專(zhuān)利名稱(chēng)：一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于固定化酶制備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法。
背景技術(shù)：
脂肪酶是一種具有特殊催化功能的高效生物催化劑，它不僅催化生物體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)，而且催化非生物體內(nèi)的化學(xué)發(fā)應(yīng)。但由于脂肪酶是水溶性的，在有機(jī)溶劑中易聚集成團(tuán)，催化效率較低，且穩(wěn)定性差，也不易回收重復(fù)利用，為了解決游離脂肪酶的缺陷，人們發(fā)明了酶固定化技術(shù)。在本發(fā)明之前，固定化酶基本都是在實(shí)驗(yàn)室使用，很難滿(mǎn)足工業(yè)應(yīng)用需要，這主要是因?yàn)楝F(xiàn)在市售固定化脂肪酶存在以下問(wèn)題:1.固定化脂肪酶的載體制備和固定化過(guò)程分開(kāi)進(jìn)行，造成固定化過(guò) 程復(fù)雜，酶與載體的生物相容性較差；2.采用共價(jià)結(jié)合法固定化的脂肪酶，其固定化反應(yīng)比較劇烈，容易造成酶的失活，導(dǎo)致固定化酶的活力降低；3.采用吸附交聯(lián)法固定化的脂肪酶與載體之間的結(jié)合作用弱，容易造成酶脫落，從而使得固定化酶的穩(wěn)定性差，使用壽命低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述缺陷，提供一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其主要技術(shù)特征在于包括以下步驟:在固定化反應(yīng)器中加入聚苯胺單體和蒸餾水使得溶液濃度為0.01 0.2mol/L，用酸調(diào)節(jié)溶液pH為1.0 7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝?，?10°C 45°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在-10°C 45°C條件下恒溫的引發(fā)劑和助劑，引發(fā)劑與單體濃度的摩爾比為1: 0.3 1: 5，助劑和單體濃度的摩爾比為1:1 1: 10，同時(shí)加入游離脂肪酶，單體質(zhì)量與脂肪酶質(zhì)量比為1: 0.01 1: 0.1 ;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于-10°C 45°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物真空干燥或冷凍干燥，得到固定化酶。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和效果在于:制備載體的同時(shí)加入游離酶使得固定化過(guò)程簡(jiǎn)單，條件溫和，時(shí)間較短，能耗低；固定化酶的蛋白吸附量高，酶活力好，對(duì)環(huán)境友好；固定化的酶穩(wěn)定性好，使用壽命長(zhǎng)，生物相容性好，能耗低，固定化后酶活力高、穩(wěn)定性好、使用壽命長(zhǎng)，以滿(mǎn)足工業(yè)化生產(chǎn)需求。本發(fā)明方法制備固定化脂肪酶的工藝簡(jiǎn)單，載體價(jià)廉易得，成本較低、低能耗以及高活性，有利于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)，且操作簡(jiǎn)單。
具體實(shí)施方式
以下將通過(guò)具體的實(shí)施例進(jìn)一步闡述本說(shuō)明，但本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列的具體實(shí)施方式
。所述的單體為苯胺及苯胺衍生物，包括苯胺、鄰苯二胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺、鄰氯苯胺、間氯苯胺、鄰甲氧基苯胺、鄰琉基苯胺的一種或幾種。調(diào)節(jié)單體溶液pH值的酸為無(wú)機(jī)酸，包括鹽酸、硫酸、醋酸、硝酸、磷酸的一各或幾種。所述的引發(fā)劑有(NH4)2S208、K2Cr207、K103、FeCl3、FeCl4、H202、Ce(S04)2、AlCl3、Mn02、HAuCl4的一種或幾種。所述的助劑有F127 (EO7qPOiqqEO7q)、十二烷基苯磺酸鈉、丁基萘磺酸鈉、二甲基二烯丙基氯化銨、十六烷基三甲基溴化銨。所述脂肪酶微生物來(lái)源為假絲酵母、曲霉、青霉、根毛霉、嗜熱真菌、毛霉、芽孢桿菌、假單胞菌、色桿菌或伯克氏菌。下面是具體實(shí)施例。實(shí)施例1:在固定化反應(yīng)器中加入鄰苯二胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.0lmol/L，滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH為7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?TC條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在0°C條件下恒溫的引發(fā)劑(NH4)2S2O8、助劑十二烷基苯磺酸鈉，(NH4)2S2O8與鄰苯二胺濃度的摩爾比為1: 0.3，十二烷基苯磺酸鈉和鄰苯二胺濃度的摩爾比為1: 5，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰苯二胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.01;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于0°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為12h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次 至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥12h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.3倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例2:在固定化反應(yīng)器中加入苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.03mol/L，滴加稀醋酸調(diào)節(jié)溶液PH為7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?0°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在10°C條件下恒溫的引發(fā)劑FeCl4，助劑丁基萘磺酸鈉，F(xiàn)eCl4與苯胺濃度的摩爾比為1: 1，丁基萘磺酸鈉和苯胺濃度的摩爾比為1: 2，同時(shí)加入游離脂肪酶，苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.04;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于10°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為14h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥18h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 3.6倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例3:在固定化反應(yīng)器中加入鄰甲苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.lmol/L，滴加稀鹽酸溶液PH為6.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝?，_5°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在_5°C條件下恒溫的引發(fā)劑HAuCl4，助劑F127，HAuCl4與鄰甲苯胺濃度的摩爾比為1: 2，F(xiàn)127和鄰甲苯胺濃度的摩爾比為1: 3，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰甲苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.08;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于-5°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為15h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物放置于真空干燥箱中在25°C、0MPa條件下干燥24h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.0倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例4:在固定化反應(yīng)器中加入鄰甲氧基苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.2mol/L，滴加稀鹽酸溶液PH為5.