專利名稱：一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬茶褐素提取領域，具體是一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法。
背景技術(shù)：
六堡茶以“紅、濃、陳、醇”享譽全國，熱銷桂、粵、港、澳、東南亞等地區(qū)，茶褐素是其品質(zhì)特征。茶褐素屬于茶色素的一種，茶色素能抗氧化、抗腫瘤、保肝等，這些能力均與其能清除自由基有關。茶褐素能清除自由基，所以也應該能抗氧化、抗腫瘤、保肝等，且部分能力已經(jīng)被實驗所證實。六堡茶和普洱茶均屬黑茶類，基本制作工藝為殺青、揉捻、渥堆、干燥。研究表明， 普洱茶渥堆過程是一系列氧化聚合反應的過程，在微生物及酶的作用下兒茶素類物質(zhì)被氧化聚合成水溶性的茶黃素、茶紅素及茶褐素。隨著渥堆過程的深入，茶黃素、茶紅素繼續(xù)氧化聚合成茶褐素，總的趨勢是茶多酚、兒茶素、茶黃素、茶紅素劇烈減少，茶褐素大量積累。茶褐素是黑茶的一個重要品質(zhì)特征。目前關于茶褐素的文章不少，但是關于六堡茶茶褐素的文章卻不多，對六堡茶的應用還停留在直接飲用的地步，六堡茶的深加工還未見有人實施。在國內(nèi)公開文獻中，有關六堡茶的研究主要集中在理化分析和加工工藝等方面， 其中中國農(nóng)業(yè)科學院茶葉研究所等單位研究了六堡茶散茶和磚茶(2006年產(chǎn))的主要功能化學成分的含量及其光譜學特性。采用高效液相色譜法、分光光度法及色差分析等方法，分析六堡茶的理化特性。華南農(nóng)業(yè)大學園藝學院對傳統(tǒng)農(nóng)家六堡茶和精制六堡茶進行了感官分析和茶湯PH值、茶多酚、咖啡堿、茶色素、各種游離氨基酸及其總量、可溶性糖含量、揮發(fā)性香氣組分等理化分析對比研究。湖南農(nóng)業(yè)大學以茯磚茶、花磚茶、青磚茶、黑磚茶、六堡茶、普洱茶為材料，以沱茶、米磚茶為對比材料，以高通量藥物篩選為手段對黑茶的抗代謝綜合癥、高膽固醇血癥、抗炎、抗消化道腫瘤活性進行了系統(tǒng)的藥理功能分析及評價。在國內(nèi)其他黑茶種類中茶色素的提取和活性研究方面，昆明理工大學和云南農(nóng)業(yè)大學研究了從普洱茶中提取茶褐素的工藝，并對所得茶褐素進行了紅外光譜和主要理化性質(zhì)分析，采用正交試驗設計方法考察料液比、提取次數(shù)、提取溫度、提取時間對茶褐素產(chǎn)率的影響。結(jié)果表明，提取次數(shù)對茶褐素產(chǎn)率的影響達到顯著水平，料液比、提取溫度和提取時間影響不顯著。優(yōu)化工藝條件為料液比1 10(g mL)，提取次數(shù)3次，提取溫度83°C， 提取時間20min，在此條件下產(chǎn)率達16. 86%。茶褐素的總酸性基團為4. 91mmol/g，其中酚羥基為4. 33mmol/g，羧基為0. 58mmol/g。紅外光譜和理化性質(zhì)分析表明，茶褐素主要是由酚類和羧酸類物質(zhì)構(gòu)成，并含有蛋白質(zhì)、多糖等化合物。普洱市人民政府茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展辦公室科技服務中心的發(fā)明專利公開了茶褐素在制藥中的應用(法律狀態(tài)實質(zhì)審查的生效法律狀態(tài)公告日2009. 9.幻，所述茶褐素是以紅茶或普洱茶為原料，通過萃取的方法從茶葉中提取得到的天然產(chǎn)物。藥理試驗結(jié)果表明，茶褐素具有顯著地抑制蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶的功能?？捎糜谥委熁蝾A防II型糖尿病、治療或預防肥胖性糖尿病、治療或預防肥胖病。由于是從茶葉中提取的純天然物質(zhì)，具有無毒副作用，服用安全可靠的優(yōu)點。
以六堡茶為原料提取分離茶褐素，工藝條件和方法與所查國內(nèi)公開文獻中的不同，并采用超聲波輔助水溶劑提取法，未見國內(nèi)公開報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法，利用超聲波輔助水溶劑提取法對六堡茶粉末進行提取，并利用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分別對茶多酚、茶黃素、茶紅素進行萃取除去的方法，對茶提取液進行處理，最后所得的水層為茶褐素粗品溶液，蒸干得到茶褐素粗品， 操作步驟如下1.原料預處理將茶葉離心機粉碎，得到茶葉粉末；2.超聲處理準確稱取一定量茶葉粉末，填入組裝回流裝置的三口燒瓶中，并加入蒸餾水，茶葉粉末與蒸餾水的料液比為g mL，茶葉粉末蒸餾水=1 5 30，常溫下用超聲裝置處理30min，得到超聲處理液；3.