利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，該方法通過一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，然后分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以50~99.5%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.015~1.324的濃縮液；將濃縮液于0.3~1μm微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的1~10％的丙二醇，即得香原料。本發(fā)明以的植物提取殘渣為原料，充分利用廢棄資源，既有效避免資源浪費，成本低廉，又有利于環(huán)境保護。本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單、操作性及可控性強，便于實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，且能變廢為寶，具有良好的開發(fā)應用前景。
【專利說明】利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于煙用香料領域，具體涉及利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法。
【背景技術】
[0002]目前煙用香料按來源大致可分為5類:①來自煙草本身的香料，如煙草香精油、浸膏等；②來自非煙草的天然植物香料，如從各種植物的花、果實、根、莖、葉中提取的精油、浸膏、酊劑等；③由美拉德反應制取的香料；④通過生物產(chǎn)香獲得的香料；⑤來自人工合成的單體香料，如醇、醛、酮等。
[0003]微生物發(fā)酵產(chǎn)香技術是生物技術的重要組成部分，是一門利用微生物的生長代謝活動來生產(chǎn)各種香氣物質(zhì)的工程技術。隨著生物技術的不斷發(fā)展,微生物發(fā)酵生產(chǎn)香料的方法也逐步得到應用和推廣，如以工農(nóng)業(yè)廢料為原料，利用微生物可以生產(chǎn)各種天然香料。微生物產(chǎn)香技術制取煙用香精，經(jīng)過發(fā)酵的樣品中的香味物質(zhì)與未經(jīng)發(fā)酵的樣品相比，香味物質(zhì)種類增多，有研究指出由產(chǎn)香微生物發(fā)酵產(chǎn)生的香料不僅風格獨特，而且種類繁多。
[0004]目前天然提取物被廣泛應用于食品、藥物、香料等領域。通常對天然植物采用溶劑提取的手段，得到含有目標成分的提取物，提取后的物料殘渣要么肥化處理，要么當作工業(yè)垃圾直接丟棄。這些被提取后的植物物料殘渣富含纖維素、或蛋白質(zhì)等，直接丟棄不利于環(huán)保，同時也是對植物殘渣中未被充分提取的有效成分、纖維素或蛋白質(zhì)等成分的一種浪費。廢棄提取殘渣中含有大量的致香成分或前提物質(zhì)，利用微生物轉化可以促進致香前體物質(zhì)的轉化和致香成分的生成。因此，這些殘渣卻是潛在的有價值資源。在資源短缺和環(huán)境污染問題日益突出的今天，通過微生物發(fā)酵以后提取致香成分不僅能實現(xiàn)廢棄提取殘渣的再利用，同時也能降低生產(chǎn)成本提高煙葉品質(zhì)。采用現(xiàn)代微生物發(fā)酵技術和現(xiàn)代生化技術，開展對提取殘渣的綜合利用及精 深加工和其系列產(chǎn)品的研究開發(fā)，具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術問題就是提供一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，充分利用廢棄物制得了優(yōu)質(zhì)的卷煙用香原料，變廢為寶，成本低廉。
[0006]為解決上述技術問題，本發(fā)明提供一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:包括以下步驟:
[0007]I) 一級發(fā)酵
[0008]①菌種活化:選取所需一級發(fā)酵菌種接種于相對應的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得到活化好的一級發(fā)酵菌種，其中，所述一級發(fā)酵菌種為里氏木霉、康氏木霉、米曲霉、短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌中的一種或幾種，其相對應培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基中的一種或幾種；
[0009]②種子液配制:取活化好的一級發(fā)酵菌種，接種于對應的液體培養(yǎng)基、滅菌得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床內(nèi)培養(yǎng)，得到一級種子液；[0010]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，再將接種好的天然提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于的搖床內(nèi)封閉發(fā)酵，得到一級發(fā)酵液；
[0011]④滅活:將一級發(fā)酵液放入11(T125°C環(huán)境下滅菌2(T60min，取出室溫放置至完全冷卻；
[0012]2) 二級發(fā)酵
[0013]①菌種活化:選取釀酒酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得到活化好的釀酒酵母HHL-1，其中，所述釀酒酵母HHL-1，保藏號為CCTCC N0:M209272 ；
[0014]②種子液配制:取活化好的釀酒酵母HHL-1，接種于培養(yǎng)基中，滅菌得到的二級種子培養(yǎng)液，置于搖床內(nèi)培養(yǎng)，得到二級種子液；
[0015]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，再將接種好的二級發(fā)酵液置于搖床內(nèi)封閉發(fā)酵，得到二級發(fā)酵液；
