專利名稱：：用于調節(jié)代謝的組合物和方法用于調節(jié)代謝的組合物和方法相關申請本申請要求于2010年5月14日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/334，991;2010年8月4日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/370，745;2010年8月22日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/375,863;2011年3月24日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/467，376以及2011年3月24日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/467，321的優(yōu)先權。通過該引用以其全文將這些申請的每一個的內容結合在此。在聯(lián)邦資助研究下做出本發(fā)明的權利陳述本工作由來自美國國立衛(wèi)生研究院的以下?lián)芸钪С?，撥款?K08CA128972(布拉德納(Bradner));K08HL105678_01(布朗(Brown))。在本發(fā)明中政府具有一定的權利。
背景技術：
：代謝性綜合征以及肥胖癥代表了在所有的工業(yè)化國家中的主要的健康問題。代謝性綜合征是一組伴發(fā)的心臟病和糖尿病的危險因素并且增加了病人對于重病的危險，包括心臟病、中風以及糖尿病。代謝性綜合征的潛在危險因素包括胰島素耐受性以及腹型肥胖。肥胖癥在西方世界中是最顯著的營養(yǎng)性失調，估計其患病率從30%至50%。肥胖癥與冠狀動脈疾病、中風以及II型糖尿病的增加的發(fā)病率相關。肥胖癥主要地不只是行為問題。恰恰相反，觀察到的肥胖受試者與正常受試者之間的機體組成的差異起因于代謝的不同以及神經病學/代謝相互作用的差異。在一定程度上，這些差異看來像是由于基因表達和/或基因產物或活性的差別?？刂茩C體組成的遺傳因素的性質是未知的。鑒于代謝性綜合征以及肥胖癥的嚴重性和流行率，存在著對用于治療和預防代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的組合物以及方法的大量需求。發(fā)明概述如下所述，本發(fā)明的特征是用于治療和/或預防代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的組合物以及方法。在一個方面中，本發(fā)明提供了一種抑制脂肪形成的方法，該方法包括將脂肪細胞或前脂肪細胞與一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(bromodomainandextra-terminal)(BET)蛋白的試劑進行接觸。在另一個方面中，本發(fā)明提供了一種抑制脂肪細胞生物學功能的方法，該方法包括將脂肪細胞與一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑進行接觸。在又另一個方面中，本發(fā)明提供了一種治療或預防人類的代謝性綜合征的方法，該方法包括向該人類給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此治療或預防該人類的代謝性綜合征。在另外的方面中，本發(fā)明提供了一種治療或預防人類的肥胖癥或體重增加的方法，該方法包括向該人類給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試齊U，由此治療或預防該人類的肥胖癥或體重增加。在另一個方面中，本發(fā)明提供了一種抑制人類的肝臟脂肪變性的方法，該方法包括向該人類給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此抑制肝臟脂肪變性。在另外一個方面中，本發(fā)明提供了一種減少人類的皮下脂肪或內臟脂肪的方法，該方法包括向該人類給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此減少該人類的皮下脂肪或內臟脂肪。在又另一個方面中，本發(fā)明提供了一種抑制人類的食物攝取或增加人類的代謝的方法，該方法包括向該人類給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試齊U，由此抑制該人類的食物攝取或增加該人類的代謝。在一個此外的方面中，本發(fā)明提供了一種用于體重失調治療的試劑盒，該試劑盒包含一種有效量的、溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的抑制劑以及該試劑盒在此處披露的任何方法中的使用的說明。在上述方面或在此描繪的本發(fā)明的任何其他方面的不同實施方案中，該方法抑制脂肪細胞分化、增殖或過度生長。在另一個實施方案中，該方法減少脂肪酸合成、脂肪生成、脂滴的積累。在另外的實施方案中，該方法減少腹型肥胖、致動脈粥樣硬化血脂異常、血壓升高、胰島素耐受性、或II型糖尿病。在其他實施方案中，該試劑是具有化學式1-XXII中任一的化合物，或任何其他在此處的化合物，或其衍生物。在又一個實施方案中，該化合物是JQl°在此外的實施方案中，該試劑是抑制性核酸分子。在又一個實施方案中，該抑制性核酸分子是一種減少Brd2、Brd3或Brd4的表達的siRNA、shRNA或反義核酸分子。在其他實施方案中，該溴基結構域和額外末端(BET)蛋白是Brd2、Brd3或Brd4。在一個另外的實施方案中，該方法降低C/ΕΒΡα和/或PPARy多肽或多核苷酸的水平。在另外的實施方案中，該方法降低了甾醇調節(jié)結合蛋白(SREBP)、過氧化物酶體增殖因子激活型受體2(PPARg2)、脂肪酸合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧化酶β、硬脂酰輔酶A脫氫酶I(SCDl)以及二?；视王；D移酶I(DGAT)的水平。在又此外的實施方案中，將該試劑局部地或全身性地給藥。在另一個實施方案中，溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的該抑制劑是JQ1。本發(fā)明提供了多種組合物，這些化合物包含一種有效量的BET家族抑制劑，以及使用此類組合物來治療或預防代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的方法。從詳細的說明中，以及從權利要求中，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將是顯而易見的。定義所謂“脂肪形成(adipogenesis)”意味著脂肪細胞的數(shù)量的增加。脂肪形成典型地包括脂肪細胞的超常增生(數(shù)量上的增加)。脂肪細胞過度生長是已存在的脂肪細胞在大小上的增加，這是甘油三酸酯累積的結果。當能量吸收超過能量消耗時，發(fā)生過度生長。超常增生起因于來自脂肪組織中前體細胞的新的脂肪細胞生成。典型地，超常增生包括前脂肪細胞的增殖以及它們分化形成脂肪細胞。所謂“體重失調(bodyweightdisorder)”意味著任何致使體重異常的失調或疾病。所謂“溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的抑制劑”意味著任何抑制或減少BET蛋白家族成員活性的試劑。如在此所述的，所謂“JQl”意味著(+)-JQl((S)-叔丁基2_(4_(4_氣苯基)_2，3,9-三甲基-6H-噻吩并[3，2-f][1,2,4]三唑并[4，3_a][1,4]二氮雜環(huán)庚_6_基)乙酸酯)。所謂“代謝性綜合征(metabolicsyndrome)”意味著一種或多種危險因素，這些因素增加了受試者發(fā)展冠心病、中風、周圍血管疾病和/或II型糖尿病的傾向。