專(zhuān)利名稱(chēng)：一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種適用于反硝化聚磷菌的篩選方法。
背景技術(shù)：
進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，我國(guó)地表水污染問(wèn)題依然較重，湖泊(水庫(kù))富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題依然突出，導(dǎo)致水體富營(yíng)養(yǎng)化的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為氮和磷，而目前城市污水處理中對(duì)氮、磷的去除率并不高，所以防治水體富營(yíng)養(yǎng)化首要目的就是研究如何進(jìn)行脫氮除磷。反硝化聚磷菌(denitrifying phosphate accumuLating organisms, DNPAOs)是應(yīng)用于反硝化除憐技術(shù)的有效菌群，它能在缺氧條件下以硝酸鹽作為電子受體進(jìn)行同步反硝化(脫氮)和過(guò)量吸磷(除磷)過(guò)程。因此，反硝化除磷技術(shù)具有反硝化脫氮時(shí)無(wú)需碳源、吸磷時(shí)無(wú)需曝氣并且排泥量少等優(yōu)點(diǎn)已成為當(dāng)前廢水處理技術(shù)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)反硝化聚磷菌的種屬都有了一定的研究，而且反硝化聚磷菌的篩選技術(shù)也有了一定的發(fā)展，但是現(xiàn)有篩選方法，需要的工作量比較大。反硝化聚磷菌的常規(guī)篩選方法是先通過(guò)富集，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的分離純化，得到單菌落以后再進(jìn)行除磷效果試驗(yàn)、反硝化產(chǎn)氣試驗(yàn)，最后篩選到反硝化聚磷菌，其中牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的分離純化需要大量時(shí)間。因此我們需要尋求一種新的技術(shù)來(lái)解決這一問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分
3-5g/LCH3COONa · 3H20 ；150-250mg/L MgSO4 · 7H20 ；
70-90mg/L NH4CL ；30-50mg/LNa2HPO4 · 2H20 ；
50-70mg/L K2SO4；20_40mg/LCaCL2 · 2H20 ；
l-3mL 微量元素溶液； 15-20g/L瓊脂，
Ph 值為 6. 5-7. 5，0· 5 X IO5-1. 5 X IO5Pa 滅菌 25-35 min。所述微量元素溶液包括以下組成
4-6g/LEDTA ；4-6g/L MnCL2· 4H20 ；1.5-1. 7g/L CuSO4 · 5H20 ； 4_6g/L FeSO4 · 7H20 ；
40-60mg/L CoCL2 · 6H20 ； 40_60mg/L H3BO3 ；
5-15mg/LKI;40_60mg/L(NH4) 6Mo7024 · 4H20。Ph值通過(guò)0.5-1. 5moL/L的氫氧化鈉溶液和0.5-1. 5 moL/L的鹽酸溶液調(diào)至6. 5~7. 5。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是通過(guò)聚磷菌分離培 養(yǎng)基的選擇性篩選，大大縮短了篩選周期，提高了工作效率。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
本發(fā)明的一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分3g/L CH3COONa · 3H20 ；150mg/L MgSO4 · 7H20 ；70mg/L NH4CL ；30mg/L Na2HPO4 · 2H20 ；50mg/L K2SO4 ；20mg/L CaCL2 · 2H20 ；lmL 微量元素溶液；15g/L 瓊脂，Ph 值為 6. 5，0.5 X IO5Pa 滅菌 25 min。微量元素溶液包括以下組成4g/LEDTA ；4g/L MnCL2 · 4H20 ;1. 5g/LCuSO4 · 5H20 ； 4g/L FeSO4 · 7H20 ；40mg/L CoCL2 · 6H20 ；40mg/L H3BO3 ；5mg/L KI ； 40mg/L (NH4) 6Mo7024 · 4H20。Ph值通過(guò)0. 5moL/L的氫氧化鈉溶液和0. 5moL/L的鹽酸溶液調(diào)至6. 5。

實(shí)施例2
