專利名稱：含多不飽和脂肪酸的固體脂肪組合物及其制備與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含多不飽和脂肪酸的固體脂肪組合物及其制備與應(yīng)用。本發(fā)明固體脂肪組合物可包含源自微生物的長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸。本發(fā)明還涉及用于制備這種產(chǎn)品以及含所述組合物的食品、營(yíng)養(yǎng)品和藥品的方法。
背景技術(shù)：
膳食脂質(zhì)是全面健康生活所必需的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在任何食物中，脂質(zhì)都是最集中的能量來源。脂質(zhì)的熱值(9千卡/克)是蛋白質(zhì)和糖(4千卡/克)的兩倍。脂質(zhì)不僅影響食物的口味、顏色、氣味和質(zhì)地，而且在人們食用后產(chǎn)生飽足感。脂質(zhì)也可用作脂溶性維生素的載體，提供必需的脂肪酸。必需的脂肪酸是多不飽和脂肪酸(PUFA)，其主鏈結(jié)構(gòu)中具有兩個(gè)或更多個(gè)雙鍵。存在兩組必需脂肪酸，即ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸。Q-3PUFA被認(rèn)為是防止動(dòng)脈硬化和冠心病的重要膳食化合物，用于緩解炎癥和延緩腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。Ω-6PUFA不僅能夠用作人體中的結(jié)構(gòu)脂質(zhì)，而且是許多炎癥因子如前列腺素和白三烯的前體。ω-3和co-6PUFA的一種重要類型是長(zhǎng)鏈ω-3和(0-6PUFA。脂肪酸分為飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸，后者進(jìn)一步細(xì)分為單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。飽和脂肪酸的脂族鏈中僅包含碳-碳單鍵，而所有其他的鍵均為氫原子飽和。不飽和脂肪酸的脂族鏈中包含碳-碳雙鍵。如果不飽和脂肪酸的分子中包含一個(gè)碳-碳雙鍵，則稱為單不飽和。PUFA包含兩個(gè)或更多個(gè)碳-碳雙鍵。短鏈脂肪酸的長(zhǎng)度約為2-7個(gè)碳原子，中鏈脂肪酸的長(zhǎng)度約為8-19個(gè)碳原子。另一方面，長(zhǎng)鏈脂肪酸具有20-24個(gè)或更多的碳。具有20個(gè)或更多碳的長(zhǎng)鏈PUFA(LC-PUFA)是本發(fā)明尤其感興趣的。根據(jù)脂肪酸碳鏈中第一雙鍵的位置，LC-PUFA可分成兩個(gè)主要的類型，稱為η_3(或ω-3)和η_6 (或ω-6)家族。ω-3或η_3標(biāo)識(shí)表示在該P(yáng)UFA家族中，第一雙鍵位于自分子的末端甲基起第三號(hào)位碳上。同樣的原理 適用于ω-6或η-6標(biāo)識(shí)。感興趣的LC-PUFA中，亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸分別含有兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)和六個(gè)雙鍵。二十二碳六烯酸(〃DHA〃)具有22個(gè)碳的鏈長(zhǎng)和從末端甲基起的第3個(gè)碳開始的6個(gè)雙鍵，稱為“22:6n-3”。其他重要的ω-3LC-PUFA包括二十碳五烯酸(飛卩六〃)，稱為“20:511-3”和ω-3 二十二碳五烯酸(“DPA η_3”)，稱為“22:5η_3”。重要的co-6LC-PUFA包括花生四烯酸(1狀〃)，稱為“20:411-6”和ω-6 二十二碳五烯酸(“DPAη-6”)，稱為 “22:5η-6”。
ω-3和ω-6型脂肪酸的母體化合物是亞油酸(LA)和α -亞麻酸(ALA)。LA和ALA被認(rèn)為是人體健康所必需的脂肪酸，因?yàn)槿瞬荒芎铣伤鼈兌仨氂缮攀倡@得。在體內(nèi)，這些母體化合物通過一系列交替去飽和作用(通過去除兩個(gè)氫原子而插入一額外的雙鍵)和延長(zhǎng)反應(yīng)(增加兩個(gè)碳原子)發(fā)生代謝。這需要一系列特殊的酶，稱為去飽和酶和延長(zhǎng)酶(elongase)。據(jù)認(rèn)為，代謝ω-6和ω-3脂肪酸的酶是相同的，導(dǎo)致兩個(gè)PUFA家族間競(jìng)爭(zhēng)這些酶。鏈延長(zhǎng)和去飽和反應(yīng)僅僅在脂肪酸分子的羧基末端發(fā)生。因此，所有代謝轉(zhuǎn)化不會(huì)改變含ω-3和ω-6雙鍵的分子的ω末端。因此，ω-3和ω-6酸是兩個(gè)獨(dú)立脂肪酸家族，因?yàn)樵谌梭w內(nèi)它們不會(huì)相互轉(zhuǎn)化。在過去20年間，健康專家推薦飽和脂肪含量較低而多不飽和脂肪含量較高的膳食。雖然該建議被許多消費(fèi)者采納，但心臟病、癌癥、糖尿病和許多其他導(dǎo)致虛弱的疾病的發(fā)生率仍在穩(wěn)步上升。科學(xué)家一致認(rèn)為多不飽和脂肪的類型和來源同脂肪總量一樣重要。最常見的多不飽和脂肪源自植物材料，缺乏長(zhǎng)鏈脂肪酸(尤其是o-3LC-PUFA)。此外，多不飽和脂肪氫化產(chǎn)生合成脂肪導(dǎo)致某些健康病癥增多并加劇了一些必需脂肪酸的缺乏。事實(shí)上，已證實(shí)許多醫(yī)學(xué)病癥可從補(bǔ)充ω-3得益。這些病癥包括:痤瘡、過敏癥、阿爾茨海默病、關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、乳腺囊腫、癌癥、囊性纖維化病、糖尿病、濕疹、高血壓、活動(dòng)過度、腸道疾病、腎功能障礙、白血病和多發(fā)性硬化。注意，世界衛(wèi)生組織推薦嬰兒配方應(yīng)富含ω-3和ω-6脂肪酸。通常使用的多不飽和脂肪酸源自植物油，包含顯著量ω-6(即，18:2η-6)，但ω-3極少或沒有。雖然ω-6和ω-3脂肪酸都是良好健康所必需的，但它們的推薦攝取比例約為4:1。ω-3的主要來源是亞麻仁油、魚油和藻類油。過去十年,亞麻仁油和魚油的生產(chǎn)快速發(fā)展。據(jù)認(rèn)為，這兩種類型的油是ω-3多不飽和脂肪的優(yōu)良膳食來源。亞麻仁油不含EPA、DHA、DPA或ARA，而是包含α -亞麻酸(18:3η_3)，α -亞麻酸(18:3η_3)是體內(nèi)制造DPA n-3、EPA和DHA的基本單元。然而，有證據(jù)表明，其代謝轉(zhuǎn)化速率緩慢且不穩(wěn)定，尤其是對(duì)于健康受損者。魚油中脂肪酸組成的類型和含量隨魚的具體種類及其飲食而差異顯著。例如，水產(chǎn)養(yǎng)殖魚比野生魚類的ω-3脂肪酸含量低。而且，魚油存在含有魚中常見的環(huán)境污染物的風(fēng)險(xiǎn)。鑒于這些ω-3和co-6LC-PUFA(鏈長(zhǎng)大于20)對(duì)健康的好處，人們希望通過食物補(bǔ)充這些脂肪酸。已知液態(tài)油如魚油和某些微生物油包含高含量的LC-PUFA。然而，由于其多不飽和性質(zhì)，這些油在室溫下(即20.C)不是固體，而是油狀或液體形式。然而，在某些食品應(yīng)用中，液態(tài)油不合適，可能需要使用固體形式的富含PUFA的油。為形成固體組合物，已嘗試了許多方法。通常用于固化不飽和油的方法包括這些油的部分或完全氫化，從而獲得半固態(tài)油。部分氫化方法導(dǎo)致形成“反式脂肪酸，已知這種脂肪酸具有某些不良作用。因此，采用氫化方法固化不飽和油的過程中，不飽和油的有益性質(zhì)受到非常不利的不良性質(zhì)的削弱，例如形成“反式”脂肪酸。其他方法包括將不飽和油與“硬”脂肪或飽和脂肪混合，所得混合物為半固體油。美國(guó)專利申請(qǐng)2007/0003686(其內(nèi)容被納入本文作為參考)公開了一種固體脂肪組合物，其包含具有飽和脂肪的油和具有長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸的微生物油以及乳化劑。用于形成包含高水平的多不飽和脂肪的可鋪展的半固體脂肪組合物的其他方法包括采用高水平的特定類型的乳化劑，或其他增稠劑如脂肪醇。

發(fā)明內(nèi)容
在本發(fā)明之前，本領(lǐng)域并沒有包含具有高水平PUFA的固體或半固體脂肪或食品而不需要外加乳化劑和/或其他類型的增稠劑的組合物。非常需要這種組合物以及這種組合物的制備方法。進(jìn)一步希望提供一種制備所述組合物的低成本方法，所述方法包括采用無害材料、最少的加工步驟以及最少的原料庫存。本發(fā)明提供了制備固體脂肪組合物的方法，該方法包括:a)將包含飽和脂肪的油與包含至少一種LC-PUFA的油混合形成混合物；和b)使混合物固化形成固體脂肪組合物，在制備所述固體脂肪組合物的過程中沒有加入外源性乳化劑。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的油選自:微生物硬脂精、未分餾棕櫚油、棕櫚油精、棕櫚硬脂精、棕櫚中段餾分、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚仁硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、棉籽硬脂精、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物、魚油硬脂精以及它們的組合。適用于本發(fā)明的包含至少一種LC-PUFA的油，優(yōu)選是微生物油，未經(jīng)冬化(winterization)處理。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，油包含飽和脂肪。油可包括但不限于:約5重量％-70重量％的至少一種LC-PUFA，所述LC-PUFA選自二十二碳六烯酸、ω -3或ω-6 二十二碳五烯酸、花生四烯酸或二十碳五烯酸。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油混合之前未經(jīng)加熱。本發(fā)明方法制備的固體脂肪組合物可以是或者可以摻入但不限于食品、營(yíng)養(yǎng)品和/或藥品。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含至少一種LC-PUFA的油與包含飽和脂肪的油的重量比為約1:9到約9:1。本發(fā)明制備固體脂肪組合物的方法可進(jìn)一步包括使包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的混合物脫臭的步驟。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，制備固體脂肪組合物的方法進(jìn)一步包括使所述混合物進(jìn)行酯交換。本發(fā)明還提供了一種固體脂肪組合物，其含有包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的混合物，其中所述混合物在室溫下為固體組合物，并且所述混合物不含外加乳化劑。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物中包含飽和脂肪的油選自:微生物硬脂精、未分餾棕櫚油、棕櫚油精、棕櫚硬脂精、棕櫚中段餾分、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚仁硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、棉籽硬脂精、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物、魚油硬脂精以及它們的組合。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物中包含至少一種LC-PUFA的油未經(jīng)冬化處理。油可包含飽和脂肪。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物可具有包含約5重量％-70重量％的至少一種LC-PUFA的油，所述LC-PUFA選自二十二碳六烯酸、ω -3或ω-6 二十二碳五烯酸、花生四烯酸或二十碳五烯酸。優(yōu)選地，本發(fā)明固體脂肪組合物不含反式脂肪酸。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物中包含至少一種LC-PUFA的油與包含飽和脂肪的油的重量比為約1:9到約9:1。本發(fā)明固體脂肪組合物可以是但不限于食品、營(yíng)養(yǎng)品或藥品。