與代謝性綜合征相關的危險因素包括腹型肥胖(即，在腹部中或周圍的過度的脂肪組織)，致動脈粥樣硬化血脂異常，包括但不限于高甘油三酸酯、低HDL膽固醇以及高LDL膽固醇、血壓升高、胰島素耐受性或葡萄糖耐受不良、前血栓狀態(tài)(例如，在血液里的高的纖維蛋白原或纖溶酶原激活物抑制劑-1)、促炎的狀態(tài)(例如，在血液中的升高的C-反應蛋白)。本發(fā)明的試劑對于治療或預防具有一種或多種前面提及的危險因素的受試者的代謝性綜合征是有用的。所謂“肥胖癥(obesity)”意味著機體脂肪相對于去脂肪體重的過量。具有30或更高的體重指數(shù)(BMI)的受試者被認為是肥胖的。所謂“體重指數(shù)(BMI)”是受試者的以千克計的體重除以他們的以米計的身高的平方。所謂“體重增加”意味著相對于在一個較早的時間點的個人的體重，或相對于一個參考體重的體重的增加。在一個實施方案中，參考體重相當于大約25的BMI。所謂“溴基結構域(bromodomain)”意味著識別乙?；馁嚢彼釟埢亩嚯牡囊徊糠?。在一個實施方案中，BET家族成員多肽的溴基結構域包括大約110個氨基酸并且共享一種保守的折疊，該折疊包括被不同的環(huán)區(qū)連接的四個α螺旋的一種左旋束，這些環(huán)區(qū)與染色質相互作用。所謂“BET家族多肽(BETfamilypolyp印tide)”意味著包括兩個溴基結構域和一種額外末端(ET)結構域的多肽或其片段，其具有轉錄調控活性或乙?；馁嚢彼峤Y合活性。示例性的BET家族成員包括BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT。所謂“BRD2多肽(BRD2polypeptide)”意味著與能夠結合染色質或者調控轉錄的NP_005095具有至少85%同一性的蛋白質或其片段。一個示例性的BRD2多肽的序列如下:MLQNVTPHNKLPGEGNAGLLGLGPEAAAPGKRIRKPSLLYEGFESPTMASVPALQLTPANPPPPEVSNPKKPGRVTNQLQYLHKVVMKALWKHQFAWPFRQPVDAVKLGLPDYHKIIKQPMDMGTIKRRLENNYYffAASECMQDFNTMFTNCYIYNKPTDDIVLMAQTLEKIFLQKVASMPQEEQELVVTIPKNSHKKGAKLAALQGSVTSAHQVPAVSSVSHTALYTPPPEIPTTVLNIPHPSVISSPLLKSLHSAGPPLLAVTAAPPAQPLAKKKGVKRKADTTTPTPTAILAPGSPASPPGSLEPKAARLPPMRRESGRPIKPPRKDLPDSQQQHQSSKKGKLSEQLKHCNGILKELLSKKHAAYAWPFYKPVDASALGLHDYHDIIKHPMDLSTVKRKMENRDYRDAQEFAADVRLMFSNCYKYNPPDHDVVAMARKLQDVFEFRYAKMPDEPLEPGPLPVSTAMPPGLAKSSSESSSEESSSESSSEEEEEEDEEDEEEEESESSDSEEERAHRLAELQEQLRAVHEQLAALSQGPISKPKRKREKKEKKKKRKAEKHRGRAGADEDDKGPRAPRPPQPKKSKKASGSGGGSAALGPSGFGPSGGSGTKLPKKATKTAPPALPTGYDSEEEEESRPMSYDEKRQLSLDINKLPGEKLGRVVHIIQAREPSLRDSNPEEIEIDFETLKPSTLRELERYVLSCLRKKPRKPYTIKKPVGKTKEELALEKKRELEKRLQDVSGQLNSTKKPPKKANEKTESSSAQQVAVSRLSASSSSSDSSSSSSSSSSS·DTSDSDSG所謂“BRD2核酸分子(BRD2nucleicacidmolecule)”意味著對BRD2多肽或其片段進行編碼的多核苷酸。所謂“BRD3多肽(BRD3polypeptide)”意味著與能夠結合染色質或者調控轉錄的NP—031397.1具有至少85%同一性的蛋白質或其片段。一個示例性的BRD3多肽的序列如下:Imstattvapagipatpgpvnppppevsnpskpgrktnqlqymqnvvvktlwkhqfawpfy61qpvdaiklnlpdyhkiiknpmdmgtikkrlennyywsasecmqdfntmftncyiynkptd121divlmaqalekiflqkvaqmpqeevellppapkgkgrkpaagaqsagtqqvaavssvspa181tpfqsvpptvsqtpviaatpvptitanvtsvpvppaaappppatpivpvvpptppvvkkk241gvkrkadtttpttsaitasrsesppplsdpkqakvvarresggrpikppkkdledgevpq301hagkkgklsehlrycdsilremlskkhaayawpfykpvdaealelhdyhdiikhpmdlst361vkrkmdgreypdaqgfaadvrlmfsncykynppdhevvamarklqdvfemrfakmpdepv421eapalpapaapmvskgaessrsseesssdsgssdseeeratrlaelqeqlkavheqlaal481sqapvnkpkkkkekkekekkkkdkekekekhkvkaeeekkakvappakqaqqkkapakka541nstttagrqlkkggkqasasydseeeeeglpmsydekrqlsldinrlpgeklgrvvhiiq601srepslrdsnpdeieidfetlkpttlreleryvksclqkkqrkpfsasgkkqaakskeel661aqekkkelekrlqdvsgqlssskkparkekpgsapsggpsrlssssssesgsssssgsss721dssdse所謂“Brd3核酸分子(Brd3nucleicacidmolecule)”意味著對BRD3多妝進行編碼的多核苷酸。所謂“BRD4多肽(BRD4polypeptide)”意味著與能夠結合染色質或者調控轉錄的NP—055114具有至少85%同一性的蛋白質或其片段。Imsaesgpgtrlrnlpvmgdgletsqmsttqaqaqpqpanaastnppppetsnpnkpkrqt61nqlqyllrvvlktlwkhqfawpfqqpvdavklnlpdyykiiktpmdmgtikkrlennyyw121naqeciqdfntmftncyiynkpgddivlmaealeklfIqkinelpteeteimivqakgrg181rgrketgtakpgvstvpnttqastppqtqtpqpnpppvqatphpfpavtpdlivqtpvmt241vvppqplqtpppvppqpqpppapapqpvqshppiiaatpqpvktkkgvkrkadtttptti301dpiheppslppepkttklgqrressrpvkppkkdvpdsqqhpapeksskvseqlkccsgi361lkemfakkhaayawpfykpvdvealglhdycdiikhpmdmstikskleareyrdaqefga421dvrlmfsncykynppdhevvamarklqdvfemrfakmpdepeepvvavsspavppptkvv481appsssdsssdsssdsdsstddseeeraqrlaelqeqlkavheqlaalsqpqqnkpkkke541kdkkekkkekhkrkeeveenkkskakepppkktkknnssnsnvskkepapmkskppptye601seeedkckpmsyeekrqlsldinklpgeklgrvvhiiqsrepslknsnpdeieidfetlk661pstlreleryvtsclrkkrkpqaekvdviagsskmkgfsssesesssessssdsedsetg721pa所謂“Brd4核酸分子(Brd4nucleicacidmolecule)”意味著對BRD4多妝進行編碼的多核苷酸。