專利名稱：室內(nèi)鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及向日葵病菌鑒定方法，具體而言涉及一種室內(nèi)鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法。
背景技術(shù)：
核盤(pán)菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.) de Bary)是一種寄主非常廣泛的病原真菌，世界上有超過(guò)400種的作物和雜草如向日葵、油菜、大豆、花生、菜豆、胡蘿卜、擬南芥等都可以受到不同程度的侵染。由核盤(pán)菌引起的菌核病是目前影響向日葵產(chǎn)量的主要病害之一。篩選耐/抗菌核病的育種材料是控制菌核病發(fā)生的重要的農(nóng)業(yè)措施。室內(nèi)鑒定不同向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平是向日葵抗病育種的前提，但是利用常規(guī)的PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)核盤(pán)菌其生長(zhǎng)速度快，僅用很小的接種量就可以在極短的時(shí)間內(nèi)使所用的供試品種的葉片腐爛，因此給抗性鑒定帶來(lái)一定的困難。

發(fā)明內(nèi)容
因此本發(fā)明的目的正是針對(duì)上述缺陷，提供一種能夠在室內(nèi)區(qū)分不同向日葵品種的抗性水平的方法。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，采用如下技術(shù)方案本發(fā)明一方面涉及鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法，包括如下步驟將活化好的核盤(pán)菌菌株接種在M培養(yǎng)基上，黑暗培養(yǎng)，用接菌針挑取單個(gè)菌絲瓊脂塊，準(zhǔn)確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側(cè)，置于20-25°C自然光下保濕培養(yǎng)，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M-培養(yǎng)基每IOOOmL含有NaOH 0. 5-2g、DL-蘋(píng)果酸 2-4g、NH4NO3 l_3g、MgSO4 0. 05-0. 2g、瓊脂粉 30_50g。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的M培養(yǎng)基每IOOOmL含有NaOHlg、DL-蘋(píng)果酸 3g、NH4NO3 2g、MgS04 0. lg、瓊脂粉 37_40g。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的M-培養(yǎng)基不包括除水之外其它營(yíng)養(yǎng)成分。本發(fā)明的方法利用M-培養(yǎng)基培養(yǎng)的核盤(pán)菌接種向日葵葉片，能夠區(qū)分不同品種的抗性，為向日葵抗性育種材料的的選育提供參考。


圖1 核盤(pán)菌菌株在PDA和M-培養(yǎng)基上生長(zhǎng)活力測(cè)定；圖2 :X-8菌株在不同培養(yǎng)條件下致病力測(cè)定結(jié)果；圖3 食葵品種資源對(duì)菌核病抗性的室內(nèi)篩選結(jié)果。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 1.配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的成分為
PDA 馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂粉13g、定容至1000mL。M-培養(yǎng)基(M-medium) =NaOH lg、DL_malic acid (蘋(píng)果酸)3g、NH4N032g、MgS04. 7H20 0. lg、39g Bacto-agar (瓊脂粉)、定容至 IOOOmL02.將核盤(pán)菌在兩種培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)，比較核盤(pán)菌生長(zhǎng)速度和菌核形成速度，結(jié)果如圖1和表1所示表1核盤(pán)菌菌株在不同培養(yǎng)基上生長(zhǎng)活力測(cè)定
權(quán)利要求
1.鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法，包括如下步驟將活化好的核盤(pán)菌菌株接種在M培養(yǎng)基上，黑暗培養(yǎng)，用接菌針挑取單個(gè)菌絲瓊脂塊， 準(zhǔn)確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側(cè)，置于20-25°C自然光下培養(yǎng)，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M-培養(yǎng)基每IOOOmL含有NaOH 0. 5_2g、DL-蘋(píng)果酸 2-4g、NH4NO3 l-3g、MgS04 0 . 05-0 . 2g、瓊脂粉 30_50g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法，所述的M-培養(yǎng)基每 IOOOmL 含有 NaOH lg、DL-蘋(píng)果酸 3g、NH4NO3 2g、MgSO4O. lg、瓊脂粉 39g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的方法，其特征在于所述的M-培養(yǎng)基不包 括除水之外其它營(yíng)養(yǎng)成分。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種鑒定向日葵品種對(duì)菌核病抗性水平的鑒定方法，包括如下步驟將活化好的核盤(pán)菌菌株接種在Minum培養(yǎng)基上(簡(jiǎn)稱M培養(yǎng)基)，黑暗培養(yǎng).然后用接菌針挑取單個(gè)菌絲瓊脂塊，準(zhǔn)確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側(cè)，置于20-25℃自然光下保濕培養(yǎng)，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M培養(yǎng)基含有NaOH、DL-蘋(píng)果酸、NH4NO3、MgSO4、瓊脂粉。本發(fā)明的方法利用M-培養(yǎng)基培養(yǎng)核盤(pán)菌接種向日葵葉片，能夠區(qū)分不同向日葵品種的抗性，為向日葵新品種的選育和抗病育種奠定基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)C12Q1/18GK102433372SQ201110397710
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月5日
發(fā)明者侯亞光, 周洪友, 娜仁, 張之為, 景蘭, 王玉杰, 石必顯, 趙君, 雷中華 申請(qǐng)人:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)