[0016]3)制得香原料
[0017]①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以50-99.5%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.015^1.324的濃縮液；
[0018]②將濃縮液于0.3^1 μ m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的廣10%的丙二醇，即得 香原料。
[0019]進一步地，所述步驟I)的發(fā)酵過程中，一級發(fā)酵培養(yǎng)基按重量百分比由80、5%的天然植物提取殘渣、5~20%的氮源和0-10%的碳源組成。
[0020]再進一步地，所述步驟I)的菌種活化中，培養(yǎng)條件為，培養(yǎng)溫度:2(T35°C，培養(yǎng)時間:12~36h。
[0021]再進一步地，所述步驟I)的發(fā)酵過程中，接種重量比為一級種子液:天然提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=1: 10~1000。
[0022]再進一步地，所述步驟I)的種子液配制中，滅菌條件為:溫度為:11(T125°C滅菌時間為:2(T40min ;培養(yǎng)條件:溫度:20~35°C、轉速為:120~200轉、時間為:1~2天。
[0023]再進一步地，所述步驟I)的發(fā)酵過程中，發(fā)酵條件；溫度為:2(T35°C、轉速為:120~200轉，時間:3~10天。
[0024]再進一步地，所述天然植物提取殘渣以一種提取殘渣或幾種按等比例混合的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為10-30%，粉碎過10-40目篩網(wǎng)后，按原料重量比的100-300%加水煮沸30min滅菌得到的，所述氮源為玉米漿、蛋白胨、氨水、硫酸銨、硝酸銨中的一種或幾種；所述碳源為葡萄糖、蔗糖、乳酸中的一種或幾種。
[0025]再進一步地，所述步驟2)的發(fā)酵過程中，接種重量比為二級種子液:滅活的一級發(fā)酵物=1: 10~1000。
[0026]再進一步地，所述步驟2)的菌種活化中，培養(yǎng)溫度:2(T35°C，培養(yǎng)時間:12~36h。
[0027]再進一步地，其特征在于:所述步驟2)的種子液配制中，滅菌條件為:溫度為:110~125°C滅菌時間為:2(T40min ;培養(yǎng)條件:溫度:20~35°C、轉速為:120~200轉、時間為:廣2天。所述步驟2)的發(fā)酵過程中，發(fā)酵條件；溫度為:2(T35°C、轉速為:120-200轉，時間:3~10天。
[0028]本發(fā)明的有益效果在于:[0029]1、本發(fā)明以廢棄的植物提取殘渣為原料，充分利用廢棄資源，既有效避免資源浪費，成本低廉，又有利于環(huán)境保護。
[0030]2、本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單、操作性及可控性強，便于實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，且能變廢為寶，具有良好的開發(fā)應用前景。
[0031]3、本發(fā)明利用生物發(fā)酵制備了煙用香料產(chǎn)生的香味物質(zhì)，發(fā)酵后的產(chǎn)品與煙香協(xié)調(diào)性好，降低刺激，掩蓋雜氣，柔和煙氣，改善余味的作用，對煙草制品的吸味和香味具有促進和改善作用。
[0032]4、本發(fā)明生成的產(chǎn)物與水或乙醇的混溶性好，可直接用于卷煙加香加料，應用方便。
【具體實施方式】
[0033]為了更好地解釋本發(fā)明，以下結合具體實施例進一步闡明本發(fā)明的主要內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于以下實施例。
[0034]實施例1
[0035]一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，包括以下步驟:
[0036]I) 一級發(fā)酵
[0037]①菌種活化:選取米曲霉接種于PDA培養(yǎng)基上，在28°C條件下培養(yǎng)24h，得到活化好的米曲霉；
[0038]②種子液配制:取活化好的米曲霉，接種于PDA液體培養(yǎng)基、121°C滅菌20min得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖`床在28°C、150轉條件下培養(yǎng)2天，得到一級種子液
[0039]③無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基制備:按重量百分比由85%的天然植物提取殘渣、15%的氮源組成；其中，天然植物提取殘渣以無花果的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為15%，粉碎過10目篩網(wǎng)后，按原料重量比的100%加水煮沸30min滅菌得到的；
[0040]④發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌無花果提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液:無花果提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=I: 100，再將接種好的無花果提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于28°C、180轉的搖床封閉發(fā)酵7天，得到一級發(fā)酵液；
[0041]⑤滅活:將一級發(fā)酵液放入121°C環(huán)境下滅菌30min，取出室溫放置至完全冷卻；
[0042]2) 二級發(fā)酵