所謂“BRDT多肽(BRDTpolypeptide)”意味著與能夠結合染色質或者調控轉錄的NP—001717具有至少85%同一性的蛋白質或其片段。Imslpsrqtaiivnppppeyintkkngrltnqlqylqkvvlkdlwkhsfswpfqrpvdavk61lqlpdyytiiknpmdlntikkrlenkyyakaseciedfntmfsncylynkpgddivlmaq121aleklfmqklsqmpqeeqvvgvkerikkgtqqniavssakeksspsatekvfkqqeipsv181fpktsisplnvvqgasvnsssqtaaqvtkgvkrkadtttpatsavkassefsptfteksv241alppikenmpknvlpdsqqqynvvktvkvteqlrhcseilkemlakkhfsyawpfynpvd301vnalglhnyydvvknpmdlgtikekmdnqeykdaykfaadvrlmfmncykynppdhevvt361marmlqdvfethfskipiepvesmplcyiktditettgrentneassegnssddsederv421krlaklqeqlkavhqqlqvlsqvpfrklnkkkekskkekkkekvnnsnenprkmceqmrl481kekskrnqpkkrkqqfiglksedednakpmnydekrqlslninklpgdklgrvvhiiqsr541epslsnsnpdeieidfetlkastlrelekyvsaclrkrplkppakkimmskeelhsqkkq601elekrlldvnnqlnsrkrqtksdktqpskavenvsrlsesssssssssesessssdlsss661dssdsesemfpkftevkpndspskenvkkmknecilpegrtgvtqigycvqdttsanttl721vhqttpshvmppnhhqlafnyqelehlqtvknisplqilppsgdseqlsngitvmhpsgd781sdttmlesecqapvqkdikiknadswkslgkpvkpsgvmkssdelfnqfrkaaiekevka841rtqelirkhleqntkelkasqenqrdlgngltvesfsnkiqnkcsgeeqkehqqsseaqd901ksklwllkdrdlarqkeqerrrreamvgtidmtlqsdimtmfennfd所謂“BRDT核酸分子(BRDTnucleicacidmolecule)”意味著對BRDT多肽進行編碼的多核苷酸。所謂“化合物(compound)”意味著任何小分子的化學化合物、抗體、核酸分子、或多肽、或其片段。術語“非對映異構體(diastereomers)”指的是具有兩個或更多個不對稱中心并且其分子不是彼此鏡像的立體異構體。術語“對映異構體(enantiomers)”是指一種化合物的兩種互為不能重疊的鏡像的立體異構體。兩種對映異構體的等摩爾混合物稱為“消旋混合物(racemicmixture)”或者“消旋體(racemate)”。術語“齒素(halogen)”是指-F、-Cl、-Br或-1。術語“鹵烷基(haloalkyl)”旨在包括在此定義的，經鹵素單、雙或多取代的烷基基團，例如氟甲基以及三氟甲基。術語“輕基(hydroxyl)”意味著-0H。如在此所使用的術語“雜原子(heteroatom)”是指除了碳或氫之外的任何元素的原子。優(yōu)選雜原子是氮、氧、硫以及磷。如在此所使用的，術語“烷基(alkyl)”意味著飽和的直鏈或支鏈非環(huán)烴，該烴典型地具有1-10個碳原子。代表性的飽和的直鏈烷基包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基以及正癸基；而飽和的支鏈烷基包括異丙基、仲-丁基、異丁基、叔-丁基、異戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基丁基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基戊基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基戍基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基戍基、3-乙基戍基、2_乙基己基、3_乙基己基、4-乙基己基、2_甲基-c1-乙基戍基、2_甲基-3_乙基戍基、2_甲基-4-乙基戍基、2_甲基-2-乙基己基、2_甲基-3_乙基己基、2_甲基-4-乙基己基、2，2-二乙基戊基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基、3，3-二乙基己基等。包括在本發(fā)明的化合物中的烷基基團可以是未經取代的、或可任選地經一個或多個取代基取代，諸如氣基、燒氣基、芳氣基、雜芳基氣基、燒氧基、燒硫基、氧基、齒素、酸基、硝基、輕基、氛基、芳基、雜芳基、烷芳基、烷基雜芳基、芳氧基、雜芳氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳氨基、雜芳氨基、碳環(huán)基、碳環(huán)氧基、碳環(huán)硫基、碳環(huán)氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、雜環(huán)氨基、雜環(huán)硫基等。對于本發(fā)明的化合物而言典型地優(yōu)選低級烷基。如在此所使用的,術語“芳族環(huán)(aromaticring)”或“芳基(aryl)”意味著單環(huán)或多環(huán)的芳族環(huán)或者包括碳和氫原子的環(huán)基團。適合的芳基基團的實例包括，但并不局限于，苯基、甲苯基、蒽基、荷基、卻基、奧基、和萘基、以及苯稠合的碳環(huán)部分，如5，6，7，8-四氫萘基。芳基基團可以是未經取代的或可任選地經一個或多個取代基取代，例如，在此所描述的用于芳基基團的取代基(包括但并不局限于烷基(優(yōu)選是低級烷基或者經一個或多個齒素取代的燒基)、輕基、燒氧基(優(yōu)選是低級燒氧基)、燒硫基、氛基、齒素、氣基、砸酸(-B(OH)2)、以及硝基)。在某些實施方案中，芳基基團是單環(huán)，其中該環(huán)包括6個碳原子。術語“雜芳基(heteroaryl)”指的是芳族的5_8元單環(huán)、8_12元雙環(huán)、或11_14元三環(huán)環(huán)系統(tǒng)，如果是單環(huán)則具有1-4個環(huán)雜原子，如果是雙環(huán)則具有1-6個雜原子，或如果是三環(huán)則具有1-9個雜原子，所述雜原子選自O、N、或S，并且剩余環(huán)原子是碳。雜芳基基團可以可任選地經一個或多個例如像在此描述的用于芳基基團的取代基取代。雜芳基基團的實例包括，但并不局限于，吡啶基、呋喃基、苯并二氧雜環(huán)戊烯基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、異噁唑基、喹啉基、吡唑基、異噻唑基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、噻二唑基、異喹啉基、吲唑基、苯丙噁唑基、苯并呋喃基、吲嗪基、咪唑并吡啶基、四唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑基、以及吲哚基。如在此所使用的術語“雜環(huán)的(heterocyclic)”指的是在一個環(huán)狀結構內包含除了碳之外的至少一個原子(例如，S、0、N)的有機化合物。這些有機化合物中的該環(huán)狀結構可以是芳族的或者，在某些實施方案中，是非芳族的。