本發(fā)明還提供了制備固體脂肪組合物的方法，該方法包括:a)將包含至少一種LC-PUFA的硬脂精與包含飽和脂肪的第二種油混合形成混合物jPb)使混合物固化形成固體脂肪組合物。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物的制備過程中無外加乳化劑。適用于本發(fā)明的硬脂精可包括但不限于:微生物硬脂精、魚油硬脂精、棕櫚硬脂精、棕櫚仁硬脂精、棉籽硬脂精、牛油樹脂硬脂精以及它們的組合。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的第二種油選自:未分餾棕櫚油、棕櫚油精、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚中段餾分、椰子油、未分餾牛油樹脂油、未分餾棉籽油、棉籽油精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物以及它們的組合。本發(fā)明還提供了一種固體脂肪組合物，其含有包含至少一種LC-PUFA的硬脂精組合物和包含飽和脂肪的第二種油的混合物，所述組合物在室溫下為固體。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，硬脂精選自:微生物硬脂精、魚油硬脂精、棕櫚硬脂精、棕櫚仁硬脂精、棉籽硬脂精、牛油樹脂硬脂精以及它們的組合。適用于本發(fā)明的包含飽和脂肪的第二種油可包括但不限于:未分餾棕櫚油、棕櫚油精、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚中段餾分、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物以及它們的組合。附圖簡(jiǎn)要說明

圖1顯示了用于制備適用于本發(fā)明的包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的各種可選的實(shí)施方式。圖2顯示了用于制備適用于本發(fā)明的經(jīng)最少加工的PUFA油的各種可選的實(shí)施方式。圖3顯示了用于制備本發(fā)明包含PUFA的固體脂肪組合物的各種可選的實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式如本發(fā)明所述，食品、營(yíng)養(yǎng)品和藥品組合物及其制備方法能提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具體是LC-PUFA，更具體是ω-3和ω-6LC-PUFA的攝取，為這些產(chǎn)品的消費(fèi)者的健康帶來益處。本發(fā)明提供了高品質(zhì)的含PUFA的固體脂肪產(chǎn)品及其制備與應(yīng)用。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，含PUFA的固體脂肪產(chǎn)品包含經(jīng)最少加工制備的含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品，所述固體脂肪產(chǎn)品具有改良的功能、改良的穩(wěn)定性，并且與許多應(yīng)用，包括天然和/或有機(jī)市場(chǎng)部門相容。例如，包含LC-PUFA的本發(fā)明固體脂肪組合物可用于或用作營(yíng)養(yǎng)品、食品和/或藥品(醫(yī)用和/或治療用)。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，用于制備本發(fā)明產(chǎn)品的油是源自微生物生物質(zhì)的含LC-PUFA的微生物油。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含至少一種LC-PUFA的油可以是經(jīng)最少加工制備的微生物油，該油是含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品，可用作制備本發(fā)明固體脂肪組合物的原料。用于制備這種經(jīng)最少加工的微生物油的方法包括從微生物質(zhì)提取包含至少一種LC-PUFA的含油餾分，以制備微生物油。培養(yǎng)包含能夠在微生物油中回收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和/或LC-PUFA的微生物的微生物來源和方法是本領(lǐng)域已知的(工業(yè)微生物學(xué)與生物技術(shù)(IndustrialMicrobiology and Biotechnology),第2版，1999,美國(guó)微生物學(xué)會(huì))。優(yōu)選地,在發(fā)酵罐中用發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物。本發(fā)明的方法和組合物適用于產(chǎn)生LC-PUFA的任何工業(yè)微生物。
微生物來源可包括諸如藻類、細(xì)菌、真菌(包括酵母)和/或原生生物等微生物。優(yōu)選的微生物包括選自下組的微生物:金色藻(如假菌界(Stramenopiles)的微生物)、綠藻、娃藻、腰鞭毛蟲(如甲藻綱的微生物、包括甲藻屬(Crypthecodinium)的成員，例如隱甲藻(Crypthecodinium cohnii))、酵母、毛霉屬(Mucor)和被抱霉屬(Mortierella)的真菌，包括但不限于高山被孢霉(Mortierella alpina)和被孢霉變種菌(Mortierellasect.Schmuckeri)。假菌界微生物包括:微藻(microalgae)和類似藻的微生物，包括以下微生物:漢姆門(Hamatores)，普羅特蒙門(Proteromonads)，歐帕門(Opalines)，德維爾派門(Develpayella)，戴普羅弗門(Diplophrys)，拉普利門(Labrinthulids)，破囊壺菌門(Thraustochytrids)，拜爾瑟門(Biosecids)，水霉門(Oomycetes)，海植戴爾門(Hypochytridiomycetes)，康曼門(Commation)，瑞可羅門(Reticulosphaera)，普萊格門(Pelagomonas)，普萊格可門(Pelagococcus)，歐里可拉門(Ollicola)，奧瑞可門(Aureococcus)，小殼藻門(Parmales)，娃藻門(Diatoms)，黃藻門(Xanthophytes)，褐藻門(Phaeophytes)，黃綠藻門(Eustigmatophytes)，綠鞭藻門(Raphidophytes)，新紐門(Synurids)，愛科斯汀門(Axodines)(包括瑞佐克姆綱(Rhizochromulinaales)，娃鞭藻綱(Pedinellales)，娃鞭藻綱(Dictyochales))，克里索達(dá)綱(Chrysomeridales)，薩西諾達(dá)綱(Sarcinochrysidales)，水樹藻目(Hydrurales)，塾居金藻目(Hibberdiales)和色金藻目(Chromulinales)。破囊壺菌門(Thraustochytrids)包括:裂殖壺菌屬(Schizochytrium)(種包括黃金石斛(aggregatum)、黎姆萘瑟(Iimnaceum)、芒格(mangrovei)、迷你藻(minutum)、歐托(octosporum))，破囊壺菌屬(Thraustochytrium)(種包括阿迪門多(arudimentale),奧雷姆(aureum)，碧席考拉(benthicola)，格羅波(gobosum)，凱尼(kinnei)，摩迪(motivum),茂迪待(multirudimentale)，派凱(pachydermum)，普羅弗(proliferum),羅素(roseum)，斯托特(striatum))，吾肯氏壺菌屬(Ulkenia)(種包括埃摩拜迪(amoeboidea)，科格尼斯(kerguelensis)，米鈕塔(minuta)，普羅弗達(dá)(profunda)，雷迪安(radiate),塞侖(sailens)，賽卡瑞那(sarkariana),斯佐凱(schizochytrops),維格斯(visurgensis),優(yōu)克尼斯(yorkensis))，破囊壺菌屬(Aplanochytrium)(種包括海羅迪(haliotidis)，科格侖斯(kerguelensisi)，普羅弗達(dá)(profunda),斯托凱(stocchinoi))，日本壺菌屬(Japonochytrium)(種包括麥尼(marinum))，阿爾托尼氏壺菌屬(Althornia)(種包括克勞迪(crouchii))和埃氏壺菌屬(Elina)(種包括瑪瑞薩(marisalba)，欣諾瑞弗卡(sinorifica)) □拉普利門(Labrinthulids)包括拉普利屬(Labyrinthula)(種包括埃格瑞尼(algeriensis)，考諾賽斯(coenocystis)，查托尼(chattonii)，瑪克賽斯(macrocystis)，大西洋瑪克賽斯(macrocystisatlantica)，雙重瑪克賽斯(macrocystis macrocystis),瑪瑞那(marina)，邁紐塔(minuta)，羅斯科弗尼(roscoffensis)，凡卡諾維(valkanovii)，維麗那(vitellina)，太平洋維麗那(vitellina pacifica)，雙重維_那(vitellina vitellina),佐普菲(zopfi))，拉普利索屬(Labyrinthomyxa)(種包括瑪瑞那(marina))，拉普利諾屬(Labyrinthuloides)(種包括海羅迪(haliotidis),優(yōu)克尼斯(yorkensis))，戴普羅弗屬(Diplophrys)(種包括阿凱瑞(archeri))，皮霍索屬(Pyrrhosorus*)(種包括瑪瑞紐斯(marinus))，索羅迪普羅屬(Sorodiplophrys*)(種包括斯特考瑞(stercorea))，克萊米多屬(Chlamydomyxa*)(種包括拉普利諾(Iabyrinthuloides)，蒙塔那(montana))。(*=對(duì)于這些屬的準(zhǔn)確分類學(xué)定位目前尚未達(dá)成一致)。雖然許多種類的微生物都是本發(fā)明原料的合適來源，但出于簡(jiǎn)短、方便和說明的考慮，本發(fā)明的詳細(xì)描述將討論培養(yǎng)能夠產(chǎn)生包含ω-3和/或ω-6多不飽和脂肪酸的脂質(zhì)的微生物，具體是能夠產(chǎn)生DHA、DPAn-3、DPAn_6、EPA或ARA的微生物的方法。其他優(yōu)選的微生物是藻類，例如破囊壺菌界(Thraustochytriales)的破囊壺菌門，包括破囊壺菌屬(Thraustochytrium)(包括吾肯氏壺菌屬(Ulkenia))和裂殖壺菌屬(Schizochytrium),包括破囊壺菌(Thraustochytriales),在共同授予Barclay的美國(guó)專利5，340，594和5，340，742中有描述，其全部?jī)?nèi)容被納入本文作為參考。更優(yōu)選地，微生物選自下組:具有ATCC第20888號(hào)、ATCC第20889號(hào)、ATCC第20890號(hào)、ATCC第20891號(hào)和ATCC第20892號(hào)鑒定特征的微生物。由于專家對(duì)于吾肯氏壺菌屬是否是一種獨(dú)立的破囊壺菌屬存在分歧，在本發(fā)明中，破囊壺菌屬包括吾肯氏壺菌屬。還優(yōu)選被孢霉變種菌(Mortierella sect.schmuckeri)(例如,包括具有ATCC74371鑒定特征的微生物)和高山被孢霉(Mortierella alpine)(例如，包括具有ATCC42430鑒定特征的微生物)。還優(yōu)選隱甲藻(Crypthecodinium cohnii)，包括具有ATCC30021, 30334-30348, 30541-30543, 30555-30557，30571，30572，30772-30775, 30812，40750, 50050-50060 和 50297-50300 鑒定特征的微生物。也優(yōu)選源自任一上述菌株的突變株以及它們的混合物。也優(yōu)選油脂性微生物。如本文所用，“油脂性微生物”指能夠累積超過20%菌體(cell)重量的脂質(zhì)形式的微生物。產(chǎn)生LC-PUFA的遺傳改造的微生物也適用于本發(fā)明。這些微生物包括經(jīng)遺傳修飾的天然產(chǎn)生LC-PUFA的微生物，以及經(jīng)遺傳改造能夠產(chǎn)生LC-PUFA但天然并不產(chǎn)生LC-PUFA的微生物。合適的微生物可從各種來源獲得，包括從自然環(huán)境收集。