tài)培養(yǎng)基中使用瓊脂為好。
[0045]其中麥飯石顆粒、鍺石顆粒，是來自天然的營養(yǎng)石，內含幾十種礦物質微量元素，尤其是含有硒鍺元素的礦石顆粒，它們是一種含抗氧化劑的礦物質，是一種無機元素，是谷胱甘肽過氧化物酶的組成部分，這種酶不僅能保護身體組織細胞免受自由基的損害，同時也具有調節(jié)前例腺素的制造功能。硒鍺對人體的正常生長和生殖非常重要，肝臟要發(fā)揮其正常功能以及體內重要的激素制造也少不了硒，研究發(fā)現(xiàn)，無機硒和鍺元素在液態(tài)培養(yǎng)基中能夠通過復雜的生物轉化，轉化為有機硒和有機鍺。有機硒和有機鍺在活性甲狀腺激素的形成、毛發(fā)和皮膚的健康、以及維持正常視力、抗癌、抗氧化方面均起作用。因此，本發(fā)明利用無機硒鍺礦石顆粒，將其無機物轉化為有機物，對增加燕麥干細胞的生理活性，很有益處。
[0046]本發(fā)明中固態(tài)培養(yǎng)基和液態(tài)培養(yǎng)基中使用的磁化水，是一種普通自來水經(jīng)4600高斯磁場磁化的水，即為小分子活性水，磁化后的水帶有磁記憶，張力、滲透壓等都比自來水、礦泉水或山泉水要高十幾倍。帶有磁記憶的小分子水。能夠快速滲透到離體愈傷組織層，激活細胞修復與生長能力，減少其褐化的發(fā)生，在液態(tài)培養(yǎng)基中對細胞系細胞傳代，增殖具有較好的作用，同時也減少了細胞變異問題。[0047]4、本發(fā)明離體材料的制備:
[0048](I)優(yōu)選無化肥農藥污染、純農家肥有機栽培方式的燕麥。水沖洗表面附著物，放進120mg/L，L-抗壞血酸中浸泡I分鐘，目的是減少離體組織的氧化。然后在放進1%升的苯菌靈溶液中殺菌10分鐘后，用無菌水沖洗10分鐘，以便除去酚苯類化合物和殘留的化學物質，然后將燕麥籽粒在放入75%的乙醇液中殺菌I分鐘，用無菌水沖洗干凈后，在放入30%的過氧化氫液中殺菌20分鐘，然后用無菌水沖冼10分鐘。
[0049]5、本發(fā)明優(yōu)選固態(tài)培養(yǎng)基的制備方法:
[0050]在如上所述的離體材料滅菌后，僅用于離體材料形成層細胞系的優(yōu)選固態(tài)培養(yǎng)基下表1中顯示。
[0051]表1
[0052]`
【權利要求】
1.將優(yōu)質啤酒200ml放入一玻璃杯內，加入燕麥干細胞粉lg，攪勻后放進一50HZ的超聲波清洗機內，超聲粉碎15-20分鐘。
2.將超聲粉碎后的干細胞啤酒混溶液過濾1000目，注入一盛有4800ml的啤酒容器內，攪勻后，以每瓶500ml的計量 灌入玻璃瓶內，注入食品級二氧化碳氣體后封口。
【文檔編號】C12C5/00GK103602538SQ201310414621
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年9月13日 優(yōu)先權日:2013年9月13日
【發(fā)明者】林樹芳 申請人:林樹芳