雜環(huán)部分的一些實例包括，但并不局限于，吡啶、嘧啶、吡咯烷、呋喃、四氫呋喃、四氫噻吩、以及二噁烷。術語“同分異構體(isomers)”或者“立體異構體(stereoisomers)”指的是具有相同的化學構成，但是原子或基團的空間安排不同的化合物。術語“同位素衍生物(isotopicderivatives)”包括化合物的衍生物,其中這些化合物中的一個或多個原子被這些原子的相應的同位素替換。例如，含有碳原子(C12)的化合物的同位素衍生物可以是其中該化合物的該碳原子被C13同位素替換的同位素衍生物。所謂“計算機建模(computermodeling)”意味著應用計算程序確定以下一項或多項:配體對于結合部分的定位和結合鄰近，被結合配體占用的空間，結合部分與配體之間的互補接觸表面的量，給定配體對結合部分進行結合的變形能，以及配體與結合部分之間的氫鍵能、范德華相互作用、疏水性相互作用、和/或靜電相互作用能的一些估算。計算機建模還可以提供模型系統(tǒng)與候選化合物的特征比較。例如，計算機建模實驗可以比較本發(fā)明的一個藥效團模型與一個候選化合物，以便評估該候選化合物與該模型的適宜性。所謂“計算機系統(tǒng)(computersystem)”意味著用于分析原子坐標數(shù)據(jù)的硬件裝置、軟件裝置以及數(shù)據(jù)存儲裝置。本發(fā)明的基于計算機的最小硬件裝置包括中央處理器(CPU)、輸入裝置、輸出裝置以及數(shù)據(jù)存儲裝置。理想的是，提供一個監(jiān)視器對結構數(shù)據(jù)進行可視化。該數(shù)據(jù)存儲裝置可以是隨機存取存儲器(RAM)或者對本發(fā)明的計算機可讀媒質進行存取的裝置。這樣的系統(tǒng)的實例是從SiliconGraphicsIncorporated公司以及SunMicrosystems公司可得到的運行基于Unix的,WindowsNT或IBMOS/2的操作系統(tǒng)的微型計算機工作站。所謂“計算機可讀媒質(computerreadablemedia)”意味著可以被計算機直接讀取并且存取例如從而使得該媒質適合于在以上提到的計算機系統(tǒng)中使用的任何媒質。該媒質包括，但并不局限于，磁存儲媒質如軟磁盤、硬磁盤存儲媒質以及磁帶；光存儲媒質如光盤或只讀光盤(CD-ROM);電存儲媒質如RAM和只讀存儲器(ROM);以及這些分類的混合體如磁/光存儲媒質。所謂“可檢測的標記物(detectablelabel)”意味著一種組合物，當把該組合物連接到一個感興趣的分子時，使后者變成通過光譜、光化學、生物化學、免疫化學、或化學的手段可檢測的。例如，有用的標記物包括放射性同位素、磁珠、金屬珠、膠粒、熒光染料、高電子密度試劑、酶(例如，如通常在酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中所使用的)、生物素、異羥基洋地黃毒甙元、或半抗原。所謂“疾病(disease)”意味著損害或妨礙細胞、組織、或器官正常功能的任何違和或失調。易于用在此描述的化合物進行治療的疾病的實例包括代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性、以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調。所謂“有效量(effectiveamount)”意味著相對于未治療的病人，改善疾病的癥狀所需的藥劑的量。用于實施本發(fā)明以治療性地處理疾病的一種或多種活性化合物的有效量隨給藥方式，受試者的年齡、體重以及總體健康狀況而變化。最終地，主治醫(yī)生或者獸醫(yī)會決定適當?shù)牧恳约敖o藥方案。這樣的量被指為“有效(effective)”量。術語“對映異構體(enantiomers)”是指一種化合物的兩種互為不能重疊的鏡像的立體異構體。兩種對映異構體的等摩爾混合物稱為“消旋混合物O”或者“消旋體(racemate)”。術語“齒素(halogen)”是指-F、-Cl、-Br或-1。術語“鹵烷基(haloalkyl)”旨在包括以上定義的，經鹵素單、雙或多取代的烷基基團，例如氟甲基以及三氟甲基。術語“輕基(hydroxyl)”意味著-0H。如在此所使用的術語“雜原子(heteroatom)”是指除了碳或氫之外的任何元素的原子。優(yōu)選雜原子是氮、氧、硫以及磷。如在此所使用的術語“雜環(huán)的(heterocyclic)”指的是在一個環(huán)狀結構內包含除了碳之外的至少一個原子(例如，S、O、N)的有機化合物。這些有機化合物中的該環(huán)狀結構可以是芳族的或者非芳族的。雜環(huán)部分的一些實例包括，但并不局限于，吡啶、嘧啶、吡咯烷、呋喃、四氫呋喃、四氫噻吩、以及二噁烷。術語“同分異構體(isomers)”或者“立體異構體(stereoisomers)”指的是具有相同的化學構成，但是原子或基團的空間安排不同的化合物。術語“同位素衍生物(isotopicderivatives)”包括化合物的衍生物,其中這些化合物中的一個或多個原子被這些原子的相應的同位素替換。例如，含有碳原子(C12)的化合物的同位素衍生物可以是其中該化合物的該碳原子被C13同位素替換的同位素衍生物。本發(fā)明提供了多個對于開發(fā)高特異性藥物是有用的靶點以便治療以在此描述的方法為特征的失調。此外，本發(fā)明的方法提供了一種容易的手段以便識別安全用于受試者的療法。此外，本發(fā)明的方法提供了以高體積通量、高靈敏度以及低復雜度實際上地分析任何數(shù)量的用于作用于在此描述的疾病的化合物的途徑。所謂“適宜性(fitting)”意味著通過自動、或半自動的手段確定試劑分子的一個或多個原子與BET家族成員的一個或多個原子或結合位點(例如，BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT的溴基結構域)的相互作用，并且確定這種相互作用穩(wěn)定的程度。用于適宜性的不同的基于計算機的方法在此進一步地描述。如在此所使用的術語“光學異構體(opticalisomers)”包括互為不能重疊的鏡像的分子，也被稱為手性分子。所謂“分離的多核苷酸(isolatedpolynucleotide)”意味著脫離了基因的核酸(例如，DNA)，該基因在衍生出本發(fā)明的核酸分子的有機體的天然存在的基因組中。因此該術語包括，例如，重組DNA,該重組DNA合并進入載體、自主復制質?；虿《尽⒒蛟松锘蛘婧松锏幕蚪MDNA，或者該重組DNA作為不依賴于其他序列的分離的分子存在(例如，通過聚合酶鏈反應(PCR)或限制性內切核酸酶消化產生的cDNA或者基因組的或cDNA的片段。此外，該術語包括從DNA分子轉錄的RNA分子，以及是對另外的多肽序列進行編碼的雜合基因的一部分的重組DNA。所謂“分離的多肽(isolatedpolypeptide)”意味著本發(fā)明的從天然伴隨它的組分中分離的多肽。典型地，當該多肽以重量計為至少60%時，將它從它天然關聯(lián)的蛋白質和天然存在的有機分子中分離。優(yōu)選地，制品是以重量計至少75%、更優(yōu)選是至少90%、并且最優(yōu)選是至少99%的本發(fā)明的多肽。本發(fā)明的分離的多肽可以，例如，通過從天然源提取、對這樣的多肽進行編碼的重組核酸的表達、或化學合成蛋白質而得到?？梢酝ㄟ^任何適當?shù)姆椒y量純度，例如，柱色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳、或高效液相色譜(HPLC)分析。所謂“標記(marker)”意味著在與疾病或失調相關聯(lián)的表達水平或活性方面具有改變的任何蛋白質或多核苷酸。在如此所使用的，“獲得一種試劑(obtaininganagent)”中的“獲得(obtaining)”包括合成、購買、或以另外的方式獲得該試劑。