[0043]①菌種活化:選取酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，在28°C條件下培養(yǎng)24h，得到活化好的二級發(fā)酵菌種，其中酵母HHL-1的保藏號為CCTCC N0:M209272 ；
[0044]②種子液配制:取活化好的酵母HHL-1，接種于LB液體培養(yǎng)基中，121°C滅菌30min得到的二級種子培養(yǎng)液，置于28°C、180轉的搖床培養(yǎng)2天，得到二級種子液；
[0045]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，接種重量比例為二級種子液:一級發(fā)酵液=1: 500，再將接種好的二級發(fā)酵液置28°C，180轉的搖床封閉發(fā)酵6天，得到二級發(fā)酵液；
[0046]3)制得香原料
[0047]①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以75%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.015的濃縮液；
[0048]②將濃縮液于0.6 ii m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的2%的丙二醇，即得香原料。
[0049]實施例2
[0050]一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，包括以下步驟:
[0051]I) 一級發(fā)酵
[0052]①菌種活化:選取康氏木霉接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在20°C條件下培養(yǎng)36h，得到活化好的康氏木霉；
[0053]②種子液配制:取活化好的康氏木霉，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基、110°C滅菌40h得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床在35°C、200轉條件下培養(yǎng)I天，得到一級種子液
[0054]③無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基制備:按重量百分比由85%的天然植物提取殘渣、10%的氮源和5%的碳源組成；其中，天然植物提取殘渣以枸杞的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為30%，粉碎過40目篩網(wǎng)后，按原料重量比的300%加水煮沸30min滅菌得到的；
[0055]④發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌枸杞提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液:枸杞提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=I: 1000，再將接種好的枸杞提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于35°C、200轉的搖床封閉發(fā)酵3天，得到一級發(fā)酵液；
[0056]⑤滅活:將一級發(fā)酵液放入125°C環(huán)境下滅菌20min，取出室溫放置至完全冷卻；
[0057]2) 二級發(fā)酵
[0058]①菌種活化:選取`酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，在35°C條件下培養(yǎng)12h，得到活化好的二級發(fā)酵菌種，其中酵母HHL-1的保藏號為CCTCC N0:M209272 ；
[0059]②種子液配制:取活化好的酵母HHL-1，接種于LB液體培養(yǎng)基中，125°C滅菌20min得到的二級種子培養(yǎng)液，置于35°C、200轉的搖床培養(yǎng)I天，得到二級種子液；
[0060]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，接種重量比例為二級種子液:一級發(fā)酵液=1: 1000，再將接種好的二級發(fā)酵液置35°C，200轉的搖床封閉發(fā)酵3天，得到二級發(fā)酵液；
[0061]3)制得香原料
[0062]①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以99.5%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.324的濃縮液；
[0063]②將濃縮液于1.0 ii m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的
I%的丙二醇，即得香原料。
[0064]實施例3
[0065]一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，包括以下步驟:
[0066]I) 一級發(fā)酵
[0067]①菌種活化:選取康氏木霉接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在35°C條件下培養(yǎng)12h，得到活化好的康氏木霉；
[0068]②種子液配制:取活化好的康氏木霉，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基、125°C滅菌20h得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床在20°C、120轉條件下培養(yǎng)2天，得到一級種子液；
[0069]③無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基制備:按重量百分比由90%的天然植物提取殘渣、8%的氮源和2%的碳源組成；其中，天然植物提取殘渣以香蕉的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為10%，粉碎過10目篩網(wǎng)后，按原料重量比的150%加水煮沸30min滅菌得到的；