美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)已列出許多公開可得的上述微生物菌株。如本文所用，任何微生物或微生物的任何特定類型包括野生型、突變體或重組類型。這些生物體的培養(yǎng)條件是本領(lǐng)域已知的，這些微生物中至少有一些微生物的適當(dāng)培養(yǎng)條件見述于例如美國(guó)專利5，130，242，美國(guó)專利5，407，957，美國(guó)專利5，397，591，美國(guó)專利5，492，938，美國(guó)專利5，711，983，美國(guó)專利5，882，703，美國(guó)專利6，245，365和美國(guó)專利6，607，900，所有專利的全部?jī)?nèi)容被納入本文作為參考。本發(fā)明中使用的微生物油可通過本領(lǐng)域已知的任何適當(dāng)?shù)姆绞綇奈⑸飦碓传@得。例如，可采用諸如氯仿、己烷、二氯甲烷、甲醇等溶劑進(jìn)行萃取，或者通過超臨界流體提取回收油?；蛘?，可采用萃取技術(shù)提取油，例如美國(guó)專利6，750，048和PCT專利申請(qǐng)序列號(hào)US01/01806所述，這兩份申請(qǐng)均在2001年I月19日以“無溶劑提取方法(SolventlessExtraction Process) ”提交,其全部?jī)?nèi)容被納入本文作為參考。其他提取和/或純化技術(shù)參見:2001年4月12日提交的題為“含油和極性脂質(zhì)的天然原料的分餾方法(Method forthe Fractionation of Oil and Polar Lipid-Containing Native Raw Materials)” 的PCT專利申請(qǐng)序列號(hào)PCT/IB01/00841 ；2001年4月12日提交的題為“采用水溶性有機(jī)溶劑進(jìn)行含油和極性脂質(zhì)的天然原料的分懼與離心方法(Method for the Fractionationof Oil and Polar Lipid-Containing Native Raw Materials Using Water-SolubleOrganic Solvent and Centrifugation) ” 的 PCT 專利申請(qǐng)序列號(hào) PCT/IB01/00963 ；2001年5月14日提交的題為“含有來自植物種子和微生物的十八碳四烯酸和Y-亞麻酸的富含極性脂質(zhì)的懼分的制備與應(yīng)用(Production and Use of a Polar Lipid-Rich FractionContaining Stearidonic Acid and Gamma Linolenic Acid from Plant Seeds andMicrobes) ”的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)序列號(hào)60/291，484 ；2001年5月14日提交的題為“含有來自微生物、遺傳改造的植物種子和海洋生物的ω-3和/或ω-6高度不飽和脂肪酸的極性脂質(zhì)懼分的制備與應(yīng)用(Production and Use of a Polar-Lipid Fraction Containing0mega-3and/or 0mega-6Highly Unsaturated Fatty Acids from Microbes, GeneticallyModified Plant Seeds and Marine Organisms) ”的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)序列號(hào)60/290，899 ;2000年2月17日提交并于2002年6月4日授權(quán)的題為“從甘油三酯混合物中分離含有二十二碳六烯酸殘留成分的甘油三酯的方法(Process for Separating a TriglycerideComprising a Docosahexaenoic Acid Residue from a Mixture ofTriglycerides)” 的美國(guó)專利6，399，803 ;和2001年I月11日提交的題為“制備富含多不飽和脂肪酸酯的混合物的方法(Process for Separating a Triglyceride Comprising a DocosahexaenoicAcid Residue from a Mixture ofTriglycerides) ” 的 PCT 專利申請(qǐng)序列號(hào) US01/01010 ;其全部?jī)?nèi)容被納入本文作為參考。提取的油經(jīng)減壓蒸發(fā)得到濃縮的油料樣品?；厥罩|(zhì)的生物質(zhì)酶處理方法參見:2002年5月3日提交的題為“由生物質(zhì)酶釋放得到的高品質(zhì)脂質(zhì)及其制備方法(HIGH-QUALITY LIPIDS AND METHODS FOR PRODUCING BY ENZYMATICLIBERATION FROM BIOMASS) ”的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)60/377，550 ；2003年5月5日提交的題為“由生物質(zhì)酶釋放得到的高品質(zhì)脂質(zhì)及其制備方法(HIGH-QUALITY LIPIDS AND METHODSFOR PRODUCING BY ENZYMATIC LIBERATION FROM BIOMAS S) ”的 PCT 專利申請(qǐng)序列號(hào) PCT/US03/14177 ;2004年10月22日提交的題為“由生物質(zhì)酶釋放得到的高品質(zhì)脂質(zhì)及其制備方法(HIGH-QUALITY LIPIDS AND METHODS FOR PRODUCING BY LIBERATION FROM BIOMASS) ”的共同待批美國(guó)專利申請(qǐng)10/971，723;題目均為“利用離心力從天然物質(zhì)混合物提取非7jC溶性天然產(chǎn)物的方法(Process for extracting native products which are notwater-soluble from native substance mixtures by centrifugal force) ” 的歐洲專利公開0776356和美國(guó)專利5，928，696，所有文獻(xiàn)的內(nèi)容被納入本文作為參考。在優(yōu)選實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的微生物油是由上述方法制備得到的高品質(zhì)微生物原油。這些油相對(duì)于(例如)魚油具有顯著的優(yōu)點(diǎn)，魚油產(chǎn)生的原油通常品質(zhì)較差，因?yàn)閺聂~生物質(zhì)回收通常涉及烹飪和己烷提取，并且魚油包含污染物、其他不良組分和/或不利的脂肪酸分布。包含至少一種LC-PUFA的油包含至少一種LC-PUFA。本發(fā)明優(yōu)選的PUFA包括C20、C22、C24 ω -3 或 ω -6PUFA。優(yōu)選地，PUFA 是長(zhǎng)鏈 PUFA (LC-PUFA)，包括 C20 或 C22 ω -3，或C20或C22 ω -6PUFA。本發(fā)明LC-PUFA優(yōu)選包含至少兩個(gè)雙鍵，更優(yōu)選至少三個(gè)雙鍵，甚至更優(yōu)選至少四個(gè)雙鍵。具有4個(gè)或更多不飽和碳-碳鍵的PUFA通常也稱為高度不飽和的脂肪酸，或HUFA。具體說，LC-PUFA可包括:二十二碳六烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約35重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)，二十二碳五烯酸n-3 (至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)，二十二碳五烯酸η-6 (至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)，花生四烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)和/或二十碳五烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)。PUFA可以是天然脂質(zhì)中常見形式的任一種，包括但不限于三酰甘油，二酰甘油，單酰甘油，磷脂，游離脂肪酸，酯化脂肪酸，或這些脂肪酸的天然或合成的衍生物形式(例如，脂肪酸的鈣鹽，乙酯等)ο在優(yōu)選實(shí)施方式中，含微生物油的餾分包含餾分中至少約70重量％，至少約80重量％，至少約90重量％，或至少約95重量％的甘油三酯形式的PUFA。本文所用術(shù)語LC-PUFA指包含一種ω-3LC-PUFA (如DHA)的油，包含一種ω-6LC-PUFA (如ARA或DPA η-6)的油，或包含兩種或更多種LC-PUFA (如DHA、DPAn_6、ARA和EPA)的混合物的油。在優(yōu)選實(shí)施方式中，產(chǎn)物包含LC-PUFA及至少一種其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。除了使用微生物質(zhì)提取包含LC-PUFA的油，基于植物的來源，例如含油種子也可用作提取或回收LC-PUFA的生物質(zhì)，包括例如任何高等植物，尤其是可用的植物，包括農(nóng)作物，特別是用于榨油的植物。從植物生物質(zhì)提取的這些油可按照本文所述進(jìn)行加工和處理，以制備油產(chǎn)品。這些植物可包括例如:低芥酸菜籽(canola)、大豆、油菜籽、亞麻子、玉米、紅花、向日葵和煙草。其他優(yōu)選的植物包括已知能夠產(chǎn)生用作藥劑、芳香劑、營(yíng)養(yǎng)劑、功能食物成分或美容活性劑的化合物的植物，或者經(jīng)遺傳工程改造產(chǎn)生這些化合物/制劑的植物。產(chǎn)生PUFA的植物包括經(jīng)遺傳工程改造而表達(dá)產(chǎn)生PUFA的基因的那些植物，以及天然產(chǎn)生PUFA的那些植物。這些基因可包括為參與經(jīng)典脂肪酸合成路徑的蛋白質(zhì)編碼的基因，或者為參與PUFA聚酮化合物合酶(PKS)途徑的蛋白質(zhì)編碼的基因。以下文獻(xiàn)中描述了參與經(jīng)典脂肪酸合成路徑的基因和蛋白質(zhì)，以及用這些基因轉(zhuǎn)化的經(jīng)遺傳工程改造的生物體，例如植物:Napier和Sayanova,《營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)學(xué)報(bào)》(Proceedings of theNutrition Society) (2005)，64:387 - 393 ；Robert 等，《功能植物生物學(xué)》(FunctionalPlant Biology) (2005)32:473-479 ;或美國(guó)專利申請(qǐng)公開2004/0172682。以下文獻(xiàn)詳細(xì)描述了 PUFAPKS路徑、該路徑中包含的基因和蛋白質(zhì)以及用于表達(dá)和產(chǎn)生PUFA的用該基因轉(zhuǎn)化的遺傳工程改造的微生物和植物:美國(guó)專利6，140, 486 ;美國(guó)專利6，566，583 ;美國(guó)專利申請(qǐng)公開20020194641 ;美國(guó)專利7，211，418 ;美國(guó)專利申請(qǐng)公開20050100995A1 ;美國(guó)專利申請(qǐng)公開20070089199 ;PCT公開W005/097982 ;和美國(guó)專利申請(qǐng)公開20050014231 ;其各自的內(nèi)容被納入本文作為參考。這些植物，尤其是含油種子可通過常規(guī)方法處理以回收油，例如通過清潔、脫殼(dehulling)和研磨。然后，壓榨種子以產(chǎn)生油或與溶劑接觸(例如刨片后)以提取油。合適的溶劑可包括有機(jī)溶劑、與水混溶的溶劑和水。優(yōu)選的溶劑是己烷。適用于本發(fā)明組合物和方法的另一種含PUFA的油的生物質(zhì)來源包括動(dòng)物來源。動(dòng)物來源的例子包括水生動(dòng)物(例如，魚、海洋哺乳動(dòng)物和甲殼動(dòng)物，例如磷蝦和其他磷蝦目浮游甲殼動(dòng)物)和動(dòng)物組織(例如，腦、肝、眼等)以及動(dòng)物產(chǎn)物如卵或乳汁。