以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法
【專(zhuān)利摘要】以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，它涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】。它的制備方法包含如下步驟：魚(yú)鱗——超聲波輔助酸處理技術(shù)脫灰除雜——超聲波技術(shù)結(jié)合酶提取技術(shù)提取膠原肽——膜分離技術(shù)純化膠原肽提取液——噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液——納米粉碎機(jī)超細(xì)微?；夹g(shù)納米化膠原肽——納米級(jí)膠原肽產(chǎn)品。它提高了脫灰除雜效果，處理后魚(yú)鱗蛋白質(zhì)含量大于90％，改變傳統(tǒng)多步提取純化的繁瑣工藝，工藝簡(jiǎn)單，縮短生產(chǎn)周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，利于規(guī)?；糯笊a(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
:
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法。

【背景技術(shù)】
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[0002]納米技術(shù)在化妝品、食品和保健品產(chǎn)業(yè)中得到重要的應(yīng)用，納米產(chǎn)品具有表面效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)和量子尺寸效應(yīng)等特性，并以其特有特性產(chǎn)生不同于常規(guī)保健成分的活性，從而提高產(chǎn)品生物利用率，提高抗氧化、延緩衰老、美白等生物活性。目前，該技術(shù)正處于快速發(fā)展階段，許多大型企業(yè)如“雀巢”、“卡夫”、“亨氏”等紛紛介入該技術(shù)研發(fā)工作中，全球在化妝品、食品和保健品產(chǎn)業(yè)中納米產(chǎn)品的產(chǎn)值已超過(guò)400億美元，并呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)。具有巨大的市場(chǎng)前景。
[0003]小分子量的魚(yú)鱗膠原肽具有促進(jìn)皮膚膠原代謝、美容、保濕、抗黑色色素瘤、降血壓、抗氧化、促進(jìn)骨細(xì)胞增值、增加骨密度、改善和治療由于膠原萎縮產(chǎn)生的關(guān)節(jié)炎、抗腫瘤、提高人體免疫力、保護(hù)胃黏膜性、減肥和降血脂作用等多種活性功能，廣泛地應(yīng)用在化妝品、保健品和食品行業(yè)中，已成為國(guó)內(nèi)外科學(xué)家研究的熱點(diǎn)。但目前市場(chǎng)上的膠原肽都是微米級(jí)的產(chǎn)品，未見(jiàn)納米級(jí)的產(chǎn)品上市，亦未見(jiàn)有關(guān)利用納米技術(shù)生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽的制備技術(shù)報(bào)道。為了提高膠原肽產(chǎn)品的附加值，搶占化妝品、食品和保健品產(chǎn)業(yè)新的制高點(diǎn)，急需開(kāi)發(fā)一種以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽的制備方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

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[0004]本發(fā)明的目的是提供以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):1、它利用超聲波輔助酸處理技術(shù)處理魚(yú)鱗，提高脫灰除雜效果，處理后魚(yú)鱗蛋白質(zhì)含量大于90%，避免傳統(tǒng)工藝出現(xiàn)的除雜后魚(yú)鱗蛋白質(zhì)含量低，導(dǎo)致膠原肽提取分離純化難度加大的現(xiàn)象，為膠原肽下一步的提取分離純化奠定基礎(chǔ)；
[0005]2、它利用超聲波提取技術(shù)結(jié)合酶提取技術(shù)一步提取膠原肽，提取產(chǎn)率超過(guò)95%，平板膜膜分離技術(shù)一步分離純化膠原肽，改變傳統(tǒng)多步提取純化的繁瑣工藝，工藝簡(jiǎn)單，縮短生產(chǎn)周期,節(jié)約生產(chǎn)成本。
[0006]3、它利用納米粉碎機(jī)超細(xì)微?；夹g(shù)處理微米級(jí)膠原肽粉末，得到總氮含量大于15%，平均相對(duì)分子質(zhì)量低于500Da，粒子粒徑小于500nm的納米級(jí)膠原肽產(chǎn)品，解決制約膠原肽產(chǎn)品向高附加值方向發(fā)展的瓶頸問(wèn)題，利于規(guī)模化放大生產(chǎn)。
[0007]為了解決【背景技術(shù)】所存在的問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:它的制備方法包含如下步驟:魚(yú)鱗——超聲波輔助酸處理技術(shù)脫灰除雜——超聲波技術(shù)結(jié)合酶提取技術(shù)提取膠原肽——膜分離技術(shù)純化膠原肽提取液——噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液——納米粉碎機(jī)超細(xì)微?；夹g(shù)納米化膠原肽——納米級(jí)膠原肽產(chǎn)品。
[0008]本發(fā)明具有以下有益效果:它提高了脫灰除雜效果，處理后魚(yú)鱗蛋白質(zhì)含量大于90%，改變傳統(tǒng)多步提取純化的繁瑣工藝，工藝簡(jiǎn)單，縮短生產(chǎn)周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，利于規(guī)模化放大生產(chǎn)。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
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[0009]圖1為本發(fā)明的流程結(jié)構(gòu)示意圖。

【具體實(shí)施方式】
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[0010]參照?qǐng)D1，本【具體實(shí)施方式】采取以下技術(shù)方案:它的制備方法包含如下步驟:魚(yú)鱗一超聲波輔助酸處理技術(shù)脫灰除雜一超聲波技術(shù)結(jié)合酶提取技術(shù)提取膠原肽一膜分離技術(shù)純化膠原肽提取液一噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液一納米粉碎機(jī)超細(xì)微?；夹g(shù)納米化膠原肽一納米級(jí)膠原肽產(chǎn)品。
[0011]它的詳細(xì)步驟為:(I)脫灰除雜:將魚(yú)鱗投入超聲波提取罐中，加入酸溶液超聲攪拌脫灰除雜，攪拌后用水洗凈，除掉魚(yú)鱗的雜質(zhì)，脫灰除雜后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量大于90% ；
[0012](2)提取:將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波提取罐，加入水和相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05-0.5 %的蛋白酶進(jìn)行超聲酶解，酶解溫度為40-60 V，酶解反應(yīng)pH值控制在7-8，酶解3-6小時(shí)；酶解結(jié)束后升溫到70-85°C，保溫15-35分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率超過(guò)95% ；
[0013](3)純化:將膠原肽提取液置于平板膜設(shè)備中，經(jīng)濾袋處理后，利用平板膜除雜，除掉樣品的顆粒狀雜質(zhì)和大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液；
[0014](4)干燥:利用噴霧干燥機(jī)干燥膠原肽溶液，得到微米級(jí)的膠原肽粉末；
[0015](5)納米化:利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，得到納米級(jí)的膠原肽樣品。
[0016]所述的步驟(I)中加入酸溶液超聲攪拌除雜所使用的酸為硫酸或鹽酸，酸溶液的體積百分比濃度為1-10%，超聲波頻率為15-60kHz，超聲波功率為300-1500W，攪拌時(shí)間為1-5小時(shí)。
[0017]所述的步驟⑵中所用的蛋白酶為無(wú)花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶中的一種、兩種或者三種組合。
[0018]所述的步驟(2)中所用超聲波頻率為15_60kHz，超聲波功率為300-1500W。
[0019]所述的步驟(2)中調(diào)節(jié)pH用堿為氫氧化鈉；調(diào)節(jié)pH用酸為硫酸或鹽酸。