加熱浸提將超聲處理液加熱到溫度40°C 100°C，浸提20min 80min，溶液趁熱抽濾，再按步驟2的蒸餾水量加入蒸餾水浸提1 5次，合并濾液；4.減壓濃縮將步驟3的合并濾液減壓濃縮至濾液的五分之一至十分之一；5.氯仿萃取將步驟4濃縮液用等體積氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層液再用等體積氯仿萃取，棄去氯仿層，留下水層；6.乙酸乙酯萃取將步驟5水層用等體積乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層再用等體積乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層；7.正丁醇萃取將步驟6水層用兩倍體積正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層再用兩倍體積正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層；8.制得茶褐素粗品將步驟7的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體，含量60%左右。用不同的提取溫度、提取時間、料液比、提取次數(shù)做正交試驗，提取溫度范圍為40°C 100°C，提取時間20min 80min，料液比1 5 1 30 (g mL)，提取次數(shù) 1 5次，通過正交試驗獲得最佳工藝條件為提取溫度100°C、提取時間40min、料液比 1 20(g mL)、提取次數(shù)4次，最佳產(chǎn)率可達22. 92%。本發(fā)明的益效是1.本發(fā)明對六堡茶茶褐素提取工藝及設備要求不苛刻、簡單易行。2.本發(fā)明研究，不但可以豐富六堡茶及茶褐素研究數(shù)據(jù)，還可對六堡茶茶褐素性質(zhì)鑒定提供必要的幫助，對六堡茶深度加工及中低檔六堡茶的銷路提供理論參考。
具體實施例方式本發(fā)明研究表明茶多酚、茶色素均易溶于熱水；而茶多酚易溶于三氯甲烷、石油醚；茶黃素能溶于熱水、醋酸乙醇、正丁醇等，難溶于氯仿、石油醚；茶紅素易溶于熱水、正丁醇，不溶于氯仿、石油醚、醋酸乙酯；茶褐素能溶于水而不溶于氯仿、乙酸乙酯和正丁醇。 結(jié)合文獻可得六堡茶中茶褐素制備工藝原理先對六堡茶進行溫水浸提，然后依次用氯仿、 乙酸乙酯、正丁醇處理六堡茶水提物，最后水層蒸干便可得到茶褐素粗品。茶褐素提取過程中，粗品產(chǎn)率受各種因素的影響，總結(jié)下來主要有溫度、提取時間、料液比、提取次數(shù)等四個方面。所以本發(fā)明用超聲波輔助水提法對六堡茶粉末進行浸提，并依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇除去茶多酚、茶黃素、茶紅素等雜質(zhì)，然后以茶褐素粗品產(chǎn)率為指標研究提取溫度、提取時間、料液比、提取次數(shù)對六堡茶茶褐素粗品產(chǎn)率的影響，并用正交試驗法及方差分析法分析優(yōu)化各因素水平，得到六堡茶中茶褐素最佳提取工藝條件，并得到最佳產(chǎn)率。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步描述。實施例1從六堡茶中提取茶褐素粗品的步驟如下1.稱取一定量茶葉，離心機粉碎，準確稱取IOg茶葉粉末，填入三口燒瓶中，加入蒸餾水300mL，組裝回流裝置，常溫下用超聲裝置處理30min ；加熱到100°C浸提80min，溶液趁熱抽濾，浸提3次，合并濾液600mL ；減壓濃縮至濾液IOOmL ；2.將步驟1的濃縮液用IOOmL氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層lOOmL，再用IOOmL 氯仿萃取，棄去氯仿層，留下水層，IOOmL ；3.將步驟2的水層用IOOmL乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層IOOmL,再用IOOmL乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層IOOmL;4.將步驟3的水層用200mL正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層IOOmL,再用 200mL正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層，IOOmL ；5.將步驟4的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體(含量60%左右)。共2. 137g提取工藝條件為提取溫度100°C、提取時間80min、料液比1 30 (g mL)、提取次數(shù)3次，所得產(chǎn)率為21. 