從這些來源回收含PUFA的油的技術(shù)是本領(lǐng)域已知的。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，用于制備固體脂肪組合物的油(如微生物油)經(jīng)精制、漂白、脫臭、冬化、或冷濾等處理，或聯(lián)用這些處理。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，有用的含PUFA的油產(chǎn)品的其他特征在于，它們包含至少足以從視覺上影響含油餾分的飽和脂肪酸。許多含PUFA的油產(chǎn)品包含足量的飽和脂肪酸，其形式在室溫下(即20°C)足以從視覺上影響油，例如導(dǎo)致油變渾濁。一些這樣的產(chǎn)品甚至因飽和脂肪酸的存在而變成糊狀，例如因?yàn)樗鼈儼懔扛视腿バ问降娘柡椭舅?。雖然在常規(guī)工藝中，這種油產(chǎn)品經(jīng)冬化去除飽和脂肪酸，但這種油產(chǎn)品可不經(jīng)冬化用于本發(fā)明，如下文更詳細(xì)所述。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明中使用的油具有尤其適用于產(chǎn)生包含LC-PUFA的固體或半固體組合物的脂質(zhì)分布。更具體說，這種油中高度不飽和化合物(例如,4、5或更高的不飽和度)相對(duì)集中，飽和化合物相對(duì)集中，且/或單、二和三-飽和的化合物的含量較低。這種組合物的特征在于，就飽和性而言，其化合物具有雙模態(tài)分布，即大量飽和化合物和大量高度不飽和化合物，而中間不飽和度的化合物的含量較低。例如，這種油可包含大于約20重量％、大于約25重量％、大于約30重量％、大于約35重量％、大于約40重量％、大于約45重量％或大于約50重量％的不飽和度為4或更高的高度不飽和化合物。在其它實(shí)施方式中，這種油可包含大于約20重量％、大于約25重量％、大于約30重量％、大于約35重量％、大于約40重量％、大于約45重量％或大于約50重量％的不飽和度為5或更高的高度不飽和化合物。可選地或此外,這種油可包含大于約30重量％、大于約35重量％、大于約40重量％、大于約45重量％或大于約50重量％的飽和化合物。可選地或此外，這種油可包含小于約25重量％、小于約20重量％、小于約15重量％、小于約10重量％或小于約5重量％的單、二或三-飽和的化合物。制備包含至少一種LC-PUFA的經(jīng)最少加工的含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品可進(jìn)一步包括處理根據(jù)本文所述制備的含提取油的餾分，例如美國(guó)專利公開US-2007-003686-A1中描述的含油餾分。這種進(jìn)一步的處理可包括但不限于真空蒸發(fā)工藝，用以制備包含至少一種LC-PUFA的油產(chǎn)品。真空蒸發(fā)工藝可包括通過高度真空蒸發(fā)去溶劑和/或干燥，它是本領(lǐng)域公知的。該工藝包括將提取的油置于真空條件下，優(yōu)選置于高溫下(例如約50°C -70°C )。例如，可將油置于大于約IOOmmHg的真空中，大于約70mmHg的真空中，大于約50mm Hg的真空中。例如，如本文所用，“大于約IOOmm Hg的真空”表示較強(qiáng)的真空,例如9OmmHg或8OmmHg的真空。在這些條件下，將餾出提取油中沸點(diǎn)低于油的任何溶劑、水或其他組分。除臭工藝是本領(lǐng)域公知的，包括將提取的油置于真空條件下，以去除可能存在的任何低分子量組分。通常，在高溫、高度真空條件下，用蒸氣噴射來去除這些組分。例如，通常將油置于大于去溶劑工藝所用的真空中。具體說，真空可以是大于約50mm Hg的真空，大于約25mm Hg的真空,大于約12mm Hg的真空,大于約6mmHg的真空,通常為約12mmHg到約6mmHg,或約6mm Hg到約Imm Hg。該工藝也可破壞可能存在的許多過氧化物鍵,減少或去除臭味，并有助于改善油的穩(wěn)定性。此外，在這些條件下，提取油中沸點(diǎn)低于油的溶劑、水和/或其他組分將餾出。除臭通常在高溫下進(jìn)行，例如約190.C到約220.C。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，本發(fā)明中使用的含PUFA的油適用于人和非人動(dòng)物的消費(fèi)。就是說，油的感官特性使得該產(chǎn)品能夠被人和非人動(dòng)物所接受。具體說，油可包含低濃度的游離脂肪酸、磷、過氧化值、茴香胺值、皂和重金屬。根據(jù)本文所述方法制備油，最大程度減少了為使其達(dá)到可接受的商業(yè)條件所需的下游加工步驟?？山Y(jié)合到適用于本發(fā)明的含PUFA的油的制備過程中的具體改進(jìn)包括省去溶劑冬化步驟、省去苛性精制工序、省去冷濾工序，還有可能省去漂白工序。此外，高真空蒸發(fā)工序可代替除臭工序。上述工藝有利于通過保留足量飽和化合物以防止組合物在室溫下(即約20°C )呈液體來制備固體或半固體產(chǎn)品。上述工藝能夠由原油，尤其是微生物原油制備食用油，回收率格外地高(95%-100%)，并且與天然和/或有機(jī)市場(chǎng)部門相適應(yīng)。
在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和/或漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低濃度的游離脂肪酸。油中游離脂肪酸濃度的測(cè)量是本領(lǐng)域已知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油中游離脂肪酸的含量小于約0.5重量％，小于約0.1重量％，小于約0.05重量％。在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低磷值。油的磷值的測(cè)量是本領(lǐng)域公知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油的磷值小于約IOppm,小于約5ppm,約為Oppm。在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低過氧化值。油的過氧化值的測(cè)量是本領(lǐng)域公知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油的過氧化值小于約2meq/kg,,小于約lmeq/kg,約為 Omeq/kg。在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低茴香胺值。油的茴香胺值的測(cè)量是本領(lǐng)域公知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油的茴香胺值小于約5，小于約3，小于約2，小于約1，小于約0.5，小于約0.3，小于約0.1，以及低于檢測(cè)限。在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低皂類濃度。油的皂類濃度的測(cè)量是本領(lǐng)域公知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油的皂類含量小于約5重量％，小于約2.5重量％，
約為O重量％。在各種實(shí)施方式中，適用于本發(fā)明的油產(chǎn)品，例如未經(jīng)溶劑冬化、苛性精制、冷濾和漂白中的一種或多種常規(guī)工藝步驟處理的油具有低重金屬值。油的重金屬值的測(cè)量是本領(lǐng)域公知的。更具體地，適用于本發(fā)明的油中Fe濃度小于約lppm、小于約0.5ppm,優(yōu)選約為Oppm ；Pb濃度小于約lppm、小于約0.2ppm,優(yōu)選約為Oppm ；Hg濃度小于約0.lppm、小于約0.04ppm,優(yōu)選約為Oppm ；Ni濃度小于約0.lppm、小于約0.0lppm,優(yōu)選約為Oppm ；Cu濃度小于約lppm、小于約0.2ppm,優(yōu)選約為Oppm。制備具有至少一種LC-PUFA的經(jīng)最少加工的含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品的方法可任選地包括在除臭步驟或高真空分餾步驟之前或之后漂白油的步驟，但更通常的做法是在除臭步驟之前進(jìn)行。漂白油是本領(lǐng)域公知的，可以常規(guī)工藝實(shí)現(xiàn)。具體說，例如，可將用于去除殘余阜和漂白粘土的二氧化娃吸附劑(例如Trysil600 (格雷斯化學(xué)公司(GraceChemicals)))加入油中，然后濾出。通常，在漂白粘土之前加入二氧化硅吸附劑。制備具有至少一種LC-PUFA的經(jīng)最少加工的含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品的方法可包括制備含LC-PUFA的液體油餾分和含LC-PUFA的固體脂肪產(chǎn)品的工藝。該工藝包括如本文所述的分餾高品質(zhì)原油，優(yōu)選微生物原油的步驟，形成油產(chǎn)品和相關(guān)的固體脂肪產(chǎn)品。這種原油產(chǎn)品可通過從生物質(zhì)，在一些實(shí)施方式中，從微生物質(zhì)提取包含至少一種LC-PUFA和飽和脂肪酸的含油餾分進(jìn)行制備。含油餾分經(jīng)冬化、冷濾、真空蒸發(fā)和/或其他方式處理，產(chǎn)生包含至少一種LC-PUFA的液體油產(chǎn)品和包含至少一種LC-PUFA的固體產(chǎn)品。所述其他處理方式可包括從固體組合物過濾分離液體油餾分。通過固/液分離技術(shù)可回收包括吸附劑的固體餾分組分。通過加熱吸附劑和固體脂肪材料以熔化固體脂肪材料，可從固體餾分分離任何吸附劑。然后，通過過濾，可從熔化的固體分離吸附劑，然后通過冷卻使熔化的固體重新固化?；厥盏墓腆w餾分可包含高水平的LC-PUFA。在優(yōu)選實(shí)施方式中，固體餾分將包含至少約20%，至少約25%，至少約30重量％的LC-PUFA，在一些實(shí)施方式中是DHA。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體餾分包含硬脂精。澄清油和固體各自可用作食品，或者用作食品添加劑。根據(jù)本發(fā)明制備的油產(chǎn)品可以是固體或半固體材料。如本文所用，術(shù)語“油”包括室溫下為固體或半固體的那些材料，以及室溫下為液體的材料。如本文所用，術(shù)語“半固體油”指在正常的室溫下為半固體、流體和可傾倒的脂肪
女口
廣叩ο如本文所用，術(shù)語“固體”或“塑性”脂肪產(chǎn)品指在約25°C的典型儲(chǔ)存溫度下為固體、非流體或不可傾倒的脂肪產(chǎn)品。制備具有至少一種LC-PUFA的經(jīng)最少加工的含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品可任選地包括在除臭步驟或者高真空分餾步驟之后分餾油的步驟，形成油精餾分和硬脂精餾分。分餾形成油精和硬脂精餾分可應(yīng)用于任何原油，或者經(jīng)漂白或除臭的油，以制備澄清的油精餾分和硬的硬脂精餾分。由于其物理性質(zhì)的差異，油精和硬脂精可用于不同的食品應(yīng)用。在常規(guī)工藝中，硬脂精是油水混合物冬化和冷濾的副產(chǎn)物，經(jīng)處理導(dǎo)致約 30%的損失。因此，分餾可產(chǎn)生易賣的硬脂精餾分。這種類型的分餾的一個(gè)例子在下文實(shí)施例4中描述。本發(fā)明還提供了通過含LC-PUFA的油的冬化處理(即冷濾、油水混合物冬化等)回收含LC-PUFA的硬脂精的方法。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，通過含LC-PUFA的油的冬化處理回收含LC-PUFA的硬脂精不需要分餾油。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，含LC-PUFA的硬脂精是微生物硬脂精。如本文所用，“微生物硬脂精”包括通過微生物油的分餾或其他處理(例如油水混合物冬化和冷濾)回收的硬脂精。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，含LC-PUFA的硬脂精包含約15重量％_50重量％的LC-PUFA。例如，本發(fā)明含LC-PUFA的硬脂精可包含至少約20重量％、至少約25重量％、至少約30重量％或至少約35重量％的LC-PUFA，具體是DHA。這種含LC-PUFA的硬脂精適用于制備本發(fā)明固體脂肪組合物。參考圖1，該圖呈現(xiàn)了制備合適的包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的各種可選的方法?？蓪?duì)原料如生物質(zhì)或經(jīng)噴霧干燥的生物質(zhì)進(jìn)行溶劑處理，以提取原油。這種原油可包括LC-PUFA?？蓪?duì)原油進(jìn)行高真空蒸發(fā)，去除原油中沸點(diǎn)比所需的油組分低的提取溶劑、水和其他組分?；蛘?，可對(duì)原油進(jìn)行任選的漂白步驟，例如去除類胡蘿卜素。然后，在高溫、高真空條件下用蒸氣噴射油，對(duì)經(jīng)任選處理的原油進(jìn)行除臭。高真空蒸發(fā)或除臭處理后產(chǎn)生的最終的油產(chǎn)品可經(jīng)過任選的分餾處理，形成油精餾分和硬脂精餾分。參考圖2，通過流程圖展示了制備適用于本發(fā)明的經(jīng)最少加工的PUFA油的各種可選方法。在其最基本的形式中，該方法包括用含生物質(zhì)(在一些實(shí)施方式中是微生物質(zhì))的巴氏消毒發(fā)酵液開始的步驟。預(yù)處理發(fā)酵液，通過裂解，例如通過酶處理或機(jī)械破碎，從菌體釋放油。然后，對(duì)預(yù)處理的發(fā)酵液進(jìn)行提取，以制備油。然后，該方法包括除臭步驟，如本文所述。在一可選的實(shí)施方式中，該方法還包括漂白步驟，即在除臭步驟之前對(duì)提取的油進(jìn)行漂白。在又一可選的實(shí)施方式中，可以在漂白步驟之前和/或在漂白和除臭步驟之間對(duì)提取的油進(jìn)行冬化步驟(即冷濾)。