[0020]所述的步驟(3)中所使用的濾袋的孔徑為0.5-50 μ m。
[0021]所述的步驟(3)中所使用的平板膜的膜截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為5kD_200kD。
[0022]所述的步驟(4)中噴霧干燥機(jī)的出風(fēng)溫度為60_90°C。
[0023]所述的步驟(5)納米粉碎機(jī)的粉碎溫度為20-40°C。
[0024]本【具體實(shí)施方式】具有以下有益效果:它提高了脫灰除雜效果，處理后魚(yú)鱗蛋白質(zhì)含量大于90%，改變傳統(tǒng)多步提取純化的繁瑣工藝，工藝簡(jiǎn)單，縮短生產(chǎn)周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，利于規(guī)?；糯笊a(chǎn)。
[0025]實(shí)例一:
[0026]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗50kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為5%硫酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲攪拌2小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為91%。
[0027]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05%的木瓜蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7，調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為60°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲酶解6小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫15分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為97%。
[0028]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為5μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為5kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0029]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為90°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0030]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為40°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為200nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0031]實(shí)例二:
[0032]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗100kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為5%硫酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為800W，頻率為30kHz，超聲攪拌5小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為91%。
[0033]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.5%的無(wú)花果蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7，調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為50°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為800W，頻率為30kHz，超聲酶解5小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到70°C，保溫15分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為96%。
[0034]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為20 μ m濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為SOkD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0035]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為75°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0036]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為35°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為300nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0037]實(shí)例三:
[0038]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗30kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為10%硫酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為1000W，頻率為30kHz，超聲攪拌I小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為93%。
[0039]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.1 %的糜蛋白酶,調(diào)節(jié)pH值,并控制反應(yīng)體系pH為8,調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為50°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲酶解4小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫20分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為 96%。
[0040]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為30 μ m濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為10kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0041]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為70°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0042]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為30°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為300nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0043]實(shí)例四:
[0044]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗80kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為10%硫酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為1500W，頻率為60kHz，超聲攪拌I小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為93%。
[0045]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.25%的中性蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.25%的無(wú)花果蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值,并控制反應(yīng)體系pH為7,調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉,所用的酸為鹽酸或硫酸,酶解溫度為50°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為500W，頻率為30kHz，超聲酶解5小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到75°C，保溫35分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為97%。