[0070]④發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌香蕉提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液:香蕉提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=I: 10，再將接種好的香蕉提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于20°C、120轉的搖床封閉發(fā)酵10天，得到一級發(fā)酵液；
[0071]⑤滅活:將一級發(fā)酵液放入110°C環(huán)境下滅菌40min，取出室溫放置至完全冷卻；
[0072]2) 二級發(fā)酵
[0073]①菌種活化:選取酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，在20°C條件下培養(yǎng)36h，得到活化好的二級發(fā)酵菌種，其中酵母HHL-1的保藏號為CCTCC N0:M209272 ； [0074]②種子液配制:取活化好的酵母HHL-1，接種于LB液體培養(yǎng)基中，110°C滅菌40min得到的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C、120轉的搖床培養(yǎng)2天，得到二級種子液；
[0075]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，接種重量比例為二級種子液:一級發(fā)酵液=1: 10，再將接種好的二級發(fā)酵液置20°C，120轉的搖床封閉發(fā)酵10天，得到二級發(fā)酵液；
[0076]3)制得香原料
[0077]①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以50%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.257的濃縮液；
[0078]②將濃縮液于0.3 ii m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的5%的丙二醇，即得香原料。
[0079]實施例4
[0080]一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，包括以下步驟:
[0081]I) 一級發(fā)酵
[0082]①菌種活化:選取康氏木霉和枯草芽孢桿菌分別接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基上，在28°C條件下培養(yǎng)24h，得到活化好的康氏木霉和枯草芽孢桿菌；
[0083]②種子液配制:取活化好的康氏木霉和枯草芽孢桿菌，分別接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基和LB液體培養(yǎng)基中、121°C滅菌20min得到的康氏木霉和枯草芽孢桿菌的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床在28°C、1500轉條件下培養(yǎng)2天，得到康氏木霉和枯草芽孢桿菌的一級種子液，將康氏木霉和枯草芽孢桿菌的一級種子液混合，得到一級種子液；
[0084]③無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基制備:按重量百分比由80%的天然植物提取殘渣、15%的氮源和5%的碳源組成；其中，天然植物提取殘渣以郁金香的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為20%，粉碎過10目篩網(wǎng)后，按原料重量比的200%加水煮沸30min滅菌得到的；
[0085]④發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌郁金香提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液:郁金香提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=I: 500，再將接種好的郁金香提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于28°C、120轉的搖床封閉發(fā)酵6天，得到一級發(fā)酵液；
[0086]⑤滅活:將一級發(fā)酵液放入121°C環(huán)境下滅菌20min，取出室溫放置至完全冷卻；
[0087]2) 二級發(fā)酵
[0088]①菌種活化:選取酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，在28°C條件下培養(yǎng)36h，得到活化好的二級發(fā)酵菌種，其中酵母HHL-1的保藏號為CCTCC N0:M209272 ；
[0089]②種子液配制:取活化好的酵母HHL-1，接種于LB液體培養(yǎng)基中，110°C滅菌40min得到的二級種子培養(yǎng)液，置于28°C、150轉的搖床培養(yǎng)2天，得到二級種子液；
[0090]③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，接種重量比例為二級種子液:一級發(fā)酵液=1: 500，再將接種好的二級發(fā)酵液置28°C，150轉的搖床封閉發(fā)酵7天，得到二級發(fā)酵液；
[0091]3)制得香原料
[0092]①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以75%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.134的濃縮液；
[0093]②將濃縮液于0.3 ii m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的5%的丙二醇，即得香原料。