根據(jù)本文所述制備經(jīng)最少加工的油的方法以及所得產(chǎn)品具有許多顯著的優(yōu)點(diǎn)。與制備含PUFA的油產(chǎn)品的常規(guī)方法相比，這些方法的成本較低，加工要求減少，產(chǎn)量增加，力口工步驟的安全性提高，并且消除了廢料/副產(chǎn)物流。而且，這些方法與天然和/或有機(jī)市場(chǎng)部門是一致的。如下文更詳細(xì)所述，本發(fā)明的含PUFA的高品質(zhì)固體脂肪產(chǎn)品可用于各種食品和應(yīng)用。人類可直接消費(fèi)固體脂肪產(chǎn)品，作為營(yíng)養(yǎng)劑、飲食、醫(yī)用產(chǎn)品或藥品。此外，固體脂肪產(chǎn)品可與供人類消費(fèi)以改善營(yíng)養(yǎng)的任何已知的人用食品或液體組合。也可將固體脂肪產(chǎn)品作為飼料或者作為動(dòng)物飼料的添加劑直接給予動(dòng)物。這樣，任何基于動(dòng)物的食品被人體消費(fèi)時(shí)可具有提高的品質(zhì)。本發(fā)明固體脂肪產(chǎn)品的使用也可擴(kuò)展至脂質(zhì)體、藥物載體、化妝品、寵物食品和水產(chǎn)飼料。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，本文所述的油產(chǎn)品可組合形成摻混物。例如，來自隱甲藻(Crypthecodinium cohnii)的經(jīng)最少加工的油可與來自高山被孢霉(Mortierellaalpina)的物理精制油摻混，所得摻混物可用于制備本發(fā)明的固體脂肪組合物。作為另一個(gè)例子，采用本文所述的油可制備含ARA的油和含DHA的油的摻混物，其中ARA與DHA的比例可以變化。這種摻混物可包含比例約為1:1到約2:1的ARA:DHA。更具體說，可制備ARA: DHA比例約為1:1，1.25:1，1.5:1，1.75:1或2:1的摻混物。參考圖3，該圖呈現(xiàn)了用于制備固體脂肪組合物的本發(fā)明的各種可選實(shí)施方式。在一個(gè)實(shí)施方式中，將半固體原油與粗品硬脂精組合形成混合物。然后對(duì)該混合物進(jìn)行除臭，再形成固體脂肪產(chǎn)品。形成固體脂肪產(chǎn)品的方法可任選地包括精制步驟、漂白步驟和/或酯交換步驟。在另一實(shí)施方式中，對(duì)粗品硬脂精進(jìn)行除臭，形成固體脂肪產(chǎn)品。單獨(dú)從硬脂精形成固體脂肪產(chǎn)品的方法可任選地包括精制步驟和/或漂白步驟。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，制備固體脂肪組合物的方法還包括使包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的混合物發(fā)生酯交換的步驟。這種酯交換反應(yīng)也可以對(duì)硬脂精和包含飽和脂肪的油的混合物進(jìn)行。進(jìn)行這種酯交換的方法包括用化學(xué)催化劑或酶處理混合物。通常，可采用甲醇鈉或乙醇鈉或者堿金屬作為催化劑進(jìn)行酯交換化學(xué)反應(yīng)。在一些實(shí)施方式中，酯交換過程中采用約0.05重量％-1.5重量％的甲醇鈉或乙醇鈉。在一些實(shí)施方式中，酯交換過程中采用約0.1重量％-10重量％的堿金屬。在一些實(shí)施方式中，酯交換過程中采用約0.05重量％-1.0重量％的鈉鉀合金。在優(yōu)選實(shí)施方式中，油混合物在5-15mmHg的真空、90_120°C的溫度下干燥0.5-2小時(shí)，然后進(jìn)行酯交換化學(xué)反應(yīng)。在一些實(shí)施方式中，酯交換反應(yīng)可以在約60-105°C的溫度下進(jìn)行約0.5-2小時(shí)的時(shí)間。酶促酯交換可以用各種酶，包括脂肪酶進(jìn)行。脂肪酶可以來源于植物或微生物，可以是sn-1，3特異性或非特異性的。在一些實(shí)施方式中，酶促酯交換可以在約45-751:的溫度下進(jìn)行約0.5-24小時(shí)。適用于酯交換的微生物脂肪酶包括來自米赫根毛霉(Rhizomucormiehei)、南極念珠菌(Candida Antarctica)、黑曲霉素(Aspergillusniger)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、螢光假單胞菌(PseudomonasfIuorescens)、念珠地絲菌(Geotrichum candidum)、德樂根霉(Rhizopus deIemar)、稻根霉菌(Rhizopus oryzae)和胎毛茶毒菌素(Thermomyces Ianuginosus)的脂肪酶。本文所述含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品可用作下文詳細(xì)描述的固體脂肪組合物的原料。然而應(yīng)理解，用于本發(fā)明固體脂肪組合物的原料并不限于使用本文所述的經(jīng)最少加工的油產(chǎn)品。發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明固體脂肪組合物的優(yōu)選實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油可混合并固化，形成固體脂肪組合物，而不需要加入乳化劑。如本文所用，術(shù)語“無外源性乳化劑”表示未加入乳化劑即可形成的本發(fā)明組合物或形成本發(fā)明組合物的方法。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，富含LC-PUFA的油的未經(jīng)冬化形式，包括未經(jīng)冬化處理的含源自微生物的二十二碳六烯酸的油(DHA油)，可用作本發(fā)明固體脂肪組合物的原料。本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明固體脂肪組合物優(yōu)選的實(shí)施方式中，固體脂肪組合物是穩(wěn)定的，無需使用乳化劑也可保持均質(zhì)。因此，制備這種組合物的方法不再需要對(duì)油進(jìn)行氫化，也不需要將這些油與乳化劑或諸如增稠劑等試劑混合。通常，精制油，即液體魚油或微生物油，以初始原油形式制備，然后進(jìn)行精制(去除磷脂和游離脂肪酸)和漂白(去除色素)步驟。然后，通常對(duì)油進(jìn)行冬化，以去除飽和脂肪。然而，在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，在固體脂肪組合物的制備過程中，使用油作為原料之前不需要進(jìn)行冬化。此外，如上所述，未經(jīng)冬化處理的含油種子的油可用作微生物油的替代形式，如下所述。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，制備固體脂肪組合物的方法包括將包含飽和脂肪的油與包含至少一種LC-PUFA的油混合形成混合物的步驟。然后,使該混合物固化,形成固體脂肪組合物。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，混合物和所得組合物包含少于約0.01重量％、小于約0.009重量％、小于約0.005重量％或小于約0.002重量％的乳化劑。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，在制備固體脂肪組合物的過程中不加入外源性乳化劑。由于不需要在制備本發(fā)明固體脂肪組合物的過程中加入乳化劑，所以降低了制備成本并簡(jiǎn)化了制備工藝。不受理論束縛，本發(fā)明人相信，不使用乳化劑，僅使用適當(dāng)比例的包含至少一種LC-PUFA的油和包含飽和脂肪的油就能夠配制穩(wěn)定、均質(zhì)的固體脂肪組合物。在一些實(shí)施方式中,包含至少一種LC-PUFA的油(如微生物油)與包含飽和脂肪的油(如硬脂精)的重量比約為1:9到約9:1，約1:6到約6:1，或約1:3到約3:1。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，包含至少一種LC-PUFA的油與包含飽和脂肪的油的重量比約為1:1，約3:1，或約 6:1。未經(jīng)冬化處理的油中存在的飽和脂肪也賦予油更大的固體稠度(與冬化的液體油相比)。制備固體脂肪組合物的本發(fā)明方法還克服了未經(jīng)冬化的油出現(xiàn)顆粒物(由于甘油三酯發(fā)生結(jié)晶)而導(dǎo)致這種未經(jīng)冬化的油變成含顆粒的稠厚的液體油的傾向。室溫下靜置，未經(jīng)冬化的油分離，形成其中包含固體的稠厚液體油形式的產(chǎn)品。本文所述方法制備了具有均質(zhì)外觀的光滑產(chǎn)品，室溫下靜置時(shí)穩(wěn)定，不發(fā)生分離。所得產(chǎn)品具有起酥油的稠度。如本文所用，“固體脂肪組合物”表示室溫下(即25°C )為固體或半固體的組合物。脂肪和油的物理化學(xué)特性包括其粘度和熔點(diǎn)。優(yōu)選地，本發(fā)明固體脂肪組合物的熔點(diǎn)至少約為30°C，至少約35°C，至少約40°C，至少約50°C。熔點(diǎn)取決于存在的不同化學(xué)實(shí)體的數(shù)量。與基于各種甘油三酯單獨(dú)存在時(shí)的熔點(diǎn)所預(yù)測(cè)的相比，幾種甘油三酯的混合物的熔點(diǎn)通常較低?；旌衔镆矊⒕哂斜葐为?dú)組分更寬的熔程。甘油單酯和甘油二酯比相應(yīng)脂肪酸組成的甘油三酯的熔點(diǎn)高。在優(yōu)選實(shí)施方式中，固體脂肪組合物將保留足夠的柔軟度，以便能夠鋪展到食品上。優(yōu)選地，在室溫下，組合物粘稠，具有遲滯流動(dòng)性質(zhì)，和/或?qū)Ρ砻娴恼掣叫源笥谟糜谥苽湓摦a(chǎn)品的原料。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物的滴點(diǎn)約為20_60°C。例如，本發(fā)明固體脂肪組合物的滴點(diǎn)至少約為30°C，至少約40°C，或至少約50°C。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物的凍凝點(diǎn)約為20_40°C。例如，本發(fā)明固體脂肪組合物的凍凝點(diǎn)至少約為20°C，至少約25°C，或至少約30°C。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物的碘值約為50-250。例如，本發(fā)明固體脂肪組合物的碘值至少約為100，至少約150，或至少約200。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物的皂化值約為150-275。例如，本發(fā)明固體脂肪組合物的皂化值約為160-260，約170-240，約180-220，或約185-215。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，本發(fā)明固體脂肪組合物具有小于約0.5ppm的砷、小于約0.04ppm的銅、小于約0.1ppm的鐵、小于約0.2ppm的鉛和小于約0.04ppm的萊。