[0046]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為50 μ m濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為200kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0047]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為60°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0048]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為20°C，得到總氮含量為17%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為400nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0049]實(shí)例五:
[0050]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗100kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為5%硫酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲攪拌5小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為92%。
[0051]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.04%的中性蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.04%的胰蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7.5,調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉,所用的酸為鹽酸或硫酸,酶解溫度為40°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲酶解3小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫25分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為96%。
[0052]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為0.5μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為1kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0053]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為75°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0054]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為30°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為10nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0055]實(shí)例六:
[0056]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗10kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為1%鹽酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為1500W，頻率為60kHz，超聲攪拌5小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為91 %。
[0057]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05%的胰蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05%的糜蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為8,調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉,所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為45°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲酶解4小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫30分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為97%。
[0058]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為I μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為20kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0059]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為80°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0060]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為25°C，得到總氮含量為17%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于300Da，粒子粒徑為200nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0061]實(shí)例七:
[0062]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗300kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為5%鹽酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為500W，頻率為30kHz，超聲攪拌3小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為93%。
[0063]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水后，先后加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.1%的木瓜蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.1%的無(wú)花果蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.1 %的菠蘿蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7，調(diào)節(jié)PH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為55°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為1500W，頻率為60kHz，超聲酶解6小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到85°C，保溫25分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為98%。
[0064]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為30 μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為50kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0065]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為90°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0066]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為40°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于300Da，粒子粒徑為10nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0067]實(shí)例八:
[0068]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗500kg,投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為10%鹽酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為1500W，頻率為60kHz，超聲攪拌I小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為93%。
[0069]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗直于超聲波反應(yīng)iip中，加入水后，先后加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.225 %的中性蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.225 %的無(wú)花果蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05%的風(fēng)味蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7，調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為50°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為1500W，頻率為60kHz，超聲酶解4小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫20分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為96%。
[0070]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為5μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為20kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0071]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為80°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0072]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為25°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于500Da，粒子粒徑為150nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
[0073]實(shí)例九:
[0074]1、稱(chēng)取魚(yú)鱗50kg，投入超聲波反應(yīng)罐中，加入體積百分比濃度為5%鹽酸溶液，調(diào)節(jié)超聲波功率為800W，頻率為30kHz，超聲攪拌4小時(shí)，用水洗凈，脫灰除雜，處理后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量為92%。
[0075]2、將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波反應(yīng)罐中，加入水后，先后加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.18%的木瓜蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.18%的菠蘿蛋白酶，加入相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.04%的風(fēng)味蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值，并控制反應(yīng)體系pH為7，調(diào)節(jié)pH值所用的堿為氫氧化鈉，所用的酸為鹽酸或硫酸，酶解溫度為55°C，調(diào)節(jié)超聲波功率為300W，頻率為15kHz，超聲酶解5小時(shí)，酶解反應(yīng)結(jié)束后，升溫到80°C，保溫25分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率為98%。
[0076]3、將提取液置于平板膜設(shè)備的儲(chǔ)存罐中，利用孔徑為10 μπι濾袋處理，去除固體雜質(zhì)后，利用截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為1kD的平板膜去除大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液。
[0077]4、利用噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液，出風(fēng)溫度為70°C,噴霧干燥結(jié)束,得到微米級(jí)膠原肽粉末。
[0078]5、利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，控制處理溫度為35°C，得到總氮含量為16%，平均相對(duì)分子質(zhì)量小于400Da，粒子粒徑為300nm的納米級(jí)膠原肽樣品。
【權(quán)利要求】
1.以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于它的制備方法包含如下步驟:魚(yú)鱗一超聲波輔助酸處理技術(shù)脫灰除雜一超聲波技術(shù)結(jié)合酶提取技術(shù)提取膠原肽一膜分離技術(shù)純化膠原肽提取液一噴霧干燥技術(shù)干燥膠原肽溶液一納米粉碎機(jī)超細(xì)微?；夹g(shù)納米化膠原肽一納米級(jí)膠原肽產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于它的詳細(xì)步驟為:(I)脫灰除雜:將魚(yú)鱗投入超聲波提取罐中，加入酸溶液超聲攪拌脫灰除雜，攪拌后用水洗凈，除掉魚(yú)鱗的雜質(zhì)，脫灰除雜后魚(yú)鱗的蛋白質(zhì)含量大于90% ； (2)提取:將脫灰除雜后魚(yú)鱗置于超聲波提取罐，加入水和相當(dāng)于脫灰除雜后魚(yú)鱗干重0.05-0.5%的蛋白酶進(jìn)行超聲酶解，酶解溫度為40-60°C，酶解反應(yīng)pH值控制在7_8，酶解3-6小時(shí)；酶解結(jié)束后升溫到70-85°C，保溫15-35分鐘滅酶，得到膠原肽提取液，提取產(chǎn)率超過(guò)95% ； (3)純化:將膠原肽提取液置于平板膜設(shè)備中，經(jīng)濾袋處理后，利用平板膜除雜，除掉樣品的顆粒狀雜質(zhì)和大分子雜質(zhì)，得到膠原肽溶液； (4)干燥:利用噴霧干燥機(jī)干燥膠原肽溶液，得到微米級(jí)的膠原肽粉末； (5)納米化:利用納米粉碎機(jī)處理微米級(jí)膠原肽粉末，得到納米級(jí)的膠原肽樣品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(I)中加入酸溶液超聲攪拌除雜所使用的酸為硫酸或鹽酸，酸溶液的體積百分比濃度為1-10%，超聲波頻率為15-60kHz，超聲波功率為300-1500W，攪拌時(shí)間為1_5小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(2)中所用的蛋白酶為無(wú)花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶中的一種、兩種及三種組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(2)中所用超聲波頻率為15-60kHz，超聲波功率為300-1500W。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(3)中所使用的濾袋的孔徑為0.5-50 μ m。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(3)中所使用的平板膜的膜截留平均相對(duì)分子質(zhì)量為5kD-200kD。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(4)中噴霧干燥機(jī)的出風(fēng)溫度為60-90°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以魚(yú)鱗為原料生產(chǎn)納米級(jí)膠原肽精華的制備方法，其特征在于所述的步驟(5)納米粉碎機(jī)的粉碎溫度為20-40°C。
【文檔編號(hào)】C12P21/06GK104419741SQ201310367512
【公開(kāi)日】2015年3月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月22日
【發(fā)明者】田娟 申請(qǐng)人:新肌飲(上海)投資管理有限公司