在此使用的短語“腸胃外給藥(parenteraladministration和administeredparenteralIy)”意味著除了腸內以及局部給藥之外的給藥方式，通常是通過注射，并且包括但并不局限于，靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、眼眶內、心內、真皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節(jié)內、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊髓內以及胸骨內注射以及輸注。術語“多環(huán)基(polycyclyl)”或者“多環(huán)的基團(polycyclicradical)”指的是兩個或更多個環(huán)的環(huán)基團(例如，環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基和/或雜環(huán)基)，其中兩個或更多個碳被兩個鄰接的環(huán)共用，例如，這些環(huán)是“稠環(huán)”。通過非相鄰的原子連接的環(huán)稱為“橋”環(huán)。多環(huán)的每個環(huán)可以經以上描述的取代基取代，例如，鹵素、羥基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基硫擬基、燒氧基、憐酸根、勝酸基、亞勝酸基、氰1基、氣基(包括燒氣基、~■燒氣基、芳氣基、~■芳氣基、以及燒基芳氣基)、酸胺基(包括燒基擬基氣基、芳基擬基氣基、氣基甲酸基以及服基)、脒基、亞胺基、硫氫基、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸根、硫酸根、磺酸基、氨磺?；喕酋０被?、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環(huán)基、烷基、烷基芳基、或芳族的或雜芳族的部分。如在此所使用的術語“多晶型(polymorph)”指的是本發(fā)明的化合物或其絡合物的固體晶型。相同化合物的不同多晶型表現(xiàn)出不同的物理、化學和/或光譜特性。不同的物理特性包括，但并不局限于，穩(wěn)定性(例如，對熱或光)、可壓縮性以及密度(在配制和產品制造方面重要)、以及溶解速率(能夠影響生物可利用率)。穩(wěn)定性的不同可由化學反應性(例如，差分氧化，一種劑型當包括一種多晶型時比包括另一種多晶型褪色更快)或力學特征(例如，存儲時破碎為動力學上有利的多晶型的片劑轉化成熱力學上更穩(wěn)定的多晶型)或兩者(例如，具有一種多晶型的片劑在高濕度時更容易斷裂)的變化引起。多晶型的不同的物理特性可以影響它們的加工。術語“藥物前體(prodrug)”包括具有可在體內代謝的部分的化合物。通常，藥物前體在體內通過酯酶或者其他機制代謝為活性藥物。藥物前體的實例以及它們的應用在本領域是眾所周知的(參見，例如，Berge等人(1977)“藥物鹽(PharmaceuticalSalts)”《藥物科學雜志》(J.Pharm.Sci)66:1_19)。可以在化合物的最終分離和純化時原位制備這些藥物前體，或通過將經純化的化合物以自由酸形式或羥基分開地與適合的酯化劑進行反應。通過用羧酸進行處理，可以將羥基基團轉化成酯類。藥物前體部分的實例包括經取代的和未經取代的、支鏈或無支鏈的低級烷基酯部分(例如，丙酸酯類)，低級烯基酯類，二-低級燒基_氣基低級燒基酷類(例如，~■甲基氣基乙基酷)，酸氣基低級燒基酷類(例如，乙酰氧基甲基酯)，酰氧基低級烷基酯類(例如，新戊酰氧基甲基酯)，芳基酯類(苯基酯)，芳基-低級烷基酯類(例如，苯甲基酯)，經取代的(例如，用甲基、鹵素、或甲氧基取代基)芳基和芳基-低級烷基酯類，酰胺類，低級烷基酰胺類，二-低級烷基酰胺類，以及羥基酰胺類。優(yōu)選的藥物前體部分是丙酸酯類和酰基酯類。也包括在體內通過其他機制轉化成活性形式的藥物前體。此外，橫跨碳-碳雙鍵的立體化學的表示也與通常的化學領域相反:“Z”指的是經常被稱為“順式(cis)”(相同側)的構象而“E”指的是經常被稱為“反式(trans)”(相反偵D的構象。本發(fā)明的化合物包括這兩種構型，順式/反式和/或Z/E。關于手性中心的命名，術語“d”以及“I”構型正如國際理論與應用化學聯(lián)合會(IUPAC)所定義的。關于術語非對映異構體、消旋體、差向異構體以及對映異構體，這些將在它們通常的語境中使用以便描述制品的立體化學。所謂“減少(reduces)”意味著至少10%、25%、50%、75%、或100%的負的改變。所謂“參考(reference)”意味著標準或對照狀況?！皡⒖夹蛄?referencesequence)”是定義的作為序列比較的基礎的序列。參考序列可以是規(guī)定序列的子集或者整體，例如全長cDNA或基因序列的區(qū)段、或者該完整的cDNA或基因序列。對多肽而言，參考多肽序列的長度將通常是至少大約16個氨基酸，優(yōu)選地是至少大約20個氨基酸，更優(yōu)選地是至少大約25個氨基酸，并且甚至更優(yōu)選地是大約35個氨基酸、大約50個氨基酸、或大約100個氨基酸。對核酸而言，參考核酸序列的長度將通常是至少大約50個核苷酸、優(yōu)選地是至少大約60個核苷酸、更優(yōu)選地是至少大約75個核苷酸、并且甚至更優(yōu)選地是大約100個核苷酸或大約300個核苷酸或它們附近的或者它們之間的任一整數(shù)。所謂“特異性結合(specificallybinds)”意味著一種化合物或抗體識別并且結合本發(fā)明的多肽，但是基本上并不識別并且結合天然地包括本發(fā)明的多肽的試樣(例如，生物試樣)中的其他分子。在本發(fā)明的方法中有用的核酸分子包括對本發(fā)明的多肽或其片段進行編碼的任何核酸分子。這樣的核酸分子不需要與內源性核酸序列具有100%的同一性，但是將典型地表現(xiàn)出基本的同一'I"生。與內源性序·列具有“基本同一'(substantialidentity)”的多核苷酸典型地能夠與雙鏈核酸分子的至少一條鏈雜交。在本發(fā)明的方法中有用的核酸分子包括對本發(fā)明的多肽或其片段進行編碼的任何核酸分子。這樣的核酸分子不需要與內源性核酸序列具有100%的同一性，但是將典型地表現(xiàn)出基本的同一性。與內源性序列具有“基本同一'I"生(substantialidentity)”的多核苷酸典型地能夠與雙鏈核酸分子的至少一條鏈雜交。所謂“雜交(hybridize)”意味著在不同的嚴格條件下進行配對以便在互補的多核苷酸序列(例如，在此描述的基因)、或其部分之間形成雙鏈分子。(例如，參見Wahl，G.M.和S.L.Berger(1987)《酶學方法》(MethodsEnzymol.)152:399),Kimmel,A.R.(1987)《酶學方法》(MethodsEnzymol.)152:507)。例如，嚴格的鹽濃度通常將是小于大約750mM的氯化鈉和75mM的檸檬酸三鈉、優(yōu)選地是小于大約500mM的氯化鈉和50mM的檸檬酸三鈉、并且更優(yōu)選地是小于大約250mM的氯化鈉和25mM的檸檬酸三鈉。在缺少有機溶劑(例如，甲酰胺)下可以獲得低嚴格雜交，而在至少大約35%的甲酰胺、并且更優(yōu)選地是至少大約50%的甲酰胺存在下可以獲得嚴格雜交。嚴格的溫度條件將通常包括至少大約30°C、更優(yōu)選地是至少大約37°C、并且最優(yōu)選地是至少大約42°C的溫度。不同的另外的參數(shù)，如雜交時間、清潔劑(例如，十二烷基硫酸鈉(SDS))濃度、以及載體DNA的包含或排除，對本領域的普通技術人員是熟知的。根據(jù)需要通過組合這些不同的條件實現(xiàn)不同的嚴格水平。在一個優(yōu)選的實施方案中，雜交將會在30°C、在750mM的氯化鈉、75mM的檸檬酸三鈉、以及1%的SDS中發(fā)生。