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，本發(fā)明固體脂肪組合物具有以下固體脂肪含量分布:10.(TC時(shí)約10%-50%，約12%-48%，或約 15%-45% ；21.1°C 時(shí)約 5%-35%，約 7%_30%，或約 10%-25% ；26.7°C 時(shí)約 2%_25%，約 4%_24%，或約 6%-20% ；33.3°C 時(shí)約 0-20%,約 2%_18%，或約 3%-16% ；37.8°C約 0-15%,約 2%_14%，或約0.5%-12%ο本發(fā)明方法中用于制備固體脂肪組合物的油包括具有至少一種LC-PUFA的油。在一些實(shí)施方式中，具有至少一種LC-PUFA的油是微生物油。微生物來源以及用于回收微生物油的包括營(yíng)養(yǎng)劑和/或LC-PUFA的微生物培養(yǎng)方法是本領(lǐng)域已知的，詳細(xì)內(nèi)容參見本發(fā)明對(duì)最少加工油的描述。這種微生物來源和方法適用于制備用作本發(fā)明固體脂肪組合物的原料的微生物油。的確，上述經(jīng)最少加工的油是用于制備固體脂肪組合物的優(yōu)選原料。然而，應(yīng)理解，如下所述的許多其他微生物油原料也可用作本發(fā)明固體脂肪組合物的原料。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，微生物油是根據(jù)2001年4月12日提交并以W001/76715公開的題為“含油和極性脂肪的天然原料的分懼方法(Method for the Fractionation ofOil and Polar Lipid-Containing Native Raw Materials) ”的 PCT 專利申請(qǐng)序列號(hào) PCT/IB01/00841和2001年4月12日提交并以W001/76385公開的題為“采用水溶性有機(jī)溶劑和離心分懼含油和極性脂肪的天然原料的方法(Method for the Fractionation of Oil andPolar Lipid-Containing Native Raw Materials Using Water-Soluble Organic Solventand Centrifugation)所述制備的油,其各自的內(nèi)容被納入本文作為參考。這兩份PCT申請(qǐng)的內(nèi)容揭示了微生物油回收方法，通常稱為Friolex方法。適用于本發(fā)明的微生物包含至少一種LC-PUFA。本發(fā)明優(yōu)選的PUFA包括:C20、C22、或 C24 ω -3 或 ω -6PUFA。優(yōu)選地，PUFA 是 LC-PUFA，包括 C20 或 C22 ω -3，或 C20 或C22co-6PUFA。本發(fā)明LC-PUFA包含至少兩個(gè)雙鍵，優(yōu)選三個(gè)雙鍵，甚至更優(yōu)選至少四個(gè)雙鍵。具有4個(gè)或更多個(gè)不飽和碳-碳鍵的PUFA通常也稱為高度不飽和脂肪酸，或HUFA。具體說，LC-PUFA可包括二十二碳六烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約35重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)，二十二碳五烯酸n-3 (至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％), 二十二碳五烯酸n-6 (至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)，花生四烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)和/或二十碳五烯酸(至少占總脂肪酸的約10重量％、約20重量％、約30重量％、約40重量％、約50重量％、約60重量％、約70重量％或約80重量％)。PUFA可以是天然脂質(zhì)中常見形式的任一種，包括但不限于三酰甘油，二酰甘油，單酰甘油，磷脂，游離脂肪酸，酯化脂肪酸，或這些脂肪酸的天然或合成衍生物形式(例如，脂肪酸的鈣鹽，乙酯等)。在優(yōu)選實(shí)施方式中，微生物油包含油中至少約70重量％的甘油三酯形式的PUFA，至少約80重量％，至少約90重量％，以及至少約95重量％。如本文所用，術(shù)語LC-PUFA表示包含單一 ω -3LC-PUFA如DHA的油，包含單一 ω-6LC-PUFA如ARA或DPA η_6的油，或包含兩種或更多種LC-PUFA如DHA、DPA n-6、ARA和EPA的混合物的油。在優(yōu)選實(shí)施方式中，產(chǎn)品包含LC-PUFA以及至少一種其他營(yíng)養(yǎng)劑。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明方法中用于制備固體脂肪組合物的包含至少一種LC-PUFA的油可包含約5重量％-70重量％的LC-PUFA。例如，在一些實(shí)施方式中，油可包含至少約5重量％、至少約10重量％、至少約15重量％、至少約20重量％的LC-PUFA，至少約25重量％、至少約30重量％、至少約35重量％的LC-PUFA,至少約40重量％、至少約45重量％和至少約50重量％的LC-PUFA。這樣的實(shí)施方式也可具有小于約30重量％、小于約35重量％、小于約40重量％、小于約45重量％、小于約50重量％、小于約55重量％、小于約60重量％、小于約65重量％和小于約70重量％的LC-PUFA。本發(fā)明方法中用于制備固體脂肪組合物的油除包含至少一種LC-PUFA的油之外，還可任選地包含飽和脂肪。通常，飽和脂肪的熔點(diǎn)比LC-PUFA或LC-PUFA混合物高。這種飽和脂肪可外源性添加到油中。優(yōu)選的外源添加的飽和脂肪包括“硬脂”例如部分氫化的植物油、完全氫化的油、部分氫化的豬油和非反式熱帶油。例如，可使用棕櫚油和棕櫚仁油及其餾分(棕櫚和棕櫚仁油精以及棕櫚和棕櫚仁硬脂精)。當(dāng)組合物包含外源添加的脂肪時(shí)，LC-PUFA油可進(jìn)行或不進(jìn)行冬化處理。外源添加的脂肪的優(yōu)選用量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)原料的固化程度和/或粘度以及所需的固化程度和/或粘度和/或組合物所需的鋪展稠度進(jìn)行確定。外源添加的脂肪的用量約為20-60重量％，約30-50重量％，約35-45重量％。在優(yōu)選實(shí)施方式中，包含至少一種LC-PUFA的油中飽和脂肪不是外源添加的，而是油中天然存在的。例如，包含LC-PUFA的微生物油可以是根據(jù)本領(lǐng)域已知任何方式提取的未經(jīng)處理的油。在這些油中，微生物油中飽和脂肪的含量約為20重量％-60重量％，約30重量％-50重量％，約35重量％-45重量％。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，所用的包含至少一種LC-PUFA的油未經(jīng)冬化處理(即未分餾)，因而包含飽和脂肪。冬化處理是指在低溫下去除許多油(包括植物油)中存在的沉積物(通常是高熔點(diǎn)固體飽和脂肪)的過程，最常見涉及通過過濾去除結(jié)晶材料，以免液體餾分在冷藏溫度下變渾濁。該技術(shù)包括將油分離成兩種或更多種具有不同熔點(diǎn)的餾分。分離的液體和固體餾分在物理和化學(xué)性質(zhì)方面具有顯著差異。合適的技術(shù)是本領(lǐng)域已知的，通常包括以下三個(gè)步驟:(i)將液體油冷卻至過飽和，導(dǎo)致晶核形成，(ii)逐漸冷卻，導(dǎo)致結(jié)晶漸進(jìn)生長(zhǎng)，和(iii)分離液相和結(jié)晶相。這些技術(shù)可包括例如常規(guī)冬化處理、去污劑分餾和溶劑冬化處理。常規(guī)冬化處理包括干燥分步結(jié)晶，其中冷卻期間具有最高熔點(diǎn)的甘油三酯從凈液體或熔化的脂肪中優(yōu)先結(jié)晶。干燥分步結(jié)晶的原理是基于在受控條件下冷卻油而不加入化學(xué)物質(zhì)。通過機(jī)械方式分離液相和固相。去污劑分餾原理類似于在受控條件下基于油的冷卻而不加入溶劑的干燥分餾。然后，加入水性去污劑溶液后，通過離心分離液相和固相。使用溶劑(通常是丙酮)冬化處理促進(jìn)甘油三酯結(jié)晶形成，因?yàn)榕c不使用溶劑相比，使用溶劑時(shí)低溫下甘油三酯通常形成更穩(wěn)定的結(jié)晶。在溶劑輔助的分餾中，可用極性或非極性溶劑來降低過濾期間體系的粘度。然后通過蒸餾去除所得餾分中的溶劑。因此，未經(jīng)冬化處理的微生物油是未經(jīng)冬化或分餾工藝的油。在其他優(yōu)選的實(shí)施方式中，包含至少一種LC-PUFA的油未氫化或部分氫化。氫化是本領(lǐng)域已知的，包括在催化劑的存在下將氫氣以化學(xué)方式添加到液體脂肪中的步驟。該工藝能夠?qū)⒅痉肿又胁伙柡椭舅岬闹辽僖恍╇p鍵轉(zhuǎn)化為單鍵，從而提高脂肪的飽和度。氫化程度，即轉(zhuǎn)化的雙鍵總數(shù)，決定了氫化脂肪的物理和化學(xué)性質(zhì)。部分氫化的油常常在其脂肪酸中保留了顯著的不飽和度。氫化也可導(dǎo)致一些順式雙鍵轉(zhuǎn)化為反式構(gòu)型，其中一個(gè)或多個(gè)雙鍵遷移至脂肪酸鏈中的新位置。當(dāng)前的研究表明，反式脂肪酸可提高總膽固醇量，增加心臟病風(fēng)險(xiǎn)，其程度與飽和脂肪酸大致相同，因此是飲食中不希望存在的。本發(fā)明能夠形成固體脂肪產(chǎn)品而不需要?dú)浠虿糠謿浠襟E。本發(fā)明中使用的包含飽和脂肪的油可以是固體、半固體或液體形式。各種各樣具有飽和脂肪的油可適當(dāng)用于制備本發(fā)明的固體脂肪組合物。在一些實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的油包括但不限于，微生物硬脂精、未分餾棕櫚油、棕櫚油精、棕櫚硬脂精、棕櫚中段餾分、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚仁硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、棉籽硬脂精、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物、魚油硬脂精(如鯡魚油硬脂精)以及它們的組合。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，包含飽和脂肪的油未經(jīng)氫化或部分氫化。本發(fā)明不要求在穩(wěn)定的固定脂肪組合物的制備中使用乳化劑。然而，在某些實(shí)施方式中可任選地使用乳化劑。適用于本發(fā)明的乳化劑包括:甘油單酯，甘油二酯，甘油單酯/甘油二酯組合，卵磷脂，乳?；母视蛦熙?甘油二酯，聚甘油酯，蔗糖脂肪酸酯，硬脂酰乳酸鈉(sodium steroyl lactylate)、硬脂酸乳酸隹丐(calcium steroyl lactylate)以及它們的組合。在一些實(shí)施方式中，乳化劑是甘油單酯/甘油二酯組合。在一些實(shí)施方式中，混合物中存在的乳化劑含量約為0.01重量％-2.0重量％，約0.025重量％-1.0重量％，約0.05重量％-0.2重量％。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，乳化劑用量小于0.01重量％，小于0.009重量％，小于0.005重量％，或小于0.002重量％。在本發(fā)明尤其優(yōu)選的實(shí)施方式中，在固體脂肪組合物的制備中不添加外源性乳化劑。據(jù)認(rèn)為，乳化劑可使混合物中各組分之間保持穩(wěn)定，從而維持均質(zhì)組合物。缺乏穩(wěn)定性可導(dǎo)致油分離或油相與水相分離。乳化劑除乳化作用外還可提供其他功能屬性，包括充氣、淀粉和蛋白質(zhì)絡(luò)合、水合、結(jié)晶改良、增溶和分散。然而，本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，無需使用乳化劑即可制備穩(wěn)定、均質(zhì)的固體脂肪組合物，如本文所述。將包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油混合的物理步驟可以本領(lǐng)域已知的任何常規(guī)混合方式進(jìn)行?？苫旌辖M合物以實(shí)現(xiàn)混合，例如獲得均質(zhì)的溶液。