一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法
【專利摘要】一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法，包括以下步驟:(1)選擇蚯蚓；(2)清洗；(3)磨漿；(4)離心，用高速離心機經(jīng)高速離心將鹽析后的漿液的雜質去除，收集上清液，沉淀用鹽溶液洗滌兩次，再離心，再收集上清液，并把收集的上清液合并到一起；(5)超濾，將合并后的上清液進行第一次超濾，濾除不溶于水的大分子；將超濾后的上清液再次進行超濾，濃縮有效成分，當濃縮液達5%-10%濃度后，進入真空冷凍干燥機；(6)真空冷凍干燥；(7)包裝。本發(fā)明可以從蚯蚓均漿液中一步獲得全部蚓激酶組分，且具有簡單易行，提取物有效成分高等特點，適合大規(guī)模生產。
【專利說明】一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬生物化學制藥【技術領域】，具體為一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法。

【背景技術】
[0002]血栓性疾病的高發(fā)病率、高死亡率及高致殘率嚴重威脅人類的生存，溶栓性藥物是治療該病的首選用藥。目前臨床上使用的溶栓性藥物中普遍存在易引起出血的副作用；有的價格昂貴，一般百姓難以承受；有的穩(wěn)定性較差，保存條件要求較高，給用藥者帶來很多不便；有的品種給藥方式單一，只有口服、或只有靜脈或肌肉注射，使用藥范圍受到很大限制。蚓激酶是從蚯蚓體內提取的一種活性物質，已被證明有較好的臨床應用價值，它是一種多分子重組口服制劑，與血栓(纖維蛋白)有特殊的親和力，能夠跟蹤溶栓，有效溶解微栓，改善微循環(huán)，加強心、腦血管側支循環(huán)，開放性修復血管受損內皮細胞，增加血管彈性，改善血管供氧功能，降低血液粘度，降低血小板聚集率，抑制血栓再次形成。修復血栓發(fā)生后周邊壞死腦細胞，挽救半暗區(qū)。目前已廣泛用于臨床，并越來越多地用在心、腦血管、內分泌，呼吸系統(tǒng)等疾病的預防和治療中心。近20多年來，不少的研究人員都在力求將蚓激酶的研究推向實際應用，先后有各種各樣的分離純化技術問世。但先有的提取方法蚓激酶的收率很低，且蚓激酶的制備成本很高，產生需處理的廢液多，蚓激酶的生產能力也相對較低。


【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明所解決的技術問題在于提供一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法，以解決上述【背景技術】中提出的問題。
[0004]本發(fā)明所解決的技術問題采用以下技術方案來實現(xiàn):
一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法，包括以下步驟:
(1)選擇蚯蚓
選擇品質優(yōu)良的蚯蚓品種，體內不能含有重金屬；
(2)清洗取一定量的活蚯蚓，水洗數(shù)次，使其內臟中的污物排除，篩除漂洗各種雜質并浙干污水；
(3)磨漿
清洗干凈的蚯蚓加入一定濃度的鹽水，在組織均漿器中高速均漿5-15分鐘后，低溫靜置鹽析沉淀；
(4)離心
用高速離心機經(jīng)高速離心將鹽析后的漿液的雜質去除，收集上清液，沉淀用鹽溶液洗滌兩次，再離心，再收集上清液，并把收集的上清液合并到一起；
(5)超濾將合并后的上清液進行第一次超濾，濾除不溶于水的大分子；將超濾后的上清液再次進行超濾，去除雜質，脫鹽脫水，濃縮有效成分，當濃縮液達5%-10%濃度后，進入真空冷凍干燥機；
(6)真空冷凍干燥
在10-30° C的條件下，干燥5-20小時制成干粉；
(7)包裝
用鋁塑膜密封包裝并低溫保存。
[0005]有益效果
本發(fā)明可以從蚯蚓均漿液中一步獲得全部蚓激酶組分，且具有簡單易行，提取物有效成分高等特點，適合大規(guī)模生產。

【具體實施方式】
[0006]下面將結合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0007]一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法，包括以下步驟:
(1)選擇蚯蚓
選擇品質優(yōu)良的蚯蚓品種，體內不能含有重金屬；
(2)清洗
取一定量的活蚯蚓，水洗數(shù)次，使其內臟中的污物排除，篩除漂洗各種雜質并浙干污水；
(3)磨漿
清洗干凈的蚯蚓加入一定濃度的鹽水，在組織均漿器中高速均漿5-15分鐘后，低溫靜置鹽析沉淀；
(4)離心
用高速離心機經(jīng)高速離心將鹽析后的漿液的雜質去除，收集上清液，沉淀用鹽溶液洗滌兩次，再離心，再收集上清液，并把收集的上清液合并到一起；
(5)超濾
將合并后的上清液進行第一次超濾，濾除不溶于水的大分子；將超濾后的上清液再次進行超濾，去除雜質，脫鹽脫水，濃縮有效成分，當濃縮液達5%-10%濃度后，進入真空冷凍干燥機；
(6)真空冷凍干燥
在10-30° C的條件下，干燥5-20小時制成干粉；
(7)包裝
用鋁塑膜密封包裝并低溫保存。
[0008]對于本領域技術人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和范圍內的所有變化囊括在本發(fā)明內。
[0009]此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領域技術人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術方案也可以經(jīng)適當組合，形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。
【權利要求】
1.一種從蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法，其特征是，包括以下步驟: (1)選擇蚯蚓 選擇品質優(yōu)良的蚯蚓品種，體內不能含有重金屬； (2)清洗 取一定量的活蚯蚓，水洗數(shù)次，使其內臟中的污物排除，篩除漂洗各種雜質并浙干污水； (3)磨漿 清洗干凈的蚯蚓加入一定濃度的鹽水，在組織均漿器中高速均漿5-15分鐘后，低溫靜置鹽析沉淀； (4)離心 用高速離心機經(jīng)高速離心將鹽析后的漿液的雜質去除，收集上清液，沉淀用鹽溶液洗滌兩次，再離心，再收集上清液，并把收集的上清液合并到一起； (5)超濾 將合并后的上清液進行第一次超濾，濾除不溶于水的大分子；將超濾后的上清液再次進行超濾，去除雜質，脫鹽脫水，濃縮有效成分，當濃縮液達5%-10%濃度后，進入真空冷凍干燥機； (6)真空冷凍干燥 在10-30° C的條件下，干燥5-20小時制成干粉； (7)包裝 用鋁塑膜密封包裝并低溫保存。
【文檔編號】C12N9/68GK104342422SQ201310338922
【公開日】2015年2月11日 申請日期:2013年8月6日 優(yōu)先權日:2013年8月6日
【發(fā)明者】賈立明, 王鳳艷, 賈京華, 劉平, 陳小明 申請人:天津賈立明蚯蚓養(yǎng)殖有限公司