在一個更優(yōu)選的實施方案中，雜交將會在37°C、在500mM的氯化鈉、50mM的檸檬酸三鈉、I%的SDS、35%的甲酰胺、以及l(fā)OOyg/ml的變性的鮭精DNA(ssDNA)中發(fā)生。在一個最優(yōu)選的實施方案中，雜交將會在42°C、在250mM的氯化鈉、25mM的檸檬酸三鈉、I%的SDS、50%的甲酰胺、以及200μg/ml的ssDNA中發(fā)生。這些條件的有用的變體對于本領域的普通技術人員將是顯而易見的。對于大多數(shù)的應用，雜交之后的洗滌步驟也將會在嚴格度方面不同。通過鹽濃度和溫度可以定義洗滌嚴格條件。如上所述，通過降低鹽濃度或增加溫度可以增加洗滌嚴格度。例如，用于洗滌步驟的嚴格鹽濃度將為優(yōu)選地小于大約30mM的氯化鈉和3mM的檸檬酸三鈉、并且最優(yōu)選地是小于大約15mM的氯化鈉和1.5mM的檸檬酸三鈉。用于洗滌步驟的嚴格的溫度條件將通常包括至少大約25°C、更優(yōu)選地是至少大約42°C、并且甚至更優(yōu)選地是至少大約68°C的溫度。在一個優(yōu)選的實施方案中，洗滌步驟將會在25°C、在30mM的氯化鈉、3mM的檸檬酸三鈉、以及0.1%的SDS中發(fā)生。在一個更優(yōu)選的實施方案中，洗滌步驟將會在42°C、在15mM的氯化鈉、1.5mM的檸檬酸三鈉、以及0.1%的SDS中發(fā)生。在一個更優(yōu)選的實施方案中，洗滌步驟將會在68°C、在15mM的氯化鈉、1.5mM的檸檬酸三鈉、以及0.1%的SDS中發(fā)生。這些條件的另外的變體對于本領域的普通技術人員將是顯而易見的。雜交技術對于本領域的普通技術人員是熟知的并且描述于例如Benton與Davis(《科學》(science)196:180,1977);Grunstein和Hogness(《美國科學院院刊》(Proc.Natl.Acad.Sc1.,USA)72=3961,1975)；Ausubel等人(《分子生物學實驗手冊》，威利出版社期刊全文數(shù)據(jù)庫，紐約(CurrentProtocolsinMolecularBiology,WileyInterscience,NewYork,)2001);Berger和Kimmel(《分子克隆技術指南》(GuidetoMolecularCloningTechniques),1987,學術出版社，紐約(AcademicPress,NewYork));以及Sambrook等人，《分子克隆實驗指南》，冷泉港實驗室出版社，紐約，(MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork)。所謂“基本上同一的(substantiallyidentical)”意味著相對于參考氨基酸序列(例如，在此描述的任一氨基酸序列)或核酸序列(例如，在此描述的任一核酸序列)，一種多肽或核酸分子表現(xiàn)出至少85%的同一性。優(yōu)選地，相對于用于比較的序列，這樣的序列在氨基酸水平或核酸上為至少85%、90%、95%、99%或甚至100%的同一。使用序列分析軟件(例如，威斯康星大學生物技術中心(麥迪遜大學道1710，威斯康星州537050)遺傳計算組的序列分析軟件包，BLAST、BESTFIT、GAP、或PILEUP/PRETTYB0X程序)典型地測量序列同一性。這種軟件通過將同源性程度分配給不同的取代、缺失、和/或其他修飾進行相同或相似序列的匹配。保守取代典型地包括以下組內的取代:甘氨酸、丙氨酸；纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸；天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺；絲氨酸、蘇氨酸；賴氨酸、精氨酸；以及苯丙氨酸、酪氨酸。在確定同一性程度的示例性方法中，可以使用BLAST程序，其中在e_3到e—.之間的概率分數(shù)表示密切相關的序列。所謂“增加(increases)”意味著相對于參考，至少大約10%、25%、50%、75%、或100%的正的改變。所謂“均方根偏差(rootmeansquaredeviation)”是指離均差的平方的算術平均數(shù)的平方根。所謂“受試者(subject)”意味著哺乳動物，包括但并不局限于，人或非人類的哺乳動物，如牛、馬、犬、綿羊、或貓。所謂“特異性結合(specificallybinds)”意味著一種化合物或抗體識別并且結合本發(fā)明的多肽，但是基本上并不識別并且結合天然地包括本發(fā)明的多肽的試樣(例如，生物試樣)中的其他分子。術語“巰基(sulfhydryl或thiol)”意味著-SH。如在此所使用的，術語“互變異構體(tautomers)”指的是通過互變異構化容易地進行相互轉化的有機分子的同分異構體，其中氫原子或質子在該反應中遷移，在一些場合伴隨著單鍵與相鄰雙鍵的轉換。如在此所使用的術語“治療(treat、treating、treatment等)”指的是減少或改善失調和/或與其相關聯(lián)的癥狀。所謂“改善(ameliorate)”是指減少、抑制、減弱、減小、阻滯、或穩(wěn)定疾病的發(fā)展或進展。將被理解的是，盡管不能排除，治療失調或違和并不要求完全地消除該失調、違和或與其相關聯(lián)的癥狀。如在此所使用的術語,“預防(prevent、preventing、prevention)”、“預防性治療(prophylactictreatment)”等指的是減少失調或違和在受試者中的發(fā)展的可能性,該受試者沒有失調或違和，但是有發(fā)展失調或違和的風險或者容易發(fā)展失調或違和?！坝行Я?effectiveamount)”指的是對經治療的受試者產生治療作用的化合物的量。這種治療效果可以是客觀的(即通過一些測試或標記是可測量的)或主觀的(即受試者給出了作用的指征或感覺到了作用)。在此描述的化合物的有效量可以在每千克體重大約Img到大約5000mg的范圍內。有效劑量還會根據(jù)給藥途徑，以及與其他藥劑共同使用的可能性而改變。將在此提供的范圍理解為該范圍內的所有值的簡略表達。例如，將I至50的范圍理解為包括下組的任一數(shù)、數(shù)的組合、或者下組的子范圍，該組由以下各項組成:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50。如在此所使用的術語“治療(treat、treating、treatment等)”指的是減少或改善失調和/或與其相關聯(lián)的癥狀。將被理解的是，盡管不能排除，治療失調或違和并不要求完全地消除該失調、違和或與其相關聯(lián)的癥狀。除非明確聲明或從上下文顯而易見，如在此所使用的，術語“或(or)”被理解為包括在內。除非明確聲明或從上下文顯而易見，如在此所使用的，術語“一個、一種(a、an)”、和“該(the)”被理解為單一的或復數(shù)的。除非明確聲明或從上下文顯而易見，如在此所使用的，術語“大約(about)”被理解為在本領域的正常容差范圍內，例如，在平均數(shù)的2標準差之內。大約可以被理解為在聲明值的10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.1%、0.05%、或0.01%之內。除非從上下文顯而易見，在此提供的所有數(shù)值被該術語大約修飾。在此的變量的任何定義中的一系列化學基團的陳述包括該變量作為任何單個基團或所列出基團的組合的定義。在此針對變量或方面的實施方案的陳述包括該實施方案作為任何單個的實施方案或與任何其他實施方案或其部分的組合。在此提供的任何組合物或方法可以與在此提供的一個或多個任何其他組合物和方法進行組合。附圖簡要說明附圖1包含八張顯微照片，展示了BET蛋白家族成員的抑制以劑量依賴性的方式阻滯3T3L1細胞中的脂肪形成，3T3L1細胞是一種廣泛地用作針對脂肪形成的模型的細胞系。用不同劑量的活性JQl(S)對映異構體或無活性的對照JQl(R)對映異構體來處理細胞。接著將藥物處理細胞用油紅O染色，作為對指示脂肪細胞分化程度的脂類累積的測量。