本發(fā)明的一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分4g/L CH3COONa · 3H20 ；200mg/L MgSO4 · 7H20 ；80mg/L NH4CL ；40mg/L Na2HPO4 · 2H20 ；60mg/L K2SO4 ；30mg/L CaCL2 · 2H20 ；2mL 微量元素溶液；20g/L瓊脂，Ph值為7，I X IO5Pa滅菌30 min。微量元素溶液包括以下組成5g/LEDTA ；5g/L MnCL2 · 4H20 ;1. 6g/LCuSO4 ·5Η20; 5g/L FeSO4 ·7Η20 ;50mg/L CoCL2 ·6Η20 ；50mg/L H3BO3 ；10mg/L KI ； 50mg/L (NH4) 6Mo7024 · 4H20。Ph值通過(guò)ImoL/L的氫氧化鈉溶液和ImoL/L的鹽酸溶液調(diào)至7。實(shí)施例3
本發(fā)明的一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分5g/L CH3COONa · 3H20 ；250mg/L MgSO4 · 7H20 ；90mg/L NH4CL ；50mg/L Na2HPO4 · 2H20 ；70mg/L K2SO4 ；40mg/L CaCL2 · 2H20 ；3mL 微量元素溶液；25g/L 瓊脂，Ph 值為 7. 5，1. 5 X IO5Pa 滅菌 35 min。微量元素溶液包括以下組成6g/LEDTA ；6g/L MnCL2 · 4H20 ;1. 7g/LCuSO4 ·5Η20; 6g/L FeSO4 ·7Η20 ;60mg/L CoCL2 ·6Η20 ；60mg/L H3BO3 ；15mg/L KI ； 60mg/L (NH4) 6Mo7024 · 4H20。Ph值通過(guò)1. 5moL/L的氫氧化鈉溶液和1. 5moL/L的鹽酸溶液調(diào)至7. 5。通過(guò)此聚磷菌分離培養(yǎng)基得到的菌株P(guān)革蘭氏染色反應(yīng)呈陰性，光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡顯示該菌為典型的短桿狀,大小O. 3 μ m-o. 4 μ ΧΙ.2 μ m-2. O μ m，菌株P(guān)主要生理生化特性為革蘭氏陰性，氧化酶陽(yáng)性，接觸酶陽(yáng)性，其基本生理生化特性與假單胞菌(Pseudomonas)很相似。經(jīng)過(guò)24小時(shí)缺氧培養(yǎng)后測(cè)定Ν03__Ν和Ρ0/—-Ρ的含量變化，發(fā)現(xiàn)菌株P(guān)除磷率達(dá)到75. 1%，脫氮率達(dá)90. 1%，篩選到的反硝化聚磷菌具有不錯(cuò)的反硝化除磷效果，同時(shí)篩選周期大大縮短了。
權(quán)利要求
1.一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，其特征在于此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分 3-5g/LCH3COONa · 3H20 ； 150_250mg/L MgSO4 · 7H20 ； 70-90mg/LNH4CL ； 30-50mg/LNa2HPO4 · 2H20 ； 50-70mg/LK2SO4； 20_40mg/LCaCL2 · 2H20 ； l-3mL 微量元素溶液； 15-20g/L瓊脂，Ph 值為 6. 5-7. 5，0· 5 X IO5-1. 5 X IO5Pa 滅菌 25-35 min。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，其特征在于所述微量元素溶液包括以下組成 4-6g/LEDTA ；4-6g/L MnCL2· 4H20 ；1.5-1. 7g/L CuSO4 · 5H20 ； 4_6g/L FeSO4 · 7H20 ； 40-60mg/L CoCL2 · 6H20 ； 40_60mg/L H3BO3 ； 5-15mg/LKI;40_60mg/L(NH4) 6Mo7024 · 4H20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，其特征在于Ph值通過(guò)O.5-1. 5moL/L的氫氧化鈉溶液和O. 5-1. 5 moL/L的鹽酸溶液調(diào)至6. 5-7. 5。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種高效反硝化聚磷菌的篩選方法，其特征在于此篩選方法通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，所述聚磷菌分離培養(yǎng)基包括以下組分3-5g/LCH3COONa·3H2O；150-250mg/L MgSO4·7H2O；70-90mg/L NH4CL；30-50mg/L Na2HPO4·2H2O；50-70mg/L K2SO4；20-40mg/L CaCL2·2H2O；1-3mL微量元素溶液；15-20g/L瓊脂，Ph值為6.5-7.5，0.5×105-1.5×105Pa滅菌25-35min。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是通過(guò)聚磷菌分離培養(yǎng)基的選擇性篩選，大大縮短了篩選周期，提高了工作效率。
文檔編號(hào)C12N1/20GK103045508SQ20121053920
公開(kāi)日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者洪武林, 劉希邈, 徐莉群, 范志偉 申請(qǐng)人:南通立源水業(yè)科技發(fā)展有限公司