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在4°C條件下恒溫的引發(fā)劑MnO2，助劑二甲基二烯丙基氯化銨，MnO2與鄰甲氧基苯胺濃度的摩爾比為1: 3，二甲基二烯丙基氯化銨和鄰甲氧基苯胺濃度的摩爾比為1: 4，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰甲氧基苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.05;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于4°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為16h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥8h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 3.0倍。將使用過(guò)·的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例5:在固定化反應(yīng)器中加入鄰氯苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.05mol/L,滴加稀硫酸調(diào)節(jié)溶液PH為7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?5°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在15°C條件下恒溫的引發(fā)劑H2O2，助劑十六烷基三甲基溴化銨，H2O2與鄰氯苯胺濃度的摩爾比為1: 0.7，十六烷基三甲基溴化銨和鄰氯苯胺濃度的摩爾比為I: 10，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰氯苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.02;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于15°C恒溫條件下反應(yīng)；應(yīng)時(shí)間為16h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物放置于真空干燥箱中在35°C、-0.1MPa條件下干燥24h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.1倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例6:在固定化反應(yīng)器中加入鄰苯二胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.05mol/L,滴加稀鹽酸溶液PH為6.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在5°C條件下恒溫的引發(fā)劑K2Cr2O7、助劑十二烷基苯磺酸鈉，K2Cr2O7與鄰苯二胺濃度的摩爾比為1: 2，十二烷基苯磺酸鈉和鄰苯二胺濃度的摩爾比為1: 5，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰苯二胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.05;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于5°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為20h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥12h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 3.2倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例7:在固定化反應(yīng)器中加入鄰甲苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.14mol/L，滴加稀醋酸調(diào)節(jié)溶液pH為7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?10°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在-10°C條件下恒溫的引發(fā)劑(NH4)2S2O8、助劑F127，(NH4)2S2O8與鄰甲苯胺濃度的摩爾比為1: 0.6，F(xiàn)127和鄰甲苯胺濃度的摩爾比為1: 1，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰甲苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.06;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于-10°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為18h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物放置于真空干燥箱中在45°C、_0.05MPa條件下干燥10h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 3.0倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例8:
在固定化反應(yīng)器中加入間氯苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.18mol/L，滴加稀硝酸溶液調(diào)節(jié)PH為5.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?0°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在20°C條件下恒溫的引發(fā)劑FeCl3，助劑十六烷基三甲基溴化銨，F(xiàn)eCl3與間氯苯胺濃度的摩爾比為1: 5，十六烷基三甲基溴化銨和間氯苯胺濃度的摩爾比為I: 8，同時(shí)加入游離脂肪酶，間氯苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.07;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于20°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為19h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥13h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 3.8倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例9:在固定化反應(yīng)器中加入對(duì)甲苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.12mol/L，滴加稀硫酸溶液調(diào)節(jié)pH為4.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?TC條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在0°C條件下恒溫的引發(fā)劑KIO3，助劑丁基萘磺酸鈉，KIO3與對(duì)甲苯胺濃度的摩爾比為1: 2，丁基萘磺酸鈉和對(duì)甲苯胺濃度的摩爾比為1: 7，同時(shí)加入游離脂肪酶，對(duì)甲苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.1;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于(TC恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為18h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥24h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.1倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。