如所示，JQl(S)對映異構體抑制了脂類累積。附圖2A和2B是圖表，展示了在脂肪細胞分化過程中，BET蛋白家族成員的抑制阻滯3T3L1細胞中C/ΕΒΡα和PPARY的表達。C/EBPa以及PPARY是脂肪形成必需的正調節(jié)蛋白。附圖2A是隨著時間在對照以及JQl處理的3T3L1細胞中的C/EBPa表達水平的圖表。附圖2B是隨著時間在對照以及JQl處理的3T3L1細胞中的PPARY表達水平的圖表。使用RT-PCR獲得結果。附圖3A-3E是圖表，展示了BET家族成員的抑制阻滯ob/ob小鼠的體重增加，ob/ob小鼠是一種缺乏瘦蛋白的鼠類肥胖癥模型。附圖3A是用JQl處理之前以及處理14天之后的ob/ob小鼠體重的圖表。附圖3B是隨著時間對照以及JQl處理的ob/ob小鼠的體重圖表。附圖3C是圖表，展示了在14天的處理期內，對照處理的以及JQl處理的ob/ob小鼠的體重增加總量。附圖3D是在14天的處理期內，對照處理以及JQl處理的ob/ob小鼠的食物攝取總量的圖表。附圖3E是在14天的處理期內，對照處理的以及JQl處理的ob/ob小鼠的飼料效率的圖表。重要地是，相對于對照小鼠，JQl阻滯了ob/ob小鼠的體重增加。附圖4A和4B是圖表，展示了BET蛋白家族成員的抑制降低ob/ob小鼠中肝臟以及脂肪組織的重量。附圖4A定量測定了用載體或JQl處理的ob/ob小鼠的肝臟重量。附圖4B定量測定了用載體或JQl處理的ob/ob小鼠的皮下脂肪重量。附圖5包含兩張顯微照片，展示了BET蛋白家族成員的抑制完全阻滯小鼠肥胖癥模型中的脂肪肝形成。將這些切片用蘇木精和伊紅染色。大的脂滴普遍存在于從僅接受載體的ob/ob小鼠上獲得的切片中。值得注意地是，在用JQl處理過的小鼠中，肝臟形態(tài)學是正常的。附圖6A-6F展示了BET蛋白家族成員的抑制減少了控制肝臟中脂肪累積的基因的表達。附圖6A-6F是一組圖表，展示了在載體處理的以及JQl處理的ob/ob小鼠中的基因表達。有趣地是，JQll降低了SREBP(附圖6A)、PPARY2(附圖6B)、FAS(這不具有統(tǒng)計學顯著性)(附圖6C)、ACCβ(附圖6D)、SCDl(附圖6Ε)以及DGAT(附圖6F)的表達。附圖7A-7C展示了溴基結構域的抑制降低了用標準飼料飼養(yǎng)的小鼠中的內臟脂肪量。附圖7Α是用標準飼料飼養(yǎng)的小鼠中的、用載體處理以及JQl處理的小鼠(每天給藥50mg/kg)的隨著時間的體重圖表。附圖7B是一個圖表，比較了載體對照或JQl處理8周之后的小鼠內臟脂肪。附圖7C是一個圖表，比較了載體對照或JQl處理8周之后的小鼠皮下脂肪。附圖8展示了該溴基結構域的抑制阻滯響應于高脂肪飲食的體重增加。附圖8是在用高脂肪飲食飼養(yǎng)的小鼠中的、用載體處理以及JQl處理的小鼠(每天給藥50mg/kg)的隨著時間的體重圖表。附圖9A&9B展示了溴基結構域的抑制保護對抗接受高脂肪飲食8周之后的胰島素耐受性。附圖9A是一個將胰島素注射入小鼠后的血糖圖，該小鼠已經食用高脂肪飲食7周并且每天用載體對照或JQl進行處理。附圖9B是附圖9A中的數(shù)據(jù)的曲線下面積(AUC)的一個圖表。發(fā)明詳細說明本發(fā)明的特征是用于治療和預防代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性、肝臟脂肪變性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的組合物以及方法。本發(fā)明至少部分地基于抑制一個或多個BET蛋白家族成員的試劑的發(fā)現(xiàn)，這些試劑阻滯體重增加并且負向調節(jié)大量在脂肪形成中具有功能的轉錄因子，并且還在其他組織如肝臟或肌肉組織中控制脂類進行分區(qū)以及的脂肪的異位累積。BET蛋白家族(包括BRD1、BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT)是染色質重塑的重要調節(jié)子并且有可能通過降低轉錄因子(包括SREBP以及PPARY2)以及由這些轉錄因子調節(jié)的靶基因(包括脂肪酸合酶(FAS)、ACCβ、S⑶I以及DGAT)的表達來控制脂肪細胞分化(注意:技術上而言，F(xiàn)AS數(shù)據(jù)不滿足統(tǒng)計顯著性)。使用對具有溴基結構域的BET家族具有生化選擇性的、細胞可滲透的有效的小分子抑制劑(JQl)獲得了在此報告的這些結果。本發(fā)明進一步提供了能夠調節(jié)該溴基結構域家族的有關化合物的用途，該溴基結構域家族是一個含有識別核染色質上乙?；?賴氨酸殘基的溴基結構域的多肽家族。賴氨酸乙酰化已經成為與細胞生物學和疾病生物學廣泛相關的信號修飾.靶向可逆地介導側鏈乙?；拿敢咽撬幬锇l(fā)現(xiàn)研究的一個活躍領域.迄今為止，成功的成果局限于核染色質背景下的共價鍵修飾的“寫入物”(乙酰轉移酶)和“擦除物”(組蛋白脫乙?；?最近對BRD4的高分辨率的共晶結構的表征顯示了與乙酰基-賴氨酸結合腔的優(yōu)異的形狀互補性.JQl結合到BRD4的串聯(lián)溴基結構域是乙?；?賴氨酸競爭的并且在人類細胞中從染色質替代BRD4。這些數(shù)據(jù)建立了靶向表觀遺傳“讀出物”的蛋白質-蛋白質相互作用的可行性，從而阻滯脂肪細胞分化。此外，此類化合物在一個良好建立的鼠類肥胖癥模型(ob/ob小鼠)中的延伸的體內用途表明BET蛋白的抑制阻滯體重增加，減少脂肪組織重量并且抑制肝臟中的脂肪累積。在肝臟中，脂肪累積的減少伴隨著控制脂肪合成的基因表達的顯著減少。在此報告的這些數(shù)據(jù)確立了抑制BET蛋白的試劑是肥胖癥以及相關代謝失調(包括脂肪肝)的有效抑制劑。肥胖癥和脂肪肝的治療對代謝性綜合征、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調，及其癥狀有益。代謝性綜合征代謝性綜合征是一組伴發(fā)的心臟病和糖尿病的危險因素并且增加了病人對重病的危險，包括心臟病、中風以及糖尿病。在一個實施方案中，用于代謝性綜合征的標準包括腰圍增加(腹型肥胖)、甘油三酸酯升高、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)減少、血壓升高和/或空腹血糖值升高。具體地，150mg/dL或更高的甘油三酸酯水平；男性低于40mg/dL并且女性低于50mg/dL的高密度脂蛋白(HDL)膽固醇；130/85mmHg或更高的血壓水平；或IOOmg/dL或更高的空腹血糖值。對大多數(shù)美國人而言，女性35英寸或更高并且男性40英寸或更高的腰圍被視為是異常地增加的。具有該列出的標準的至少三個異常水平的個體被視為患有代謝性綜合征。許多醫(yī)師相信代謝性綜合征有可能與胰島素的耐受性相關聯(lián)。代謝性綜合征增加患動脈粥樣硬化心血管疾的危險1.5-3倍，并且提高患2型糖尿病的危險3-5倍。它影響超過26%的成人或超過5000萬的美國人。代謝性綜合征的臨床管理集中于降低患動脈粥樣硬化性心血管疾病的危險，以及降低尚未發(fā)展出臨床糖尿病的病人患2型糖尿病的危險。最近公布的結果表明五分之一的美國成人患有代謝性綜合征。目前治療代謝性綜合征的方法是不充足的。本發(fā)明的包含抑制一種或多種BET蛋白(例如，Brd2、Brd3、Brd4)的生物學活性的試劑的組合物有用于代謝性綜合征的預防或治療，或者有用于任何一種或多種與代謝性綜合征相關聯(lián)的危險因素的預防或治療。含有漠基結構域的蛋白質基因調控基本上被可逆的、非共價的大分子組裝控制。至RNA聚合酶的信號轉導要求更高級的蛋白質復合體，該復合體被能夠解釋染色質的翻譯后修飾狀態(tài)的組裝因子在空間上調控。表觀遺傳讀出物是結構上不同的蛋白質，各自具有一個或多個進化上保守的效應物模塊，該效應物模塊識別組蛋白或DNA的共價修飾。組蛋白尾上的賴氨酸殘基的ε-Ν-乙酰化(Kac)與開放的染色質構造以及轉錄激活相關聯(lián)3。