37%。實施例2從六堡茶中提取茶褐素粗品的步驟如下1.稱取一定量茶葉，離心機粉碎，準確稱取IOg茶葉粉末，填入三口燒瓶中，加入蒸餾水200mL，組裝回流裝置，常溫下用超聲裝置處理30min ；加熱到80°C水浸提60min，溶液趁熱抽濾，浸提5次，合并濾液IOOOmL ；減壓濃縮至濾液IOOmL ；2.將步驟1的濃縮液用IOOmL氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層lOOmL，再用IOOmL 氯仿萃取，棄去氯仿層，留下水層，IOOmL ；3.將步驟2的水層用IOOmL乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層IOOmL,再用IOOmL乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層IOOmL;4.將步驟3的水層用200mL正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層IOOmL,再用200mL正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層，IOOmL ；5.將步驟4的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體(含量60%左右)共2. 156g。提取工藝條件為提取溫度80°C、提取時間60min、料液比1 20 (g mL)、提取次數(shù)5次，所得產(chǎn)率為21. 56%。實施例3從六堡茶中提取茶褐素粗品的步驟如下稱取一定量茶葉，離心機粉碎，準確稱取IOg茶葉粉末，填入三口燒瓶中，加入蒸餾水50mL，組裝回流裝置，常溫下用超聲裝置處理30min ；加熱到40°C水浸提20min，溶液趁熱抽濾，浸提2次，合并濾液IOOmL ；減壓濃縮至濾液20mL ；2.將步驟1的濃縮液用20mL氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層20mL，再用20mL氯仿萃取，棄去氯仿層，留下水層，20mL ；3.將步驟2的水層用20mL乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層20mL，再用 20mL乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層20mL ；4.將步驟3的水層用40mL正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層20mL，再用40mL 正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層，20mL ；5.將步驟4的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體(含量60%左右)。共1. 668g提取工藝條件為提取溫度40°C、提取時間20min、料液比1 5 (g mL)、提取次數(shù) 2次，所得產(chǎn)率為16. 68%。實施例4從六堡茶中提取茶褐素粗品的步驟如下稱取一定量茶葉，離心機粉碎，準確稱取IOg茶葉粉末，填入三口燒瓶中，加入蒸餾水200mL，組裝回流裝置，常溫下用超聲裝置處理30min ；加熱到100°C水浸提40min，溶液趁熱抽濾，浸提4次，合并濾液SOOmL ；減壓濃縮至濾液IOOmL ；2.將步驟1的濃縮液用IOOmL氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層lOOmL，再用IOOmL 氯仿萃取，棄去氯仿層，留下水層，IOOmL ；3.將步驟2的水層用IOOmL乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層IOOmL,再用IOOmL乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層IOOmL;4.將步驟3的水層用200mL正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層IOOmL,再用 200mL正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層，IOOmL ；5.將步驟4的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體(含量60%左右)。共2. 292g試驗獲得最佳工藝條件為提取溫度100 °C、提取時間40min、料液比 1 20(g mL)、提取次數(shù)4次，最佳產(chǎn)率可達22. 92%。