實(shí)施例10:在固定化反應(yīng)器中加入鄰琉苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.09mol/L,滴加稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH為1.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?5°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在45°C條件下恒溫的引發(fā)劑Ce(SO4)2，助劑十二烷基苯磺酸鈉，Ce(SO4)2與鄰琉苯胺濃度的摩爾比為1: 4，十二烷基苯磺酸鈉和鄰琉苯胺濃度的摩爾比為1: 6，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰琉苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.03 ;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于45°C恒溫條件下反應(yīng)；應(yīng)時(shí)間為24h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物放置于真空干燥箱中在40°C、-0.03MPa條件下干燥12h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.3倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例11:在固定化反應(yīng)器中加入間甲苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.llmol/L，滴加稀磷酸溶液調(diào)節(jié)PH為6.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?5°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在15°C條件下恒溫的引發(fā)劑AlCl3、助劑十二烷基苯磺酸鈉，AlCl3與間甲苯胺濃度的摩爾比為1: 3，十二烷基苯磺酸鈉和間甲苯胺濃度的摩爾比為1: 6，同時(shí)加入游離脂肪酶，間甲苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.07 ;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于15°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為21h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物冷凍干燥16h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了
4.7倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可重復(fù)利用。實(shí)施例12:在固定化反應(yīng)器中加入鄰氯苯胺和蒸餾水使得溶液濃度為0.15mol/L，滴加稀硝酸溶液調(diào)節(jié)PH為4.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝螅?TC條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在0°c條件下恒溫的引發(fā)劑(NH4)2S2O8、助劑十六烷基三甲基溴化銨，(NH4)2S2O8與鄰氯苯胺濃度的摩爾比為1: 4，十六烷基三甲基溴化銨和鄰氯苯胺濃度的摩爾比為1: 8，同時(shí)加入游離脂肪酶，鄰氯苯胺質(zhì)量與脂肪酶用量比為1: 0.08;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于0°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)時(shí)間為23h，反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物放置于真空干燥箱中在10°C、_0.02MPa條件下干燥18h，所得的固定化酶酶活比游離酶提高了 4.2倍。將使用過(guò)的固定化酶經(jīng)洗滌干燥后可 重復(fù)利用。
權(quán)利要求
1.一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于包括以下步驟:在固定化反應(yīng)器中加入聚苯胺單體和蒸餾水使得溶液濃度為0.0l 0.2mol/L，用酸調(diào)節(jié)溶液pH為1.0 7.0 ;充分?jǐn)嚢柚寥芤撼浞只旌暇鶆蚝?，?10°C 45°C條件下恒溫靜置；再向固定化反應(yīng)器中加入事先在-10°C 45°C條件下恒溫的引發(fā)劑和助劑，引發(fā)劑與單體濃度的摩爾比為1: 0.3 1: 5，助劑和單體濃度的摩爾比為1:1 1: 10，同時(shí)加入游離脂肪酶，單體質(zhì)量與脂肪酶質(zhì)量比為1:0.01 1: 0.1;然后攪拌使整個(gè)體系混合均勻，放置于-10°C 45°C恒溫條件下反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，分別用蒸餾水、無(wú)水乙醇過(guò)濾洗滌多次至濾液無(wú)色，然后將產(chǎn)物真空干燥或冷凍干燥，得到固定化酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于所述的單體為苯胺及苯胺衍生物，包括苯胺、鄰苯二胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對(duì)甲苯胺、鄰氯苯胺、間氯苯胺、鄰甲氧基苯胺、鄰琉基苯胺的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于調(diào)節(jié)單體溶液pH值的酸為無(wú)機(jī)酸，包括鹽酸、硫酸、醋酸、硝酸、磷酸的一各或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于所述的引發(fā)劑有(NH4)2S2O8' K2Cr2O7, K103、FeCl3' FeCl4' H2O2' Ce (SO4) 2、AlCl3' MnO2, HAuCl4的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于所述的助劑有F127、 十二烷基苯磺酸鈉、丁基萘磺酸鈉、二甲基二烯丙基氯化銨、十六烷基三甲基溴化銨。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于真空干燥溫度為10°c 45°C，真空度為O -0.1MPa0
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于所述脂肪酶微生物來(lái)源為假絲酵母、曲霉、青霉、根毛霉、嗜熱真菌、毛霉、芽孢桿菌、假單胞囷、色桿囷或伯克氏囷。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于單體質(zhì)量與脂肪酶放置于-10°C 45°C恒溫條件下反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為12 24h。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于將產(chǎn)物真空干燥或冷凍干燥8 24h，得到固定化酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是在制備聚苯胺載體同時(shí)加入脂肪酶進(jìn)行吸附的反應(yīng)-吸附耦合固定化脂肪酶方法，本發(fā)明為以苯胺及苯胺衍生物為單體，加入引發(fā)劑和助劑，同時(shí)加入需固定化的游離脂肪酶，放置于恒溫條件下反應(yīng)，過(guò)濾洗滌得到以聚苯胺為載體的固定化脂肪酶。本發(fā)明克服了傳統(tǒng)的固定化方法存在的固定化過(guò)程復(fù)雜，酶與載體的生物相容性較差，反應(yīng)比較劇烈，容易造成酶的失活，導(dǎo)致固定化酶的活力降低，容易造成酶脫落，穩(wěn)定性差，使用壽命低等缺陷。本發(fā)明具有固定化過(guò)程簡(jiǎn)單，條件溫和，效率高，固定化酶的蛋白吸附量高，酶活力好，固定化的酶穩(wěn)定性好，使用壽命長(zhǎng)。
文檔編號(hào)C12N11/08GK103088011SQ20131005067
公開(kāi)日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2013年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月6日
發(fā)明者熊健, 候麗云, 黃亞娟, 張華 申請(qǐng)人:揚(yáng)州大學(xué)