可加熱包含飽和脂肪的油和/或包含至少一種LC-PUFA的油(例如，加熱至至少約40°C )，使得組合物完全形成液體并且相互混溶。然而，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，為形成均質(zhì)的固體脂肪組合物，在混合之前加熱油的步驟是不必要的。不希望受理論的束縛，本發(fā)明人相信，至少來自后續(xù)除臭步驟的熱將有利于油混合物的均質(zhì)化，以形成均一的固體脂肪產(chǎn)品，因而在混合之前加熱油是不必要的。因此，在優(yōu)選實(shí)施方式中，混合之前不加熱包含飽和脂肪的油和/或包含至少一種LC-PUFA的油?；旌现盁o需加熱可有益地簡(jiǎn)化固體脂肪組合物的制備過程，并有助于能量和資源轉(zhuǎn)化。本發(fā)明方法也包括固化包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的混合物，以形成固體脂肪組合物。例如，在混合物高于室溫的實(shí)施方式中，使混合物冷卻至室溫?；蛘?，可將混合物主動(dòng)冷卻至室溫，或者例如低于室溫。例如，組合物可冷卻至約25-30°C，使其固化。冷卻步驟期間，不論是主動(dòng)還是被動(dòng)冷卻，可混合或攪動(dòng)混合物。以這種方式，可控制冷卻，從而實(shí)現(xiàn)均一冷卻而不產(chǎn)生分層的組合物。優(yōu)選地，可調(diào)節(jié)冷卻條件，以使脂肪的晶體結(jié)構(gòu)(即固體階段分子本身取向方式)達(dá)到所需水平，得到所需的產(chǎn)品塑性、功能性和穩(wěn)定性。通常，β-主晶(prime crystal)導(dǎo)致光滑、乳脂狀稠度。與β_主晶相比，β_晶體通常較大、較粗糙且顆粒感較強(qiáng)，通常是不太希望有的。因此，在優(yōu)選實(shí)施方式中，控制冷卻過程以使混合物中的甘油三酯形成穩(wěn)定的β_主晶，以產(chǎn)生具有光滑稠度的產(chǎn)品。實(shí)現(xiàn)這種優(yōu)選的結(jié)晶形式的冷卻方法包括以約1_20°C /分鐘，約5-15°C /分鐘，約10°C /分鐘的速率冷卻混合物。優(yōu)選地，固體脂肪組合物中至少約50重量％的脂肪和/或油，至少約55重量％，至少約60重量％，至少約65重量％，至少約70重量％，至少約75重量％，至少約80重量％，至少約85重量％，至少約90重量％，至少約95重量％，或約100重量％是β -主晶。在優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明固體脂肪組合物具有均一質(zhì)地，因此具有均一的外觀和稠度。這些實(shí)施方式的另一特征在于，組合物穩(wěn)定，靜置不會(huì)分離或喪失其均一質(zhì)地，優(yōu)選保持更長(zhǎng)的時(shí)間。因此，靜置時(shí)組合物不會(huì)產(chǎn)生非均一的外觀或稠度。在優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明組合物可在室溫下靜置至少約I天，至少約I周，至少約2周，至少約3周，至少約4周而不分離或喪失其均一質(zhì)地。本發(fā)明固體脂肪組合物是LC-PUFA的豐富來源。在一些實(shí)施方式中，固體脂肪組合物包含至少約15重量％，至少約20重量％，至少約25重量％，或至少約30重量％的至少一種LC-PUFA，具體是二十二碳六烯酸。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式中，固體脂肪組合物不含反式脂肪酸。本發(fā)明還提供了一種固體脂肪組合物，其含有包含至少一種LC-PUFA的硬脂精組合物和包含飽和脂肪的第二種油的混合物，所述組合物在室溫下為固體。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，制備這種固體脂肪組合物的方法包括:將包含至少一種LC-PUFA的硬脂精與包含飽和脂肪的第二種油混合，形成混合物，然后使混合物固化，形成固體脂肪組合物。合適的硬脂精包括但不限于:微生物硬脂精、魚油硬脂精、棕櫚硬脂精、棕櫚仁硬脂精、棉籽硬脂精、牛油樹脂硬脂精以及它們的組合。適用于本發(fā)明的包含飽和脂肪的第二種油包括但不限于:未分餾棕櫚油、棕櫚油精、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚中段餾分、椰子油、未分餾牛油樹脂油、未分餾棉籽油、棉籽油精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物以及它們的組合。本文所述乳化劑可任選地用于配制本發(fā)明的固體脂肪組合物。本發(fā)明組合物也可包含各種額外的功能成分。例如,本發(fā)明組合物可進(jìn)一步包含微囊產(chǎn)品(microencapsulant),包括例如蛋白質(zhì)、簡(jiǎn)單或復(fù)合糖，固體和顆粒物。優(yōu)選的微囊產(chǎn)品包括:菌體顆粒物；阿拉伯膠；麥芽糊精；疏水改性淀粉；多糖，包括藻酸鹽，羧甲基纖維素和瓜爾膠；疏水改性多糖如辛基取代的淀粉；蛋白質(zhì)，包括乳清蛋白分離物、大豆蛋白和酪蛋白酸鈉；以及它們的組合。此外，本發(fā)明組合物還可包含表面活性劑，包括例如，陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、非離子表面活性劑、兩性表面活性劑、不溶于水的乳化劑、細(xì)分顆粒和天然產(chǎn)生的材料。陰離子表面活性劑包括:羧酸、硫酸酯(sulfuricester)、烷基磺酸、烷基芳族磺酸和混雜的陰離子親水基團(tuán)。陽離子表面活性劑包括胺鹽、銨化合物、其他含氮堿類和非含氮堿類。非離子表面活性劑包括連接增溶基團(tuán)的醚鍵、酯鍵、酰胺鍵、混雜的連接鍵和多重連接鍵。兩性表面活性劑包括:氨基和羧基，氨基和硫酸酯，氨基和烷基磺酸，氨基和芳族磺酸，堿性和酸性基團(tuán)混雜的組合。不溶于水的乳化劑包括離子性親水基團(tuán)和非離子性親水基團(tuán)。細(xì)分的顆粒包括任何細(xì)分非溶解的顆粒，包括粘土和碳。天然產(chǎn)生的材料包括:藻酸鹽、纖維素衍生物、水溶性樹膠、脂質(zhì)和留醇、磷脂、脂肪酸、醇、蛋白質(zhì)、氨基酸和去污劑。本發(fā)明組合物也可包含親水膠體。其他任選的成分包括增稠劑如多糖。增稠劑是用于提高組合物粘度的成分。在這種實(shí)施方式中，額外的功能成分是在混合步驟期間加入的。在一個(gè)實(shí)施方式中，固體脂肪組合物是起酥油。起酥油通常不含或包含極少外加的水或水性組分，并且包含高水平的脂肪?；蛘?，固體脂肪組合物可以是人造奶油、涂抹醬(spread)、蛋黃醬或色拉味調(diào)料等產(chǎn)品。這種產(chǎn)品的制備可包括:將脂肪和/或油與其他成分如水和/或奶制品、合適的食用蛋白質(zhì)、鹽、調(diào)味劑和著色劑以及維生素A和D摻混。人造奶油通常包含至少80%的脂肪。蛋黃醬和色拉味調(diào)料是半固體脂肪食品，通常包含不少于65%的植物油和30%干燥全蛋或蛋黃。鹽、糖、香料、調(diào)味品、醋、檸檬汁和其他成分完成這些產(chǎn)品。因此，本發(fā)明組合物可進(jìn)一步包含其他成分。優(yōu)選的其他成分包括:抗氧化劑，調(diào)味劑，味道促進(jìn)劑，甜味劑，色素，維生素，礦物質(zhì)，益生元(pre-biotic)化合物，益生菌(pro-biotic)化合物，治療性成分，醫(yī)療成分，功能性食品成分,加工成分以及它們的組合。在一個(gè)尤其優(yōu)選的實(shí)施方式中，其他成分是抗氧化劑。抗氧化劑是本領(lǐng)域已知的，可以在發(fā)酵制備微生物油或者脂質(zhì)加工過程的任何時(shí)間點(diǎn)加入，或者在本發(fā)明方法實(shí)施期間加入?？寡趸瘎┯兄诜乐顾卯a(chǎn)品氧化變質(zhì)。合適的抗氧化劑可由本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行選擇。優(yōu)選的抗氧化劑包括:抗壞血酸棕櫚酸鹽、生育酚、檸檬酸、抗壞血酸、叔丁基氫醌(TBHQ)、丁羥茴醚(BHA)、丁羥甲苯(BHT)、沒食子酸丙酯(PG)、迷迭香提取物、卵磷脂、葉酸及其混合物和鹽?？寡趸瘎┛梢员绢I(lǐng)域常規(guī)用量加入產(chǎn)品中。包含脂質(zhì)的組合物的氧化狀態(tài)和穩(wěn)定性可以本領(lǐng)域各種已知方式進(jìn)行測(cè)量，許多這些技術(shù)的描述可由美國(guó)油品化學(xué)學(xué)會(huì)(American Oil Chemist’ s Society)以及其他來源獲得。定量測(cè)定產(chǎn)品抗氧化穩(wěn)定性的一種方法是在樣品加熱分解過程中測(cè)定從樣品逸出的導(dǎo)電物質(zhì)(揮發(fā)性分解產(chǎn)物)的量計(jì)算Rancimat值。在優(yōu)選實(shí)施方式中，在91.6°C的溫度下，本發(fā)明組合物的Rancimat值至少約為10小時(shí),至少約15小時(shí),至少約20小時(shí)和至少約25小時(shí)。在優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明產(chǎn)品(包括含PUFA的高品質(zhì)油產(chǎn)品和固體脂肪組合物)在適當(dāng)條件下儲(chǔ)存以盡可能減少氧化降解。實(shí)現(xiàn)這種儲(chǔ)存條件的許多方法是本領(lǐng)域已知的并且適用于本發(fā)明，例如用惰性氣體環(huán)境代替環(huán)境大氣。降低或盡可能減少氧化降解的優(yōu)選方法是在氮?dú)?N2)或氬氣氣氛或氮?dú)夂投趸細(xì)怏w的混合氣氛下儲(chǔ)存產(chǎn)品。優(yōu)選地，包裝的產(chǎn)品在氮?dú)庀逻M(jìn)行包裝。在包含產(chǎn)品的容器中產(chǎn)生氮?dú)鈿夥盏姆椒ㄊ潜绢I(lǐng)域已知的。在其他優(yōu)選的實(shí)施方式中，也可以在混合物冷卻過程中向混合物中鼓送氮?dú)庖蕴峁╊~外的抗氧化保護(hù)作用，從而提高產(chǎn)品的氧化穩(wěn)定性和/或化學(xué)穩(wěn)定性。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明產(chǎn)品可包含藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或外加的藥物活性劑(即治療或醫(yī)療活性成分或其組合)。該實(shí)施方式尤其有利于水溶性低的藥物活性劑。這種藥品具有以下優(yōu)點(diǎn):同時(shí)提供治療活性成分以及有益的營(yíng)養(yǎng)劑如LC-PUFA。藥學(xué)上可接受的賦形劑的例子包括但不限于:水、磷酸鹽緩沖鹽水、林格溶液、右旋糖溶液、含血清溶液、漢克斯溶液、其他水性生理學(xué)平衡液、油、酯和二醇。本發(fā)明藥物活性劑包括但不限于:他汀類、抗高血壓藥、抗糖尿病藥、抗癡呆藥、抗抑郁藥、抗肥胖藥、食欲抑制劑以及增強(qiáng)記憶和/或認(rèn)知功能的藥物。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明產(chǎn)品可包含食物成分如功能性食物成分、食品添加劑或其他成分。本發(fā)明產(chǎn)品可單獨(dú)用作食品、營(yíng)養(yǎng)品或藥品，或者可摻入或加入食品、營(yíng)養(yǎng)品或藥品中。在第一種實(shí)施方式中，本發(fā)明產(chǎn)品是包含本發(fā)明油品和食物組分的食品。該產(chǎn)品可直接用作食品成分，例如飲料、沙司、乳制品(如牛奶、酸奶酪、乳酪和冰淇淋)和烘焙食物中的油和/或起酥油和/或涂抹醬和/或其他脂肪成分；或者可選地用作營(yíng)養(yǎng)品，如營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑(以膠囊或片劑形式)；肉品或其他產(chǎn)品被人消費(fèi)的任何動(dòng)物的飼料或飼料添加劑；任何陪伴動(dòng)物，包括狗、貓和馬的飼料或飼料添加劑；食品補(bǔ)充劑，包括嬰兒食品和幼兒配方。術(shù)語“動(dòng)物”表示屬于動(dòng)物界的任何生物體，包括但不限于可由其獲得禽肉、肉類、海味、牛肉、豬肉或羊羔肉的任何動(dòng)物。海味源自但不限于:魚、蝦和貝殼類動(dòng)物。術(shù)語“產(chǎn)品”包括除了源自這些動(dòng)物的肉品之外的任何產(chǎn)品，包括但不限于雞蛋、牛奶或其他產(chǎn)品。