權(quán)利要求
1.一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法，其特征在于，利用超聲波輔助水溶劑提取法對六堡茶粉末進行提取，并利用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分別對茶多酚、茶黃素、茶紅素進行萃取除去的方法，對茶提取液進行處理，最后所得的水層為茶褐素粗品溶液，蒸干得到茶褐素粗品，操作步驟如下1)原料預處理將茶葉離心機粉碎，得到茶葉粉末；2)超聲處理準確稱取一定量茶葉粉末，填入組裝回流裝置的三口燒瓶中，并加入蒸餾水，茶葉粉末與蒸餾水的料液比為g mL，茶葉粉末蒸餾水=1 5 30，常溫下用超聲裝置處理 30min，得到超聲處理液；3)加熱浸提將超聲處理液加熱到溫度40°C 100°C，浸提20min 80min，溶液趁熱抽濾，再按步驟 2)的蒸餾水量加入蒸餾水浸提1 5次，合并濾液；4)減壓濃縮將步驟幻的合并濾液減壓濃縮至濾液的五分之一至十分之一；5)氯仿萃取將步驟4)濃縮液用等體積氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層液再用等體積氯仿萃取， 棄去氯仿層，留下水層；6)乙酸乙酯萃取將步驟幻水層用等體積乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層液再用等體積乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層；7)正丁醇萃取將步驟6)水層用兩倍體積正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層再用兩倍體積正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層；8)制得茶褐素粗品將步驟7)的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體。
2.一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法，其特征在于，利用超聲波輔助水溶劑提取法對六堡茶粉末進行提取，并利用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分別對茶多酚、茶黃素、茶紅素進行萃取除去的方法，對茶提取液進行處理，最后所得的水層為茶褐素粗品溶液，蒸干得到茶褐素粗品，操作步驟如下1)原料預處理將茶葉離心機粉碎，得到茶葉粉末；2)超聲處理準確稱取一定量茶葉粉末，填入組裝回流裝置的三口燒瓶中，并加入蒸餾水，茶葉粉末與蒸餾水的料液比為g mL，茶葉粉末蒸餾水=1 20，常溫下用超聲裝置處理30min， 得到超聲處理液；3)加熱浸提將超聲處理液加熱到溫度100°C，浸提40min，溶液趁熱抽濾，再按步驟幻的蒸餾水量加入蒸餾水浸提4次，合并濾液；4)減壓濃縮將步驟幻的合并濾液減壓濃縮至濾液的五分之一至十分之一；5)氯仿萃取將步驟4)濃縮液用等體積氯仿萃取，棄去氯仿層，剩下水層液再用等體積氯仿萃取， 棄去氯仿層，留下水層；6)乙酸乙酯萃取將步驟幻水層用等體積乙酸乙酯萃取，棄去乙酸乙酯層，剩下水層再用等體積乙酸乙酯萃取，重復2次，棄去乙酸乙酯層，留下水層；7)正丁醇萃取將步驟6)水層用兩倍體積正丁醇萃取，棄去正丁醇層，剩下水層再用兩倍體積正丁醇萃取，重復2次，棄去正丁醇層，留下水層；8)制得茶褐素粗品將步驟7)的水層減壓蒸餾得茶褐素粗品固體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從六堡茶中提取茶褐素粗品的方法。該方法利用超聲波輔助水溶劑提取法對六堡茶粉末進行提取，并利用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分別對茶多酚、茶黃素、茶紅素進行萃取除去的方法，對茶提取液進行處理，最后所得的水層為茶褐素粗品溶液，蒸干得到茶褐素粗品。本發(fā)明的益效是1.本發(fā)明對六堡茶茶褐素提取工藝及設備要求不苛刻、簡單易行。2.本發(fā)明研究，不但可以豐富六堡茶及茶褐素研究數(shù)據(jù)，還可對六堡茶茶褐素性質(zhì)鑒定提供必要的幫助，對六堡茶深度加工及中低檔六堡茶的銷路提供理論參考。
文檔編號A23F3/18GK102334574SQ201110243458
公開日2012年2月1日 申請日期2011年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月23日
發(fā)明者何英姿, 張雪紅, 朱家安, 逯釗琦 申請人:廣西師范學院