[0094]在實際工作過程中，根據(jù)具體情況選取幾種的不同的一級發(fā)酵菌種，在相對應的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，然后將各種不同的一級種子液混合后，再進行一級發(fā)酵。
[0095]
【權利要求】
1.一種利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)一級發(fā)酵 ①菌種活化:選取所需一級發(fā)酵菌種接種于相對應的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得到活化好的一級發(fā)酵菌種，其中，所述一級發(fā)酵菌種為里氏木霉、康氏木霉、米曲霉、短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌中的一種或幾種，其相對應培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基中的一種或幾種； ②種子液配制:取活化好的一級發(fā)酵菌種，接種于對應的液體培養(yǎng)基、滅菌得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床內(nèi)培養(yǎng)，得到一級種子液； ③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌天然植物提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基中并充分混合均勻，再將接種好的天然提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基置于的搖床內(nèi)封閉發(fā)酵，得到一級發(fā)酵液； ④滅活:將一級發(fā)酵液放入11(T125°C環(huán)境下滅菌2(T60min，取出室溫放置至完全冷卻； 2)二級發(fā)酵 ①菌種活化:選取釀酒酵母HHL-1接種于LB培養(yǎng)基上，培養(yǎng)得到活化好的釀酒酵母HHL-1，其中，所述釀酒酵母HHL-1，保藏號為CCTCC N0:M209272 ； ②種子液配制:取活化好的釀酒酵母HHL-1，接種于培養(yǎng)基中，滅菌得到的二級種子培養(yǎng)液，置于搖床內(nèi)培養(yǎng)，得到二級種子液； ③發(fā)酵:將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，再將接種好的二級發(fā)酵液置于搖床內(nèi)封閉發(fā)酵，得到二級發(fā)酵液； 3)制得香原料 ①分離二級發(fā)酵液得到上層清液，以50-99.5%的乙醇為溶劑萃取上層清液，將萃取液進行減壓濃縮，制成相對密度為1.015^1.324的濃縮液； ②將濃縮液于0.3^1 μ m微孔濾膜下過濾，收集濾液，并向濾液中添加濾液總重量的廣10%的丙二醇，即得香原料。
2.根據(jù)權利要求1所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟I)的發(fā)酵過程中，一級發(fā)酵培養(yǎng)基按重量百分比由80、5%的天然植物提取殘渣、5~20%的氮源和0~10%的碳源組成。
3.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟I)的菌種活化中，培養(yǎng)條件為，培養(yǎng)溫度:2(T35°C，培養(yǎng)時間:12~36h。
4.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟I)的發(fā)酵過程中，接種重量比為一級種子液:天然提取殘渣發(fā)酵培養(yǎng)基=1: 10~1000。
5.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟I)的種子液配制中，滅菌條件為:溫度為:11(T125°C滅菌時間為:2(T40min ;培養(yǎng)條件:溫度:20~35°C、轉速為:120~200轉、時間為:1~2天。
6.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟I)的發(fā)酵過程中，發(fā)酵條件；溫度為:2(T35°C、轉速為:120-200轉，時間:3~10天。
7.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述天然植物提取殘渣以一種提取殘渣或幾種按等比例混合的提取殘渣為原料，在烘干至水分含量為10~30%，粉碎過10-40目篩網(wǎng)后，按原料重量比的100~300%加水煮沸30min滅菌得到的，所述氮源為玉米漿、蛋白胨、氨水、硫酸銨、硝酸銨中的一種或幾種；所述碳源為葡萄糖、蔗糖、乳酸中的一種或幾種。
8.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟2)的發(fā)酵過程中，接種重量比為二級種子液:滅活的一級發(fā)酵物=1: 10~1000。
9.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:所述步驟2)的菌種活化中，培養(yǎng)溫度:20-35°C，培養(yǎng)時間:12~36h。
10.根據(jù)權利要求1或2所述利用天然植物提取殘渣制備發(fā)酵類香原料的方法，其特征在于:其特征在于:所述步驟2)的種子液配制中，滅菌條件為:溫度為:110-125°C滅菌時間為:20-40min ;培養(yǎng)條件:溫度:20~35°C、轉速為:120~200轉、時間為:1-2天，所述步驟2)的發(fā)酵過程中，發(fā)酵條件；溫度為:20-35°C、轉速為:120-200轉，時間:3~10天。
【文檔編號】C12R1/865GK103773806SQ201310268039
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2013年6月28日 優(yōu)先權日:2013年6月28日
【發(fā)明者】肖龍恩, 喻世濤, 程書鋒, 苗麗坤, 朱巍 申請人:湖北中煙工業(yè)有限責任公司, 武漢市黃鶴樓科技園有限公司