飼養(yǎng)這些動(dòng)物時(shí)，可將營(yíng)養(yǎng)劑如LC-PUFA摻入這些動(dòng)物的肉品、乳汁、蛋或其他產(chǎn)品中以提高這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量。此外，飼養(yǎng)這些動(dòng)物時(shí)，營(yíng)養(yǎng)劑如LC-PUFA可改善動(dòng)物的總體健康狀況。可以在各個(gè)制備階段將本發(fā)明組合物加入諸如烘焙食品、維生素補(bǔ)充劑、飲食補(bǔ)充劑、粉末飲料等各種產(chǎn)品中。許多成品或半成品的粉末化食品可采用本發(fā)明組合物進(jìn)行制備。可列出的包含本發(fā)明產(chǎn)品的部分食品包括:生面團(tuán)；稀面糊；烘焙食品，包括例如蛋糕、芝士蛋糕、小圓面包、玉米餅、餡餅、紙托蛋糕、小甜餅、長(zhǎng)條形面包、面包、小白面包、餅干、松餅、面粉糕餅、烤餅和烤面包片；液體食品，例如飲料、能量飲品、嬰兒配方食品、液體膳食、果汁、多重維生素糖漿、膳食替代品、醫(yī)用食品和糖漿；半固體食品，例如幼兒食品、酸奶酪、芝士、谷類、薄煎餅混合物；食品棒狀物，包括能量棒；經(jīng)過加工的肉；冰淇淋；冷凍甜品；冷凍酸乳酪；威化混合物；色拉醬；和替代雞蛋混合物。還包括:烘焙食品，例如小甜餅、薄脆餅干、甜品、點(diǎn)心、餡餅、格蘭諾拉麥片/點(diǎn)心棒和烤餡餅皮；鹽腌點(diǎn)心如薯片、玉米片、墨西哥玉米片、擠壓成形的點(diǎn)心、爆米花、椒鹽脆餅、炸薯片和堅(jiān)果；特制點(diǎn)心如調(diào)味液、干果點(diǎn)心、肉品點(diǎn)心、豬肉卷、健康食品棒和稻米/玉米蛋糕；和糖果點(diǎn)心如糖，以及小甜餅和蛋糕餡料。本發(fā)明的另一個(gè)產(chǎn)品實(shí)施方式是醫(yī)用食品。醫(yī)用食品包括基于認(rèn)可的科學(xué)原理，根據(jù)由醫(yī)學(xué)評(píng)估確立的獨(dú)特營(yíng)養(yǎng)需求，針對(duì)疾病或病癥進(jìn)行特定飲食控制，并在醫(yī)師監(jiān)督下外部食用或給予的制劑中的食品。雖然結(jié)合具體方法、產(chǎn)品和生物體描述了本發(fā)明，但這些描述旨在包括根據(jù)本文所述內(nèi)容可獲得并且有用的所有這種方法、產(chǎn)品和生物體，包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的所有替代形式、改進(jìn)形式和優(yōu)化形式。本文使用的脂肪酸和其他成分的來源以及含量或范圍是指，包括所有組合和亞組合以及本文所述的具體實(shí)施方式
。提供下面的實(shí)施例和測(cè)試結(jié)果是為了闡述目的而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例實(shí)施例1:高品質(zhì)原油的制備在發(fā)酵罐中培養(yǎng)富含DHA油的裂殖壺菌屬微生物以產(chǎn)生發(fā)酵液。收集發(fā)酵液并與Alcalaseli 2.4 (一種裂解的裂殖壺菌屬菌體的蛋白酶)相接觸。所得裂解菌體混合物是一種乳液，與27%異丙醇的水溶液相接觸。攪拌混合該混合物，然后離心，以產(chǎn)生具有兩相的基本非乳化產(chǎn)品。較重的相包含經(jīng)消耗的發(fā)酵液組分，較輕的相包含含有一些異丙醇和水的富含DHA的油。較輕的相干燥后得到高品質(zhì)的原油。實(shí)施例2:藻類油的最少加工處理本實(shí)施例闡述了本發(fā)明經(jīng)最少加工處理的油的制備。大規(guī)模制備經(jīng)最少加工處理的油。將200千克根據(jù)實(shí)施例1所述由含DHA的裂殖壺菌屬微生物制得的高品質(zhì)原油在氮?dú)庀录訜嶂?5°C-70°C。然后按約0.2%(w/w)的比例將50%檸檬酸溶液加入油中，氮?dú)庀禄旌?0-45分鐘。然后，將0.2%-0.5% (w/w)助濾劑加入油中，過濾以去除油中存在的任何雜質(zhì)。然后以180千克/小時(shí)的進(jìn)料速率，在210°C下對(duì)油進(jìn)行除臭處理。然后，在經(jīng)除臭的油中補(bǔ)充生育酚、抗壞血酸棕櫚酸鹽和迷迭香提取物。每個(gè)工藝步驟中的油的特征在表I中給出。術(shù)語“PV”表示過氧化值；術(shù)語“FFA”表示游離脂肪酸；術(shù)語“P-AV”表示對(duì)茴香胺值。該過程的回收率大于98%。表I
權(quán)利要求
1.一種制備固體脂肪組合物的方法，該方法包括: a)將包含飽和脂肪的油與包含至少一種LC-PUFA的油混合形成混合物；和 b)使所述混合物固化形成固體脂肪組合物， 其中，在制備所述固體脂肪組合物的過程中不外加乳化劑。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含飽和脂肪的油選自小組:微生物硬脂精、未分餾棕櫚油、棕櫚油精、棕櫚硬脂精、棕櫚中段餾分、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚仁硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、棉籽硬脂精、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物、魚油硬脂精以及它們的組合。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油未經(jīng)冬化處理。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油包含飽和脂肪。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油包含約5重量％-70重量％至少一種選自下組的LC-PUFA:二十二碳六烯酸、ω -3或ω -6 二十二碳五烯酸、花生四烯酸和二十碳五烯酸。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油在混合步驟之前未經(jīng)加熱處理。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固體脂肪組合物選自:食品、營(yíng)養(yǎng)品和藥品。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油與包含飽和脂肪的油的重量比約為1:9到約9:1。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括對(duì)混合物進(jìn)行除臭處理。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括使所述混合物發(fā)生酯交換。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油來自選自下組的來源:微生物來源、植物來源和動(dòng)物來源。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油來自微生物來源。
13.一種固體脂肪組合物，其含有包含飽和脂肪的油和包含至少一種LC-PUFA的油的混合物，所述混合物在室溫下為固體，并且所述混合物不含外加乳化劑。
14.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含飽和脂肪的油選自下組:微生物硬脂精、未分餾棕櫚油、棕櫚油精、棕櫚硬脂精、棕櫚中段餾分、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚仁硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、棉籽硬脂精、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物、魚油硬脂精以及它們的組合。
15.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油未經(jīng)冬化處理。
16.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油包含飽和脂肪。
17.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油包含約5重量％_70重量％至少一種選自下組的LC-PUFA:二十二碳六烯酸、ω -3或ω -6二十二碳五烯酸、花生四烯酸和二十碳五烯酸。
18.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述固體脂肪組合物不含反式脂肪酸。
19.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油與包含飽和脂肪的油的重量比約為1:9到約9:1。
20.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述固體脂肪組合物選自:食品、營(yíng)養(yǎng)品和藥品。
21.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油來自選自下組的來源:微生物來源、植物來源和動(dòng)物來源。
22.如權(quán)利要求13所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含至少一種LC-PUFA的油來自微生物來源。
23.一種制備固體脂肪組合物的方法，該方法包括: a)將包含至少一種LC-PUFA的硬脂精與包含飽和脂肪的第二種油混合形成混合物；和 b)使所述混合物固化形成固體脂肪組合物。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，在制備所述固體脂肪組合物的過程中不外加乳化劑。
25.如權(quán)利要求23所 述的方法，其特征在于，所述硬脂精選自下組:微生物硬脂精、魚油硬脂精、棕櫚硬脂精、棕櫚仁硬脂精、棉籽硬脂精、牛油樹脂硬脂精以及它們的組合。
26.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，所述包含飽和脂肪的第二種油選自下組:未分餾棕櫚油、棕櫚油精、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚中段餾分、椰子油、未分餾牛油樹脂油、未分餾棉籽油、棉籽油精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物以及它們的組合。
27.一種固體脂肪組合物，其含有包含至少一種LC-PUFA的硬脂精組合物和包含飽和脂肪的第二種油的混合物，其中所述組合物在室溫下為固體。
28.如權(quán)利要求27所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述硬脂精選自下組:微生物硬脂精、魚油硬脂精、棕櫚硬脂精、棕櫚仁硬脂精、棉籽硬脂精、牛油樹脂硬脂精以及它們的組合。
29.如權(quán)利要求27所述的固體脂肪組合物，其特征在于，所述包含飽和脂肪的第二種油選自下組:未分餾棕櫚油、棕櫚油精、未分餾棕櫚仁油、棕櫚仁油精、棕櫚中段餾分、椰子油、未分餾牛油樹脂油、牛油樹脂硬脂精、未分餾棉籽油、棉籽油精、酯交換棕櫚油摻混物、酯交換棉籽油摻混物以及它們的組合。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種固體脂肪組合物，其包含具有飽和脂肪的油和具有至少一種長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸的油。具體說，所述固體脂肪組合物具有高水平的長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸和低水平的乳化劑或不含乳化劑。在優(yōu)選實(shí)施方式中，所述多不飽和油是未經(jīng)冬化處理的微生物油。本發(fā)明還涉及制備這些組合物以及包含所述組合物的食品、營(yíng)養(yǎng)品和藥品的方法。
文檔編號(hào)A23D9/04GK103168860SQ201310052680
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2008年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月31日
發(fā)明者J·N·S·P·森納那亞克, N·阿邁德, J·菲奇塔利 申請(qǐng)人:馬太克生物科學(xué)公司