乙酰基_賴氨酸的背景特異的分子識別主要由溴基結構域介導。作為轉錄因子復合體(TAF1、PCAF、Gcn5以及CBP)的組分以及表觀遺傳記憶的決定子4，含有溴基結構域的蛋白質有重要的生物學意義。有含有總共57種不同的溴基結構域的41種人類蛋白質。盡管大量序列不同，但所有的溴基結構域共享一個保守的折疊，該折疊包括由確定底物特異性的不同環(huán)區(qū)(ZA與BC環(huán))連接的四個α螺旋(αζ、αΑ、αΒ、ac)的一種左旋束。具有肽底物的共晶體結構表明乙?；?賴氨酸被一種中心疏水腔識別并且通過與存在于大多數(shù)溴基結構域中的天冬酰胺殘基的氫鍵得以錨定5。溴基結構域和額外末端(BET)家族(BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT)共享一種共同結構域構造以及一種更趨異的C端募集結構域，該共同結構域構造包括表現(xiàn)高水平的序列保守性的兩個N端溴基結構域6。本發(fā)明特征在于用于抑制人類溴基結構域蛋白質的組合物和方法。本發(fā)明的化合物本發(fā)明提供了多種化合物(例如，JQl和具有在此描述的化學式的化合物)，這些化合物結合在BET家族成員(例如BRD2、BRD3、BRD4)的第一溴基結構域的apo晶體結構的結合袋中。本發(fā)明提供了此類化合物以及其他本領域中已知的BRD2、BRD3以及BRD4抑制劑于在此描述的方法中的用途。此類化合物描述于，例如，W02009084693以及相對應的US2010286127中，將其通過引用結合在此。不希望受理論的約束，這些化合物可以特別有效地抑制脂肪形成、脂肪細胞分化以及脂肪細胞生物學活性的有害方面(例如，過度的脂肪合成、過度的脂肪累積/脂肪細胞過度生長、脂肪細胞炎癥、器官纖維化)。在一種方法中，使用分子對接程序對以下化合物進行選擇:有用于代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為在代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的治療的化合物，以鑒別預期結合到溴基結構域結構結合袋的化合物。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物可以阻止、抑制、或破壞、或減少BET家族成員(例如，BRD2、BRD3、BRD4、BRDT)的至少10%、25%、50%、75%、或100%的生物活性，和/或例如通過結合到溴基結構域apo結合袋內的結合位點破壞這類蛋白質的亞細胞定位。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物是小分子，其分子量小于大約1000道爾頓、小于800、小于600、小于500、小于400、或小于大約300道爾頓。本發(fā)明的化合物的實例包括JQl和其他化合物，這些化合物結合到BET家族成員(例如，BRD4(下文指BRD4(I)；PDBID20SS))的第一溴基結構域的apo晶體結構的結合袋。JQl是一種新型的噻吩并-三唑并-1，4-二氮雜環(huán)庚烷。本發(fā)明進一步提供了這些化合物的藥學上可接受的鹽。在一個方面，該化合物是具有化學式I的化合物:權利要求1.一種抑制脂肪形成的方法，該方法包括將脂肪細胞或前脂肪細胞與一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑進行接觸。2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中該方法抑制脂肪細胞分化、增殖或過度生長。3.一種抑制脂肪細胞生物學功能的方法，該方法包括將脂肪細胞與一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑進行接觸。4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其中該方法減少脂肪酸合成、脂肪生成、脂滴積累。5.一種用于治療或預防受試者的代謝性綜合征的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此治療或預防該受試者的代謝性綜合征。6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其中該方法減少腹型肥胖、致動脈粥樣硬化血脂異常、血壓升高、胰島素耐受性、或II型糖尿病。7.一種用于治療或預防受試者的肥胖癥或體重增加的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此治療或預防該受試者的肥胖癥或體重增加。8.一種抑制受試者的肝臟脂肪變性的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此抑制肝臟脂肪變性。9.一種用于減少受試者的皮下脂肪或內臟脂肪的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此減少該受試者的皮下脂肪或內臟脂肪。10.一種用于抑制受試者的食物攝取或增加受試者的代謝的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此抑制該受試者的食物攝取或增加該受試者的代謝。11.一種保護對抗受試者胰島素耐受性的方法，該方法包括向該受試者給予一種有效量的抑制溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的試劑，由此保護對抗該受試者中的胰島素耐受性。12.根據(jù)權利要求1-11中任一項所述的方法，其中該試劑是具有化學式1-XXII中任一的化合物，或任何在此處披露的化合物，或其衍生物。13.根據(jù)權利要求12所述的方法，其中該化合物是JQl。14.根據(jù)權利要求1-11中任一項所述的方法，其中該試劑是一種抑制性核酸分子。15.根據(jù)權利要求14所述的方法，其中該抑制性核酸分子是一種降低Brd2、Brd3或Brd4的表達的siRNA、shRNA或反義核酸分子。16.根據(jù)權利要求1-11中任一項所述的方法，其中該溴基結構域和額外末端(BET)蛋白是Brd2、Brd3或Brd4。17.根據(jù)權利要求1-11中任一項所述的方法，其中該方法降低C/EBPα和/或PPARY多肽或多核苷酸的水平。18.根據(jù)權利要求1-11中任一項所述的方法，其中該方法降低了留醇調節(jié)結合蛋白(SREBP)、過氧化物酶體增殖因子激活型受體2(PPARg2)、脂肪酸合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧化酶β、硬脂酰輔酶A脫氫酶I(SCDl)以及二酰基甘油?；D移酶I(DGAT)的水平。19.根據(jù)權利要求1-18中任一項所述的方法，其中將該試劑局部地或全身性地給予。20.一種用于體重失調治療的試劑盒，該試劑盒包含一種有效量的、溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的抑制劑以及該試劑盒在權利要求1-11中任一項所述的方法中進行使用的說明。21.根據(jù)權利要求20所述的試劑盒，其中溴基結構域和額外末端(BET)蛋白的該抑制劑是JQl。`全文摘要本發(fā)明提供了多種組合物，這些組合物包含一種有效量的抑制BET蛋白(例如，Brd2、Brd3、Brd4)的試劑，以及使用此類組合物來治療或預防代謝性綜合征、肥胖癥、II型糖尿病、胰島素耐受性以及相關的其特征為代謝或脂肪累積方面發(fā)生不希望的改變的失調的方法。文檔編號C12N15/09GK103119160SQ201180033570公開日2013年5月22日申請日期2011年5月16日優(yōu)先權日2010年5月14日發(fā)明者J·E·布拉德納,J·布朗,J·普魯茲基申請人:達那-法伯癌癥研究所,布里格姆及婦女醫(yī)院